EL LABORATORIO EN EL

DIAGNOSTICO
DE DENGUE
Laboratorio de Metaxnicas Virales
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

EL VIRUS
Familia: Flaviviridae.
Causa el Dengue y Dengue
Hemorrgico.
Transmitido por mosquitos.
Es un virus ARN (cido
Ribonucleico de una sola hebra).
Tiene 4 serotipos: (DEN-1, 2, 3 y
4).

VIRUS DENGUE
PrM :Glicoprotena
Precursor de M
Protege a la protena E

M: Induce Acs. Nt y proteccin

C y RNA:
11Kd
Nucleocapside
Epitopes cls T

E: Principal Protena Estructural

(53-54kd) Glicoprotena

Aedes aegypti

Aislamiento
Viral
IgM
IgG>1280
Seroconversion

Diagnstico
Dengue

Deteccin
Antgeno

Deteccin
Genoma
Situacin
CLINICA
Epidemiolgica

DINAMICA DE RESPUESTA
INMUNE

ASPECTOS IMPORTANTES EN EL
DIGNOSTICO
Ficha

Clnica
Tipo de muestra
Obtencin de muestras
Transporte y conservacin de
M.
Tipo de prueba

CRITERIOS PARA LA OBTENCION, CONSERVACION

Y TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ACUERDO AL
TIPO DE PRUEBA
Mtodo de
Diagnstico

Obtencin de
muestras

Anticuerpos: IgM,
IgG

Sangre.- A pacientes con

tiempo de enfermedad
igual o mayor a 6 das.

Deteccin del
antgeno Ag NS1,
deteccin de ARN,
aislamiento viral y
tipificacin de los
serotipos.

Histopatologa e
inmunohistoqumi
ca.

Sangre.- A pacientes con

un tiempo de
enfermedad igual o
menor a 5 das.
(perodo virmico)
Tejido.- Realizar la
necropsia dentro las 24
horas de fallecimiento
(Tejido bazo, hgado y/o
rin).
Tejido.- Realizar la
necropsia dentro de las
24 horas de fallecimiento
(Tejido bazo, hgado y/o
rin).

Muestra
Biolgica

Suero

Suero

Tejido

Tejido

Cantidad

Conservaci
ny
Transporte

Tiempo de
resultado en el
Sistema NETLAB

2 ml

Estril. Enviar
en cadena de
fro 2 8 C

3 das.

2 ml.

Estril. Enviar
en cadena de
fro 2 8 C

6 das para PCR y

hasta 30 das para
aislamiento viral.

2 cm3

Estril. Enviar
en
preservante y
en cadena de
fro 2 8 C

6 das para PCR y

hasta 30 das para
aislamiento viral.

2cm3

Enviar en
formol al 10%
tamponado,
en un
volumen 10
veces del
volumen de la
muestra, a
temperatura
ambiente.

5 das.

KIT ELISA DE CAPTURA IgM

DENGUE
IMPLEMENTACION: 2008 -2010
TRANSFERENCIA: 2010 lotes pilotos
PRUEBA DIAGNOSTICA
SENSIBILIDAD %ESPECIFICIDAD%

TARIKI IGM
DENGUE INS

99.3

98

PRUEBA DE REFERENCIA
TARIKI IGM
DENGUE
INS

Total

+
-

149

154

100

101

150

102

255

Total

ELISA CAPTURA IgM o IgG DENGUE

ELISA CAPTURA IgM: Infeccin

reciente.
ELISA CAPTURA IgG: Infeccin
secundaria

ELISA INDIRECTA IgG: Infeccin

pasada

IgM
6-10 das.......... 96% Sensibilidad
98% Especificidad

Das Fiebre
1-5
6-10
20-30
40-60
Costa Rica, Panam
Nicaragua

% IgM
56
96
93
23
Guzmn et al., 97

PRUEBAS RAPIDAS IgM, IgG Y ANTIGENO.

PRUEBA ELISA ANTIGENO NS1

Detecta antgeno NS1
Suero de 1-5 das
Diagnostico temprano
de dengue.
Sensibilidad 93%
Especificidad 100%
Sensibilidad(97.3%) en inf. aguda primaria
Sensibilidad (70.0%) en inf. aguda segundaria
VPP 100%
VPN 97.3%.
Evaluation of a commercial dengue NS1 antigen-capture ELISA for laboratory diagnosis of acute dengue virus infection
V. Kumarasamya, A.H. Abdul Wahaba, S.K. Chuab, Z. Hassana, Y.K. Chema, M. Mohamada and K.B. Chua
Journal of Virological Methods
Volume 140, Issues 1-2, March 2007, Pages 75-79

Aislamiento del virus Dengue

Inmunofluorescencia Indirecta
Acs. Monoclonales especficos tipo

Diagnstico Inmunohistoqumico en
muestras fallecidos FHD/SCD

Necrosis Focal

Clulas Kupffer

RT- PCR

Diagnstico
Vigilancia
Epidemiologa Molecular
Estudios etiopatogenia
Vacunas

Diferentes PCR
para virus Dengue
Genes

E NS5-3 E-NS3

Primers D/E F/C

F/E

D/E

C-E C-prM

NS5

NS3

D/E

F/C
D/E

D/C
D/E

D/C
D/E

RT-PCR EN DENGUE
RT PCR Dengue Multiplex

Sensibilidad: 98%
Especificidad: 98%

PCR EN TIEMPO REAL

Detecta
Cuantifica carga viral

ANALISIS GENETICO DEL DENV-1.Las secuencias que obtuvimos se agrupan con el genotipo
Amrica-frica, siendo el primer serotipo que reingreso al Per
en 1,990
Se mantiene la circulacin del mismo genotipo desde su
ingreso en el ao 1,990.
Aunque se han establecidos clados distintos que tienen
correlacin con el tiempo y espacio, se puede observar para el
2,007 la circulacin de dos clados dispersos que abarca la zona
norte de Per y la zona central del pas, respectivamente.

12PERU2007
17PERU2007
LIMA21PERU2006
18PERU2007
123PERU2003
120PERU2004
P ER U95- 81- PERU1996
P ER U96- 15- PERU1996
117PERU2004
116PERU2000
121PERU2004
125PERU2002
20PERU2005
RIOH 36589-AN GO LA 1988
109PERU2002
127PERU2002
118PERU2000
FG A-89-F.GUY ANA 1989
5103-FR ENCHP OLYNE SI A1989
141602-VEN EZU ELA1994
5736- VEN EZU ELA1995
62234-INDI A1962
64411-INDIA1964
125239-VEN EZU ELA1994
CAREC 778156-TR INIDAD1978
6222- VEN EZU EL A1995
PR S- 288690-J AMAICA1977
150172-VEN EZU ELA1995
CES ARA1-CO ST ARICA1993
CAREC 780572-TR INIDAD1978
BR90-BR AS IL 1990
BeH584526- BRASI L1997
BR97-409- BRA SI L1997
BR97-233- BRA SI L1997
BR97-111- BR ASI L1997
BR01-MR-BRA SIL2001
2000- PAR AGU AY 1988
301arg00-AR GENT INA2000
295arg00-AR GENT INA2000
259par00-P ARAGUAY2000
INS 347869-C OLOMBIA1985
1378-M EX ICO 1983
1298-M EXICO 1980
CAREC 86471-TR INID AD1986
BEAR 404147-BR ASIL1982
INS 371869-C OLOMBIA1996
99- 36- 1HuNI ID-P ARAGUAY1999
DEI0151- PER U 1991
280par00-P ARAGUA Y2000
297ar g00-AR GENT INA2000
293ar g00-AR GENT INA2000
28164-V ENE ZUE LA 1997
LIMA22PERU2006
4PERU2007
3PERU2007
5PERU2007
23086-INDI A1960
633760-INDI A1963
631286-INDI A1963
S 275-SIN GAP OR E1990
23819-MY ANMAR 1996
32514-MY ANMAR 1998
PRS 228686-BURMA1976
8114- SIN GA POR E1993
ABIDJ AN-ABIDJ AN 19
DAK ARA- 1520- IVORYC OAST1985
IBH 28328-NI GERIA 1968
2543- 63-TH AY LAND 1963
16007-THAY LAND1964
TH-SMAN-TH AY LAND 1954
01- 44- 1HuNIID-TAH ITI2001
192206-FRENCHP OL YNE SIA2001
98901518-INDON ES IA1998
GD23-95-CHINA 1995
02- 07- 1HuNI ID-INDON ES IA2002
02- 17- 1HuNI ID-INDON ES IA2002
98901530-INDON ES IA1998
AUSHC S1- AUSTR ALIA1983
AUSH AT I7-AU STR ALI A 1983
S EYCHE LLE S2003
A88-IND ONE SI A1988
Y ap31-MICR ONE SI A2004
SC01-IND ONE SIA2004
WE STP AC-NAUR U1974
P hilippines836- 1
PRS 228682-PHILIPP INE S1974
99S A236-PH IL IP PIN ES 1999
01St219-PH ILIP PIN ES 2001
99S A660-PH IL IP PIN ES 1999
02S A071-PH IL IP PIN ES 2002
Caribbean495- 1-ARUBA1985
02R BD008- PHI LI PP INE S2002
AHF 82-80-THAYLAND
95S LMC28- PHI LI PP INE S1995
02S A029-PH IL IP PIN ES 2002
02- 13- 1HuNI ID-PHI LI PP INE S2002
01- 37- 1HuNI ID-S AMO A2001
02S A079-PH ILIP PIN ES2002
02S A073-PH IL IP PIN ES 2002
02SA047-PH ILIP PIN ES 2002
HAWAII-H AWAII1945
MOCHIZU KI-J AP AN1953
GZ80-CHIN A1980
My98D131459-MYANM AR 1998
LAOCH323- LA OS 1996
My99D136115-MYANM AR 1999
My01D138862-MYANM AR 2001
My00D137143-MYANM AR 2000
My00D136957-MYANM AR 2000
765101-TAIW AN1987
My00D136981-MYANM AR2000
DJ IBOUT I-DJ IB OUT I1998
PUO 359-THAY LAND1980
98- 35- 1HuNIID-THA YLAND1998
CAMBODIA1998
GD05-99-CHINA 1995
2302-TH AY LAND1993
2308-TH AY LAND1993
01- 15- 1HuNIID-THA YLAND2001
01- 61- 1HuNIID-CAMB ODI A2001
01- 65- 1HuNIID-THAYLAND2001
01- 36- 1HuNIID-INDON ESIA2001
Zhejiang-07- 04-CHIN A2004
02- 38- 1HuNIID-THAYLAND2002
01- 42- 1HuNIID-CAMBODI A2001
49-TH AY LAND1999
My00D136393-MYANM AR2000
02- 33- 1HuNI ID-THAYLAND2002
02- 23- 1HuNI ID-THAYLAND2002
SC40V I05-MA LAYS IA2004
WI25V I05-THAYLAND2004
02- 20- 1HuNI ID-THAYLAND2002
My01D12897-MY ANAMR 2001
My00D137045-MYANM AR 2000
My98D131987-MYANM AR 1998
My01D137726-MYANM AR 2001
My99D135979-MYANM AR 1999
My01D144168-MYANM AR 2001
MY01D1m193-MY ANMAR 2001
059-01-MY ANMAR
My01D141500-MYANM AR20001
My01D142512-MYANM AR2001
My01D139067-MYANM AR 2001
P 72-1244-MALAYS IA1972
MALAYSIA GENOTY PE

Muestras - Per

AMERICA - AFRICAE

Muestras - Per

THAILAND

SOUTH PACIFIC

ASIA

DEN3-H87-OUTGROUP

0.05

rbol filogentico de secuencias para DENV-1 obtenidos mediante NJ con 500

repeticiones de la regin E/NS1 considerando las secuencias reportadas en el GEN
BANK y las obtenidas en el presente estudio.

ANALISIS GENETICO DEL DENV-2.-

Las secuencias que obtuvimos hasta el presente corresponden a

los genotipos Amrica que ingres a Per en 1,995 y al
genotipo Amrica-Asia que ingreso en el 2,001.
Se evidencia la relacin del genotipo Amrica Asia con la
presencia de dengue hemorrgico.

L ARD1693-V ENE ZUEL A1997

L ARD1390-V ENE ZUEL A1997
L ARD167 5-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD168 8-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD170 1-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD181 1-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD230 3-VENEZUEL A
1 99 8
L ARD2995-V ENE ZUEL A1998
L ARD4256-VENE ZUEL A
1999
L ARD155 7-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD191 3-VENEZUEL A
1 99 7
L ARD5207-VENE ZUEL A
2000
L ARD4341-VENE ZUEL A
1999
1 5957-V ENE ZUEL A
1 996
L ARD6123-V ENE ZUEL A2000
LARD5952 -VENE ZUEL A2000
L ARD5942-V ENE ZUEL A2000
L ARD4924-VENE ZUEL A
1999
L ARD221 3-VENEZUEL A
1 99 8
L ARD239 6-VENEZUEL A
1 99 8
L ARD6045-VENE ZUEL A
2000
L ARD1432-VENE ZUEL A
1997
L ARD1681-VENE ZUEL A
1997
L ARD1689-VENE ZUEL A
1997
L ARD1809-VENE ZUEL A
1997
L ARD2217-VENE ZUEL A
1998
L ARD2252-VENE ZUEL A
1998
L ARD2891-VENE ZUEL A
1998
L ARD2893-VENE ZUEL A
1998
L ARD2957-VENE ZUEL A
1998
IMT SSA-M ART-98-703 -M ARTIN
IQUE1
toc2016-BRAS IL
Cuba46-CUBA1997
Cuba23-97-CUBA1997
Cuba28-CUBA1997
Cuba32-CUBA1997
Cuba30-CUBA1997
Cuba187-CUBA1997
Cuba165-CUBA1997
CUBA120 -97-CUBA19 97
CUBA115 -97 CUBA1997
CUBA58-97-CUBA1997
CUBA89-97-CUBA1997
Cuba133-97-CUBA1997
Cuba137-97
7 -97-CUBA1997
Cuba163-CUBA1997
Cuba166-CUBA1997
Cuba188-CUBA1997
Cuba205-CUBA1997
Cuba70a-CUBA1997
CUBA118 -97-CUBA19 97
Cuba165-97-CUBA1997
Cuba13-97-CUBA1997
DR5 9-01-DOM INI
INICANRE PU
BLI C20 01
DR3 1-01-DOM INICANRE PU
BLI C20 01
DR2 3-01-DOM INICANRE PU
BLI C20 01
L ARD1996 -V ENEZUEL A
1 99 7
129 14-Te kax-M EXICO
2001
Oax468-M EXICO
2000
119 36-St.Elen a
-M EXICO
2001
202 1
-Oxku t
z cab-M EXICO
2001
1 33 81-Choc hola-M E XI CO
2 002
1 33 82-T i z im in-M EXICO
2002
1 34 04-Opi che -nM EXICO
2 002
102954-VENE ZUEL A
1991
49255-BRASIL 1995
124 B-BOL IVIA1998
ROR1 81 2-BRASIL
ROR1 81 1-BRASIL
BR6 4022-BRASIL 1998
M IG1269-BRASIL
8 110827-J AMAICA1 981
L ARD1657-VE NE ZUEL A1997
M ARA
3-VENEZUEL A
1 990
N.1409-J AMAICA
1 983
M ar
a 4-VE NE ZUELA1990
3 60236-COL OM BIA199 2
P R1991 B-PUE RTORICO1991
P R1991 A-PUE RTORICO1991
3 60281-COL OM BIA199 2
P R1988 B-P UERTORICO1988
P R1994 B-PUE RTORICO1994
P R1994 A-PUE RTORICO1994
b el 16 1082-BRAS IL
L ARD1910 -V ENEZUEL A
1 99 7
19966-V ENEZUEL A1996
L ARD3146 -VE NEZUEL A
1998
P R1988 AP UE RTORICO1988
PR1986B-P UE RTORICO1986
219PERU
2001
6663-0 1-PERU2001
6658-0 1-PERU2001
PR1986A-P UE RTORICO19 86
PT-COL OM BIA199 6
J AMAICA-J AMAICA
1983
PR1998B-PUE RT ORICO1998
PR1998A-PUE RT ORICO1998
D8 0-1 41-THAYLAND1980
D84-481 -T HAY LAND19 84
D83-061-THAYLAND1983
D87-1421-THAYLAND1987
CTD2 03-VIET NAM 1998
74 VI04-VIE TNA
M 200 4
CT D2 8-VIE TNAM 1997
CT D1 11-VIET NAM1998
CT D2 01-VIET NAM1998
CT D2 25-VIET NAM1998
CTD27-VIET NAM1997
D8 9-8 28-THAYLAND1989
D91 -533-THAY LAND19 91
M3-M ALAYSIA1987
D2-04
-CHINA
CTD43-VIE TNA
M 199 7
CTD2-9VIETNA
M 1998
CT D33-VIETNA
M 198 7
CTD226-VIET NAM1998
CT D68-VIETNA
M 199 7
CTD44-VIETNAM 1998
0 4-CHINA1985
CT D24-VIETNA
M 199 7
CT D20-VIETNA
M 199 7
CTD13-VIE TNAM 1997
CTD6-VIE TNA
M 199 8
D80-038- T HAYLAND1980
P 7-863-M ALAYSIA1969
M 2-M ALAYSIA198 7
D80-100 -T HAYLAND1980
PUO-2 18-BANGKOK1980
M 1-M ALAY SIA198 7
16681-T HAYLAND1964
T H3 6
-THAY LAND1958
P UO-2 80-THAYLAND1980
Bank74-BANGKOK197 4
D84-016-THAY LAND1984
D84-0 13-THAYLAND19 84
D83-1 24-THAYLAND19 83

Secuencias - Per
ASIA - AMERICA

D83-307 -T HAYLAND1983
P UO-312-T HAYLAND19 80
CO4 89 -T HAILAND1996
GD0 8- CHINA1998
GD0 8-98-CHINA1998
D8 7-881-THAYLAND1987
D8 7-881-THAILAND1987
D87-1418-THAYLAND1987
ThNH36-93-T HAYLAND1993
ThNH55-93-T HAYLAND1993
T hNH29-93-T HAYLAND19 93
D87-167-T HAYLAND1987
T hNH45-93-T HAYLAND19 93
T hNH54-93-T HAYLAND19 93
T hNH62-93-T HAYLAND19 93
T hNH63-93-T HAYLAND19 93
T hNH69-93-T HAYLAND19 93
C0576-THAY LAND1994
C0390-THAY LAND1995
D87 -199 -T HAILAND19 87
D8 7-2 79-THAILAND1987
DS T87-060-T HAYLAND19 87
D9 4-0 39-THAY LAND1994
D8 7-1 077-THAILAND1987
D8 7-0 11-THAILAND1987
Th NH-p14-93-T HAY LAND19 93
Th NH-p11-93-T HAY LAND19 93
Th NH-p12-93-T HAY LAND19 93
D87 -499-THAYLAND19 87
D87 -1283-T HAILAND1987
T hNH81-93-T HAYLAND19 93
T hNH76-93-T HAYLAND19 93
D8 7-1040-T HAILAND1987
D87-1 44 -1THAYLAND1987
D87-1 37 -2THAYLAND1987
ThNH-2 8-93-T HAY LAND19 93
ThNH-5 2-93-T HAY LAND19 93
ThNH-p 16- 93-THAYLAND1993
ThNH-p 36- 93-THAILAND1993
D87 -1121-T HAILAND1987
D94 -548-THAYLAND19 94
D87 -704-THAYLAND19 87
D87 -642-THAYLAND19 87
ThNH-7 -93
-THAILAND1993
NIID20-T HAY LAND2004
K0049-T HAILAND19 95
D87-1 113-THAILAND1987
C038 5-T HAYLAND1994
D94 -179 -T HAILAND19 94
T hNH73-93-T HAYLAND1993
D87-3 00-THAILAND1987
D94-376-THAILAND1994
C037 1-THAYLAND1995
C0257-THAY LAND1994
C0166-THAY LAND1996
C0167-THAY LAND1996
CO1 68 - THAILAND1998
D87-738-THAILAND1987
K0008-T HAYLAND1994
K0010-T HAYLAND1994
K0005-T HAYLAND1994

SL 77-SRIL AN
KA1969

SL 105 0-S RIL AN

KA

44-CHINA1989
43-CHINA1987
CTD4 8
-VIET NAM
CTD1 13- VIETNAM1997
CTD2 04- VIETNAM1998
CTD2 08- VIETNAM1998
CTD2 10- VIETNAM1998
CTD2 12- VIETNAM1998
C
- 932-Ac apulc o-M EXICO1997
C1077
-Ch i lpanc ingo -M EXICO
1997
CTD2 11- VIETNAM1998
DVI57488 6-VIETNA
M
NewGuineaC-NE WGUINE A
1 944
2 088-P HIL IP PINES1983
TAIWAN
-TAIW AN
1987
DOH005-PHIL IP PINES

ASIA

DOH0 77-P HIL IP PINES

DOH-0 34-PHIL IP PINES
BRL 0020-PHIL IP PINES
CI-15-PHIL IP PINES
DOH0 78-PHIL IP PINES
DOH1 20-PHIL IP PINES
DOH3 21-PHIL IP PINES
DOH3 49-PHIL IP PINES
SL M C148-P HIL IP PINES1995
PCM C60-PHIL IP PINES1998
BRL 008-PHIL IP P INES

PHILIPPINES

98900665-INDONES IA
1 998
98900666-INDONES IA
1 998
CAM R14-THAILAND19 98
CAM R2-SINGAPORE1991
9 8900663-INDONES IA1998
CookIs la nd s1-COOKISL AND
S1997
9 D-18-PHIL IP PINES1998
0 1-4 -61 Hu NII D
-PHIL IP PINES2001
GD19-2 001
-CHINA20 01
00-43-1HuNII D
-SRIL AN
KA2000
00-36-1HuNII D
-PHIL IP P INES2000
NIID25-PHIL IP P INES2004
T B16i -INDONES IA2004
S INGAPORE-SINGAP ORE
CAM R4-F AREAST1998
CAM R13-FARE AST19 98
GD2 4-93-CHI NA1993
00-0 9-1Hu NII D-EAS TTIM OR2000
01-04-1HuNII D
-I NDONESIA
2 001
94-05-1HuNII D-INDONESIA
1 994
TS V01-AUS TRALIA1993
NARITA53 -INDONES IA2004
BA05i -INDONES IA2004
1582-SRIL AN
KA1985
2 71 235-S RIL AN
KA1990
SL 767-SRIL AN
KA
1 583-S RIL AN
KA198 5
S EY-4 2-S EYCHELL ES1977
SEY-5 2-S EYCHELL ES 1977
S-4452-S EYCHELL ES 19 77
105 1
- INDONE SIA1976
BC1 7-M erida-M E XICO
1 996
10-SOM AL IA1984
Torres Stra it1-AUS T RALIA1996
0190-BURKINAFASO19 83
NIID23-SRIL AN
KA200 4
DEL H
I -96-INDIA1996
1 45 1-INDIA1996
9 6-19-1Hu NIID-INDIA1996
CAM R17-SINGAPUR1991
CAM R7-SRIL AN
KA199 4
2 06714-SRIL AN
KA1989
CAM R16-S AUDI ARABIA
1992
F J 11-99-CHINA1999
CAM R10-INDIA1994
CAM R6-INDIA1991
CAM R5-AUST RALIA
1 995
CAM R8-INDIA1991
Zhej ia ng-01-04-CHINA2004
CAM R11-UGANDA1 993
TRI-1751
-TRINIDAD1954

COSMOPOLITAN

P 9-122 -INDIA1957

Secuencias - Per

218PERU
19
99
220PERU
19
98
170PERU
19
98
130PERU
20
01
131PERU
20
01
IQT2913-P ERU1996
IQT1797-P ERU1995
IQT2133-PERU1996
P eru-539-96PERU19 96
132PERU
20
01
P R1 52-P UERTORICO19 69
7 80447-TRINIDAD1978
EKB194-T ONGA1974
T ONGA-T ONGA1974
PR-1 59-P UERTORICO1969
S1-P UERT ORICO1969
Ve n2-V ENEZUEL A1987
SJ L14 82-M EXICO
1 984

AMERICA

BC1 39- Qu i ntana Roo

-M EXICO
1 994
BC1 34-M erida-ME XICO
1 994
1 32-M EXICO
1992
1 31-M EXICO
1992
3 28 298-M EXICO
1995
P8 -140 7
-M ALAY SIA197 0

Da kAr
578-IVORY COAST1980

HD106 74-SE NEGAL1970

PM 33974-GUINE AREP UB
L IC
1 98 1
OUT GROUP DE NGUE 1

0 .0 5

AFRICA

Arbol filogentico de secuencias DEN2 de la regin E/NS1 obtenidas mediante NJ,

modelo Tamura Nei con 500 repeticiones, considerando secuencias previamente
reportadas en el GEN BANK y las obtenidas en el presente estudio.

ANALISIS GENETICO DENV-3.Se gener un rbol filogentico considerando las secuencias

obtenidas en el presente estudio y algunas secuencias
reportadas por otros pases.
Las secuencias que obtuvimos corresponden al DENV-3
genotipo INDIA.
Se observa que desde su ingreso a Per, este genotipo presenta
alta dispersin, formando clados que se agrupan segn los
aos y rea geogrfica, respectivamente.
La presencia de este genotipo ha sido permanente a la fecha y
esta relacionado con casos de dengue grave.

98TW407-T AIWAN1998
96-17-1HuNIID-THAYLAND1996
98TW368-T AIWAN1998
T hai9709a-T HAI LAND1997
701T N9811a-T AIWAN1998
98TW388-T AIWAN1998
98TW390-T AIWAN1998
98TW434-T AIWAN1998
98TW503-T AIWAN1998
98TW414-T AIWAN1998
T hai9807a-T HAI LAND1998
Viet9809a-VIET NAM1998
T hai0211a-T HAILAND2002
00-40-1HuNIID-T HAY LAND2000
00-41-1HuNIID-T HAY LAND2000
Viet9609a-VIET NAM1996
D93-044-T HAYLAND1993
D97-0291-T HAY LAND1997
D95-0400-T HAY LAND1995
D94-122-T HAY LAND1994
CO331-T HAILAND1994
D93-674-T HAY LAND1993
D96-313-THAYLAND1996
D94-283-T HAY LAND1994
D92-423-T HAY LAND1992
D95-0014-T HAY LAND1995
T hai0308a-T HAILAND2003
Viet0409a-VIET NAM2004
807KH0509a-T AIW AN2005
Viet0507a-VIET NAM2005
Viet0310b-VIET NAM2003
98TW182-IND
O NESIA1998
KP S-4
-0657-207-T HAILAND1998
D96-330-T HAY LAND1996
CO 360-T HAILAND1994
D97-0106-T HAY LAND1997
D97-0144-T HAY LAND1997
007-T HAY LAND1987
D91-538-T HAY LAND1991
31985KLA-MY ANMAR1988
D91-393-T HAY LAND1991
D92-431-T HAY LAND1992
1384-T HAY LAND1987
D88-086-T HAY LAND1988
PaH881-88-T HAY LAND1988
D89-273-T HAY LAND1989
Singapore812095-SINGAPORE1995
DEN3-T HAY LAND1987
AP U-BAN
GLADESH2001
165-BAN
G LADESH2000
58-BANGLADESH2000
164-BAN
G LADESH2000
114-BAN
G LADESH2000
00-27-1HuNIID-BANG LADESH2000
Myan0508a-MYANMAR2005
J ACO B-BAN
GLADESH2001
Bang0108a-T HAILAND2001
BDH02-1-BAN
G LADESH2002
BDH-02-2-BAN
GLADESH2001
BDH02-3-BAN
G LADESH2002
BDH02-4-BAN
G LADESH2002
BDH02-5-BAN
G LADESH2002
BDH02-6-BAN
G LADESH2002
BDH02-7-BAN
G LADESH2002
BDH02-8-BAN
G LADESH2002
DEN3-T HAY LAND1986
CH53489-24-28-T HAY LAND1973
DEN3-T HAY LAND1973
DEN3-T HAY LAND1962
D3-73NIID-UNKNOWM1973
H87-P HILIP PINE S1956
80-2-CHINA1980
P F 90-3056-T AHIT I1990
P F 92-4190-T AHIT I1992
DEN3-FIJI1992
P F 90-3050-F RENCHP OLY NESIA1990
P F 90-3050-T AHITI 1990
DEN3-T AHITI1989
P F 92-2956-T AHITI 1992
SLEMAN78-INDO NESIA1978
DEN3-IND
O NESIA1978
DEN3-IND
O NESIA1973
P F 90-6056-T AHIT I1990
P F 92-2986-T AHIT I1992
P F 89-27643-TAHITI 1989
P F 89-320219-TAHIT I1989
DEN3-MALAYSIA1981
88-IND
ONESIA1988
DEN3-MALAYSIA1974

THAILAND

P hil0508a-P HI LIP PINES2005

812KH0508a-T AIWAN2005
813KH9408a-T AIWAN1994
P hil9808a-PHILIP PINES1998
P hil9711a-P HILIP PINES1997
95TW466-T AIWAN1995
P hil9609a-P HI LIP PINES 1996
P hMH-J 1
-97-P HILIP PINES1997
P F 94-116-F RENCHP OLY NESIA1994

T aiwan-739079A-T AIWAN-UNK
DEN3-P HILIP PINES 1983
DEN3-IND
O NESIA1985

Indo9909a-T AIWAN1999
98902890-INDONESI A1998
D88-303-THAYLAND1988
NIID04-I ND
ONESIA2005
Indo9108a-IND
ONESIA1991
98901590-INDONE SIA1998

Cuba116-00-CUBA2000
2336-MARTINIQ UE 2001
BR74886-02-BRASIL2002
D3P Y-FM11-03-PARAGUAY 2003
1243-MARTINIQ UE 1999
2023-MARTINIQ UE2001
2012-MARTINIQ UE2001
1706-MARTINIQ UE2000
1567-MARTINIQ UE2000
68784-BRASIL2000
D3BR-CU6-02-BRASIL2002
F SB413-BOLIVIA2003
F SB439-BOLIVIA2003
D3BR-P P 15-04-BRASIL2004
D3BR-RP 2-03-BRASIL2003
D3BR-SG2-02-BRASIL2002
D3BR-SL3-02-BRASI L2002
D3BR-ST 14-04-BRASIL2004
D3P Y-AS10-03-P ARAGUAY2003
D3P Y-AS12-02-P ARAGUAY2002
D3P Y-AS9-03-P ARAG UAY 2003
D3P Y-Y A2-03-P ARAG UAY 2003
D3P Y -P J 7-03-P ARAG UAY 2003
D3P Y -P J 6-03-P ARAG UAY 2003
D3P Y -P J 5-03-P ARAG UAY 2003
D3P Y -P J 4-03-P ARAG UAY 2003
D3BR-P V6-03-BRASIL2003
D3BR-P V5-02-BRASIL2002
D3BR-P V4-03-BRASIL2003
D3BR-P V2-03-BRASIL2003
D3BR-P V3-03-BRASIL2003
MF I624-P ERU2005
38PERU2007
32PERU2007
OBT 4024-P ERU2005
LIMA13PERU2006
LIMA14PERU2006
27PERU2005
LARD6315-VE NEZUELA2000
25PERU2005
LIMA16PERU2006
LIMA15PERU2006
MEX6097-MEXICO1995
LARD6318-VENEZUELA2000
LARD7812-VENEZUELA2001
Cuba580-01-CUBA2001
Cuba21-02-CUBA2002
Nicaragua24-94-NICARAGUA1994
LARD6456-VENEZUELA2001
LARD7984-VENEZUELA2001
LIMA20PERU2006
LIMA19PERU2006
28PERU2005
21PERU2005
19PERU2007
LARD6722-VENEZUELA2001
LARD621810-VENEZUELA2000
C23-009-VENEZUELA2003
LARD7110-VENEZUELA2001
C02-003-VENEZUELA2001
LARD6668-VENEZUELA2001
LARD5990-VENEZUELA2000
104PERU2004
161PERU1999
LARD6007-VENEZUELA2000
LARD6397-VENEZUELA2000
C09-006-VENEZUELA2001
LARD6411-VENEZUELA2000
F ST 289-P ERU2004
23PERU2005
LARD6667-VENEZUELA2001
LARD6666-VENEZUELA2001
DEN3-SRILANKA1991
DEN3-SRILANKA1989
DEN3-MOZAMBIQ UE1985
00-28-1HuNIID-CAMBODIA2000
S142-SOMALIA1993
DEN3-INDIA1984

S.E ASIA-PACIFIC
OPD029NIID-EASTT IMOR2005
T L018NIID-EAST TIMO R2005
OP D007NIID-EASTT IMO R2005
T L129NIID-EAST TIMOR2005
P ED129NIID
-EAST TIMO R2005
T L109NIID-EAST TI M
O R2005
P ED109NIID
-EAST TIMO R2005
T L029NIID-EAST TI M
O R2005
ET 209-EASTT IMOR2000

98901640-INDO NESIA1998
98-I ND
O NESIA1998
FW06-INDO NESIA2004
NIID02-IND
O NESIA2005
KJ 46-INDO NESIA2004
P h86-IND
O NESIA2004
KJ 71-INDONESI A2004
Indo0508a-IND
ONESIA2005
BA51-INDO NE SIA2004
P I64-IND
ONESIA2004
Indo9804a-IND
O NESIA1998
Indo0312a-IND
O NESIA2003
98901437-INDONESIA1998
98901403-INDONESIA1998
FW01-INDO NESIA2004
NAMRU-2-98901413-SUMAT RA1988
98901517-INDONESIA1998
NAMRU-2-98901620-J AVA1988
T B16-INDO NESIA2004
KJ 30i-IND
ONESIA2004
T B55i-INDONESIA2004

DEN3-SRILANKA1985
1326-SRILANKA1981
DEN3-SRILANK A1981
Singapore-SINGAPORE
SriLan9912a-SRILANKA1999
1266-SRILANKA2000
99TW628-T AIWAN1999

Secuencias -

Per

Secuencias -

Per

INDIA

DEN3-SAMOA1986

DEN3-P UE RTORICO1977
DE N3-TAHITI1965
P R6-P UERTORICO 1966
BS-P Rico63-P UERT ORICO1963

1339-P UERTO RICO1977

AME RICA

0. 02

rbol filogentico de secuencias DENV-3 de la regin E/NS1 obtenidas mediante NJ, modelo Tamura Nei con 500 repeticiones, considerando secuencias previamente reportadas en el GEN BANK y las
obtenidas en el presente estudio.

ANALISIS GENETICO DENV-4.Para el anlisis tambin se consideraron secuencias reportadas

al GENBANK por diferentes pases a fin de establecer la
distribucin filogentica descritos por Rico-Hesse et. al.
Tambin se gener un rbol filogentico considerando las
secuencias obtenidas en el presente estudio y algunas
secuencias reportadas por otros pases.
Las secuencias que obtuvimos corresponden al DENV-4
genotipo INDONESIA.

1420-MEXICO 1983
1414-MEXICO 1983
DEN4-ELS ALVAD
O R1983
D4M.3
-MART I N
I Q UE 1982
D4M.13MARTI N
I Q UE1982
814669-DO MINICA1981
SUR 1982C-SURINAM1982
D4.66-P UE RTO RICO 1987
D4.69-P UE RTO RICO 1987
M33-P UER
T OR
IC
O 1985
D4.63-P UE RTO RICO 1987
D4M.10MARTI N
I Q UE1982
D4M.16MARTI N
I Q UE1982
J AM 1983-J A
MAICA1983
D4.117-P UERTO RICO 1986
SUR 1982D-SURINAM1982
D4.65-P UE RTO RICO 1987
D4M.12MARTI N
I Q UE1982
D4M.20P UERTO RI C
O 1982
DEN4-T AH
ITI1985
TR
I 1984BT RI N
I DAD1984
373-CO L
O MBI A1996
D4.109-ECUAD
O R1994
D4M.15MARTI N
I Q UE1982
T RI 1982BT RI N
I DAD1982
D4M.24MARTI N
I Q UE1982
TR
I 1982AT RI N
I DAD1982
M32-P UER
T OR
IC
O 1985
D4.60-P UE RTO RICO 1987
HO N 1991-HO NDURAS 1991
D4.9-P UE R
T O RICO 1987
SUR 1982A-SURINAM1982
D4M.25P UERTO RI C
O 1982
D4M.5
-MART I N
I Q UE 1982
TR
I 1984AT RI N
I DAD1984
DEN4-NEWCALED
ON
I A1984
DEN4-IND
O NE SI A1976
D4.116-P UERTO RICO 1986
J AM 1981-J AMA
I CA1981
D4.64-P UE RTO RICO 1987
D4M.4
-MART I N
I Q UE 1982
D4M.7
-MART I N
I Q UE 1982
DEN4-T AH
ITI1979
DEN4-MEXICO 1984
BRASI L-BRASI L1982
703-4-T HAILAND1994
D4.8-P UE R
T O RICO 1987
D4M.42P UERTO RI C
O 1986
SUR 1982B-SURINAM1982
D4.73-P UE RTO RICO 1987
D4M.21MARTI N
I Q UE1982
D4M.44MARTI N
I Q UE1981
DE N4-IND
O NE SI A1977
D4.1-P UER
T ORI C
O 1987
D4.3-P UER
T ORICO 1987
96-P UERTO RI C
O 1990
D4.86-P UERTO R
I CO 1994
D4.36-P UERTO R
I CO 1992
DEN4-P UERTO RICO 1986
P uertoRico1986-P UERTO RI C
O 1986
D4.115-P UE RTO RICO 1986
D4.32-P UERTO R
I CO 1992
D4.42-P UERTO R
I CO 1992
D4.31-P UERTO R
I CO 1992
D4.27-P UERTO R
I CO 1992
D4.30-P UERTO R
I CO 1992
D4.25-P UERTO R
I CO 1992
BDS 1993BBARBAD
O S1993
TR
I 1994-T RINIDAD1994
D4.80-P UERTO R
I CO 1994
D4.78-P UERTO R
I CO 1994
D4.77-P UERTO R
I CO 1994
D4.76-P UERTO R
I CO 1994
D4.37-P UERTO R
I CO 1992
D4.24-P UERTO R
I CO 1992
D4.34-P UERTO R
I CO 1992
D4.35-P UERTO R
I CO 1992
D4.41-P UERTO R
I CO 1992
D4.72-P UERTO R
I CO 1987
D4.62-P UERTO R
I CO 1987
D4.26-P UERTO R
I CO 1992
D4.28-P UERTO R
I CO 1992
D4.82-P UERTO R
I CO 1994
D4.29-P UE RTO RICO 1992
D4.81-P UERTO R
I CO 1994
D4.87-P UERTO R
I CO 1994
D4.79-P UERTO RICO 1994
D4.89-P UERTO RICO 1994
D4.83-P UE RTO RICO 1994
SUR 1994C-S URI NAM1994
D4.112-MART I N
IQ UE 1995
BDS 1993ABARBAD
O S1993
FG UF RENCHG UY ANNE1995
FG U5
-F RENCH
G UY ANNE 1994
FG U5
-F RENCH
G UY ANNE 1995
D4.108 1996CR-CO ST ARICA1996
S UR 1994B-SURI NA
M1994
S UR 1994A-SURI NA
M1994
D4.108-COST AR
I CA1996
FG U4-F RENCH
G UY ANNE 1994
FG U3-F RENCH
G UY ANNE 1993
FG U2-F RENCH
G UY ANNE 1994
FG U6-F RENCH
G UY ANNE2004
G UA
FWI-G UAD
E LOUP E2004
MAR
F WI2MARTI NIQ UE2004
FG U7-F RENCH
G UY ANNE2005
D4.44-P UERTO R
I CO 1998
M
O N1994A-M
O NTS ERRAT 1994
M
O N1994C-M
O NT SE RRAT 1994
BDS 1999-B
ARBADOS1999
M
O N1994B-M
O NTS ERRAT 1994
T RI 1999-T RINIDAD1999
D4.113-VE NEZUELA1995
D4.85-P UERTO RICO 1994
BAH 1998C-BAHAMAS1998
BAH 1998BBAHAMAS1998
BAH 1998ABAHAMAS1998
MAR
F WI MARTINIQ UE2004
D4.48-P UERTO R
I CO 1998
D4.15-P UE RTO RICO 1998
D4.46-P UERTO R
I CO 1998
D4.84-P UE RTO RICO 1994
2
16
PERU20
07
2
17
PERU20
07
1
58
PERU20
07
1
57
PERU20
07
LI
MA18
PERU20
06
LI
MA17
PERU20
06
17
3PERU1
99
8
D4.19-P UE RTO R
I CO 1998
D4.18-P UE RTO R
I CO 1998
D4.14-P UE RTO R
I CO 1998
D4.12-P UE RTO R
I CO-1998
D4.47-P UE RTO R
I CO 1998
D4.13-P UE RTO R
I CO 1998
D4.20-P UE RTO R
I CO 1998
D4.17-P UERTO R
I CO-1998
D4.45-P UERTO R
I CO 1998
D4.110-ELSALVAD
O R1993
DEN4-ELSALVAD
OR1994
D4.67-P UERTO R
I CO 1987
1551-MEXI CO 1985
D4.5-P UER
T OR
IC
O 1987
MEX 1991-MEXI C
O 1991
4915-MEX
I CO 1995
D4.111-MEXICO 1995
5962-MEXI CO 1996
4959-MEXI CO 1995
6637-MEXI CO 1997
8976-SIN
G APO RE1995
H241-P -P HIL
IP PI NES1956
G uangzhou
DE N4-P HI L
IP PI NES1984
D4-61NI ID-UNK N
OWN1961
DEN4-P HIL
IP PI NES 1964
T hD4 0068 85T HA
I LAND1985
DE N4-S RI LANKA1978
P 7-1006-MALA
Y S IA1969

IND ONESIA

Sec uenci as - P er

96-33-1HuNII D-INDI A1996

T HAI85-T HAI LAND1985
T hD4 0696 80-T HA
I LAND1980
T hD4 0792 93-T HAILAND1993
T hD4 0092 77-T HAILAND1977
DEN4-T HAY LAND1978
T hD4 0087 77T HA
I LAND1997
T hD4 0113 76T HA
I LAND1976
T hD4 0104 86T HAILAND1986
T hD4 0116 81T HAILAND1981
T hD4 0182 85T HA
I LAND1985
DEN4-T HAY LAND1984
T hD4 0096 82-T HAILAND1982
T hD4 0417 84T HAILAND1984
T hD4 0194 83T HA
I LAND1983
T hD4 0129 84T HAILAND1984
T hD4 0233 86T HAILAND1986
T hD4 0073 83T HAILAND1983
T hD4 0420 93-T HA
I LAND1993
T hD4 0358 92T HA
I LAND1992
T hD4 0600 94T HA
I LAND1994
T hD4 0109 96T HA
I LAND1996
17-SRILANK A1978
T hD4 1571 98-T HAI LAND1998
02-21-1HuNI ID-CA
MBO DIA2002
T hD4 0557 91T HA
I LAND1991
T hD4 0348 91T HA
I LAND1991
T hD4 0103 91T HAI LAND1991
T hD4 0333 93T HAI LAND1993
T hD4 0261 92T HAI LAND1992
T hD4 0229 96T HA
I LAND1996
T hD4 0100 95T HA
I LAND1995
T hD4 1142 98T HA
I LAND1998
99-10-1HuNI I DT HAY LAND1999
T hD4 0003 99-T HA
I LAND1999
T hD4 0485 95T HA
I LAND1995
T hD4 0352 02T HA
I LAND2002
T hD4 1448 98T HAILAND1998
T hD4 1218 01T HAILAND2001
T hD4 0152 99T HAILAND1999
T hD4 0274 00T HAILAND2000
T hD4 0761 00T HAILAND2000
T hD4 0357 02T HAILAND2002
T hD4 0438 02T HA
I LAND2002
T hD4 0485 01T HA
I LAND2001
T hD4 0501 02T HAILAND2002
T hD4 0521 99T HA
I LAND1999
T hD4 2014 01-T HA
I LAND2001
T hD4 0319 00T HA
I LAND2000
T hD4 0759 00T HAI LAND2000
T hD4 0440 01T HA
I LAND2001
MY 01-23264-M
ALAY SI A2001
MY 01-23314-M
ALAY SI A2001
MY 01-23096-M
ALAY SI A2001
MY 01-23298-M
ALAY SI A2001
ET 00-EASTTIMO R2000
DEN4-I ND
O NESIA1973
MY 01-22713-M
ALAY SIA2001
1503-Y UCAT ANM
X84-MEXICO 1984
T hD4 0734 00T HA
I LAND2000
SW38i-INDO NESI A2004
SW36i-I NDO NES IA2004
02-12-1HuNII DI NDO NESI A2002
DEN4-T HAY LAND1963
T H127098-T HAILAND1998
T h0016499-T HA
I LAND1999
T h0043901-T HAI LAND2001
T hD4 0017 97-T HA
I LAND1997
T H0047697-T HA
I LAND1997
P 75-514-MALAY SIA1975
P 73-1120-MALAYSI A1973
P 75-215-MALA
Y S IA1975

S. E ASIA

MALAYSIA

0.02

THAILA ND
SYLVATIC

rbol filogentico de secuencias DENV4 de la regin E/NS1 obtenidas mediante NJ, modelo Tamura - Nei con
500 repeticiones, considerando secuencias previamente reportadas en el GEN BANK y las obtenidas en el
presente estudio.

CIRCULACION DE UN NUEVO LINAJE DEL

VIRUS DENGUE 2 GENOTIPO AMERICA / ASIA
EN LA REGION AMAZONICA DE PER, 2010
Mamani E.1, Alvarez C. 2, Garca M. 1, Figueroa D.1, Gatty M.2, Guio H.3,
Merino S.1, Valencia P. Calampa C. 2 , Franco L 4, Cabezas C.1
1 Laboratorio de Arbovirus Instituto Nacional de Salud, Per
2 Direccin Regional de Salud Loreto.
3 Laboratorio de Biologa Molecular y Biotecnologa Instituto Nacional de
Salud
4 Instituto Carlos III Espaa.
Email: emamani@ins.gob.pe

Fig 3. rbol filogentico mediante Neighbor-joining de 32 secuencias genticas de la regin

E/NS1 del virus dengue serotipo 2 (DENV-2). 10 secuencias de virus dengue aislados en Per
en diferentes brotes del ao 1995 al 2010 fueron comparadas con secuencias de DENV
depositadas en el GenBank (www.ncbi.nlm.nih.gov).

INTERPRETACION DE RESULTADOS DE
LABORATORIO PARA EL DIAGNOSTICO
DE DENGUE
CASO CONFIRMADO
Resultado Positivo por RT-PCR.
Resultado Positivo de aislamiento viral.
Resultado Positivo a antgeno NS1.
Resultado Positivo de IgM en una sola muestra
Evidencia de seroconversin en IgG en
muestras pareadas.
a.

DIRECTIVA SANITARIA PARA EL

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE
DENGUE

La implementacin de la nueva directiva

de diagnstico de laboratorio.
-Vigilancia rutinaria
-Vigilancia centinela en establecimientos
-Deteccin temprana de brotes (30 a 50
muestras)

RED NACIONAL DE LABORATORIOS EN SALUD PUBLICA

Bagua
2000
Chachapoyas
Tumbes
09/02/99

Iquitos
18/12/94

Cajamarca
13/11/96

Piura
17/06/94

Tarapoto
25/07/94

Chiclayo
27/10/95

Pucallpa
2000

La Libertad
Huaraz
2000

Puerto Maldonado
2000

Lima

Abancay
26/05/99

Huancayo
04/09/98

LAB. DE REFERENCIA NACIONAL

24 LAB. DE REFERENCIA REGIONAL

04 Disas en Lima

Cusco
16/02/97

Huancavelica
2000

Puno
23/09/96

Ayacucho
23/07/94
Arequipa
06/11/96

Tacna
20/12/96

RED DE LABORATORIOS PARA

EL DIAGNSTICO DE DENGUE
Iquitos

Bagua
Cajamarca
Tumbes
Piura

Tarapoto

Chiclayo

Pucallpa

La Libertad

Cusco

Huaraz
Puerto Maldonado

Lima**

Abancay

Huancayo
Huancavelica

Puno

Ayacucho

1 LAB. DE REFERENCIA NACIONAL

24 LAB. DE REFERENCIA REGIONAL

ELISA-Dengue

Arequipa
Tacna

RT-PCR

Acceso a NETL@b
Ingresar el
nombre de
usuario y
contrasea.
y hacer click en
login

CONTRIBUCION DEL LABORATORIO

EN EL DIAGNOSTICO DE DENGUE
Manejo clnico del paciente (Hto. Plaq. y otros).
Confirmacin de casos de dengue (serolgicas virolgicas
y moleculares)
Demostrar y predecir severidad (carga viral en estudio)
Deteccin temprana circulacin virus dengue en reas
nuevas (vigilancia basada en Lab.)
Deteccin temprana de nuevos serotipos y subtipos
(vigilancia basada en Lab.)

CONTRIBUCION DEL LABORATORIO

EN EL DIAGNOSTICO DE DENGUE
Estimado de incidencia despus de epidemias
Confirmacin casos y su caracterizacion (severos)
Caracterizacin cepas dengue (Secuenciamiento)
Diseo de nuevas estrategias o herramientas de
diagnstico.
Diferenciar enfermedades similares (diagnstico
diferencial)

GRACIAS