Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • 2K vistas

    Métodos Histológicos

    Cargado por

    Jessica
    Este documento describe varios métodos histológicos, incluyendo métodos directos e indirectos para estudiar tejidos bajo el microscopio. Explica procesos como la fijación, inclusión en parafina, corte al micrótomo, y coloración con hematoxilina y eosina, que permiten observar la estructura celular a nivel microscópico. También cubre métodos especiales como coloraciones, cultivos celulares e inmunohistoquímica.

    Copyright:

    Attribution Non-Commercial (BY-NC)
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    Métodos Histológicos

    Cargado por

    Jessica
    2K vistas81 páginas
    Este documento describe varios métodos histológicos, incluyendo métodos directos e indirectos para estudiar tejidos bajo el microscopio. Explica procesos como la fijación, inclusión en parafina, corte al micrótomo, y coloración con hematoxilina y eosina, que permiten observar la estructura celular a nivel microscópico. También cubre métodos especiales como coloraciones, cultivos celulares e inmunohistoquímica.

    Título original

    MÉTODOS-HISTOLÓGICOS

    Derechos de autor

    © Attribution Non-Commercial (BY-NC)

    Formatos disponibles

    PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Este documento describe varios métodos histológicos, incluyendo métodos directos e indirectos para estudiar tejidos bajo el microscopio. Explica procesos como la fijación, inclusión en parafina, corte al micrótomo, y coloración con hematoxilina y eosina, que permiten observar la estructura celular a nivel microscópico. También cubre métodos especiales como coloraciones, cultivos celulares e inmunohistoquímica.

    Copyright:

    Attribution Non-Commercial (BY-NC)
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    2K vistas81 páginas

    Métodos Histológicos

    Cargado por

    Jessica
    Este documento describe varios métodos histológicos, incluyendo métodos directos e indirectos para estudiar tejidos bajo el microscopio. Explica procesos como la fijación, inclusión en parafina, corte al micrótomo, y coloración con hematoxilina y eosina, que permiten observar la estructura celular a nivel microscópico. También cubre métodos especiales como coloraciones, cultivos celulares e inmunohistoquímica.

    Copyright:

    Attribution Non-Commercial (BY-NC)
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    Está en la página 1de 81

    MÉTODOS HISTOLÓGICOS

    GISELA GARCÍA CRESPO.


    MÉTODOS HISTOLÓGICOS

    • Los métodos o técnicas histológicas se


    puede definir como: la serie de
    procedimientos especiales a los que se
    somete el material que se va a estudiar
    bajo el microscopio (Histológicamente)
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • DIRECTOS( En
    vivo)
    • INDIRECTOS
    (Postmorten)
    • COLORACIÓN
    MÉTODOS DIRECTOS

    • ESTUDIO DONDE SE EMPLEAN


    PROCEDIMINETOS QUE NO AFECTAN
    LA BIOLOGÍA CELULAR, O PERMITEN
    OBSERVAR LOS CAMBIOS QUE SUFRE
    ANTE DETERMINADOS
    PROCEDIMIENTOS.
    METODOS INDIRECTOS
    • PROCEDIMIENTOS QUE REQUIEREN
    MAYOR TIEMPO PARA PODERLOS
    EJECUTAR, A VECES REQUIEREN DE
    UNA FIJACIÓN PREVIA.
    • SON PROCEDIMIENTOS MEDIATOS O
    POSTMORTEN.
    Entre estos procedimientos contamos...
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • CULTIVOS CELULARES
    Se cultivan células fuera del organismo que
    les dio origen.
    Requiere un medio apropiado: aséptico (sin
    agentes nocivos), temperatura, pH, humedad,
    nutrientes, etc.
    CULTIVOS CELULARES
    CULTIVOS CELULARES
    CULTIVOS CELULARES
    METODOS HISTOLÓGICOS

    • AUTORRADIOGRAFIA:Técnica por la
    cual un objeto radiactivo produce una
    imagen de sí mismo sobre una película
    fotográfica. La imagen se denomina
    autorradiografía
    Autorradiografía
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • CENTRIFUGACIÓN -
    ULTRACENTRIFUGACIÓN
    Se obtienen células o componentes
    subcelulares específicos de acuerdo a su
    gradiente de sedimentación Ej.: glóbulos
    rojos, glóbulos blancos; mitocondrias,
    retículo endoplasmático, etc.
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • INJERTOS O TRANSPLANTES
    – Homo-injertos: se realizan en la misma
    especie
    • Auto-transplantes ( el mismo individuo)
    • Alo-injertos (diferentes individuos)
    – Isotransplante
    Homotransplante
    Alotransplante
    METODOS HISTOLÓGICOS

    – Hetero-injertos o xeno-injertos: se efectúan


    entre especies diferentes
    Xenotransplante o
    heterotransplante
    Xenotransplante o
    heterotransplante
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • Disociación

    • Escisiones

    • Iluminación especial
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • Disociación
    • Escisiones
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • Maceraciones

    • Inyecciones
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • Reconstrucciones
    METODOS HISTOLÓGICOS
    • Fotografías
    • Videos
    • Dibujos
    ...
    METODOS HISTOLÓGICOS

    • DIRECTOS
    • INDIRECTOS
    • COLORACIÓN
    METODO DE COLORACIÓN
    • SE BUSCA CONTRASTAR COMPONENTES
    CELULARES O EXTRACELULARES A TRAVÉS
    DE SUSTANCIAS CROMÓGENAS.
    TEORÍAS DE LA
    COLORACIÓN
    FÍSICA
    QUÍMICA
    FÍSICO-QUÍMICA
    CLASIFICACIÓN DE LOS
    COLORANTES
    CLASIFICACIÓN
    POR SU ORIGEN
    • NATURALES
    • ARTIFICIALES
    CLASIFICACIÓN DE LOS
    COLORANTES
    CLASIFICACIÓN
    POR SU ORIGEN
    • NATURALES
    COLORANTES
    NATURALES
    VEGETALES
    • hematoxilina, azafrán,
    orceína.
    COLORANTES

    ANIMALES
    • carmín (cochinilla)
    COLORANTES

    ARTIFICIALES
    PIGMENTOS
    • rojo rutenio, verde
    brillante, azul de Prusia.
    • Derivados de la anilina
    • (destilación de la hulla)
    Colorantes. Clasificación
    química

    • Colorantes Básicos
    • Colorantes Ácidos
    • Colorantes Neutros
    Procesamiento Histológico
    Fases o procesos:

    • Toma de la muestra
    • Fijación
    • Repicado
    • Inclusión de la muestra
    • Corte al micrótomo
    • Coloración
    • Montaje
    Procesamiento Histológico
    • Toma de la muestra
    – Identificación
    • Especie
    • Raza
    • Número
    • Etc.
    Procesamiento Histológico

    • Toma de la muestra
    – Tamaño
    Procesamiento Histológico

    • Toma de la muestra
    – Tamaño: 0,5 a 1 cm
    FIJACIÓN

    PRINCIPIO DE LA FIJACIÓN
    CARACTERÍSTICAS DE UN BUEN
    FIJADOR
    FIJACIÓN
    Formol al 10 %
    Procesamiento Histológico
    • Toma de la muestra
    – Identificación
    Repicar la muestra
    Procesamiento Histológico
    • TOMA DE LA MUESTRA (0,5-1 CM)
    • FIJACIÓN: 40-60 VECES EL VOLUMEN
    • LAVADO EN AGUA CORRIENTE

    ¿cómo cortar tan delgado?


    ¿ 5 micrómetros?
    ¡¡¡ parafina !!! ... Pero y el agua?
    ¡¡¡ No son miscibles!!!
    Procesamiento Histológico
    • DESHIDRATACIÓN EN ALCOHOLES
    CRECIENTES (50º- 100º)
    • ACLARAMIENTO EN XILOL
    • INCLUSIÓN EN PARAFINA

    • CONFECCIÓN DE LOS BLOQUES


    Inclusión en parafina
    • Procesamiento de la
    muestra
    – Lavado
    – Deshidratación
    – Aclaramiento (xilol)
    – Inclusión en parafina
    Inclusión
    • Confección del
    bloque
    – Identificación
    Inclusión
    • Confección del
    bloque
    Corte al microtomo

    • 5 micrómetros
    – Deslizamiento
    – Rotación
    MICROTOMO DE
    DESLIZAMIENTO
    Procesamiento Histológico

    Microtomos de deslizamiento
    Corte al microtomo
    • 5 micrómetros
    – Microtomos de rotación
    Procesamiento Histológico

    • Recolección de los
    cortes
    – Pescado (baño
    María)
    Procesamiento Histológico
    • Recolección de los cortes
    • Desparafinación
    – Estufa
    – Xilol

    ¿ y el agua ? ...

    • Hidratación(alcoholes decrecientes)
    • Coloración
    COLORACIÓN
    HEMATOXILINA Y EOSINA
    COLORACIÓN
    HEMATOXILINA Y EOSINA
    • Coloración
    – Desparafinación (xilol)
    – Hidratación
    – Coloración Hematoxilina
    – Coloración Eosina
    HEMATOXILINA & EOSINA
    RESUMEN:
    • CORTE AL MICROTOMO
    • RECOLECCIÓN (BAÑO DE MARÍA)
    • DESPARAFINACIÓN (XILOL)
    • HIDRATACIÓN ALCOHOLES DECRECIENTES
    (100º A-AGUA)
    • COLORACION HEMATOXILINA( núcleo- ácidos)
    HEMATOXILINA & EOSINA

    • LAVADO AGUA CORRIENTE


    • COLORACIÓN EOSINA
    • LAVADO CON AGUA
    • DESHIDRATACIÓN
    • ACLARAMIENTO
    • MONTAJE
    Tipos de coloración ( acorde
    color producido )
    Tipos de coloración ( acorde
    color producido )

    • Ortocromática

    • METACROMÁTICA

    • Impregnación
    Tipos de coloración ( acorde
    color producido )

    • Retrógrada

    • Progresiva

    • VITAL (in vivo, in vitro)

    • Histoquímica
    MÉTODOS HISTOQUÍMICOS
    Para carbohidratos: PAS, PAS-D
    Lípidos.: SUDÁN, ACEITE ROJO
    Ácidos nucléicos: FEULGEN
    Pigmentos y minerales: VON KOSSA (Ca.)
    EnzimaS : FOSFATASA (alcalina , ácida), ESTERASAS
    MÉTODOS HISTOQUÍMICOS

    COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LOS TEJIDOS


    MÉTODOS INMUNOHISTOQUÍMICOS
    ENZIMAS (P-AP), FLUORESCENCIA
    OTRAS COLORACIONES

    • PARA TEJIDO CONJUNTIVO


    • FIBRAS RETICULARES
    • IMPREGNACIONES ARGÉNTICAS Y
    ÁUREAS
    • CELULAS CROMAFINES
    • HONGOS
    • BACTERIAS
    Coloración H & E
    COLORACIÓN H & E
    HISTOQUÍMICA: Azul Alciano
    HISTOQUÍMICA: PAS
    COLORACIONES ESPECIALES:
    TRICRÓMICAS
    COLORACIÓN FIBRAS
    ELÁSTICAS
    FIBRAS ELÁSTICAS
    IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA
    METACROMASIA: AZUL DE
    TOLUIDINA
    TRICRÓMICA
    CME “DR. HUMBERTO
    FERNÁNDEZ MORÁN”

    PANTALLA FLUORESCENTE
    RESULTADO

    Transmisión Barrido
    GRACIAS POR SU ATENCIÓN

    También podría gustarte