Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de qumica.
Laboratorio de qumica orgnica I.

Prctica 6: Cromatografa en capa fina.

Objetivos:

Conocer la tcnica de cromatografa en capa fina, sus caractersticas y los factores que en ella
intervienen.

Observar la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los
eluyentes utilizados.

Emplear la tcnica de cromatografa en capa fina como criterio de pureza e identificacin de

sustancias

Antecedentes

La cromatografa constituye un mtodo fsico de separacin en el cual los componentes a

separar se distribuyen entre dos fases: una fase estacionaria, slida o lquida, de gran rea superficial, y
una fase mvil, lquida o gaseosa, que pasa a travs de la primera.

Un principio fundamental de la cromatografa se basa en las solubilidades o adsortividades

diferentes de las sustancias a separar en relacin a las dos fases entre las cuales se deben particionar.

Por esta razn, se distinguen dos fenmenos muy importantes y que son prcticamente los reactores
del proceso de separacin: adsorcin y paricin.

La cromatografa en capa fina es una tcnica para la separacin rpida y el anlisis cualitativo

de pequeas cantidades de muestra.

Este tipo de cromatografa se fundamenta en la separacin por particin slido-lquido, fase mvil
(eluyente) y fase slida (adsorbente), llevndose a cabo la elucin en forma ascendente (por
capilaridad).

Dentro de las principales aplicaciones de la cromatografa en capa fina, se puede mencionar que es

una tcnica eficiente para:

Establecer si dos compuestos son idnticos

Determinar el nmero de componentes de una mezcla

Determinar el disolvente adecuado para una separacin cromatografa en columna.

Monitorear la separacin de una mezcla por cromatografa en columna.

Seguir el proceso de una reaccin.

Como criterio de pureza.

Una vez que se llev a cabo una separacin por cromatografa en capa fina para identificar cada

uno de los compuestos, se requiere revelar las placas.

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El mtodo ms utilizado de revelado es el uso del yodo, ste forma complejos coloridos que van de

caf a amarillos, llevndose a cabo en una cmara de revelado, en la cual estn contenidos los cristales

de yodo; la placa una vez eluida, se deja secar y se introduce en esta cmara, hasta que aparecen las
manchas definidas, donde se encuentra cada compuesto separado.

El segundo mtodo ms utilizado es el revelado con luz ultravioleta, aprovechando que muchos

compuestos presentan fluorescencia bajo la luz UV. Esto se puede lograr tambin, utilizando un
adsorbente con un indicador (sulfuros de cadmio o zinc) fluorescente, el cual, despus de eluir una
muestra y dejar secar, se observa bajo la luz UV.

Existen otros mtodos de revelado, disponibles principalmente a base de reactivos qumicos, sin

embargo, no son muy utilizados, ya que este tipo de reactivos son muy especficos para ciertos grupos
funcionales.

Gel de Slice

Es una forma granular y porosa de dixido de slice, hecho a partir de silicato de sodio. Es un gel

slido y duro, de aspecto cristalino, poroso, inerte, no txico e inodoro. Su frmula molecular es
SiO2*nH2O, caso insoluble en agua y en cualquier otro disolvente. Es qumicamente estable, slo
reacciona con cido fluorhdrico y con lcali.

El gel de slice, tambin conocido como silicagel, es un producto absorbente que puede diferenciar
la adsorcin de diferentes molculas, actuando como un adsorbente selectivo en procesos de

cromatografa, tanto en columna como en placa fina. Se utiliza para separar sustancias ms polares
(alcoholes, aminas, cidos carboxlicos).

El proceso de adsorcin se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo-dipolo o enlaces de

hidrogeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a analizar y
no actuar como catalizador en reacciones de descomposicin. El adsorbente interacciona con las
sustancias mediante interaccin dipolo-dipolo o mediante enlace de hidrgeno si lo presentan.

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Resultados.
I.

Efecto de la concentracin.
Solucin 1.

Concentracin.

Distancia recorrida
Solucin

3 gotas

3.5

6 gotas

3.4

9 gotas

3.5

II.

Rf

(cm)

Eluyente

0.515
6.8

0.5
0.515

Polaridad de las sustancias y de los eluyentes.

Eluyente

Distancia recorrida

Rf

(cm)

Soluciones

Eluyente
2

Metanol

4.4

4.9

5.3

0.8202

0.9245

Hexano

5.7

Acetato de etilo

1.6

3.9

6.6

0.242

0.591

III.

Distancia recorrida (cm)

Eluyente

Sustancia
4

Acetato de etilo

Pureza de las sustancias.

Rf

Eluyente

4.1

4.1

1.0

6.8

0.60

IV.

Criterio parcial de identificacin.

5
0.60

0.15

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Eluyente

Distancia recorrida (cm)

Soluciones
Paracetamol

Acetato de etilo

2.2

Syncol
2.2

Rf

Eluyente
0.2

Paracetamol
5.0

0.44

Syncol
0.44

0.04

Nota: Observar en el anexo los dibujos de las cromatoplacas a tamao natural.

Datos tericos.

Solucin 1: Benzoina al 3% en acetona.

Solucin 2: Cafena al 1% en acetona.

Solucin 3: Benzoina al 1% en acetona.

Solucin 4: Benzoina al 1% en acetona.

Solucin 5: Benzoina al 1% en acetona + cafena al 1% en acetona

Syncol: Paracetamol 500mg/ pamabrom 25mg/ prilamina 15mg.

Cuestionario.

1. Cmo se elige el eluyente en cromatografa en capa fina?

Lo ms recomendable es iniciar la elucin con un disolvente no polar; eluyendo
posteriormente, con disolventes de mediana polaridad, hasta finalizar con los de mayor

polaridad, separando al inicio, los compuestos menos polares de la mezcla a separar y terminar
con los compuestos ms polares.
Influyen varios factores:

Precio.

Pureza.

Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores).

2. Por qu se dice que la cromatografa en capa fina es un criterio parcial y no total de

identificacin?

Porque lo nico que identifica es un aproximado de la cantidad de compuestos presentes en la

solucin, no proporciona informacin respecto a cuantos compuestos estn presentes en cada

mancha que separa y tampoco que compuesto sea cada una, adems de siempre necesitar un
estndar.

3. Cul ser el resultado de los siguientes errores en cromatografa en capa fina?

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I.

Aplicacin de la disolucin muy concentrada. Observar una mancha demasiado muy

II.

Utilizar eluyente de alta polaridad. La mancha de elucin podra desplazarse

prolongada dificultando la medicin de Rf

demasiado, casi hasta alcanzar la marca de eluyente, no observar adecuadamente la

III.

distancia entre ambos y claramente un Rf mayor a 0.5.

Emplear gran cantidad de eluyente en la cmara de cromatografa. El eluyente subir

de ms por la fase slida

4. El valor del Rf depende del eluyente utilizado?

Depende de la polaridad
5. Qu significa que una sustancia tenga:
I.

Rf <0.5: el eluyente es de muy baja polaridad para la separacin.

III.

Rf >0.5: el eluyente es de muy alta polaridad para la separacin.

II.

Rf=0.5: el eluyente es el ideal para la separacin

Anlisis.
I.

Efecto de la concentracin.

Eluyente afect de igual forma a las tres muestras, a pesar de que cada muestra posea
concentraciones diferentes, esto porque el eluyente afecta debido a la polaridad de la sustancia

y no a la cantidad de ella, a parte que siempre va a existir un exceso de eluyente dentro de la

cmara de cromatografa lo que garantiza que pueda absorber y correr a toda la sustancia; el
Rf no se vio afectado por este hecho. El Rf promedio fue de 0.5.
II.

Polaridad de las sustancias y de los eluyentes.

Los eluyentes se pueden ordenar en orden creciente segn qu tan polares sean de la
siguiente manera:

Hexano < acetato de etilo < metanol

Las fuerzas intermoleculares que presenta el hexano son muy dbiles como para afectar a la
muestra y poder disolverla, es por eso que no corre. El metanol, es un compuesto con
interacciones intermoleculares fuertes, puentes de hidrogeno y momentos dipolares, por eso es

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muy polar y al interaccionar con la muestra la puede disolver y al ir subiendo por capilaridad
ya lleva consigo la muestra.

El acetato de etilo posee una polaridad media, ya que su momento dipolar es menor, en
comparacin con el del etanol, aparte que casi no forma puentes de hidrgeno, por eso la
fuerza de arrastre fue media, pero no por eso significa que sea el menos eficiente en la prueba.
Entre ms prximo est el Rf a 0.5 ms eficiente ser el eluyente, es por eso que el metanol no

puede ser el eluyente adecuado, ya que al correr demasiado puede evitar una separacin
adecuada de los componentes en la muestra.

El peso molecular tambin es un factor determinante en el orden de elucin, un compuesto no

polar de alto peso molecular se desplaza ms lento que un compuesto no polar de bajo peso
molecular.

Hidrocarburos <Olefinas< steres < Halogenuros de alquilo < Aromticos<Cetonas < Aldehdos
<steres <Alcoholes<Aminas<cidos y bases fuertes.
La elucin ocurre ms rpido con disolventes no polares, esto porque las fuerzas

intermoleculares son similares lo que facilita una nueva interaccin (que solubilice), si la
elucin es lenta, necesita un disolvente polar, indicando que el compuesto es ms polar, como el
caso de la benzona y cafena (Fig. 1),

lo que hace necesario un eluyente con fuerzas

intermoleculares similares para lograr que estos se disuelvan.

Se observa que la polaridad de la benzona es muy baja porque corri muy poco en presencia
de la acetona, teniendo un Rf de 0.15 en promedio, pero tampoco es una sustancia apolar ya

que el hexano no la afect; para obtener un Rf cercano a 0.5 sera necesario hacer una

combinacin de eluyentes, por ejemplo metanol y acetato de etilo y hacer la prueba para ver si
es la combinacin adecuada.

Benzona. Presenta un pequeo

momento dipolar en el grupo cetona

y el grupo hidroxi, esto a causa de la
diferencia de electronegatividades
entre el O y el C.

Fig. 1

Cafena. La polaridad de esta

molcula es muy alta, por la

presencia de varios tomos de N y de

O, originando una distribucin

electrnica ms pronunciada del lado

de estos tomos,

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III.

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Pureza de las sustancias.

Se observa que la muestra 5 es una mezcla de al menos dos sustancias, cada una con una
polaridad diferente, as cada uno de los componentes corri distancias diferentes; al observar

la misma distancia recorrida por la sustancia 4 y uno de los componentes de la 5, la sustancia

pura es la muestra 4 y la impura es la muestra 5, la ltima conteniendo cafena, la mancha que
est por debajo con Rf=0.15 .
IV.

Criterio parcial de identificacin.

Se observa que la muestra de paracetamol (parmetro de comparacin), comparada con la

muestra de syncol, las manchas corrieron la misma distancia, con un Rf= 0.44, el eluyente los
afect del mismo modo, tambin se observa que en la muestra de syncol se formaron dos

manchas, una con menor distancia recorrida, esto hace evidente que la muestra de syncol es

una mezcla de mnimo dos componentes (las dos manchas observadas), basndonos en la
informacin terica se puede saber que la segunda mancha no es una sola sustancia, sino que
es una mezcla de pamabrom y prilamina.

El criterio de identificacin es algo muy parcial, porque para poder identificar una muestra fue
necesario tener otra que tuviera a la sustancia pura a identificar para poder hacer una
comparacin,

Con este procedimiento solo se separa la mezcla en varios componentes pero no se garantiza
que cada mancha separada sea un compuesto, no proporciona informacin si es una mezcla o
una sustancia pura.

En todos los casos que se us acetato de etilo se obtuvo un Rf cercano a 0.5 lo que indica que
este es un eluyente ideal para estas sustancias.

Conclusiones
(Clave 10)

La cromatografa en capa fina es una tcnica rpida de separacin de mezclas, que ayuda a
determinar un aproximado de componentes presentes.

En esta tcnica existen dos fases, una estacionaria y otra mvil, la primera es una parte slida
por dnde el compuesto transitar y la segunda es la que arrastrar dicho compuesto.

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La cromatografa en capa fina se basa en la solubilidad de la mezcla con el eluyente, as que

para que la muestra pueda correr es necesario que sea soluble en el eluyente, si esto pasa
implica que las interacciones intermoleculares de ambas sustancias son parecidas.

Es necesario hacer varias pruebas con diferentes eluyentes para determinar cul es el ms

apropiado. En este caso el ms apropiado para la benzona fue el acetato de etilo, lo que indica
que la polaridad de estas sustancias es parecida.

La cafena es una sustancia ms polar que la benzona, por eso en presencia el eluyente

(acetato de etilo) no corri mucho. Para obtener un Rf mejor en esta sustancia sera necesario
hacer una prueba con una mezcla de acetato de etilo y metanol, ya que el metanol por s solo
corri demasiado.

La cromatografa en capa fina es un criterio parcial de identificacin de sustancias, solo ayuda

a dar un aproximado de componentes en la muestra a analizar, esto se observa en la muestra

de syncol, que en la mancha con Rf = 0.15 se sabe que contiene ms de un componente pero no
es posible ver esto en el experimento.

Para identificar un compuesto mediante esta tcnica es necesario tener un parmetro de

comparacin, es decir el componente a identificar puro.

(Clave 17)

Conoc la tcnica de cromatografa en capa fina, los factores que intervienen al realizarla y sus
caractersticas.

Observe la relacin de la polaridad de las sustancias analizadas as como la de los eluyentes

utilizados.

Aplique la tcnica de cromatografa en capa fina para identificar la pureza de una muestra de
Syncol.

Entend que para realizar una cromatografa en capa fina se debe analizar las interacciones de
fuerza intermolecular de la sustancia a separar, el eluyente y el adsorbente.

Un compuesto no polar de alto peso molecular se desplaza ms lento que un compuesto no

polar de bajo peso molecular.

Bibliografa

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Prctica 6: Cromatografa en capa fina.

vila Zrraga Jos Gustavo, Garca Manrique Consuelo, Gaviln Garca Irma Cruz, Qumica
Orgnica Experimentos con un enfoque ecolgico, Direccin General de Publicaciones y
Fomento Editorial, UNAM, Mxico 2001.

Lamarque Alicia, Zygadlo Julio, Fundamentos terico-prcticos de Qumica Orgnica,

Encuentro grupo Editor, Argentina, 2008.