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    Turbidimetria y Nefelometria

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    Victor Manuel Ramirez
    La turbidimetría y nefelometría se utilizan para medir partículas en suspensión mediante el uso de un turbidímetro u nefelómetro. La turbidimetría mide la intensidad de un haz disminuido, mientras que la nefelometría mide la radiación dispersada. Estos métodos se aplican comúnmente en inmunoprecipitación, inmunodifusión radial e inmunodifusión doble. La elección entre turbidimetría y nefelometría depende de factores como la intensidad y tamaño de las

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    Turbidimetria y Nefelometria

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    La turbidimetría y nefelometría se utilizan para medir partículas en suspensión mediante el uso de un turbidímetro u nefelómetro. La turbidimetría mide la intensidad de un haz disminuido, mientras que la nefelometría mide la radiación dispersada. Estos métodos se aplican comúnmente en inmunoprecipitación, inmunodifusión radial e inmunodifusión doble. La elección entre turbidimetría y nefelometría depende de factores como la intensidad y tamaño de las

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    EQUIPO 12

    UNIDAD 2
    TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA
    2.2 INSTRUMENTOS
    El instrumento usado en la turbidimetra es el turbidmetro que es un fotmetro de
    filtro.
    El instrumento usado en la nefelometra, el nefelmetro
    El procedimiento de la nefelometra generalmente es emprico y slo se
    consideran
    3
    factores:
    1. La concentracin: Mayor sea el nmero de partculas, mayor es la dispersin.
    2. Tamao de la partcula: Factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla,
    concentracin
    de
    los
    reactivos
    y
    la
    fuerza
    inica.
    3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero
    si estn coloreadas, se debe escoger una porcin del espectro electromagntico
    en la que la absorcin del medio se reduzca al mnimo.
    Diferencias turbidimetria y nefelometra
    La nefelometra se basa en la medicin de radiacin dispersa, en cambio la
    turbidimetra en la medicin de la intensidad de un haz disminuido.
    2.3 APLICACIONES

    INMUNOPRECIPITACION

    La inmunoprecipitacion cuantificada por turbidimetria o nefelometra se emplea


    hoy en los laboratorios de autoinmunidad para determinar el factor reumtide.
    Tanto en los reactivos como en el suelo puedes exitir partculas que produzcan
    una dispersin de luz no deseada.
    Ejemplo: lipoprotenas, quilomicrones. Tambin puede interferir la suciedad.

    INMUNODIFUSION RADIAL

    En este caso se aade un antisuero especfico a la agarosa que, a su vez, se


    vierte sobre las placas. Se forma pozos en el gel y se colocan en ellos estndares
    de protenas y problemas (antgenos). El antgeno difunde en el gel durante varias
    horas y va reaccionando con el Ac. En la zona equivalencia se produce un anillo
    de precipitacin.

    INMUNODIFUSION DOBLE O TECNICA DE OUCHTERLONY

    Se forman pozos en el gel de agarosa, generalmente en patrn de roseta. Se


    depositan antisueros especficos en los pozos centrales y los estndares de
    protenas y los problemas en los pozos circundantes. Al difundir las muestras en el
    gel, donde el anticuerpo y el antgeno alcanzan la equivalencia, se forman bandas
    de precipitacin insolubles.
    La posicin y forma de la banda se determinan segn la concentracin del
    antgeno y del anticuerpo, y sus tamaos. La distancia de las bandas con respecto
    al anticuerpo es directamente proporcional a la cantidad de antgeno presente.
    2.4 ANALISIS DE PROCESOS
    Factores para la eleccin entre turbidimetra y nefelometra:

    - Intensidad de la radiacin transmitida o dispersada con la intensidad de la


    radiacin procedente de la fuente.
    La mejor eleccin cuando la muestra contiene pocas partculas
    dispersantes es la nefelometra. La turbidimetra es buena cuando las muestras
    contienen grandes concentraciones de partculas dispersantes.
    - Tamao de las partculas dispersantes. En la nefelometra la intensidad de
    la radiacin dispersada a 90 es mayor si las partculas son bastante pequeas
    para que se produzca una dispersin Rayleigh. Si las partculas son mayores la
    intensidad de la dispersin disminuir.
    En turbidimetra la seal consiste en la disminucin relativa de la radiacin
    transmitida, por lo que el tamao de las partculas dispersantes es menos
    importante.

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