Informes de laboratorio de Analtica II

Departamento de Qumica - Universidad de crdoba

Practica N 6

30/11/2016

DETERMINACION DE LA CONCENTRANCION DE HIERRO EN UNA MUESTRA

LIQUIDA MEDIANTE LA TECNICA DE ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION
ATOMICA
Gerson Jos Vlez peinado
Mauricio Javier Bolao Bautista
Hernderson Oviedo Vargas
Facultad de Ciencias Bsicas.
Programa: Qumica.
Docente: Edineldo Lans Ceballos

Abstract
In the following report we will show how to determine the concentration of iron in a sample through
the technique of atomic absorption spectroscopy. The present procedure can be applied for the
calibration, of other metals also in the determined experimental conditions, of Atomic Absorption
Spectrophotometers (with their corresponding instrumental instruments: hydride generators,
automatic injectors), so much that they verify the atomization by the action of a flame through a
chamber of graphite. This calibration, by a team that is composed of a complex instrumental system
and because it is a spectrophotometric technique, is carried out by interpolation on the corresponding
regression line. On the other hand, it must be taken into account that, in order to apply the
corresponding calibration for the development of the analytical determination of an element, it must
carry out an analogous treatment of the patterns and samples and, in addition, Chemical natures of
their matrices.

INTRODUCCIN

una llama, donde es disociado de sus enlaces

qumicos y, por ganancia de electrones, se sita
en un estado atmico base neutra no excitada
ni ionizada. La sensibilidad de los mtodos
atmicos est dentro de los lmites de partes por
milln a partes por mil millones, partes por billn
(ppb). Las ventajas adicionales de estos
mtodos
son
rapidez,
conveniencia,
selectividad inusualmente elevada y costos

Espectroscopia de Absorcin Atmica: Esta

tcnica est basada en el fenmeno de
absorcin de la luz de determinadas longitudes
de onda por parte de tomos vaporizados en
estado de reposo. Las bandas de absorcin son
muy estrechas, por lo cual el espectro total de
absorcin de un tomo se define como espectro
de lneas. El elemento en estudio es situado en
1

moderados
de
los
instrumentos.
La
determinacin espectroscpica de especies
atmicas slo se puede llevar a cabo dentro de
un medio gaseoso, en el cual los tomos
individuales estn separados unos de los otros.
Consecuentemente, el primer paso en todos los
procedimientos
espectroscpicos
es
la
atomizacin, un proceso en el cual la muestra
es volatilizado y descompuesto para producir un
gas atmico. La eficiencia y reproducibilidad del
paso de atomizacin determina en gran parte la
sensibilidad, precisin y exactitud del mtodo,
es decir, la atomizacin es, con mucho, el paso
ms importante en la espectroscopia atmica.

transductor y pasa a un amplificador y por ltimo

a un sistema de lectura.
Instrumentacin:

Tcnica de espectroscopia de absorcin

atmica (EAA).

La tcnica de absorcin atmica en flama en

una forma concisa consta de lo siguiente: la
muestra en forma lquida es aspirada a travs
de un tubo capilar y conducida a un nebulizador
donde sta se desintegra y forma un roco o
pequeas gotas de lquido. Las gotas formadas
son conducidas a una flama, donde se produce
una serie de eventos que originan la formacin
de
tomos.
Estos
tomos
absorben
cualitativamente la radiacin emitida por la
lmpara y la cantidad de radiacin absorbida
est en funcin de su concentracin.

La seal de la lmpara una vez que pasa por la

flama llega a un monocromador, que tiene como
finalidad el discriminar todas las seales que
acompaan la lnea de inters. Esta seal de
radiacin electromagntica llega a un detector o
2

Una fuente de radiacin que emita una

lnea especfica correspondiente a la
necesaria para efectuar una transicin en
los tomos del elemento analizado.
Un nebulizador, que, por aspiracin de la
muestra lquida, forme pequeas gotas
para una atomizacin ms eficiente.
Un Quemador, en el cual por efecto de la
temperatura alcanzada en la combustin y
por la reaccin de combustin misma, se
favorezca la formacin de tomos a partir
de los componentes en solucin.
Un sistema ptico que separe la radiacin
de longitud de onda de inters, de todas las
dems radiaciones que entran ha dicho
sistema.
Un detector o transductor, que sea capaz
de transformar, en relacin proporcional,
las seales de intensidad de radiacin
electromagntica, en seales elctricas o
de intensidad de corriente.
Un amplificador o sistema electrnico, que
como su nombre lo indica amplifica la seal
elctrica producida, para que en el
siguiente paso pueda ser procesada con
circuitos y sistemas electrnicos comunes.
Por ltimo, se requiere de un sistema de
lectura en el cual la seal de intensidad de
corriente, sea convertida a una seal que el
operario pueda interpretar (ejemplo:
transmitancia o absorbancia). Este sistema
de lectura, puede ser una escala de aguja,
una escala de dgitos, un graficador, una
serie de datos que pueden ser procesados
a su vez por una computadora, etc.

Fuente de radiacin: La fuente es muy

Atomizadores de llama: Para conseguir

diferente a las utilizadas en espectroscopia

molecular, las bandas son lo suficientemente
anchas para permitir el uso de una fuente
continua y un monocromador. La lnea de
absorcin atmica en una llama u horno es ms
angosta que la banda. En los instrumentos de
absorcin atmica se utilizan dos tipos de
lmpara: lmparas de ctodo hueco y lmparas
de descarga sin electrodos.

que los tomos absorban radiacin hay que

obtener una poblacin de estos al estado basal
a partir de la solucin de una muestra, cuya
absorbancia est relacionada en forma sencilla
con la concentracin del analito en la solucin
esto se puede lograr con una llama.
Propiedades de la llama. Cuando una muestra
nebulizada se lleva al interior de una llama, el
disolvente se evapora en la zona de combustin
primaria de la llama, la cual est localizada
justamente arriba de la punta del quemador.
Las partculas slidas finamente divididas
resultantes son llevadas a una regin en el
centro de la llama, denominada regin
interzonal. Aqu, en la parte ms caliente de la
llama, se forman los tomos gaseosos y los
iones elementales a partir de las partculas
slidas. En esta regin tambin se lleva a cabo
la excitacin del espectro atmico de emisin.
Finalmente, los tomos y los iones son llevados
al borde exterior, o a la zona de combustin
secundaria, en donde la oxidacin se puede
presentar antes de que los productos de la
atomizacin se dispersen en la atmsfera.

Lmparas de descarga sin electrodo: En

los comercios es posible conseguir
lmparas de descarga sin electrodo para
diversos elementos. Sin embargo, su
desempeo aparentemente no es tan
confiable como el de la lmpara de
ctodo hueco.

Lmparas de ctodo hueco: la fuente de

radiacin ms til para la espectroscopia
de absorcin atmica es la lmpara de
ctodo hueco, que se muestra en la
figura 3. Consiste en un nodo de
tungsteno y un ctodo cilndrico sellado
en un tubo de vidrio que contiene un gas
inerte, por ejemplo, argn, a presin de 1
a 5 torr. El ctodo es fabricado con el
metal del analito o puede servir como
soporte para un recubrimiento de ese
metal.

Monocromador: Los de uso ms frecuente

en absorcin atmica son los prismas y
rendijas.

Instrumento de lectura: Puede ser un

galvanmetro sencillo, un voltmetro digital, un
potencimetro registrador, una computadora
con salida digital del amplificador. Un
instrumento de absorcin atmica contiene los
mismos componentes bsicos que un
instrumento diseado para las mediciones de
absorcin molecular: una fuente, un contenedor
de la muestra, un selector de longitud de onda
y un detector/sistema para la lectura. Algunos
fabricantes ofrecen instrumentos tanto de
simple haz como de doble haz.

Quemador de flujo laminar o de pre mezcla:

la muestra es nebulizada por el flujo de
oxidante, una vez pasado el extremo del capilar.
El aerosol resultante se mezcla con el
combustible y pasa a travs de una serie de
deflectores, que eliminan las gotas que no sean
muy finas. Debido a estos deflectores la mayor
parte de la muestra se rene en el fondo de la
cmara de mezcla, de donde se enva a un
recolector de deshechos. El aerosol, el oxidante
y el combustible, se queman en la ranura de un
quemador, que produce una llama que
generalmente tiene 5 10 cm de longitud. Los
quemadores de flujo laminar producen una
llama relativamente estable y un recorrido
mayor, lo cual aumentan la sensibilidad.
Adems, la obstruccin rara vez constituye un
problema.

Instrumento de EAA utilizado en la

experimentacin:

Thermo S Series AA Spectrometer

Mtodo del estndar externo o calibracin
sencilla:
La calibracin se consigue al obtener la seal
de respuesta (absorbancia, altura del pico, rea
del pico) en funcin de la concentracin
conocida del analito. Una curva de calibracin
se prepara con una grfica de los datos o
ajustndoles
una
ecuacin
matemtica
aceptable, como la ecuacin de la recta dada
por la pendiente y la ordenada al origen que se

usa en el mtodo de los mnimos cuadrados

lineales.

En los casos en que los datos no se ajustan a

un modelo lineal, entonces se puede recurrir a
los mtodos de regresin no lineal. Algunos de
stos utilizan modelos polinomiales o
procedimientos de regresin mltiple.

El paso siguiente es la etapa de prediccin, en

la que se obtiene la seal de respuesta para la
muestra y se usa para predecirla concentracin
desconocida del analito, Cx, a partir de la curva
de calibracin o de la ecuacin de mejor ajuste.
La concentracin del analito en la muestra
original se calcula luego mediante Cx aplicando
los factores de dilucin convenientes tomados
de los pasos que se siguieron para preparar la
muestra.

Para la construccin del modelo de regresin se

utiliz el software Microsoft Office: Excel
2013.

El anlisis de regresin proporciona los medios

para obtener en forma objetiva dicha recta, y
tambin para especificar la incertidumbre
asociada con el uso posterior. Esta
incertidumbre se relaciona con los residuos que
se muestran en la figura anterior, los cuales son
una medida de qu tan lejos de la recta de mejor
ajuste quedan los datos.
La relacin matemtica que representa esta
suposicin se llama modelo de regresin, y se
podra representar con

Materiales
4 matraces aforados de 25 ml.

y = mx + b
1 matraz aforado de 250 ml.
Donde b es la ordenada al origen o interseccin
con el eje y, es decir, el valor de y cuando x es
cero, y m es la pendiente de la recta

1 matraz aforado de 50 mL
2 pipetas transfer de 1000 l y 100 l

Para
determinar
una
concentracin
desconocida cx a partir de la recta de mnimos
cuadrados, se obtiene el valor de la respuesta
del instrumento yc para la incgnita, y la
pendiente y la ordenada al origen se usan para
calcular la concentracin desconocida cx como
se muestra en la siguiente ecuacin:
Cx =

Solucin patrn de 100 mg Fe/L

PROCEDIMIENTO
Se prepar una solucin de hierro a 100 ppm,
de esta solucin patrn se tomaron ciertas
cantidadaes para preparar 4 estndares de
hierro de 25 mL y obtener los estndares a 0.1,
1, 2 y 3 ppm respectivamente.

yx b
m

Se prepar agua acidulada, es decir, una

solucin de HNO3 al 0,15%

Anlisis de Fe
ID Muestra
mg/L
Blanco 1
0
Blanco 2
0
Estndar 1
0,1
Estndar 2
1
Estndar 3
2
Estndar 4
3
Muestra N2
X

Para preparar la digestin

se tom un
Erlenmeyer en el cual se agregaron 5 mL de
HNO3 concentrado y un mililitro de H2O2 y se
agit, luego se realiz un calentamiento por un
tiempo aproximado de dos horas a una
temperatura aproximadamente de 95C hasta
que qued una pequea cantidad que se estima
fue de 5 mL la cual se dej enfriar. El producto
de la digestin se transfiri a un matraz de 50
mL al cual se le complet su volumen con agua
acidulada.

Despus de realizar las correciones de

absorbancia las cuales fueron realizadas a
partir de la resta del blanco a todas las
absorbancias de los estndares nos queda.

ANLISIS Y RESULTADOS
Parmetros del Anlisis de Hierro (Fe)

Anlisis de Fe
ID Muestra
mg/L
Blanco 1
0
Blanco 2
0
Estndar 1
0,1
Estndar 2
1
Estndar 3
2
Estndar 4
3
Muestra N2
X

Para la determinacin de hierro por el mtodo

de llama por absorcin atmica se adoptaron
parmetros instrumentales, los cuales ayudan a
eliminar posibles interferencias para una normal
medicin del analito de inters. Estos
parmetros son los siguientes:
Longitud de Onda ():
nm
Ancho de Banda:
Tipo de Llama:

Abs
0,001
0,007
0,01
0,051
0,071
0,098
0,020

248.2

Abs
0,001
0,007
0,008
0,051
0,064
0,091
0,020

Hierro

0,2

De acuerdo a los datos de absorbancia medidos

a una longitud de onda de = 248,2nm, se
reportan en la tabla los datos de absorbancia
corregidos, la curva de calibracin se muestra
en la figura 1.

Aire/Acetileno

Curva de calibracin de estndar de

absorcin atmica
Una vez realizados los estndares requeridos
de la manera que se indica en el procedimiento,
el equipo de absorcin atmica S Series AA
Spectrometer mostro los siguientes resultados
despus de hacer realizar las grficas
pertinentes.
6

Figura 1. Curva de calibracin para anlisis

de Hierro
Anlisis de Fe
ID Muestra
mg/L
Blanco 1
0
Blanco 2
0
Estndar 1
0,1
Estndar 3
2
Estndar 4
3
Muestra N2
X

CURVA DE CALIBRADO DE
ESTANDARES DE HIERRO
0,1
0,09
0,08
0,07
0,06
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
0

y = 0,0269x + 0,0125
R = 0,9453

Abs
0,001
0,007
0,008
0,064
0,091
0,013

CURVA DE CALIBRADO DE
ESTANDARES DE HIERRO
(CORREGIDA)
0

0,1
0,09
0,08
0,07
0,06
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
0

Esta es una curva de calibracin representativa

de mltiples ensayos realizados para
determinar ste, como rango de trabajo nico.
Con el fin de obtener siempre la linealidad de la
curva
de
calibracin
se
optimizacin
parmetros del espectrofotmetro como son la
altura del quemador y el flujo de gas para
obtener una sensibilidad mayor en el mtodo
as:

y = 0,0287x + 0,0055
R = 0,9995

Determinacin de la concentracin de
la muestra problema.

Altura del quemador:

9,4 mm

Flujo de gas:

0,9 L/min

Ecuacin 1. Concentracin de Hierro

Para dar como aceptada una curva de

calibracin el ajuste lineal de la misma no debe
ser inferir a 0,9950 con lo que se est
garantizando una adecuada correlacin entre
patrones que componen la curva y asegurando
como cuantificacin correcta al momento de
leer cualquier muestra.

A partir de la ecuacin de la grafica se tiene

que y = 0,0287x + 0,0055
Donde Y es la absorbancia de la mustra, la
cual es de 0,020. Despejando X tenemos que:
=

De la Figura 1 se puede observar que existe un

valor que no da un carcter lineal, el cual se
pudo eliminar, ya que era un valor sospechoso
y se pudo ignorar, de esto nos queda que:

0,020 0,0055
0,0287

= 0,02613 /

Ecuacin 5. Sensibilidad del mtodo

Anlisis Estadstico
Error de estimacin del mtodo de curva de
calibrado:

Suma

x
0,1
2
3
5,1

x2
0,01
4
9
13,01

y
0,008
0,064
0,091
0,163

y2
0,0001
0,005041
0,009604
0,012441

xy
0,001
0,142
0,294
0,4018

Y2 b Ym XY
n2

m:

Pendiente de la curva de calibracin

0,0044

S = 0,0317 = 0,1533 mg Fe/L

Entonces:

Este valor correspondera al factor de respuesta

del instrumento en funcin de la concentracin.
Lmite de Deteccin Instrumental: La
definicin cuantitativa ms aceptada para el
lmite de deteccin es la mnima concentracin
o la mnima masa de analito que se puede
detectar para un nivel de confianza dado. Este
lmite depende de la relacin entre la magnitud
de la seal analtica y el valor de las
fluctuaciones estadsticas de la seal del
blanco.

= 0,001302

Ecuacin 3. Desviacin estndar de la

pendiente (m) en el modelo de regresin:
:
n

Sm = Sy,x n X2 ( X)2 = 0,0006252

Tabla 2. Datos para el lmite de deteccin

Ecuacin 4. Desviacin estndar del

intercepto (b) en el modelo de regresin:
:

Blanco
1
2
Promedio
D.
Estndar

X2

Sb = Sy n X2( X)2 = 0,04231

Sensibilidad:
La
sensibilidad
de
la
espectrometra de absorcin atmica de llama
se define como la concentracin de metal que
produce una absorcin de 1% (una absorbancia
de aproximadamente 0,0044)

Abs del Blanco

0,001
0,007
0,004
0,00424264

Para determinar el lmite de deteccin se

emplean las siguientes formulas

Para determinar la sensibilidad se utiliza la

siguiente ecuacin:
=

Sensibilidad.

0,0044: es la mnima seal que produce un 1%

de concentracin del analito

Ecuacin 2. Desviacin estndar de Y y X en

el modelo de regresin: , :
Sy,x =

S:

Sm = Sbl + kSbl
Ecuacin 6. Mnima seal distinguible

Cm =

Sm Spromedio(bl)
m

Ecuacin 7. Lmite de deteccin

Conclusin

Donde:

A travs de los mtodos usados podemos decir

que se lleg al objetivo de cuantificar el Fe
presente en la muestra de estudio. La tcnica
de EAA proporciono resultados exactos en la
cuantificacin de hierro obtenindose un factor
de correlacin aceptable de 0,9995 se infiere
que para poder validar el mtodo analtico
mediante EAA es necesario mejorar la forma en
que se emplea el mtodo, de manera que se
debe minimizar al mximo los errores humanos,
como posible error la preparacin de
soluciones, efectos de matriz (en caso de ser
matrices complejas), lavado de recipientes,
entre otros factores.

Sm : Mnima seal distinguible.

Sbl : Seal promedio del blanco
K: Constante de nivel de confianza igual a 3
sbl : Desviacin estndar de las mediciones
del blanco
m: Pendiente de la curva
Cm: Limite de deteccin
Entonces:
Sm = 0,004 + 3(0,00424264) = 0,0167279 UA

. Bibliografa

0,0167279 0,004
Cm =
= 0,4434 mg Fe/L
0,0287

Para el lmite de deteccin instrumental se

obtuvo una concentracin de 0,4434 mg Fe/L,
lo que corresponde a la cantidad de analito que
da una respuesta significativamente diferente al
blanco o al ruido de una solucin que no
contiene el analito.

Se tabulan todos los parmetros estadsticos

obtenidos para simplificar el anlisis:
PARAMETRO
Desviacin estndar de Y y X
Desviacin estndar de la
pendiente
Desviacin estndar del
intercepto

00,001302
0,0006252
0,04231
0,1533 mg Fe
/L

Sensibilidad
Lmite de Deteccin Instrumental
0,4434 mg/L
(L.D.I)

Principios de anlisis instrumental. Skoog

Holler 6Ed Espectroscopia de Absorcin
Atmica Pag 260-268
Validacin de la metodologa por el mtodo
estndar 3111 Absorcin Atmica para
el anlisis de metales pesados en muestras
de aguas y aguas residuales Escuela
tecnolgica de qumica
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstrea
m/11059/3141/1/5430858G633.pdf