Identificacion de Protozoos
Identificacion de Protozoos
Identificacion de Protozoos
Miraflores, Lima
Patobiologia Acuatica
Ing. Cesar Pea Dominguez
Escuela Profesional de Ingeniera en Acuicultura
Moscoso Yocelin, Rondn Deysi & Tovalino Evelyn
2017
Resumen
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Introduccin
Segn Sanchez (2000), el reino Protista se establece como una unidad en 1993, y se
reconoce la existencia de ancestros, anteriores al desarrollo definitivo de los eucariotas,
ya que en la descripcin de los protozoos, como animales primarios dentro de los
eucariotas, realizada por Golfuss en 1818, y la de Hogg en 1860, quien describe el reino
Primigenium formado por protoctistas (animales primarios), no se realizaban tales
consideraciones.
Los eucariotes dieron lugar a los miembros de Archezoa y Protozoa. En relacin con los
primeros, tanto los metamonadas (Giardia spp), como los microsporidios (Nosema sp),
son los organismos unicelulares ms antiguos, anteriores a la incorporacin de los
simbiontes, hace 1100 millones de aos y adems tienen mecanismos propios para la
vida parsita. Estos organismos fueron clasificados dentro de Protozoa durante muchos
aos, pero en la actualidad ya no se ubican en ese Reino (Sanchez 2000).
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el cono sur americano adems de otras especies que parasitan a los mamferos
domsticos y silvestres principalmente de frica, aunque algunas son cosmopolitas
(Gajadhar 199, Maslov 1996).
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Objetivos
Objetivo general
Mtodo
mbito espacial y temporal
Este trabajo se realiz los das 04, 11, 18 y 25 de Setiembre del presente ao, en el
laboratorio de Bioquimica de la Facultad de Oceanografa, Pesquera, Ciencias
Alimentarias y Acuicultura, ubicado en Roma 350, distrito de Miraflores - Lima.
Mtodo de muestreo
La presente investigacin es de tipo observacional y descriptivo, y fue desarrollada en
tres fases: fase de campo, fase de laboratorio, fase de anlisis.
- FASE DE CAMPO
En esta fase se incluye la obtencin de la muestra con el cual se trabajo, Poecilia sp.
(Guppy). La recoleccin de la muestra se llev a cabo en el Parque de la Exposicion,
ubicado en el Distrito de Lima, Av. 28 de Julio, Cercado de Lima 15046.
Para la toma de muestras de agua se efectu en dos zonas: superficial y media, mediante
el mtodo de recoleccin directa (obtencin de la muestra directamente introduciendo
un poco la mano debidamente protegida para obtener la muestra sin ser agitada).
- FASE DE LABORATORIO
- FASE DE ANALISIS
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Materiales
Microscopio
Estereoscopio
Campana UV
Mechero
Rtulador
Bolsas ziploc
Caja de cubre - portaobjetos.
Cmara digital.
Agua Destilada
Guantes Quirrgicos
Tapabocas
Goteros
Bistur
Solucin de Ag NO3 al 2%
Procedimiento
A. Recoleccin de las Muestras
1. Ubicacin del rea determinada para el muestreo.
2. Procurar condiciones de mxima esterilidad.
3. Tomar las muestras necesarias de la especie seleccionada.
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B. Identificacion de protozoos
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C. Fijacion de la muestra
1. Secar la muestra al aire libre
2. Impregnar la muestra con nitrato de plata por 10 minutos.
3. Lavar previamente la muestra con agua destilada.
4. Exponer a rayos UV por 20 minutos
5. Lavar nuevamente en agua destilada.
6. Dejar secar
7. Rotular el portaobjeto
8. Observar al microcopio.
Figura 5. Reposar 10
min figura 6. Lavar
con agua destilada
Figura 7. Muestra en
UV figura 8.
Enjuagar la muestra
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Resultados
Se logr identificar los individuos presentes en la muestras a partir de sus caractersticas
morfofisiolgicas, mediante la ayuda del Atlas de Microorganismos de Agua Dulce.
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En la tabla 1 se muestran las cantidades de protozoos observados en la especie Poecilia
sp.
Tabla 1. Cantidad de Chilodonella
ESTADSTICA CANTIDAD DE
PARASITARIA Chilodonella
PREVALENCIA 80%
INTENSIDAD 3, 8, 5, 7
ABUNDANCIA 3, 8, 0, 5, 7
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4. Chilodonela unciata. De forma ovada, con pico- dbilmente sobresaliente, curvado
hacia la izquierda. Aplanada por el lado ventral (base deslizante) y solo aqu ciliada.
Protuberancias del lado dorsal sin cilios, muy aplanadas hacia el borde del cuerpo, por
lo que el animal parece rodeado por un reborde translucido. Se alimenta de diatomeas y
algas verdes. T 50 -90 um. H Aguas estancadas
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Los microorganismos de agua dulce presentan una amplia diversidad a nivel de
morfologa, estructuras internas y externas, sustrato y condiciones ecolgicas. Muchas
de estas estructuras fueron observadas a nivel microscpico durante el desarrollo y
elaboracin de la investigacin, constituyendo una base fundamental para la
identificacin y clasificacin taxonmica de los individuos
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Discusiones
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estanques. En lo que se refiere a las tallas de los hospederos, Kazubski y Migala
(1974) encontraron que Chilodonella spp. tiene diferentes afinidades hacia sus
hospederos dependiendo de la edad de los mismos: los ms jvenes son los ms
susceptibles a la infeccin. En nuestra investigacin corroboramos dicha afirmacin:
los menores de un ao fueron los ms parasitados, y aunque ambas tallas de cras
albergaron al ciliado, hubo una predileccin por las de 10 cm. Esto probablemente
se deba a que estuvieron en contacto con los hospederos ms tiempo y a que la
superficie para colonizar es mayor. Por otra parte, la diferencia en nmero de
ciliados instalados en la piel y en las branquias fue mnima, aunque existe cierta
preferencia que nos permite afirmar que el hbitat especfico es la piel. Grupcheva
(1987) incluye a los ciliados asociados a dos o ms localizaciones, pero con
preferencia por alguna de ellas, dentro del rubro de especies euritpicas, como es el
caso de Ch. uncinata. Este trabajo es el segundo en donde se aprecian aspectos
patognicos de esta especie. Se detectaron sntomas como anorexia, nerviosismo,
movimientos operculares rpidos y, a nivel branquial, un color rojo obscuro y gran
cantidad de mucus, cuando la intensidad promedio fluctu entre 23 y 50 parsitos
por pez. Tambin se observ a los ciliados alimentndose directamente de las
clulas epiteliales; esto es posible porque morfolgicamente estn bien adaptados
con una faringe que posee un cirtos rgido con el que ocasiona dao directo al
hospedero. Se reconoce de manera general que Chilodonella spp. es capaz de
ocasionar daos a los peces, que se traducen en hiperplasia branquial, edema,
necrosis e hipoxaemia, la cual en ocasiones provoca la muerte (Langdon, Gudkovs,
Humphrey y Saxon, 1985; Hoffman, Kazubski, Mitchell y Smith, 1979;
Schaperclaus, 1992). CONCLUSIONES Durante el perodo invernal las cras de
Cyprinus carpio rubrofruscus son ms susceptibles a la infeccin por Ch. uncinata.
Las cras de 10 cm albergan un mayor nmero de parsitos, en comparacin con las
ms pequeas (5 cm). La piel ofrece un sustrato ms apropiado para el desarrollo
de Ch. uncinata. No existen quistes de este ciliado para la propagacin de la
infeccin, sta se produce exclusivamente a base de trofozotos.
Conclusiones
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Referencias bibliogrficas
Cavalier-Smith T. The Protozoan phylum Opalozoa. J Euk Microbiol 1993;40(5):609-
615.
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rRNAs implications for the evolution of parasistism in the trypanosomatid protozoa.
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based on rRNA genes 1995; Proceedings of the National Academy of Sciences of the
United States of America. 92(13):5793-5797.
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Ellender BR y Weyl OLF (2014). Una revisin de los conocimientos actuales, los
riesgos y los impactos ecolgicos.
Heinz Streble / Dieter Krauter 1987 Atlas de los Microorganismos de Agua Dulce.
Ediciones Omega, S. A. barcelona pag 240 241
Lom J y Dykova I (1992). Protozoarios parsitos de peces (Elsevier) Amsterdam,
Londres, Nueva York,
Tokio
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Chilodonellasis
Es causante de la enfermedad denominada opacidad de la piel. Etiologa
El agente causal es la Chilodonella sp., que es un protozoo ciliado.
Ciclo de vida
El cuerpo del animal afectado puede presentar una purulencia que asemeja papel de lija,
pero MANUAL BSICO DE SANIDAD PISCICOLA 26 que con el transcurso del
tiempo comienza la piel a desprenderse. Tambin suele atacar las branquias,
presentando en dicho caso cuadros bastantes crticos, pues adems de frotarse contra el
fondo y superficie duros, se presentan problemas respiratorios boqueo en superficie.
Los peces presentan movimientos lentos, y se separan de los cardmenes.
Tratamiento
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Se puede realizar con baos (inmersiones) en agua con sal comn en una proporcin de
1 % (1g por cada litro de agua) durante 10 minutos, con repeticiones durante las
siguientes semanas hasta que se observe una mejora.
http://www.fao.org/3/a-as830s.pdf
Chilodoneliasis:
El protozoario causante de esta enfermedad es el Chilodonella cyprini que:
Afecta principalmente a truchas jvenes.
Los peces que son ms susceptibles al ataque de este parsito son aquellos que
presentan desnutricin.
Sntomas:
Como esta es una enfermedad que se presenta en invierno, se recomienda que todos los
peces reciban un bao de 5 minutos en una solucin de sal al 5%. Para el tratamiento se
recomienda la aplicacin de sal en concentraciones de apenas 0.15 a 0.2% durante dos
das. Tambin se recomienda la desecacin y desinfeccin con cal viva, que ayuda a
eliminar los protozoarios enquistados que quedan en el fondo de los estanques.
(Manual de buenas prcticas SANIPES)
Resumen
Este trabajo se ha realizado con peces ornamentales que se han popularizado como
mascotas, generando una demanda y por lo tanto deben importarse. Poecilia reticulata
"guppy , es un pez muy popular en el mbito acuarstico, hoy en da se ha logrado
desarrollar una gran cantidad de variedades segn su coloracin, tipo y forma de cola.
Son peces vivparos que toleran un mbito extremo de temperatura, siendo la ms
adecuada entre 25C y 28C. Analizando la muestra se encontr a la Chilodonella sp que
es un protozoo que se encontraba en la piel y en las escamas de la Poecilia reticulata,
estos estn sometidos debido al estrs de los peces , pueden ocasionar una disminucin
en su respuesta inmunolgica, lo que les hace ms susceptible a las enfermedades, por
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este motivo una principal recomendacin es mejorar y mantener un balance adecuado
entre la calidad del agua y las densidades para dicha especie. En este informe se puede
observar los procedimientos adecuados que se han realizado para poder encontrar el
protozoo en los guppys.
Palabras claves Poecilia reticulata, Chilodonella sp, peces ornamentales,
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Marco terico
Son organismos unicelulares eucariotas, cuyas clulas realizan todas las funciones
vitales. Su nutricin es mayoritariamente hetertrofa. Aqu se agrupan protozoos cuya
clula presenta cilios, fundamentales en la locomocin y captura de alimentos. Su
hbitat fundamental es el agua libre, desplazndose y alimentndose de las bacterias
dispersas en el medio. Protozoo ciliado, incluido en el grupo de los Gymnostmidos,
que se alimenta de bacterias y se desarrolla en medios con cierta carga de materia
orgnica. Un pariente cercano del ms conocido Ichthyophthirius multifiliis es
Chilodonella sp. causante de la turbidez u opacidad de la piel, la cual comienza -por lo
general- radicada entre la cabeza y el comienzo de la aleta dorsal. La piel afectada
puede presentar una purulencia que asemeja papel de lija, pero que con el transcurso del
tiempo comienza a desprenderse en jirones. Antes de eso casi seguramente ya habr
atacado las branquias y los peces presentarn un cuadro bastante crtico, ya que adems
de rascarse contra el fondo o superficies duras, comenzarn a respirar agitadamente. La
natacin suele ser lenta y fatigosa.
Este parsito, como la mayora, pocas veces es observado en peces de acuario cuyo
ambiente es adecuado y cuyos habitantes estn bien alimentados. Por otro lado dadas
sus dificultades para movilizarse, slo se transmitir la enfermedad de un pez a otro si
se encuentra muy superpoblado el recipiente, razn por la cual se debe respetar la regla
de utilizar no menos de 5 litro de agua por pez. Con peces bien alimentados, en un
ambiente limpio y espacio suficiente, es muy difcil que Chilodonella sp. tenga
oportunidad de prosperar. Las bajas temperaturas facilitan su actividad, en particular
cuando los peces son tropicales y se debilitan por esa causa.
Ciclo de vida
El cuerpo del animal afectado puede presentar una purulencia que asemeja papel de lija,
pero que con el transcurso del tiempo comienza la piel a desprenderse. Tambin suele
atacar las branquias, presentando en dicho caso cuadros bastantes crticos, pues adems
de frotarse contra el fondo y superficie duros, se presentan problemas respiratorios
boqueo en superficie. Los peces presentan movimientos lentos, y se separan de los
cardmenes.
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Pequeos puntos blancos sobre las aletas Manchas Aletas
Tratamiento
Se puede realizar una alternativa menos estresante, consiste en un bao con una
solucin salina al 1% durante 10 - 15 minutos, pasando entonces los peces a un tanque
con agua limpia, preferentemente a una temperatura de unos 28 - 30 C en el caso de
especies tropicales con repeticiones durante las siguientes semanas hasta que se observe
una mejora.
Si no remite, se pueden usar tratamientos especficos antiparasitarios.
Para evitar reinfecciones, conviene sacar todos los peces del acuario infectado y dejar
dicho tanque sin peces a 30C durante 5 das, al cabo de los cuales, los parsitos habrn
muerto en su totalidad. Dr. Edgar Daniel Balbuena Rivarola, Consultor Nacional,
Oficial Principal de Acuicultura y Pesca para Amrica Latina y el Caribe, FAO.
Figura 1 Chilodonella sp
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Figura 2 Chilodonella sp con un aumento de 400X
Referencias bibliogrficas
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