CARRERA:

ESPECIALIZACIÓN EN
BACTERIOLOGÍA CLÍNICA

Dra. Sara E. Satorres

MÓDULO 1- 1- TEMAS:
Aspectos clínicos generales de las enfermedades
infecciosas.
Conceptos de infección.
Tipos de infección.
Mecanismo de transmisión de la infección.
Diagnóstico etiológico de las enfermedades infecciosas
Diagnóstico microbiológico/Papel del Microbiólogo.
Toma de muestra.
Identificación microbiana:
Métodos microscópicos.
Métodos de examen y tinciones.
Métodos basados en pruebas bioquímicas.
Diagnóstico serológico.
ASPECTOS CLÍNICOS GENERALES
DE LAS ENFERMEDADES
INFECCIOSAS
 DIFERENTES CONCEPTOS
Enfermedad Infecciosa
Infecciosa: conjunto de alteraciones morfofuncionales
y productivas causadas por la presencia y multiplicación del
microorganismo en los tejidos del hospedador y por la reacción en
contra de éste, bajo ciertas condiciones ambientales. Un elemento
distinguible de otras enfermedades es la transmisibilidad.
Infección (del latín infecere: poner dentro): penetración, fijación y
multiplicación de un microorganismo patógeno en un organismo
superior.
La infectividad de un microorganismo: capacidad que posee para
adaptarse a vivir dentro del hospedador.
Patogenicidad: capacidad del microorganismo
Patogenicidad: de producir
enfermedad en el organismo infectado.
Virulencia: es un término cuantitativo que indica el grado de
Virulencia:
patogenicidad..
 TIPOS DE INFECCIÓN

Por su origen:
Infección endógena: microorganismo presente en la
microbiota del hombre
enfermedad

aumento de la virulencia disminución de defensas

Infección exógena
exógena:: penetración del agente infeccioso desde
el exterior (fuente externa).
Por su etiología:
Infecciones puras Infecciones mixtas

Concomitantes Consecutivas

Por su localización:
Infecciones locales
locales:: afectan a un determinado tejido,
órgano o sistema.
Infecciones generalizadas o sistémicas
sistémicas:: afecta a
numerosos órganos y tejidos.
Por su evolución y curso:
Sobreagudas, agudas y subagudas
subagudas:: período de incubación corto.
Crónicas: largo período de incubación.

Por su clínica:
Infecciones clínicas
clínicas:: producen síntomas y lesiones evidentes.
Típicas Atípicas

Infecciones subclínicas
subclínicas:: existiendo alteraciones funcionales o
anatómicas, son tan leves que a veces no son reconocidas.
Infecciones inaparentes
inaparentes:: sin alteraciones funcionales y
morfológicas apreciables. Signos y síntomas clínicos no
perceptibles.
Infecciones latentes
latentes:: no existen síntomas ni lesiones (portador).
Por su pronóstico: letalidad, probable curso y resultado de
la enfermedad:
leves, graves, reservadas y mortales.

Por su presentación:

Esporádica: el número de enfermos es reducido.

Esporádica
Endémica: el número de casos es el esperado y se
Endémica:
presentan de una forma constante en el tiempo.
Epidémica: aparece un número de casos mayor al
Epidémica:
esperado. Cuando alcanza una amplia distribución
geográfica se denomina pandemia
pandemia.
 MECANISMOS DE TRANSMISIÓN DE LA INFECCIÓN

 Vertical: el agente infeccioso se transmite de la madre al

hijo.

Congénita: por infección del embrión o feto

En el útero (in útero) En el momento del parto

Lactancia
 Horizontal: (contagio de individuos que coexisten en el
tiempo).

Directa: contacto físico con el hospedador infectado o con

Directa:
las excreciones/secreciones emitidas por él (aerosoles,
semen, orina, heces). Requiere un contacto estrecho
entre individuos. Este contagio puede ser por vía oral,
respiratoria, genital, cutánea o conjuntival.

Indirecta: implica una separación en el espacio y en el

Indirecta:
tiempo entre la fuente de infección y el hospedador
susceptible, requiriendo la intervención de un
intermediario físico (vehículos), vivo (vector) o
inanimado.
 DIAGNÓSTICO DE LAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
 DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
Debe considerarse en el marco del proceso global de la
atención médica de las enfermedades infecciosas.

Facultativo Microbiólogo Clínico

intercomunicación

PAPEL DEL MICROBIÓLOGO

 Consultor
 Indicación de técnicas de diagnóstico fiables.
 Prevención de diseminación de infecciones.
 Colaboración en la optimización y distribución de los
recursos sanitarios.
DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Instauración rápida del tratamiento efectivo

Significativa reducción de la mortalidad y morbilidad

MICROBIOLOGÍA CLÍNICA ACTUAL Y EFICIENTE

Técnicas clásicas Nuevas tecnologías

"Nunca olvidar que el motivo principal

del quehacer diario es el paciente”.
 TOMA DE MUESTRA
Se deben seguir los siguientes principios:
 La indicación clínica

Confirmación de la existencia de una infección.

Conocimiento del microorganismo causante de la infección.
Erradicación microbiológica.
Cribado de la presencia de un microorganismo.
Conocimiento de la sensibilidad a los ATB.
Estudios epidemiológicos.
 El material debe ser representativo del lugar de
infección.
 Cantidad suficiente.
 Si la muestra proviene de un territorio normalmente
estéril, cualquier microorganismo hallado tendrá valor
diagnóstico.
 Si la muestra se toma a través de una región
normalmente colonizada por microorganismos
comensales, el objetivo será prevenir, que estos
contaminen la muestra.
 Es preferible tomar el microorganismo del margen de
la lesión (frente a la del centro)
 Siempre que sea posible es mejor tomar la muestra
por punción que por hisopado.
 Los hisopos son adecuados para muestras
orofaríngeas, vaginales y uretrales.
 En infecciones de heridas: antes de tomar la muestra
limpiar bien la zona de pus y exudado que estará
colonizada por flora saprófita que muchas veces no es
causante del proceso infeccioso.
 Elegir el momento adecuado para tomar la muestra:
• Conocer la evolución natural de la enfermedad.
• Tomar la muestra antes de iniciar el tratamiento
antibiótico.
 Serología: en general el diagnóstico indirecto para
detección de anticuerpos requiere de 2 muestras, una
tomada al principio de la enfermedad y otra a las 4
semanas para objetivar la seroconversión.

.
 TRANSPORTE
 El objetivo del transporte es mantener la muestra en
condiciones lo más parecidas posible al momento de
la toma.
 Debe ser rápido y evitar el calor y frío excesivo, los
cambios de presión y desecación.
 Los medios utilizados tienen la finalidad de ralentizar
el metabolismo de los microorganismos y permitir su
viabilidad.
 Para el transporte por correo hay que seguir la
normativa internacional específica.
 Recipientes para el transporte: cierre adecuado, puede
contener un medio de transporte (Stuart, Amies o Cary Blair).

 Para el transporte de muestras líquidas estériles (médula

ósea, sangre, líquido articular) se precisa un anticuagulante,
el mejor es polianetol sulfonato de sodio (SPS) a un
concentración máxima de 0,0025% (Neisserias y anaerobios
son sensibles a concentraciones mayores).

 Para el aislamiento de anaerobios los recipientes estériles

prereducidos son los mejores medios de transporte.

 Tomar en cuenta que los hisopos de alginato de calcio

pueden ser tóxicos para algunas bacterias, es mejor usar los
de dacrón o poliéster e introducirlos en medios de transporte
que el fabricante suele incluir.
 HOJA DE PETICIÓN
 Datos de filiación (nombre, edad o fecha de
nacimiento, número de historia clínica, servicio
habitación).
 Datos del producto patológico (tipo de producto,
localización anatómica, y/o lesión de la que proviene,
procedimiento de la toma de muestra).
 Motivo de las solicitud (diagnóstico de sepsis, IU,
control de curación).
 Enfermedades de base (diabetes, transplante, etc)
 Nombre del médico solicitante.
 Fecha y hora de la toma de muestra.
 Persona que ha realizado la extracción.
Muestra Sistema de transporte Volumen de la muestra Otras consideraciones

Sangre: cultivo Frasco de hemocultivo en Adultos: 20 ml/cultivo La piel se debe desinfectar con alcohol al 70%
bacteriano medio con nutrientes Niños: 5-10 ml/cultivo seguido de yodo al 2%; se recogen 2-3 cultivos
habitual Neonatos: 1-2 ml/cultivo durante un período de 24h a no ser que el
Sistemas automatizados paciente esté en shock séptico o se deba
comenzar con tratamiento antibiótico inmediato, la
obtención de muestras debe estar separada por
30-60 minutos.
Septicemia continuada e intermitente

Sangre: bacterias El mismo que para los El mismo que para los Las consideraciones son las mismas que para los
intracelulares hemocultivos habituales. hemocultivos habituales hemocultivos habituales. La liberación de las
(Brucella, Francisella, bacterias intracelulares puede mejorar la
género Neisseria) Sistema de lisis centrifugación recuperación del microorganismo; el género
Neisseria se inhibe por algunos anticoagulantes
(polianetol sulfonato sódico).

Sangre: género Medios adicionados de suero 1-5 ml La muestra es útil sólo durante la primera semana
Leptospira de conejo (14%v/v) de la enfermedad

Sistemas Detección del producto del metabolismo bacteriano

automatizados
Muestra Sistema de transporte Volumen de la muestra Otras consideraciones

Líquido cefalorraquídeo Tubo estéril con tapón Cultivo de bacterias: 1-5 ml Las muestras se toman en forma aséptica y
de rosca se envían inmediatamente al laboratorio. No
Cultivo de micobacterias: se deben exponer ni al calor ni a la
tanto volumen como sea
refrigeración.
posible

Otros líquidos Pequeños volúmenes: Tanto volumen como sea Las muestras se toman con aguja y jeringa.
normalmente tubos de rosca estériles. posible No se debe inyectar aire en el frasco de
estériles cultivo debido a que inhibiría el crecimiento
(peritoneal,pleural, sinovial, Grandes volúmenes: de los anaerobios.
pericárdico) frascos de hemocultivos

Catéter Tubo de rosca N/A El sitio de entrada debe ser desinfectado

con alcohol.
El catéter debe ser manipulado de un modo
aséptico. Rodar tres o cuatro veces sobre la
superficie de una placa de agar sangre.
Muestra Sistema de transporte Volumen de la muestra Otras consideraciones

Respiratorio: faringe Hisopo Dacron o de alginato N/A Se procede a un hisopado en el área de

de calcio inmerso en el inflamación, se toma el exudado si existe evitando
medio de transporte el contacto con la saliva.

Respiratorio: epiglotis Toma de sangre para El mismo que para los La toma de muestras de la epiglotis puede
hemocultivos hemocultivos precipitar el cierre completo de la vía aérea.

Respiratorio: senos Tubo anaerobio estéril 1-5 ml Las muestras se deben tomar con aguja y jeringa,
paranasales el cultivo de la nasofaringe y de la orofaringe no
tiene valor. Las muestras se deben cultivar para
bacterias aerobias y anaerobias.

Respiratorio: vías Recipiente con tapón de 1-2 ml Esputo expectorado: cepillado de dientes y
inferiores rosca estéril. gargarismos con sol. de bicarbonato de sodio
Tubo o vial anaerobio sólo saturado antes de la toma de la muestra para
para las muestras tomadas, disminuir la contaminación con flora normal de
evitando la flora del tracto boca.
respiratorio superior. Muestras de broncoscopia: los anestésicos
pueden inhibir el crecimiento bacteriano, por lo
que las muestras se deben procesar
inmediatamente.
Broncoscopio «protegido»: se pueden realizar
cultivos para anaerobios.
Aspirado pulmonar directo: las muestras se
pueden procesar para cultivo de bacterias
aerobias y anaerobias
Muestra Sistema de transporte Volumen de la muestra Otras consideraciones

Oído Jeringa con tapón, sin aguja. El volumen que se tome Las muestras se deben aspirar con una aguja y una
tubos estériles con tapón de jeringa.El cultivo del oído externo no tiene
rosca valor predictivo para la otitis media.

Ojo Inoculación de las placas de El volumen que se tome Para las infecciones de la superficie del ojo, las
cultivo a la cabecera del muestras se recogen con un hisopo o un legrado
enfermo (sellar y transportar al corneal. Para las infecciones profundas, se
laboratorio inmediatamente). realiza la aspiración del humor vítreo o acuoso.
Sembrar en un medio adecuado en forma inmediata,
el retraso provocará pérdida significativa de
microorganismos.

Exudados Aspirado en tubos estériles Bacterias: 1-5 ml Se debe evitar la contaminación con materiales de
(trasudados, con tapón de rosca. Micobacterias: 3-5 ml la superficie. Las muestras son generalmente
drenajes, úlceras) Hisopo inmerso en el medio inadecuadas para el cultivo de anaerobios.
de transporte.

Heridas (heridas Aspirado en tubos estériles 1-5 ml de pus Las muestras se deben obtener con aguja y jeringa
abiertas, abscesos) con tapón de rosca o en un estériles. Tomar muestras en la base de la herida.
tubo o vial estéril para Evitar las muestras obtenidas con hisopo.
anaerobios.

Tejidos Tubos estériles con tapón de Muestra representativa Se debe tomar una cantidad suficiente de tejido que
rosca. Un tubo o vial estéril del centro y del borde de permita recuperar pequeñas cantidades de
para anaerobios la lesión microorganismos. Añadir SF estéril.
Muestra Sistema de transporte Volumen de la muestra Otras consideraciones

Orina: porción Envase de orina estéril Bacterias: 10 ml Evitar la contaminación de la muestra con bacterias de uretra o
media de la Micobacterias: >10 ml vagina. Los microorganismos pueden crecer muy rápidamente
micción en la orina, por lo que las muestras se deben transportar
inmediatamente al laboratorio, y refrigerarse si no se procesa
inmediatamente.

Orina: cateterizada Envase de orina estéril Bacterias: 10 ml La cateterización no se recomienda para los cultivos habituales
Micobacterias: >10 ml (riesgo de inducir infección). Desinfectar la zona perineal,
introducir la sonda por la uretra y tomar la porción media del
chorro de orina que sale por la sonda.

Orina: punción Tubo o vial estéril para Bacterias: 10 ml Es una muestra invasiva. Método válido para cultivos de
suprapúbica anaerobios Micobacterias: >10 ml anaerobios. Neonatos graves, pacientes cuyos urocultivos
previos presenten resultados conflictivos, sospecha de
microorganismos de difícil desarrollo.

Heces Recipiente estéril con N/A Es necesario el transporte rápido al laboratorio para evitar la
tapón de rosca producción de ácido por las bacterias fecales normales
(bactericida para algunos patógenos entéricos).
Debido a que se inoculará un gran número de medios diferentes,
no se debe usar el hisopo para la toma de muestras.
 Genitales Consideraciones

Niñas premenárquicas y Muestra del tercio exterior de vagina con un hisopo humedecido en
Infecciones mujeres vírgenes solución fisiológica estéril.
cervicovaginales

En mujeres con actividad Fondo de saco vaginal: 3 hisopos

sexual (48 hs de abstinencia Endocervix: hisopos con solución fisiológica estéril e hisopo en
sexual): espéculo estéril medio de transporte adecuado.

Secreción uretral 72 hs de abstinencia sexual Hisopo uretral embebido en solución fisiológica estéril.
y retención urinaria mínima Escasa muestra: primer chorro miccional.
de 3 horas

Ulceras genitales Limpiar la superficie de la lesión con SF, luego raspar suavemente
la lesión con una gasa seca hasta que fluya el líquido seroso.

Otros sistemas de transporte: Hisopos especialmente diseñados

para sondas de Neisseria gonorrhoeae y Chlamydia trachomatis..
IDENTIFICACIÓN MICROBIANA

MÉTODOS MICROSCÓPICOS
En general, la microscopía se utiliza en microbiología con dos
propósitos básicos:
 Detección inicial de microorganismos.
 Detección preliminar o definitiva de los mismos.

MICROSCOPÍA DE CAMPO BRILLANTE (LUZ)

Se visualiza por transiluminación dejando pasar la luz a través del
condensador hacia la muestra.

MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO

Se incluye un condensador especial que impide que la luz
transmitida ilumine directamente la muestra. Mayor poder de
resolución.

MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASE

Se crea una imagen tridimensional del microorganismo o la muestra
que permite un análisis más detallado de las estructuras internas.
MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA
Los fluorocromos pueden absorber la luz ultravioleta de
longitud de onda más corta y emitir energía a una mayor
longitud de onda visible. La imagen observada es el resultado
de la radiación electromagnética emitida por las moléculas
que han absorbido la excitación primaria y remitido una luz
con mayor longitud de onda.

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Espirales magnéticos dirigen un haz de electrones desde un
filamento de tungsteno a través de una muestra y hacia una
pantalla. Normalmente, las muestras están teñidas o
recubiertas de iones metálicos con el fin de crear contraste.
MÉTODOS DE EXAMEN Y TINCIONES
Método de tinción Principio y aplicaciones

Examen directo

Examen en fresco Preparación no teñida, examinada con microscopía de campo brillante,

de campo oscuro o de contraste de fase.

KOH al 10% Se usa para disolver el material proteico y facilitar la detección de

elementos fúngicos que no son afectados por soluciones alcalinas
fuertes.

Tinta china Se añade tinta china como material de contraste.

Yodo de Lugol Se agrega para reforzar el contraste de las estructuras internas

(muestras parasitológicas).
Tinciones diferenciales

Tinción de Gram
Constituye el criterio básico para separar los grandes grupos
de bacterias : grampositivas y gramnegativas

Tinción de hematoxilina
férrica Detección e identificación de protozoos fecales

Tinción de impregnación Detección espiroquetas ( especies de Borrelia, Leptospira,

argéntica Treponema)

Tinción de azul O de Es una alternativa a la hematoxilina férrica para la tinción de

toluidina protozoos.

Tinción de Wright-Giemsa Se utiliza para detectar parásitos sanguíneos, cuerpos de

inclusión de virus y clamidias, y especies de Toxoplasma,
Pneumocystis, Borrelia y Rickettsia.
Tinciones acidorresistentes
Se utiliza para teñir micobacterias, así como otros
Tinción de Ziehl-Neelsen
microorganismos acidorresistentes. La captación de la
carbolfucsina requiere el calentamiento de la muestra
(tinción acidorresistente en caliente). Los
microorganismos se ven rojos sobre un fondo azul claro.

Tinción de Kinyoun Tinción acidorresistente en frío.

Fluorocromos no específicos se unen a los ácidos

Tinción auramina- rodamina micólicos y forman complejos estables resistentes a la
decoloración con alcohol ácido. Los microorganismos
tienen una fluorescencia verde amarillenta sobre un
fondo negro.

Tinción acidorresistente
modificada Se usa un agente decolorante débil. Microorganismos
parcialmente acidorresistentes: Nocardia, Rhodococcus,
Tsukamurella, Gordonia.
 El pigmento se intercala en el ácido nucleico (nativo y
Tinciones fluorescentes desnaturalizado). Para detectar bacterias en baja
concentración (103-104UFC/ml) en frotis preparados de
Tinción naranja de acridina líquido y exudados.
Con pH ácido= 4, las bacterias y los hongos se mantienen
de color naranja rojizo, pero el material de fondo se tiñe
de amarillo verdoso

Se acoplan anticuerpos (monoclonales o policlonales)

Tinción directa con anticuerpos con moléculas fluorescentes. La unión específica a un
fluorescentes microorganismo es detectada por la presencia de
fluorescencia microbiana. Esta técnica ha demostrado
ser útil para detectar o identificar muchos
microorganismos (Streptococcus pyogenes, Bordetella,
Francisella, Legionella, Chlamydia entre otros).
MÉTODOS BASADOS EN PRUEBAS BIOQUÍMICAS
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
 PRUEBAS BIOQUÍMICAS
El microorganismo es capaz de:
 Fermentar azúcares, degradar compuestos, crecer a
una determinada temperatura o en presencia de
inhibidores.

 Presentar o no una determinada actividad

enzimática, grupo de enzimas o determinada vía
metabólica.

 Producir compuestos coloreados, etc.

 Importante:
 Trabajar con un cultivo fresco (18-24h de incubación)
en un medio en que el microorganismo se desarrolle
en forma óptima, a pH, fuerza iónica, atmósfera y
temperatura adecuados.

 Llevar a cabo los correspondientes controles de

calidad, sembrando una cepa positiva y otra negativa
para la prueba bioquímica a realizar.
CLASIFICACIÓN DE PRUEBAS PARA IDENTIFICACIÓN BACTERIANA

 Enzimas vinculadas con la respiración.

Oxidasa, catalasa

 Descomposición de azúcares simples, ácidos

orgánicos y otros.

 Requerimientos de oxígeno.
OF (oxidación-fermentación).
Crecimiento en caldo tioglicolato.
Producción de ácido, o ácido y gas.
Fermentación de carbohidratos.
 Detección de enzimas y vías metabólicas
RM-VP (rojo de metilo - Voges Proskauer).
Gluconato
O.N.P.G. (orto nitro ß-D-galactopiranósico).
Esculina
Hipurato

 Fuente única de carbono

citrato
malonato
 Utilización de compuestos nitrogenados.
Reducción de nitrato: asimilación, oxidación.

 Descomposición de carbohidratos, aminoácidos y otros.

Indol, H2S, fenilalanina , lisina, arginina, ornitina, urea.

 Ensayos combinados
TSI, LIA, Bilis esculina.
 Detección de exoenzimas

Lecitinasa, proteasas, coagulasa, amilasas, celulasas

desoxirribonucleasas.
 Acción de microorganismos sobre la sangre
(hemolisinas)

 misceláneos
KCN
Bilis
Producción de pigmentos

 Test de crecimiento o inhibición

Temperatura
NaCl
Antibióticos
 Sistemas comerciales manuales o
galerías multipruebas
 Sistemas miniaturizados que permiten realizar
simultáneamente entre 10 y 50 pruebas bioquímicas.
Elaborados principalmente para bacterias de importancia
médica.

 Celdillas con sustrato liofilizado se inoculan individualmente

con suspensión bacteriana pura.

 Los resultados de las pruebas se expresan de forma numérica

(se agrupan de tres en tres, y el resultado de cada trío queda
reducido a un dígito).
 Sistemas comerciales más comunes:
BBL, ENTEROTUBE II (Becton Dickinson). Identificación de enterobacterias.

OXI/FERM TUBE II (Becton Dickinson).Bacilos Gram negativos aerobio

/anaerobios facultativos, oxidasa (+).

API (BioMérieux). Bacilos Gram negativos (enterobacterias y

no enterobacterias), Neisseria spp, Haemophilus spp, cocos gram positivos.

VITEK (BioMérieux).

Oxoid Biochemical Identification System (O.B.I.S.) (Oxoid): Listeria spp.

Otros: RapID systems y MicroID (Remel), Biochemical ID systems (Microgen).

BBL Enterotube II es un tubo de plástico con compartimientos,
formado por 12 medios de cultivo diferentes, que permiten la
determinación de 15 reacciones bioquímicas.
Inoculación con suspensión de una sola colonia, utilizando una
aguja de inoculación .
La combinación de reacciones resultante, junto con la guía de
interpretación (libro de códigos), permite la identificación de
Enterobacterias con importancia clínica.
Prueba Reacción / Enzimas Negativo Positivo

Glucose fermentación de glucosa rojo (a naranja) amarillo (a dorado)

sin desprendimiento Con desprendimiento
Gas producción de gas en la fermentación de la glucosa
de cera de cera
Lysine lisina descarboxilasa amarillo morado
Ornithine ornitina descarboxilasa amarillo morado
de beige a ámbar
H2S producción de H2S negro
claro
Indole producción de indol incoloro rojo o rosa

Adonitol producción de adonitol rojo (a naranja) amarillo (a dorado)

Lactose fermentación/oxidación de lactosa rojo (a naranja) amarillo (a dorado)
Arabinose fermentación/oxidación de arabinosa rojo (a naranja) amarillo (a dorado)
Sorbitol fermentación/oxidación de sorbitol rojo (a naranja) amarillo (a dorado)
de incoloro a ámbar
VP producción de acetoína (Voges-Proskauer) rojo
claro
Dulcitol utilización del dulcitol verde amarillo (a dorado)
cualquier tono de
PA fenilalanina descarboxilasa de negro a gris oscuro
verde
de incoloro a ámbar
Urea ureasa de rosa claro a rosa
claro
Citrate utilización del citrato verde azul
 1. Después de 18-24 h de incubación,
efectuar la interpretación de todas las
reacciones, comparando los colores de los
medios en el tubo con aquellos que se
suministran en el esquema de colores.

2. Indicar cada resultado de prueba positivo

marcando con un círculo el número que
aparece debajo del compartimiento
apropiado en el bloc de resultados.

3. Sumar todos números marcados con un

círculo en la sección entre corchetes e
ingresar la suma en el espacio suministrado
debajo de las flechas.

4. Buscar el número de cinco dígitos (código

numérico) en la guía de interpretación
y utilizar la base de datos.
 Sistemas comerciales
automatizados

 La identificación de las bacterias se basa en la

inoculación de una suspensión de microorganismos
en tarjetas con determinados paneles de reacciones
bioquímicas. La sensibilidad antimicrobiana se lleva a
cabo en forma similar a través de tarjetas que
contienen diluciones estandarizadas de distintos
antibióticos correspondientes a los puntos de corte
de sensibilidad establecidos por CLSI.
 En general los instrumentos están basados en un
principio de fotometría-fluorometría.
 Inoculación, incubación y lectura se efectúan de modo
automatizado.

 Los datos obtenidos se incorporan en un ordenador, el cual

proporciona con un índice alto de fiabilidad la
identificación del microorganismo.

 Paneles (tarjetas) comerciales disponibles en el mercado:

MicroScan, Vitek, Pasco, Wider, Phoenix, etc.
 VITEK®

 Tarjetas GNI para bacilos gram-negativos y GPI para cocos

gram-positivos. Para estudios de sensibilidad tarjetas GNS
113 y GPS 102 para bacilos gram-negativos y cocos gram-
positivos, respectivamente.

 Paneles cromogénicos: para identificación de levaduras,

anaerobios y microorganismos difíciles (Neisseria,
Haemophilus, Gardnerella, Moraxella) .
 La ventaja más notable de estos sistemas en relación
a los métodos convencionales es la rapidez con que
se obtienen los resultados:
5h vs 48h en la identificación bacteriana
8h vs 24h en la sensibilidad antimicrobiana

La adecuada combinación del método

convencional manual y estos sistemas aumenta
considerablemente la eficiencia de los
diagnósticos microbiológicos.
• Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. Elsevier
Mosby. 7aed. 2014.
• Mandell G, Douglas R, Bennett J. Enfermedades infecciosas.
Principios y prácticas. Editorial Médica Panamericana. 8a
edición.2015. Tomos I y II
• Madigan M. T, Martinko J.M, Dunlap P.V, Clark D.P. Brook, Biología
de los microorganismos. 12º ed. Pearson Educación S.A, 2009.
• Vargas, LJ, Vila, A , Lanza, A, Bonvehi P, Nazar, J, Mikietuk, A, Labat,
R, Smayevsky, J.Utilidad del sistema VITEK en la identificación
bacteriana y estudios de sensibilidad antimicrobiana. Acta Bioquím
Clín Latinoam 2005; 39 (1): 19-25.
• Identificación de Enterobacteriaceae mediante, BBL Enterotube
II.2011. http://fundacion.usat.es/metodos rápidos.