Resultados

Aminoácido “A”

pH inicial: 8,57
Los miliequivalentes (mEq) de NaOH agregados:
mEq = N x V (ml)

mEq=0,5x0,5=0,25
mEq=0,5x1=0,5

Tabla 1. Valores obtenidos al titular el Aminoácido “A” con NaOH 0,5 N

N° Valores (ml) pH Valores (mEq)

1 0 1,65 0
2 0,5 1,67 0,25
3 1,0 1,74 0,5
4 1,5 1,82 0,75
5 2,0 1,99 1
6 2,5 2,46 1,25
7 3,0 5,47 1,5
8 3,5 6,30 1,75
9 4,0 8 2
10 4,5 8,91 2,25
11 5,0 9,24 2,5
12 5,5 9,47 2,75
13 6,0 9,63 3
14 6,5 9,75 3,25
15 7,0 9,88 3,5
16 7,5 10 3,75
17 8,0 10,12 4
18 8,5 10,23 4,25
19 9,0 10,35 4,5
20 9,5 10,46 4,75
21 10,0 10,56 5
22 10,5 10,66 5,25
 23 11,0 10,74 5,5
24 11,5 10,80 5,75
25 12,0 10,90 6
26 12,5 -- --
27 13,0 10,95 6,5
28 14,0 11,02 7
29 15,0 11,06 7,5
30 16,0 11,10 8
31 17,0 11,12 8,5
32 18,0 11,16 9
33 19,0 11,18 9,5
34 20,0 11,20 10
35 21,0 11,22 10,5
36 22,0 11,23 11
37 23,0 11,25 11,5
38 24,0 11,26 12
39 25,0 11,27 12,5
40 28,0 11,29 14
41 30,0 11,30 15
42 32,0 11,31 16
43 34,0 11,32 17
44 36,0 11,33 18
45 38,0 11,34 19
46 40,0 11,35 20
47 42,0 11,35 21

Fuente: Datos obtenidos en la realización de la práctica n°1 en el laboratorio

de bioquímica. Fecha: 06/02/2019
Se identificaron tres zonas de amortiguación en la gráfica de titulación, luego se
comprobaron los valores de pKa, pKb y pKr de cada zona, dando como resultado:
pKa = 1,74 + 2,46 = 2,1
2
pKb = 8,91 + 10,90 = 9,90
2
pKr = 11,10 + 11,27 = 11,18
2
Se analizó la gráfica y se compararon con los valores de la tabla de
aminoácidos de la guía de laboratorio de bioquímica y se pudo comprobar que el
aminoácido “A” se trata de la Arginina.
Disociación:
COOH COO- COO- COO-
NH3+ C H NH3+ C H NH2 C H NH2 C H
CH2 pKa=2,1 CH2 pKb=9,90 CH2 pKr= 11,18 CH2
CH2 CH2 CH2 CH2
CH2 CH2 CH2 CH2
NH NH NH NH
C NH2+ C NH2+ C NH2+ C NH
NH2 NH2 NH2 NH2
Carga = +2 Carga = +1 Carga = 0 Carga = -1
Zwitterion

La Arginina es un aminoácido básico por lo tanto se usó la siguiente fórmula

para calcular el punto isoeléctrico:
 pI = pKb + pKr
2
pI = 9,90 + 11,27 = 10,54
2

Aminoácido 2
Se determinó los miliequivalentes (mEq) de NaOH agregados con la siguiente
fórmula:
mEq = N x V (ml)
N=M/(n°de OH)= 0,1/1=1
mEq=0,1x0,5=0,05
mEq=0,1x1=0,1

Tabla 2. Titulación de aminoácido 2 (0,05 M) con NaOH (0,1 M)

N° Volumen (ml) pH Volumen (mEq)

1 0,000 1,635 0
2 0,500 1,673 0,05
3 1,000 1,712 0,1
4 1,500 1,752 0,15
5 2,000 1,794 0,2
6 2,500 1,836 0,25
7 3,000 1,881 0,3
8 3,500 1,927 0,35
9 4,000 1,976 0,4
10 4,500 2,027 0,45
11 5,000 2,082 0,5
12 5,500 2,141 0,55
13 6,000 2,205 0,6
14 6,500 2,276 0,65
15 7,000 2,355 0,7
16 7,500 2,447 0,75
17 8,000 2,555 0,8
18 8,500 2.692 0,85
19 9,000 2,878 0,9
20 9,500 3,181 0,95
21 10,000 3,963 1
22 10,500 4,754 1,05
23 11,000 5,069 1,1
24 11,500 5,268 1,15
25 12,000 5,419 1,2
26 12,500 5,543 1,25
27 13,000 5,652 1,3
28 13,500 5,751 1,35
29 14,000 5,843 1,4
30 14,500 5,932 1,45
31 15,000 6,019 1,5
32 15,500 6,106 1,55
33 16,000 6,194 1,6
34 16,500 6,286 1,65
35 17,000 6,384 1,7
36 17,500 6,492 1,75
37 18,000 6,613 1,8
38 18,500 6,758 1,85
39 19,000 6,941 1,9
40 19,500 7,194 1,95
41 20,000 7,550 2
42 20,500 7,906 2,05
43 21,000 8,159 2,1
44 21,500 8,342 2,15
45 22,000 8,486 2,2
46 22,500 8,608 2,25
47 23,000 8,715 2,3
48 23,500 8,813 2,35
49 24,000 8,905 2,4
50 24,500 8,994 2,45
51 25,000 9,080 2,5
52 25,500 9,167 2,55
53 26,000 9,255 2,6
54 26,500 9,347 2,65
55 27,000 9,446 2,7
56 27,500 9,553 2,75
57 28,000 9,676 2,8
58 28,500 9,823 2,85
 59 29,000 10,010 2,9
60 29,500 10,279 2,95
61 30,000 10,683 3
62 30,500 11,072 3,05
63 31,000 11,313 3,1
64 31,500 11,472 3,15
65 32,000 11,588 3,2
66 32,500 11,679 3,25
67 33,000 11,752 3,3
68 33,500 11,815 3,35
69 34,000 11,868 3,4
70 34,500 11,915 3,45
71 35,000 11,956 3,5
72 35,500 11,994 3,55
73 36,000 12,027 3,6

Fuente: Datos obtenidos del Manual de Laboratorio de Bioquímica para

Medicina, Edición abril 2017, página 10

Se identificaron tres zonas de amortiguación en la gráfica de titulación, luego

se comprobaron los valores de pKa, pKb y pKr de cada zona, dando como
resultado:
pKa = 1,881 + 3,181 = 2,531
2
pKr = 4,754 + 6,758 = 5,756
2
pKb = 8,342 + 11,072 = 9,707
2
Se analizó la gráfica y se compararon con los valores de la tabla de
aminoácidos de la guía de laboratorio de bioquímica y se pudo comprobar que el
aminoácido 2 se trata del Glutamato.
 Disociación:
COOH COO- COO- COO-
NH3+ C H NH3+ C H NH3+ C H NH2 C H
CH2 pKa=2,531 CH2 pKr=5,756 CH2 pKb=9,707 CH2
CH2 CH2 CH2 CH2
COOH COOH COO- COO-
Carga = +1 Carga = 0 Carga = -1 Carga = -2
Zwitterion

El Glutamato es un aminoácido ácido, por lo tanto se usó la siguiente fórmula

para calcular el punto isoeléctrico:
pI = pKb + pKr
2
pI = 5,756 + 9,707 = 7,731

Aminoácido 3
Se determinó los miliequivalentes (mEq) de NaOH agregados con la siguiente
fórmula:
mEq = N x V (ml)
N=M/(n°de OH)= 0,1/1=1
mEq=0,1x0,5=0,05
mEq=0,1x1=0,1
Tabla 3. Titulación de aminoácido 3 (0,05 M) con NaOH (0,1 M)

N° Volumen (ml) pH Volumen (mEq)

1 0,000 1,740 0
2 0,500 1,783 0,05
3 1,000 1,827 0,1
 4 1,500 1,872 0,15
5 2,000 1,918 0,2
6 2,500 1,965 0,25
7 3,000 2,013 0,3
8 3,500 2,063 0,35
9 4,000 2,114 0,4
10 4,500 2,168 0,45
11 5,000 2,224 0,5
12 5,500 2,282 0,55
13 6,000 2,344 0,6
14 6,500 2,409 0,65
15 7,000 2,479 0,7
16 7,500 2,553 0,75
17 8,000 2,634 0,8
18 8,500 2,720 0,85
19 9,000 2,813 0,9
20 9,500 2,912 0,95
21 10,000 3,014 1
22 10,500 3,118 1,05
23 11,000 3,221 1,1
24 11,500 3,320 1,15
25 12,000 3,415 1,2
26 12,500 3,506 1,25
27 13,000 3,593 1,3
28 13,500 3,677 1,35
29 14,000 3,759 1,4
30 14,500 3,841 1,45
31 15,000 3,922 1,5
32 15,500 4,005 1,55
33 16,000 4,090 1,6
34 16,500 4,180 1,65
35 17,000 4,277 1,7
36 17,500 4,385 1,75
37 18,000 4,508 1,8
38 18,500 4,658 1,85
39 19,000 4,858 1,9
40 19,500 5,182 1,95
41 20,000 6,951 2
42 20,500 8,721 2,05
43 21,000 9,048 2,1
44 21,500 9,246 2,15
 45 22,000 9,397 2,2
46 22,500 9,522 2,25
47 23,000 9,630 2,3
48 23,500 9.729 2,35
49 24,000 9,821 2,4
50 24,500 9,908 2,45
51 25,000 9,994 2,5
52 25,500 10,079 2,55
53 26,000 10,166 2,6
54 26,500 10,255 2,65
55 27,000 10,348 2,7
56 27,500 10,449 2,75
57 28,000 10,558 2,8
58 28,500 10,680 2,85
59 29,000 10,818 2,9
60 29,500 10,972 2,95
61 30,000 11,134 3
62 30,500 11,289 3,05
63 31,000 11,424 3,1
64 31,500 11,536 3,15
65 32,000 11,629 3,2
66 32,500 11,707 3,25
67 33,000 11,773 3,3
68 33,500 11,830 3,35
69 34,000 11,880 3,4
70 34,500 11,925 3,45
71 35,000 11,964 3,5
72 35,500 12,000 3,55
73 36,000 12,033 3,6

Fuente: Datos obtenidos del Manual de Laboratorio de Bioquímica para

Medicina, Edición abril 2017, página 11.

Se identificaron tres zonas de amortiguación en la gráfica de titulación, luego

se comprobaron los valores de pKa, pKb y pKr de cada zona, dando como
resultado:
 pKa = 1,965 + 4,005 = 2,985
2
pKb = 9,046 + 10,680 = 9,863
2
Se analizó la gráfica y se compararon con los valores de la tabla de
aminoácidos de la guía de laboratorio de bioquímica y se pudo comprobar que el
aminoácido 3 se trata del Aspartato.
Disociación:
COOH COO- COO- COO-
NH3+ C H NH3+ C H NH3+ C H NH2 C H
CH2 pKa=2,39 CH2 pKr=4,136 CH2 pKb=10,09 CH2
COOH COOH COO- COO-
Carga = +1 Carga = 0 Carga = -1 Carga = -2

El Aspartato es un aminoácido ácido, por lo tanto se usó la siguiente fórmula

para calcular el punto isoeléctrico:
pI = pKb + pKr
2
pI = 10,09 + 4,136 = 7.113
2
 Discusión

El proceso de titulación de los diferentes aminoácidos problema al

agregarles una base fuerte como el hidróxido de sodio, generaba incrementos en
el pH expresados en la curva de titulación, y al determinar donde se ubicaban
teórica y gráficamente sus puntos de mayor y menor amortiguación, se logró
calcular los pK de cada aminoácido, así como el punto isoeléctrico.
Los aminoacidos tiene grupos ionizables, el grupo alfa-carboxilo y alfa-
amino, que son responsables de generar la maxima capacidad amoritiguadora de
la molecula, y sus pKa y pKb e incluso pKr si tiene una cadena lateral ionizable,
varian de acuerdo al aminoacido.Al comparar el comportamiento del aminoacido
desconocido “A”, a traves de sus graficas y pK experimetales con las datos
teoricos se determino que aminoacido especifico es, la arginina, un aminoacido
basico, diamino.
Los aminoacidos 2 y 3, glutamato y aspartato, respectivamente, son
aminoacidos acidos , dicarboxilicos, de igual manera q el aminoacido desconocido
“A” al comparar sus datos experimentales con los datos teoricos fueron
determinados.
Cada uno de estos aminoacidos tienen una importancia biologica y son
esenciales para el organismos por que no pueden ser sintetizados por el
organismo y deben ser aportados a traves de la dieta, y poseen caracteristicas
quimica particulares y funciones asociadas en el organismo que ayudan a
mantener el medio interno
La adición de la base fuerte, fue incrementando el valor del pH lentamente ,
es decir, se mantenía la capacidad amortiguadora (resistencia) que viene
representada por la región en forma de meseta que se presenta en las gráficas
cuando los cambios de pH eran grandes, la región donde la curva se desplazaba
casi verticalmente el aminoácido perdía dicha capacidad.
El experimento describe a una mayor escala el proceso de amortiguacion
dentro del cuerpo humano, y que las pequeñas variaciones pueden ocasionar
cambios brusco en el pH, sin embargo estas soluciones amortiguadoras dentro
de sus rango específicos estos cambios son minimos y resisten al cambio de pH
permitiendo al cuerpo trabajar a pH fisiologico.