Práctica Laboratorio # 5. Carbohidratos

DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Objetivos
- Determinar la presencia de azúcares reductores utilizando diferentes métodos cualitativos.
- Observar diferencias entre pentosas y hexosas, así como entre aldosas y cetosas, a través de
métodos colorimétricos.
Fundamentos
 ¿Qué son los carbohidratos?
Los carbohidratos son considerados como las biomoléculas más abundantes en la naturaleza,
como principales funciones se encuentran: ser fuente de energía y dar estructura tanto a
células como organismos. (Bender, 2016; Pratt, 2012).
En las plantas, los carbohidratos se sintetizan a partir de la fotosíntesis, mientras que en los
animales, las células pueden sintetizarlos a partir de proteínas, pero su principal fuente
proviene de los vegetales, ya sea por consumo directo o por ingesta de azúcares extraidos a
partir de estos. (Bender, 2016)
 Clasificación
Los carbohidratos se componen principalmente de carbono, hidrógeno y oxígeno en

proporciones (CH2O)n. Se clasifican dependiendo del número de monómeros que
compongan la molécula, se dividen en: monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
Los monosacáridos son los azúcares más simples, estos no se pueden hidrolizar en
carbohidratos más sencillos. Se pueden clasificar en triosas, terosas, pentosas, hexosas o
heptosas, dependiendo si tienen 3, 4, 5, 6 o 7 átomos de carbono en su estructura. De igual
forma, se pueden clasificar en cetosas o aldosas, si poseen un grupo cetona o aldehído
respectivamente. Estas clasificaciones se utilizan generalmente para su nomenclatura, un
ejemplo de esto es la glucosa, que se presenta seis átomos de carbono y contiene un greupo
aldehído, por ende, se denomina aldohexosa. (Bender, 2016; Pratt, 2012).
Los disacáridos son azúcares formados por dos monosacáridos unidos mediante un enlace
glucosídico. Dicha unión se produce a través del carbono anomérico del primer monosacárido
y el carbono (n) del segundo monosacárido. Debido que el hidroxilo anomérico puede
configurar en la forma alfa o Beta, pueden producir dos tipos de azúcar diferente. En este
caso se debe de tener en cuenta que la estructura de cada monosacárido se encuentra cíclica
lo cual es producto de la previa reacción con agua lo que produce un enlace tipo éster entre
la cetona o el aldehído con el OH del carbono previo al terminal. Un ejemplo de disacárido
es la lactosa que está formado a partir de una molécula de galactosa con una de glucosa.
Los polisacáridos, o también llamados glucanos, están formados por grandes cantidades de
monosacáridos conectados entre sí por enlaces glucosídicos. Los polisacáridos pueden
dividirse en dos: Homoglicanos, es decir que su estructura está dada por un solo tipo de
monosacárido y los Heteroglucanos que contienen dos o más tipos de monosacáridos. (Carey,
2006)
MATERIALES Y REACTIVOS
Reactivos
Glucosa
Sacarosa
Almidón
Celulosa
Fructosa
Ribosa
Maltosa
Lactosa
Etanol (revisar concentración)
Benceno (revisar
concentración)
Acetona(revisar
concentración)
NaOH(revisar concentración)
Ácido pícrico (revisar concentración)
Reactivo de Fehling A y B
Reactivo de Barfoed
Reactivo de Benedict
Reactivo de Bial
Reactivo de Seliwanoff
Material de laboratorio
Vasos de precipitado de 150
ml (8 en total)
Tubos de ensayo (14)
Pipetas de vidrio de 1 ml (1)
Pipetas pasteur (5)
Pipeteadores (1)
Espátula (1)
Pinzas (1)
Gradilla (1)
Mecheros
Trípode
Placas de calentamiento
Baño termostatado
PROCEDIMIENTO
Las pruebas fueron tomado a partir de Yañez (2006) y Universitat D’Alacant (s.f)
Para realizar las pruebas de los numerales II a V, se debe preparar soluciones de los
carbohidratos al 1% en agua destilada.
I) SOLUBILIDAD DE GLÚCIDOS
Comprueba la solubilidad de los siguiente carbohidratos: sacarosa, gluocosa, almidón y
celulosa.
Coloca 0,1 g de muestra en 10ml del solvente. Observa solubilidad a temperatura ambiente y en
caliente 8baño maría en ebullición) y consigna los datos en la siguiente tabla:
Tabla 1. Solubilidad de carbohidratos

Solvente AGUA ETANOL BENCENO
Glúcido T° amb Calor T° amb Calor T° amb Calor
Glucosa
Sacarosa
Almidón
Celulosa
II) IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES

1) PRUEBA DE FEHLING
En 5 tubos de ensayo coloca 2 ml de la solución de Fehling A y 2 ml de la solución B,
luego adiciona 3 gotas de solución de carbohidrato, de acuerdo a como se describe en la
tabla 2.
Tabla 2. Resultado para purba de Fehling

# de tubo Muestra Resultado Clasificación
1 Glucosa
2 Fructosa
3 Ribosa
4 Sacarosa
5 Almidón
Colocar los tubos en baño de maría durante 3 minutos, sacarlos y dejarlos enfriar y observar
presencia o ausencia de precipitado de color rojo.
2) PRUEBA DE BENEDICT
Se numeran 4 tubos de ensayo. Se añade a cada tubo 1 ml de: agua (ensayo blanco),
glucosa, sacarosa y almidón. Se añaden 2 ml de reactivo de Benedict a cada uno de ellos y
se mezcla bien. Se calientan en un baño maría hirviendo durante 5 minutos. Si la reacción
es positiva aparece un precipitado rojizo, verde o amarillo. Consigna los datos en la tabla 3.
Tabla 3. Resultados para prueba de Benedict
1 Agua
2 Glucosa
3 Sacarosa
4 Almidón
3) PRUEBA DE BRAFOED
Se numeran 4 tubos de ensayo. Adicionar 3 ml de reactivo de Barfoed y 1 ml de glucosa,
ribosa, maltosa y lactosa, se calientan en un baño maría hirviendo. Medir el tiempo que
tarda cada muestra en formar precipitado de color rojo. Consigna los datos en la tabla 4.
Tabla 4. Resultados para prueba de Brafoed

1 Glucosa
2 Ribosa
3 Maltosa
4 Lactosa
III) IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES EN ORINA

En un tubo de ensayo colocar 1 ml de orina normal y 1 ml de orina de diabético en otro. A los
dos tubos, adicionar 1 ml de ácido pícrico y 0,5 ml de NaOH 5%. A continuación adicionar 5
gotas de acetona al 50% y colocar los tubos a baño maría por 12 min. Observar cambio de color
de amarillo a rojo.
IV) PRUEBA DE BIAL

Tomar 3 tubos de ensayo, agregar 2 mL de glucosa al tubo 1, 2 mL de ribosa al tubo 2 y 2ml de
agua al tubo 3. Colocar 2 mL de reactivo de Bial a los tres tubos. Calentar en baño maría por 5
minutos. Observar la aparición de una coloración azul-verdosa en alguno de los tubos.
V) PRUEBA DE SELIWANOFF
Tomar 3 tubos de ensayo, agregar 2 mL de glucosa al tubo 1, 2 mL de fructosa al tubo 2 y 2ml
de agua al tubo 3. Colocar 0,5 mL de reactivo de Seliwanoff a los tres tubos. Calentar en baño
maría por 60 segundos exactos. Consignar los resultados obtenidos en cada tubo y continuar
calentando y anotando las observaciones cada minuto por un lapso de 5 minutos.
BIBLIOGRAFÍA
Bender, D. A. . autor, Botham, K. M. . autor, & Rodwell, V. W. . author. (2016). Harper.
Bioquímica ilustrada, 30e. México, D.F.: McGraw-Hill Interamericana Editores, S. A. de C. V.s.
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Carey, F. A. (2006). Química orgánica. McGraw-Hill Interamericana.
́ ica. México, D.F.: Editorial El Manual Moderno. https://search-

Pratt, Charlotte W. 2012. Bioquim
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Yáñez, Á. R. (2006). Manual de prácticas de bioquímica. Retrieved from https://ebookcentral-
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Universitat D’Alacant. (s.f.). Segunda práctica: Identificación de azúcares. Retrieved from

https://ciencias.ua.es/es/extension-universitaria/documentos/extension-universitaria/ven-a-hacer-
practicas/2017/bioquimica-identificacion-de-azucares.pdf

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Los carbohidratos se componen principalmente de carbono, hidrógeno y oxígeno en

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