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Universidad Autónoma de Nuevo León

Escuela Industrial y Preparatoria Técnica


“Álvaro Obregón”
Técnico laboratorista Industrial

Elaboración de productos químicos


PIA: RENCUENTO EN PLACA DE COLIFORMES
TATALES EN HORTALIZAS

Docente: QFB. Hugo Ramos del Ángel

Equipo:
Delgado Marín Susana Valeria 1904761
García Morales Cecilia Yareli 1913899
Martínez Uriegas Luis Gilberto 1916126
Rivera Pérez Adriana Monserrat
Rivera Quezada Joana Floresthela 1895255
Villanueva Ortiz Nitzy Gabriela 1922404

Aula: 404 Grupo: 5C

Fecha de realización: 15 de Noviembre de 2019


Fecha de entrega: 20 de noviembre de 2019
Objetivo:

El objetivo de esta práctica consta de realizar una siembra para poder


identificar el número de microorganismos coliformes totales en las hortalizas en
este caso el tomate.

Introducción:

Como todos sabemos las hortalizas son muy propensas a que se contaminen
muy fácilmente, ya sea por su medio de cultivo o así como también por su
manipulación o por medio de transporte.

Los vegetales están expuestos a los microorganismos a partir del proceso de


producción, en el entorno agrícola, y luego en la manipulación, siendo más
exactos a través del contacto con el suelo, agua de riego contaminado y animal
o personas que transporten o manipulen estos alimentos.

Entre los microorganismos patógenos presentes en frutas y hortalizas


encontramos bacterias como la Salmonella Typhi, Clostridium sp., Escherichia
coli… entre otras. Un ejemplo de bacterias desarrolladas en alimentos
consumidos crudos es la Salmonella Typhi transmitida a través de la ingesta
de agua contaminada o de alimentos que se riegan o lavan con agua infectada,
más común en países subdesarrollados pero aún así no dejamos de estar
expuestos si hay una mala higiene.

Nosotros en este práctica realizamos un recuento en placa de coliformes


totales en hortalizas.

La definición generalmente aceptada para el término “coliformes” describe a


estos microorganismos como bacilos Gram negativos, no esporulados,
aerobios o anaerobios facultativos que fermentan la lactosa con producción de
ácido y gas, aunque algunos pueden ser fermentados
Materiales y reactivos:

Descripción del medio de cultivo:

El agar EMB es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial utilizado para


el aislamiento de bacilos Gram negativos, principalmente de la familia
Enterobacteriaceae, y otros bacilos Gram negativos no exigentes. También se
le conoce con las siglas EAM, que significa eosina-azul de metileno.

Este medio fue creado por Holt-Harris y Teague en 1916. Contiene peptona,
lactosa, sacarosa, fosfato dipotásico, agar, eosina, azul de metileno y agua. Es
muy similar al agar MacConkey, sobre todo si se usa el agar EMB modificado
por Levine, que no contiene sacarosa.

MODO DE USO:

Sembrar el medio de cultivo con la muestra de ensayo por estría cruzada.


Incubar 24 – 48 h a 35ºC.

PREPARACION:

Rehidratar 36 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15


minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante
1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC ( 15 lbs
de presión) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC. Vaciar en
cajas de Petri estériles. Conservar a temperatura ambiente.
Diagrama de procesos:

Preparar Agar EMB Preparar 90 de la


Preparar 200ml de
solución de agar que
SSI
realizamos para
esterilizar

60 ml de agua y
2.3 de agar
Esterilizar el material
4 tubos, junto con 2
pipetas, 4 cajas
Poner a ebullición la Petri, un matraz, la
solución SSI, agar.

Esterilizar Preparar la
solución madre
Agregarles a los
90ml de SSI y 4 tubos 9ml de
10gr de tomate SSI

Hacer las
soluciones

Sembrar
SSI

Vaciar el agar
en las cajas
Petri

Agregar al agar un
mililitro de la solución
Poner a
a cada caja, hacer 8
solidificar en el
en la mesa para que
refrigerador
se mezcle.
Observar
Interpretación de resultados:

Conclusión:

La presencia de indicadores microbiológicos en los alimentos puede causar una contaminación


fecal directa o indirecta y por consiguiente sirve como un “marcador” de que ha ocurrido
contaminación fecal, y por lo tanto indica la presencia potencial de microorganismos
patógenos.

Algunos de los organismos indicadores que son más comúnmente usados para asegurar la
inocuidad alimentaria incluyen bacterias coliformes, E. coli, Enterococcus spp. totales y el
recuento de placas aerobias (APC) o microorganismos mesófilos aeróbicos. Los colifagos han
sido propuestos como alternativa de indicadores de contaminación con patógenos virales.

Como ya lo vimos en los resultados de esta práctica el número de microorganismos coliformes


en nuestra siembra de (-4) dio un resultado de 3 colonias formadoras, pensamos que eso se
debe a la manipulación del alimento a la hora de ser cultivado, distribuido y a como llego a
nuestras manos, si se lavo o no se lavo correctamente.
Resultados:
Los resultados se analizaron después de 48 horas de encubación
Grupo control -1 -4
En esta caja como era Tuvo un crecimiento de Tuvo un crecimiento de
de esperarse no hubo 7 colonias de alrededor 10 colonias
crecimiento de microrganismo de de microrganismos
microrganismos coliformes coliformes

Bibliografía:

1- Recuperado de https://lifeder.com>agar-emb del día 19 de noviembre del 2019 a las


8:45 p.m.
2- Recuperado de https://www.probiotek.com del día 19 de noviembre del 2019 a las
8:55 p.m.
3- Recuperado de http://www.fao.org/3/a1374s/a1374s07.pdf el día 19 de noviembre de
2019 a las 9:10 p.m.

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