Formacion de Histamina en Caballa y Jurel
Formacion de Histamina en Caballa y Jurel
Formacion de Histamina en Caballa y Jurel
INGENIERO PESQUERO
AREQUIPA – PERÚ
2016
PRESENTACIÓN
ii
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Los miembros del jurado que aprobaron por UNANIMIDAD la presente tesis, para optar
el título profesional de Ingeniero Pesquero fueron:
_______________________________
Ing. Carlos Navarro Pilares
Presidente
____________________________ ____________________________
Mg. Ana Maria Guzmán Neyra Dr. Daniel Valencia Ponze
Miembro Secretario
_______________________________
Mg. Mario Céspedes Carpio
Asesor
iii
DEDICATORIA
A:
iv
AGRADECIMIENTOS
En primer lugar a Dios, por permitirme llegar hasta donde he llegado, y por haberme
acompañado siempre, por cumplir este sueño en realidad y ser de este la alegría que llena
mi corazón, por ser mi fortaleza en los momentos de debilidad y por brindarme una vida
de aprendizajes, experiencias y sobre todo de felicidad. Gracias por dar tu vida por mí, y
gracias por aceptarme como soy, gracias por ser la niña de tus ojos y por conocer tu
camino de verdad y nunca me apartaré de ti.
A mi madre
Por todo el apoyo que me has dado, por acompañarme siempre y por creer en mí, y por
haber trabajado tanto para que no me falte nada, y en tu condición lo has dado todo por
mí, y lo lograste. Doy gracias a Dios por haberme dado una mamá luchadora y
trabajadora por sus hijos.
A mi asesor de tesis
Y una de las personas que admiro por su inteligencia, sencillez y conocimientos al Mg.
Mario Céspedes Carpio, a quien le debo el hecho de que esta tesis sea realidad.
Quienes hacen de cada momento único e inolvidable: Karol Neyra, Marianela Garambel,
Richard Febres, Jacqueline Olivos, Cesar Marquina, Daniel Arce, Rafael Turco, Alex
Paredes y mis primeros sobrinos, Arely Salazar y Ezequiel Paredes, y en especial a
Josmell Huachani por ser el regalo perfecto que Dios me puso en mi camino.
¡Gracias a todos!
v
ÍNDICE
Pág.
CAPITULO I
INTRODUCCIÓN 01
CAPITULO II
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
2.4 Alteraciones 23
vi
2.4.3.1 Método sensorial 26
A. Apariencia general 26
B. Apariencia de la superficie y de las escamas 26
C. Apariencia de los ojos 27
D. Apariencia de las branquias 27
E. Olor 27
F. Apariencia de las paredes abdominales y órganos internos 28
G. Textura y elasticidad muscular 28
2.4.3.2 Método químico 28
A. Aminas - Bases volátiles totales 29
B. Aminas biogenas 29
CAPITULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
vii
CAPITULO IV
RESULTADO Y DISCUSIÓN
4.1.Materia prima 45
4.1.1. Análisis físico organoléptico 45
4.1.2. Nivel de histamina de materia prima 47
4.1.3. Análisis microbiológico de materia prima 47
4.2.De los experimentos 49
4.2..1 Temperatura de almacenamiento 49
4.2..2 Tiempo de almacenamiento 99
4.2..3 Influencia de la carga microbiana 107
4.2..4 Forma de almacenamiento 121
CONCLUSIONES 152
RECOMENDACION 153
BIBLIOGRAFÍA 154
ANEXOS 160
viii
ÍNDICE DE CUADROS
Pág.
ix
65
Cuadro N° 18. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 12 °C.
67
Cuadro N° 19. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 12 °C.
69
Cuadro N° 20. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 12 °C.
70
Cuadro N° 21. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 08 °C.
72
Cuadro N° 22. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 08 °C.
74
Cuadro N° 23. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 08 °C
75
Cuadro N° 24. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C.
77
Cuadro N° 25. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C.
79
Cuadro N° 26. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C.
80
Cuadro N° 27. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 0 °C.
82
Cuadro N° 28. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 0 °C.
83
Cuadro N° 29. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 0 °C.
85
Cuadro N° 30. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a diferentes
temperaturas de almacenamiento.
87
Cuadro N° 31. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
diferentes temperaturas de almacenamiento.
90
Cuadro N° 32. Nivel de histamina (ppm) en la especie anchoveta a
diferentes temperaturas de almacenamiento.
92
Cuadro N° 33. Comportamiento de histamina (ppm) en las especies
caballa, jurel y anchoveta a diferentes temperaturas de almacenamiento.
x
temperatura de 4 °C.
100
Cuadro N° 35. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C.
101
Cuadro N° 36. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C.
103
Cuadro N° 37. Nivel de histamina (ppm) de las especies jurel, caballa y
anchoveta a temperatura de 4 °C.
105
Cuadro N° 38. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de la especie
jurel en la formación de histamina (ppm).
108
Cuadro N° 39. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de la especie
caballa en la formación de histamina (ppm)
111
Cuadro N° 40. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de la especie
anchoveta en la formación de histamina (ppm).
114
Cuadro N° 41. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de las especies
jurel, caballa y anchoveta en la formación de histamina (ppm) a
temperatura de 4°C. 118
xi
134
Cuadro N° 51. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de HG.
135
Cuadro N° 52. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera sin vísceras.
137
Cuadro N° 53. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de filetes.
139
Cuadro N° 54. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1) entera, (F2): Hg,(F3):
entera sin víscera, (F4): filetes
141
Cuadro N° 55. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera, (F2):
HG,(F3): entera sin víscera, (F4): filete
143
Cuadro N° 56. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera, (F2): HG,
(F3): entera sin víscera, (F4): filete
145
Cuadro N° 57. Nivel de histamina (ppm) de las especies jurel, caballa y
anchoveta a Temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera,
(F2): HG, (F3): entera sin víscera, (F4): filete.
149
xii
ÍNDICE DE GRÁFICOS
Pág.
temperatura a 16°C 71
Gráfico N° 10. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
73
temperatura a 16°C
Gráfico N° 11. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
74
temperatura a 12 °C
76
Gráfico N° 12. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura a 12°C 78
Gráfico N° 13. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
79
temperatura a 12°C
80
Gráfico N° 14. Determinación de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura a 8 °C 82
Gráfico N° 15. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
84
temperatura de 8 °C.
85
Gráfico N° 16. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
xiii
temperatura de 8 °C. 88
Gráfico N° 17. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
90
temperatura de 4 °C.
93
Gráfico N° 18. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C. 97
Gráfico N° 19. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
100
temperatura de 4 °C.
102
Gráfico N° 20. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 0 °C. 103
Gráfico N° 21. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
106
temperatura de 0 °C.
108
Gráfico N° 22. Nivel de histamina (ppm) en la especie anchoveta a
temperatura de 0 °C. 109
Gráfico N° 23. Nivel de histamina (ppm) en la especie jurel a diferentes
112
temperaturas de almacenamiento.
113
Gráfico N° 24. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
diferentes temperaturas de almacenamiento. 115
Gráfico N° 25. Nivel de histamina (ppm) en la especie anchoveta a
116
diferentes temperaturas de almacenamiento.
Gráfico N° 26. Comportamiento de histamina (ppm) en las especies
119
caballa, jurel y anchoveta a diferentes temperaturas de almacenamiento.
122
Gráfico N° 27. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C. 123
Gráfico N° 28. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
125
temperatura de 4 °C.
126
Gráfico N° 29. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C. 128
Gráfico N° 30. Nivel de histamina (ppm) de las especies jurel, caballa y
130
anchoveta a temperatura de 4 °C.
131
Gráfico N° 31. Crecimiento de microorganismos (ufc/g) de la especie
jurel durante 48 horas 133
Gráfico N° 32. Variación del contenido de histamina de la especie jurel
134
almacenada a 4°C y en 48 horas
136
xiv
Gráfico N° 33. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de la especie
138
caballa en la formación de histamina (ppm) durante 48 horas
Gráfico N° 34. Variación del contenido de histamina de la especie 139
caballa almacenada a 4°C y en 48 horas
Gráfico N° 35. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de la especie 141
anchoveta en la formación de histamina (ppm) durante 48 horas
Gráfico N° 36. Variación del contenido de histamina en la especie 143
anchoveta almacenada a 4°C y en 48 horas
Gráfico N° 37. Influencia de la carga microbiana (ufc/g) de las especies 145
jurel, caballa y anchoveta en la formación de histamina (ppm) a
temperatura de 4°C 150
Gráfico N° 38. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera.
Gráfico N° 39. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada en forma HG.
Gráfico N° 40. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera sin vísceras.
Gráfico N° 41. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de filetes.
Gráfico N° 42. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera.
Gráfico N° 43. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada en forma HG.
Gráfico N° 44. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera sin vísceras.
Gráfico N° 45. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de filetes.
Gráfico N° 46. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera.
Gráfico N° 47. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de HG.
Gráfico N° 48. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada de forma entera sin vísceras.
xv
Gráfico N° 49. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de filete.
Gráfico N° 50. Nivel de histamina (ppm) de la especie jurel a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera, (F2): HG,
(F3): entera sin víscera, (F4): filete.
Gráfico N° 51. Nivel de histamina (ppm) de la especie caballa a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera, (F2): HG,
(F3): entera sin víscera, (F4): filetes.
Gráfico N° 52. Nivel de histamina (ppm) de la especie anchoveta a
temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera, (F2): HG,
(F3): entera sin víscera, (F4): filete.
Gráfico N° 53. Nivel de histamina (ppm) de las especies jurel, caballa y
anchoveta a temperatura de 4 °C almacenada en forma de (F1): entera,
(F2): HG, (F3): entera sin víscera, (F4): filetes.
xvi
ÍNDICE DE TABLAS
ÍNDICE DE FIGURA
INDICE DE FOTOS
xvii
INDICE DE ABREVIATURAS
xviii
RESUMEN
El presente trabajo tiene como objetivo estudiar la formación de histamina en caballa, jurel
y anchoveta, en relación al tiempo y temperatura de almacenamiento. El estudio se realizó
con las tres especies más consumidas que ocupan los tres primeros lugares en
desembarques a nivel nacional.
El nivel de histamina se evaluó a diferentes temperaturas de 24°C, 20°C, 16°C, 12°C, 8°C,
4°C y 0°C en tres días, obteniendo a 24°C la mayor cantidad de histamina, en comparación
a 0°C. También se evaluó la histamina en tiempo de almacenamiento durante tres días,
pero mantenida a 4°C de temperatura, obteniendo como resultado una variación por
especie muy por debajo del límite de la norma internacional de la FDA de 50 ppm. La
influencia de los microorganismos en relación a la histamina y a 4°C de temperatura
constante durante dos días de almacenamiento, no se presenció el mismo comportamiento
entre microorganismos y el nivel de histamina en las especies analizadas. Asimismo se
apreció la forma de almacenamiento de acuerdo al tipo de corte, donde tiene mucha
relación con la producción de histamina siendo las variables en forma entera, HG, entera
sin víscera y filete, siendo esta última forma la más aceptable.
xix
CAPITULO I
INTRODUCCIÓN
1.2. Justificación
Indudablemente una evaluación sensorial organoléptica no asegura la calidad del
pescado, por lo cual, es necesario realizar pruebas químicas para determinar, por
ejemplo, la histamina.
Cuando se almacena pescados que presentan alguna lesión, con otros que no
presentan lesiones, se produce contaminación. Los pescados lesionados presentan
mayor cantidad de microorganismos y son más factibles a desarrollar histamina,
presentándose más cantidad de microorganismos en las agallas, vísceras, o si ya
llevó algún proceso en los filetes.
2
temperatura) que influye en su formación, así como la forma en que podría
reducirse para mantener por más tiempo un producto de buena calidad y que sea
inocuo para el consumo.
1.3.Objetivos
1.3.1. Objetivo general
Estudiar la formación de histamina en caballa, jurel y anchoveta en relación
al tiempo y temperatura de almacenamiento.
3
CAPITULO II
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
4
principal período de desove de la caballa es desde fines de la primavera y
durante el verano, con mayor intensidad de enero a marzo.
La caballa es un recurso de altos niveles nutritivos, tal como se muestra en
el siguiente cuadro.
5
principalmente entre diciembre y abril, siendo los grupos de edad de uno y
dos años los que constituyen mayormente las capturas. Alcanza su madurez
sexual a los 12 cm y se reproduce mediante la producción de huevos por
parte de las hembras, que son fertilizados por el macho en el agua y el
embrión se desarrolla fuera del cuerpo de la hembra. El desove de la
anchoveta abarca casi todo el año, con dos periodos, desde mayor
intensidad, el principal en invierno (agosto-setiembre) y otro en verano
(febrero –Marzo). La anchoveta es planctófaga por excelencia, es decir que
se alimenta exclusivamente de plancton (fitoplancton y zooplancton).
Durante los eventos de EL Niño, la anchoveta se alimenta mayormente de
copépodos y eufausidos; disminuyendo el consumo de fitoplancton en su
dieta (IMARPE, 2007).
Este recurso es una valiosa fuente proteica animal de alta calidad. Su alto
contenido de lisina y otros aminoácidos esenciales la hacen particularmente
adecuada para el complemento de dietas ricas en carbohidratos. Es rico en
minerales como: potasio, hierro, fósforo y calcio. Su componente graso
cuenta con una notable presencia de vitamina A y D muy necesarios para un
adecuado desarrollo del cerebro y el cuerpo. La anchoveta, en particular es
la especie que presenta los más altos contenidos de omega -3,
principalmente ácidos grasos polinsaturados (EPA y DHA).
0 20 40 60 80
Porcentaje (%)
6
2.1.3 Recurso jurel Trachurus murphyi
IMARPE (2007), menciona que el jurel Trachurus murphyi es una especie
pelágica, de forma hidrodinámica: pedúnculo caudal muy fino y la cola
bifurcada con una quilla lateral formada por las escamas engrosadas que
constituyen el término de la línea lateral, la que está cubierta de escamas
transformadas en escudos y tiene una curva característica. Presenta una
coloración azul grisácea en el dorso, los lados y el vientre son plateados. La
distribución y concentración de los cardúmenes de jurel guardan cierta
relación con la variación e interacción de las masas de agua frente a nuestro
litoral. Se acerca a la costa durante el verano o en años cálidos (El Niño) y
se aleja en los meses de invierno o en años fríos (La Niña). Su alto
contenido proteico y bajo precio hace de él un producto alimenticio
conveniente para el ser humano. Los países de mayor consumo de jurel en
las últimas décadas son Chile, Perú, Estados Unidos, Sri Lanka y Papúa-
Nueva Guinea, entre otros.
7
En la tabla N° 01 se presenta el desembarque de recursos hidrobiológicos pelágicos en
el año 2013, la especie anchoveta ocupa el primer lugar de extracción, con una
cantidad de 4859056 Tm, la cual es destinada al consumo humano indirecto y
directamente, luego sigue la especie jurel con una cantidad de 82111 Tm,
posteriormente la especie bonito con una cantidad de 77221 Tm y la especie caballa
con una cantidad de 58297 Tm (PRODUCE, 2013).
Sardina 56 5 26 17 63 161 -
8
Tabla 02. Desembarque de recursos hidrobiológicos analizadas en este estudio,
marítimo, según especie pelágica del 2007 al 2013. (Toneladas métrica brutas)
2.2 Histamina
2.2.1. Definiciones
La FAO (2009), menciona que la histamina es una toxina del grupo de aminas
biogenas, producto de la descarboxilación del aminoácido histidina. La
histamina está presente en ciertos alimentos que contienen histidina libre, y es
generado por ciertas bacterias durante la putrefacción y fermentación de
pescado.
9
número de bacterias alcanzó su máximo valor a las 24 horas, a temperatura de
28°C. No hubo diferencias significativas entre el número de bacterias de 4 y
10°C a las 0 y 24 horas, encontrándose diferencias (p<0.05) a las 48 horas. La
concentración de histidina aumentó en forma rápida a 28°C, de 202,75 ppm a
1003,61 ppm, siendo este último el valor máximo para todas las muestras. No
se encontraron diferencias significativas entre los valores de histidina para 4 y
10°C. Se aislaron e identificaron 15 especies de bacterias mesófilas presentes
en el músculo de la corvina, 8 de las cuales dieron resultado positivo como
productoras de histamina (Klebsiella pneumoniae subsp. Pneumoniae,
Salmonella arizonae, enterobacter Sakazakii y Klebsiella oxytoca). Los
valores promedio de histamina detectados en el músculo de la corvina fueron
de un mínimo 10.28 y un máximo de 59,53 ppm, sin llegar a valores
considerados tóxicos por la FDA. Se encontraron diferencias (p<0,05) para
los valores de histamina a los tiempos de 24 y 48 horas a temperaturas de
10°C.
Según estudio de Millan et al. (2003) mencionan que la liza presenta una
calidad microbiológica aceptable al ser almacenada a 0 y 6°C por un período
de tiempo de hasta 96 horas. A 25°C y a partir de las 24 horas de
almacenamiento la carga microbiana se encuentra por encima de los límites
máximos permisibles.
10
Gozzi et al. (2011), estudiaron la influencia de la temperatura de
conservación sobre la formación de histamina en caballa (Scomber japonicus)
asociada a los cambios químicos y los atributos organolépticos de los
ejemplares conservados en diferentes condiciones. La calidad del pescado se
determinó por evaluación sensorial mientras que la inocuidad se estableció
midiendo el contenido de histamina a 6°C durante una semana realizando el
muestreo después de transcurridos uno, tres, cinco y siete días en condiciones
de refrigeración. A la temperatura ambiente de 20°C el muestreo se efectuó
diariamente durante tres días. Las caballas refrigeradas superaron los niveles
aceptables de histamina al tercer día antes de ser rechazadas por los panelistas
sensoriales. Cuando las muestras se mantuvieron a temperatura ambiente
alcanzaron niveles peligrosos de histamina al segundo día en coincidencia
con el rechazo determinado por el panel de evaluación sensorial. Usaron el
método de inmunoensayo por absorción ligado a enzimas (Elisa) mediante el
equipo cuantitativo para su determinación en alimentos denominado
Histamine Food EIA, también conocido como Ridascreen, art. No 1604
distribuido por R-Biopharm Inc., Marshall, USA (suministrado por LDN).
Los resultados fueron leídos a 450 nm (nanómetro) usando el lector de
microplacas Reader 100, Organon Technica, Miami, Florida, USA.
11
refrigeración. La enzima se mantiene estable mientras esta en el estado
congelado y se puede reactivar muy rápidamente después de la
descongelación.
12
la producción de histamina en el pescado, aun cuando la bacteria deje de ser
activa (muerta o con metabolismo mínimo) (Hungerford, 2010).
Drogas y Alimentos de los Estados Unidos [FDA, por sus siglas en inglés],
(2011); Graü, Sánchez, Zerpa, Vallenilla y Berti, (2003). Una vez formada,
puede ocasionar la intoxicación escombroidea, denominada a veces
“envenenamiento histamínico”, la cual raramente es letal, y por lo general sus
síntomas son leves. Herrera y Santos (2005) mencionan que una gran
proporción de las intoxicaciones alimentarias corresponden a intoxicaciones
por biotóxinas e histamina (aproximadamente un 80%) o a infecciones por
virus, mientras que en un estudio realizado en España por Martín et al.
(2007), señalan que en un 92% de los brotes de intoxicación alimentaria por
biotóxinas, el pescado fue el alimento más consumido, seguido de los
13
mariscos y otros productos en un 6%. De estos casos se identificó como
agente etiológico a la histamina en 47 brotes (92%).
14
Cuadro N° 3. Relación de aminoácidos y aminas biogénicas
Fenilalanina Fenetilamina
Tirosina Tiramina
Histidina Histamina
Lisina Cadaverina
Arginina Putrescina
Triptofano triptamina
15
condición puede empeorar aún más con algunas especies de atún que generan
calor, lo que origina temperaturas internas que pueden exceder las
temperaturas ambientales y aumentar la probabilidad de condiciones
favorables para el crecimiento de bacterias formadoras de enzimas.
16
prepara a partir de los componentes musculares o acuosos del tejido de
pescado.
17
bacterias estén inactivas. La enzima es más estable que las bacterias en estado
congelado y puede ser reactivada con el descongelamiento.
18
corte de un pescado o de un lote, existe la posibilidad de que otros cortes
puedan superar las 500 ppm. Debido a que la histamina generalmente no está
distribuida de manera uniforme en un pescado o en un lote, la validez de los
análisis de histamina depende del diseño del plan de muestreo. En los
pescados grandes que forma escombrotoxina, la parte inferior y anterior
(delantera) del lomo del pescado (no la pared abdominal) ofrece más
posibilidades de encontrar la mejor información sobre el contenido de
histamina del pescado. La combinación de indicadores adicionales de
condiciones que pueden llevar a cabo a la formación de histamina, como la
inspección sensorial y la medición de temperatura interna, con los análisis de
histamina puede proporcionar una mayor certeza de la seguridad del producto.
La observación de la presencia de huecos tipo panal (vacios en la carne del
pescado) en los lomos de los atunes cocidos previstos para enlatado es un
medio valioso de detección de pescados expuestos a los tipos de abuso de
temperatura que pueden llevar al desarrollo de histamina. Cualquier pescado
que forme escombrotoxina y demuestre el rasgo debe destruirse o desviarse a
usos no alimenticios.
19
La determinación de aminas biogénicas se realiza mediante Cromatografía
Liquida de Alta Presión (HPLC) y la cantidad de aminas biogénicas se
expresa en miligramos por 100 gramos o en partes por millón (ppm).
Por una parte, el Reglamento (CE) 853/2004 del Parlamento Europeo y del
Consejo, de 29 de abril de 2004, por el que se establecen normas específicas
de higiene de alimentos de origen animal, establece que: Los productos
frescos de la pesca, los productos de la pesca no transformados
descongelados, así como los productos cocidos y refrigerados de crustáceos y
moluscos, se mantendrán a una temperatura próxima a la de fusión del hielo
(entre 0 y 4ºC).
Por otra parte, las empresas alimentarias deben cumplir los criterios de
seguridad alimentaria relativos a Histamina en los alimentos de mayor riesgo
(productos de la pesca), establecidos en el Reglamento (CE) 2073/2005, de la
comisión de 15 de noviembre de 2005 relativo a los criterios microbiológicos
aplicables a los productos alimenticios y sus posteriores modificaciones. (Ver
anexo II)
20
2.3 Almacenamiento en refrigeración
Los pescados son alimentos muy perecederos, es decir, se alteran con rapidez y
facilidad salvo que se recurra a tratamientos de conservación adecuados. Uno de los
más útiles es la refrigeración. Este sistema permite mantener la calidad comercial de
los alimentos por un periodo de tiempo variable. El tiempo en que se mantienen en
perfecto estado depende de la especie, el método de captura y la manipulación, en la
que siempre que se aplican temperaturas de entre 0 y 4.4ºC desde el mismo momento
de la captura, y ésta debe mantenerse en todas las etapas de distribución hasta su
llegada al consumidor (FDA, 2011)
Las técnicas de conservación del pescado tienen como principio retardar, reducir e
inhibir el proceso de descomposición. El daño causado por bacterias y la catálisis, que
son fenómenos biológicos que se desarrollan en condiciones no optimas. La autólisis
21
es un control de la acción de enzimas sobre el pescado. El método más utilizado por la
industria pesquera es bajar la temperatura.
Para que el hielo sea eficaz debe estar limpio. Los recuentos bacterianos del hielo
pueden poner en peligro el pecado. El hielo debe ser fabricado con agua potable y
limpia, y este debe almacenarse en condiciones higiénicas. Este debe desecharse al
final de cada viaje o proceso de enfriamiento.
Es esencial que alrededor del pescado haya hielo suficiente para obtener una velocidad
de enfriamiento adecuada. El cumplimiento de las buenas normas higiénicas, aseguran
la conservación de la frescura del pescado durante su descarga de la embarcación, en
la planta en tierra, durante el tratamiento y a lo largo de toda la cadena de distribución.
Los pescados de pequeño tamaño y alto contenido graso se estropean antes que los de
mayor tamaño y menos grasa. Las sardinas y boquerones se conservan sólo entre 3 y 6
días, mientras que la merluza y el bacalao mantienen sus condiciones óptimas durante
dos o tres semanas. Otras especies de gran tamaño como el pez espada llegan a los 24
días. (Ramírez, 2009).
22
2.4 Alteraciones
Los métodos para la evaluación de la calidad del pescado fresco pueden ser
convenientemente divididos en dos categorías: sensorial e instrumental.
23
La cantidad de aminas biogénicas producidas depende del nivel de amino
libre ácidos presentes, que está relacionada con las especies, la cantidad y la
actividad de enzimas descarboxilasa.
24
2.4.2. Cambios en la calidad y duración en almacén del pescado enfriado
2.4.2.1. Efecto de la temperatura de almacenamiento
Se conoce que tanto la actividad enzimática como la microbiana están
altamente influenciadas por la temperatura. Sin embargo, en el rango de
temperatura de 0 a 25 °C, la actividad microbiana es relativamente más
importante, y los cambios en la temperatura tienen mayor impacto en el
crecimiento microbiano que en la actividad enzimática (Huss, 1999).
25
2.4.3. Evaluación de la calidad del pescado
2.4.3.1. Método sensorial
Un examen organoléptico, basado en criterios objetivos para verificar
criterios de frescura. Si la evaluación organoléptica no permite una
decisión objetiva, se procede a la evaluación mediante un ensayo
químico. De presentarse resultados no satisfactorios durante la
evaluación el producto es declarado No Apto para Consumo Humano
(SANIPES, 2010). (Ver anexo VII).
H. Apariencia general
La observación de la apariencia general, nos da una idea del estado del
producto, se puede observar si los pescados presentan erosiones, la
presencia de hielo, su cantidad suficiente o insuficiente, la ruptura de los
tejidos o de la cavidad abdominal, las coloraciones anormales, etc.; todo
ello nos lleva a tener “una idea” del estado del pescado.
26
J. Apariencia de los ojos
L. Olor
27
M. Apariencia de las paredes abdominales y órganos internos
28
evaluaciones sensoriales de la calidad y, además, el compuesto químico a
ser medido debe incrementar o disminuir de acuerdo al nivel de deterioro
microbiológico o de autolisis (Huss, 1999).
29
CAPITULO III
MATERIALES Y METODOS
3. Equipos
Termómetro graduado
Balanza de capacidad en 15Kg ±5 g.
Kit de histamina ALERT BULK HISTAMINA 288 pozos
Kit de extracción (frascos de plástico con tapa, jeringas con filtro de fibra de
vidrio, tubos de muestra 12 x 75 mm y una placa portapozos).
Reloj satelital (nextel)
Jeringa graduada o micropipeta y
Puntas de pipeta.
30
3.8 Recepción de materia prima
Para este estudio se contó con la ayuda de una embarcación pesquera artesanal
AMBROSIA, número de matrícula - MO-11667-BM y número de permiso de
pesca - RDR N° 169 - 04; que realizó la captura de las especies de caballa y jurel,
siendo la zona de pesca frente a Matarani. Así mismo la captura se realizó a horas
de la madrugada (3:00 am), y después de dos horas se recepcionó en el muelle
Pesquero Ocean Fish S.A.C. con una temperatura inicial de 6.7°C, la cual se
almacenó en cajas de plástico con hielo en escama, para su posterior estudio.
31
Para el transporte de pescado fresco de caballa, jurel y anchoveta al laboratorio de
la Universidad Católica Santa María, se procedió al congelado (-18°C) y
almacenadas en bolsas lacradas, en cajas de teknopor.
32
3.4.1 Procedimiento de la Obtención de Histamina
A. Preparación de reactivos
33
B. Nivel de histamina a detectar.
Se pueden indicar que:
Se evaluó desde 5 ppm sabiendo que fueron muestras de calidad según
la evaluación físico organoléptico.
Se puede elegir 50 ppm para determinar si la muestra ya ha producido
niveles significativos de histamina, si excedió o no, sobre el tope FDA
para análisis de muestra individual.
El nivel de la histamina a detectar es muy limitada y los rangos son de
tipo referencial de obtención rápida, con datos de numeración entera a
comparación de la cromatografía Liquida de alto rendimiento (HPLC).
Muestra representativa y
Cifra Agua a
homogenizada puesta en Mezclado y filtrado Dilución del extracto filtrado
histamina adicionar
bolsa o frasco en plástico
Adicionar 500 µl al frasco con 10 ml
5 ppm 10 g. 90 ml SI
de buffer diluente de muestra.
Adicionar 100 µl al frasco con 5 ml
10 ppm 10 g. 77 ml SI
buffer diluente de muestra
Adicionar 100 µl al frasco con 5 ml
15 ppm 10 g. 115 ml SI
buffer diluente de muestra
Adicionar 100 µl al frasco con 5 ml
20 ppm 10 g. 154 ml SI
buffer diluente de muestra
Adicionar 100 µl al frasco con 10 ml
40 ppm 10 g. 154 ml SI
buffer diluente de muestra
Adicionar 100 µl al frasco con 10 ml
50 ppm 10 g. 190 ml SI
buffer diluente de muestra
SI. Luego colocar en un
Adicionar 100 µl al frasco con 10 ml
100 ppm 10 g. 190 ml vasito 1 ml de filtrado con
de buffer diluente de muestra.
1ml de agua.
SI. Luego colocar en un
Adicionar 100 µl al frasco con 10 ml
200 ppm 10 g. 190 ml vasito 1 ml de filtrado con 1
buffer diluente de muestra
ml de agua.
SI. Luego colocar en un
Adicionar 100 µl al frasco con 10 ml
300 ppm 10 g. 190 ml vasito 1 ml de filtrado con
buffer diluente de muestra
1ml de agua.
34
Figura. N° 01. Proceso para la obtención del nivel de histamina
Solo el sobrenadante
Mezclar y filtrar
10 minutos Incubación 2
C. Preparación de la muestra.
Para la muestra representativa en este estudio, se realizó el corte por la sección
anterior y baja del lomo, se retiró las espinas, posteriormente se pesó y se
molió para que sea homogénea la muestra.
35
D. Preparación del extracto filtrado.
Se pesó 10 g. de muestra homogenizada y se adicionó agua destilada
conforme el nivel de histamina a detectar (cuadro N° 04). Y al realizar la
prueba se empezó con 5 ppm como valor inicial y en otras ocasiones el valor
de la histamina estaba muy por encima de 5 ppm, y al volver a realizar la
prueba se obtuvo cifras mayores de 10 ppm, 15 ppm y 20 ppm
respectivamente.
36
E. Filtrar el sobrenadante.
Para el estudio utilicé jeringas con filtro. Pero para empezar a filtrar, primero
se retiró el embolo de la jeringa y se agregó solo el sobrenadante. No se llenó
más de 2/3 partes. Luego se volvió a colocar el embolo para pasar el extracto
filtrado hacia un tubo con tapa.
37
(aspirar y botar suavemente). Y así con las otras muestras se continúa de la
misma forma.
5. Sea con puntas nuevas o usando la punta específica de cada pozo se
transfirió 100 µl de pozo rojo a su correspondiente pozo blanco. (No
olvidar que cada muestra es una punta nueva).
6. Al completar la transferencia de pozo rojo a su correspondiente pozo
blanco se agitó suavemente por deslizamiento en superficie plana por 20
segundos, se retiró y se eliminó los pozos rojos.
38
10. Se incubó por 10 minutos en oscuridad.
11. Usando una nueva punta de pipeta por cada pozo se adicionó 100 µl de
Solución stop (frasco rojo) a todos los pozos. Usando la misma punta
mezclamos 1 vez para uniformizar el tono de color. Luego agitamos por
deslizamiento en superficie plana por 20 segundos. Posteriormente
realizamos la lectura visual, poniendo los pozos sobre un papel blanco para
ver mejor los colores y se hizo una lectura mirando de arriba hacia abajo.
El pozo con el referente de histamina da un color lila.
Mientras más azul es el pozo muestra - es histamina por debajo.
Mientras más rojo es el pozo muestra - es histamina por encima.
39
Foto N° 08. Lectura de pozos para determinación de histamina en
ppm
Todos los ensayos se realizaron por triplicado y se trabajó con valores promedio
solamente para cuadros de comparación con cada una de las especies.
40
Especies de Pescado Temperatura de Almacenamiento
E1 : Jurel T1 : 24°C
E2 : Caballa T2 : 20°C
E3 : Anchoveta T3 : 16°C
T4 : 12°C
T5 : 8°C
T6: 4°C
T7: 0°C
Especies de Pescado
E1: Jurel
E2: Caballa
E3: Anchoveta
41
consumidor, es por ello la importancia en este experimento conocer
los niveles de histamina en las especies analizadas.
Especies de Pescado
E1: Jurel
E2: Caballa
E3: Anchoveta
42
E3: Anchoveta F3: Entera sin vísceras
F4: Filetes
43
ALERT histamina es una prueba ELISA directa competitiva y
mediante la adición de reactivos proveídos por el fabricante en una
secuencia propia del método, dan lugar a que los pozos blancos que
contienen anticuerpos de captura permiten la determinación visual
tipo punto de corte o semicuantitativo del nivel de histamina de la
muestra. Al final de la prueba, la referente histamina del Kit ALERT
genera un tono de color que no es ni azul ni rojo a fin de poder
comparar los resultados de las muestras.
44
CAPITULO IV
RESULTADOS Y DISCUSION
45
Cuadro N° 05. Criterios físico - organoléptico de los pescados grasos de
acuerdo a la categoría de frescura de Anchoveta (engraulis ringens), Jurel
(Trachurus picturatus murphy) y Caballa (Scomber sp)
Pigmentación Perdida de
tornasolada, colores resplandor y de Apagada sin
vivos y brillantes brillo, colores brillo, colores Pigmentación muy
Piel con irisaciones clara más apagados, diluidos, piel apagada la piel se 9 9 9
diferencia entre menor diferencia doblada cuando se desprende de la carne
superficie dorsal y entre superficie curva el pez
ventral. dorsal y ventral
Consistenc
Bastante rígida,
ia de la Muy firme, rígida Un poco blanda Blanda (flácida) 9 9 9
firma
carne
Ligeramente derrames
Opérculos Plateados Amarillentos 9 9 9
teñidos, de rojo o sanguíneos y
marrón amplios
Convexo y
Convexo,
ligeramente Plano; pupila
abombado, pupila Cóncavo en el centro,
hundido, pupila borrosa; derrames
Ojo azul negruzca, pupila gris, cornea 9 9 9
oscura, cornea sanguíneos
brillante “parpado” lechosa
ligeramente alrededor del ojo
Transparente
opalescente
Color menos
Color rojo vivo a vivo, mas pálido Engrosándose y
Amarillentas,
Branquias purpura uniforme en los bordes , decolorándose 9 9 9
mucosidad lechosa
sin mucosidad mucosidad mucosidad opaca
transparente
Olor graso un
Ausencia de olor poco sulfuroso a
Olor de las Fresco a algas
a algas, olor tocino rancio o Agrio descompuesto 9 9 9
branquias marinas, a yodo
neutro fruta
descompuesta
46
4.1.2. Nivel de histamina de materia prima
El presente trabajo de investigación tiene como objetivo, la obtención de
histamina en las especie de jurel, caballa y anchoveta, por ello fueron
sometidos a una prueba inicial de histamina, obteniendo como resultado por
cada especie de 5 ppm en 0 horas de haber recepcionado la materia prima de
acuerdo al cuadro N° 06. Esto nos indica que la materia prima inicial es
inocua para la salud del consumidor.
0 5 5 5 5 5 5 5 5 5
47
las 0 horas se presenció en 50 (UFC/g), pero sí de histamina en 5 ppm; pero
para las muestras de anchoveta no hubo incidencia de microorganismos a las 0
horas, pero sí de histamina en 5 ppm. Resultados proporcionados por el
laboratorio de la Universidad Católica de Santa María.
Plan de
Microorganismos Limites
Alimentos evaluación
Especie / Grupo Categoría n c m M
0 50 5 - 5 - 5
48
varían con el nivel y la composición de la flora bacteriana. A la vez .FAO,
(2009) señala que la formación de histamina se atribuye principalmente a la
actividad de enterobacteriáceas, que pueden producir niveles elevados de
histamina y otras aminas biógenas en el músculo de los pescados cuando los
productos no se refrigeran inmediatamente tras la captura.
Cabe mencionar que los resultados de las tres especies, son pescados histamínicos
y si no cuidamos la cadena de frio y no respetamos las buenas prácticas de
manufactura, no serían productos de calidad e inocuos.
49
manteniéndose así el resultado hasta el final del ensayo debido a que el Kit
de histamina es límitado. Superando ampliamente las tolerancias
establecidas por la UE y normas nacionales. Paralelamente las muestras
presentaron un olor descompuesto, agrio con vientre e intestinos
destrozados a la vez con la carne flácida y piel con pigmentación muy
apagada, la piel se desprende de la carne con mucha facilidad y los ojos
cóncavos en el centro, pupila gris, cornea lechosa y las branquias
presentaron mucosidad lechosa, amarillenta y opaca según los criterios
físicos - organolépticos de los pescados grasos de acuerdo a la categoría de
frescura.
50
CUADRO N° 09. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA DE 24 °C.
Muestra
Horas
1 2 3
0 10 15 10
24 200 200 200
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final de
No admitidos No admitidos No admitidos
la frescura
400
Histamina en ppm
300
200 Muestra 1
100 Muestra 2
Muestra3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
51
histamina se haya íntimamente relacionada con la temperatura ambiental
siendo acelerada principalmente por el tipo de pescado histaminico, por el
tiempo de exposición, por los microorganismos presentes, forma de captura
e higiene y manipulación. Según FAO (2013) menciona que los altos
niveles de histamina son un resultado del abuso del tiempo Bruto y de la
temperatura durante la manipulación y el almacenamiento.
Muestra
Horas
1 2 3
0 10 10 15
24 200 200 200
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
52
GRÁFICO N° 03. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA A 24°C.
350
53
la proliferación de microorganismos, la cual a las 24 horas, el pescado ya se
encontraba fuera de lo establecido para el consumidor, mostrando un rápido
deterioro con la evaluación físico organoléptico.
Muestra
Horas
1 2 3
0 15 15 15
24 300 300 300
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
350
300
Histamina (ppm)
250
200
Muestra 1
150
Muestra 2
100
Muestra 3
50
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
54
En el gráfico N° 04 se puede apreciar claramente que la temperatura de
24°C si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
24 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo descartado para el
consumo humano.
55
pigmentación muy apagada, la piel se desprende de la carne con mucha
facilidad y los ojos cóncavos en el centro, pupila gris, cornea lechosa y las
branquias presentaron mucosidad lechosa, amarillenta y opaca según a los
criterios físicos - organolépticos de los pescados grasos de acuerdo a la
categoría de frescura. Ver Anexo VII.
Muestra
Horas
1 2 3
0 10 10 05
24 200 200 200
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
56
GRÁFICO N° 05. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA A 20 °C.
350
57
histamina, pero en este caso se realizó la prueba cuando la especie llegó a
las 20°C de temperatura corporal (temperatura ambiente), este lapso de
tiempo ayudó a la proliferación de microorganismos, la cual a las 24 horas,
el pescado ya se encontraba fuera de lo establecido para el consumidor,
mostrando un rápido deterioro con la evaluación físico organoléptico.
Muestra
Horas
1 2 3
0 05 10 10
24 200 200 200
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
400
Histamina (ppm)
300
200 Muestra 1
100 Muestra 2
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
58
En el gráfico N° 06 se puede apreciar claramente que la temperatura de
20°C si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
24 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo descartado para el
consumo humano.
Muestras
Horas
1 2 3
0 15 15 15
24 300 300 300
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
59
El comportamiento del nivel de histamina de anchoveta fresca a temperatura
de 20 °C es comparado en el siguiente gráfico.
350
300
Histamina (ppm)
250
200
Muestra 1
150
Muestra 2
100
50 Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
60
En el cuadro N° 15, 16 y 17 el valor inicial obtenido de las muestras de la
especie jurel y caballa fue de 10 ppm, en relación al tiempo establecido
desde 0 horas, pero a una temperatura constante de 16 °C; sin embargo el
valor se suma significativamente en diez veces más al valor inicial dentro de
las 24 horas representando un valor de 100 ppm siendo un valor limite a la
tolerancia establecida en 100 ppm (10 mg/100g) Unión Europea (UE) para
consumo humano, para las especies de jurel y caballa. Pero a partir de 48
horas, hasta culminar las pruebas en 72 horas, se obtuvo en 300 ppm debido
a que el kit de histamina presenta una limitación en la realización de la
prueba.
MUESTRA
Horas
1 2 3
0 10 10 10
24 100 100 100
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación
final de la No admitidos No admitidos No admitidos
frescura
61
El comportamiento del nivel de histamina de jurel fresco a temperatura de
16 °C es comparado en el siguiente gráfico.
400
Histamina (ppm)
300
200 Muestra 1
100 Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
62
histamina, pero en este caso se realizó la prueba cuando la especie llegó a
las 16°C de temperatura corporal (temperatura ambiente), este lapso de
tiempo ayudó a la proliferación de microorganismos, la cual a las 24 horas,
el pescado se encontró en límite de lo establecido para el consumidor,
mostrando un rápido deterioro con la evaluación físico organoléptico.
Muestras
Horas
1 2 3
0 10 05 10
24 100 100 100
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación
final de la No admitidos No admitidos No admitidos
frescura
350
300
Histamina (ppm)
250
200
Muestra 1
150
Muestra 2
100
Muestra 3
50
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
63
En el gráfico N° 09 se puede apreciar claramente que la temperatura de
16°C si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
24 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo descartado para el
consumo humano.
64
encontraba fuera de lo establecido para el consumidor, mostrando un rápido
deterioro con la evaluación físico organoléptico.
Muestras
Horas
1 2 3
0 10 10 10
24 200 200 200
48 300 300 300
72 300 300 300
Calificación
final de la No admitidos No admitidos No admitidos
frescura
350
300
Histamina (ppm)
250
200
Muestra 1
150
100 Muestra 2
50 Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
65
24 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo descartado para el
consumo humano.
66
las mismas condiciones, que se muestra en el cuadro N° 20 un valor cuatro
veces mayor al valor aceptable.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 50 50 50
48 100 100 100
72 100 100 100
Calificación
final de la No admitidos No admitidos No admitidos
frescura
67
GRÁFICO N° 11. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA A 12 °C
120
68
temperatura corporal (temperatura ambiente), este lapso de tiempo ayudó a
la proliferación de microorganismos, la cual a las 48 horas, el pescado se
encontró en límite de lo establecido para el consumidor, mostrando
deterioro de acuerdo con la evaluación físico organoléptico.
Muestras
Horas
1 2 3
0 10 10 10
24 50 50 50
48 100 100 100
72 200 200 200
Calificación
final de la No admitidos No admitidos No admitidos
frescura
250
200
Histamina (ppm)
150
Muestra 1
100
Muestra 2
50 Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
69
En el gráfico N° 12 se puede apreciar claramente que la temperatura de
12°C si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
48 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo descartado para el
consumo humano.
Muestras
Horas
1 2 3
0 10 10 10
24 100 100 100
48 200 200 200
72 300 300 300
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
70
El comportamiento del nivel de histamina de anchoveta fresca a temperatura
de 12 °C es comparado en el siguiente gráfico.
400
Histamnina (ppm)
300
200 Muestra 1
100 Muestra 2
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
71
El nivel de histamina en ppm y a una temperatura de 08°C, se demostró a
las 0 horas y a 5 ppm para las especies de jurel, caballa y anchoveta valor
reflejado en el cuadro N° 21, 22 y 23.
A las 72 horas para las muestras de jurel y caballa muestran un valor similar
en 100 ppm y a la vez las muestras presentan ruptura ventral, mientras para
las muestras de anchoveta presenta 200 ppm y su calificación final de la
frescura es no admitido por presentar olor desagradable, musculo muy
flácida, perdida de la forma de sus vísceras y ojos muy turbios.
Especies
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 20 20 20
48 40 40 40
72 100 100 100
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
72
GRÁFICO N° 14. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA A 8 °C.
150
Histamina (ppm)
100
Muestra 1
50
Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
73
CUADRO N° 22. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 8 °C.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 40 40 40
48 100 100 100
72 100 100 100
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
150
Histamina (ppm)
100
Muestra 1
50 Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
74
Se ha demostrado que la temperatura ambiental ejerce un marcado efecto
sobre la velocidad de formación de histamina. La velocidad de formación de
histamina se haya íntimamente relacionada con la temperatura ambiental
siendo acelerada principalmente por el tipo de pescado histaminico, por el
tiempo de exposición, por los microorganismos presentes, forma de captura
e higiene y manipulación. Según FAO (2013) menciona que los altos
niveles de histamina son un resultado del abuso del tiempo Bruto y de la
temperatura durante la manipulación y el almacenamiento.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 50 50 50
48 100 100 100
72 200 200 200
Calificación final
No admitidos No admitidos No admitidos
de la frescura
75
GRÁFICO N° 16. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
ANCHOVETA A TEMPERATURA DE 8 °C.
250
Histamina (ppm)
200
150
Muestra 1
100
Muestra 2
50
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
76
Para el caso de la especie jurel a 72 horas presentó un valor de 10 ppm,
mientras para la especie caballa presentó un valor de 15 ppm, pero para la
especie anchoveta el valor determinado fue de 50 ppm. La temperatura de
refrigeración y las buenas prácticas de manufactura ayuda a no incrementar
exageradamente el nivel de histamina.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 05
72 10 10 10
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
77
GRÁFICO N° 17. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA DE 4 °C.
12
Histamana (ppm)
10
8
6 Muestra 1
4 Muestra 2
2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
78
CUADRO N° 25. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 4 °C.
Especies
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 10 10 10
48 15 15 15
72 15 15 15
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
20
Histamina (ppm)
15
10 Muestra 1
Muestra 2
5
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
79
Se ha demostrado que la temperatura a 4°C ejerce un mínimo efecto sobre la
velocidad de formación de histamina. De acuerdo a Field y Calderón, (2008)
mencionan que la formación de histamina se detiene con la refrigeración a
0º centígrados.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 20 20 20
48 40 40 40
72 50 50 50
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
60
Histamina (ppm)
40
Muestra 1
20
Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
80
En el gráfico N° 19 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
24 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo apto para el
consumo humano.
Los valores presentados en este último ensayo de las especies jurel, caballa
y anchoveta y una misma temperatura constante de 0°C, y con un nivel de
histamina de 5 ppm, resultados reflejados en el cuadro N° 27, 28 y 29.
Paralelamente se evidenció la calidad de frescura de cada una de las
muestras. Manteniendo a una temperatura de almacenamiento de 0°C, el
nivel de histamina no asciende significativamente.
81
CUADRO N° 27. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA DE 0 °C.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 05
72 05 05 05
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
6
Histamana (ppm)
5
4
3 Muestra 1
2 Muestra 2
1
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
82
Se ha demostrado que la temperatura a 0°C ejerce un minimo efecto sobre la
velocidad de formación de histamina. De acuerdo a Field y Calderón, (2008)
mencionan que la formación de histamina se detiene con la refrigeración a
0º centígrados.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 05
72 05 05 05
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
83
GRÁFICO N° 21. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 0 °C.
Histamana (ppm)
5
4
3 Muestra 1
2 Muestra 2
1
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
84
CUADRO N° 29. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
ANCHOVETA A TEMPERATURA DE 0 °C.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 05
72 05 05 05
Calificación final
Admitidos Admitidos Admitidos
de la frescura
6
Histamana (ppm)
4
Muestra 1
2
Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
85
Se ha demostrado que la temperatura a 0°C ejerce un mínimo efecto sobre la
velocidad de formación de histamina. De acuerdo a Field y Calderón, (2008)
mencionan que la formación de histamina se detiene con la refrigeración a
0º centígrados.
86
El cuadro N° 30 y en el gráfico N° 23 reflejan el nivel de histamina de
acuerdo a cada temperatura de almacenamiento, donde se concluye que a
más bajo sea la temperatura, el nivel de histamina no incrementa
significativamente que a comparación de la temperatura ambiente, y
también se puede mencionar que la buenas prácticas de manufactura juegan
un papel importante.
E1:JUREL
0 11.667 8.333 10 5 5 5 5
87
El comportamiento del nivel de histamina de jurel fresco a diferentes
temperaturas de refrigeración a ambiente, es comparado en el siguiente
gráfico.
24 °C.
350 JUREL
300 300 300 20°C.
JUREL
HISTAMINA (PPM)
250 16°C.
200 200 JUREL
12°C.
150
JUREL
100 100 100 100 8°C.
8.333 JUREL
50 11.667 5 50 40
20 4°C.
0 5 105 5 5 5 105 JUREL
0 24 48 72 0°C.
TIEMPO (HORAS) JUREL
88
tiempo de exposición, por los microorganismos presentes, forma de captura
e higiene y manipulación. Según FAO (2013) menciona que los altos
niveles de histamina son un resultado del abuso del tiempo Bruto y de la
temperatura durante la manipulación y el almacenamiento.
89
las variaciones de temperatura pero también se puede decir que las
características organolépticas, no siempre guardan una relación directa con
el nivel de histamina.
E2:CABALLA
HORAS 24°C 20°C 16°C 12°C 8°C 4°C 0°C
0 11.667 8.333 8.333 10 5 5 5
24 200 200 100 50 40 10 5
48 300 300 300 100 100 15 5
72 300 300 300 200 100 15 5
20°C. CABALLA
250
200 200 200 16°C. CABALLA
150 12°C. CABALLA
100 100 100 100
8°C. CABALLA
50 50
40
0 11.667
10
8.333
5 10
5 15
5 15
5 4°C. CABALLA
0 24 48 72 0°C. CABALLA
TIEMPO (HORAS)
90
En el gráfico N° 24 se puede apreciar claramente que la temperatura si tiene
influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se manifiesta en el
primer día de almacenamiento a 0 horas, siendo 0°C y 4 °C que
mantuvieron constante el nivel de histamina en 5 y 15 ppm hasta las 72
horas, pero a partir de 8°C y a 48 horas se aprecia 100 ppm, valor que se
encuentra en límite, de acuerdo a lo establecido por las normas pero a partir
de los 12 °C hasta los 24 °C se hizo evidente el efecto de la temperatura de
almacenamiento en las muestras, las cuales presentaron un elevado
contenido de histamina que alcanzó los 200 y 300 ppm, superando
ampliamente las tolerancias establecidas por las normas.(SANIPES, 2010).
91
de 200 ppm, siendo valor alejado a lo establecido por la Unión Europea. Así
mismo a 20°C y 24°C se encuentra fuera de lo establecido por las normas
internacionales.
E3:ANCHOVETA
HORA 24°C 20°C 16°C 12°C 8°C 4°C 0°C
0 15 15 10 10 5 5 5
24 300 300 200 100 50 20 5
48 300 300 300 200 100 40 5
72 300 300 300 300 200 50 5
92
El comportamiento del nivel de histamina de anchoveta fresca a diferentes
temperaturas de refrigeración a ambiente, es comparado en el siguiente
gráfico.
24 °C.
350 ANCHOVETA
250 16°C.
ANCHOVETA
200 200 200 200
12°C.
150 ANCHOVETA
93
siendo acelerada principalmente por el tipo de pescado histaminico, por el
tiempo de exposición, por los microorganismos presentes, forma de captura
e higiene y manipulación. Según FAO (2013) menciona que los altos
niveles de histamina son un resultado del abuso del tiempo Bruto y de la
temperatura durante la manipulación y el almacenamiento.
Por lo que a partir de las 8°C y a 48 horas en jurel representa 40 ppm, valor
que está por debajo de límite establecido por la FDA, pero a 72 horas el
valor se encuentra a 100 ppm por lo cual se encuentra en límite establecido
por la Unión Europea. El comportamiento del valor histamina en la especie
de caballa se asemeja a la especie jurel por lo que decimos que a partir de
las 24 horas y a 8°C el valor es de 40 ppm siendo apto para el consumo
humano, mientras a 48 horas se encuentra la histamina al valor límite por la
Unión Europea y a 100 ppm. Mientras para la especie anchoveta el valor de
histamina refleja un valor límite establecido por la FDA de 50 ppm en 72
horas a 4°C por lo cual decimos que está apto para el consumo humano; si
desde la captura de la materia prima realizamos las buenas prácticas de
manufactura, controlamos y evitamos la intoxicación por consumo de
pescado histamínico. Las diferencias de anchoveta con nivel de histamina a
50 ppm, caballa en 15 ppm y jurel 10 ppm por 4°C durante 72 horas se
puede decir que fue debido a la cantidad de proteínas y lipidos de cada
especie analizada.
94
después de la captura del pescado, ya que los niveles alcanzados dependen
principalmente de la combinación de los factores temperatura y tiempo.
95
CUADRO N° 33.
24 20 16 12 8 4 0 24 20 16 12 8 4 0 24 20 16 12 8 4 0
Horas
°C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C °C
24 200 200 100 50 20 5 5 200 200 100 50 40 10 5 300 300 200 100 50 20 5
48 300 300 300 100 40 5 5 300 300 300 100 100 15 5 300 300 300 200 100 40 5
72 300 300 300 100 100 10 5 300 300 300 200 100 15 5 300 300 300 300 200 50 5
96
GRÁFICO N° 26.
24 °C. JUREL
20°C. JUREL
350
16°C. JUREL
12°C. JUREL
300 300 300 300 8°C. JUREL
4°C. JUREL
250 0°C. JUREL
24 °C. CABALLA
HISTAMINA (PPM)
97
En el gráfico N° 26 se puede apreciar claramente que la temperatura si tiene
influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se manifiesta en el
primer día de almacenamiento a 0 horas, siendo 0°C y 4 °C que
mantuvieron constante el nivel de histamina en 5 y 50 ppm hasta las 72
horas, pero a partir de los 8 °C hasta los 24 °C se hizo evidente el efecto de
la temperatura de almacenamiento en las muestras, las cuales presentaron un
elevado contenido de histamina que alcanzó los 100, 200 y 300 ppm,
superando ampliamente las tolerancias establecidas por las
normas.(SANIPES, 2010).
Como se aprecia en el gráfico N°26, que a partir de los 4°C para la especie
anchoveta, mostró 50 ppm en 72 horas, contenido alto de histamina, que a
comparación de la especie caballa que a la misma hora mostró 15 ppm y a la
misma hora la especie jurel mostró 10 ppm. Field y Calderón, (2008)
mencionan que el pescado fresco llega a tener 10 ppm de histamina.
98
4.2.2. Tiempo de almacenamiento
En este experimento se evalúo la formación de histamina en las tres especies
diferentes, mantenido en una sola temperatura constante de refrigeración
durante tres días de almacenamiento. Los siguientes valores de este
experimento queda reflejado que cuando ya se generó la producción de
histamina, ésta continúa activa a temperaturas de refrigeración. Según
estudios citados en este estudio mencionan que la histamina no se destruye
una vez generada. En el cuadro N° 34 y gráfico N° 27 respectivamente, se
evaluó a la especie jurel, en una de las muestras que se realizó por
triplicado, se obtuvo el más alto valor de histamina, en 15 ppm, durante las
72 horas, valor tres veces más al valor inicial. Paralelamente se evaluó la
frescura durante todo este tiempo donde representa apto para el consumo
humano.
99
que los niveles alcanzados dependen principalmente de la combinación de
los factores temperatura y tiempo.
Muestra
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 10
72 10 10 15
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
20
Histamana (ppm)
15
10 Muestra 1
Muestra 2
5
Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
100
primer día de almacenamiento a 0 horas, pero una de las muestras de la
especie jurel, presentó variación de 10 y 15 ppm a partir de las 48 horas,
siendo apto para el consumo humano.
Muestra
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 10 10 10
48 15 15 15
72 15 15 20
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
101
GRÁFICO N° 28. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 4 °C.
25
Histamana (ppm)
20
15 Muestra 1
10 Muestra 2
5 Muestra 3
0
0 24 48 72
Tiempo (horas)
102
almacenamiento durante una temperatura de refrigeración, ayuda a que el
nivel de histamina no se eleve tan rápidamente.
Muestras
Horas
1 2 3
0 05 05 05
24 20 20 20
48 40 40 40
72 50 50 50
Calificación
No No No
final de la
Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
60
Histamana (ppm)
40
Muestra 1
20 Muestra 2
0 Muestra 3
0 24 48 72
Tiempo (horas)
103
anchoveta, presentó variación de 20 y 50 ppm a partir de las 24 horas,
siendo apto para el consumo humano.
A partir de las 0 horas de cada especie muestra los niveles de histamina que
va de forma creciente hasta a las 72 horas de cada una de las muestras de
estudio. Pero el valor de histamina de la muestra de anchoveta y a 72 horas
tiene un valor de 50 ppm, valor diez veces más que al valor inicial y en
límite del valor establecido por la FDA y valor dentro de lo establecido por
la CE (Comunidad Europea) y SANIPES.
104
Los resultados mencionados en el cuadro N° 37, para el estudio E2: caballa
son comparados por Gozzi et al. (2011) que muestran su estudio con
caballas mantenidas durante 2 días a la temperatura de 6°C, frecuente en
heladeras domésticas¸ no presentan problemas para la salud humana porque
el contenido de histamina se halló por debajo del máximo permitido
legalmente. En cambio Ayala et al. (2001) reportaron que el nivel de
histamina para anchoveta sometida a temperatura de refrigeración 9±1°C se
mantuvieron sensorialmente aceptables hasta las 18 horas, presentando en
estas condiciones, valores de 4,6 mg de histamina/ 100 g (46 ppm). Se
puede mencionar de que un manejo inadecuado de la temperatura de
almacenamiento influye en el crecimiento del nivel de histamina como
también a una temperatura estable de 4°C puede incrementar mientras
avance el tiempo de almacenamiento, porque una vez formada la histamina,
no se puede destruir (FDA, 2011). A la vez se puede mencionar que debido
a los lípidos de anchoveta al igual que de las demás especies marinas y a
diferencia de a otros animales, se caracterizan por poseer ácidos grasos de
cadena larga (de hasta 24 átomos de carbono) y altamente insaturada (4, 5 o
6 insaturaciones). Dichas insaturaciones hacen que estos lípidos sean muy
susceptibles a la oxidación, alterando de esta manera el sabor, olor y color
de la carne. Además los lípidos oxidados y los productos secundarios de la
oxidación intervienen en la desnaturalización de la proteína, haciendo que
estas pierdan sus propiedades funcionales y nutricionales. (ITP, 2013).
0 5 5 5
24 5 10 20
48 6.667 15 40
72 11.667 16.667 50
105
El comportamiento del nivel de histamina de jurel, caballa y anchoveta
fresco a temperatura de 4 °C es comparado en el siguiente gráfico.
60
50
HISTAMINA (PPM)
40
30 E1: JUREL
20 E2: CABALLA
10 E3: ANCHOVETA
0
0 24 48 72
TIEMPO (HORAS)
106
4.2.3. Influencia de la carga microbiana
El propósito de la evaluación es para ver si la influencia de la carga
microbiana sometida a las mismas condiciones de las diferentes especies
histamínicas, en diferentes niveles obtenidos de histamina, son
proporcionales, las cuales se mantienen a temperatura constante de 4°C
representando resultados en los siguientes cuadros y gráficos.
107
CUADRO N° 38. INFLUENCIA DE LA CARGA MICROBIANA
(UFC/g) DE LA ESPECIE JUREL EN LA FORMACION DE
HISTAMINA (ppm).
1E+18 Especie…
1E+15
1E+12
1E+09
1000000
1000
1
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
108
En el gráfico N° 31 se puede apreciar claramente que la carga microbiana
(UFC/g) si tiene un incremento, durante el transcurso del tiempo y
temperatura constante de 4°C, que se manifiesta a las 0 horas de su
almacenamiento con 50 UFC/g.
25
Especie…
20
Histamina (ppm)
15
10
0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
109
En el gráfico N° 32 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
28 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo apto para el
consumo humano.
110
CUADRO N° 39. INFLUENCIA DE LA CARGA MICROBIANA
(UFC/g) DE LA ESPECIE CABALLA EN LA FORMACION DE
HISTAMINA (ppm).
Cantidad de microorganismos
histaminogénicos (Vibrio sp,
Horas Clostridium sp, Lactobacillus sp, Histamina (ppm)
Salmonella sp, Klebsiella,
Pneumoniae, Proteus) (UFC/g)
0 ---- 05
4 0.8 x 102 05
8 1.5 x 102 05
12 2.4 x 103 05
16 3.1 x 103 05
20 1.8 x 104 05
24 1.6 x 105 05
28 2.6 x 106 10
32 1.1 x 108 15
36 2.5 x 109 15
40 1.4 x 1011 20
44 2.8 x 1011 20
48 4.7 x 1012 20
111
GRÁFICO N° 33. INFLUENCIA DE LA CARGA MICROBIANA
(UFC/g) DE LA ESPECIE CABALLA EN LA FORMACION DE
HISTAMINA (ppm) DURANTE 48 HORAS
Especie Caballa
1000000000000
10000000000
Histaminogenicos UFC/g
100000000
1000000
10000
100
1
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
112
GRÁFICO N° 34. VARIACIÓN DEL CONTENIDO DE HISTAMINA
EN LA ESPECIE CABALLA ALMACENADA A 4°C Y EN 48
HORAS
25
Especie Caballa
20
Histamina (ppm)
15
10
0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
113
A las 32 horas la cantidad de microorganismos se incrementa llegando al
límite permisible para el consumo humano que representa 5.1 x 105 (UFC/g)
y con un nivel de histamina de 15 ppm, valor que es tres veces más al valor
inicial.
Cantidad de microorganismos
histaminogénicos (Vibrio sp, Clostridium
Horas Histamina (ppm)
sp, Lactobacillus sp, Salmonella sp,
Klebsiella, Pneumoniae, Proteus) (UFC/g)
0 ---- 05
4 --- 05
8 3.3 x 10 05
12 1.3 x 102 05
16 5.2 x 102 05
20 2.7 x 103 05
24 9.3 x 104 10
28 8.6 x 105 15
32 5.1 x 105 15
36 3.2 x 106 20
40 7.6 x 107 20
44 3.6 x 108 20
48 8.4 x 109 40
114
El comportamiento del crecimiento microbiano de anchoveta fresco a
diferentes tiempos es comparado en el siguiente gráfico.
Especie Anchoveta
10000000000
Histaminogenicos UFC/g
100000000
1000000
10000
100
1
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
115
GRÁFICO N° 36. VARIACIÓN DEL CONTENIDO DE HISTAMINA
EN LA ESPECIE ANCHOVETA ALMACENADA A 4°C Y EN 48
HORAS
45 Especie Anchoveta
40
Histamina (ppm) 35
30
25
20
15
10
5
0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
Tiempo (horas)
116
de la histamina es de 20 ppm en un tiempo de almacenamiento de 48 horas,
también se encuentra dentro de lo establecido por la norma internacional y
nacional. Para las muestras de la especie de anchoveta el valor límite de la
cantidad microbiana llegó a las 32 horas con un 5.1 x 105 (UFC/g), pero a
las 48 horas la cantidad de histamina es de 40 ppm, valor que se encuentra
dentro del rango establecido por la FDA. En cambio, si rechazamos por
medio del valor límite de la cantidad microbiológica en pescado por las
normas nacionales e internacionales se estaría descartando el pescado entre
las 20 y 24 horas, pero a temperatura constante de 4°C, la formación de
histamina en este estudio es de 5 ppm y 10 ppm durante 20 y 24 horas de
almacenamiento, por lo que decimos que está apto para el consumidor, ya
que se encuentra dentro de lo establecido por las normas. Esta alteración de
resultados en este estudio evidencia, que no se ajusta a la influencia de
microorganismos a la producción de histamina debido a que los
microorganismos histamínicos son por lo general mesófilos ,Jeri, (2002) del
grupo Enterobacteriaceae ciertos, Morgonella morganii, Klebsiella
pneumoniae y Hafnia alvei que son los productores más potentes de
histamina, porque estas se desarrollan bien a partir de los 10 °C, pero a 5°C
el crecimiento se retarda apreciablemente, como también Morgonella
morganii, no sintetiza histamina cuando el musculo del pescado se
encuentra en todo momento menor a 5°C, sin embargo Morgonella
morganii, libera histamina a bajas temperaturas de (0 a 5°C) posterior a un
día de conservación y a mayores de conservación temperaturas de (10 a
25°C).
Por lo tanto Ababouch, 1991; Okuzumi et al. (1984) citado por Ayala et al.
(2001) mencionan en su estudio que no debe esperarse una relación
proporcional entre los valores de histamina con los de contaminación
microbiana, puesto que no necesariamente todas las bacterias cultivadas en
las condiciones de estudio, son capaces de sintetizar histidina
descarboxilasa. De acuerdo a este estudio y datos obtenidos en laboratorio,
sobre las UFC de microorganismos cultivados no fueron específicas para el
estudio de la formación de histamina, las cuales no todas se encontraron en
las mismas condiciones de sintetizar la histina. Por su parte Naila et al.
117
(2010) encontraron en su estudio, que la formación de aminas biógenas en el
pescado, depende de la temperatura, cuya disminución inhibe el crecimiento
microbiano y reduce la actividad enzimática.
Cantidad de Cantidad de
Cantidad de
Histamina microorganismos Histamina microorganismos Histamina
HORAS microorganismos
(ppm) histaminogénicos (ppm) histaminogénicos (ppm)
histaminogénicos
(UFC/g) (UFC/g)
(UFC/g)
0 50 5 ---- 5 ---- 5
118
GRÁFICO N° 37.
1.00E+20 6.40E+19
1.00E+19
1.00E+18
1.00E+17 1.40E+17
1.00E+16
4.40E+15
1.00E+15
MICROORGANISMOS (UFC/G)
1.00E+14
4.70E+13
1.00E+13 1.20E+13
1.40E+12 2.80E+12
1.00E+12
1.00E+11 8.40E+10
3.20E+10 2.50E+10
1.00E+10
3.60E+09
1.00E+09 8.70E+08 1.10E+09 7.60E+08
4.20E+08
1.00E+08
2.90E+07 2.60E+07 3.20E+07
1.00E+07 8.60E+06 5.10E+06
1.00E+06 2.50E+06 1.60E+06
9.30E+05
3.20E+05 1.80E+05
1.00E+05
2.70E+04 2.40E+04 3.10E+04 2.70E+04
1.00E+04 1.30E+04
5.20E+03
1.00E+03 8.00E+02 1.50E+03 1.30E+03
3.30E+02
1.00E+02 5.00E+01
20 20 20 40
20
1.00E+01 10 15
10 15
10 15 15
5 5 5 5 5 5 5
1.00E+00
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
TIEMPO (HORAS)
119
En el gráfico N° 37 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento a 0 horas, pero a partir de las
28 horas muestra elevado contenido de histamina, siendo apto para el
consumo humano en las tres especies.
Ababouch, 1991; Okuzumi et al. (1984) citado por Ayala et al. (2001)
mencionan en su estudio que no debe esperarse una relación proporcional
entre los valores de histamina con los de contaminación microbiana, puesto
que no necesariamente todas las bacterias cultivadas en las condiciones de
estudio son capaces de sintetizar histidina descarboxilasa.
120
4.2.4. Forma de almacenamiento
Muestras:
Horas F1= ENTERA
F1.1 F1.2 F1.3
0 05 05 05
24 05 05 10
48 10 10 15
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
121
El comportamiento del nivel de histamina de jurel fresco de forma entera a
temperatura de 4 °C es comparado en el siguiente gráfico.
16
14
12 F1.1
Histamina (ppm)
10
8
F1.2
6
4
2 F1.3
0
0 24 48
Tiempo (horas)
122
CUADRO N° 43. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) EN LA ESPECIE
JUREL A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA DE FORMA
HG.
Muestras:
Horas F2= HG
F2.1 F2.2 F2.3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 10 05 05
Calificación final de
Admitidos Admitidos Admitidos
la frescura
12
10 F2.
Histamina (ppm)
8 1
6
F2.
4 2
2
F2.
0 3
0 24 48
Tiempo (horas)
123
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. La forma de almacenamiento de la especie jurel de tipo
de corte HG contiene un nivel de histamina de 10 ppm como se muestra el
gráfico N°39, que de acuerdo a la FDA (2011) menciona que la evisceración
y la extracción de las branquias pueden reducir, aunque no eliminar, la
cantidad de bacterias formadoras de histamina.
Muestras:
Horas F3= ENTERA SIN VISCERAS
F3.1 F3.2 F3.3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 10 10 10
Calificación final de la
Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
124
El comportamiento del nivel de histamina de jurel fresco de forma entera sin
vísceras a temperatura de 4 °C es comparado en el siguiente gráfico.
12
F3.
10 1
Histamina (ppm)
8
6 F3.
2
4
2
F3.
0 3
0 24 48
Tiempo (horas)
125
horas se mantuvo el valor obtenido inicialmente en 5 ppm, por lo que
también se da mención de la calificación de la frescura con resultados
admitidos para el consumo humano.
Muestras:
Horas F4= FILETES
F4.1 F4.2 F4.3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 05 05 05
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
6
5
F4.1
Histamina (ppm)
4
3
F4.2
2
1 F4.3
0
0 24 48
Tiempo (horas)
126
En el gráfico N° 41 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. La forma de almacenamiento de la especie jurel de tipo
de corte en filete, contiene un nivel de histamina de 5 ppm como se muestra
el gráfico N°41, que de acuerdo a la FDA (2011) menciona que la
evisceración y la extracción de las branquias pueden reducir, aunque no
eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de histamina, sin embargo,
Ramírez (2009) cuando se realiza incorrectamente, el enfriamiento del
pescado, pueden acelerar el proceso de desarrollo de histamina en las partes
comestibles del pescado al propagar las bacterias desde la cavidad visceral a
la carne del pescado.
127
CUADRO N° 46. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA DE
FORMA ENTERA.
Muestras:
Horas F1= ENTERA
F1.1 F1.2 F1.3
0 05 05 05
24 10 10 10
48 15 20 20
Calificación final de la
Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
25
20
F1.1
Histamina (ppm)
15
10 F1.2
5
0 F1.3
0 24 48
Tiempo (horas)
128
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados
Muestras:
Horas F2= HG
F2.1 F2.2 F2.3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 10 05 05
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
129
GRÁFICO N° 43. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA DE
FORMA HG.
12
10 F2.
1
Histamina (ppm)
8
6 F2.
4 2
2
F2.
0 3
0 24 48
Tiempo (horas)
130
Paralelamente la calificación final de la frescura es admitida para el
consumo humano.
Muestras:
Horas F3= ENTERA SIN VISCERAS
F3.1 F3.2 F3.3
0 05 05 05
24 10 05 10
48 15 15 15
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
16
14
F3.
12
Histamina (ppm)
1
10
8 F3.
6 2
4
2 F3.
3
0
0 24 48
Tiempo (horas)
131
En el grafico N° 44 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. La forma de almacenamiento de la especie caballa de
tipo de corte entera sin vísceras, contiene un nivel de histamina de 10 ppm
como se muestra el gráfico N°44, que de acuerdo a la FDA (2011) menciona
que la evisceración y la extracción de las branquias pueden reducir, aunque
no eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de histamina
132
El comportamiento del nivel de histamina de caballa fresco de forma de
filete a temperatura de 4 °C es comparado en el siguiente gráfico.
6
5
Histamina (ppm)
F4.
4
1
3 F4.
2 2
1
0
0 24 48
Tiempo (horas)
133
En el cuadro N° 50 y gráfico N° 46 muestran la determinación de histamina
(ppm) en la especie anchoveta a temperatura de 4 °C almacenada en 48
horas de forma entera, las muestras presentaron valores máximos de 40
ppm, siendo ocho veces más al valor inicial y en 0 horas. Por lo que
decimos que el valor de histamina está por debajo de 50 ppm, establecido
por la FDA.
50
Histamina (ppm)
40 F1.1
30
20 F1.2
10
0 F1.3
0 24 48
Tiempo (horas)
134
En el gráfico N° 46 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados
Muestras:
Horas F2= HG
F2.1 F2.2 F2.3
0 05 05 05
24 15 10 15
48 20 15 20
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
135
El comportamiento del nivel de histamina de anchoveta fresco de forma de
HG a temperatura de 4 °C es comparado en el siguiente gráfico.
25
20 F2.1
Histamina (ppm)
15
10 F2.2
5
F2.3
0
0 24 48
Tiempo (horas)
136
En el cuadro N° 52 y gráfico N° 48 muestran la determinación de histamina
(ppm) en la especie anchoveta a temperatura de 4 °C almacenada en 48
horas de forma entera sin vísceras, una de las muestras presentaron valores
máximos de 40 ppm, siendo ocho veces más al valor inicial y en 0 horas.
Por lo que decimos que el valor de histamina está por debajo de 50 ppm,
establecido por la FDA.
Muestras:
Horas F3= ENTERA SIN VISCERAS
F3.1 F3.2 F3.3
0 05 05 05
24 15 15 20
48 20 20 40
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
137
GRÁFICO N° 48. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
ANCHOVETA A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA DE
FORMA ENTERA SIN VISCERAS.
25
20
F2.1
Histamina (ppm) 15
10
F2.2
5
0 F2.3
0 24 48
Tiempo (horas)
138
Paralelamente la calificación final de la frescura es admitida para el
consumo humano directo.
Muestras:
Horas F4=FILETES
F4.1 F4.2 F4.3
0 05 05 05
24 05 05 05
48 10 15 10
Calificación
final de la Admitidos Admitidos Admitidos
frescura
20
15 F4.1
Histamina (ppm)
10 F4.2
5 F4.3
0
0 24 48
Tiempo (horas)
139
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. La forma de almacenamiento de la especie anchoveta
de tipo de corte en filete, muestra una variación de histamina en 10 y 15
ppm como se muestra el grafico N°49, que de acuerdo a la FDA (2011)
menciona que la evisceración y la extracción de las branquias pueden
reducir, aunque no eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de
histamina, sin embargo, Ramírez (2009) cuando se realiza incorrectamente,
el enfriamiento del pescado, pueden acelerar el proceso de desarrollo de
histamina en las partes comestibles del pescado al propagar las bacterias
desde la cavidad visceral a la carne del pescado.
140
pueden reducir, aunque no eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de
histamina (FDA, 2011).
E1: JUREL
HORAS
F1 F2 F3 F4
0 5 5 5 5
24 5 5 5 5
48 11.667 6.667 10 5
14
11.667 JUREL: ENTERA
12
10
HISTAMINA (PPM)
10
JUREL: HG
8 6.667
6 5 5 5 5 5 5 5 5 5
JUREL: ENTERA SIN
4 VISCERA
2 JUREL: FILETES
0
0 24 48
TIEMPO (HORAS)
141
En el gráfico N° 50 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados.
142
CUADRO N° 55. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
CABALLA A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA EN
FORMA DE (F1): ENTERA, (F2): HG, (F3): ENTERA SIN VISCERA,
(F4): FILETE.
E2: CABALLA
HORAS F1 F2 F3 F4
0 5 5 5 5
24 10 5 8.333 5
48 18.333 6.667 15 5
20 18.333
18
16 15 CABALLA: ENTERA
HISTAMINA (PPM)
14
12 10 CABALLA:HG
10 8.333
8 6.667
6 5 5 5 5 5 5 5 CABALLA: ENTERA SIN
4 VISCERA
2 CABALLA: FILETES
0
0 24 48
TIEMPO (HORAS)
143
En el gráfico N° 51 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados.
144
CUADRO N° 56. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LA ESPECIE
ANCHOVETA A TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA EN FORMA
DE (F1): ENTERA, (F2): HG, (F3): ENTERA SIN VISCERA, (F4): FILETE.
E3: ANCHOVETA
HORAS F1 F2 F3 F4
0 5 5 5 5
45 40
40 ANCHOVETA: ENTERA
35
HISTAMINA (PPM)
30 26.667 ANCHOVETA: HG
25
18.33316.667 18.333
20
13.333 11.667 ANCHOVETA: ENTERA
15
10 SIN VISCERA
5 5 5 5 5
5
ANCHOVETA: FILETES
0
0 24 48
TIEMPO (HORAS)
145
En el gráfico N° 52 se puede apreciar claramente que la temperatura de 4°C
si tiene una influencia sobre el nivel de histamina en el tiempo, que se
manifiesta en el primer día de almacenamiento 0 horas. En cuanto a la
forma de almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre
la variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. De acuerdo a la FDA (2011) menciona que la
evisceración y la extracción de las branquias pueden reducir, aunque no
eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de histamina.
146
Para las muestras de las especies en forma de filetes de jurel y caballa
durante 48 horas presentó el mismo valor en 5 ppm al valor inicial en 0
horas, pero para las muestras de anchoveta obtuvo un valor de 11.667 ppm,
valor dos veces más aproximadamente al valor inicial.
147
su evisceración y mantenimiento en condiciones mínimas de enfriamiento.
Esto con el motivo de que las bacterias propias de la especie en condiciones
no adecuadas de conservación, los pescados de carne oscura sufren
descomposición bacteriana llevando a descarboxilación de aminoácido L-
histidina originando la formación de histamina (Field y Calderón, 2008).
Por otro lado Benner et al. (2009) en sus estudio mencionan la presencia de
histamina en el pescado, que está relacionada con una falta de control de
temperatura y tiempo. Además, la formación de histamina puede ser
influenciada por debilitación. Por ejemplo, en el atún de aleta amarilla sin
eviscerar se almacena a 30 °C durante 12 horas, el nivel máximo de
histamina fue de 2 400 mg / kg, (2400 ppm) pero en el atún eviscerado,
almacenado en las misma condición, fue de 16 mg / kg (16 ppm).
148
CUADRO N° 57.
TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA EN FORMA DE (F1): ENTERA, (F2): HG, (F3): ENTERA SIN VISCERA,
(F4): FILETE.
0 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
149
GRÁFICO N° 53. NIVEL DE HISTAMINA (ppm) DE LAS ESPECIES JUREL, CABALLA Y ANCHOVETA A
TEMPERATURA DE 4 °C ALMACENADA EN FORMA DE (F1): ENTERA, (F2): HG, (F3): ENTERA SIN VISCERA,
(F4): FILETES.
45
40
40
JUREL: ENTERA
35 JUREL: HG
JUREL: ENTERA SIN VISCERA
30
JUREL: FILETES
HISTAMINA (PPM)
26.667
25 CABALLA: ENTERA
CABALLA:HG
20 18.333 18.333 18.333
16.667 CABALLA: ENTERA SIN VISCERA
15 CABALLA: FILETES
15 13.333
11.667 11.667 ANCHOVETA: ENTERA
10 10
10 8.333 ANCHOVETA: HG
6.667 6.667
5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 ANCHOVETA: ENTERA SIN VISCERA
5
ANCHOVETA: FILETES
0
0 24 48
TIEMPO (HORAS)
150
En el gráfico N° 53 se puede apreciar claramente que la forma de
almacenamiento de acuerdo al tipo de corte, sí tiene una influencia sobre el
nivel de histamina en el tiempo, que se manifiesta en el primer día de
almacenamiento 0 horas en las tres especies. En cuanto a la forma de
almacenamiento las vísceras y agallas tienen una influencia sobre la
variación de histamina. Ayala et al. (2001) señalan que también podría
atribuirse al incremento de las bacterias formadoras de histidina
descarboxilasa, por acción de las enzimas proteolíticas de los fluidos
viscerales, cuya actividad aumenta con la temperatura y la presencia de
sustratos adecuados. De acuerdo a la FDA (2011) menciona que la
evisceración y la extracción de las branquias pueden reducir, aunque no
eliminar, la cantidad de bacterias formadoras de histamina.
151
CONCLUSIONES
152
RECOMENDACION
153
BIBLIOGRAFÍA
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159
ANEXOS
160
ANEXO I
PRODUCTO NIVEL
ALIMENTOS PISCÍCOLAS LISTOS PARA COMER (COCCIÓN Listeria monocytogenes - presencia del organismo en una muestra de
TODOS LOS PESCADOS Salmonella spp. - presencia del organismo en una muestra de gramos.
ALIMENTOS PSICOLAS LISTOS PARA COMER (COCCIÓN MINIMA Vibrio cholerae - presencia del agente toxico O1 o O139 o no-O1 y no-
DE PARTE DEL CONSUMIDOR) O139 en una muestra de 25 gramos
ALIMENTOS PISCÍCOLAS LISTOS PARA COMER (COCCIÓN Vibrio parahaemolyticus - niveles iguales a o más de 1 x 104/g
MÍNIMA DE PARTE DEL CONSUMIDOR) (Positiva o negativa para Kanagawa)
ALIMENTOS PISCÍCOLAS LISTOS PARA COMER (COCCIÓN Vibrio vulnificus - presencia del organismo.
MÍNIMA DE PARTE DEL CONSUMIDOR)
ALMEJAS, OSTRAS Y MEJILLONES PROCESADOS DESPUÉS DE SU Vibrio parahaemolyticus - niveles menores de 30/g (MPN).
RECOLECCIÓN Y VIEIRAS CON HUEVAS Y VIEIRAS ENTERAS,
FRESCOS O CONGELADOS, CUYAS ETIQUETAS MANIFIESTAN,
"PROCESADO PARA REDUCIR VIBRIO VULNIFICUS A NIVELES
NO DETECTABLES"
Clostridium botulinum -
2. Presencia de la toxina.
Microbiología -
TODOS LOS PESCADOS Bifenilos policlorinados (PCB) - 2.0 ppm (porción comestible).
PECES MARINOS DE ESCAMA Y MOLUSCOS Aldrina y dieldrina - 0.3 ppm (porción comestible).
161
ANCAS DE RANA Benzena hexachloruro (BHC) - 0.3 ppm (porción comestible).
Clordecona - 0,4 ppm para carne de cangrejo y 0,3 ppm para otros
TODAS LOS PESCADOS
pescados (porción comestible).
TODAS LOS PESCADOS DDT, TDE y DDE - 5.0 ppm (porcion comestible).
162
ANEXO II
Criterios de seguridad alimentaria
Plan de Método
Microorganismos, Limites Fase en que se
muestreo analítico
Categoría de alimentos sus toxinas y aplica el
de
metabolitos n c m M criterio
referencia
Productos
1.26. Productos de la pesca procedentes de especies de 100 200 comercializados
Histamina 9 2 HPLC
pescados asociados a un alto contenido de histamina mg/kg mg/kg durante su vida
útil
Productos
1.27. Productos de la pesca sometidos a tratamientos de
200 400 comercializados
maduración enzimática en salmuera, asociados a un alto Histamina 9 2 HPLC
mg/kg mg/kg durante su vida
contenido de histidina
útil
163
ANEXO III
164
ANEXO IV
165
ANEXO V
o 288 micropozos desglosables recubiertos con anticuerpos y 288 micropozos desglosables para mezclado con marca roja.
o 6 sobres conteniendo polvo Buffer diluente (sample diluent) para extracto de muestra (10 mM PBS). Se disuelve 1 sobre en 1
o 2 frasco cada uno con 40 ml de Buffer de lavado concentrado (Wash buffer)). El contenido de 1 frasco se disuelve en 960 ml
Nota: esta descripción de componentes corresponden al kit ALERT histamina de 288 pozos. Para el kit ALERT de 24 pozos, todos estos
componentes están presentes, pero en las cantidades necesarias para correr la prueba adecuadamente.
La histamina de la muestra previamente homogenizada se extrae mediante la adición de agua destilada en cantidad especificada según el
nivel de histamina a detectar. Se agita la mezcla. La solución extraída es filtrada y una fracción de esta es colocada y mezclada dentro de
ALERT histamina es una prueba ELISA directa competitiva y mediante la adición de reactivos proveídos por el fabricante en una
secuencia propia del método, darán lugar a que los pozos blancos que contienen anticuerpos de captura permiten la determinación visual
tipo punto de corte o semicuantitativa del nivel de histamina de la muestra. Al final de la prueba, la referente histamina del Kit ALERT
genera un tono de color que no es ni azul ni rojo a fin de poder comparar los resultados de las muestras.
Si la muestra es más azul que el color del referente se considera que la muestra tiene menos histamina.
Si la muestra es más roja que el color del referente se considera que la muestra tiene más histamina.
166
ESPECIFICACIONES
FDA 2001. Presentation on October 26,2001, 4th World Fish Inspection & Quality Control Congress, Vancouver, B.C.
Performance of Histamine Test Kits for Applications to Seafood. Walter F. Staruszkiewicz and Patricia L. Rogers, Ph.D.
http://seafood.ucdavis.edu/ORGANIZE/wstar2rtf.rtf..
FDA 2003 Performance of Histamine Test Kits for Applications to Seafood. P. L. Rogers, Ph.D., is Chemist and W. F.
Staruszkiewicz is Research Chemist, US Food & Drug Administration, 200 C St. S.W., Washington, D.C. 20204
http://seafood.ucdavis.edu/pubs/histamine.htm
El Seafood Network le reconoce la capacidad de detectar correctamente cifras tan bajas como 2 ppm de histamina.
http://seafood.ucdavis.edu/haccp/compendium/chapt27.htm
Neogen Corporation
Información sobre los métodos para determinar histamina en la web del fabricante:
http://www.neogen.com/FoodSafety/FS_Product_List.asp?Test_Kit_Cat=207a
6 de junio 2015
LAPROVET eirl
167
ANEXO VI
168
ANEXO VII
169
ANEXO VIII
Pigmentación Perdida de
tornasolada, colores resplandor y de
Apagada sin brillo,
vivos y brillantes brillo, colores Pigmentación muy
colores diluidos, piel
Piel con irisaciones clara más apagados, apagada la piel se 9 9 9
doblada cuando se
diferencia entre menor diferencia desprende de la carne
curva el pez
superficie dorsal y entre superficie
ventral. dorsal y ventral
Consistenc
Bastante rígida,
ia de la Muy firme, rígida Un poco blanda Blanda (flácida) 9 9 9
firma
carne
Plateados,
Parduscos y con
Ligeramente
Opérculos Plateados derrames sanguíneos Amarillentos 9 9 9
teñidos, de rojo o y amplios
marrón
Convexo y
Convexo,
ligeramente Plano; pupila
abombado, pupila Cóncavo en el centro,
hundido, pupila borrosa; derrames
Ojo azul negruzca, pupila gris, cornea 9 9 9
oscura, cornea sanguíneos alrededor
brillante “parpado” lechosa
ligeramente del ojo
Transparente
opalescente
Color menos
Color rojo vivo a vivo, mas pálido Engrosándose y
Amarillentas,
Branquias purpura uniforme en los bordes , decolorándose 9 9 9
mucosidad lechosa
sin mucosidad mucosidad mucosidad opaca
transparente
170
171