Seimc-Procedimiento24a ETS

Procedimiento de Microbiología Clínica
Recomendaciones de la Sociedad Española de

Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
Diagnóstico microbiológico de las

24a. infecciones de transmisión sexual
y otras infecciones genitales
Editores Coordinador Autores
Emilia Cercenado Mansilla Fernando Vázquez Valdés Juan Carlos Galán Montemayor
Rafael Cantón Moreno José Antonio Lepe Jiménez
Luis Otero Guerra
Judit Serra Pladevall
Fernando Vázquez Valdés
ISBN: 978-84-09-07783-0
EDITORES:
Emilia Cercenado Mansilla. Servicio de Microbiología. Hospital General Universitario Gregorio Marañón. Madrid.
Rafael Cantón Moreno, Servicio de Microbiología. Hospital Universitario Ramón y Cajal e Instituto Ramón y Cajal de
Investigación Sanitaria (IRYCIS). Madrid.
SUGERENCIA DE CITACIÓN:
Galán Montemayor JC, Lepe Jiménez JA, Otero Guerra L, Serra Pladevall J, Vázquez Valdés F. Diagnóstico micro-
biológico de las infecciones de transmisión sexual y otras infecciones genitales. 2018. 24a. Vázquez Valdés F (coor-
dinador). Procedimientos en Microbiología Clínica. Cercenado Mansilla E, Cantón Moreno R (editores). Sociedad
Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica (SEIMC). 2018
AVISO:
Reservados todos los derechos. Los documentos SEIMC o cualquiera de sus partes no podrán ser reproducidos, al-
macenados, trasmitidos, distribuidos, comunicados públicamente o transformados mediante ningún medio o sistema
sin la previa autorización de sus responsables, salvo excepción prevista por la ley. Cualquier publicación secundaria
debe referenciarse incluyendo “Este documento ha sido elaborado por la SEIMC (Sociedad Española de Enferme-
dades Infecciosas y Microbiología Clínica) y su contenido puede encontrase en la página web www.seimc.org”
Procedimientos en Microbiología Clínica
Recomendaciones de la Sociedad Española de

Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
Editores:
Emilia Cercenado Mansilla
Rafael Cantón Moreno
2 4 a . Diagnóstico microbiológico de las

infecciones de transmisión sexual
y otras infecciones genitales
Coordinador:
Fernando Vázquez Valdés1,2
Autores:
Juan Carlos Galán Montemayor3
José Antonio Lepe Jiménez4
Luis Otero Guerra2,5
Judit Serra Pladevall2,6
Fernando Vázquez Valdés1,2
1
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Central de Asturias; Área de Microbiología, Facultad de Medi-
cina; Instituto Universitario Fernández Vega (IUFV) y Fundación de Investigación Oftalmológica (FIO) e Instituto
de Investigación Sanitaria del Principado de Asturias (ISPA), Oviedo.
2
Grupo de Estudio de Infecciones de Transmisión Sexual (GEITS) de la SEIMC
3
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Ramón y Cajal, Madrid. Instituto Ramón y Cajal de Investiga-
ción Sanitaria (IRYCIS). CIBER en Epidemiología y Salud Pública (CIBERESP). Unidad de Resistencia a Anti-
bióticos y Virulencia Bacteriana, Madrid.
4
Unidad Clínica de Enfermedades Infecciosas, Microbiología y Medicina Preventiva. Hospital Universitario Vir-
gen del Rocío, Sevilla.
5
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de Cabueñes, Gijón. Instituto de Investigación Sanitaria del
Principado de Asturias (ISPA), Oviedo.
6
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Vall d’Hebron; Vall d’Hebron Institut de Recerca (VHIR); Uni-
versitat Autònoma de Barcelona. Barcelona.
DOCUMENTO CIENTÍFICO
Abreviaturas usadas en este documento:
ADN: Ácido desoxirribonucleico

ARN: Ácido ribonucleico
CDC: Center for Disease Control and Prevention
CE: Marcado Unión Europea
CLIA: Quimioluminiscencia
CMI: Concentración mínima inhibitoria
CMV: Citomegalovirus
CT: Chlamydia trachomatis
E: Especificidad
ECDC: European Center for Diseases Prevention and Control
EDO: Enfermedad de declaración obligatoria
EIA: Enzimoinmunoensayo
EPI: Enfermedad Pélvica Inflamatoria
FDA: Food and Drug Administration
GV: Gardnerella vaginalis
HD: Haemophilus ducreyi
HSH: Hombres que tienen relaciones sexuales con hombres
IgG: Inmunoglobulina G
IgM: Inmunoglobulina M
ITS: Infecciones de transmisión sexual
LCR: Líquido cefalorraquídeo
LGV: Linfogranuloma venéreo
LOS: Lipooligosacáridos
MALDI-TOF: Matrix-assisted laser desorption/ Ionization –Time of Flight –Mass Spectrometry
MG: Mycoplasma genitailum
MH: Mycoplasma hominis
mL: Mililitro
Mab: Monoclonal antibody
MAMEF: Tecnología microwave accelerated metal enhanced fluorescence
NG: Neisseria gonorrhoeae
NGS: Next generation sequencing
NM: Neisseria meningitidis
OMP: Proteína de membrana externa
OMS: Organización Mundial de la Salud
PMN: Leucocitos polimorfonucleares
POCT: Point-of-care-test
RPR: Rapid plasma reagin
S: Sensibilidad
SPS: Polianetolsulfonato de sodio
TA: Temperatura ambiente
TAAN: Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos
TP: Treponema pallidum
TPHA: Treponemal pallidum hemagglutination assay
FTA: Fluorescent treponemal assay
TK: Timidin-kinasa
TV: Trichomonas vaginalis
UNG: Uretritis no gonocócia
UNGNC: Uretritis no producidas ni por CT ni por NG
4
UP: Ureaplasma parvum

UU: Ureaplasma urealyticum
VA: Vaginitis aerobia
VB: Vaginosis bacteriana
VDRL: Venereal disease research laboratory
VEB: Virus Epstein-Barr
VHA: Virus de la hepatitis A
VHB: Virus de la hepatitis B
VHC: Virus de la hepatitis C
VHS: Virus del herpes simple
VIH: Virus de la inmunodeficiencia humana
VPH: Virus del papiloma humano
VVZ: Virus varicela zoster
Procedimientos de Microbiología de la SEIMC relacionados con este documento:
- 1. Recogida, transporte y conservación de las muestras

- 1a. Recogida, transporte y procesamiento general de las muestras
- 1b. Recogida, transporte y procesamiento general de las muestras en el Laboratorio de Microbiología
- 2. Serología de las hepatitis víricas
- 2a. Serología de las hepatitis víricas
- 6. Diagnóstico microbiológico de la infección por VIH
- 6a. Diagnóstico microbiológico de la infección por VIH
- 6b. Diagnóstico microbiológico de la infección por el VIH
- 8. Diagnóstico de laboratorio de las infecciones por herpesvirus
- 8a. Diagnóstico de laboratorio de las infecciones por herpesvirus
- 13. Microbiología de la infección perinatal
- 24. Diagnóstico microbiológico de las infecciones de transmisión sexual y otras infecciones genitales
(PNT-ITS-3; PNT-ITS-5, PNT-ITS-6)
- 40. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Mycoplasma spp. y Ureaplasma spp.
- 44. Diagnóstico microbiológico de las infecciones por Chlamydia spp. y especies relacionadas
- 50. Diagnóstico microbiológico de las hepatitis víricas
- 54. Diagnóstico microbiológico de la infección bacteriana asociada al parto y al puerperio
- 57. Diagnóstico microbiológico de la infección por el virus del papiloma humano
- 59. Microbiota
Documentos de Consenso:
Documento de consenso sobre diagnóstico y tratamiento de las infecciones de transmisión sexual en adultos,
niños y adolescentes (marzo 2017). Grupo de expertos del Grupo de Estudio de SIDA de la SEIMC (GESIDA),
Secretaría del Plan Nacional sobre el SIDA (SPNS), Grupo de Estudio de ITS de la SEIMC (GEITS), Grupo
Español para la Investigación de las Enfermedades de Transmisión Sexual de la Academia Española de Der-
matología y Venerología y de la Sociedad Española de Infectología Pediátrica (SEIP). Ministerio de Sanidad,
servicios sociales e igualdad. https://www.seimc.org/contenidos/gruposdeestudio/geits/pcientifica/documen-
tos/geits-dc-ITS-201703.pdf
SEIMC:
- Guía de recomendaciones para el diagnóstico precoz del VIH en el ámbito sanitario

- Documento de consenso sobre las infecciones de transmisión sexual en personas infectadas por el VIH (sep-
tiembre 2010)
- Infecciones de transmisión sexual
5
INDICE DE CONTENIDOS
INDICE DEL DOCUMENTO CIENTÍFICO
1. Introducción.........................................................................................................................................7
1.1. Epidemiología.......................................................................................................................7
1.2. Consideraciones clínicas y síndromes.......................................................................................8
2. Recogida de las muestras................................................................................................................10

2.1. Aspectos generales................................................................................................................10
2.2. Medios de transporte y recogida de las muestras..............................................................10
2.3. Tipos de muestras...................................................................................................................10

3. Transporte y conservación de las muestras.......................................................................................13
4. Manejo de la muestra en su recepción en el laboratorio de Microbiología........................................14

5. Procesamiento de las muestras.........................................................................................................14
5.1. Inoculación........................................................................................................................14
5.2. Pruebas rápidas para el diagnóstico de las infecciones de transmisión sexual (ITS).............15
5.3. Procedimientos específicos de detección de los patógenos causales de las ITS..................19
5.3.1. Microbiota vaginal.....................................................................................................19
5.3.2. Neisseria gonorrhoeae..............................................................................................19
5.3.3. Chlamydia trachomatis...........................................................................................21
5.3.4. Micoplasmas genitales................................................................................................23
5.3.5. Sífilis (Treponema pallidum)......................................................................................24
5.3.6. Donovanosis.........................................................................................................31
5.3.7. Chancroide................................................................................................................31
5.3.8. Herpes genital...........................................................................................................32
5.3.9. Linfogranuloma venéreo............................................................................................34
5.3.10. Vaginosis bacteriana y vaginitis aerobia....................................................................34
5.3.11. Candidiasis genital....................................................................................................36
5.3.12. Tricomoniasis............................................................................................................37
5.3.13. Papilomavirus humanos (verrugas genitales) (VPH).................................................38
5.3.14. Proctocolitis por patógenos entéricos...................................................................39
5.3.15. Proctocolitis por protozoos...................................................................................39
5.3.16. Otros patógenos y cuadros clínicos......................................................................39
5.3.17. ITS en niños......................................................................................................
.........................41
6. Interpretación e información de los resultados..................................................................................41
7. Test de curación de las ITS..........................................................................................................45
8. Bibliografía......................................................................................................................................45
9. Anexos:
Anexo I. Aproximación diagnóstica (algoritmos etiológicos) al paciente con ITS y otras
infeccione genitales ..................................................................................................................47
Anexo II. Evidencias científicas del diagnóstico de las ITS........................................................61
Anexo III. Consejo para realizar una prueba diagnóstica en las ITS según tipo de población...68
DOCUMENTOS TÉCNICOS
PNT-ITS-01. RPR (Rapid Plasma Reagin) para diagnóstico de la infección por Treponema pallidum
PNT-ITS-02. TPHA. Hemaglutinación para diagnóstico de la infección por Treponema pallidum
PNT-ITS-03a. Detección molecular de Chlamydia trachomatis, genotipo de linfogranuloma venéreo
y detección de coinfecciones por dos o más genotipos mediante PCR en tiempo real
PNT-ITS-04. Cultivo y métodos de sensibilidad para Neisseria gonorrhoeae
PNT-ITS-07. Detección molecular del VHS en muestras anogenitales
6
1. INTRODUCCIÓN
Las infecciones de transmisión sexual (ITS) son un esta infección ha cambiado, alcanzando una distribu-
problema de Salud Pública a nivel mundial tanto en ción más amplia. Las tasas de infección por los se-
términos de morbilidad como mortalidad, debido a rovares invasivos de CT son poco orientativas, pero
las complicaciones y secuelas que pueden producir están en continuo aumento. En algunas series alcan-
si no se diagnostican y se tratan rápida y correcta- zan hasta el 10% de las infecciones por CT, pero en
mente. Tanto es así, que la Organización Mundial de otros casos su detección es anecdótica. Esta dispa-
la Salud (OMS) ha establecido una estrategia global ridad es consecuencia por un lado de la escasa im-
para la reducción de las ITS entre 2016 y 2021. plementación de los sistemas de genotipado para la
detección de los serovares L1-L3 (infradiagnóstico),
Existen más de 30 bacterias, virus y parásitos que y por otro lado al cribado sistemático en poblaciones
se transmiten por contacto sexual. Ocho de estos con prácticas sexuales de alto riesgo en centros es-
patógenos son los principales agentes etiológicos pecializados (sobreestimación), ya que el patrón epi-
de ITS. De estos ocho, cuatro causan infecciones demiológico de dicha infección son hombres que tie-
curables [sífilis, gonorrea, infección por Chlamydia nen sexo con hombres (HSH), de entre 35 y 44 años
trachomatis (CT) y tricomoniasis] y cuatro infeccio- y fuertemente asociado a la infección por el VIH.
nes virales incurables [hepatitis B, virus del herpes
simple (VHS), virus de la inmunodeficiencia huma- La infección gonocócica es la segunda ITS de etiolo-
na (VIH) y virus del papiloma humano (VPH]. gía bacteriana más prevalente, después de la infec-
ción por CT. Según datos del European Center for
En este documento se tratarán las principales ITS, Diseases Prevention and Control (ECDC), en 2014
así como otras infecciones genitales que estricta- se notificaron 66.413 nuevos casos de infección por
mente no se transmiten por contacto sexual pero NG en 27 países europeos, lo que representa una
que se procesan de la misma forma. También se tasa de 20 casos por 100.000 habitantes y un incre-
incluyen ITS tratadas con más profundidad en otros mento del 53% respecto el año 2008. El grupo de
documentos (hepatitis, VIH, virus Zika) así como edad entre 15 y 24 años fue el que presentó mayor
patógenos entéricos y protozoos intestinales que prevalencia. Los casos diagnosticados en HSH re-
también pueden ser transmitidos por contacto se- presentaron el 65% de todos los casos detectados
xual. en hombres. En España, según los datos de la Red
Nacional de Vigilancia Epidemiológica, en 2013 se
1.1. EPIDEMIOLOGÍA declararon 3.315 casos de gonococia, que represen-
ta una incidencia de 7,12 casos por 100.000 habitan-
Según la OMS, se calcula que cada año se produ- tes, con un incremento continuo desde el año 2008.
cen en el mundo 357 millones de nuevas ITS, sien-
do las tres principales la infección por CT, Neisseria Las infecciones por TP en España han experimen-
gonorrhoeae (NG) y Treponema pallidum (TP). tado según datos de las enfermedades de decla-
ración obligatoria (EDO), un incremento desde el
La infección por CT es la principal ITS bacteriana a año 2000, si bien a partir de 2011 las cifras se han
nivel mundial y en continuo aumento año tras año. La estabilizado. En 2015 se declararon 3.693 casos
OMS estimó, en 2012, alrededor de 131 millones de con una tasa 7,96 casos por 100.000 habitantes. El
nuevas infecciones por año en el mundo. En Europa principal grupo afectado es el de HSH.
las cifras son de 187 casos por 100.000 habitantes.
Sin embargo, esas cifras son probablemente inferio- Además, el herpes genital es la primera causa de úl-
res a las reales, ya que la mayoría de las infecciones ceras genitales y se calcula que más de 500 millones
por CT son asintomáticas. El patrón epidemiológico de persones viven infectadas por este virus. El VPH
para la infección urogenital no invasiva está mayo- se estima que produce 290 millones de infecciones
ritariamente asociado a jóvenes heterosexuales de diagnosticadas por presencia de ADN viral, 27 millo-
edades comprendidas entre 20 y 24 años. nes de condilomas genitales, 27 millones de lesio-
nes de bajo grado y 1,5 millones de lesiones de alto
Los casos de linfogranuloma venéreo (LGV) han grado. Este virus es también el causante del cáncer
estado, tradicionalmente, asociados a áreas tropica- cervical, que es el segundo cáncer más frecuente en
les. Sin embargo, desde 2003, la epidemiología de las mujeres. En 2008, se estimaron 529.000 nuevos
7
casos de cáncer cervical a nivel mundial. Ébola en 2014 o Zika en 2015-2016 han puesto de
manifiesto la posible de transmisión de estos virus
Otros agentes etiológicos de ITS menos frecuentes por vía sexual, aumentando la lista de agentes infec-
son Mycoplasma genitalium (MG), que se encuentra ciosos asociados a ITS. El virus Zika fue descrito en
en el 10-35% de las uretritis no producidas ni por 1947 en monos de Uganda y 5 años más tarde se
CT ni por NG (UNGNC) en varones. Ureaplasma describió el primer caso en humanos. Sin embargo,
urealyticum (UU) es causa del 5-10% de las uretritis durante 50 años sólo se habían descrito casos es-
no gonocócicas (UNG) agudas, pero no es necesa- porádicos en regiones de África y Asia. No es hasta
riamente patógeno en todos los casos en los que se 2007, cuando se describe un brote por Zika en la Mi-
detecta. cronesia, seguido de un segundo brote más extenso
en 2013-2014 en la Polinesia francesa, hasta la gran
La donovanosis, producida por Klebsiella granulo- explosión en Sudamérica (con epicentro en Brasil)
matis, se considera una ITS tropical con casos es- en 2015-16. Asimismo, en el oeste de África (entre
porádicos y es endémica en India, Papúa-Nueva Guinea, Liberia, Nigeria, Senegal y Sierra Leona) en
Guinea, Sudamérica, Vietnam, Australia y el sur de 2014 tuvo lugar un brote epidémico sin precedentes
África. causado por el virus Ébola y desde aquí se descri-
bieron casos importados y autóctonos por primera
La epidemiología de la infección por Haemophilus vez fuera de África, incluyendo España. Este brote
ducreyi (HD) es pobremente entendida y no se inclu- epidémico generó una gran alarma social, debido a
ye en las ITS curables según la OMS. Actualmente unas muy altas tasas de mortalidad. La infección por
además de úlceras genitales, es una causa frecuen- el virus Ébola se asocia a cuadros de fiebre hemo-
te de úlceras cutáneas crónicas en zonas tropicales rrágica, transmitido por sudor, saliva, orina o sangre
en el sur del Pacífico, sudeste asiático y África. de individuos enfermos, pero el brote de 2014 sirvió
para demostrar que la transmisión sexual también
La epidemiología de Trichomonas vaginalis (TV) no era posible.
es tan conocida, pero se estima que a nivel global
supone cerca de la mitad de las ITS curables. De 1.2. CONSIDERACIONES CLÍNICAS Y SÍN-
todas formas, hay diferencias y fluctuaciones que DROMES
oscilan entre el 3,2% en población general en los
EEUU hasta el 7,5-25% en clínicas de planificación Para el diagnóstico de las ITS, se aconseja una apro-
familiar o <1% en Europa. Es más frecuente en mu- ximación sindrómica, de forma que según el síndro-
jeres entre los 40-49 años. En hombres suele ser me clínico del paciente, se utilizarán unas determina-
asintomática y supone el 10-12% de las UNG. das herramientas y técnicas microbiológicas u otras.
Las ITS se clasifican en (Tablas 1A y 1B y Anexo I.
Otras infecciones genitales que estrictamente no se Algoritmos diagnósticos):
transmiten por contacto sexual pero que se proce-
san de la misma forma son la vaginosis bacteriana A. Infecciones ulcerativas. Las causas más frecuen-
(VB) y la candidiasis genital. La VB tiene una pre- tes de estas infecciones son el VHS y TP (agente
valencia que se sitúa en torno al 29% en Estados causal de la sífilis o lúes); otros agentes etiológicos
Unidos, donde es la primera causa de vaginitis. Ac- menos frecuentes son HD, CT serovariedades L1,
tualmente se dan argumentos para considerarla al L2, L3 (agente causal del LGV), y más excepcional-
menos de transmisión sexual. En Europa las tasas mente, K. granulomatis (antes denominado Calym-
publicadas suelen ser inferiores, entre el 4% y el matobacterium granulomatis, agente causal de la
14% según los países. La mayoría de casos de VB donovanosis o granuloma inguinal).
se dan en mujeres entre 15 y 44 años, mientras que
la incidencia es muy baja tanto en mujeres prepu- B. Infecciones supurativas. Incluye básicamente ure-
berales como en posmenopáusicas. La candidiasis tritis, cervicitis y proctitis. La uretritis gonocócica está
genital es la segunda causa más común de vaginitis producida por NG; y la UNG puede estar causada
en mujeres en edad fértil. por diferentes agentes etiológicos como CT, MG y
UU. Otros agentes menos frecuentes causantes de
Las epidemias recientes de infecciones por arbovi- UNG son VHS, TV, organismos levaduriformes, TP,
rus que por primera vez han afectado a extensos VPH, Adenovirus, Haemophilus spp., Neisseria me-
grupos poblacionales como la infección por virus ningitidis, enterobacterias y microorganismos asocia-
8
dos a la VB. En el caso de la cervicitis, los principales pyogenes, Streptococcus agalactiae, Staphylococ-
agentes etiológicos son CT, NG y MG. Otros microor- cus aureus, E. coli y H. influenzae y con abundantes
ganismos de la microbiota vaginal, como bacterias polimorfonucleares. Otros agentes causales de vul-
anaerobias, estreptococos, estafilococos, Escheri- vovaginitis son: Salmonella spp., Shigella spp., NG,
chia coli y Haemophilus influenzae pueden producir CT, VHS y citomegalovirus (CMV), y en niñas prepu-
infección del trato genital superior. Las infecciones berales, los oxiuros.
mixtas son frecuentes. Los principales agentes cau-
sales de la proctitis son NG, CT (D-K), CT (L1, L2, D. Infecciones parasitarias. En este grupo se en-
L3), TP y VHS. El papel de MG está actualmente en cuentra la escabiosis, causada por Sarcoptes sca-
discusión. biei y la pediculosis causada por Phthirus pubis.
C. Vulvovaginitis. Estrictamente no se considera una E. Infecciones verrugosas o pseudotumorales. In-

ITS excepto en el caso de TV, aunque puede estar cluye las infecciones causadas por el VPH y por Mo-
relacionada en el caso de la VB. El agente etiológi- lluscum contagiosum.
co más frecuente son diferentes especies del género
Candida, que causan la candidiasis vulvovaginal. La F. Otras. Otros agentes causales de ITS son: los
VB es otra entidad muy frecuente, se trata de una virus de las hepatitis (A, B, C), el VIH, CMV y virus
disbacteriosis, resultado del reemplazamiento de los de Epstein-Barr; infección por el virus Zika y el vi-
lactobacilos productores de H2O2 (Lactobacillus cris- rus Ébola y, finalmente, infecciones por patógenos
patus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus jensenii) entéricos (géneros Shigella, Salmonella y Campylo-
por altas concentraciones de Gardnerella vaginalis bacter) y protozoos intestinales (Giardia lamblia,
(GV), bacterias anaerobias (Atopobium vaginae, Mo- Entamoeba histolytica, Cryptosporidium spp. y mi-
biluncus spp., Prevotella spp.), MH, UU y numerosos crosporidios).
anaerobios difíciles de cultivar o no cultivables (gé-
neros Megasphaera, Lachnospira, Sneathia, etc), sin Es importante recordar que a todos los pacientes con
reacción inflamatoria. La vaginitis causada por TV en ITS se les debe realizar una determinación de anti-
nuestro entorno es poco frecuente. La vaginitis ae- cuerpos frente al VIH, especialmente a los pacientes
róbica es otra disbacteriosis causada por sobrecre- con sífilis y úlceras genitales ya que estas patologías
cimiento de ciertos patógenos como Streptococcus favorecen la adquisición y transmisión del VIH.
Tabla 1A. Cuadro clínico y microorganismos implicados en las ITS

Impresión clínica Agentes etiológicos Otros microorganismos implicados/ Comentarios
habituales en ITS
Amnionitis C. trachomatis, Bacteroides spp., Capnocytophaga spp., E. coli, G. vaginalis (tambien en
(líquido amniótico) N. gonorrhoeae, asintomáticas), H. influenzae, H. Parainfluenzae, L. monocytogenes, M.
U. urealyticum hominis, S. agalactiae, S. pyogenes,
Bartolinitis (glándulas C. trachomatis, Anaerobios, bacilos gramnegativos, estreptococos, H. influenzae, S.

de Bartolino)/ N. gonorrhoeae aureus
Esquenitis (glándula
de Skene)
Cervicitis
C. trachomatis, Microorganismos de la microbiota vaginal como estreptococos,
N. gonorrhoeae, estafilococos, E. coli y H. influenzae. Infecciones mixtas.
VHS, M. genitalium
T. vaginalis
EPI (salpingitis)
N. gonorrhoeae, Microorganismos de la microbiota vaginal como estreptococos,
C. trachomatis estafilococos, E. coli y H. influenzae. Anaerobios y G. vaginalis.
M. genitalium Infecciones mixtas.
Endometritis
C. trachomatis, Actinomicetos, Bacteroides spp., enterobacterias, Enterococcus spp., G.
N. gonorrhoeae, vaginalis, H. influenzae, L. monocytogenes, Prevotella bivia, S.
M. genitalium agalactiae , S. pyogenes, M. hominis (en cervix)
Endometritis postparto
- Bacteroides fragilis, B. bivius, B. disiens, cocos anaerobios,
Epididimitis enterobacterias, Enterococcus spp., S. agalactiae
C. trachomatis, Enterobacterias, M. tuberculosis, Pseudomonas spp., Candida spp., virus

N. gonorrhoeae de las paperas
9
Tabla 1B. Cuadro clínico y microorganismos implicados en las ITS

Impresión clínica Agentes Otros microorganismos implicados/ Comentarios
etiológicos
habituales en ITS
Oftalmia neonatorum C. trachomatis, Microorganismos de la microbiota vaginal como estreptococos,
N. gonorrhoeae estafilococos, E. coli y H. influenzae
VHS
Prostatitis
C. trachomatis, E. coli, otras enterobacterias, Enterococcus spp., Pseudomonas spp., S.
N. gonorrhoeae aureus (tambien productor de abscesos prostáticos)
M. genitalium* *Causa de UNG, pero faltan evidencias
T. vaginalis
Úlceras genitales con
linfoadenopatía T. pallidum,H.
ducreyi, C.
trachomatis (LGV),
K. granulomatis,
VHS, VPH
Uretritis masculina
N. gonorrhoeae, C. E. coli, H. influenzae, H. parainfluenzae, S. agalactiae, N. meningitidis,
trachomatis, U. Candida spp., Adenovirus, enterobacterias
urealyticum, M.
genitalium,
T. vaginalis, VHS
Uretritis femenina (y
síndrome uretral) N. gonorrhoeae, E. coli, S. saprophyticus
C. trachomatis, *Faltan evidencias
M. genitalium*
U. urealyticum
Vaginosis bacteriana
- Prevotella spp., Mobiluncus spp., Atopobium vaginae, Gardnerella
vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum y numerosos
anaerobios fastidiosos o no cultivables (géneros Megasphaera,
Vulvovaginitis Lachnospira, Sneathia, etc)
T. vaginalis Candida spp., enterobacterias, S. aureus, S. pyogenes, VHS,

S. agalactiae, Haemophilus spp.
2.RECOGIDA DE LAS MUESTRAS

2.1 ASPECTOS GENERALES
La adecuada toma y transporte de las muestras es técnicas (microscopía, cultivo, biología molecular)
un factor clave en el rendimiento de las técnicas cada toma debe realizarse sobre una zona previa-
microbiológicas. Los microorganismos implicados mente no muestreada, rotando la torunda durante
en las ITS suelen ser de crecimiento fastidioso, unos segundos.
por lo que las técnicas que solamente detectan mi-
croorganismos viables pueden dar resultados fal- Con independencia de los aspectos relacionados
sos negativos si no se siguen de forma estricta las con la seguridad del paciente, estas muestras pue-
normas de recogida y transporte de las muestras. den tener trascendencia legal. Por tanto, las mues-
tras microbiológicas obtenidas deben ser etiqueta-
2.2.MEDIOS DE TRANSPORTE Y RECO- das con el nombre del paciente y/o un identificador
GIDA DE LAS MUESTRAS único, el tipo de muestra y la fecha y hora de la
toma. Además, es muy importante verificar que las
Para el diagnóstico de una ITS, el tipo de muestra a etiquetas identificativas de muestra y solicitud coin-
recoger dependerá de la edad, sexo, prácticas se- ciden.
xuales y manifestaciones clínicas del paciente. Cada
laboratorio puede emplear sistemas de torundas y 2.3.TIPOS DE MUESTRAS
contenedores específicos que dependen del tipo de
muestra, el tipo de determinación que se va a realizar En las Tablas 2A y 2B se detallan las condiciones
y de las recomendaciones del fabricante. En muchos de toma de muestra en función de la localización
casos se recogerán varias muestras para diferentes de la infección.
10
Tabla 2A. Recogida de muestras para el diagnóstico de las ITS

Localización Condiciones de Forma de toma de la Torundas y Comentarios
toma de muestra muestra Contenedores
Anal/rectal Anoscopia Emplear un anoscopio sin Cultivo N. En HSH y VIH
(pacientes lubricar humedecido con gonorrhoeae: positivos con
sintomáticos) agua. Tomar las muestras torundas de dacrón diarrea tomar una
bajo visualización directa o rayón con medio muestra adicional
de las lesiones. de transporte tipo para estudio de
Stuart-Amies con microorganismos
carbón activado. entéricos. Enviar la
TAAN: torundas muestra refrigerada
específicas y (4ºC).
contenedores
específicos.
Anal/rectal Toma sin Insertar la torunda 2-3 cm Cultivo NG: torundas En HSH y VIH
visualización en el canal anal. Presionar de dacrón o rayón positivos con
lateralmente para evitar la con medio de diarrea tomar una
materia fecal y favorecer la transporte tipo muestra adicional
obtención de células Stuart-Amies con para estudio de
epiteliales columnares, carbón activado. patógenos
Rotar la torunda durante TAAN: torundas entéricos. Enviar la
10-30 segundos. Si se específicas y muestra refrigerada
objetiva contaminación contenedores (4ºC).
fecal visible, desechar la específicos.
torunda y obtener nueva
muestra.
Cérvix Exocervix Utilizar un espéculo no TAAN: torundas Son adecuadas
lubrificado para visualizar específicas y para el diagnóstico
el cérvix. Limpiar el moco contenedores del virus del herpes
cervical con una torunda específicos. simple (VHS).
seca y descartarla. Raspar Enviar la muestra
con la torunda las lesiones refrigerada (4ºC).
o úlceras sospechosas.
Cérvix Endocervix Utilizar un espéculo no Cultivo NG: torundas En mujeres
lubrificado para visualizar de dacrón o rayón histerectomizadas,
el cuello uterino. Limpiar el con medio de tomar muestra de
moco cervical con una transporte tipo orina para TAAN o
torunda seca y descartarla. Stuart-Amies y una toma vaginal
Insertar la torunda 2–3 cm carbón activado. para cultivo o
en el canal cervical y rotar TAAN: torundas TAAN. En
durante 5–10 segundos. específicas y prepuberales,
contenedores tomar muestra del
específicos. vestíbulo vaginal
para cultivo o
AANs. Enviar la
muestra refrigerada
(4ºC).
Uretra En hombres, la Hombres: -Usar torundas Cultivo NG: torundas El paciente no
toma de muestra se finas con varilla de de dacrón o rayón debe haber orinado
realiza en la uretra alambre. con medio de en las 2 horas
esponjosa. En la -Si hay secreción, o transporte tipo previas a la
mujer, la uretra se aparece a la presión, Stuart- Amies y realización de la
localiza entre el recoger en la torunda. carbón activado. toma de la
clítoris y el introito -En ausencia de TAAN: torundas muestra. Enviar la
vaginal. secreción, insertar 2-3 cm específicas muestra refrigerada
una torunda fina y rotar 5- (4ºC).
10 segundos.
Mujeres: -Limpiar con gasa
estéril o torunda.
-Estimular la secreción
mediante masaje de la
uretra contra la sínfisis del
pubis a través de la vagina.
Faringe Pilares tonsilares, Utilizar depresor lingual TAAN: torundas No contaminar con
faringe posterior y para una correcta específicas y microbiota de
zonas ulceradas, visualización y rotar la contenedores mucosas y lengua.
inflamadas o con toruda 5–10 segundos. específicos. Enviar la muestra
exudado purulento. refrigerada (4ºC).
11
Tabla 2B. Recogida de muestras para el diagnóstico de las ITS

Localización Condiciones de Forma de toma de la Torundas y Comentarios
toma de muestra muestra Contenedores
Lesiones Lesiones en área Limpiar la lesión con una Para microscopía No adecuado para lesiones
genitales genital gasa estéril empapada con de campo oscuro, orales o rectales.
características solución salina estéril, depositar la Para TAAN, enviar la
de sífilis apretar suavemente la muestra en un muestra refrigerada (4ºC).
primaria base de la lesión hasta que portaobjetos y
se obtenga un líquido observar
claro, si no se obtuviera inmediatamente al
líquido, se debe añadir una microscopio.
gota de solución salina a la TAAN: torundas
lesión o aspirar el material específicas y
de la base de la lesión con contenedores
aguja y jeringa. específicos.
Para TAAN, tomar la
muestra con torunda o el
material aspirado y
depositarlo en un medio de
transporte para virus.
Úcera genital Se limpiará la Si hay una vesícula, Cultivo HD: En el caso de sospecha de
superficie de la aspirar el contenido con torundas de dacrón linfogranuloma venéreo
lesión con una gasa jeringa. En ausencia de o rayón con medio (LGV) se puede realizar
humedecida en vesículas, frotar de transporte tipo una punción de la
suero salino estéril. vigorosamente la base con Stuart-Amies adenopatía. Enviar la
Evitar aplicación la torunda (sin hacer Cultivo viral: muestra refrigerada (4ºC).
previa de sangrar). torundas y medio
antisépticos. de transporte para
virus.
TAAN: torundas
específicas y
contenedores
específicos.
Vagina Visualizar la zona Para cultivo, El exudado vaginal es
mediante la colocación de emplear torundas óptimo para la
espéculo sin lubrificante. de dacrón o rayón recuperación de Candida
Tomar la muestra de la con medio de spp., TV. Cuando se
zona donde el exudado transporte tipo sospeche la infección por
sea más abundante. En Stuart- Amies. NG o CT, se debe realizar
ausencia de exudado TAAN: torundas la toma de exudado
tomar la muestra del fondo específicas. endocervical (excepto en
del saco vaginal posterior. mujeres histerectomizadas
en las que se realiza la
toma en el fornix posterior).
Para TAAN, enviar la
muestra refrigerada (4ºC).
Sangre total Miembros Desinfectar la zona donde Viales de Los hemocultivos son
superiores, se va a realizar la punción hemocultivo positivos en el 10-30% de
preferiblemente venosa. Extraer dos series los pacientes con
vena cefálica o de hemocultivos. Obtener gonococemia.
mediana. de 5-10 mL de sangre total
por vial.
Suero Miembros Desinfectar la zona donde Tubo de vacío con Realizar serología de sífilis
superiores, se va a realizar la punción separador de suero y VIH a todos los pacientes
preferiblemente venosa, obtener de 5-10 con sospecha de ITS.
vena cefálica o mL de sangre total
mediana.
Orina Micción Micción espontanea. Tubo de vacío para Exclusivamente para
espontanea, Obtener 10 mL de orina de orina sin técnicas de TAAN. La
la porción inicial. conservantes recolección de volúmenes
superior a 20 mL diluye la
muestra y puede afectar a
´
la sensibilidad de los
estudios. Enviar la muestra
refrigerada (4ºC).
NOTA: el semen no es una muestra adecuada para el estudio de las ITS, además para el diagnóstico molecular tiene
muchos inhibidores y puede complicar el diagnóstico
12
3.TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE menos estable que el ADN. En ese escenario,

LAS MUESTRAS las muestras biológicas deben inocularse en me-
dios de transporte que lleven estabilizantes, como
Los principales agentes infecciosos implicados en PreservCyt® o Thinprep. En esas condiciones las
las ITS son no cultivables como TP, fastidiosos muestras pueden conservarse a temperatura am-
(CT) o muy sensibles a las condiciones de trans- biente (TA) hasta 60 días, pero la no utilización
porte y conservación (TV o NG). Por lo tanto, esta de medios con estabilizantes invalidaría la prueba
es una de las etapas más críticas en el proceso de diagnóstica basada en detección de ARN. La es-
aislamiento e identificación de los agentes infec- trategia basada en serología, tradicionalmente no
ciosos relacionados con ITS que pude dar lugar a ha requerido condiciones estrictas y bastaba 1 mL
resultados falsos negativos. En la era pre-TAAN, de suero para el diagnóstico de agentes infeccio-
la opción óptima era la inoculación directa de la sos como TP, VIH o virus hepatotropos (VHA, VHB
muestra en un medio de cultivo, pero este esce- o VHC) que una vez centrifugada la sangre (tubo
nario idóneo era pocas veces realizable. Por ello, de 5 mL de sangre con gel separador), el suero se
el desarrollo de las TAAN ha ido progresivamente podía guardar a temperatura de 4ºC por 4-5 días.
instaurándose como el método de referencia para En estos casos, lo más importante era separar el
el diagnóstico de las ITS, ya que las condiciones suero, sin mucha dilación. Sin embargo, los nue-
de transporte y conservación de las muestras no vos algoritmos diagnósticos para detección del
son tan estrictas. Si bien la estabilidad del material VIH o virus hepatotropos que combinan técnicas
biológico dependerá del tipo de ensayo comercial serológicas con técnicas moleculares implican la
empleado, previamente a la toma de muestra se necesidad de acortar los tiempos de separación de
deberá consultar con el fabricante sobre las condi- suero, para evitar posibles degradaciones del ARN
ciones de almacenaje y transporte. En ocasiones (caso de VIH o VHC). Finalmente, la estrategia
es necesario disponer de microorganismos via- basada en cultivo es la que requiere condiciones
bles, por lo que el cultivo es altamente recomenda- más estrictas para evitar fracasos de aislamiento
ble en dos escenarios muy concretos: conocer los bacteriano o discrepancias entre TAAN y cultivo,
perfiles de resistencia antibiótica de algunos mi- de especial relevancia en casos de agresiones se-
croorganismos y para propósitos médico-legales. xuales. En la infección por NG es especialmente
importante el estudio de la sensibilidad antibiótica,
En esta sección se describen conceptos genera- para lo que es necesario microorganismos viables.
les. Entre las medidas generales que condicionan Los hisopos podrán introducirse en un medio de
el rendimiento óptimo, se debe recordar que cual- transporte no nutritivo (como Stuart o Amies con
quier toma debe realizarse antes de iniciar el trata- carbón activado) o un medio nutritivo (como Trans-
miento antimicrobiano. También que se debe evitar grow, GonoPak o InTray GC). En el primer caso,
el uso de antisépticos o lubricantes ya que pueden la tasa de recuperación de organismos viable es
inhibir el crecimiento de algunos microorganismos. máxima si el medio de Stuart o Amies se conserva
Además, hay que asegurarse de que los hisopos y entre 2-8ºC antes del transporte al laboratorio. Si
medios de transporte no contengan sustancias in- esto no fuera posible o el tiempo hasta inocula-
hibidoras de las TAAN. Por último, dependiendo de ción en medios de cultivo fuera >24h se recomien-
la estrategia o propósito del diagnóstico (cultivo, da medios nutritivos. En este caso, se alcanza la
serología o TAAN) deben seguirse unas recomen- máxima supervivencia cuando las muestras en
daciones más o menos estrictas ya que no todos el medio de trasporte se preincuban a 37ºC/24 h
los tipos de muestras sirven para todas las estra- antes del transporte al laboratorio, pero el tiempo
tegias (por ejemplo, la muestra de exudado vagi- de envío al laboratorio no debe ser superior a 72
nal puede servir para técnicas TAAN específicas horas.
para gonococo, pero no para el cultivo). Cuando la
estrategia es la detección molecular, el transpor- El diagnóstico de ITS es sindrómico, es decir que la
te y conservación de muestras es menos estricto, toma de muestra dependerá de la presentación clí-
siempre que en cada caso se sigan las indicacio- nica pero también de la historia del paciente (edad,
nes de los fabricantes. Sin embargo, es necesario sexo, comportamiento sexual o cirugías como his-
tener cuidado cuando el diagnóstico se base en terectomía…). Sin embargo, hay situaciones que
detección de ARN (por ejemplo en algunas plata- pueden estar asociadas a varios agentes infeccio-
formas para detección de CT o VPH), ya que es sos (por ejemplo, úlceras genitales), pueden exis-
13
tir coinfecciones (muy frecuente la coinfección por para un determinado microorganismo, o bien pue-
NG y CT) o tratarse de portadores asintomáticos den tener menor sensibilidad que las estrategias
(frecuente en las infecciones extragenitales, como TAAN frente a un solo microorganismo. Un ejem-
orofaringe). En estos casos las TAAN tienen una plo es la detección de MG ya que su carga bac-
gran ventaja ya que muchos medios de transporte teriana es 100 veces inferior que la de CT, por lo
son genéricos para múltiples microorganismos y que si se emplean medios muy diluidos, se pueden
las plataformas actuales permiten un cribado de obtener resultados falsos negativos, aun habiendo
múltiples agentes en un único ensayo; mientras conservado y transportado la muestra en condicio-
que el cultivo debe ser muy específico de cada es- nes adecuadas.
pecie, como el de NG o VHS. Sin embargo, pese
a la generalización de las TAAN frente a múltiples En la Tabla 3 se detallan la temperatura de conser-
dianas, estas pueden presentar baja sensibilidad vación y el tiempo máximo de envío al laboratorio.
Tabla 3. Transporte y tiempo óptimo de transporte

Agente Transporte y tiempo de transporte óptimo
CT TA, 2 días (para cultivo refrigerar a 4ºC y <2 h)

EPI Frasco de hemocultivo TA, 30 minutos a 1 h
Granuloma inguinal TA, 2 h
HD TA (envío inmediato al laboratorio)
Levaduras TA, 2 h (examen en fresco), 12h (cultivo), ADN (7 días)
LGV TA, 2 h (envío inmediato si se realiza cultivo celular); 2 días o refrigerada si
TAAN
NG Refrigerado, TA y cultivo (≤1h). TAAN (2 días)
Piojos TA, 1h
Sarna TA, 1h
TP TA, campo oscuro (envío inmediato), serología (2 h)
TV TA, salino (30 minutos- óptimo a 2 h), cultivo (envió inmediato), antígeno (24 h) y
TAAN (7 días)
VB TA, salino (2 h), tinción de Gram (12 h), TAAN (7 días)
VHS TA, si cultivo y >2 h refrigerar la muestra
VPH TA, 48 h
4. MANEJO DE LA MUESTRA EN SU RE- 5. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

CEPCIÓN EN EL LABORATORIO DE MI-
CROBIOLOGÍA 5.1. INOCULACIÓN
Las muestras deben recibirse en el laboratorio Los patógenos causantes de ITS son en muchas
de Microbiología debidamente identificadas, de lo ocasiones organismos frágiles y de crecimiento
contrario se rechazarán. Antes de su procesamien- fastidioso en los medios de cultivo. Las TAAN, y
to, el microbiólogo debe determinar si la muestra especialmente los cultivos pueden dar resultados
enviada es adecuada para el examen solicitado, y falsos negativos si no se realiza de forma adecua-
si el recipiente y el volumen son adecuados. Igual- da la recogida de la muestra, así como su transpor-
mente se debe de hacer una valoración general te, almacenamiento y procesamiento.
del tipo de muestra enviada, las determinaciones
solicitadas y el diagnóstico referido, para decidir el Para minimizar estos factores, en consultas espe-
procesamiento más adecuado que permita el ma- cializadas de ITS que estén alejadas del laborato-
yor rendimiento diagnóstico posible, en ocasiones rio, pueden disponer de medios de cultivo para su
ampliando las determinaciones solicitadas y en inoculación directa en la consulta, e incluso tener
otros casos, restringiéndolas. una pequeña estufa, lo que aumenta el rendimiento
14
en la recuperación de NG en caso de uretritis. Otra realización de “pool” de orinas en los cribados de

posibilidad es localizar físicamente la consulta de CT, pero aunque se ha observado que presentan
ITS en las inmediaciones o en el propio Servicio buena sensibilidad y especificidad, no se realizan
de Microbiología, con lo que se podría realizar la habitualmente. Estos escenarios se describen en
siembra de los medios en el mismo momento de la poblaciones con baja incidencia de infecciones por
toma. También, ante una sospecha de uretritis, y CT y NG. Así en la India se redujeron >50% los
para valorar la presencia de leucocitos PMNs en el costes de reactivos al analizar en un mismo ensa-
exudado, puede obtenerse una torunda exclusiva yo muestras agrupadas de orina de diferentes pa-
para este fin, que se rueda sobre un porta y se cientes (5 muestras por ensayo) y se observaron
envía al laboratorio para su tinción (azul de metile- menores tasas de inhibición por el efecto dilución
no modificado o tinción de Gram) y examen al mi- de los potenciales inhibidores. La S y E fueron del
croscopio. Ya en el laboratorio, el personal técnico 96,1% y 96,5%, respectivamente.
debe disponer de algoritmos claros para el proce-
samiento de las muestras. Cuando se realice culti- Otro “pool” consiste en juntar las muestras de fa-
vo, este debe ser prioritario en el tiempo respecto ringe, recto y orina del mismo paciente en el caso
de otras determinaciones. de HSH, pero se ha encontrado entre el 5-9% me-
nos de sensibilidad. Aunque podría ser una solu-
Los medios se deben inocular comenzando por el ción coste-eficaz este procedimiento puede com-
medio más general hasta el más selectivo. El culti- prometer la S y E, máxime en sitios anatómicos
vo en agar chocolate debe sembrarse junto con el como zonas extragenitales con una baja prevalen-
medio Thayer-Martin o similar debido a que algu- cia de NG y CT, a lo que hay que añadir el riesgo
nos gonococos pueden inhibirse por la vancomici- de falsos positivos causados por otras especies de
na que contiene el medio. En el caso de muestras Neisseria en el caso de NG. Además, se debería
de exudados vaginales y uretrales se requieren repetir la TAAN en cada muestra por separado en
dos torundas por muestra para una mejor recupe- el caso de que el “pool” sea positivo, por lo que se
ración de los microorganismos buscados o por si tendrían que incluir dos torundas para cada zona
se requiere realizar cultivo y otra técnica; las pla- anatómica. En opinión de los expertos de este
cas de cultivo se deben incubar hasta 72 horas en procedimiento, mientras que las plataformas no
las estufas correspondientes antes de descartar- estén perfectamente validadas para muestras ex-
las como negativas. Para el estudio de virus se de- tragenitales, la utilización de muestras agrupadas
ben seguir las normas generales de inoculación y para cribado poblacional podría contribuir más a
procesamiento para el aislamiento de los mismos. la confusión, especialmente con NG en muestra
faríngea. Por ello y a falta de evidencias fuertes
En las nuevas guías IDSA y ASM del 2018, en el parece prudente no realizar el “pool” aunque en
caso de EPI, las muestras de endocérvix, dilata- países con pocos recursos podría ser una solución
ción o curetaje, tienen limitada utilidad en la bús- coste-eficaz sin comprometer demasiado la S y E.
queda de Actinomyces spp. ya que es parte de la
microbiota normal. En el caso de los DIU sólo se
buscará Actinomyces spp. si se produce una infec- 5.2. PRUEBAS RÁPIDAS PARA EL DIAG-
ción en la inserción del mismo o si se ha dejado NÓSTICO DE LAS ITS
más tiempo del recomendado (5 años) y por ello el
clínico deberá comunicar esta situación al perso- Para contribuir al control de las ITS es fundamen-
nal del laboratorio para realizar el cultivo en caso tal disponer de pruebas diagnósticas ya que faci-
de que se requiera. litan un tratamiento etiológico rápido y específico.
La demora en el diagnóstico condiciona tratamien-
El cribado basado en muestras agrupadas o “pool” tos mal dirigidos o ausentes, por lo que es primor-
de muestras ha tenido tanto defensores como de- dial emplear pruebas que proporcionen dentro de
tractores. Los trabajos que han explorado esta es- lo posible, resultados inmediatos y evitar así nue-
trategia diagnóstica se han circunscrito a países vos contagios al interrumpir la cadena de transmi-
con bajos recursos económicos o a intereses eco- sión. Se ha demostrado mediante modelos, que
nómicos de empresas del sector del diagnóstico emplear una prueba rápida con una sensibilidad
in vitro que buscan aumentar los márgenes de be- del 63%, consigue tratar más pacientes infecta-
neficios. A fin de reducir costes se ha propuesto la dos, que esperar el resultado de una prueba muy
15
sensible realizada en el laboratorio a expensas de sensibilidad del 95% y especificidad del 95%, apli-
que el paciente acuda a una segunda consulta a cado a una población con una prevalencia del 1%,
recoger el resultado y ser tratado en consecuencia. produciría aproximadamente 60 positivos por cada
Además, con tratamientos bien dirigidos se evita la 1.000 individuos estudiados, lo que supone que 50
aparición de resistencias y se reduce el coste. serían falsos positivos, y un paciente no sería diag-
nosticado. En este caso, aunque el valor predictivo
Las principales técnicas rápidas que se pueden negativo fuese >99,9%, el valor predictivo positivo
realizar en un laboratorio de alta resolución son sería de solo el 20%. Por tanto, la distribución ge-
pruebas de microscopia (tinción de Gram en una neralizada de pruebas diagnósticas rápidas para
uretritis, campo oscuro en una úlcera) y sobre todo su realización fuera del laboratorio debe de valo-
las TAAN, especialmente PCR en formato múltiple rarse con sumo cuidado. En la Tabla 4 se expone
frente a los principales patógenos, con resultados la sensibilidad y especificidad de estas pruebas.
en 1-2 horas. La comercialización de técnicas que
permitan determinar de forma rápida y en monotest
Recursos en internet de algunas de estas pruebas
la presencia de genes de resistencia constituirá el
rápidas:
siguiente objetivo.
Examination of Vaginal Wet:
También puede conseguirse diagnóstico rápido
https://www.youtube.com/watch?v=8dgeOPGx6YI
mediante la realización de pruebas en el lugar de
atención del paciente (point-of-care-test, POCT).
Se pueden definir las POCT como las pruebas diag-
5-Minute Wet Mount:
nósticas que permiten que, en la misma visita, se
https://brooksidepress.org/Products/ed2/Video/
realice el diagnóstico, se indique el tratamiento y
wet_mount_video.htm
que idealmente, para su realización no se necesite
personal entrenado ni fuente de electricidad para
equipamiento asociado (que no precise nevera, cen-
Análisis participativo en el reconocimiento de
trífuga, microscopio ni lector). Las pruebas POCT
imágenes:
deben cumplir los requisitos ASSURED estableci-
http://www.fba.org.ar/proeco/
dos por la OMS: Affordable (económico), Sensitive
(sensible), Specific (específico), User-friendly (uso
amigable, pocos pasos y mínimo entrenamiento),
APGO Educational series in women’s health is-
Rapid and robust (rápido y robusto, resultados en <
sues:
30 min), Equipment-free (sin equipos), Deliverable
https://www.youtube.com/channel/UCB67eiHQz-
to end-users (disponible para usuarios finales).
qqLUBHrDJzYdtQ
Si bien el futuro de las pruebas POCT parece pro-
metedor en base a nuevas tecnologías como las
SEMERGEN:
microfluídicas y las microwave accelerated metal
https://es.slideshare.net/CFB/habilidades-del-me-
enhanced fluorescence (MAMEF), en la actualidad
dico-de-familia-en-el-diagnostico-de-las-vulvovagi-
solo se dispone de técnicas comercializadas para
nitis
el diagnóstico del VIH y la sífilis. Las pruebas dispo-
nibles para otros patógenos no alcanzan la sensibi-
lidad y especificidad proporcionada por las técnicas
Gram
TAAN disponibles en los laboratorios.
https://www.youtube.com/watch?v=BWwun-qhwsg
https://www.youtube.com/watch?v=FceD8FFhuew
Estas pruebas se deben valorar con cautela, pues
no sólo la sensibilidad es muy importante, sino que
además hay que tener en cuenta que una baja pre-
valencia influye de forma muy importante sobre el
valor predictivo. Así una prueba de cribado con una
16
Tabla 4. Pruebas de diagnóstico rápido de las ITS
Microorganismo/ Prueba S (%) E (%) Comentario

síndrome
Chlamydia Inmunocromatografía 82-84 98 No recomendado
trachomatis AAN GeneXpert CT/NG 97-99 >99
Neisseria Gram endocervix 45-65 90-99 Tinción de Gram no recomendada

gonorrhoeae Gram uretra (con clínica) 90-95 95-99 en faringe y recto
Gram uretra (asintomático) 50-75 85-87
TAAN GeneXpert CT/NG 98-100 99,9
Treponema Microscopía campo oscuro 39-81 82-100 No en lesiones orales y rectales.

pallidum Inmunofluorescencia directa 90-95 >98 La S depende de microscopísta
RPR (Ac no treponémicos)
Chembio DPP Assay POCT 73-100 79-98 Requiere confirmación
98 100 Comparado con EIA
Tinción Tzanck
Herpes simplex Inmunofluorescencia directa Variable No E Depende del número de viriones en
70-90 >95 las lesiones
Tinción de Gram
Haemophilus <50 50-70

ducreyi Tinción directa Wright-
Giemsa
Donovanosis 40-50 <50
Examen en fresco
Vaginosis Tinción de Gram (Nugent)
bacteriana Tinción de Gram (Ison-Hay) 70-90 95-100
pH 60-80 95-100
Sonda ADN (Affirm VPIII) 96-97 90
Rapid pH- Amine FermCard 75-80 60-70
Rapid PIP (G. vaginalis) >90 >99
BVBluesystem 80-90 85-90
80-85 90-92
Examen en fresco 91,7 97,8
Examen con KOH 10%
Candida spp. Sonda ADN (Affirm VPIII) 40-60 >99
54-80 96
Examen en fresco/ Tinción de 85-90 >99
Gram
Trichomonas Aglutinación con látex 62-92 99-100 70% comparado con PCR
vaginalis OSOM Tricho Rapid Test 95 100
80-94 95
VIH Chembio DPP Assay POCT 99,8 100 En sangre capilar

S: sensibilidad; E: especificidad
Es difícil hacer recomendaciones concretas respecto a pruebas rápidas a implementar, debido a que los
escenarios son distintos en cada centro de trabajo. Factores como la cercanía o lejanía de las diferentes
consultas, la prevalencia de infección en la población, la frecuencia en el transporte de las muestras o el
disponer de recursos humanos y materiales apropiados, condicionan la elección de la técnica concreta. En
la Tabla 5 se expone la realidad actual y la opinión de los expertos de este documento sin que sean
exhaustivas las pruebas a realizar.
17
Tabla 5. Niveles asistenciales y pruebas diagnósticas de ITS

Nivel Pruebas Comentario
diagnósticas
Oficinas de VIH Actualmente la pueden realizar los propios pacientes en las farmacias
Farmacia
Consulta de Medición del pH vaginal Usar tiras reactivas capaces de medir variaciones de pH de 0,5 (ACI- LIT® pH 0-6
Atención MERCK). Material recogido, una vez extraído el espéculo, en la rama inferior que no
Primaria sea una muestra vaginal del fondo de saco vaginal posterior, ya que éste puede tener
el pH elevado por la presencia de moco cervical.
Si no se dispone de espéculo vaginal se introduce una tira de indicador de pH con
ayuda de los dedos de la mano en las caras laterales de la vagina a medio camino
entre el cérvix y el introito.
Se define como pH vaginal elevado si es > 4,5 y ocurre en: vaginosis bacteriana,
vaginitis por TV y las infecciones mixtas; también por otros factores como moco
cervical con sangre, semen, duchas vaginales y en la vaginitis atrófica. Las vaginitis
candidiásicas tienen un pH < 4,5.
Un pH normal descarta las vaginitis que cursen con pH elevado, y en la práctica nos
sitúa ante una vaginitis candidiásica.
Test de las aminas Se realiza añadiendo KOH al 10% en el material recogido en la rama inferior del
espéculo oliéndolo posteriormente. Si no se dispone de espéculo se puede realizar
extendiendo la muestra en un portaobjeto, obtenida con una torunda previamente
introducida en la vagina, oliéndola después de añadir unas gotas de KOH al 10%.
Métodos comerciales
que combinan ambas
pruebas:
-FemExam Menos sensible y especifico que los criterios de Amsel:
(descatalogado en pH S: 88% y E: 64% (utiliza un punto de corte de pH 4,7) y para aminas S:40% y
España) E:95%
-QuickVue Advance G. Detección de prolina iminopeptidasa que indica presencia de 2x107 ufc de GV en
vaginalis secreción vaginal sin diluir
-OSOM BVBLUE Detecta altas concentraciones de sialidasa (niveles 7,8 U) en 10 minutos en muestras
vaginales
Microscopía: Aunque es un método rápido y da una información muy útil, la realidad es que el
-Exudado uretral médico de Atención Primaria normalmente no dispone de microscopio o no dispone
-Exudado vaginal de tiempo para su realización
-Criterios de Nugent y
Hay-Ison
Servicio de Microscopía La realidad en nuestro medio es que no se realizan estas pruebas en Urgencias y se
Urgencias GenXpert NG/CT derivan al laboratorio
VIH rápida (carga viral)
o VIH-sífilis
Consulta de ITS Todas las de Atención Aunque teóricamente en la consulta de ITS se pueden realizar todas las pruebas
o Consulta de Primaria. señaladas para Atención Primaria, sólo en las consultas mejor dotadas se dispone de
pruebas rápidas Microscopía microscopio y capacidad para hacer tinciones básicas. El facultativo tiene que tener la
formación y experiencia para llevar a cabo el examen e interpretación de la extensión.
GenXpert NG/CT Permite el tratamiento etiológico de las infecciones por CT y NG. En caso de resultados
negativos, permite clasificar a las uretritis como UNGNC
VIH rápida carga viral
Servicio de Todas las pruebas Precisa equipos y personal dispuestos a dar respuesta inmediata a las solicitudes de
Microbiología habituales. las consultas.
Microscopía de campo
oscuro
Amplio abanico de
técnicas moleculares de
POC (incluyendo carga
viral de VIH o VHC) de
apoyo a los servicios de
Urgencias
18
5.3. PROCEDIMIENTOS ESPECÍFICOS DE ADNr 16S), y las herramientas de análisis masi-

DETECCIÓN DE LOS PATÓGENOS CAU- vo de datos (técnicas meta-ómicas) (ver Procedi-
SALES DE LAS ITS miento en Microbiología Clínica de la SEIMC nº
59), han permitido identificar y asignar taxonómi-
5.3.1. Microbiota vaginal camente a la mayoría de los microorganismos sin
necesidad de cultivarlos. Uno de los primeros es-
Durante años y con las técnicas diagnósticas dis- tudios en describir la microbiota vaginal, usando
ponibles, ni la composición, ni la dinámica de las tecnología de secuenciación masiva, analizó 400
diversas poblaciones bacterianas vaginales o cer- mujeres de diferentes etnias en edad fértil e iden-
vicales, estuvieron bien caracterizadas. Era am- tificó hasta 5 comunidades tipo con un predominio
pliamente conocido que Lactobacillus spp. era el claro de las especies previamente enumeradas o
microorganismo predominante en la vagina preme- de un incremento en la proporción de bacterias
nopáusica, en concentraciones de 107-108 ufc/g anaerobias estricta. Todo ello demuestra que la
de flujo; que existían aproximadamente 35 espe- microbiota cervico-vaginal es altamente compleja
cies, siendo las más frecuentes Lactobacillus cris- y heterogénea y que no es una población estática,
patus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus iners y sino en estado dinámico, donde los tipos y niveles
Lactobacillus jensenii. También que la mayoría de de poblaciones fluctúan continuamente dentro de
las mujeres albergaban en la vagina a una sola un entorno cambiante. Aunque la colonización de
especie de Lactobacillus en un momento dado y la vagina se inicia con el nacimiento, la microbiota
se demostró que esta colonización era transitoria es escasa durante la infancia, y es con la primera
ya que 2/3 de las mujeres perdían o adquirían di- menstruación, y gracias al aumento de la humedad
ferentes especies de Lactobacillus a lo largo de un vaginal y a la secreción de nutrientes, cuando em-
periodo de 8 meses, aunque la colonización por pieza a establecerse una microbiota vaginal defi-
lactobacilos productores de H2O2 era más perma- nitiva. La composición de este ecosistema está in-
nente. fluenciada por distintos factores tanto endógenos
Lactobacillus spp. protege a la vagina frente a la (como la edad, el ciclo menstrual o el embarazo)
colonización por patógenos, interfiriendo la adhe- como exógenos, como las relaciones sexuales, el
rencia de estos al epitelio vaginal al bloquear sus uso de antibióticos, tampones y anticonceptivos.
receptores por mecanismos de exclusión o despla-
zamiento e inhibiendo su multiplicación mediante Varios estudios, mediante técnicas de secuencia-
la producción y excreción H2O2, ácido láctico y ción, han establecido una relación entre la micro-
bacteriocinas. Aun así, no todas las cepas de Lac- biota vaginal y distintas patologías, como la vagi-
tobacillus spp. expresan estas propiedades con la nosis bacteriana (VB), las infecciones del tracto
misma intensidad, sino que existen enormes dife- urinario y las relacionadas con la salud reproducti-
rencias entre especies e incluso entre cepas de va, el embarazo y el recién nacido, pero son pocos
una misma especie. Otro mecanismo con el que los trabajos que establecen una relación entre la
Lactobacillus spp. podría prevenir la infección microbiota vaginal y las ITS.
consiste en una inmunomodulación. Se ha com-
probado que las células vesicales coestimuladas 5.3.2. Neisseria gonorrhoeae
por ciertas cepas de Lactobacillus spp. y E. coli
muestran un aumento de la expresión de TLR4, lo La toma de muestra, así como el transporte y el
que da lugar a un aumento de la activación de la procesamiento de esta, es especialmente impor-
proteína NF-kappaB y el subsiguiente incremento tante en la infección gonocócica, sobre todo para
de la secreción de TNF, amplificando así la res- el cultivo, ya que NG es muy sensible a las con-
puesta inmune. diciones ambientales. Actualmente los escobillo-
nes flocados en medio de transporte líquido tipo
El conocimiento del microbioma se ha visto con- Stuart-Amies con carbón activado, presentan un
siderablemente ampliado tras la aplicación de las alto porcentaje de recuperación, ya que las cortas
técnicas moleculares de secuenciación masiva, fibras dispuestas de forma perpendicular, garan-
especialmente las de segunda generación, tam- tizan una absorción máxima de la muestra y una
bién conocidas como “next generation sequen- buena elución en el medio líquido de transporte.
cing” (NGS). Su utilización, particularmente en el Por otro lado, durante mucho tiempo se ha pensa-
gen que codifica la subunidad 16S del ARNr (gen do que la supervivencia del gonococo era superior
19
a temperatura ambiente en comparación a la refri- El cultivo es el único método que permite estudiar
geración y muchos libros de texto ofrecen recomen- la eficacia del tratamiento antibiótico. Aunque las
daciones contradictorias. En estudios recientes, se TAAN no están aprobadas por la Food and Drug
demuestra que la conservación y supervivencia Administration (FDA) como test de curación, és-
del gonococo es muy superior si los escobillones tas se pueden utilizar, teniendo siempre en cuenta
con medio de transporte se mantienen refrigera- que se puede estar detectando ADN residual de la
dos (4 ºC). primoinfección. En el caso de la infección gonocó-
cica, se recomienda esperar dos semanas desde
a) Examen microscópico, mediante tinción de la finalización del tratamiento, para realizar un test
Gram o azul de metileno. La observación a x1000 de curación mediante TAAN.
aumentos de ≥ 2 PMN por campo y diplococos
gramnegativos (Figura 1), permite hacer un diag- Ante la sospecha de infección diseminada es ne-
nóstico rápido de uretritis gonocócica con una bue- cesario extraer una muestra de sangre para reali-
na sensibilidad (>95%) y especificidad (III, C). En zar hemocultivos. Estos deben contener una con-
cambio, la sensibilidad de la tinción de Gram en centración de polianetolsulfonato de sodio (SPS)
varones asintomáticos, en exudados endocervica- no superior al 0,025%, ya que el gonococo es sen-
les y en exudados rectales y faríngeos es baja, por sible a este compuesto. Pueden subcultivarse so-
lo que no es una herramienta útil para descartar lamente en agar chocolate. Las muestras de líqui-
estas infecciones. Se debe hacer siempre detec- dos estériles (LCR, articular) deben centrifugarse
ción de NG en UNG ya que pueden ser mixtas y en (>1 mL) a 1500xg durante 15 minutos y cultivar el
el caso de Gram equívocos (diplococos extracelu- sedimento.
lares o atípicos) en el 25% de los casos hay creci-
miento de NG en cultivo. En el caso de la tinción c) TAAN. Actualmente son las recomendadas
con azul de metileno (mezcla de azul de metileno para la detección de las infecciones urogenitales
y violeta de genciana, 4 partes de azul de metileno en mujeres y varones con y sin síntomas, ya que
por una de violeta de genciana), la ventaja es que se ha demostrado que son coste-eficaces.
requiere sólo 10-15 segundos frente a los 4 minu-
tos de la tinción de Gram y que se observa mejor la La ventaja de estas técnicas es que detectan mi-
morfología, pero no las características tintoriales. croorganismos no viables, aumentando así la sen-
sibilidad y facilitando la recogida, transporte y pro-
b) Cultivo. El diagnóstico definitivo se realiza cesamiento de las muestras. Esta alta sensibilidad
mediante el aislamiento e identificación del mi- ha permitido el uso de muestras menos invasivas,
croorganismo en cultivo (ver PNT-ITS-04). Ade- como la primera micción de orina en los varones
más es la única prueba diagnóstica que permite y el frotis vaginal en las mujeres. Esto facilita la
realizar estudios de sensibilidad antimicrobiana, auto-toma de la muestra por parte del paciente,
por lo que es esencial para detectar y monitori- procedimiento utilizado en muchos casos en el cri-
zar las resistencias antimicrobianas. El cultivo es bado. Es importante remarcar que la sensibilidad
adecuado para muestras endocervicales, uretra- de las TAAN en orina de mujeres, puede ser un
les, rectales, primera micción de orina, faríngeos 10% inferior que en los exudados vaginales. En
y conjuntivales. Además es la técnica recomenda- muestras extragenitales, la especificidad de estas
da en el caso de infección persistente o sospecha pruebas es inferior, pudiendo dar falsos positivos,
de fracaso terapéutico. Se recomienda el uso de por lo que ante la sospecha de que se trate de
medios selectivos (III, B). Las placas se deben in- un falso positivo, se debe repetir con otro método.
cubar durante 24-72 horas a una temperatura de Aunque se ha recomendado el diagnóstico de fa-
35-37ºC y con un atmósfera al 5% de CO2. Las téc- ringe y recto en HSH, también se recomienda en
nicas de identificación varían mucho en función de pacientes heterosexuales debido a la transmisión
la disponibilidad del laboratorio. Una herramienta por sexo oral, práctica cada vez más extendida.
muy utilizada en la actualidad y que presenta una
buena sensibilidad y especificidad, es la espectro- d) Otros: la serología y los enzimoinmunoensa-
metría de masas (MALDI-TOF). yos carecen de utilidad para el diagnóstico de la
infección gonocócica.
20
Figura 1. Tinción de Gram de exudado uretral con rinas no se ven afectadas por este mecanismo (ver
uretritis gonocócica (x1000) Procedimiento de Microbiología Clínica nº 38).
f) Tipificación de NG. Aporta información epide-

miológica relevante, cómo dinámicas poblacionales,
identificación de redes de transmisión, estudios de
subpoblaciones, estudios de fracasos terapéuticos,
estudios de contactos, etc. Existen métodos feno-
típicos, como la auxotipificación y la determinación
de serovariedades, que requieren un largo tiempo
de procesamiento y los reactivos disponibles son
caros; y los métodos genotípicos: PFGE, AFLP, y
secuenciación.
5.3.3. Chlamydia trachomatis
e) Pruebas de sensibilidad. El tratamiento de la a) Aunque la infección por CT se puede diag-

gonorrea es complicado debido a la habilidad que nosticar por cultivo, ensayos de inmunofluores-
ha presentado NG de desarrollar resistencia a los cencia directa o serología, el método de elección
antimicrobianos utilizados a lo largo de los años. Es son las TAAN que han supuesto la gran revolución
por esta razón que la monitorización de la sensibili- tecnológica en la mejora del diagnóstico de las in-
dad antimicrobiana de este microorganismo es una fecciones por CT, debido a su alta sensibilidad y
medida esencial. Se considera que el tratamiento especificidad. Las otras estrategias diagnósticas
empírico debe curar >95% de los casos de gono- ya no se recomiendan. Se han aprobado varias es-
rrea, por lo que es básico conocer la sensibilidad trategias TAAN para diferentes plataformas comer-
antimicrobiana de NG a nivel local. ciales. Por otra parte, también existen diferencias
El método de dilución en agar se considera la téc- en las dianas seleccionadas para aumentar la sen-
nica de referencia para la determinación de la con- sibilidad. Las primeras aproximaciones se basaron
centración mínima inhibitoria (CMI), sin embargo, en detectar un fragmento del plásmido críptico que
el método de difusión con tiras en gradiente de an- está en aproximadamente 10 copias/célula. Sin
tibiótico (como Etest) es una alternativa aceptable embargo, la identificación de la denominada va-
para la determinación de la CMI en la rutina del riante sueca (nvCT), que porta una delección en el
laboratorio, siempre que se utilicen los medios de plásmido críptico que afectaba al fragmento usado
cultivo adecuados siguiendo las recomendaciones por varios sistemas comerciales, supuso un infra-
del European Committee for Antimicrobial Suscep- diagnóstico por acumulación de falsos negativos.
tibility Testing (EUCAST). El método de difusión con Este hallazgo, supuso que las nuevas versiones
discos presenta en cambio resultados más aleato- de las plataformas comerciales llevaran 2 dianas,
rios principalmente para diferenciar los aislados bien en plásmido y cromosoma o bien ambas en
sensibles de aquéllos con sensibilidad disminuida, el plásmido. La última aproximación diagnóstica
particularmente con los betalactámicos. El Clinical para detectar CT se ha basado en detectar ARN
and Laboratory Standards Institute (CLSI) propone de las subunidad 23S del ARNr, tanto una como
el medio agar GC con 1% de un suplemento defi- dos dianas, que aumenta aún más la sensibilidad.
nido que contiene en g/L: vitamina B 12 (0,01), L En un futuro próximo se implementarán las TAAN
glutamina (10), adenina (1), clorhidrato de guanina en point-of-care que se describen en el apartado
(0,03), ácido para-aminobenzoico (0,013), L-cistei- 5.2 de este procedimiento.
na (1,1), glucosa (100), NAD (0,25), cocarboxilasa
(0,1), nitrato férrico (0,02) y clorhidrato de tiamina La detección de las variantes de CT relacionadas
(0,003). El antibiograma debe acompañarse ade- con el LGV ha quedado reservado para centros de
más de la prueba cromogénica de nitrocefina para referencia o grupos de investigación. Sin embargo,
detectar la posible producción de betalactamasa, lo aunque infrecuente en la población general, la si-
cual implicará resistencia a amino-, carboxi- y urei- tuación epidemiológica requiere disponer de técni-
dopenicilinas, con independencia de su resultado cas moleculares para la correcta identificación de
de sensibilidad in vitro, mientras que las cefalospo- estas variantes, ya que el tratamiento antibiótico
21
es más prolongado que el tratamiento de una in- la propuesta más extendida es el cribado a grupos
fección por variantes no invasivas. Algunas com- de riesgo, donde sí se ha demostrado una justi-
pañías de diagnóstico microbiológico ya ofertan la ficación riesgo-beneficio. Esta estrategia sugiere
posibilidad de identificar estas variantes. La mayo- tanto el diagnóstico a todas las personas sintomá-
ría de las estrategias diagnósticas se basan en la ticas y sexualmente activas, como el cribado en
defección de una delección de 36 nucleótidos en individuos asintomáticos que incluye mujeres ≤25
el gen pmpH. años, embarazadas, o mujeres que tienen varias
parejas sexuales o si han sido diagnosticadas de
b) Tipo de muestra. El tipo de muestra reco- otra ITS recientemente. CT se detecta en locali-
mendado para la detección molecular de CT es la zación anorectal en el 8,4% de las mujeres y de
muestra de orina en el varón (20 mL, al menos 1h estas, todas tienen infección urogenital. El cribado
después de la última micción) y la muestra vagi- en hombres no está recomendado excepto en po-
nal en la mujer (realizado por un profesional o bien blación de hombres que tengan sexo con hombres
auto-toma), aunque también pueden realizarse (HSH), (cribado rectal y/o uretral dependiendo de
procedimientos más invasivos obteniendo mues- sus prácticas sexuales) o hubieran sido reciente-
tra de uretra o endocérvix. Aunque estas técnicas mente diagnosticados de una ITS. La presencia de
moleculares aún no están validadas para determi- CT en recto de HSH es 3-19,5% y en faringe entre
nar la presencia de CT en muestras extragenitales 0,5-2,3%.Todos aquellos pacientes con diagnósti-
como faringe y recto, son ampliamente utilizadas co positivo que sean tratados deberían ser evalua-
en estas muestras. dos para garantizar la erradicación de la bacteria
en un tiempo entre 3-6 meses.
c) Toma de muestra y medio de transporte. En
el caso de los procedimientos invasivos, se intro- e) Fracaso del tratamiento. La mayoría de los
duce un hisopo de plástico o alambre 2-3 cm en la aparentes fracasos de tratamiento son consecuen-
uretra o 1-2 cm en el canal endocervical, seguido cia de reinfecciones, falta de adherencia o re-ex-
de rotación para coleccionar cantidad suficiente de posición a la misma fuente. No se han descrito aun
células epiteliales. La cabeza del hisopo debe ser mecanismos de resistencia a tetraciclinas en CT.
de rayón o dacrón, ya que otros materiales pueden
inhibir el posible crecimiento del microorganismo, f) Genotipado. Conocer el genotipo de las cepas
si se quisiera cultivar. Los hisopos floculados son de CT causantes de una determinada infección en
los más utilizados. Una vez realizada la toma, ésta nuestro entorno, ha tenido tradicionalmente un ca-
se debe conservar en un medio de transporte ade- rácter más académico que clínico. Sin embargo,
cuado, como UTM (universal transport medium) y tanto la epidemia de LGV, como el mayor cono-
conservar a 4ºC antes del envío al laboratorio o a cimiento de la biología de este microorganismo,
-70ºC si el envío se demora >24 h. hace cada vez más útil y conveniente que los la-
boratorios puedan ofertar esta determinación en
d) Tipo de cribado. No existen unas recomen- su cartera de servicios. El estudio genotípico más
daciones claras sobre el cribado y el nivel de ge- demandado es para identificar las cepas de LGV,
neralización del mismo. Como se comentaba en el ya que el tratamiento antibiótico necesario para su
apartado de epidemiología, en Europa probable- erradicación es más extenso que una infección por
mente hay un infradiagnóstico de las infecciones CT no-LGV (15 días de doxiciclina y 5 días, res-
por CT, observándose una gran disparidad en las pectivamente). Varias compañías de diagnóstico in
tasas de infección entre países con sistemas de vitro ya ofrecen en su panel diagnóstico de ITS, la
vigilancia activa y aquellos que utilizan sistemas diferenciación de LGV de otras infecciones por CT
de detección basados exclusivamente en el diag- (Ver PNT-ITS-3a). Ninguno de los TAAN ha sido
nóstico diferencial en pacientes sintomáticos. Re- aprobado por la FDA para úlceras genitales.
cordemos que la mayoría de las infecciones son
asintomáticas, por lo que el diagnóstico no solo Por otra parte, el genotipado de las cepas uroge-
debería centrarse en los casos sintomáticos. En el nitales de CT, se ha basado tradicionalmente en la
otro extremo, los pocos países que llegaron a im- secuenciación del gen ompA (estrategias de PCR
plementar sistemas de cribado poblacional no en- en tiempo real), que codifica para la principal pro-
contraron una justificación riesgo-beneficio y des- teína de membrana externa de CT. Sin embargo,
escalaron los programas de cribado. Hoy en día, los trabajos de epidemiología molecular de los úl-
22
timos años han revelado que este gen es altamen- así como la auto-toma de un exudado vaginal. Aun-
te intercambiable entre diferentes genotipos y no que en varones se cita en la literatura que es más
diferencia entre los diferentes patotipos de CT. Por sensible la muestra de orina que el exudado uretral,
tanto, la clasificación genotípica basada únicamente cuando se recoge la muestra para varios patógenos
en este gen puede inducir a errores de genotipado. la muestra uretral puede ser más conveniente. En
La combinación entre los genes pmpH y ompA, es mujeres es más sensible el exudado vaginal que la
la estrategia más sencilla para la mejor asignación orina. Se deben obtener muestras anales si se quie-
de genotipos. re diagnosticar esta localización. Para los exudados
el medio de transporte es el UTM (válido para CT,
Mycoplasma spp. y virus).
5.3.4. Micoplasmas genitales
El único método diagnóstico útil son las TAAN. Exis-
Los micoplasmas son las bacterias más pequeñas ten técnicas comerciales y caseras, y en ambos ca-
de vida libre y se caracterizan por no tener pared sos es importante que los laboratorios validen estas
bacteriana. La capacidad de algunos micoplasmas técnicas y participen en programas de evaluación
de poder ser cultivados en medios inanimados, per- externa.
mitió su aislamiento desde el tracto urogenital tanto
en individuos sintomáticos como en asintomáticos, Debido a la elevada frecuencia de resistencias en
por lo que su papel patógeno siempre fue contro- nuestro país, siempre que sea posible se debe de-
vertido. terminar la presencia de mutaciones que confieren
resistencia a macrólidos, las más frecuentes en las
a) Las TANN han aportado información muy rele- posiciones A2058 y A2059 (numeración de E. coli)
vante. Permiten diferenciar lo que mediante el cul- del gen 23S ARNr. Puede realizarse de forma case-
tivo se identificaba como UU, en dos especies dis- ra mediante secuenciación, aunque ya existen sis-
tintas: Ureaplasma parvum (UP), no implicado en temas comerciales.
patología, y UU propiamente dicho, responsable de
cuadros de uretritis pero que también se encuentra Se han descrito mutaciones en las posiciones S83
en pacientes asintomáticos. Diversos trabajos indi- y D87 (numeración de MG) de la región QRDR del
can que la carga bacteriana elevada es un factor gen parC que confieren resistencia a moxifloxaci-
predictivo positivo de uretritis. no, que a día de hoy son menos frecuentes pero
no despreciables. Las mutaciones en gyrA parecen
También mediante TAAN se ha podido establecer tener menor importancia.
el papel etiológico de MG, organismo muy difícil de
cultivar, y que es responsable tanto de casos de c) Test de curación. Debido a la elevada preva-
uretritis como de cervicitis, endometritis y EPI. Se lencia de resistencias a macrólidos, el test de cura-
considera que es la segunda causa de uretritis no ción es obligado en todos los casos. La muestra no
gonocócica en el varón, y esto convierte a las téc- se debe obtener hasta pasadas 3 semanas de fina-
nicas diagnósticas genómicas en imprescindibles. lización del tratamiento aunque no existe consenso
Existen pocas alternativas terapéuticas, siendo la entre las guías que varían entre 2 semanas y 4-6
azitromicina el tratamiento de elección. Doxiciclina semanas después del tratamiento.
es menos eficaz, con sólo un 30-40% de curación
microbiológica. d) Ureaplasma urealyticum. La muestra inicial
de orina y el exudado uretral transportado en me-
MH se ha relacionado con vaginosis, EIP y endo- dio UTM son aceptables en casos de uretritis. Exis-
metritis. Se puede cultivar en medios específicos, ten ensayos comercializados basados en las TAAN
aunque cada vez se generaliza más el empleo de para el diagnóstico, y en alguno de ellos de formato
TAAN. múltiplex se puede determinar la presencia tanto
de UU como de UP, MH y MG. El cultivo presen-
b) M. genitalium. Para su diagnóstico, además ta muchas limitaciones, pues precisa mantener la
de los exudados cervicales y uretrales obtenidos viabilidad de los micoplasmas mediante medios de
por el facultativo, se puede emplear la orina de pri- transporte específicos (4SP), la inoculación en cal-
mera micción tanto en varones como en mujeres, dos selectivos y la siembra en medio agar A8 o en
23
galerías comerciales. El tiempo de incubación es treponemas comensales, así como también en te-
como mínimo de 48 h. El cultivo de micoplasmas jidos, LCR, humor vítreo o líquido amniótico. Tam-
fue objeto de revisión en la anterior edición de este bién tienen interés en el diagnóstico de la sífilis
procedimiento (ver Procedimiento SEIMC nº 24; 2ª congénita y en la neurolúes.
edición, 2007).
No se recomienda su realización en sangre por la
e) M. hominis. Al igual que en el caso de UU, existencia de sustancias inhibidoras. Para realizar
existen técnicas comercializadas para su cultivo esta prueba se pueden utilizar muestras frescas
que fueron revisadas en la edición previa de este o congeladas. Existen formatos comerciales, no
procedimiento, pero en la actualidad se dispone de validados para todos los tipos de muestras, por lo
TAAN en formato multiplex. que es fundamental el empleo de los controles de
validación correspondientes. Se considera que la
5.3.5. Sífilis (Treponema pallidum) PCR del LCR tiene escaso valor para el diagnós-
tico de neurosífilis debido a su baja sensibilidad y
El diagnóstico puede ser directo (detección de T. especificidad.
pallidum en las lesiones, adenopatías, tejidos o
LCR) o indirecto basado en la detección de anti- c) Técnicas de inmunofluorescencia directa, de
cuerpos. La detección directa proporciona el diag- hibridación in situ o las tinciones argénticas: están
nóstico definitivo de sífilis y es especialmente útil en desuso.
en lesiones sospechosas en individuos serológica-
mente no reactivos. d) Es posible la tipificación de los treponemas
mediante técnicas de RFLP o de secuenciación, e
a) La microscopía de campo oscuro de las incluso es posible determinar la presencia de mu-
muestras de úlceras o de lesiones exudativas cu- taciones en el 23S ARNr que confieren resistencia
táneas, proporciona el diagnóstico inmediato me- a macrólidos, pero todas ellas se emplean con fi-
diante la visualización de los treponemas móviles. nes de investigación.
La muestra ideal es el exudado seroso de lesiones
activas. No son válidas las muestras hemáticas e) El diagnóstico indirecto serológico proporcio-
ni de origen oral ni anal. Para la obtención de la na un diagnóstico presuntivo.
muestra, las lesiones activas se deben limpiar cui-
dadosamente con un hisopo estéril y solución sali- Las pruebas no treponémicas, también llamadas
na estéril para eliminar costras y restos. Mediante reagínicas, detectan anticuerpos frente a una com-
una torunda o una gasa estéril hay que provocar binación de cardiolipina, lecitina y colesterol que se
una leve abrasión de la lesión para producir exu- forman como respuesta al daño en las membranas
dado seroso. En ocasiones hay que presionar la celulares que provocan las espiroquetas. No son
base de la úlcera para que se produzca. El exuda- por tanto anticuerpos específicos pero son un in-
do se recoge directamente sobre el portaobjetos, dicador muy útil de la actividad de la enfermedad.
o bien mediante un tubo capilar o un asa bacterio- Las pruebas treponémicas detectan anticuerpos
lógica. Se puede añadir una gota de suero salino específicos frente a T. pallidum. De todos modos,
para homogeneizar, y seguidamente cubrir con un ninguna prueba serológica es capaz de diferenciar
cubreobjetos. Tiene como principales inconvenien- la sífilis de las trepanomatosis no venereas (pian,
tes que la observación ha de ser inmediata a la pinta y bejel).
recogida (<30 minutos), se precisa disponer de
un microscopio de campo oscuro y de un micros- e1) La primera prueba no treponémica dis-
copista experto, ya que es un método laborioso y ponible fue el test de Wassermann, que metodo-
subjetivo en el que el resultado negativo no exclu- lógicamente era una fijación del complemento y
ye la infección. ya no se emplea. Siguen teniendo todo el interés
el VDRL y el RPR, que detectan una mezcla de
b) Las técnicas de PCR están desplazando al anticuerpos IgG y IgM, son técnicas manuales y
campo oscuro en el diagnóstico de la sífilis prima- no permiten la automatización, si bien hay algún
ria y en muchos laboratorios se considera el test intento de automatización descrito en la literatura.
de elección. Las técnicas de PCR permiten estu- Son sencillas, baratas, sensibles y además permi-
diar lesiones extragenitales donde puedan existir ten la semicuantificación mediante la determina-
24
ción del título. Se positivizan a los 10-15 días des- moniae, malaria y durante la gestación. Los falsos
pués de la aparición del chancro (unas 6 semanas positivos de duración superior a 6 meses, suelen
después de la infección). Por eso su sensibilidad presentar títulos elevados y se producen en enfer-
en la sífilis primaria ronda el 78-86%, mientras que medades crónicas que cursan con daño tisular cró-
en la sífilis secundaria es del 100%. En la sífilis nico, como la fiebre reumática, mieloma múltiple,
latente permanece cercana al 100% y disminuye leucemia, linfoma, diabetes, adicción a drogas in-
en la terciaria 71-86% (Tabla 6). travenosas y otras) (Tabla 7). Pueden existir falsos
negativos debido al efecto prozona (especialmente
El VDRL es una microfloculación, debe observarse en casos de sífilis secundaria), y para evitarlo, se
al microscopio (100x) y las muestras aceptables aconseja diluir los sueros.
son suero y LCR (en este último hay que evitar
la contaminación con sangre o suero). El RPR es e2) Las pruebas treponémicas incluyen
una macrofloculación que puede valorarse sin mi- TPHA, FTA, Inmunoblot, EIA y quimioluminiscencia
croscopio debido al empleo de carbón para fijar los (CLIA). El test de inmovilización treponémica (TPI)
antígenos. Se emplea en suero y en plasma, y sus ya no se usa debido a que es difícil de estandarizar
títulos suelen ser superiores a los del VDRL. y requiere treponemas vivos. Las técnicas treponé-
micas son técnicas cualitativas, más específicas y
Estas técnicas cuantitativas ayudan a establecer precoces que las no treponémicas (positivas a la
la fase de la enfermedad y en algunos casos pue- 1-2 semanas de aparecer el chancro) y permane-
den ser útiles para indicar tratamiento, como sería cen positivas de por vida incluso en infecciones tra-
el caso de un paciente que se reinfecta y en el que tadas, por lo que no deben emplearse como mar-
se demuestra un incremento en el título. En gene- cadores de actividad ni para la valoración del éxito
ral, títulos >16 indican enfermedad activa y sería del tratamiento. La mayoría detectan tanto IgM
preciso iniciar el tratamiento, si bien esta decisión como IgG, si bien es posible determinar la presen-
ha de tomarse a la luz de los hallazgos clínicos, cia de IgM mediante formatos específicos de FTA,
infecciones previas y posibles tratamientos pre- Inmunoblot y EIA, pero su sensibilidad es baja y no
vios. Títulos iguales o inferiores a 16 no excluyen ayudan a determinar la fase de la enfermedad. Son
la infección activa, especialmente si existe clínica útiles para el diagnóstico de la sífilis congénita.
compatible o los tratamientos previos no están do-
cumentados. El TPHA es una hemaglutinación pasiva que em-
plea eritrocitos sensibilizados con extracto de T.
También permiten hacer seguimiento de la res- pallidum. El suero se diluye con un sorbente que
puesta al tratamiento. La caída del título después contiene treponemas no patógenos. Si el suero
del tratamiento es variable y depende de factores contiene anticuerpos específicos anti T. pallidum
como la fase de la enfermedad, su duración y el se forma un agregado de eritrocitos cubriendo el
título inicial, pero la regla general considera que en pocillo, mientras que si no los contiene, los eritro-
una sífilis temprana el título debería de caer 4 ve- citos se depositan en la base del pocillo microtiter
ces a los 6 meses. En el caso de una sífilis tardía, en U. Las reacciones falsas positivas son posibles
o después de múltiples episodios de infección, la pero menos frecuentes que en las pruebas no tre-
caída del título es más lenta y puede estabilizarse a ponémicas y se pueden producir en presencia de
títulos bajos (VDRL <8, RPR<16). La comparación anticuerpos anti-eritrocitos, en enfermedades auto-
de títulos entre distintas muestras debe realizarse inmunes y en conectivopatías, entre otras. La prue-
en paralelo y con la misma técnica. En pacientes ba FTA ha dejado de usarse en muchos laborato-
con enfermedades autoinmunes puede persistir el rios debido a que es muy laboriosa.
título a pesar de un tratamiento correcto.
En la mayoría de los laboratorios se emplean técni-
Los falsos positivos se estiman en un 0,2-0,8% de cas de EIA o CLIA, debido fundamentalmente a la
los casos, y pueden ser transitorios, habitualmente automatización que se consigue con autoanaliza-
con títulos bajos, en respuesta a condiciones que dores que permiten ensayar números muy eleva-
cursan con una activación policlonal de linfocitos dos de muestras, por lo que se han convertido en
B, como ocurre en las inmunizaciones y en las la prueba de cribado inicial. Detectan anticuerpos
infecciones agudas por virus de la hepatitis A, B, totales (IgG y IgM). La muestra a ensayar es suero.
C, sarampión, VEB, varicela, Mycoplasma pneu- Tienen una elevada sensibilidad y especificidad.
25
f) Algoritmos diagnósticos (Figuras 2 y 3). En rentes de infraestructuras sanitarias, permitiendo

la mayoría de los laboratorios de cierto tamaño se de forma simultanea realizar el cribado e iniciar el
emplea el denominado algoritmo reverso, que se tratamiento. No tienen sentido en nuestro entorno,
inicia con una prueba treponémica automatizada, en el que disponemos de laboratorios capaces de
EIA o CLIA. El resultado negativo, en el contexto realizar diagnósticos mucho más precisos.
de cribado excluye la infección y en el contexto de
un paciente con sospecha diagnóstica debe repe- h) Neurosífilis. El examen del LCR debe reali-
tirse la extracción y el ensayo a las 6 semanas. zarse cuando exista sospecha clínica neurológica,
El resultado positivo ocurre tanto en personas con oftálmica u ótica, en la sífilis terciaria cardiovas-
enfermedad antigua correctamente tratada como cular y gomas, y ante un fracaso terapéutico. La
en pacientes no tratados con enfermedad activa, definición de neurosífilis asintomática depende de
siendo más sensible que las pruebas no treponé- la valoración en el LCR de las proteínas, células y
micas para detectar la sífilis de reciente adquisi- anticuerpos no treponémicos y treponémicos, sin
ción. En poblaciones de baja prevalencia, detecta que exista una definición de consenso. La valora-
falsos positivos. Debe confirmarse con otra prueba ción del LCR en pacientes asintomáticos podría
treponémica distinta, y en muchos laboratorios se estar indicada en 3 situaciones: pacientes VIH con
emplea la técnica de TPHA, que parece mejor en el sífilis tardía y CD4 ≤350/mm3 y/o títulos en suero
caso de resultados discordantes que el FTA. Si la de VDRL/RPR >1:32; en caso de fracaso seroló-
segunda prueba treponémica es también positiva, gico y en caso de tratamiento alternativo (tetraci-
hay que realizar una prueba no treponémica para clinas) durante una sífilis tardía. La serología del
conocer el título basal que determina la actividad LCR debe valorarse junto con la clínica, y sirve
y frente al que se comparan los controles de tra- para apoyar el diagnóstico clínico, puesto que el
tamiento. Esta prueba no treponémica se puede diagnóstico de certeza es histológico. Es muy im-
realizar en una segunda muestra del paciente. Hay portante que la muestra no esté contaminada con
que emplear suero diluido y sin diluir para evitar el sangre. La técnica de elección es el VDRL, pues
efecto prozona. Si la segunda prueba treponémica es más sensible (se calcula que es sensible en
no es positiva, puede plantearse la confirmación un 40% de los casos) que el RPR, pero aun así,
con un inmunoblot IgG. El algoritmo reverso de los ambos son poco sensibles, por lo que un resulta-
CDC emplea como segunda prueba el RPR mien- do negativo no excluye neurolúes (falsos negati-
tras que el de los ECDC recomienda otra prueba vos). Un resultado positivo en ausencia de con-
treponémica, ambos algoritmos parecen tener la taminación hemática se considera indicativo de
misma utilidad en poblaciones de baja prevalencia. neurolúes en una sífilis tardía, pero en una sífilis
precoz (<1 año) el significado no está tan claro.
El denominado algoritmo tradicional fue empleado El resultado negativo de una prueba treponémica
en la mayoría de los laboratorios antes de la apa- (idealmente FTA) en LCR hace muy improbable
rición de pruebas automatizadas. Actualmente se una neurolúes, aunque no excluye el diagnósti-
sigue usando en laboratorios de pequeño tamaño y co. Por el contrario, el resultado positivo puede
en ciertos países. Se inicia con una prueba no tre- tener problemas de especificidad por la presen-
ponémica (RPR o VDRL) idealmente cuantificada. cia de anticuerpos en LCR como consecuencia
Sólo detecta sífilis activa. El resultado positivo se de alteraciones en la barrera hematoencefálica
confirma con una prueba treponémica. en el contexto de procesos que nada tengan que
ver con la sífilis. Por último, tampoco las técnicas
g) Las pruebas diagnósticas a pie del enfer- de PCR son aquí de gran ayuda debido a su baja
mo (POCT) deben de ser capaces de proporcio- sensibilidad y especificidad en esta muestra, aun-
nar el diagnóstico sin necesidad de equipamiento que al no haber un patrón oro se cree que la sen-
adicional (neveras, centrífugas o microscopios), y sibilidad de la PCR está infraestimada pero no es
tienen especial relevancia en la estrategia de la el test adecuado para esta condición.
OMS para la eliminación de la sífilis congénita y
la transmisión vertical de sífilis y VIH. En la actua- i) Control de tratamiento. El objetivo es detec-
lidad existen técnicas que detectan tanto anticuer- tar posibles reinfecciones o fallos en el tratamien-
pos treponémicos como no treponémicos que son to. En el caso de una sífilis primaria o secundaria,
útiles en el contexto de países y situaciones case recomienda realizar una evaluación serológica
26
a los 3, 6 y 12 meses. El título debería de caer En el caso de una sífilis latente, puede no producir-
4 veces (dos diluciones) en 6 meses. Pero hasta se la respuesta serológica no treponémica.
en un 20% de los pacientes tratados no se logra
esta reducción en el título hasta pasado un año, y Se considera fracaso terapéutico o reinfección si la
algunos pacientes permanecen con títulos bajos y sintomatología primaria o secundaria permanece
estables (serofast). Si no se objetiva una disminu- o reaparece a las dos semanas del tratamiento, y
ción de cuatro veces el título inicial a los 12 meses, si se objetiva un incremento de dos diluciones del
estaría indicado el examen del LCR. La negativiza- título de anticuerpos no treponémicos. En estos
ción de las pruebas no treponémicas después del casos se debe evaluar el LCR para descartar neu-
tratamiento se considera el mejor test de curación. rolúes y poder así decidir la pauta de tratamiento
Las pruebas treponémicas pueden permanecer más adecuada.
positivas de por vida.
Tabla 6. Fases de la sífilis y sensibilidad de las pruebas diagnósticas
Fase Duración Sensibilidad pruebas serológicas (%) Comentario

VDRL RPR EIA / TPHA FTA
CLIA*
Incubación 10-90 días - - - - - Periodo entre el
(media 21) contacto y el chancro.
Primaria 3-8 semanas 78 86 97 76 84 Chancro en el lugar de

la infección. Resolución
espontánea.
Secundaria 3-12 semanas 100 100 100 100 100 Un 25% de los no
tratados desarrolla
signos a las 4-10
semanas de aparecer
el chancro.
Latencia 1er año 95 98 100 100 100 Serología positiva sin

temprana evidencia clínica.
Latencia > 1er año o 71 73 94 94 96 La diferenciación en un

tardía y duración año es arbitraria. 1 año
terciaria indeterminada es criterio de IUSTI**.
* La sensibilidad puede variar en función del ensayo comercial utilizado.

**International Union against Sexually Transmitted Infection.
27
Tabla 7. Falsos positivos de las pruebas diagnósticas de la sífilis
Prueba Falsos positivos

No treponémicas
(a títulos bajos) Permanecen Activación policlonal transitoria de linfocitos B
<6 meses Vacunaciones
Hepatitis A
Hepatitis B
Hepatitis C
Sarampión
Virus Epstein Barr
Varicela
Mycoplasma pneumoniae
Paludismo
Infecciones del tracto respiratorio superior
Infarto agudo de miocardio reciente
Gestación
(títulos bajos o Permanecen Fiebre reumática

elevados) >6 meses Daño tisular crónico
Adicción a drogas intravenosas
Edad extrema
Leucemia
Linfoma
Mieloma múltiple
Lupus eritematoso sistémico
Gammapatías
Diabetes
Síndrome anti-fosfolípidos
Reacciones alérgicas graves
Lepra
Hepatitis crónica
Infección VIH
Treponémica Fiebre reumática

Lupus eritematoso
Adicción a drogas intravenosas
Diabetes
Edad extrema
Gestación
Enfermedad de Lyme (FTA)
28
Figuras 2 y 3. Algoritmos diagnósticos de la sífilis.
Prueba
no treponémica
No serodiagnóstico de sífilis. No ¿Positivo?

No se puede descartar infección
reciente
Si
Prueba
treponémica
No serodiagnóstico de sífilis No ¿Positivo?
Si
Serodiagnóstico de sífilis
29
Diagnóstico serológico de la sífilis

REVERSO
Prueba
treponémica
No diagnóstico de sífilis.
No ¿Positivo?
No se puede descartar
infección reciente
Si
2ª prueba
treponémica
Resolver discrepancia con 3ª No ¿Positivo?

prueba treponémica
(inmunoblot)
Si
Prueba no treponémica
cuantificada
Probable sífilis tratada.

El tratamiento podría estar indicado No ¿Positivo?
si no existe historia de tratamiento
previo
Si
Sífilis pasada o nueva.

Tratamiento habitualmente indicado a
no ser que haya sido realizado
previamente.
Volver a tratar si se objetiva incremento
del título en dos diluciones respecto a la
muestra previa
5.3.6. Donovanosis
30
5.3.6. Donovanosis aprobado por la FDA. La PCR se utiliza en muy

pocos centros y presenta problemas en el diseño
Infección producida por Klebsiella granulomatis de los cebadores, lo que conduce a posible am-
(anteriormente denominado Calymmatobacterium plificación cruzada con otras especies del género
granulomatis). Klebsiella.
El diagnóstico se realiza mediante: g) Serología: no tiene valor
a) Microscopía directa del raspado, torunda o 5.3.7. Chancroide

impronta de las lesiones: ver los cuerpos de Do-
novan con tinción de Giemsa, Leishman, Wright o Infección causada por Haemophilus ducreyi.
Warthin-Starry. Es el método más rápido y fiable.
Rotar una torunda firmemente por la úlcera y des- El diagnóstico se realiza mediante:
pués rotar en la superficie de un portaobjetos. El
uso previo de antibióticos hace difícil el diagnósti- a) Clínico: la precisión diagnóstica sólo es del
co. Baja a moderada sensibilidad. 30-80% y hay úlceras genitales mixtas con otros
patógenos.
b) Biopsias: mejor en casos atípicos, crónicos y
para excluir procesos tumorales, viendo los cuer- b) Microscopia: útil cuando hay una gran carga
pos de Donovan teñidos con Giemsa o plata. Se de microorganismos en forma de vagones de tren
obtiene una biopsia (en sacabocados) de la lesión o encadenados o de bandada de peces. Su S es
y preferiblemente se debe fijar con formalina. Re- baja 5-63% y su E 51-99%. Puede dar falsos posi-
quiere personal entrenado debido a que los cuer- tivos. No se recomienda para su diagnóstico.
pos de Donovan pueden ser escasos. Moderada a
baja sensibilidad. c) Cultivo: técnicamente difícil y en las mejores
condiciones tiene una sensibilidad del 75-80% (III,
Cuerpos de Donovan: inclusiones de bacilos bipo- B). Es el patrón oro, pero es menos sensible que
lares con aspecto de imperdible y potencial cáp- la PCR. Se debe recoger la muestra limpiando pre-
sula en células mononucleares e histiocitos. Las viamente con salino fisiológico estéril y luego usar
células mononucleares tienen un diámetro entre una torunda de alginato cálcico, dacrón o algodón
25–90 µm, mientras que las dimensiones de los (ninguna parece ser mejor que otra) de la úlcera.
cuerpos de Donovan son de 0,5–0,7 por 1–2 µm y Se toma material de la base de la úlcera o de los
pueden estar encapsulados o carecer de cápsula. bordes después de eliminar el pus superficial con
una torunda de algodón. H. ducreyi sobrevive de 2
c) Tinción de Papanicolau: puede ser útil en zo- a 4 horas en la torunda si se mantiene a 4ºC. Un
nas endémicas. método alternativo es colocar la torunda en un me-
dio como el de Amies o Amies con carbón activa-
d) Inmunofluorescencia indirecta: da buenos re- do y enviarla lo antes posible al laboratorio (antes
sultados cuando la lesión está establecida, pero de las 4 h). Otro medio de trasporte es medio de
tiene poca sensibilidad con lesiones tempranas, tioglicolato con hemina. Para bubones se recoge
por lo que se emplea más para estudios epidemio- con aguja y jeringa aspirando el material purulento
lógicos que como prueba confirmatoria. desde una zona de tejido normal para reducir la
contaminación. La recuperación de HD es menor
e) Cultivo: difícil y laborioso por lo que no se de bubones intactos que de la base de la úlcera o
realiza de forma rutinaria. Puede cultivarse en sis- de bubones abiertos. Lo ideal es inocular la mues-
temas de cocultivo con monocitos y más fácilmen- tra directamente. No parece una ventaja usar el
te usando un medio de cultivo para Chlamydia spp. medio de transporte comparado con la inoculación
modificado, pero su rendimiento no es adecuado. directa, en dos medios de cultivo al lado del pa-
Se puede hacer en monocapas de células HEp-2 ciente. Lo ideal es un medio bifásico debido a que
con medio de RPMI (suplementado con suero fetal las cepas difieren en su capacidad de crecimiento:
bovino, NaHCO3, vancomicina y penicilina). agar gonococo suplementado con 2% de hemog-
lobina bovina y 5% de suero bovino y suplementa-
f) Molecular: ningún método molecular está do con 1% de IsovitaleX (ya no está disponible el
31
medio CVA comercializado por Gibco Lab), 3 μ/ muestra se puede enviar en un recipiente estéril
mL de vancomicina para prevenir el crecimiento de seco, y si el envío al laboratorio se demora, se
grampositivos, y el segundo agar Mueller-Hinton congelará la muestra a -70ºC. No se requiere nin-
suplementado con sangre de caballo lisada al 5%, gún medio de transporte específico a no ser que lo
1% de Isovitalex y 3 μ/mL de vancomicina. Una indique el método comercial de PCR. Hay PCRs
modificación igualmente eficaz es sustituir el suero caseras y algunas comerciales como una PCR
bovino fetal por carbón activado al 0,2% que es múltiple para HD, TP y HS (III, B) y otras no bien
más barato. Algunas cepas de HD son sensibles validadas todavía. La S de la PCR es del 95%.
a la vancomicina pero se prefiere, a pesar de ello,
incluirla en los medios. Los medios se incuban en f) Serología: enzimoinmunoensayo (usando
5% CO2 a temperatura de 33-35ºC (es crítico que antígeno de células enteras sonicadas, o LOS u
no supere los 35ºC) y en ambiente húmedo un OMP. No es útil para el diagnóstico, la respuesta
mínimo de 72 h. El aislamiento mejora si se pone es lenta y da reacciones cruzadas con otras espe-
en condiciones de microaerofilia (en una jarra de cies de Haemophilus. Se utilizan en estudios epi-
anaerobiosis sin catalizador pero con dos sobres demiológicos. La S es del 55-100% y la E 23-96%.
generadores de CO2 y H2). Debido a que el labo-
ratorio no dispone habitualmente de estos medios, g) Biopsia de tejido: no es diagnóstico, podría
los clínicos deben preguntar si es posible prepa- ser útil para diagnosticar úlceras atípicas.
rarlos en 2-3 h.
h) Antibiograma: se puede realizar por dilución
H. ducreyi es un microorganismo asacarolítico y en agar o medante tiras en gradiente (Etest) pero
no se identifica bioquímicamente de forma fácil en no se realiza de rutina debido a que no hay méto-
el laboratorio. Sus colonias son tostadas o color dos estandarizados ni criterios interpretativos.
canela y amarillentas autoadherentes y se pueden
empujar enteras sobre la superficie del agar. Son i) Los Center for Disease Control and Preven-
oxidasa positiva, catalasa negativa y requieren el tion (CDC) debido a la dificultad diagnóstica han
factor nutricional X (hemina) para crecer (mediante propuesto el diagnóstico probable si un paciente
el test de la porfirina positiva) y no requieren NAD tiene úlceras dolorosas genitales y se ha excluido
(factor V). Actualmente la identificación se puede sífilis y herpes (IV, C).
realizar mediante MALDI-TOF.
j) No se recomienda realizar el test de curación.
Los controles de calidad con cepas de HD envia-
das a los laboratorios tienen valor limitado debido 5.3.8. Herpes genital y otras lesiones por el grupo
a que los aislados de laboratorio están más adap- herpes
tados al crecimiento que aislados frescos. El pro-
cesamiento de estos controles debe realizarse en a) Estudios virológicos. La confirmación en to-
paralelo junto con las muestras problema en me- dos los pacientes con sospecha clínica de herpes
dios preparados en el momento. Si esto no es po- genital, debe realizarse utilizando métodos diag-
sible, se deben procesar mediante PCR. nósticos que detecten directamente el virus en las
muestras genitales (Ib, A).
d) Inmunofluorescencia (detección de antíge-
nos): es una técnica con mayor sensibilidad que el Las muestras adecuadas para el estudio virológi-
cultivo y útil en zonas de alta prevalencia que utili- cos son variadas e incluyen principalmente raspa-
za un anticuerpo monoclonal frente a la OMP (pro- dos de vesículas cutáneas, exudados de úlceras
teína de membrana externa de 29 KDa) o también genitales o de mucosa rectal en el caso de proctitis
mediante inmunofluorescencia indirecta usando (Ib, A). En ausencia de lesiones externas: exudado
anticuerpos monoclonales frente a los lipooligo- uretral (hombre), exudado cervical o uretra (mu-
sacáridos (LOS). jer), orina (hombres y mujeres), exudado vulvar/
vaginal (niñas prepúberes) y exudado vaginal (mu-
e) PCR: puede haber inhibidores en las mues- jeres con histerectomía). En general los mejores
tras de las úlceras y puede ser necesario un paso resultados se obtienen a partir de lesiones vesi-
previo, que es muy laborioso, con extracción fe- culares, aunque las lesiones primarias producen
nol-cloroformo, para realizar una PCR múltiple. La mejores resultados que las recurrentes.
32
La detección molecular del VHS mediante PCR El estudio de resistencia a los antivirales, se en-
en tiempo real (qPCR) actualmente se considera marca dentro del concepto de fracaso del trata-
el método de diagnóstico de elección (Ib, A). Las miento clínico y se define como la falta de respues-
distintas variantes de qPCR permiten simultánea- ta al tratamiento antiviral (generalmente aciclovir/
mente la detección y el tipado del VHS en un solo valaciclovir) después de 10 días. En tales casos,
paso en base al análisis de las diferentes tempe- debe sospecharse infección por una cepa de VHS
raturas de fusión de los amplicones específicos de resistente y realizar pruebas de resistencia fenotí-
VHS-1 y 2. En comparación con el cultivo celular, pica y/o genotípica. La ventaja principal de la ge-
es más sensible y específica (Ib, A) y aumenta los notipificación es que se realiza directamente sobre
porcentajes de detección de VHS en muestras mu- la muestra del paciente, lo que hace innecesario
cocutáneas en un 11-71%. el aislamiento del virus en cultivo celular. Depen-
diendo de la carga de virus, los resultados pueden
Actualmente el diagnóstico molecular del herpes estar disponibles en menos de dos días, lo cual
molecular tiene dos enfoques, el primero dirigido es muy importante para la toma de decisiones clí-
por la clínica con el empleo de qPCR (hay más nicas. Las pruebas de resistencia genotípica ge-
de 15 equipos comerciales con marcado CE-IDV) neralmente implican la amplificación y secuencia-
o una aproximación sindrómica en el contexto del ción de los genes de la timidin-kinasa (TK) y ADN
diagnóstico de la úlcera genital (dado que el virus polimerasa y su comparación con cepas de refe-
herpes simplex sólo es responsable del 50-80% de rencia sensibles (generalmente HSV-1 X14112 y
los casos de los casos de úlcera genital) mediante HSV-2 HG52 Z86099). La resistencia a aciclovir/
qPCR multiplex donde además del diagnóstico de valaciclovir/famciclovir casi siempre se asocia con
la infección por el VHS se incluyen formatos de mutaciones no sinónimas en el gen TK y menos
qPCR dúplex y triplex (incluso protocolos que invo- frecuentemente en el gen de la ADN polimerasa.
lucran hasta 5 dianas moleculares) con el objetivo
de incluir en el diagnóstico diferencial otros mi- No se recomiendan los métodos de detección de
croorganismos como HD, CT serovar L, TP o VVZ. antígenos virales, como el análisis de inmunofluo-
rescencia directa, el inmunoensayo enzimático y
El cultivo celular actualmente no se considera el la tinción de Tzanck y Papanicolaou, excepto en
método de referencia para el diagnóstico del VHS, entornos de recursos extremadamente limitados
aunque todavía se usa en algunos centros. Su es- (Ib, A).
pecificidad es virtualmente del 100%, pero los ni-
veles de excreción de virus, la calidad de la mues- b) Serología tipo-específica: los estudios sero-
tra y las condiciones de transporte influyen en su lógicos no se recomiendan de forma rutinaria para
sensibilidad. Para el aislamiento del virus pueden el diagnóstico en pacientes asintomáticos (IV, C)
emplearse células Hep-2 o VERO pero es posible pero pueden ser útiles en casos de enfermedad
su recuperación en casi cualquier línea diploide genital recurrente cuando los métodos de detec-
o heterodiploide. La agitación durante la incuba- ción directa de virus han sido negativos (III, B) y
ción puede aumentar el número de aislamientos para las parejas sexuales de pacientes con herpes
y disminuir el tiempo de aparición de efecto cito- genital (sobre todo gestantes), ya que las parejas
pático. El efecto citopático es típico afectando a sero-discordantes pueden recibir consejo sobre
la totalidad de la monocapa en el caso del VHS-1, estrategias para reducir el riesgo de infección (Ib,
siendo más focal en el caso del VHS-2 y carac- A).
terizándose por la aparición de células refráctiles
de mayor tamaño, que tienen tendencia a fusio- Aunque las técnicas de western-blot o inmuno-blot
nar sus núcleos. El tiempo medio de aparición del son las pruebas serológicas de elección (sensibi-
efecto citopático es de tres días, aunque en mues- lidad 97% y especificidad >98%), no se utilizan de
tras de líquido vesicular el efecto puede aparecer rutina al ser complejas en su realización y no exis-
en 24 horas. La identificación del virus se realiza tir oferta de equipos comerciales. Debido a lo an-
generalmente por inmunofluorescencia directa con terior, el diagnóstico serológico está basado en el
anticuerpos monoclonales frente al VHS-1 y 2. En empleo de técnicas de enzimoinmunoensayo ca-
ocasiones, puede requerirse cultivo celular para paces de detectar anticuerpos tipo-específicos IgG
determinar la sensibilidad antiviral y generar sufi- frente a las glucoproteínas gG1 y gG2 (III, B). Las
cientes virus para estudios de transmisión. pruebas de IgM no se recomiendan en el diagnós-
33
tico de rutina y los estudios de avidez generalmen- co, adherido a las paredes vaginales y uniforme;
te no están disponibles de forma comercial. Dado b) pH vaginal > 4,5; c) olor a pescado tras añadir
que los equipos comerciales tienen una sensibili- a la muestra KOH al 10%, y d) más de un 20% de
dad muy diferente para VHS-2 y VHS-1, las tasas células clave (células clue) en montajes en fresco
de seroprevalencia del VHS, la presencia de fac- (microscopio x40).
tores de riesgo para el herpes genital y la historia
clínica influyen en el valor predictivo positivo de la b) La tinción de Gram se considera actualmente
serología tipo-específica y deben guiar la interpre- el método de referencia para el diagnóstico micro-
tación de los resultados (III, B). Las especificidades biológico de la VB, ya que presenta una sensibili-
de las pruebas ELISA pueden mejorarse elevando dad del 62 al 100% y una especificidad del 79 al
el valor del índice para interpretar la positividad de 100%. La tinción de Gram se evalúa con distintos
la prueba y comprobando los valores intermedios criterios, por ejemplo, los de Hay/Ison o Nugent
con una prueba confirmatoria alternativa (IIa, B). (Tabla 9), en los que se asignan distintos grados
en función de la proporción relativa de bacilos
Es necesario distinguir en genitales las lesiones grampositivos con morfología de Lactobacillus y
por VHS de las producidas por VVZ, ya que ge- de cocos y bacilos Gram- variables (como GV, A.
neralmente son, en el último caso, reactivaciones vaginae, Prevotella spp., Porphyromonas spp. y
del VVZ que recuerdan VHS y es importante su Peptostreptococcus spp.) y de bacilos gramnega-
diferenciación debido a que el tratamiento antiviral tivos curvados (como Mobiluncus spp.) (Figura 4).
requiere dosis más altas en el caso de VVZ, a la
posibilidad de recurrencias y a la posibilidad en las c) Por su baja sensibilidad y especificidad, la
reactivaciones de transmisión de una varicela por citología cervical teñida por el método de Papani-
vía sexual en el caso de una pareja sin anteceden- colaou carece de utilidad en el diagnóstico de la
tes de haberla pasado. VB. Debido a la naturaleza microbiológica comple-
ja de la VB y a la falta de un único microorganismo
Además también se han observado lesiones ulce- causante, no se recomienda realizar el cultivo de
rativas por virus de Epstein-Barr. GV. La tinción de Gram y los nuevos ensayos de
diagnóstico del microbioma vaginal son más espe-
5.3.9. Linfogranuloma venéreo cíficos que el cultivo o las sondas de ADN para GV.
El diagnóstico del LGV se incluye en el apartado B. Vaginitis aerobia (VA): todavía no se ha investi-
de C. trachomatis. gado suficientemente la incidencia y la prevalencia
de la VA y se desconoce la causa de esta. La VA
5.3.10. Vaginosis bacteriana y vaginitis aerobia se diferencia de la VB en que existe inflamación y
presencia abundante de leucocitos en la vagina,
A. Vaginosis bacteriana (VB): el diagnóstico se es- de aquí su denominación de vaginitis. En cambio
tablece fundamentalmente por los signos clínicos se asemeja a la VB en que es una disbacteriosis.
y las características del flujo vaginal, y puede con- Los síntomas incluyen inflamación, flujo amarillo y
firmarse por criterios objetivos microscópicos en la dispareunia vaginal. El pH vaginal suele incremen-
tinción de Gram del exudado vaginal. tarse por encima de 6 y la prueba de KOH es ne-
gativa. Hay presencia de microbiota predominante
a) Los criterios clínicos de Amsel están basados como E. coli, S. agalactiae o S. aureus que pre-
en la presencia de tres de los siguientes síntomas sentan los criterios de Hay/Ison o los criterios AV
o signos: a) flujo vaginal fino, homogéneo, blan- de Donders (≥ 5).
34
Tabla 8. Diagnóstico diferencial de las principales causas de vaginitis.

Vaginitis bacteriana Candidiasis Tricomoniasis
Sintomatología
Aproximadamente 50%
10-20% asintomáticas 10-50% asintomáticas
asintomáticas
Exudado con olor a pescado Prurito Prurito
Dolor vulvar Disuria
Dolor en abdomen bajo (poco
Exudado vaginal sin olor
frecuente)
Dispareunia
Signos clínicos
Secreción vaginal homogénea,
delgada, de color blanquecino-
Eritema vulvar Eritema vulvar
grisáceo y que se adhiere a las
paredes vaginales
Ausencia de vaginitis Fisuras vulvares Vaginitis
Exudado vaginal espumoso y
Lesiones cutáneas satélite
amarillento
Edema vulvar
Tabla 9. Interpretación de la tinción de Gram según criterios de Nugent y de Hay/Ison

Criterios de Nugent
Recuento / campo
Morfología Puntuación
inmersión
>30 0
5-30 1
Bacilos grampositivos con
1-4 2
morfología de Lactobacillus
<1 3
0 4
>30 4
Bacilos gramnegativos con 5-30 3
morfología de Gardnerella y 1-4 2
Bacteroides <1 1
0 0
>5 2
Bacilos Gram-variables
<1-4 1
curvados
0 0
Interpretación: Puntuación 0-3 Normal; 4 – 6 Intermedio; 7 – 10 Vaginosis bacteriana
Criterios de Hay/Ison
Grado Morfología
Predominio de bacilos gramposiivos con
1. Normal
morfología de Lactobacillus
Flora mixta con algún Lactobacillus y también
2. Intermedio bacilos gramnegativos tipo Gardnerella o
Mobiluncus
Predominio de Gardnerella y/o Mobiluncus.
3. Vaginosis bacteriana
Pocos o ningún Lactobacillus
Figura 4. Tinción de Gram de exudado vaginal mostrando las típicas células clave de
vaginosis bacteriana
35
5.3.11. Candidiasis genital La diferenciación entre especies albicans/no-albi-

cans es aconsejable en la candidiasis genital no
La candidiasis genital afecta principalmente a mu- complicada y obligatoria si se sospecha la presen-
jeres en forma de candidiasis vulvovaginal, y oca- cia de una candidiasis recurrente, aunque la evi-
sionalmente a hombres en forma de balanitis o ba- dencia (III, B) no lo aconseja en la no complicada.
lanopostitis. Un aspecto importante a considerar es No obstante, actualmente es fácil la diferenciación
que la candidiasis genital puede aparecer de forma de especies mediante MALDI-TOF.
concomitante a otras ITS.
La especiación a partir del cultivo se puede realizar
La candidiasis vulvovaginal, es la segunda causa mediante pruebas de fermentación o asimilación de
más común de vaginitis en mujeres en edad fértil carbohidratos o, como se ha indicado anteriormen-
y no suele tener la consideración de ITS, ya que te, mediante espectrometría de masas (MALDI-
las especies de Candida forman parte de la mi- TOF). El uso de medios cromogénicos permite la
crobiota vaginal normal; sin embargo, se puede diferenciación de las principales especies de Can-
transmitir por esta vía. Los síntomas clínicos de la dida manteniendo la sensibilidad respecto al cultivo
enfermedad son inespecíficos y pueden asociarse en medio de Sabouraud, aunque algunos estudios
con otras enfermedades e infecciones vaginales. El encuentran una disminución de aproximadamente
prurito vulvar y la sensación de ardor son los sínto- un 10% en la sensibilidad del medio cromogénico
mas característicos en la mayoría de las mujeres, cuando se emplea este enfoque.
a menudo acompañadas de dolor e irritación que
conducen a dispareunia y disuria. La exploración, b) Con independencia de lo anterior, existen apro-
generalmente revela eritema vulvar y una secreción ximaciones moleculares a la detección y espe-
vaginal de color blanco y aspecto grumoso. Según ciación de especies de Candida directamente en
su forma de presentación se clasifica no complica- muestras genitales. Las sondas de hibridación de
da (episodios sintomáticos únicos o infrecuentes) o ADN presentan sensibilidades similares al culti-
complicada o recurrente (4 o más episodios en 12 vo. Las TAAN, aunque no muy implantadas en la
meses). actualidad, muestran un aumento moderado en la
sensibilidad respecto al cultivo y es probable que
En el hombre, la balanitis y la balanopostitis pueden reemplacen a las sondas de hibridación de ADN.
adquirirse a través del contacto sexual directo con
parejas que presentan candidiasis vulvovaginal y c) No está aconsejado el estudio de sensibilidad a
por tanto tienen consideración de ITS. Los signos los antifúngicos de forma rutinaria para el manejo
y síntomas clínicos son inespecíficos en muchas de la candidiasis genital, de forma que en la candi-
ocasiones, aunque los pacientes generalmente re- diasis recurrente el tratamiento está dirigido por la
fieren ardor local y prurito, y la exploración muestra especie de Candida aislada.
vesículas en el glande que luego se desarrollan en
parches de exudado blanquecino. Figura 5. Agar Sabouraud con crecimiento de Can-
dida spp.
La candidiasis genital, está producida principal-
mente por Candida albicans aunque otras especies
del género Candida aparecen en el 10–20% de los
pacientes con candidiasis genital recurrente. Can-
dida glabrata es la especie no-albicans predomi-
nante en la candidiasis genital junto a C. albicans.
a) Aunque el diagnóstico de la candidiasis genital

puede realizarse de forma sindrómica, la micros-
copía y el cultivo en medios selectivos (agar Sa-
bouraud dextrosa con cloranfenicol-gentamicina)
(Figura 5) son el estándar diagnóstico en pacientes
sintomáticos aunque la sensibilidad y especificidad
de la microscopía es aproximadamente del 60-70%
en comparación con las técnicas de cultivo.
36
muestras de semen puede tener una mayor ren-

5.3.12. Tricomoniasis tabilidad. La inoculación de los medios de cultivo
según el tipo de muestra se realiza del modo si-
El diagnóstico de la infección por Trichomonas va- guiente:
ginalis se realiza mediante:
- Uretra: se inocula la torunda directamente.
a) Microscopia: - Orina: se recogen 10 mL, se centrifugan a 1500xg
durante 10 minutos y se inoculan 50 µL del sedi-
- Examen en fresco: es de fácil realización, rapidez mento en el caldo de cultivo.
y bajo coste, pero presenta una escasa sensibili- - Semen: se deja licuar a temperatura ambiente
dad (entre el 44-68%) dependiendo del observador, durante 1 hora antes de procesar, se centrifuga a
aunque tiene una especificidad del 98%, la tempe- 2000xg durante 10 minutos y se inoculan 50 µL del
ratura por debajo de 22ºC y el retraso en la obser- sedimento en el caldo.
vación de 10-30 minutos disminuye la sensibilidad
drásticamente. Para su realización se mezcla en un Si se utiliza orina para cultivo debe procesarse en
portaobjetos una gota de secreción uretral o vagi- 30 minutos y mantener mientras tanto a 37ºC para
nal con una gota de suero fisiológico o salino al que no haya pérdida de viabilidad. En el caso de la
0,5% atemperado a 37ºC, se pone un cubreobjetos PCR, se debe congelar a las 2h si está a 37ºC y en
y se observa al microscopio para observar la mo- 1 hora si se ha mantenido a temperatura ambiente.
vilidad característica de las tricomonas primero a Los cultivos, incubados a 37ºC, se deben obser-
100x y después a 400x para confirmar. El uso de var al microscopio un mínimo de 1 minuto en los
solución de salino- glucosa a pH 6,0 preserva los días 2 y 5 tras la inoculación e incubación. El me-
trofozoitos hasta 6 horas. dio InPouch TV test, tiene la ventaja de aumentar
la viabilidad del protozoo hasta 21 días y presenta
- Tinciones: se usan varias como tinción de Gram, una estabilidad a temperatura ambiente de hasta 6
Giemsa, naranja de acridina o Papanicolau, pero meses. Se revisa la presencia de TV en la cámara
su sensibilidad es baja en comparación con los superior de la bolsa. Puede mantenerse a tempe-
métodos moleculares. La tinción de Papanicolau ratura ambiente hasta 48 h antes de mantenerse a
con tecnología líquida aumenta la sensibilidad a 37ºC.
60-96% y la E al 98-100% pero el valor predictivo
positivo es bajo en sitios con baja prevalencia. c) Pruebas rápidas: sondas genéticas comerciales
(Affirm VP III, Becton-Dickinson) (aprobado FDA y
b) Cultivo (IIb, B): requiere numerosos nutrientes CE pero considerado de complejidad moderada)
en el medio como carbohidratos, aminoácidos, pu- que detectan la presencia de Candida spp., GV y
rinas, pirimidinas, ácidos grasos, hierro y vitaminas. TV en muestras vaginales con una sensibilidad y
Se realiza en los caldos de Roiron y de Diamond. especificidad para TV del 83% y 100% respectiva-
Es fácil de realizar, de bajo coste y requiere un mente en comparación con el cultivo y el examen
inóculo de tan solo 300 a 500 tricomonas/mL. Su en fresco. Además, poseen la ventaja de ofrecer un
principal inconveniente es el tiempo de incubación resultado fiable a los 45 minutos-1 hora.
ya que se requieren de dos a siete días para iden-
tificar el parásito. En mujeres es positivo en los 3 d) POCT: inmunocromatografia de flujo capilar
primeros días, pero en hombres requiere más días (OSOM Trichomonas rapid test. Genzyme Diagn.)
de incubación. Actualmente ya no es el método de (aprobado por la FDA) en 30 minutos, y el XenoS-
elección al tener una sensibilidad del 44-75% en trip-Tv (Xenotope Diagnostic), TV latex agglutina-
mujeres y del 40-56% en hombres frente a la PCR. tion test de Kalon en 10 minutos (no aprobado por
En varones el cultivo puede infraestimar el número la FDA y CE). La S de estos métodos es del 40-
de pacientes con tricomoniasis, y es mayor su S 95% y la E del 92-100%. La S baja en poblaciones
en orina que en muestra uretral. Si se realiza ex- con baja prevalencia y puede haber falsos positi-
clusivamente cultivo de orina o de exudado uretral vos, por lo que es necesario confirmar el resultado
se diagnostican el 67% de los casos, con lo que es de estas pruebas.
mejor combinar el sedimento de orina y la torunda
uretral (III, B). En mujeres sirven las torundas del e) TAAN (IIb, B): es la técnica de elección. Presenta
fornix posterior, torundas vaginales tomadas por el una sensibilidad del 70% en algunos estudios pero
propio paciente o la orina (II, B). El cultivo de las
37
no se utiliza rutinariamente, además, los métodos problema. Hay dos genotipos, el genotipo I es el
tradicionales de PCR requieren detección postam- más frecuentemente infectado por virus y el tipo II
plificación de productos, lo que resulta laborioso y asociado a resistencia a metronidazol.
puede conducir a errores. La PCR a tiempo real
mejora la precisión y elimina la necesidad de un j) Serodiagnóstico: los antígenos lisados tienen
procesado postamplificación y ofrece una sensibi- mayor sensibilidad y especificidad que la α-actinina
lidad del 90,1% y una especificidad del 100%. La para ELISA. No se utiliza para el diagnóstico.
detección en el primer chorro de orina aumenta la
sensibilidad tanto en hombres como en mujeres. 5.3.13. Papilomavirus humanos (verrugas genita-
También se ha desarrollado una amplificación iso- les) (VPH)
térmica (LAMP) casera. En general, la PCR no está
aprobada por la FDA para varones (excepto la de El diagnóstico de las verrugas genitales en el pa-
algunas compañías de diagnóstico) mientras que, ciente inmunocompetente es fundamentalmente
si lo están para orina, vaginal y endocervical en clínico ya que las lesiones son suficientemente ca-
mujeres. La sensibilidad de la PCR es del 89-98% racterísticas y se basa en el examen visual minu-
y en general mejora el rendimiento si se combina cioso del área genital (puede ser una enfermedad
la toma de varias muestras como orina, uretra y multifocal y multicéntrica), que puede favorecerse
pene. Existen actualmente formatos de detección con el empleo de luz incidente y lente de aumento.
combinados con otros patógenos. El uso de colposcopio, ureterocospio o anoscopio
puede ser útil en algunas situaciones, pero no es
La estabilidad del ADN de TV para PCR es mayor necesario en la práctica clínica rutinaria.
(hasta 30 días) cuando la muestra se mantiene a
4ºC (sólo es estable 3 días sin medio conservante). La biopsia simple (con estudio histopatológico y
A temperatura ambiente también se mantiene 30 molecular) puede ser necesaria como apoyo diag-
días con conservante siempre que éste se añada nóstico y debe ser considerada en las siguientes
en la primera hora después de la recogida de la circunstancias:
muestra.
a) Presencia de lesiones atípicas (lesiones pig-
f) Test de curación: deben ser negativos tras 2 se- mentadas, induradas, adheridas al tejido subya-
manas, y sólo están recomendados si persisten cente, hemorrágicas o ulceradas).
síntomas o si hay recurrencias (IV, C). Como ac-
tualmente se realiza el diagnóstico con PCR, esta b) Lesiones en pacientes inmunodeprimidos (in-
es la técnica que se utilizarían para realizar el test cluidos los infectados con el VIH).
de curación.
c) Lesiones que no responden o empeoran duran-
g) La precisión de las pruebas ofrecidas a través te el tratamiento estándar.
de internet es variable. En varones la recogida por
el propio paciente es mejor cuando se realiza con En estos casos, el diagnóstico microbiológico de
torunda a partir de exudado de pene que con una las infecciones por VPH, se realiza por los mismos
muestra de orina. métodos moleculares utilizados en el cribado del
carcinoma de cérvix.
h) Nuevos métodos: hay técnicas de PCR basadas
en beacon con primers frente al gen pfoB en to- Con independencia de lo anterior, es necesario
rundas endocervicales secas (detecta 3-4 TV/ mL). explorar a las mujeres con verrugas anogenitales
Los sistemas comercializados son el Presto(plus) para descartar la presencia de lesiones a nivel del
Assay y el TIB MOLBIOL LightMix Kit Trichomonas cérvix mediante citología, técnicas moleculares y
vaginalis Assay sobre torundas secas. colposcopia debido al riesgo de desarrollo de neo-
plasia cervical. Este estudio debería realizarse en
i) Tipificación: RFLP del gen de la actina y detec- base a lo especificado el procedimiento SEIMC
ción de virus de Trichomonas (Familia Totiviridae, para el estudio del VPH en muestras genitales.
genero Trichomanosvirus), de difícil realización. El
más robusto es el MSLT que requiere cultivo de la (https://www.seimc.org/contenidos/documentos-
muestra para tener suficiente carga de ADN, aun- cientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-
que la realización de una PCR anillada elimina este procedimientomicrobiologia57.pdf)
38
5.3.14. Proctocolitis por patógenos entéricos d) EPI: búsqueda de microorganismos CT, NG, MG,
TV y VIH, VB, enterobacterias y otros bacilos gram-
La observación de leucocitos PMNs mediante tin- negativos y cocos grampositivos
ción de Gram del exudado anorectal es una herra-
mienta útil y rápida. A todos los pacientes con fac- e) Epididimoorquitis: tinción de Gram/ azul de meti-
tores de riesgo se les deberían realizar las pruebas leno de exudado uretral (mismos criterios que ure-
adecuadas para detección de NG, CT (y LGV si CT tritis), cultivo convencional exudado uretral y TAAN
positivo), VHS y TP, ya que son los principales cau- de exudado uretral/ chorro de inicio de la micción.
santes de proctitis. Ante la sospecha de una proc-
tocolitis causada por enteropatógenos, el copro-
f) Eskenitis: cultivo y PCR para NG, CT, VB y micro-
cultivo es el método adecuado para el aislamiento
biota asociada.
de Shigella spp., Salmonella spp. o Campylobacter
spp. Las pruebas moleculares para la detección de
g) Infecciones oculares (conjuntivitis): CT, NG y MG
estos patógenos cada vez son más utilizados ya
(algunas publicaciones lo encuentran también en
que presentan mayor sensibilidad que el cultivo.
esta localización, está en discusión).
5.3.15. Proctocolitis por protozoos
h) Molluscum contagiosum: clínica, dermatoscopía
y raramente biopsia en lesiones atípicas. La PCR
La detección de estos patógenos por métodos con-
casera no es de uso rutinario en los laboratorios.
vencionales o por PCR se describe en otros proce-
dimientos de la SEIMC (ver Procedimientos SEIMC
i) Parásitos en semen que se conoce su transmisión
nº 30; 2008 y nº 35; 2009).
sexual: Entamoeba histolytica, Trypanosoma cruzi
(animales), y Toxoplasma gondii (animales).
5.3.16. Otros patógenos y cuadros clínicos
(Ver también Anexo I. Algoritmos diagnósticos) j) Proctitis: cultivo y PCR
a) Balanopostitis: cultivo subprepucial de Candida k) Prostatitis: cultivo y PCR. Papel incierto en aso-
spp., S. pyogenes, S. aureus, GV y anaerobios, ciación con nanobacterias y presencia de UU
PCR para TV y VHS y serología para sífilis.
l) Uretritis no gonocócica: existe una gran diver-
b) Bartolinitis: cultivo y PCR del pus. sidad de microbioma en la uretra y es variable de
persona a persona. En el 35% de las UNG no se
c) Ectoparásitos: detecta ningún microorganismo de los considera-
dos patógenos, por ello estudios caso-control ayu-
- P. pubis (ladillas): visualización del parásito y/o dan a valorar distintos microorganismos que se
huevos y visualización al microscopio si es nece- encuentran en casos sintomáticos. Se ha visto que
sario microorganismos de los géneros Propionibacte-
rium, Staphylococcus, Corynebacterium, Acineto-
- S. scabiei (sarna): clínico, dermatoscopia, to- bacter, Streptococcus, Micrococcus, Comomonas,
mografía de coherencia óptica. Diagnóstico definiti- Escherichia, Paracoccus y Arthrobacter son en ge-
vo identificando los ácaros, huevos o material fecal neral contaminantes. En la Tabla 10 se exponen
(scybala) de los raspados cutáneos de los surcos algunos y su posible significado.
mediante un escalpelo y poner en un porta con KOH
al 10%. Alternativamente, se puede aplicar una gota Las UNG por adenovirus pueden suponer hasta un
de aceite mineral para sacar el ácaro a la superficie 16% de las UNG no CT y producen disuria, mea-
y después coger el aceite con el escalpelo y pasarlo titis y/o conjuntivitis. En menos del 40% se obser-
a un porta. Un resultado negativo al microscopio no van ≥5 PMNs y puede haber presencia de monoci-
descarta la sarna. Otro método es aplicar tinta chi- tos que orientan el diagnóstico.
na negra o azul en las zonas sospechosas de tener
surcos y luego lavar con alcohol para eliminar la tinta Puede plantear diagnóstico diferencial la esquis-
de la superficie. También se puede detectar el pará- tosomiasis vesical que cursa con hemospermia o
sito mediante ELISA o PCR para detectar ADN del disuria.
parásito.
39
Tabla 10. Otros microorganismos encontrados en uretritis y su posible significado
Microorganismo Papel en UNG Comentario

Enterococcus Ninguno Posible ITU con síntomas y signos de
uretritis
Posible transferencia en sexo rectal
Finegoldia Ninguno Sólo refleja sexo vaginal sin protección

(Peptostreptococcus)
Gardnerella vaginalis Incierto No claro si es transferencia pasiva desde

vagina o verdadera colonización
Haemophilus influenzae y En algunos casos Puede indicar sexo oral

H. parainfluenzae
Mycoplasma fermentans Incierto
Mycoplasma hominis Incierto
Mycoplasma penetrans Ninguno Se ha visto en pacientes VIH positivos
Ureaplasma parvum Incierto Alta carga bacteriana puede ser

significativo de UNG crónica
Pasteurella multocida Posible Contactos sexuales con animales
l) Vaginitis: el papel de Weeksella virosa no se ha se al menos una vez al año o más frecuentemente
confirmado como de transmisión sexual. dependiendo de circunstancias específicas (prácti-
cas de riesgo con múltiples parejas, diagnóstico de
m) Virus en semen que se conoce su transmisión otras ITS o alta incidencia local de VHC). En casos
sexual: virus Ebola-Marburg, GB C (antes denomi- de sospecha de infección aguda se recomendaría
nado virus de la hepatitis G), hepatitis C y B, Zika, un estudio de carga viral en plasma ya que el pe-
CMV, Epstein- Barr, herpes 8, herpes 1 y 2, VIH, riodo de seroconversión es de 8-9 semanas, mo-
virus linfoma células T humano 1. mento en que podría aumentar las probabilidades
de transmisión. Sin embargo, el cribado en semen
n) Virus Ebola: al tratarse de un virus ARN de nivel no está recomendado ya que la presencia en esta
4, el diagnóstico de laboratorio requiere instalacio- muestra es errática y dependiente de la carga viral
nes de alto nivel de bioseguridad. en plasma.
o) Virus hepatotropos emergentes asociados a Ante un diagnóstico de VIH o cualquier ITS, el cri-
transmisión sexual: la hepatitis C (VHC) no se bado serológico debería incluir también VHB, ya
transmite eficientemente a través del contacto se- que el riesgo de infección por VHB es mayor en
xual. Sin embargo, varios trabajos sugieren trans- personas que tienen sexo sin protección, múltiples
misión sexual del VHC en personas VIH +, ya que parejas, antecedentes de ITS o HSH y usuarios de
el virus puede encontrarse en mayor frecuencia en drogas. La mayor concentración de VHB es en san-
el semen de individuos VIH + (37,8%) que en el de gre y aunque puede detectarse en semen, saliva o
individuos VIH- (18,4%). La presencia de carga vi- secreciones vaginales siempre es a baja concen-
ral en semen tiene correlación con la carga viral en tración, por lo que no se recomienda el estudio de
plasma ya que no parece que el virus se replique VHB en muestras genitales.
en leucocitos genitales. Con las nuevas estrategias
diagnósticas y de tratamiento de la hepatitis C, el Para una mayor información sobre el diagnóstico
mayor riesgo de transmisión estaría asociado más de virus hepatotropos recomendamos la lectura del
a infección aguda especialmente HSH y VIH posi- Procedimiento SEIMC nº 50 (2014).
tivos.
Se recomienda el cribado serológico de VHC en la p) Virus Zika: el diagnóstico se puede realizar por
evaluación inicial de personas recientemente diag- PCR en tiempo real o mediante estudio serológico.
nosticadas de VIH, y este cribado debería realizar- La elección de una estrategia diagnóstica u otra,
40
o incluso el tipo de muestra más conveniente está Sin embargo, existen peculiaridades diagnósticas
condicionada por el tiempo transcurrido desde el de las ITS en los niños prepuberales, respecto al
inicio de los síntomas. La detección molecular es tiempo de los estudios, métodos a emplear y signifi-
específica y por tanto definitoria de un diagnóstico cado de las positividades de los estudios:
de infección por virus Zika; en cambio, la serología
puede dar reacciones cruzadas con otros flavivi- a) Los niños con sospecha de abuso sexual,
rus, por lo que debe considerarse como caso sos- pueden acudir a urgencias o ser evaluados sema-
pechoso hasta confirmación, bien por otra técnica nas o meses después del abuso y esto influye en el
como el test de neutralización, seroconversión de abordaje de estudio de las posibles ITS.
IgG o incremento de 4 veces la IgG. El diagnóstico
de confirmación de casos autóctonos debe reali- b) Es importante considerar el periodo de incu-
zarse en el Centro Nacional de Microbiología (Ma- bación de las distintas infecciones a la hora de plan-
jadahonda, Madrid). Los tipos de muestras para tear el estudio microbiológico. Los estudios micro-
el diagnóstico molecular del virus Zika son suero, biológicos de NG, CT y TV, deberían realizarse dos
orina o semen. El tiempo medio de eliminación del semanas después del incidente y siempre y cuando
virus es menor en saliva, suero (1 semana), des- no se haya instaurado tratamiento antibiótico profi-
pués en orina (2 semanas) y más prolongado en láctico en la evaluación inicial. El estudio serológico
semen, donde además las viremia es más alta. Sin del VIH debería plantearse a distintos tiempos: en el
embargo, la serie publicada más amplia que anali- momento de la consulta,y, a las 6, 12 y 24 semanas
za el aclaramiento del virus revela que en orina se posteriores.
aclara antes que en suero (8 versus 14 días). La
presencia del virus Zika puede detectarse también c) No hay un consenso respecto al empleo de
en otras localizaciones, como saliva o exudado va- TAANs frente al cultivo. En general, se aceptan las
ginal, pero el rendimiento es muy pobre. TAANs en orina y muestras vaginales para CT y NG
en niñas prepúberes. Sin embargo, no hay estudios
q) Vulvitis: búsqueda fundamentalmente de TP, que avalen el uso de estas técnicas en muestras
VHS y Candida spp. de orina en niños prepúberes, ni en localizaciones
extragenitales como el recto y faringe en niñas y
5.3.17. ITS en niños niños. No existe tampoco evidencia suficiente para
recomendar el uso de TAANs en el diagnóstico de
La detección de una ITS en niños prepuberales o TV en niños prepúberes.
un adolescente no sexualmente activo puede ser
evidencia de abuso sexual. La prevalencia de ITS d) La importancia de la positividad de una prue-
entre los niños que sufren un abuso sexual es de ba en la evaluación del abuso sexual infantil varía
aproximadamente 5-8%. Sin embargo, la prevalen- según el microorganismo detectado. Las que son
cia puede variar según los hallazgos de la explora- específicas de contacto sexual incluyen: infección
ción, el entorno social y el agente infeccioso. por NG y TP, y en el caso del virus VIH o TV siem-
La decisión de realizar un estudio de ITS a un niño pre que se haya excluido la adquisición perinatal. El
con sospecha de abuso sexual debe realizarse de resto: VHS, verrugas genitales, y CT, se consideran
forma individualizada y debería plantearse si los pa- ITS menos específicas en el contexto del abuso se-
dres lo solicitan o concurren las siguientes circuns- xual al poseer otras formas de infección.
tancias: presencia de signos o síntomas de ITS, la
existencia de una ITS en hermanos u otros niños de e) Debido a las implicaciones médico legales se
su ambiente social, la sospecha de que el abusador recomienda que todas las muestras positivas por
tiene una ITS o alta probabilidad de padecerla y la TAANs sean conservadas adecuadamente en el
evidencia de penetración genital. laboratorio por si fueran necesarias nuevas deter-
minaciones. Lesiones genitales que recuerden VHS
Dependiendo de la sospecha del microorganismo se confirmará que no sea VVZ con presentación
causante de la posible ITS, las muestras que debe- atípica.
rían ser tenidas en consideración son las mismas
que en adultos, con la excepción de que en las ni- f) Respecto a MG, otros micoplasmas y Mollus-
ñas, no se realizan habitualmente tomas endocervi- cum contagiosum, no hay evidencia para su inter-
cales, sino tomas de muestra vulvar y vaginal con pretación en niños y solo deberían ser considera-
torunda. das si hay otros indicadores de abuso sexual.
41
6. INTERPRETACIÓN E INFORMACIÓN Antes de la validación definitiva de los informes,

DE LOS RESULTADOS habría que considerar una serie de aspectos que
podrían acompañar al informe en forma de comen-
A) Microscopía tarios:
Examen en fresco - Las muestras rectales, la orina de mujeres emba-

razadas y la orina de mujeres en la tercera sema-
- Informar la presencia o ausencia de leucocitos, na después de la menstruación pueden contener
levaduras o trofozoitos de TV. altos niveles de inhibidores (es probable que las
hormonas desempeñen un papel en esta inhibi-
Tinción de Gram ción) y por esto inhibir el proceso de amplificación
de ácidos nucleicos, lo que puede causar resulta-
- Informar la presencia o ausencia de levaduras, dos falsos negativos. Por lo tanto, se recomienda
leucocitos y la presencia o ausencia de diplococos verificar que existe un control de inhibición en las
Gram-negativos intracelulares. pruebas (aunque muchos de los sistemas comer-
- Informar la presencia o ausencia de células clave ciales actuales pueden eliminar sustancias inhibi-
o si la microscopía sugiere VB en base a los crite- doras durante el proceso de extracción). Lo ante-
rios de Nugent o de Hay/Ison. rior, podría afectar a la sensibilidad de la prueba y
debería indicarse.
B) Cultivo
- Aunque la detección de NG por TAAN es más
- Informar el aislamiento de microorganismos clí- sensible que el cultivo, el cultivo permite la identifi-
nicamente significativos, en su defecto informar cación confirmatoria y el estudio de la sensibilidad
el no aislamiento de microorganismos específicos antibiótica. Por ello, se debería recomendar rea-
(por ejemplo, NG) o microbiota normal (no debe lizar un cultivo en todos los casos de positividad
informarse la ausencia de NG en muestras vagina- mediante TAAN.
les ya que no es la muestra de elección).
- La detección del VHS mediante cultivo presenta
C) Sensibilidad antibiótica una sensibilidad menor que las pruebas de TAAN
si las vesículas o úlceras están en fase de cicatri-
- Informar la sensibilidad antibiótica en base a cri- zación.
terios EUCAST o CLSI.
- Las pruebas de TAAN en el caso de MG, pueden
D) Métodos moleculares presentar problemas de sensibilidad en algunos
equipos comerciales debido a que son infecciones
- Informar los resultados de las pruebas en base a de baja carga bacteriana.
lo siguiente:
- Las pruebas de TAAN que utilizan ensayos dú-
- Detectado: para un resultado reactivo confirmado plex o múltiplex, pueden presentar una inhibición
de la prueba. competitiva, lo que podría afectar a la sensibilidad
de la prueba.
- No detectado. para un resultado no reactivo de
la prueba. En las Tablas 11A y 11B se expone la opinión de
los integrantes en la elaboración de este documen-
- Indeterminado: cuando un resultado reactivo no to sobre la conveniencia de informar o no un de-
puede ser confirmado. terminado patógeno en función de la localización
anatómica basado en evidencias si las hay o en
- Inhibitorio: cuando la presencia de inhibidores la opinión como expertos teniendo en cuenta que
dentro de la muestra impide la amplificación por en algunos casos no hay guías claras al respecto.
TAAN.
42
Tabla 11A. Conveniencia de informar un patógeno según su localización anatómica

Microorganismo Localización Método Comentario
CT Todas Cultivo Informar

CT Orina (varones) TAAN Informar, es la muestra de elección
CT Orina (mujeres) TAAN Informar, no es la muestra de elección por
menor sensibilidad
CT Vaginal, endocervical, TAAN Informar
uretral
CT Rectal TAAN Informar, genotipado LGV
CT Orofaringea TAAN Informar. Asintomático o paucisintomático:
Puede ser fuente de transmisión por sexo
oral
CT Exudado de TAAN Informar, genotipado LGV
adenopatía (si está
presente)
GV Pene TAAN / Informar, comentario de posible valor en
Cultivo balanitis
GV Uretral varones TAAN Informar, comentario de su valor de portador
/Cultivo
Levaduras Orofaringea/rectal Cultivo- No informar
TAAN
Levaduras Genital Cultivo Informar, especiar dependiendo de recursos,
no realizar estudio de sensibilidad
antifúngicos de rutina
Micoplasmas:
MG Orina (varones) TAAN Informar. Pueden presentar problemas de
sensibilidad en algunos equipos comerciales
debido a que son infecciones de baja carga
bacteriana
MG Orina (mujeres) TAAN Informar, es menos sensible que la muestra

vaginal
MG Uretral, vaginal, TAAN Informar, pueden aparecer problemas de
endocervical, sensibilidad en algunos equipos comerciales
endometrial debido a que son infecciones de baja carga
bacteriana
MG Faríngeo TAAN No informar/ Controvertido
MG Rectal TAAN Informar, controvertido en asintomáticos

MH Faríngeo TAAN / No informar
Cultivo
MH Recto TAAN / No informar
Cultivo
MH Resto de muestras TAAN / No informar
Muestra noble en Cultivo Informar
mujeres (EPI)
UP Todas TAAN No informar
UU Faríngeo TAAN No informar
/cultivo
UU Recto TAAN No informar
/cultivo
UU Vaginal/Orina TAAN No informar/ IUSTI no recomienda cribado,
/cultivo sólo en hombres con alta carga bacteriana y
habiendo excluido otras causas
UU Uretral TAAN Informar (aunque la mayoría es colonización
/cultivo y tampoco se recomienda en algunas guías)
43
Tabla 11B. Conveniencia de informar un patógeno según su localización anatómica

Microorganismo Localización Método Comentario
NG Todas cultivo Informar, realizar siempre estudio

de sensibilidad antibiótica
NG (mujeres) Orina TAAN Informar, en caso de negatividad
reseñar que su sensibilidad es
inferior a otras muestras genitales
NG (varones) Orina TAAN informar, muestra recomendada en
hombres asintomáticos
NG Vaginal, TAAN informar
endocervical,
uretral
NG Rectal TAAN Informar, confirmar con un
segundo método molecular
previamente
NG Orofaríngea TAAN Informar, confirmar con un
segundo método molecular
previamente
NM Faríngeo Cultivo No informar/
Ver Procedimiento SEIMC
Infecciones TRS 2006: informar si
se cultiva en abundancia o si se
solicita expresamente
NM Uretral/ Vaginal Cultivo Informar
TV Faríngeo TAAN No informar
TV Rectal TAAN No informar
TV Vaginal, uretral Microscopía Informar, la sensibilidad se estima
en 51-65%
TV Vaginal, uretral Cultivo Informar, la sensibilidad se estima
en 75-96%
TV Orina, vaginal, TAAN Informar, sensibilidad y
endocervical, especificidad del 95-100%
uretral
VHS Anogenital Cultivo Informar, método menos sensible
que TAAN si las vesículas o
úlceras están en fase de
cicatrización
VHS Anogenital TAAN Informar
VHS Suero Serología tipo La presencia o ausencia de
específica anticuerpos tipo-específicos puede
ayudar a determinar si la infección
es primaria o recurrente
Predominio de E. faecalis, Vagina Cultivo Informar sin antibiograma
S. agalactiae, Poner comentario de crecimiento
enterobacterias, S. aureus, predominante y su papel en
etc vaginitis aeróbica
44
7. TEST DE CURACIÓN DE LAS ITS

En la Tabla 12 se exponen las recomendaciones del
test de curación de las ITS según diferentes organi-
zaciones.
Tabla 12. Test de curación de ITS e infecciones genitales
Microorganismo Test de curación Fuente

HD (Chancroide) No se recomienda CDC
CT* No recomendado de rutina, persiste ADN 3-5 semanas BASHH**
después del tratamiento
Recomendado 3-4 semanas después de finalizar el CDC

tratamiento. Si se adelanta, pueden obtenerse falsos
positivos de bacterias no viables cuando se realiza por
técnicas moleculares
Donovanosis No se recomienda GuÍa
australiana
LGV No se recomienda en tratamiento de 21 días IUSTI

Como CT CDC
M. genitalium** Debido a la elevada prevalencia de resistencias a IUSTI
macrólidos, el test de curación es obligado en todos los
casos. La muestra no se debe obtener hasta pasadas 3
semanas de finalización del tratamiento aunque no existe
consenso entre las guías que varían entre 2 semanas y 4-6
semanas después del tratamiento
NG* Se recomienda en todos los casos. No antes de pasadas BASHH
dos semanas de completar el tratamiento
Sífilis El test de curación es la negativización de los anticuerpos BASHH, IUSTI
no treponémicos. Realizar serología a los 3, 6 y 12 meses.
Y cada 6 meses hasta negativización o serofast.
TV >2 semanas BASHH
* El test de curación para CT y NG para la nueva guía IDSA y ASM de 2018 no se recomienda a menos que haya
persistencia de síntomas o en el embarazo y pacientes de riesgo en el cribado a los 3-12 meses
** British Association for Sexual Health and HIV
** Se recomienda por algunos autores el test de curación en recto después del tratamiento debido a que el tratamien-
to con azitromicina tiene poca efectividad
8.BIBLIOGRAFÍA 3. Diagnóstico microbiológico de las infecciones de

transmisión sexual y otras infecciones genitales. 2007.
1. Bignell C, Unemo M; European STI Guideli- Procedimientos en Microbiología Clínica. Disponible
nes Editorial Board. 2012 European guideline on the en:https://www.seimc.org/contenidos/documentos-
diagnosis and treatment of gonorrhoea in adults. Int J cientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc- proce-
STD AIDS. 2013; 24: 85-92. dimientomicrobiologia24.pdf. Acceso el 1 de abril de
2018.
2. Canadian Guidelines on Sexually Transmitted
Infections – Laboratory diagnosis of sexually trans- 4. European Centre for Disease Prevention and
mitted infections. Disponible en: https://www.cana- Control. Sexually transmitted infections in Europe 2014.
da.ca/en/public-health/services/infectious-diseases/ Disponible en: https://ecdc.europa.eu/sites/portal/files/
sexual-health-sexually-transmitted-infections/cana- media/en/publications/Publications/sexual-transmitted-
dian-guidelines/sexually-transmitted-infections.html. infections-europe-surveillance-report-2013.pdf. Acceso
Acceso el 20 de abril de 2018. el 1 de junio de 2018.
45
5. Grupo de Expertos del Grupo de Estudio de PLOS ONE. 2015;10: e0143304.

SIDA de la SEIMC (GESIDA), Secretaría del Plan
Nacional sobre el SIDA (SPNS), Grupo de Estudio 11. Papp R, Schachter J, Gaydos CA, Van Der
de ITS de la SEIMC (GEITS), Grupo Español para la Pol B. Centers for Disease Control and Prevention.
Investigación de las Enfermedades de Transmisión Recommendations for the laboratory-based detec-
Sexual de la Academia Española de Dermatología tion of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorr-
y Venerología y de la Sociedad Española de Infec- hoeae--2014. MMWR Recomm Rep. 2014; 63 (RR-
tología Pediátrica (SEIP). Documento de consenso 02): 1-19.
sobre diagnóstico y tratamiento de las Infecciones
de Transmisión Sexual en adultos, niños y adoles- 12. Patel R, Kennedy OJ, Clarke E, Geretti A, Nil-
centes. Ministerio de Sanidad, Servicios Sociales e sen A, Lautenschlager S, et al. 2017 European gui-
Igualdad, 2017. delines for the management of genital herpes. Int J
STD AIDS. 2017; 28:1366-79.
6. Infectious diseases laboratory test directory.
CDC2018. Disponible en: https://www.cdc.gov/labo- 13. Seña AC, Hsu KK, Kellogg N, Girardet R,
ratory/specimen-submission/cdc-lab-tests.pdf. Acce- Christian CW, Linden J, et al. Sexual assault and
so el 2 de agosto de 2018. sexually transmitted infections in adults, adoles-
cents, and children. Clin Infect Dis. 2015; 61 (Suppl
7. John Janier M, Hegyi V, Dupin N, Unemo M, Ti- 8):S856-64.
plica GS, Potočnik M, et al. 2014 European guideline
on the management of syphilis. J Eur Acad Dermatol 14. Sexually transmitted diseases treatment gui-
Venereol. 2014; 28:1581-93. delines, 2015. MMWR Recomm Rep 2015; 64 (No.
RR-3):1-135.
8. Lacey CJ, Woodhall SC, Wikstrom A, Ross
J. 2012 European guideline for the management of 15. Sherrard J, Donders G, White D, Jensen JS;
anogenital warts. J Eur Acad Dermatol Venereol. European IUSTI. European (IUSTI/WHO) guideline
2013; 27:e263-70. on the management of vaginal discharge, 2011. Int J
STD AIDS. 2011; 22: 421-9.
9. Miller JM, Binnicker MJ, Campbell S, Carroll
KC, Chapin KC, Gilligan PH et al. A Guide to utiliza- 16. Unemo, M. Ballard, R. Ison, C. Lewis, D.
tion of the Microbiology laboratory for diagnosis of in- Ndowa, F. Peeling, R. Laboratory diagnosis of se-
fectious diseases: 2018 Update by the Infectious Di- xually transmitted infections, including human immu-
seases Society of America and the American Society nodeficiency virus World Health Organization; 2013.
for Microbiology. Clin Infect Dis. 2018; 67: e1-e94.
17. World Health Organization. Global health
10. Newman L, Rowley J, Vander Hoorn S, Wijes- sector strategy on sexually transmitted infections,
ooriya NS, Unemo M, Low N, et al. Global estimates 2016-2021. Towards ending STIs; 2016. Dispo-
of the prevalence and incidence of four curable se- nible en: http://www.who.int/reproductivehealth/
xually transmitted infections in 2012 based on sys- publications/rtis/ghss-stis/en/apps.who.int/iris/bits-
tematic review and global reporting. Meng Z, editor. tream/10665/.../1/who-rhr-16.09-eng.pdf. acceso el
2 de agosto de 2018.
46
10. ANEXOS
Anexo I. Aproximación diagnóstica (algoritmos etiológicos) al paciente con ITS y otras infecciones genitales (teniendo en cuenta que ocasionalmente puede
aparecer algún otro no incluido en la mayoría de estudios)
Balanopostitis
Causas infecciosas
Causas no infecciosas
Traumática Candida spp. ITS: Anaerobios: Aerobios:

Irritativa: <20% M. genitalium Tinción de Gram con Estreptococos (S. pyogenes)
- Falta de higiene Trichomonas vaginalis formas fusiformes/ Estafilococos (S. aureus)
- Retención de esmegma Treponema pallidum mixtas
- Uso lubrificantes, Herpes simplex Gardnerella vaginalis
afrodisiácos VPH
- Antisépticos
- Tratamientos tópicos
Alérgica:
- De contacto
- Fármacos
Crónica:
- Reiter
- Plasmocelular de Zoom
- Queratósica
- Líquenes
- Neoplasias
47
Bartolinitis
Causas infecciosas
Tumores ITS: Bacilos Gram-negativos Respiratorios:

N. gonorrhoeae Anaerobios S. pneumoniae
C. trachomatis ¿Vaginosis? H. influenzae
48
Enfermedad inflamatoria pélvica
Causas infecciosas
Vaginosis Enterobacterias: Respiratorias: Crónica: ITS:

G. vaginalis - E. coli H. influenzae M. tuberculosis C. trachomatis
Atopobium vaginae Enterococo S. pneumoniae Actinomyces spp. N. gonorrhoeae
Peptostreptococcus spp. Campylobacter spp. S. pyogenes M. genitalium
Bacteroides spp. S. agalactiae S. aureus T. vaginalis
Leptotrichia spp. VIH
Clostridios
Micoplasmas
Microbiota vaginal
49
Epididimoorquitis
Causas infecciosas
Amiodarona ITS: No ITS: Bacilos Gram-negativos Otros:

Enfermedad de Behçet C. trachomatis Bacilos Gram-negativos por: por prácticas insertivas Virus paperas
N. gonorrhoeae - Enfermedad urinaria anales Coxsackievirus
M. genitalium* obstructiva Virus rubéola
U. urealyticum* - Cirugía tracto urinario VEB
* (faltan evidencias) - Instrumentación VVZ
Candida spp.
Blastomyces spp.
Coccidiodes spp.
50
Prostatitis
Causas infecciosas
AGUDA CRÓNICA
Patógenos urinarios: Patógenos de prostatitis aguda y
E. coli Blastomyces spp.
Bacilos Gram-negativos Coccidiodes spp.
Pseudomonas spp. Histoplasma spp.
S. aureus
Enterococo
S. agalactiae
Patógenos ITS:
M. genitalium (papel
controvertido)
51
Proctitis, colitis, enteritis
Causas infecciosas
- Autoinmunes Candida spp. Proctitis: Proctocolitis: Enteritis:

- Psicológicas (prurito anal) N. gonorrhoeae Shigella spp. G. lamblia
- Disfunción neuromuscular C. trachomatis Salmonella spp. Cryptosporidium spp.
- Alergia LGV Campylobacter spp. Microsporidios
- Enfermedad Crohn M. genitalium C. difficile Histoplasma
- Colitis ulcerosa Sífilis E. histolytica
- Colitis por radiación VIH Cryptosporidium spp.
- Colitis química CMV
- Neoplasia
52
Prurito en piel de
región genital
Zona de vello Piel de región genital y

oreas localizaciones
(también familiar)
Pediculosis pubis Escabiosis
53
Rash cutáneo
Causas no infecciosas Causas infecciosas
Genital:
Generales:
- Líquenes Genital: N. gonorrhoeae
- Dermatitis Candida spp. C. trachomatis
- Psoriasis
Sífilis (incluyendo sífilis oral)
- Prurito anal
54
Formaciones verrucosas
Causas infecciosas
- Tumores benignos No umbilicada

(angioqueratoma, quiste) Umbilicada
- Tumores malignos
(epidermoides, etc) Molluscum Condilomas
- Hemorroides contagiosum acuminados
Formas clínicas Subclínicas Portador (VPH)
55
Úlcera genital
Causas infecciosas
- Trauma Ulceras Ulceras no

- Erupciones por fármacos dolorosas dolorosas
(tetraciclinas)
- Síndrome de Behçet
- Psoriasis Chancroide Granuloma Herpes Linfogranuloma Lúes o sífilis
- Dermatitis de contacto (chancro inguinal genital venéreo (chancro duro)
- Cáncer (células blando)
escamosas)
- Vasculitis
Chlamydia Treponema
Haemophilus Calymmatobacterium
Virus herpes trachomatis pallidum
ducreyi granulomatis
simplex 1 y 2 (L1, L2, L3)
VVZ
56
Algoritmo 11
Uretritis
y Cervicitis
Causas infecciosas
- Irritantes químicos Uretritis y Uretritis y Uretritis y Uretritis y

(espermicidas, cervicitis cervicitis no cervicitis no cervicitis no
productos de baño) gonocócica gonocócica gonocócica gonocócica
poco frecuente rara
- Cuerpos extraños frecuente
- Neoplasia endoureteral
- Síndrome Stevens-
Johnson Virus herpes simplex 1 y 2
Neisseria Chlamydia trachomatis Enterobacterias
- Granulomatosis de Adenovirus
gonorrhoeae Ureaplasma urealyticum Treponema pallidum
Wegener Trichomonas vaginalis
Mycoplasma genitalium Condiloma acuminata
Candida spp. Otros: Haemophilus spp.,
Neisseria meningitidis,
Clostridium difficile,
anaerobios
57
Algorítmo 12 Vulvovaginitis y
vaginosis (mujeres)
Causas infecciosas
- Irritación química por Otras

baños de burbuja, Candidiásica Tricomoniásica Vaginosis vulvovaginitis y
perfumes y detergentes (ITS) bacteriana vaginitis aerobia
- Exudado fisiológico
debido a cambios
Candida spp. Trichomonas vaginalis Gardnerella vaginalis, Streptococcus pyogenes
hormonales
Atapobium vaginae, Streptococcus agalactiae
- Vaginitis atrófica
Bacterias asociadas a S. aureus
- Cuerpo extraño
vaginosis bacteriana Haemophilus spp.
- Trauma
(BVAB): Salmonella spp.- Shigella spp.
Megasphera spp., Virus herpes simplex
Mycoplasma hominis, CMV
Ureplasma urealyticum
Mobiluncus spp.,
Bacteroides bivius,
Bacteroides disiens
58
Vulvovaginitis
en niñas
Examen en fresco
Sin sangrado Cultivo
Con sangrado
Condiloma Patógeno
Microbiota
Cuerpo extraño específico
normal
Hemangioma
Liquen escleroso
ITS
Pubertad precoz Respiratorios Entéricos (abuso sexual)
Trauma
(incluyendo abuso
sexual) - Alteración anatómica (doble
Tumor vagina con fístula, uréter ectópico)
Streptococcus pyogenes Neisseria gonorrhoeae
Prolapso uretral - Cuerpo extraño (toallitas de Shigella spp.
Streptococcus pneumoniae Chlamydia trachomatis*
Enf. cutánea vulvar papel) Yersinia spp.
Neisseria meningitidis Trichomonas vaginalis**
Shigella - Vulvovaginitis inespecífica (mala
Staphylococcus aureus Gardnerella vaginalis***
S. pyogenes higiene)
Moraxella catharralis Micoplasmas genitales***
- Quejas vaginales psicosomáticas
Haemophilus influenzae Herpes genital
- Enfermedad sistémica
Otros Papilomavirus
(escarlatina, enfermedad de
Crohn, enfermedad de Kawasaki)
* se negativiza a los 12-18
- Enfermedad cutánea vulvar
meses de vida perinatal
(psoriasis, seborrea, liquen
** rara en prepuberales,
escleroso)
vagina no estrogénica
- Oxiuros
*** controvertidos
59
Vulvitis
Causas infecciosas
- Liquen ITS: Candida spp.

- Psoriasis T. pallidum
- Alergia Herpes simplex
- Dermatitis atópica VPH
- Neoplasia
- Vulvodinia
60
Anexo II. Evidencias científicas del diagnóstico de

las ITS
Niveles de evidencia:
Ia Evidencia obtenida de meta-análisis de ensayos

controlados y aleatorizado
Ib Evidencia obtenida de al menos un ensayo contro-
lado y aleatorizado.
IIa Evidencia obtenida de al menos un estudio bien di- Grado de recomendación:

señado, pero no aleatorizado.
A: Niveles de evidencia Ia, Ib
Evi-
B: Niveles de evidencia IIa, IIb, III
IIb Evidencia obtenida de al menos un estudio bien di-
C: Evidencia IV
señado quasi-experimental.
III Evidencia obtenida de un estudio no experimental

descriptivo bien diseñado, como estudios de com-
paración, correlación o casos control.
IV Evidencia obtenida de comités de expertos, opinio-
nes y/o experiencia clínica de
personas de reconocida experiencia.
61
Sistema GRADE (Grading of Recommendations, Assessment, Development and Evaluation)
Grado de Riesgos / Calidad de la evidencia Trascendencia

Recomendación beneficios
1A Los beneficios Evidencia consistente basada Recomendación
Recomendación fuerte claramente superan en ensayos bien realizados, fuerte,
Evidencia de alta al los riesgos y las aleatorizados y controlados o se puede aplicar a la
calidad cargas, o viceversa evidencias abrumadoras de mayoría de los
otro tipo. Investigaciones pacientes en la
adicionales es poco probable mayoría de las
que cambien nuestra circunstancias y sin
confianza en la estimación del reservas
beneficio y riesgo
1B Los beneficios Evidencia basada en ensayos Recomendación
Recomendación fuerte claramente superan aleatorizados y controlados fuerte,
Evidencia de calidad al los riesgos y las con limitaciones importantes probablemente sea
moderada cargas, o viceversa (resultados inconsistentes, con aplicable a la mayoría
defectos metodológicos, de los pacientes
indirectos o poco precisos) o
evidencias muy fuertes de otro
tipo. Investigaciones
adicionales (si se realizan) es
probable que tengan impacto
en la confianza en el beneficio
y riesgo estimado
1C Los beneficios Evidencia basada en estudios Recomendación
Recomendación fuerte parecen observacionales, experiencia relativamente fuerte
Evidencia de baja superar a los riesgos clínica no sistematizada, o que podría
calidad y las cargas o basada en ensayos cambiar cuando se
viceversa aleatorizados y controlados, disponga de
pero con defectos graves. evidencias de mayor
Cualquier estimación del calidad
efecto es incierto
2A Beneficios muy Evidencia consistente basada Recomendación débil,
Recomendación débil equilibrados en ensayos bien realizados, la mejor acción puede
Evidencia de alta con los riesgos y aleatorizados y controlados o cambiar dependiendo
calidad cargas evidencias abrumadoras de de las circunstancias,
otro tipo. Investigaciones pacientes o valores
adicionales es poco probable sociales
que cambien nuestra
confianza en la estimación del
beneficio y riesgo
2B Beneficios muy Evidencia basada en ensayos Recomendación débil
Recomendación débil equilibrados aleatorizados y controlados Enfoques alternativos
Evidencia de calidad con los riesgos y con limitaciones importantes probablemente sean
moderada cargas, con (resultados inconsistentes con mejores en algunos
incertidumbres en la defectos metodológicos, pacientes en
estimación de indirectos o poco precisos) o determinadas
beneficios, evidencias muy fuertes de otro circunstancias
riesgos y cargas tipo. Investigaciones
adicionales (si se realizan) es
probable que tengan impacto
en la confianza en el beneficio
y riesgo estimado
2C Incertidumbre en la Evidencia basada en estudios Recomendación muy
Recomendación débil. estimación de observacionales, experiencia débil; otras
Evidencia de baja beneficios, riesgos y clínica no sistematizada, o alternativas pueden
calidad cargas; los basada en ensayos ser
beneficios pueden aleatorizados y controlados igualmente razonables
estar muy pero con defectos graves.
equilibrados con los Cualquier estimación del
riesgos y las cargas efecto es incierto
62
Candidiasis, vaginosis, enfermedad pélvica inflamatoria (EPI)
Tipo de situación Nivel de evidencia
Candidiasis
En las mujeres sintomáticas se debe realizar microscopía y el cultivo Nivel III, Grado C
Se debe tomar un hisopo vaginal del fórnix anterior para: Nivel III Grado B
.- Examen de Gram o fresco Nivel III Grado B
.- Sembrar directamente en medio para hongos. En cuadros no complicados Nivel III Grado B
identificar a nivel de C. albicans / C. no albicans
Vaginosis
Se recomiendan los criterios de Hay/Ison para el diagnóstico de vaginosis Grado C
No cultivar GV para el diagnóstico de la vaginosis: presente en 50% de las Nivel IIa
mujeres normales
En estudios de investigación, una alta concentración de GV se asocia con la Nivel IIa
presencia de VB
EPI
Ante sospecha EPI, buscar NG, CT y MG en el tracto genital inferior: respalda 1B
el diagnóstico de EPI y modifica el tratamiento
Chancroide
Diagnóstico definitivo: identificación de HD por cultivo. Sin embargo, las TAAN Nivel III, Grado B
son más sensibles (el cultivo tiene una sensibilidad del 75% en el mejor de los
casos).
Se han descrito PCR caseras con la ventaja de detectar simultáneamente otros Nivel III, Grado B
patógenos como TP y el VHS.
63
Chlamydia trachomatis
El diagnóstico de infección tanto genital como extragenital de CT se debe realizar usando Nivel IIa, Grado B
TAAN
Las mujeres con síntomas de proctitis deben tratarse de la misma manera que los hombres Nivel IV, Grado C
Indicaciones para realizar pruebas diagnósticas: Nivel IV, Grado C

.- Factores de riesgo: edad <25 años, nuevo contacto sexual en el último año, más
de un compañero sexual en el último año
.- Síntomas o signos de uretritis en hombres
.- Secreción cervical o vaginal con factor de riesgo para ITS
.- Epididimo-orquitis aguda en un hombre <40 años o con factores de riesgo para ITS
.- Dolor pélvico agudo y / o síntomas o signos de EPI
.- Proctitis / proctocolitis
.- Conjuntivitis purulenta en un neonato o adulto
.- Neumonía neonatal atípica
.- Personas diagnosticadas con otras ITS
.- Contacto sexual con personas con una ITS o EIP
.- Interrupción del embarazo
.- Cualquier intervención o manipulación intrauterina
Para el diagnóstico se recomiendan pruebas AAN debido a su sensibilidad, especificidad y Nivel I, Grado A
rapidez
La prueba diagnóstica se debe realizar en la primera consulta, pero si el contacto de riesgo Nivel IV, Grado C
fue hace menos de dos semanas, se debe repetir la prueba de AAN dos semanas después
de la exposición
Para el adecuado rendimiento de las TAAN, es fundamental seguir las recomendaciones del Nivel I, Grado A
fabricante sobre recolección, transporte, almacenamiento de muestras, controles internos,
positivos, negativos y controles de inhibición y la participación en un programa de evaluación
de calidad externa
Usar TAAN capaces de detectar todas las variantes conocidas (como la variante sueca Nivel I, Grado A
(nvCT), e investigar cualquier variación significativa inexplicable en la incidencia local o en
tasa de positividad
Las muestras de primera elección recomendadas para el diagnóstico de infecciones Nivel I, Grado A
urogenitales con TAAN son la orina de primer chorro en varones (20 ml de muestra
obtenidos pasada 1 hora de la micción previa) y en mujeres torundas vulvovaginales
obtenidas tanto por personal sanitario como mediante auto-toma
Debido a una sensibilidad subóptima, la orina de primer chorro en mujeres solo se debe usar Nivel II, Grado B
si no se pueden obtener otras muestras
El diagnóstico TAAN en muestras extragenitales, confirmar los resultados positivos con otro Nivel II
ensayo
En muestras rectales de HSH, genotipar los positivos para LGV, independientemente de la Nivel II, Grado B
presencia de síntomas anorrectales
No se recomienda realizar pruebas diagnósticas sobre muestras de semen Nivel II, Grado B
Si TAAN no disponibles, la detección de Ac. IgM apoya el diagnóstico de enfermedad Nivel I, Grado A
invasiva, como la LGV y neumonía neonatal
Se recomienda la prueba anual de CT en clínicas de ITS o de salud sexual para todas las Nivel IIa, Grado B
mujeres y hombres jóvenes sexualmente activos (<25 años de edad), y se debe considerar
para HSH
En mujeres y hombres jóvenes (<25 años de edad) positivos para CT se debería de repetir Nivel III, Grado C
la prueba en 3-6 meses
No se recomienda el uso rutinario de un test de curación en pacientes tratados con Nivel IV, Grado C
regímenes recomendados de primera línea, pero debe realizarse en el embarazo, en
infecciones complicadas, si los síntomas persisten, si se han administrado regímenes de
segunda línea o de tercera línea, y si se sospecha el incumplimiento de la terapia o la
reexposición
Cuando esté indicado el test de curación mediante TAAN este debe realizarse cuatro Nivel III, Grado B
semanas después de la finalización de la terapia
64
Herpes genital

Si baja probabilidad de herpes genital, confirmar el resultado positivo de Ac. anti Nivel III, Grado B
VHS-2 mediante muestra repetida o ensayo diferente
Si sospecha de herpes genital, hacer confirmación diagnóstica directa del virus Nivel Ib, Grado A
mediante toma con hisopos de la base de la lesión
En primer episodio de herpes genital, tipificar VHS-1 / VHS-2 para orientar el Nivel III, Grado B
consejo y tratamiento
No se recomienda determinación viral directa rutinaria en asintomáticos, ya que Nivel Ib, Grado A
es poco probable que se obtenga la confirmación del estado del portador
(eliminación viral intermitente)
La detección del ADN del VHS es la prueba de oro para el diagnóstico. Es más Nivel Ib, Grado A
sensible y específico que el cultivo celular
Los métodos de detección de antígenos virales, como el análisis de Nivel Ib, Grado A
inmunofluorescencia directa, el inmunoensayo y las tinciones de Tzanck y
Papanicolaou, ya no se recomiendan, excepto en entornos de recursos
extremadamente limitados (Ib, A)
La serología VHS tipo específica puede ser útil en los siguientes grupos:
.- Antecedentes de enfermedad genital recurrente o atípica cuando los Nivel III, Grado B
métodos de detección directa de virus han sido negativos
.- Primer episodio de herpes genital, donde la diferenciación entre infección Nivel III, Grado B
primaria y reactivación guía el consejo y manejo
.- Parejas sexuales. Las parejas serodiscordantes pueden recibir consejo Nivel Ib, Grado A
sobre estrategias para reducir el riesgo de infección
.- Gestantes asintomáticas con antecedentes de pareja con herpes genital Nivel IIb, Grado B
La especificidad del EIA se puede mejorar elevando el valor del índice para Nivel IIa, Grado B
interpretar la positividad y repitiendo todos los resultados intermedios con una
prueba confirmatoria
Diagnóstico de la infección anorrectal: usar TAAN, ya que es más sensible que Nivel IIa, Grado B
el cultivo
Hombres que tienen sexo con hombres (HSH)

Las TAAN son las pruebas de elección para la detección de infecciones rectales Nivel IIa, Grado B
por clamidia y gonococo
Con las instrucciones adecuadas, la autotoma rectal para TAAN de NG y CT es Nivel IIa, Grado B
una alternativa aceptable, viable y válida
Ofrecer la determinación del VHC a los HSH asintomáticos y VIH negativos 2B
cuando existan factores de riesgo (por ejemplo, sexo asociado con traumatismo
o lesión, drogadicción o LGV rectal)
Ofrecer al menos una vez al año la determinación del VHC a los varones en los 2B
que esté indicado la prueba trimestral de VIH y a los que se administra PrEP
Realizar anualmente la determinación de VHC a los HSH que sean VIH 1C
positivos, y siempre que exista sospecha clínica
Las pruebas de VIH se deben ofrecer a los HSH en cualquier circunstancia 1B
Ampliar la posibilidad de realizar rutinariamente pruebas de VIH a HSH fuera de 1C
las consultas de ITS
Los HSH deben de disponer de pruebas POCT para VIH fuera del entorno 1B
sanitario
Linfogranuloma venéreo

En varones VIH positivos, pero no en negativos, se recomienda la tipificación 2C
rutinaria de LGV en las infecciones por Chlamydia tanto sintomática como
asintomática y de cualquier localización
No se considera necesario una prueba de curación para LGV si se completa el Nivel IV, Grado C
tratamiento recomendado de 21 días de doxiciclina
Si está indicado, se debe realizar una prueba de curación a las 2 semanas Nivel IV, Grado C
después de completar el tratamiento de LGV para evitar la detección de ADN /
ARN de CT no viables
65
Mycoplasma genitalium

Las TAAN en muestras clínicas son los únicos métodos útiles para el Nivel III, Grado B
diagnóstico
Algunos medios de transporte pueden disminuir la sensibilidad en ensayos Nivel III, Grado B
caseros y debe ser evaluado
En los pacientes infectados deben buscarse otras ITS (CT, NG, sífilis, VIH y TV) Nivel IV, Grado C
Ante sospecha de transmisión vertical, observar al RN buscando signos de Nivel IV, Grado C
conjuntivitis e infección del tracto respiratorio
Realizar test de curación rutinaria en todos los pacientes (alta prevalencia de Nivel III, Grado B
resistencia a los macrólidos)
Las muestras para los test de curación se deben obtener no antes de pasadas 3 Nivel III, Grado B
semanas desde el inicio del tratamiento
No se recomienda la determinación rutinaria en HSH asintomáticos 2C
Neisseria gonorrhoeae

En varones sintomáticos con secreción uretral, la presencia en la tinción de Nivel III, Grado C
Gram o con azul de metileno de diplococos en el interior de PMN ofrece buena
sensibilidad (≥95%) y especificidad como prueba diagnóstica rápida
La microscopía tiene baja sensibilidad (≤55%) en varones asintomáticos y en la Nivel III, Grado C
infección endocervical (≤55%) y rectal (≤40%), por lo que no puede
recomendarse como una prueba de exclusión en estas situaciones
En las mujeres la orina no es una muestra adecuada pues tienen menor Nivel II, Grado B
sensibilidad que las torundas genitales
Para el cultivo proporcionan resultados aceptables la siembra directa y el uso de Nivel IV
medios de transporte
El cultivo es barato, específico, permite la confirmación y pruebas de Nivel III, Grado B
susceptibilidad. Mantener la capacidad de cultivar es esencial monitorizar las
resistencias. Se recomiendan medios de cultivo selectivos que contengan
antimicrobianos
En pacientes con gonococia o en riesgo de presentarla, realizar de forma Nivel III, Grado C
rutinaria el cribado de otras ITS
En mujeres se debe valorar la obtención de muestras rectales y faríngeas Nivel IV, Grado C
cuando hay antecedentes de exposición directa
Para el diagnóstico de la gonococia rectal la muestra puede obtenerse mediante Nivel III, Grado C
torunda ciega o bajo visión directa con proctoscopio
Las TAAN con VPP <90% precisan confirmación con otra TAAN frente a una Nivel III, Grado B
diana diferente
TAAN en muestras extragenitales: evaluar en el propio laboratorio. Los positivos Nivel IIb, Grado B
se confirman con otra TAAN frente a diana diferente
Se recomienda prueba de curación en todos los casos Nivel IV, Grado C
Pruebas de curación en asintomáticos: se pueden realizar con TAAN pasadas 2 Nivel IV, Grado C
semanas desde la finalización del tratamiento, y si el resultado es positivo, se
debería de hacer cultivo y pruebas de susceptibilidad antes de administrar otro
tratamiento
Sarna, ladillas

Sarna
Prueba de curación: 2 semanas después de la finalización del tratamiento Nivel IV, Grado C
mediante examen microscópico
Ladillas
Confirmar la eficacia del tratamiento 1 semana después de su finalización Nivel IIa, Grado B
mediante la búsqueda de piojos o liendres
66
Sifilis

Realizar microscopía de campo oscuro del chancro siempre que exista disponibilidad de 2A
equipo y personal
Determinar mediante PCR la presencia de TP en aquellas lesiones en las que se pueda 1A
esperar que esté presente
La prueba serológica de elección para el cribado es EIA/CLIA, preferiblemente 1B
determinando tanto IgG como IgM
Todos los HSH deben de ser evaluados para la sífilis 1B
Los resultados de cribado positivos se deben de confirmar con otra prueba treponémica 1B
(no FTA) y con una segunda muestra
A los resultados de cribado positivos se les debe realizar cuantificación mediante VDRL o 1A
RPR
Repetir una serología negativa de sífilis: 1B
.- a las 6 y 12 semanas después de un contacto aislado de alto riesgo
.- a las 2 semanas después de que el estudio de chancros por campo oscuro o PCR
haya sido negativo
A todos los pacientes con sífilis se les debe hacer cribado de otras ITS incluyendo al VIH 1A
El diagnóstico y tratamiento de la sífilis es idéntico para pacientes VHI positivo y negativo 1B
Control de tratamiento, obtener suero a los 1, 3 y cada 6 meses. Idealmente, realizar Nivel IV, Grado C
siempre la misma prueba no treponémica y en el mismo laboratorio Controlar hasta que
negativice o los títulos se mantengan bajos (1:1 - 1:4, durante 1 año y en ausencia de
riesgo)
Trichomonas vaginalis

Toma de muestras en mujeres Nivel III, Grado B
.- Hisopo del fórnix posterior con espéculo.
.- Las autotomas vaginales con hisopo es probable que den resultados
equivalentes
.- La orina se emplea con TAAN
En varones el cultivo uretral y del primer chorro de orina diagnostican el 60-80% de los Nivel III, Grado B
casos, y ambas muestras de forma simultánea aumentaran significativamente la tasa de
diagnóstico mediante microscopía o cultivo
Pruebas de curación: sólo si permanece sintomático después del tratamiento o si los Nivel IV, Grado C
síntomas vuelven a aparecer
POCT de TV Nivel IIb, Grado B
El cultivo tiene mayor sensibilidad que la microscopía y puede detectar TV en varones Nivel IIb, Grado B
Las TAAN ofrecen la mayor sensibilidad, son de elección si hay recursos para ello y se Nivel IIb, Grado B
convierten en la “prueba de oro”
No se recomienda el cribado de TV en individuos asintomáticos Nivel I, Grado A
Uretritis no gonocócica

En las uretritis no gonocócicas asintomáticas no se recomienda la realización de pruebas Nivel III, Grado B
diagnósticas
En las uretritis sintomáticas y aquellas con una secreción visible, evaluar la presencia de Nivel IV, Grado C
uretritis mediante la demostración de leucocitos PMN
Si hay secreción uretral, se puede recoger esta sin hacer una toma intrauretral Nivel IV, Grado C
Paciente sintomático con frotis uretral normal, recomendar volver para una nueva toma Nivel IV, Grado C
matinal sin haber orinado en toda la noche
La orina de primer chorro puede examinarse para filamentos, y si están presentes, teñir y Nivel III, Grado B
si ≥ 10 PMNL / campo 1000x, indica uretritis
La sensibilidad del frotis uretral depende del tiempo desde última micción. Se desconoce Nivel IV, Grado C
el tiempo óptimo. 2-4 horas es convencional
Toma uretral para determinar presencia de PMN: usar asa de plástico o hisopo de Nivel IIb, Grado A
algodón, que se introducen 1 cm en la uretra. El asa de plástico es menos doloroso que
el hisopo de Dacrón, que a su vez es menos doloroso que un hisopo de rayón
Si hay secreción uretral, se prefiere su recogida a la toma del exudado uretral Nivel IV, Grado C
67
Anexo III. Consejo para realizar un test diagnóstico según tipo de población (Guías australianas, excepto
donde se indica los CDC americanos) (Hay variaciones en otras guías y debe ser considerado tentativo de
patógenos a buscar en estas poblaciones)
Población Comentario
Abuso sexual:
- CT Test de cualquier orificio que ha sufrido penetración. Considerar muestras recogidas por el
propio paciente
Cribado inicial y repetir después de 2 semanas o más pronto si sintomático
TAAN son altamente sensibles y pueden detectar infección temprana
- NG Test de cualquier orificio que ha sufrido penetración. Considerar muestras recogidas por el
propio paciente
Cribado inicial y repetir después de 2 semanas o más pronto si sintomático
Si TAAN positivo tomar una torunda en el sitio o sitios relevantes para cultivo antes del
tratamiento
-Hepatitis B Test basal, repetir Ag HBs a las 6 y 12 semanas, si anti-HBs negativo
Considerar Ig Hepatitis B si no es inmune, no historia de vacunación o estado desconocido. Se
dará en las 72 horas de la exposición y vacuna de hepatitis B en 14 días
Asegurar que se completa el esquema de vacunación
- Sífilis Según protocolo de sífilis
- TV Cribado inicial y repetir 2 semanas después o más temprano si síntomas
- VIH Test basal y seguido por test a la 6 y 12 semanas
Las muestras y sus resultados pueden ser presentadas legalmente
Considerar profilaxis postexposición si se ve en las 72 horas de exposición
Adolescentes:
- CT, VHB, Sífilis, No recomendado cribado de CT en España aunque si en otros países
VIH Hacer cribado oportunístico
CDC en primera visita recomiendan solo CT, NG y VIH
Vacunación si VHB negativo
Usuarios de
drogas:
- CT Considerar muestras recogidas por el propio paciente
- NG Considerar muestras recogidas por el propio paciente
Si TAAN positivo tomar una torunda en el sitio o sitios relevantes para cultivo antes del
tratamiento
Se prefieren los cultivos para muestras de zonas no genitales
- Hepatitis A Vacunar si no está inmune
- Hepatitis B Tiene riesgo, si no vacunado, vacunar si no inmune
Se recomienda test después de completar la vacunación
- Hepatitis C Se mirará su estado serológico
Se recomienda test anual
No se considera una ITS excepto en pacientes VIH positivos con sexo anal
Si Ac. positivos, realizar TAAN para excluir hepatitis crónica
- Sífilis Según protocolo de sífilis
Embarazadas: CDC: VIH, TP, HBsAg, CT, NG, VHC y no se recomiendan para vaginosis, TV, VHS-2
Hombres que
tienen relaciones
sexuales con CDC: VIH, TP, NG, CT
hombres:
Mujeres que
tienen relaciones
sexuales con
mujeres:
- CT Transmisión no común
- NG Transmisión no común
- Sífilis Ver periodo ventana e historia
No datos, realizar test si pareja positiva
- TV No
- Vaginosis No
bacteriana
- VIH Ver periodo ventana e historia
Transmisión no común, realizar test si pareja positiva
- VHB Vacunación si negativa
68
Población Comentario
Mujeres y hombres
trabajadores del sexo:
- CT Considerar muestra recogida por el paciente
- NG Considerar muestra recogida por el paciente
Si ANN positivo tomar una muestra con torunda de los sitios relevantes para cultivo antes del
tratamiento
Los cultivos son preferidos para sitios no genitales
- Hepatitis A Vacunar si no inmune
Es innecesario más test después de completar la vacunación
- Hepatitis B Vacunar si no inmune
Considerar test después de vacunación de la hepatitis B
- Hepatitis C Si Ac. positivo, test de TAAN hepatitis C para determinar si tiene hepatitis C crónica
- Sífilis Si sospecha protocolo de sífilis
- VIH Repetir el test si el paciente estuvo expuesto en las 12 semanas previas (periodo ventana)
Parejas de VIH positivo:
Si TAAN positivo tomar una muestra con torunda de los sitios relevantes para cultivo antes del
tratamiento
Títulos anti-HBs se chequearán regularmente y el conviviente recibirán recuerdos para
mantener anti-HBs >10
- Hepatitis C Si ac positivo, test de TAAN hepatitis C para determinar si tiene hepatitis C crónica
Personas en centros
penitenciarios:
tratamiento
Considerar test después de vacunación de la hepatitis B
- Hepatitis C Si Ac.positivo, test de TAAN hepatitis C para determinar si tiene hepatitis C crónica
- VIH Repetir el test si el paciente estuvo expuesto en las 12 semanas previas (periodo ventana)
Refugiados e
inmigrantes nuevos:
- CT Ofrecer si riesgo debido a asalto sexual o sexo sin protección. Considerar muestra recogida
por el paciente
- NG Ofrecer si riesgo debido a asalto sexual o sexo sin protección
Considerar muestra recogida por el paciente
tratamiento
Considerar test después de vacunación de la hepatitis B sólo en VIH positivo y pareja sexual o
contactos caseros

-VIH Repetir el test si el paciente estuvo expuesto en las 12 semanas previas (periodo ventana)
Personas transgénero:
tratamiento
- VIH Repetir test si paciente expuesto en las 12 semanas previas (periodo ventana)
- VHA Vacunar si no inmune
- VHB Vacunar si no inmune
69
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-01
Servicio / Unidad de Microbiología RPR (Rapid Plasma Reagin) para el diagnóstico
Hospital............................................ de la infección por Treponema pallidum Edición Nº 02 Página 1 de 6
PNT-ITS-01
RPR (Rapid Plasma Reagin) PARA EL DIAGNÓSTICO DE
LA INFECCIÓN POR Treponema pallidum
ELABORADO REVISADO Y APROBADO
Nombre / Firma Fecha Nombre / Firma Fecha
EDICIÓN FECHA ALCANCE DE LAS MODIFICACIONES
01 2007 Edición inicial
02 2018 Segunda edición
COPIA REGISTRADA Nº............................ASIGNADA A.....................................................
Este documento es propiedad del Servicio de Microbiología del Hospital/Centro…………………………..........….

La información en él contenida no podrá reproducirse total ni parcialmente sin autorización escrita del Re-
sponsable de su elaboración. Las copias no registradas no se mantienen actualizadas a sus destinatarios.
70
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-01
Servicio / Unidad de Microbiología
RPR (Rapid Plasma Reagin) para el diagnóstico
1. PROPÓSITO Y ALCANCE
El objetivo de este documento es describir la prueba serológica RPR (Rapid Plasma Reagin) que determina
de forma macroscópica la presencia de anticuerpos no treponémicos frente a Treponema pallidum. Se usa
para determinar la actividad de la enfermedad y la respuesta al tratamiento, y en algunos algoritmos como
prueba de cribado en el diagnóstico.
2. FUNDAMENTO
La prueba emplea el antígeno del VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) que contiene cardiolipina,
lecitina y colesterol, estabilizados con EDTA, así como partículas de carbón. El paciente con sífilis produce
anticuerpos anti-cardiolipina, que se unen al antígeno del ensayo, formando una red que atrapa a las partí-
culas de carbón, visualizándose la reacción macroscópicamente.
Los anticuerpos del paciente se forman como respuesta a las lipoproteínas o a la cardiolipina presentes en
el treponema, así como a los antígenos lipoides del propio paciente expuestos como consecuencia de la in-
fección por T. pallidum o también como respuesta al daño tisular en el seno de enfermedades autoinmunes
o por el uso de drogas parenterales.
La reacción se efectúa en una tarjeta de superficie plástica, donde se deposita el suero problema y segui-
damente el antígeno con las partículas de carbón. Si los anticuerpos están presentes se produce una flocu-
lación negra que puede verse macroscópicamente. Cuando no hay presencia de anticuerpos no se produce
aglutinación. Se determina la presencia tanto de anticuerpos de la clase IgG como IgM. La reacción puede
cuantificarse (titulación), lo que sirve para estudiar la evolución y respuesta al tratamiento. Si existe una
disminución significativa (dos diluciones dobles) indicaría que el tratamiento ha sido eficaz. Incrementos en
la misma proporción implican fallo en el tratamiento o reinfección. Si no hay una disminución significativa
(títulos estables), no significa necesariamente un fracaso terapéutico, y el paciente debe seguir siendo eva-
luado en el tiempo clínica y serológicamente.
3. DOCUMENTOS DE CONSULTA
1. García-Lechuz Moya JM, González López JJ, Orta Mira N, Sánchez Romero MI. Recogida, transporte y
procesamiento general de las muestras en el Laboratorio de Microbiología. 2017. 1b. Sánchez Romero MI
(coordinadora). Procedimientos en Microbiología Clínica. Cercenado Mansilla E, Cantón Moreno R (edito-
res). SEIMC 2017. Disponible en http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmi-
crobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia1b.pdf
2. Alados JC, Gómez E, Leiva J, Pérez-Sáenz JL, Rojo E . Seguridad en el laboratorio de Microbiología
Clínica. 2014. 10 a. Pérez Saénz JL (coordinador). Procedimientos en Microbiología Clínica. Cercenado
Mansilla E, Cantón Moreno R (editores) SEIMC 2014. Disponible en: http://www.seimc.org/documentos/pro-
tocolos/microbiologia.
3. Gestión de residuos.
4. Prospecto del equipo comercializado con las instrucciones del fabricante presente en cada caja de reac-
tivos.
71
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-01
RPR (Rapid Plasma Reagin) para el diagnóstico
4. MUESTRAS
- Para la realización de esta prueba se requiere sangre total (5 ml) que se centrifugará para obtener el sue-
ro. No se requiere ninguna preparación especial del paciente.
- La prueba se lleva acabo preferiblemente sobre muestra de suero, sobre todo si su realización se va a
demorar más de 48 horas. Es la muestra preferida para realizar cuantificación.
- Los sueros pueden almacenarse en nevera a 4ºC durante una semana. En caso de no realizarse la técnica
en una semana, se deberán congelar a -20ºC.
- El plasma también es una muestra aceptable, pero la determinación debe llevarse a cabo tan pronto como
sea posible.
- No debe realizarse esta prueba en muestras lipémicas o hemolizadas, ya que pueden dar resultados
erróneos.
5. REACTIVOS Y PRODUCTOS
- Equipo RPR comercializado. Contiene las tarjetas, los controles, el reactivo con el antígeno, incluyendo
partículas de carbón, y las agujas de dispensación.
- Solución salina (cloruro sódico al 0,9%)
6. APARATOS Y MATERIAL
- Puntas de pipeta.
- Palillos. Normalmente vienen suministrados en el equipo comercializado (ver procedimiento).
- Agitador orbital que permita velocidad de giro de 100 ± 2 rpm.
- Reloj temporizador
7. PROCEDIMIENTO
7.1.ENSAYO CUALITATIVO
1. Dejar que los reactivos, controles y muestras alcancen la temperatura ambiente.

2. Rotular cada círculo de la tarjeta de reacción, con la identificación de la muestra o control que se vaya
a ensayar.
3. Dispensar 50 μl de cada control o muestra en su círculo correspondiente.
4. Con un palillo, abrir la gota dispensada hasta ocupar, sin sobresalir, todo el círculo de la tarjeta.
5. Agitar para resuspender el vial de reactivos con el antígeno para homogeneizar el contenido.
6. En posición vertical, dejar caer una gota limpia (sin burbujas) sobre la muestra o controles. No mezclar.
7. Colocar la tarjeta sobre el agitador orbital.
8. Rotar 8 minutos a 100 ±2 rpm.
9. Con la tarjeta en la mano, rotarla manualmente para una mejor observación de los resultados
10. A las muestras que en el ensayo cualitativo presenten agregados, se les debe realizar el ensayo
cuantitativo.
72
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-01
Servicio / Unidad de Microbiología RPR (Rapid Plasma Reagin) para el diagnóstico
7.2. ENSAYO CUANTITATIVO
1. Preparar las tarjetas para hacer diluciones dobles seriadas desde 1/1 hasta 1/16 (se precisan 5
círculos por suero o control).
2. Añadir 50 μl de solución salina a los círculos 2, 3, 4 y 5. Dejar la gota sin abrir a la extensión del círculo.
3. Añadir 50 μl de cada suero o control al círculo 1. Añadir 50 μl de cada suero o control al círculo 2 sobre
el salino, y con la misma pipeta, mezclar el suero y el salino mediante la aspiración y dispensación de la
mezcla un total de 8 veces, evitando formar burbujas.
4. Transferir de la mezcla del segundo círculo, 50 μl al salino del círculo 3 y mezclar como en el
paso anterior.
5. Continuar así de forma sucesiva hasta el círculo 5.
6. Después de mezclar, tirar 50 μl.
7. Con un palillo, y empezando en el círculo con mayor dilución (el 5 en este caso), abrir la mezcla
hasta ocupar sin sobresalir, todo el círculo de la tarjeta. Con el mismo palillo, repetir el proceso en el
resto de círculos, desde más, a menos diluido.
8. Agitar para resuspender el vial de reactivos con el antígeno y las partículas de carbón.
9. En posición vertical, dejar caer una gota limpia (sin burbujas) sobre la muestra o controles. No mezclar.
10. Colocar la tarjeta sobre el agitador orbital.
11. Rotar 8 minutos a 100 ±2 rpm.
12. Con la tarjeta en la mano, rotarla manualmente para una mejor observación de los resultados.
13. Si la mayor dilución permanece positiva (1/16), es preciso hacer más diluciones hasta obtener
el punto final.
14. Preparar diluyente: suero no reactivo diluido 1:50 en solución salina al 0,9%.
15. Preparar dilución 1:16 del suero problema en solución salina al 0,9% (0,1 ml suero problema en
1,5 ml de salino). Agitar para homogeneizar.
16. Preparar tarjetas para hacer diluciones dobles seriadas desde 1/16 hasta 1/256 (se precisan 5
círculos por suero o control).
17. Dispensar 50 μl del diluyente en los círculos 2 al 5.
18. Dispensar 50 μl de la predilución 1:16 del suero problema a los círculos 1 y 2, siguiendo los
pasos previamente explicados en los puntos del 3 al 12.
19. Al finalizar todas las pruebas, y antes de recoger, separar la aguja del vial de reactivos para
proceder a su aclarado con agua destilada, dejando secar al aire. Esto permitirá que en el siguiente
ensayo las gotas de reactivo caigan uniformes y sin burbujas. Tapar de nuevo el vial con la aguja
y almacenar el reactivo en nevera.
Controles:
- Se incluirán control positivo y negativo en cada ensayo.
- En ensayos cuantitativos, se incluirán controles de título conocido.
- En los cambios de lote, se deben ensayar 6 sueros de título conocido en paralelo dos días consecutivos.
- Controlar la temperatura ambiente. Si es demasiado fría o calurosa (es ideal el rango 23-29ºC), puede
afectar a la precisión del ensayo.
- La aguja de dispensación del reactivo es otro elemento a controlar, sobre todo después de una caída ac-
cidental o si los controles no dan el resultado esperado.
73
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-02
Servicio / Unidad de Microbiología TPHA. Hemaglutinación para el diagnóstico de la
infección por Treponema pallidum
Hospital............................................ Edición Nº 02 Página 1 de 4
PNT-ITS-02
TPHA. Hemaglutinación para el diagnóstico de la

02 2018 Segunda ecición

74
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-02
El objetivo del presente documento es describir el ensayo TPHA para la detección cualitativa de anticuerpos
frente a Treponema pallidum en suero o plasma mediante hemaglutinación pasiva.
2. FUNDAMENTO
El ensayo se basa en el empleo de eritrocitos aviares recubiertos con antígenos de T. pallidum (cepa
Nichols), que se unen a anticuerpos específicos presentes en el suero o plasma del paciente. Las célu-
las se suspenden en un medio que contiene componentes para eliminar las reacciones no específicas.
Las reacciones positivas se muestran mediante aglutinación de las células y las reacciones negativas me-
diante la sedimentación de células en forma de botón o pequeño anillo.
res). SEIMC 2017. Disponible en http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmi-
Mansilla E, Cantón Moreno R (editores) SEIMC 2014. Disponible en: http://www.seimc.org/documentos/
protocolos/microbiologia.
3. Gestión de residuos.
4. Prospecto del equipo comercializado con las instrucciones del fabricante presente en cada caja de re-
activos.
4. MUESTRAS
- Son válidas las muestras de suero y plasma (5 ml). No es válido el LCR.

- Las muestras no deben contener células de la sangre ni contaminación microbiana.
- Se pueden almacenar en nevera a 4-8ºC una semana.
- Para periodos más largos de almacenamiento, congelar a -20ºC.
- No debe realizarse esta prueba en muestras lipémicas o hemolizadas, ya que pueden dar resultados
erróneos.
Reactivos incluidos en el equipo comercial. Incluye:

1. Células de prueba: suspensión de eritrocitos aviares cubiertos con antígenos de T. pallidum.
2. Células de control: suspensión de eritrocitos aviares.
3. Diluyente y sueros de control positivo y negativo.
- Pipetas calibradas.
- Microplacas de 96 pocillos con fondo en U.
- Puntas de pipeta.
75
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-02
7. PROCEDIMIENTO
1. Preparar 3 pocillos por muestra: dilución, prueba y control.

2. Diluir las muestras a 1:20. En el pocillo de dilución, dispensar 190 µL del diluyente comercial y añadir
10 µL de muestra o controles. Mezclar bien.
3. En el pocillo de prueba, añadir 25 µL del diluido del paso 2.
4. En el pocillo de control, añadir 25 µL del diluido del paso 2.
5. Resuspender los viales con las células de prueba y de control.
6. Añadir 75 µL del vial “células de prueba” al pocillo de prueba. Mezclar con la pipeta.
7. Añadir 75 µL del vial “células de control” al pocillo de control. Mezclar con la pipeta.
8. Incubar a temperatura ambiente (15-30ºC) en una superficie sin vibración durante 45 minutos.
9. Proceder a la lectura visual.
Controles:
- Siempre realizar el ensayo con células sensibilizadas (pocillo prueba) y sin sensibilizar (pocillo control).
- Si se observa aglutinación con las células no sensibilizadas, repetir la prueba con el Procedimiento de
absorción de reacciones no específicas.
- Incluir controles positivos y negativos en cada ensayo.
Procedimiento de absorción de reacciones no específicas:

Se aplica cuando se observa aglutinación tanto con las células de prueba como con las de control.
1. Mezclar 190 µL de células de control resuspendidas y 10 µL de muestra o controles.
2. Incubar a temperatura ambiente 30 minutos.
3. Centrifugar a un mínimo de 1500xg durante 3 minutos.
4. Añadir 25 µL del sobrenadante a dos pocillos.
5. Resuspender y añadir al primer pocillo 75 µL de células de prueba.
6. Resuspender y añadir al primer pocillo 75 µL de células de control.
7. Incubar a temperatura ambiente durante un mínimo de 45 minutos.
8. Leer e interpretar
8. OBTENCIÓN Y EXPRESIÓN DE RESULTADOS
- Después de la incubación, los patrones de lectura permanecen estables durante 3 horas si no se mani-
pula la placa, pero se aconseja que en el último paso de incubación a temperatura ambiente se realice un
seguimiento de la aglutinación cada 15 minutos aproximadamente para efectuar la lectura en el momento
óptimo de aglutinación de los controles.
- Se considera resultado "No reactivo" (negativo) cuando se observa un botón compacto en el centro del
pocillo, sin agujero o con un mínimo agujero central.
- El resultado es “Reactivo” (positivo) cuando se observa aglutinación en todo el pocillo y también cuando
se observa un botón de células sin aglutinar formando un círculo, y células aglutinadas por fuera y por den-
tro del círculo. En el pocillo control no debe de haber aglutinación.
- Si se observa aglutinación en el pocillo “prueba”, pero también aglutina el pocillo “control”, realizar
el procedimiento de absorción de reacciones no específicas.
76
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-02
Hospital............................................ infección por Treponema pallidum Edición Nº 02 Página 4 de 4
9. RESPONSABILIDADES
Las descritas en el manual general de organización del laboratorio y en las descripciones de cada puesto
de trabajo.
El procedimiento será realizado por personal técnico cualificado y con entrenamiento específico.
La supervisión y validación de los resultados debe llevarla a cabo el facultativo especialista responsable.
10. ANOTACIONES AL PROCEDIMIENTO
Las fuentes más frecuentes de errores son: la suciedad en los pocillos de la placa de microdilución,
lo que altera el patrón de depósito de las células, los errores de pipeteo y las vibraciones durante el
tiempo de incubación previo a la lectura.
11. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Esta prueba no sirve para evaluar la respuesta al tratamiento.
12. BIBLIOGRAFÍA
1. Ballard R, Hook EW III. Syphilis . In: Unemo M, Ballard R, Ison C, Lewis D, Ndowa F,
Peeling R, eds. Laboratory diagnosis of sexually transmitted infections, including human
immunodeficiency virus. World Health Organization (WHO), Geneva, Switzerland, 2013: 107-129.
2. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for
syphilis. Clin Microbiol Rev 1995; 8: 1-21.
77
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-03a
Servicio / Unidad de Microbiología Detección molecular de C. trachomatis, genotipo de
LGV y detección de coinfecciones por dos o más
Hospital............................................ genotipos mediante PCR en tiempo real Edición Nº 01 Página 1 de 5
PNT-ITS-03a
Detección molecular de C. trachomatis, genotipo de
LGV y detección de coinfecciones por dos o más ge-
notipos mediante PCR en tiempo real

78
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-03a
El propósito es definir la estrategia diagnóstica para la detección de ADN de los serovares L1-L3 de Chlamydia
trachomatis causante LGV y las coinfecciones por genotipos invasivos (LGV) y no invasivos de CT (serovares
D-K) en muestras genitourinarias, rectales o faríngeas mediante amplificación de ácidos nucleicos por PCR
en tiempo real.
El procedimiento se aplica en muestras biológicas previa demostración de la presencia de CT en la muestra

biológica a estudio.
2. FUNDAMENTO
Chlamydia trachomatis (CT) es un patógeno intracelular altamente prevalente en nuestro entorno. Si bien
no existen datos oficiales sobre la tasa de incidencia en España, basándonos en los datos de los países
de nuestro entorno, la infección por CT es la infección bacteriana más frecuente en las ITS. Por otra par-
te, el linfogranuloma venéreo (LGV) es una enfermedad de transmisión sexual causada por los genotipos
invasivos L1, L2 y L3 de CT. Tradicionalmente se ha considerado una enfermedad endémica en África,
Latinoamérica y Asia. Los casos detectados en Europa se consideraban casos importados, pero desde
2003 se han descrito casos autóctonos de LGV por todos los países europeos, Estados Unidos y Australia.
Algunos métodos comerciales basados en la detección molecular de C. trachomatis diferencian LGV de
otros serovares de C. trachomatis de transmisión sexual (serovares D-K). Sin embargo, no existen estrate-
gias que permitan identificar infecciones por más de un genotipo y el escenario actual sugiere alta propor-
ción de coinfecciones.
Los sistemas comerciales para la detección molecular de CT se basan en la detección de dianas en plásmi-
do críptico y/o ADNr. Por otra parte el diagnóstico de infección por LGV se basa en la delección interna de
36 pb del gen pmpH. En este documento se describe un procedimiento diagnóstico de segundo nivel, una
vez que se demuestre la presencia de CT en la muestra biológica a estudio en hombres que tienen sexo
con hombre tengan síntomas o no.
El procedimiento propuesto es una PCR en tiempo real usando sondas TaqMan, siguiendo el protocolo
propuesto por Morré y cols. en 2005 y posteriormente revisado por Schaeffer y cols. en 2008, para detectar
LGV. Para detectar presencia de otras CT además de LGV, el protocolo propuesto es el descrito por Ro-
dríguez y cols en 2015.
res). SEIMC. 2017. Disponible en http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmi-
79
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-03a
Detección molecular de C. trachomatis, genotipo de
Servicio / Unidad de Microbiología LGV y detección de coinfecciones por dos o más
4. MUESTRAS
Las muestras validadas por los CDC son exudados uretrales y cervicales; sin embargo está ampliamente
extendido el uso de las técnicas moleculares para detección de CT y/o LGV en muestras faríngeas o rec-
tales tomadas con torundas de dacrón. Las condiciones para la recogida y el transporte deben contemplar:
- Respetar las normas descritas en el procedimiento de recogida y procesamiento de las muestras en el
laboratorio de Microbiología.
- En el caso de muestras recogidas con torunda, garantizar la recogida suficiente de células epiteliales. Una
vez tomada la muestra introducir la torunda en un medio de transporte adecuado para CT.
- Identificar correctamente el tubo (código empleado) y los tubos que se deriven de los procesos subsi-
guientes: extracción de ácidos nucleicos y PCR.
- Si no se puede procesar inmediatamente, se recomienda no prolongar la conservación a 4ºC más de 24
horas. En caso necesario conservar las muestras a -70ºC para períodos más prolongados.
- El material genético una vez extraído debe procesarse. En caso de que no pueda procesarse de inmedia-
to, se puede conservar a -20ºC.
a) - Sistema de extracción de ácidos nucleicos (automática o manual).
b) - Master mix: TaqMan Fast Universal PCR Master Mix (2x) (Applied Biosystems).
c) - Control interno de amplificación (CI): Existen dos alternativas para definir un CI

1) Presencia desconocida de CT en la muestra. Se amplificará mediante sonda Taqman específica un
fragmento del gen que codifica para la proteína GAPDH de origen humano.
Primer F: 5’-CCACCCATGGCAAATTCC-3’
Primer R: 5’-ATGGGATTTCCATTGATGAC AAG-3’
Sonda: FAM-5’-TGGCACCGTCAAGGCTGA GAACG-3’ TAMRA
(Adaptado de Schaeffer y col. 2008).
2) Presencia conocida de CT en la muestra. Se utilizará el gen ompA, como control interno.
Primer F: 5’-GGTTTCGGCGGAGATCCT-3’
PrimerR:5’-AGTAACCCATACGCATGCTGAT-3’
Sonda:FAM-5’-CTTGCACCACTTGGTGTGACGC -3’ TAMRA
d) – Reactivos específicos para amplificar el gen pmpH de LGV Las secuencias de primers y sonda especí-
ficos para los genotipos L1-L3 de C. trachomatis estan basados en la deleción de interna de 36 bp proceden
de la publicación de Schaeffer y cols. en 2008.
Primer F: 5’-CTGTGCCAACCTCATCATCAA-3’
Primer R: 5’AGACCCTTTCCGAGCATCACT-3’
Sonda: FAM-5’-CCGCCTGCTCCAACAGTT AGTGATG- 3’-BHQ1
Reactivos específicos para amplificar el gen pmpH de No-LGV
Primer F: 5’- CTATTGTGCCAGCATCGACTC -3’
Primer R: 5’- AGACCCTTTCCGAGCATCACT-3
Sonda: FAM-AGCTCCTGCTGCTTCAAGCTCTTTA-3’-BHQ1
80
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-03a
- Agitador orbital tipo vórtex.

- Termociclador: la técnica está validada para el sistema ABI 7500 Fast de Applied Biosystems. En caso
necesario puede ser adaptada a otros sistemas teniendo en cuentas las modificaciones oportunas en el
marcaje de las sondas adaptándolas a los sistemas ópticos de cada termociclador.
- Cabina de seguridad.
- Pipetas automáticas de volumen variable.
- Tubos de plástico de fondo cónico tipo Eppendorf de 1,5 ml.
- Puntas con filtro de diferentes calibres.
- MicroAmp Fast Optical 96-well Reaction plates
7. PROCEDIMIENTO
7.1. EXTRACCIÓN DE MATERIAL GENÉTICO
- El procesamiento de las muestras se realizará en campana de bioseguridad.

- Las muestras tomadas en torunda se homogeneizarán utilizando un vortex en 1-2 ml de medio de trans-
porte.
- La extracción de ácidos nucleicos se realizará a partir de alícuotas de 500 L del medio de transporte,
según se detalle en el procedimiento habitual de trabajo del laboratorio correspondiente. Como ejemplo de
sistema de extracción automática podemos citar el EasyMag de BioMerieux y como ejemplo de sistema
manual el Quiamp Mini kit de Quiagen. Aunque seguramente otros sistemas de extracción manual y auto-
mática sean igualmente eficientes.
7.2. AMPLIFICACIÓN
La reacción se hace en un volumen final de 25 µL, con 12,5 µL de TaqMan Fast Universal PCR Master
MIX (2x), 0,15 µM de cada primer, 0,1 µM de la sonda (tanto para la reacción de genotipado como para el
control), y 5 µL de ADN extraído de la muestra.
- El protocolo de amplificación es de 2 minutos a 50ºC, 1 minuto a 95ºC, y 40 ciclos de 5 segundos a 95ºC
y 1 minuto a 60ºC (programar la lectura del termociclador en este paso).Todas las reacciones de amplifica-
ción están diseñadas para las mismas condiciones de PCR.
Controles:
- Además de una reacción del control de extracción y amplificación por muestra, incluir en cada ensayo
un control negativo de la master mix añadiendo 5 µl de agua en lugar de muestra y un control positivo que
garantice la calidad óptima de los reactivos y del material genético eluido.
- Al ser las sondas del control interno y diana de amplificación marcadas con la misma sonda FAM, no
pueden ser empleadas en un mismo tubo de amplificación. Se puede plantear una mejora cambiando los
fluoróforos para que todas las dianas puedan amplificarse en un solo tubo.
8. OBTENCIÓN, INTERPRETACIÓN Y EXPRESIÓN DE RESULTADOS
Los resultados se expresarán en términos cualitativos de positivo o negativo.

Si no amplifica ni la diana ni el control, la reacción no es válida y se debe repetir el procedimiento.
La amplificación del control negativo indicaría una contaminación. Esta circunstancia invalida el resultado
obtenido y es necesario repetir el procedimiento desde la extracción del material genético.
81
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-03a
Deben estar descritas en el manual general de organización del laboratorio o Servicio/Unidad de Microbio-
logía y en las fichas de descripción de los puestos de trabajo.
El procedimiento deberá llevarse a cabo por personal técnico cualificado con un entrenamiento específico.
La supervisión de la técnica y de los resultados emitidos deberá realizarla el Facultativo Especialista Res-
ponsable del laboratorio o Unidad de Microbiología que los emite.
Todo el personal del laboratorio de Microbiología deberá conocer las normas generales de seguridad e
higiene. Estas recomendaciones deberán estar recogidas en un documento establecido por el laboratorio
de Microbiología.
- La sensibilidad de la técnica depende en gran medida de una correcta toma de muestra y de una buena
extracción de ácidos nucleicos.
- Al no tratarse de una técnica comercial aprobada para diagnóstico “in vitro”, este procedimiento debe ser
validado y sometido a los controles adecuados en cada laboratorio de Microbiología. Los resultados obte-
nidos se deben interpretar junto con la información clínica del paciente.
12. BIBLIOGRAFÍA
1. Morré SA, Spaargaren J, Fennema JS, de Vries HJ, Coutinho RA, Peña AS. Real-time polymerase
chain reaction to diagnose lymphogranuloma venereum. Emerg Infect Dis. 2005; 11: 1311-2.
2. Schaeffer A, Henrich B. Rapid detection of Chlamydia trachomatis and typing of the Lymphogranulo-
ma venereum associated L-Serovars by TaqMan PCR. BMC Infect Dis. 2008; 8:56.
3. Rodríguez-Domínguez M, González-Alba JM, Puerta T, Menéndez B, Sánchez-Díaz AM, Cantón
R, del Romero J, Galán JC. High prevalence of co-infections by invasive and non-Invasive Chlamydia
trachomatis genotypes during the Lymphogranuloma Venereum outbreak in Spain. PLoS One. 2015;
10:e0126145.
82
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
Servicio / Unidad de Microbiología Cultivo y antibiograma de Neisseria gonorrhoeae
PNT-ITS-04
CULTIVO Y ANTIBIOGRAMA DE Neisseria gonorrhoeae

02 2018 Segunda edición

83
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
El objetivo del presente procedimiento es describir la metodología a seguir para el cultivo y el antibiograma
de Neisseria gonorrhoeae. Es un documento de consulta para el personal del laboratorio encargado de su
realización e interpretación.
2. FUNDAMENTO
Neisseria gonorrhoeae es un patógeno exclusivo del ser humano que se transmite fundamentalmente por
vía sexual. En el hombre causa cuadros de uretritis, epididimitis y proctitis. En la mujer origina cervicitis,
endometritis y proctitis. La infección crónica del tracto genital femenino puede conllevar la aparición de di-
ferentes patologías: enfermedad inflamatoria pélvica, salpingitis, embarazo ectópico, infertilidad, peritonitis
y perihepatitis. Además puede producir infección gonocócica diseminada (IGD) como artritis, meningitis y
endocarditis, y también se pueden producir conjuntivitis o infección de piel. El cultivo del gonococo se pue-
de realizar: 1. En medios no selectivo como el agar chocolate enriquecido con un suplemento de vitaminas,
aminoácidos y otros factores nutritivos. 2. En medios selectivos que contienen antimicrobianos como el
agar Thayer-Martin, Martin-Lewis o medio New York City.
El agar Thayer-Martin modificado permite el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae a partir de muestras

faríngeas, exudados genitales, y otras muestras que contengan microbiota mixta. Este medio está com-
puesto por GC medium (medio para gonococo) suplementado con sangre calentada, extracto de levadura,
isovitalex y los antimicrobianos vancomicina, colistina, trimetoprim, y nistatina, para inhibir a bacterias
grampositivas, gramnegativas (incluyendo casi todas las neisserias saprofitas) y levaduras. Las ventajas
del cultivo frente a otros métodos de detección son su alta sensibilidad y especificidad, su bajo coste y su
utilidad para diferentes tipos de muestras. Además el cultivo permite aislar el microorganismo para la rea-
lización de pruebas adicionales, como por ejemplo el estudio de sensibilidad antimicrobiana. Sus inconve-
nientes son la necesidad de un transporte adecuado para mantener la viabilidad del microorganismo y que
requiere un mínimo de 24-72 horas para obtener el crecimiento del gonococo.
El gonococo ha sido capaz de desarrollar resistencias a todos los antibióticos que se han utilizado para
su tratamiento. Actualmente, la ceftriaxona administrada juntamente con azitromicina, es el tratamiento de
elección, sin embargo también se han detectado aislados de gonococo con sensibilidad “in vitro” disminui-
da a las mismas, e incluso también fracaso terapéutico. Por ello, desde hace años es inexcusable realizar
un antibiograma a todos los aislados de N. gonorrhoeae. El método de dilución en agar se considera el mé-
todo de referencia para la determinación de la CMI, sin embrago el método de difusión con tiras de gradien-
te de antibiótico es una alternativa aceptable para la determinación de la CMI en la rutina del laboratorio.
res). SEIMC 2017. Disponible en: http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmi-
2. Calvo J, Cantón R, Fernández F, Mirelis B, Navarro F. Detección fenotípica de mecanismos de resis-
tencia en gramnegativos. 2011. 38. Navarro F (coordinador). Procedimientos en Microbiología Clínica.
Cercenado mansilla E, Cantón Moreno R (editores). SEIMC 2011. Disponible en: http://www.seimc.org/
documentoscientificos.php?mn_MP=3&mn_MS=358
3. Manuales de instrucciones de los sistemas diagnósticos.
84
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
4. MUESTRAS
Las muestras clínicas utilizadas para cultivo son principalmente el exudado endocervical en la mujer y el ure-
tral en el varón. También se cultivan exudados faríngeos y rectales y muestras de sangre y líquido articular
ante la sospecha de infección diseminada.
Muestras endocervicales: antes de obtener la muestra, se debe utilizar una esponja o torunda para eliminar
todas las secreciones exocervicales. Posteriormente se debe insertar una segunda torunda 1-2 cm en el ca-
nal endocervical que se rotará contra la pared del mismo 2 o más veces (entre 10-30 segundos). La torunda
se retirará sin tocar la superficie vaginal y se introducirá en un medio de transporte apropiado etiquetado con
los datos del paciente. Los exudados vaginales solamente se utilizarán para cultivo de gonococo en mujeres
sometidas a histerectomía, en las que se realizará la toma en el fórnix posterior.
Muestras uretrales: preferiblemente se debe obtener la muestra antes de orinar. Se insertará la torunda en
la uretra (1-2 cm en mujeres, 2-4 cm en hombres) y se rotará más de 2 veces.
Muestras rectales: se insertará la torunda pasando el esfínter anal, girándola de lado a lado, dejar 10-30
segundos y extraer. Si está contaminada con heces descartar y repetir la toma con otra torunda. Para mues-
tras faríngeas y de zonas estériles se seguirán las normas de recogida, transporte y procesamiento general
de muestras en el laboratorio de microbiología (Procedimiento SEIMC nº 1b; PNT-RTPM-01) SEIMC 2017.
Las muestras se rechazarán cuando estén mal identificadas y/o las condiciones de conservación sean inade-
cuadas (temperatura inapropiada, muestras en medio no apropiado).
5.1. CULTIVO
- Torundas de plástico o alambre con la zona distal de rayón, dacrón o alginato cálcico.
- Torunda (flocada o no) con medio líquido de transporte (Amies con carbón activado).
- Las torundas con carbón pueden ser beneficiosas para neutralizar la toxicidad de la muestra aunque el
carbón puede interferir en la realización de la tinción de Gram.
- Las torundas de algodón no se recomiendan.
- Medios de transporte comerciales líquidos o semisólidos.
- Placas con medio de cultivo sólido:
a) medios no selectivos como agar chocolate enriquecido;
b) medios selectivos como agar Thayer-Martin (TM), Martin-Lewis (ML), New York City (NYC).
Los antimicrobianos añadidos en dichos medio selectivos son:
- vancomicina: 3 mg/L (TM); 4 mg/L (ML); 2 mg/L (NYC)
- colistina: 7,5 mg/L (TM); 5,5 mg/L (NYC)
- trimetoprim lactato: 5 mg/L (TM); 3 mg/L (NYC)
85
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
- nistatina: 13,5 mg/L (TM); anisomicina: 20 mg/L (ML); anfotericina B: 1,2 mg/L (NYC)
- Reactivos de la tinción de Gram
5.2. ANTIBIOGRAMA
- Agar GC con 1% de un suplemento definido (Isovitalex) que contiene en g/L: vitamina B 12 (0,01), Lglu-
tamina (10), adenina (1), clorhidrato de guanina (0,03), ácido para-aminobenzoico (0,013), L-cisteina (1,1),
glucosa (100), NAD (0,25), cocarboxilasa (0,1), nitrato férrico (0,02) y clorhidrato de tiamina (0,003).
- Prueba cromogénica de nitrocefina para detectar la posible producción de betalactamasa.

- Tiras de gradiente de concentración de antibióticos.
Nota: el medio MHF (EUCAST) no está validado para la determinación de la sensibilidad de N. gonorr-
hoeae a antimicrobianos.
5.3. CONSERVACIÓN Y FECHAS DE CADUCIDAD
Las torundas con medio de transporte se deben conservar en un lugar seco y oscuro a una temperatura
entre 15-20ºC. El almacenamiento prolongado, o en lugares calurosos, provoca la desecación del medio
por evaporación del agua, con la consecuente pérdida de calidad.
No se deben utilizar torundas que presenten una disminución excesiva del medio. No se utilizarán las to-
rundas después de su fecha de caducidad o en las que se observen signos de deterioro.
Las placas con medio de cultivo se deben conservar en lugar oscuro y seco a 6-12ºC. Evitar congelación
y sobrecalentamiento. No abrir las bolsas que contienen las placas hasta que éstas se vayan a utilizar.
Se recomienda que las placas se atemperen antes de la inoculación con la muestra.
5.4. CONTROLES DE CALIDAD
Es necesario aplicar controles de calidad en el cultivo de gonococo ya que los medios comerciales y los
procedimientos de cultivo varían en su selectividad y sensibilidad.
- Agar chocolate: color chocolate. Valorar crecimiento obtenido después de 24-48 horas de incubación a 35
± 2ºC en atmósfera enriquecida en 5% de CO2.
Microorganismo Crecimiento
Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 Excelente
Neisseria meningitidis ATCC 13090 Excelente
Haemophilus influenzae ATCC 35056 Excelente
86
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
- Agar TM, ML y NYC: color chocolate. Valorar crecimiento obtenido después de 24-72 horas de incubación
a 35 ± 2ºC en atmósfera enriquecida en 5% de CO2.
Microorganismo Crecimiento
Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 Bueno a excelente
Neisseria meningitidis ATCC 13090 Bueno a excelente
Neisseria lactamica ATCC 23970 Bueno a excelente
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido
Proteus mirabilis ATCC 29906 Inhibido
Candida albicans ATCC 10231 Inhibido
- Agar GC con IsoVitaleX: Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226
6.1. CULTIVO
• Asas de siembra
• Estufa de CO2 (35ºC) o jarras de CO2
• Portaobjetos para la tinción de Gram
• Mechero Bunsen o incinerador de asas
• Soporte para tinciones
• Reactivos de la tinción de Gram:
- Cristal Violeta
- Lugol
- Alcohol-acetona al 50%
- Safranina o fucsina
• Reactivos de la tinción de azul de metileno:

- Azul de metileno (4 partes) más violeta de genciana (1 parte)
- Agua destilada
• Tiras de Pathotec® Citocromo Oxidasa o similar
• Sistema de identificación bacteriana, ya sea por reacciones bioquímicas (API, Enterotube, Oxi/Ferm
Tube, RapID systems, MicroScan, Vitek, etc.) o por espectrometría de masas (MALDI-TOF).
• Disco Cefinase (Prueba rápida de β-lactamasa)
87
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
6.2. ANTIBIOGRAMA
• Caldo para la preparación de un inóculo estándar.

• Placas con medio de cultivo GC+Isovitalex.
• Un dispositivo fotométrico para determinar la turbidez de la suspensión de inóculo.
• Cultivo de control: Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226.
• Tiras de gradiente de antibiótico.
• Dispositivo o pinzas para dispensar las tiras de gradiente de antibiótico.
• Estufa de CO2 (35ºC) o jarras de CO2
7. PROCEDIMIENTO
7.1. CULTIVO
Tras 48-72 horas de incubación se observarán las colonias de color grisáceo a las que se aplicará la iden-
tificación presuntiva.
La identificación presuntiva se realiza observando la morfología de la colonia (color grisáceo), la tinción de

Gram (diplococos gramnegativos), prueba de la oxidasa positiva (líquida o en tiras de papel) y la prueba de
la catalasa positiva (peróxido de hidrógeno al 3%). N. gonorrhoeae da la prueba del superoxol, con peróxi-
do de hidrógeno al 30%, fuertemente positiva (+++).
La identificación definitiva se realiza con las pruebas de la identificación presuntiva y con una o más téc-
nicas que demuestren los patrones de utilización de carbohidratos (por ejemplo, el sistema API NH) y las
características inmunológicas o perfiles enzimáticos de los microorganismos. Actualmente la espectrome-
tría de masas (MALDI-TOF) es una herramienta muy útil para la identificación definitiva de N. gonorrhoeae.
Los métodos de amplificación de ácidos nucleicos también tienen una elevada sensibilidad y especificidad.
7.2. ANTIBIOGRAMA
Una vez identificado y aislado el microorganismo, se realizará un subcultivo en agar chocolate. A partir de
este subcultivo de 24 horas, se preparará una suspensión del microorganismo con una turbidez equivalen-
te a la del patrón 0,5 de McFarland. Esta suspensión contendrá aproximadamente entre 1 y 2 x 108 UFC/
mL. Se sumergirá una torunda estéril en el inóculo correctamente diluido y se hará rodar firmemente varias
veces contra la pared interna superior del tubo para exprimir el líquido en exceso. Se inoculará toda la su-
perficie del agar GC+ Isovitalex de la placa tres veces, girando la placa 60 grados cada vez para obtener
una inoculación uniforme. Se volverá a colocar la tapa de la placa y se mantendrá la placa a temperatura
ambiente durante 3 – 5 min, pero no más de 15 min, para permitir que la humedad de la superficie se absor-
ba antes de aplicar las tiras impregnadas de fármaco. Se aplicaran las tiras empleando técnicas asépticas.
A los 15 min después de aplicar las tiras, se invertirán e incubarán las placas durante 20-24 h a 35°C en
atmósfera aerobia enriquecida con dióxido de carbono al 5-7%.
A partir de una colonia también se debe realizar la prueba rápida de β-lactamasa (disco Cefinase) para
evaluar la utilidad clínica de penicilina.
88
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
Los resultados obtenidos para cada muestra se introducirán en el programa informático y serán validados
por el facultativo responsable.
1. En la tinción de Gram del exudado se debe notificar el número de leucocitos PMNs por campo de inmer-
sión y si hay o no diplococos gramnegativos intracelulares.
2. En el cultivo, si a las 48- 72 horas de incubación no se observa crecimiento compatible con N. gonorr-
hoeae, se debe informar cómo negativo.
3. Si se observan colonias sospechosas, una vez confirmadas las pruebas de identificación presuntiva, se
debe notificar el crecimiento de un microorganismo compatible con Neisseria gonorrhoeae pendiente de
identificación definitiva. Una vez confirmada la identificación definitiva del microorganismo, se debe infor-
mar cómo tal y proceder a la realización del antibiograma.
4. Se informará el valor de CMI así como su interpretación de los principales antibióticos utilizados para el
tratamiento de la infección gonocócica.
Deben estar descritas en el manual general de organización del laboratorio de Microbiología y en las fichas
de descripción de los puestos de trabajo. El procedimiento deberá llevarse a cabo por personal técnico cua-
lificado con un entrenamiento específico. La supervisión de la técnica y de los resultados emitidos deberá
realizarla el facultativo especialista responsable del laboratorio de Microbiología que los emite.
La toma de muestra, su transporte y conservación por parte de los servicios implicados, debe estar aseso-
rada por los responsables del laboratorio de Microbiología.
- Pueden obtenerse resultados falsamente negativos cuando la toma de muestra o su conservación no ha

sido la adecuada.
- Las torundas de algodón inhiben el crecimiento del gonococo.
- Las placas deben incubarse en atmósfera de aproximadamente un 5% de CO2 en un ambiente saturado
de humedad.
- Es preferible utilizar dos torundas, una para cultivo y otra para examen microscópico (en su defecto puede
inocularse un porta con el exudado directamente en la consulta).
- Todo el personal del laboratorio deberá conocer y seguir las normas generales de bioseguridad e higiene.
Todas las manipulaciones deben realizarse con guantes.
- El resultado obtenido depende en gran medida de la calidad de la muestra remitida.

- La tinción de Gram del exudado es una técnica rápida y tan sensible como el cultivo en uretritis sintomática
en hombres, pero es poco sensible en otras localizaciones.
- Entre un 3-10% de las cepas de Neisseria gonorrhoeae se inhiben a una concentración de 3 mg/L de van-
comicina y también algunas son sensibles a trimetoprim, aunque actualmente estas cepas son muy poco
frecuentes.
89
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-04
- Debe realizarse una identificación utilizando dos métodos diferentes, por ejemplo, uno bioquímico como
el sistema APINH y otro inmunológico, debido a que algunos aislados son prolina iminopeptidasa negativos
y pueden dar códigos de identificación erróneos. Alternativamente se puede realizar la identificación me-
diante MALDI-TOF.
- Las pruebas de amplificación de ácidos nucleicos pueden dar falsos positivos debido a reacciones cruza-
das con otras especies de Neisseria.
12. BIBLIOGRAFÍA
1. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2ª edición. Editor HD Isenberg. 2005. American Society for
Microbiology. Washington DC, USA.
2. CLSI Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Test; Twenty-Second
Informational Supplement, 32: 100 - 102 [Internet]. Available from:
http://antimicrobianos.com.ar/ATB/wp-content/uploads/2012/11/M100S22E.pdf
3. European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Breakpoint tables for
interpretation of MICs and zone diameters. Version 8.1: 50 - 53 [Internet]. Available
from: http://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST_files/Breakpoint_tables/B
reakpoint_table_v_8.1.pdf
4. Knapp JS. Historical perspectives and identification of Neisseria and related species. Clin Microbiol Rev.
1988; 1:415-431.
5. Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Jorgensen JH, Yolken RH (eds). Manual of Clinical Microbiology.8ª ed.
American Society for Microbiology. Washington DC. 2003. 5. Sarafian SK, Knapp JS. Molecular epidemio-
logy of gonorrhoea. Clin Microbiol Rev. 1989; 2 (Suppl):S49-S55.
90
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-07
Detección molecular del virus del herpes simplex en
muestras anogenitales
PNT-ITS-07
DETECCIÓN MOLECULAR DEL VIRUS DEL HERPES
SIMPLEX EN MUESTRAS ANOGENITALES

91
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-07
Servicio / Unidad de Microbiología Detección molecular del virus del herpes simplex en
Hospital............................................ muestras anogenitales Edición Nº 01 Página 2 de 4
Definir la metodología básica para la detección de ácidos nucleicos del virus del herpes simplex (VHS) en
muestras anogenitales.
Este procedimiento es aplicable a todos los laboratorios de Microbiología Clínica que realicen el estudio mo-
lecular de pacientes que presenten lesiones vesiculares o ulcerativas sospechosas de infección por el VHS.
2. FUNDAMENTO
Los métodos basados en TAANs para la detección del VHS en muestras anogenitales, están diseñados
para detectar cualitativamente y diferenciar VHS-1 y VHS-2, empleando distintos objetivos moleculares
(ARNm o ADN) y utilizando distintos sistemas de amplificación: qPCR (PCR en tiempo real), TMA (real-
time transcription mediated amplification), SDA (strand displacement amplification), LAMP (loop-mediated
isothermal DNA amplification) o HDA (helicase-dependent amplification). Estos sistemas detectan regio-
nes conservadas de los genes que codifican la glucoproteina B o la ADN polimerasa.
Muchos de estos sistemas se integran en distintas plataformas de diagnóstico sindrómico de úlceras ano-
genitales que detectan además, del VHS-1 y VHS-2, H. ducreyi , C. trachomatis Serovar L, T. pallidum y
virus varicela-zoster.
Algunos de estos sistemas requieren un paso previo de extracción manual o automatizada, aunque otros
emplean plataformas que integran el proceso de extracción como parte del proceso diagnóstico.
res). SEIMC. 2017. Disponible en http://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmi-
3. Gimeno C (Coordinadora). Camaró M, Catalá V, Gimeno C, Martinez R, Olmos P. Validación y verificación
de los métodos microbiológicos. 2013. 48 . Gimeno C (coordinadora). Procedimientos en Microbiología
Clínica. Cercenado Mansilla E, Cantón Moreno R (editores) SEIMC 2013. Disponible en: http://www.seimc.
org/documentos/protocolos/microbiologia.
4. Manuales de instrucciones de los sistemas diagnó́ sticos.
4. MUESTRAS
La muestra adecuada para el estudio del VHS es el material procedente de vesículas o úlceras localizadas
en el área anogenital. En mujeres, principalmente vulva, vagina, exocérvix o área perianal. En hombres;
glande, diáfisis del pene o área perianal.
Para la toma de muestras se debe utilizar una torunda fina preferiblemente con punta de dacrón, montada
en un mango flexible.
La obtención de la muestra se realiza mediante el levantamiento de la parte superior de la vesícula (por
ejemplo, con una aguja) y frotando la lesión con la torunda para obtener células epiteliales (y líquido). Para
92
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-07
las úlceras, raspar suavemente la base de la lesión con la torunda para obtener células epiteliales.
Es preciso prestar especial atención a las condiciones de transporte y almacenamiento de las muestras. Des-
pués de la toma, la muestra debe colocarse de inmediato en viales que contengan un medio de transporte para
virus (medio de transporte universal o cualquier sistema comercial adecuado proporcionado o recomendado
por el fabricante de la técnica).
El envío de las muestras puede realizarse a temperatura ambiente si va a ser inmediato, y refrigerado si va a
sufrir demora.
Las muestras pueden conservarse a refrigeradas a 2-8°C hasta 7 días después de la toma, pero si el procesa-
miento se va a demorar mas de una semana deben congelarse a -70°C.
Se utilizarán los reactivos, controles y demás productos suministrados el fabricante de la técnica. No se

utilizarán materiales que hayan superado su fecha de caducidad.
Deberán utilizarse los equipos adecuados para cada técnica siguiendo las indicaciones del fabricante. Los
sistemas de extracción y amplificación pueden ser genéricos (compatibles) o exclusivos para una determi-
nada TAAN.
Se utilizará también material general de laboratorio tanto inventariable como fungible.

- Centrífugas.
- Agitadores.
- Pipetas y micropipetas (0.5-20 μL, 20-200 μL).
- Material plástico desechable (punta de pipetas, tubos, etc).
- Guantes acetonitrilo o similares
7. PROCEDIMIENTO
Al existir distintos métodos comerciales para la determinación del VHS con marcado CE, es aconsejable
seguir el protocolo y recomendaciones que proporcionan los fabricantes.
En los casos que sea necesario un proceso de extracción de ácidos nucleicos previo, se deben de emplear
los métodos que los fabricantes recomiendan, ya que son los que han sido validados para el uso con dichos
protocolos.
Se aplican las siguientes definiciones:

a) Durante la fase analítica
Reactivo: resultado positivo inicial de etapa interna pendiente de validación clínica.
No reactivo: resultado negativo pendiente de validación clínica.
Indeterminado: el resultado no es claramente positivo o negativo. Se requieren pruebas adicionales.
b) Durante la fase post-analítica
Detectado: resultado reactivo confirmado y validado.
No detectado: resultado no reactivo confirmado y validado.
Indeterminado: resultado reactivo que no puede ser confirmado.
Inhibitorio (o no válido): presencia de inhibidores dentro de la muestra que impide la amplificación. Se re-
quiere una muestra adicional.
93
DOCUMENTO TÉCNICO
PNT-ITS-07
Deben estar descritas en el manual general de organización del laboratorio de Microbiología y en las fichas
de descripción de los puestos de trabajo. El procedimiento deberá llevarse a cabo por personal técnico cua-
lificado con un entrenamiento específico. La supervisión de la técnica y de los resultados emitidos deberá
realizarla el facultativo especialista responsable del laboratorio de Microbiología Molecular que los emite.
-Todo el personal del laboratorio de Microbiología deberá conocer las normas generales de seguridad e hi-
giene. Estas recomendaciones deberán estar recogidas en un documento establecido por el laboratorio de
Microbiología. Como recomendación general, deberán evitarse, en lo posible las manipulaciones innecesa-
rias y extremarse las precauciones en el manejo de las muestras.
- Se debe diseñar un flujo de trabajo unidireccional, que debe iniciarse en el área de extracción o preparación
de las muestras para después pasar al área de amplificación o detección. No poner en contacto las mues-
tras, equipos y reactivos utilizados en un área con la zona en la que se realizó el paso anterior.
- No mezclar reactivos de diferentes lotes.
- Utilizar controles positivos y negativos en cada ensayo con idea de poder interpretar adecuadamente los
resultados.
- Revisar los resultados del control interno para poder valorar que el desarrollo de la técnica ha sido correcto.
- Proteger los reactivos de la humedad. Una exposición prolongada a la humedad puede afectar al rendi-
miento de las técnicas.
-Tomar las medidas necesarias para la conservación o desecho de las muestras después de su estudio.
- Se recomienda la descontaminación periódica de los equipos usados habitualmente, especialmente micro-
pipetas, y de las superficies de trabajo.
- El empleo de muestras para los que la técnica no ha sido validada, puede provocar resultados inconsis-
tentes.
- La posibilidad de falsos negativos depende de la calidad de la muestra y de la extracción, así como de los
procesos de transporte o conservación inadecuados.
12. BIBLIOGRAFÍA
1. Hofstetter AM, Rosenthal SL, Stanberry LR. Current thinking on genital herpes. Curr Opin Infect Dis.
2014;27:75-83.
2. Johnston C, Corey L. Current concepts for genital herpes simplex virus infection: Diagnostics and patho-
genesis of genital tract shedding. Clin Microbiol Rev. 2016;29:149-61.
3. LeGoff J, Péré H, Bélec L. Diagnosis of genital herpes simplex virus infection in the clinical laboratory.
Virol J. 2014;11:83.
4. Patel R, Kennedy OJ, Clarke E, Geretti A, Nilsen A, Lautenschlager S, Green J, Donders G, van der Mei-
jden W, Gomberg M, Moi H, Foley E. 2017 European guidelines for the management of genital herpes. Int
J STD AIDS. 2017;28:1366-79.
5. Sauerbrei A. Optimal management of genital herpes: current perspectives. Infect Drug Resist. 2016;9:129-
41.
94

Seimc-Procedimiento24a ETS

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Seimc-Procedimiento24a ETS

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Seimc-Procedimiento24a ETS

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Procedimiento de Microbiología Clínica

Recomendaciones de la Sociedad Española de

Diagnóstico microbiológico de las

Editores Coordinador Autores

Investigación Sanitaria (IRYCIS). Madrid.

Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica (SEIMC). 2018

Recomendaciones de la Sociedad Española de

2 4 a . Diagnóstico microbiológico de las

Abreviaturas usadas en este documento:

ADN: Ácido desoxirribonucleico

UP: Ureaplasma parvum

Procedimientos de Microbiología de la SEIMC relacionados con este documento:

- 1. Recogida, transporte y conservación de las muestras

- Guía de recomendaciones para el diagnóstico precoz del VIH en el ámbito sanitario

2. Recogida de las muestras................................................................................................................10

4. Manejo de la muestra en su recepción en el laboratorio de Microbiología........................................14

6. Interpretación e información de los resultados..................................................................................41

7. Test de curación de las ITS..........................................................................................................45

C. Vulvovaginitis. Estrictamente no se considera una E. Infecciones verrugosas o pseudotumorales. In-

Tabla 1A. Cuadro clínico y microorganismos implicados en las ITS

Bartolinitis (glándulas C. trachomatis, Anaerobios, bacilos gramnegativos, estreptococos, H. influenzae, S.

C. trachomatis, Enterobacterias, M. tuberculosis, Pseudomonas spp., Candida spp., virus

Tabla 1B. Cuadro clínico y microorganismos implicados en las ITS

T. vaginalis Candida spp., enterobacterias, S. aureus, S. pyogenes, VHS,

2.RECOGIDA DE LAS MUESTRAS

Tabla 2A. Recogida de muestras para el diagnóstico de las ITS

Tabla 2B. Recogida de muestras para el diagnóstico de las ITS

3.TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE menos estable que el ADN. En ese escenario,

Tabla 3. Transporte y tiempo óptimo de transporte

CT TA, 2 días (para cultivo refrigerar a 4ºC y <2 h)

4. MANEJO DE LA MUESTRA EN SU RE- 5. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

en la recuperación de NG en caso de uretritis. Otra realización de “pool” de orinas en los cribados de

Tabla 4. Pruebas de diagnóstico rápido de las ITS

Microorganismo/ Prueba S (%) E (%) Comentario

Neisseria Gram endocervix 45-65 90-99 Tinción de Gram no recomendada

Treponema Microscopía campo oscuro 39-81 82-100 No en lesiones orales y rectales.

Haemophilus <50 50-70

VIH Chembio DPP Assay POCT 99,8 100 En sangre capilar

Tabla 5. Niveles asistenciales y pruebas diagnósticas de ITS

VIH rápida carga viral

5.3. PROCEDIMIENTOS ESPECÍFICOS DE ADNr 16S), y las herramientas de análisis masi-

f) Tipificación de NG. Aporta información epide-

5.3.3. Chlamydia trachomatis

e) Pruebas de sensibilidad. El tratamiento de la a) Aunque la infección por CT se puede diag-

f) Algoritmos diagnósticos (Figuras 2 y 3). En rentes de infraestructuras sanitarias, permitiendo

Tabla 6. Fases de la sífilis y sensibilidad de las pruebas diagnósticas

Fase Duración Sensibilidad pruebas serológicas (%) Comentario

Primaria 3-8 semanas 78 86 97 76 84 Chancro en el lugar de

Latencia 1er año 95 98 100 100 100 Serología positiva sin

Latencia > 1er año o 71 73 94 94 96 La diferenciación en un

* La sensibilidad puede variar en función del ensayo comercial utilizado.

Tabla 7. Falsos positivos de las pruebas diagnósticas de la sífilis

Prueba Falsos positivos

(títulos bajos o Permanecen Fiebre reumática

Treponémica Fiebre reumática

Figuras 2 y 3. Algoritmos diagnósticos de la sífilis.

No serodiagnóstico de sífilis. No ¿Positivo?

No serodiagnóstico de sífilis No ¿Positivo?

Diagnóstico serológico de la sífilis