CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LA CELULA

Microscopía ¿Cómo hacemos para estudiar la célula?

Límite de Resolución: medida de la capacidad para distinguir un objeto de otro. Es la distancia mínima que
debe haber entre dos objetos para que sean percibidos como objetos separados.

El ojo humano solo tiene un poder de resolución de aprox 100 um (micrones). La mayoría de las células
eucariotas miden entre 10 y 30 um de diámetro, de 3 a 10 veces menos que el poder de resolución del ojo.

Las células procariotas como las bacterias son aún más pequeñas pudiendo medir menos de 1um de diámetro.

Los virus miden en general de 10 a 100 nm (nanómetros). Mientras que las moléculas que conforman las
estructuras presentan tamaños menores a 1 nm.

Para distinguir células individuales y las estructuras que la componen es necesario utilizar instrumentos que
suministren una mejor resolución.

Microscopio Óptico: formados por estructuras de tipo mecánico, un sistema de lentes y una fuente luminosa.

El sistema de lentes posee lentes de tres tipos:

o Condensador, pasa un haz de luz que incide

sobre el objeto a estudiar
o Objetivo: aumenta la imagen proyectándola
sobre la lente ocular

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 o Ocular: aumenta más la imagen del objeto y a su vez la proyecta sobre el ojo.

El aumento del microscopia hoce referencia a dimensiones aparentes del

objeto comparados con su tamaño real. El M. Opco. no puede resolver
detalles menores a 0.2 mm. Se pueden distinguir las estructuras mas grandes
dentro de las células eucariotas y también células procariotas individuales.

No podemos observar la estructura interna de las celular procariotas ni

distinguir entre las estructuras mas finas de las células eucariotas.

Microscopio Electrónico: Se utiliza un haz de electrones. Existen 2 tipos:

o Microscopio Electrónico de Transmisión: el poder de resolución aumentó cerca de mil veces respecto
del M. Opco.

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 o Microscopio Electrónico de Barrido: Los Electrones no atraviesan el preparado a diferencia del MET
sino que éste es barrido por un haz continuo de particulas. su poder de resolución es inferior al MET
pero permite obtener representaciones tridimensionales vívidas de las células y de las estructuras
celulares.

Preparación de Muestras:

Para ser observadas al microscopio, las muestras deben ser sometidas a un tratamiento previo.

1) Obtención de muestra: con instrumental adecuado y mucho cuidado para no dañar la estructura.

2) Fijación: los especímenes deben ser fijados con formol para evitar la degradación encimática de la
célula.

3) Deshidratación: p/ evitar degradación tb.

4) Inclusión: son incluidos en parafina para formar el "taco" que permite conservar a la muestra por un
tiempo indefinido.

5) Corte: son seccionados en cortes ultrafinos utilizando un "microtomo".

6) Coloración (MO) / Contrastado(ME): las células y sus componentes son casi completamente
transparentes a la luz, ya que el 70% del peso de las células corresponde a H2O, a través de la cual la
luz pasa fácilmente. Para crear suficiente contraste cuando se usa el M.Opco las células deben ser
tratadas con colorantes que se adhieran diferencialmente a componentes subcelulares específicos
produciendo regiones de opacidad diferente. Una de las mas comunes la tinción de hematoxilina-
eosina que tiñe al núcleo de azul y al citoplasma de rosado. Para el M. Elect los especímenes se tratan
en general con compuestos de metales pesados.

Todas estas técnicas conducen a la muerte de la célula y a cambios químicos y morfológicos que no se
encuentran en células activas en la matriz extracelular.

Observación de Células Vivas:

Mediante microscopios de Contraste de Fase y de Interferencia Diferencial. Los cuales son sistemas opticos
especialmente diseñados que intensifican las interferencias y proporcionan un mayor contraste.

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Otra técnica es la Microscopia de Contraste Oscuro donde el haz de luz llega a la muestra desde el costado y
los sistemas de lentes detectan la luz reflejada por la misma muestra que aparece como un abjeto brillante
contra un fondo oscuro.

Los rasgos de las células que son invisibles en otras

técnicas de microscopia óptica, adquieren a menudo
gran relieve en las de campo oscuro.

Cultivo Celular:

Permite el estudio del comportamiento de las células,

sin intervención de las variaciones sistémicas,
ocurridas dentro de un organismo durante su normal
homeostasis y bajo el estres de un experimento.

Se coloca la célula sobre placas de cultivo, en las

cuales se mantienen y hacen crecer, mediante un medio sintético enriquecido con suero.

Tipos de Cultivo:

o Primario: se obtienen a partir de animales o vegetales. El tejido se separa en condiciones asépticas y

se corta en pequeños trozos a los cuales se trata con una enzima proteolítica llamada Tripsina que
disocia los agregados celulares y genera una suspensión se células libres que se cultiva en un medio
apropiado.
o Secundario: se obtiene mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo primario, seguido de un
nuevo cultivo en una caja de petre que tambien tiene un medio de cultivo suplementado con suero.

o Cultivo de Líneas Celulares Establecidas: cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones
cancerosas de la célula. Ej Celulas HeLa útiles para el estudio del cancer.

Fraccionamiento Celular:

Su objetivo es disgregar a la célula separando las organelas principales de modo que sus funciones
individuales puedan ser estudiadas. El instrumento utilizado es la Centrífuga, la cual puede alcanzar altas
revoluciones.

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El procedimiento comienza con la
Homogeneizacion. El homogenato
que se obtiene a partir de un tejido,
se centrifuga, lograndose la
separación de las partes de la
célula en dos fracciones llamadas
Pellet que consisten en las
estructuras mas grandes
depositadas en el fondo del tubo y
el Sobrenadante constituido de
partes mas pequeñas suspendidas en el líquido sobre el Pellet. El sobrenadante es luego traspasado a otro tubo
y centrifugado otra vez. El proceso es repetido incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se
consigue recolectar componentes más pequeños en los sucesivos Pellet.

Otras Técnicas

o Citometría de Flujo: Permite la medición rápida de ciertas características físicas y químicas de células
suspendidas en un líquido que producen una señal de forma individual al interferir con una fuente de
luz que emite el equipo denominado Citómetro. Una de las características mas importantes de éstos,
es su capacidad de medir múltiples parámetros celulares tales como tamaño, forma y complejidad.
Tambien cualquier componente celular o función que pueda ser marcado con florocromo.

o Métodos Citoquímicos: Permiten identificar in-situ (en la célula), compuestos químicos mediante
reacciones químicas. Tiene un objetivo cualitativo o tmb cuantitativo. Muchas veces persigue el
estudio de cambios dinámicos producidos en el contenido químico celular en distintas etapas del
metabolismo o en distintas patologías.

o Técnicas Inminohistoquímicas: se basa en la especificidad de la reacción antígeno-anticuerpo. Los

anticuespos son proteínas que pueden fijarse selectivamente a materiales extraños que desencadenan
su síntesis, llamados antígenos. Los anticuerpos son herramientas muy versátiles para reconocer y
manipular célular y moléculas. De esta manera los componentes moleculares y celulares quedan
teñidos en forma diferencial por los anticuerpos que se fijan a ellos.

o Difracción de rayos X: consiste en el bombardeo de la molécula por un delgado haz de rayoz x que
provoca la dispersión de la radiación, a través de los electrones de los átomos de la muestra. El haz

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 disperso debe alcanzar una placa fotográfica. La estructura molecular tridimensional se deduce a
partir de las posiciones y las intensidades de las manchas registradas en la placa fotográfica.

PROCARIOTA VS EUCARIOTA. COMPARTAMENTALIZACION CELULAR

La variedad de células que existen es increiblemente grande, abarcando desde organismos unicelulares hasta
el hombre. Existen 2 tipos de células. Las células EUCARIOTAS que poseen núcleo verdadero y las
PROCARIOTAS sin nucleo verdadero.

Todas las celulas comparten dos características esenciales:

1. Existencia de Membrana Externa o Plasmática que separa el citoplasma de la célula de su ambiente

externo.

2. Material Genético, la información hereditaria la cual dirige las actividades de una célula y permite
reproducirse y transmitir sus caracteres a la progenie.

La diferencia entre estos tipos celulares se debe a la compartimentalización característica de los eucariontes.
En esta celula cada compartimento esta destinado para una función en particular. Es decir que en las
eucariotas el trabajo celular está dividido en espacios diferentes, lo que las hace mas eficientes.

En los procariontes todas estas funciones se realizan o bien en la membrana plasmática o en el citoplasma. A
su vez, su tamaño es mucho menor al de las eucariotas.

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 ORGANIZACIÓN GENERAL DE LAS CÉLULAS

Células Procariotas:

Únicamente el reino monera incluye células procariotas, cuyos principales representantes son las bacterias.
Las bacterias son organismos unicelulares conformados por:

o Una CÁPSULA, presente en

algunos organismos formados por un
material mucoso, que permite a las
bacterias entre si o a
determinados sustratos.
o Un FLAGELO tambien presente en
algunos procariontes. Su función se
relaciona con el desplazamiento de la
célula.
o Una PARED CELULAR, puede ser
rigida o flexible. Es porosa y brinda
protección a la célula.
o MEMBRANA PLASMÁTICA, es una bicapa de fosfolípidos con proteinas asociadas, sin colesterol.
Presenta pliegues hacia el interior que aumentan su superficie con diversas funciones.
o CITOPLASMA, es no compartimentalizado a diferencia de la eucariota.
o ADN, es una sola molecula circular denominada cromosoma, no asociado a histonas. Está disperso en
el citoplasma.
o RIBOSOMAS, son del tipo 70-S. Pueden encontrarse aislados o agrupados en poliribosomas.
o PLÁSMIDOS, son material genético extra al ADN cromosomico, que codifican para distintas
proteinas como el pili sexual o resistencia a antibióticos.
o PILI.

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Se sabe que existen dos tipos de pared celular bacteriana, los cuales pueden diferenciarse mediante la
TINCION DE GRAM.

o Bacterias Gram Positivas: se combinan con los colorantes y los retienen, por lo cual adquieren un
color púrpura. El péptidoglicano es el principal componente de la pared celular de las Gram Positivas
que es mas gruesa que la de las Negativas.

o Bacterias Gram Negativas: no retienen los colorantes y se observan color rosado. El peptidoglicano se
encuentra en una mínima proporción.

Otros tipos de células procariotas:

MICOPLASMAS: bacterias mas pequeñas de vida independiente. Carecen de pared celular del peptidoglicano
(no toman la coloración de Gram y son resistentes a la penicilina) y en su membrana plasmática poseen
esteroles que no son sintetizados por la bacteria, sino que son absorbidos del medio de cultivo o tejido donde
se desarrollan.

CIANOBACTERIAS: anteriormente llamadas Algas Cianofíceas azul verdosas. Son bacterias Gram
negativas. Se encuentran en estanques, lagos, suelo húmedo, océanos y en algunas fuentes termales. Contienen
clorofila y éste y pigmentos accesorios se localizan en las membranas que son fotosintéticas. Éstas reciben el
nombre de Láminas Internas o Laminillas Fotosintéticas. Muchas especies de Cianobacterias fijan nitrógeno y
este proceso permite enriquecer el suelo.

Implicancias de las procariotas en las ciencias de la salud:

ESCHERIIQUIA COLI: bacteria Gram-negativa que forma parte de la flora normal del hombre. Sin embargo
existen serotipos que pueden provocar enfermedades en los humanos entre ellos el O-157-H7 causante del
síndrome urémico hemolítico. Éste se produce como consecuencia de toxinas bacterianas que lesionan
pequeños vasos sanguíneos, afectando fundamentalmente al riñon siendo causa de insuficiencia renal y
pudiendo llevar a la muerte principalmente niños menores a 5 años causando tambien anemia y
trombocitopenia que es una reducción en el número de plaquetas que son las encargadas del proceso de
coagulación. Se asocia al consumo con manipulación de alimentos contaminados como usar carne poco
cocida, lacteos o jugos sin pasterurizar, vegetales contaminados mal lavados que se comen crudos.

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ANTIBIÓTICOS: sustancias químicas producidas por un ser vivo o tambien derivados sintéticos que matan o
impiden el crecimiento de ciertas clases de microorganismos sensibles, generalmente las bacterias. Los
antibióticos tienen efectos sobre una diversidad de bacterias y sus mecanismos de acción difieren basados en
las características particulares de cada organismo. Por lo general son objetivos que no existen en las células de
mamíferos. Un ejemplo son los antibióticos que atacan e impiden la formación de la pared celular bacteriana,
como la Penicilina. Tambien existen los que disgregan la membrana celular como la Polimixina, aqueñños
que inhiben la síntesis de ácidos nucleicos como las Quinolonas, aquellos que inhiben la síntesis de proteínas
uniendose a los ribosomas como las Tetraciclinas.

CARIES: enfermedad multifactorial que destruye los tejidos del diente como consecuencia de la
desmineralización provocada por los ácidos que genera la placa bacteriana. Las bacterias fabrican este ácido a
partir de restos alimenticios de la dieta. Streptococcus Mutans (Gram positiva anaerobia facultativa.

Células Eucariotas:

Dentro de las células eucariotas podemos distinguir la Célula Vegetal y la Célula Animal las cuales comparten
ciertas características en comun:

o PRESENCIA DE MEMBRANA PLASMATICA la cual define los límites celulares y las aísla del
exterior. Es una bicapa lipídica asociada a proteínas
o ADN LINEAL fuertemente unido a proteinas especiales (Histonas)
o PRESENCIA DE ENVOLTURA NUCLEAR EN NUCLEO BIEN DEFINIDO: doble membrana
lipídica que rodea el material genético y lo separa de los otros contenidos celulares
o CITOESQUELETO: proteinas organizadas formando intrincadas estructuras dando lugar a un
esqueleto interno que aporta sosten estructural y posibilita el movimiento celular
o CITOPLASMA COMPARTIMENTALIZADO: cada función se lleva a cabo en una gran variedad de
estructuras rodeadas por membrana denominadas Organelas, como los Peroxisomas que realizan
diversas funciones metabólicas y de detoxificación, las Mitocondrias, las cuales son centrales
energéticas de la célula, los Ribosomas que se encargan de las sínteis de las proteínas, el Retículo
Endoplásmico Liso en el cual se sintetizan distintos tipos de lípidos, el Retículo Endoplásmico
Rugoso asociado al transporte y procesamiento de proteínas y el Aparato de Golgi, que es

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 modificados y distribuidor de proteínas sintetizadas en el REG y los Lisosomas que contienen
enzimas digestivas para la degradación de moléculas complejas. Estas últimas cuatro organelas
constituyen el sistema de endomembranas.

La células Vegetales presentan una PARED CELULAR cuya estructura es diferente a la de la pared celular
bacteriana, que está compuesta por celulosa y otros polisacáridos. Las células animales carecen de pared
celular.

Otras organelas presentes son los CLOROPLASTOS donde aconstece la fotosíntesis.

Por otro lado presentan una GRAN VACUOLA CENTRAL que lleva a cabo la función de los lisosomas en
las células animales.

Los Hongos y los Parásitos también están formados por células eucariotas.

RELACION DE LOS VIRUS, VIROIDES Y PRIONES CON CÉLULAS

Virus:

No son considerados células ya que no pueden realizar dos funciones básicas características de la materia
viva: METABOLISMO y REPRODUCCION. Para ello deben infectar a una célula y utilizar de la misma toda
la maquinaria de síntesis. Los definimos como Parásitos Intracelulares Obligados.

Estan formados por material genético más proteínas. El mat genético o ácido nucleico puede ser ADN o ARN,
por otro lado las proteínas se encuentran formando un cubierta llamada CÁPSIDE, formada por unidades mas
pequeñas denominadas CAPSÓMEROS.

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Algunos virus pueden tenes otra cubierta mas de Lípidos, Proteinas y Glucoproteinas. Éstos se denominan
VIRUS ENVUELTOS ya que presentan envoltura. Los que carecen de la misma se denominan VIRUS
DESNUDOS.

Por estar formados por una

asociación de macromoléculas
pertenecen al nivel de organización
macromolecular complejo o sub-
celular.

Bacteriófago:

Virus específicos de las bacterias. Al

infectar una célula huésped, pueden establecer dos tipos de procesos. Un CICLO LÍTICO y un CICLO
LISOGÉNICO. En ambos casos el ciclo comienza del mismo modo. El virus reconoce la célula a infectar, se
une a su membrana e ingresa el ácido nucleico viral. La cápside queda por fuera de la célula.

En el Ciclo Lítico el ácido nucleico se multiplica en forma independiente al adn de la célula infectada, luego
se sintetizan las cápsides y finalmente se ensamblan cápside y ácido nucleico formándose asi los virus hijos
que salen de la célula, rompiendo su membrana.

En el Ciclo Lisogénico el material genético viral se integra al material genético de la célula infectada pasando
a estar en estado de Profago. Se multiplica entonces su material genético junto con el material genético
celular. Cuando las condiciones son las apropiadas, el adn viral se separa del adn celular, se multiplica y
desues forma cápsides y ensambla virus hijos de la misma manera que el ciclo Lítico.

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Viroides y Priones:

Los Viroides son agentes infecciosos constituidos exclusivamente por una molécula de ARN careciendo de
cubierta proteica a diferencia de los virus. Infectan fundamentalmente a las plantas. Pertenecen al nivel de
organización macromolecular por estar formados por tan solo una molécula de ARN.

Los Priones son proteínas infecciosas que carecen de ácidos nucleicos. Son los agentes responsables de
encefalopatías espongiformes transmisibles que afectan el sistema nervioso central, entre ellas la enfermedad
de la vaca loca. Pertenecen al nivel de organización macromolecular. Aparentemente estas enfermedades son
causadas por el cambio en la estructura de una proteína normalmente presente en las membranas celulares
llamada proteína priónica o PPr. La secuencia de aminoácidos de la proteína normal y de la patógena es
idéntica, lo que varía es su conformación o plegamiento en el espacio. De acuerdo a esta teoría la proteína
alterada puede unirse a su vez a la proteína normal y cambiar su conformación, transformándola a su vez en
una proteína alterada. De esta forma se propagaría la enfermedad y se generarían nuevas proteínas infecciosas
de esta forma el pasaje de la forma normal a la patológica es catalizada por el mismo prion. Por lo tanto hace
falta una pequeña cantidad de éste para provocar la transformación de toda la proteína normal ya que se trata
de un fenómeno de crecimiento exponencial. Se denominan espongiformes ya que el cerebro adquiere un
aspecto parecido al de una esponja.

Virus del HIV:

Es un retrovirus. Su mat genético es ARN. Presenta una membrana lipídica, se trata de un virus envuelto. De
ella sobresalen principalmente dos glicoproteínas, la 41 y la 120, esenciales para la entrada del virus en las
células a las que infectará.

Esta membrana a su vez recubre a la cápside del virion formada por proteínas principalmente la p-18 y la p-
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fundamental para el mecanismo de infección
intracelular.

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Ciclo de infección:

Comienza cuando un virión o partícula vírica se une a la superficie externa de la célula susceptible o linfocito
T cd4 positivo. A este primer estadio del ciclo se lo denomina ABSORCION.

Luego el virus fusiona su envoltura lipopoteica con la membrana celular introduciendo en las células su
núcleo cápside junto con el ARNque constituye su dotación genética. En cada partícula viral se encuentran
dos cadenas de ARN vírico. A este proceso se lo conoce como PENETRACIÓN.

Una vez que el virus ha penetrado en una célula, una enzima llamada Retrotranscriptasa, produce ADN a
partir de ARN viral. El ADN recién sintetizado viaja al núcleo y se integra al ADN cromosómico. En este
punto la infección se ha hecho permanente y la forma integrada del virus se denomina PRO VIRUS. La
integración de este ADN de doble cadena en el cromosoma del huésped es necesaria para la síntesis de nuevas
moléculas de ARN, ya que el virus carece completamente de la maquinaria metabólica necesaria para realizar
la transcripción y la síntesis de proteínas necesarias para la cápside y la misma transcriptasa-reversa. Una vez
que se sintetiza el ARN y las proteínas de la cápside, se ensamblan nuevos viriones los cuales salen de la
célula y pueden infectar otros linfocitos.

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SIDA o Síndrome de la Inmunodeficiencia Humana:

Enfermedad infecciosa crónica producida por el virus del HIV. Normalmente los globulos blancos atacan y
destruyen a cualquier organismo extraño que entra al ser humano. Esta respuesta es coordinada principalmente
por un tipo de glóbulo blanco llamado Linfocito CD4+. El HIV ataca específicamente a estas células, se une e
ingresa a ellas y tiene lugar su ciclo de vida por lo tanto las destruye.

Luego de la infección primaria tiene lugar un período de latencia clínica en el cual el virus se encuentra
reproduciéndose en los órganos inmunes pero no se encuentra en sangre.

Clínicamente el SIDA se declara cuando un paciente que presenta el virus tiene un conteo de Linfocitos CD4
inferior a 200 célular por mililitro cúbico de sangre, lo que es un numero muy bajo, y un alto número de
copias del virus en su sangre.

En esta condición el sistema inmune se halla gravemente deteriorado de modo que el paciente queda expuesto
a diversos procesos patológicos generados por un conjunto de infecciones oportunistas. Es decir que el SIDA
es la etapa final de la infección por HIV.

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