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    A Determinacion de Colinesterasa

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    Este documento describe los objetivos y fundamentos de la determinación de la colinesterasa plasmática. Los objetivos son conocer los plaguicidas organofosforados y carbamatos, determinar la colinesterasa en pacientes intoxicados por estos compuestos e interpretar los resultados. Se explica que existen dos tipos de colinesterasa y que su disminución indica intoxicación por plaguicidas inhibidores de la enzima. Finalmente, se proveen instrucciones para realizar la prueba y medir la actividad de la colinesterasa.

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    A Determinacion de Colinesterasa

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    Este documento describe los objetivos y fundamentos de la determinación de la colinesterasa plasmática. Los objetivos son conocer los plaguicidas organofosforados y carbamatos, determinar la colinesterasa en pacientes intoxicados por estos compuestos e interpretar los resultados. Se explica que existen dos tipos de colinesterasa y que su disminución indica intoxicación por plaguicidas inhibidores de la enzima. Finalmente, se proveen instrucciones para realizar la prueba y medir la actividad de la colinesterasa.

    Descripción original:

    Determinación

    Título original

    A DETERMINACION DE COLINESTERASA

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    Este documento describe los objetivos y fundamentos de la determinación de la colinesterasa plasmática. Los objetivos son conocer los plaguicidas organofosforados y carbamatos, determinar la colinesterasa en pacientes intoxicados por estos compuestos e interpretar los resultados. Se explica que existen dos tipos de colinesterasa y que su disminución indica intoxicación por plaguicidas inhibidores de la enzima. Finalmente, se proveen instrucciones para realizar la prueba y medir la actividad de la colinesterasa.

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    Este documento describe los objetivos y fundamentos de la determinación de la colinesterasa plasmática. Los objetivos son conocer los plaguicidas organofosforados y carbamatos, determinar la colinesterasa en pacientes intoxicados por estos compuestos e interpretar los resultados. Se explica que existen dos tipos de colinesterasa y que su disminución indica intoxicación por plaguicidas inhibidores de la enzima. Finalmente, se proveen instrucciones para realizar la prueba y medir la actividad de la colinesterasa.

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    UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMON

    FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUÍMICAS


    MATERIA: TOXICOLOGIA
    GRUPO 400

    Determinación de Colinesterasa

    Objetivos

     Conocer que son los plaguicidas, organofosforados carbamatos.

     Determinar la colinesterasa plasmática en pacientes intoxicados


    por organofosforados carbamatos.

     Interpretación de resultados.

    Introducción
    La determinación de su actividad es de importancia clínica para detectar
    pacientes intoxicados por plaguicidas organofosforados y carbamatos.
    La colinesterasa es una enzima encargada de la degradación rápida de un
    neurotransmisor.

    Se ha demostrado la existencia de dos colinesterasas:


     La colinesterasa verdadera que se encuentra en los eritrocitos y
    terminaciones de nervios colinérgicos.
     La butiril colinesterasa o pseudocolinesterasa que se encuentra en
    plasma, hígado, musculo liso y adipocitos.
    La colinesterasa del suero o plasma esta asociadas a las siguientes
    condiciones clínicas:
    1- Constituye un índice de función hepática, especialmente en
    hepatopatías crónicas. Se observa una buena correlación entre el
    aumento de GOT (AST) y la disminución de Che, en hepatitis
    infecciosas.
    2- Su disminución indica intoxicación por insecticidas
    organofosforados inhibidores de la che.
    3- En algunos individuos sensibles a la succinilcolina, relajante
    muscular administrado durante la anestesia, se observa una apnea
    post anestésica prolongada y en algunos casos fatal. Esto coincide
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    FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUÍMICAS
    MATERIA: TOXICOLOGIA
    GRUPO 400

    con la presencia de una variante genética de la che (atípica)


    incapaz de hidrolizar la succinilcolina.
    En sujetos normales esta droga es hidrolizada “in vivo” por la che, de
    1 a 4 minutos, por eso la apnea también se relaciona con bajos
    niveles de che total.

    FUNDAMENTO:
    FUNDAMENTOS DEL METODO
    butiriltiocolina + H2 O Che tiocolina + butirato
    tiocolina + DTNB 2-nitro-5-mercaptobenzoato

    REACTIVOS PROVISTOS

    Sustrato: viales conteniendo ioduro de S-butiriltiocolina y ácido 5,5'-


    ditiobis-2-nitrobenzoico (DTNB) desecados.
    Buffer: solución de buffer fosfatos para pH final 7.
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    FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUÍMICAS
    MATERIA: TOXICOLOGIA
    GRUPO 400

    INSTRUCCIONES PARA SU USO


    Buffer: listo para usar. Puede presentar cristales que sedimentan en
    reposo y no afectan su reactividad. Pipetear sin remover el sedimento.
    Sustrato: agregar 3 ml de buffer a un vial de sustrato .Tapar y
    homogenizar hasta disolución completa. Reconstituir en el momento de
    usar.
    ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
    Reactivos provistos: Son estables en refrigerador (2 – 10ºC) hasta la
    fecha de vencimiento indicada en la caja.
    Sustrato reconstituido: Es estable 1 hora a temperatura ambiente.
    INDICIOS DE ESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS
    El cambio de coloración de los reactivos puede indicar deterioro de los
    mismos.
    MUESTRA
    Suero o plasma
    a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual.
    b) Aditivos: En caso de emplear plasma como muestra, se recomienda el
    uso de heparina o EDTA como anticoagulantes para su obtención.
    Los anticoagulantes que contienen citratos, fluoruro u oxalatos producen
    una leve inhibición.
    MATERIAL REQUERIDO (No provisto)
    Espectrofotómetro.
    Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
    Cronómetro.
    UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMON
    FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUÍMICAS
    MATERIA: TOXICOLOGIA
    GRUPO 400

    CONDICIONES DE REACCIÓN
    Longitud de onda: 405 nm
    Temperatura de reacción: 25,30 o 37 ºC
    Volumen de la muestra: 20 ul
    Volumen de reactivo (sustrato):3 ml

    1. Ejemplo:
    0,200
    0,220
    0,240
    0,260
    30
    X Fc =

    2. Ejemplo:
    0,400
    0,500
    0,600
    0,700
    30
    X Fc =

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