UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES

CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS

MATERIA: Laboratorio de Biotecnología ambiental

CENTRO ACADÉMICO: Ciencias Básicas.
DEPARTAMENTO
ACADÉMICO: Ingeniería Bioquímica.

PROGRAMA EDUCATIVO: Licenciatura en Biotecnología

CLAVE DE LA
AÑO DEL PLAN DE ESTUDIOS: 2010 SEMESTRE: Octavo MATERIA: 20242
PERIODO EN QUE
ÁREA ACADÉMICA: Biotecnología Ene-Jun 2021
SE IMPARTE:
HORAS SEMANA T/P: 3/3 CRÉDITOS: Nueve
MODALIDAD EDUCATIVA EN NATURALEZA DE
LA QUE SE IMPARTE: Presencial LA MATERIA: Téorico-práctica

ELABORADO POR: Juan Antonio Lozano Alvarez

REVISADO Y APROBADO POR FECHA DE
LA ACADEMIA DE: Biotecnología ACTUALIZACIÓN: Enero 2021

DESCRIPCIÓN GENERAL

Este laboratorio abarcará principalmente ejemplos de la aplicación de la Biotecnología para disminuir

la concentración de diferentes contaminantes presentes en diferentes compartimentos ambientales
como lo son el agua, suelo y aire. Lo anterior a través del uso de organismos o derivados de ellos,
con el objetivo de ilustrar y complementar lo revisado en la parte teórica.

OBJETIVO (S) GENERAL (ES)

El objetivo de este manual es el de ofrecer un material práctico y fundamentado para mostrar el
papel esencial de la Biotecnología ambiental en el mantenimiento adecuado del ambiente,
utilizando diferentes organismos como plantas, hongos, biopolímeros, etc. en la eliminación o
disminución de diferentes contaminantes en el agua, el suelo y el aire.

GENERALIDADES DEL LABORATORIO

El contenido del curso son 8 prácticas, las cuales cubren los temas tratados en el curso
teórico.
La hora de entrada será en punto de la hora indicada, dando 5 minutos de flexibilidad: pasado
este tiempo, favor de no interrumpir y no se justificará la inasistencia. Cada equipo deberá
presentarse puntualmente con sus protocolos completos y con los materiales solicitados en
cada práctica.
El cuidado de instalaciones y material es responsabilidad de todos, deberá reponerse si se
daña.
Es requisito trabajar con la bata bien cerrada, con lentes de seguridad y con guantes (estos
últimos en caso de ser necesario); destinar apropiadamente los residuos con características
CRETIB (corrosivo, reactivo, explosivo, tóxico, inflamable y Biológico-infeccioso) en los
envases correspondientes. Si se tiene alguna duda con la disposición de dichos residuos,

Código: FO-121500-20
Revisión: 00
Emisión: 16/06/09
 preguntarle al profesor o al técnico. En el caso de no poseer características incluidas en el
CRETIB, si son sólidos se tiran al cesto de la basura y los líquidos en la tarja.
Se prohíbe introducir alimentos, fumar o tomar dentro del laboratorio.

En caso de ser la modalidad virtual, se realizarán las prácticas entre el profesor y el técnico, se
grabarán y se “cargarán” en you tube, para que los alumnos las puedan revisar y a partir de los
resultados mostrados, procederán a realizar su reporte. En caso de tener una visita
programada y no se pueda realizar in vivo, se revisarán videos que cubran el mismo objetivo y
a partir de ahí, se elaborará el reporte. Este último se cargará en el aula virtual en la sesión
posterior a la finalización de la práctica. El reporte será revisado y será entregado en el aula
virtual en los ocho días siguientes a la entrega del reporte por parte de los alumnos. Todos los
demás aspectos adicionales serán tratados de manera similar a como se imparte la teoría en
su modalidad en línea.

FORMATO DEL REPORTE

Portada Incluyendo Institución, centro, departamento, carrera, nombre del Indispensable

alumno (a), Número y título de la práctica y fecha de entrega.
Número y título de la Como encabezado del cuerpo de la práctica incluir nuevamente Indispensable
práctica estos datos.
Objetivo (s) Anotar el (los) objetivo (s) planteados al inicio de la práctica. Indispensable
Introducción Obtenida por parte del alumno, indicando en forma breve 15%.
antecedentes, importancia y estudios principales realizados sobre
el tema de interés. Incluir las citas bibliográficas (al menos 3).
Materiales y métodos Anotar los materiales y métodos aplicados en la práctica (en tiempo Indispensable
pasado).
Resultados Reporte claro de los resultados obtenidos en forma de tablas, 20%
gráficas, esquemas, etc.
Discusión de Análisis profundo de los resultados y comparación con los 30%
resultados reportados en literatura (incluir al menos 3 citas bibliográficas).
Conclusiones Extracción de los puntos concluyentes de su discusión. 20%
Cuestionario Anotar las preguntas y respuestas correctas del cuestionario. 10%
Bibliografía Referencias bibliográficas detalladas consultada para la 5%
introducción y la discusión. Autor (es).(año), Título de la
publicación, Edición, Editorial, Lugar, año, Página(s) Consultada(s).
Por ejemplo,en el caso de un libro:
Silverstein R.M., Webster F.X., Kiemle D.J. y Bryce D.L. (2015).
Spectrometric identification of organic compounds. 8a. ed. John
Wiley and Sons, USA, 340-356.

En el caso de un capítulo de un libro:

Freeman H.S. y Mock G.N. (2012). Dye application, manufacture of
dye intermediates and dyes. En: Handbook of industrial chemistry
and biotechnology. (J.A. Kent, Ed.), Springer, USA, 475-548.

En el caso de un artículo científico:

Han R., Ding D., Xu Y., Zou W.,Wang Y., Li Y. y Zou L. (2008). Use
of rice husk for the adsorption of congo red from aqueous solution
in column mode. Biores. Technol. 99 (8), 2938-2946.
Apéndice Cálculos, ecuaciones utilizadas, etc. se integran en este apartado. Indispensable

A modo de ejemplo se muestra el siguiente reporte:

2 Código: FO-121500-20
Revisión: 00
Emisión: 16/06/2009
 CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA

PRÁCTICA No. 3
Cinética del Crecimiento Microbiano
(Cultivo Batch)
Nombre del alumno (a) o integrantes del equipo:

Maestro (a): Anotar el nombre del maestro.

LUNES 17 DE FEBRERO DE 2018

 Practica 3.
Cinética del Crecimiento Microbiano, Cultivo Batch

Objetivos.

1. Determinar la cinética de crecimiento de B. subtilis y representándola con

los datos obtenidos en graficas.
2. Determinar la velocidad específica de crecimiento, consumo de sustrato, la
productividad y el rendimiento celular.
3. conocer alguno de los métodos para cuantificar la biomasa microbiana.
4. establecer algunas ventajas y desventajas de los métodos de
cuantificación.

Introducción.

El conocimiento de la cinética de crecimiento y producción de metabolitos

es fundamental en el tratamiento cuantitativo de los procesos de fermentación,
este conocimiento permite la predicción del transcurso de fermentación, la
evaluación de velocidades, rendimiento y productividades y entrega información
útil para establecer estrategias de producción y optimización del proceso.

El comportamiento cinético de una población está determinado por un

conjunto de factores genético y ambiental, entre estos últimos destacas las
condiciones de operación (composición del medio, temperatura, pH, y otras) y la
modalidad del cultivo, en la que distinguimos el cultivo por lotes, el cultivo
continuo, el cultivo por lotes alimentados o semicontinuo.

El cultivo por lotes se define como aquel que se realiza sin intercambio de
materia con los alrededores, salvo lo referente a los gases (aireación, producción
de CO2 y otros) que se suministran y retiran del sistema de forma continua. En
esta modalidad de cultivo se carga inicialmente los nutrientes y luego se inoculan
en una determinada cantidad de células viables. (1)

Metodología.

Material. Reactivos.
4 matraces Erlenmeyer.
24 cajas petri. Medio de caldo nutritivo.
Pipetas 10mL Cultivo de B. subtilis.
15 tubos con tapón de baquelita Reactivo DNS.
estériles. Agua destilada.
15 tubos con tapón de baquelita.
20 tubos de ensaye
Pipetas 5mL.
Bioreactor de 3L.
Espectrofotómetro UV/visible
Estufa de incubación
Material. Reactivos.

Procedimiento.
Se prepararon 2 L de caldo nutritivo y se colocó en el biorreactor y se
esterilizó a 15 lb/pulg2 por 15 min., y se tomó una muestra con pipeta estéril (10
mL) que sirvieron de blanco, y se inóculo con el cultivo de Bacillus subtillis
(inoculo). Se colocó el biorreactor con todos los módulos utilizados en la
fermentación (control de la temperatura, control de la aireación), en ese momento
se tomó un par de muestras, determinada a t 0, una muestra se colocó en un tubo
estéril con tapón de rosca, la cual se conservó en refrigeración para determinar
posteriormente la concentración de azucares; y la otra en una celdilla para medir
la absorbancia a 560 nm. Estas mediciones se realizaron en lapsos de una hora
por 12 horas.
Para determinar la biomasa en vez de tener la absorbancia, se hizo una
curva patrón con diluciones del inoculó, midiendo la absorbancia a 560 nm, y las
diluciones fueron centrifugadas y secadas a peso constante para determinar el
peso de la biomasa, realizando una curva entre absorbancia contra biomasa.
Para la determinación de azucares se empleó el método del DNS. Primero
se elaboró una curva patrón con muestras de dextrosa, a 0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 y
1.0mg/mL de dextrosa, se tomó de cada uno 0.5 mL (*)y se le agregaron 0.5 mL
del reactivo DNS, se colocaron los tubos en baño María por 5 minutos. Se
enfriaron y se les agregaron 5 mL de agua destilada a cada uno, se realizó la
lectura en el espectrofotómetro a 540 nm. Se Obtuvo la gráfica de absorbancia
contra concentración de azucares.

Para determinar el azúcar en las muestras, éstas se centrifugaron a 3000 r.p.m.

por 5 minutos, y de cada una se diluyo a 1:10, se repitió el procedimiento para la
determinación de azúcar descrito anteriormente, tomando 0.5 mL de la muestra
indicado con *) y se interpolaron los valores con la gráfica obtenida de la curva
patrón anterior.

Resultados.

Se obtuvieron los siguientes datos:

Conc Conc
Tiempo Abs- Abs-
Azúcar Abs Biomasa Abs
(hrs) biomasa azúcar
(mg/ml) (gr/mL)
0 0.000 0.052 0.0 0.000 0.0000 0.000
1 0.070 0.059 0.1 0.025 0.0009 0.700
2 0.082 0.061 0.2 0.073 0.0006 0.389
 Conc Conc
Tiempo Abs- Abs-
Azúcar Abs Biomasa Abs
(hrs) biomasa azúcar
(mg/ml) (gr/mL)
3 0.084 0.071 0.4 0.157 0.0003 0.170
4 0.132 0.073 0.6 0.257 0.0002 0.083
5 0.270 0.070 0.8 0.334
6 0.417 0.058 1.0 0.421
7 0.780 0.055
8 0.982 0.042
9 1.340 0.041
10 1.532 0.034
11 1.637 0.014
12 1.590 0.008

Con los siguientes valores (curvas patrón de azúcar y biomasas) se pudo

graficar:
Con estas graficas se obtuvieron los siguientes datos:

Tiempo
(hrs) Conc biomasa (grs/mL) Conc- azúcar (mg/mL)
0 0.00006 1.439
1 0.00015 1.601
2 0.00016 1.648
3 0.00017 1.879
4 0.00023 1.926
5 0.00040 1.856
6 0.00059 1.578
7 0.00105 1.509
8 0.00131 1.207
9 0.00176 1.184
10 0.00200 1.022
11 0.00214 0.559
12 0.00208 0.419

Obteniendo el siguiente gráfico:

 Además de obtener la siguiente gráfica:

Para determinar la velocidad específica del crecimiento (μ) de Bacillus

subtillis, se determinaron cada μ de cada par de puntos entre las 4 y 9horas (fase
exponencial) y se determinó promedio de las velocidades, siendo de μ = 0.393h -1,
el tiempo de duplicación, el cual fue td= 1.76 h, el rendimiento biomasa sustrato
Yx/s = 0.00457 g Biomasa/mg Sustrato y una productividad de P = 0.00014 g
Biomasa/h·mL; los tiempos entre fase y fase fueron de la fase latente a la fase
exponencial 4.96 h y de la fase exponencial a la fase estacionaria 8.45 h; la
velocidad especifica de consumo de sustrato ν = 150.45491 mgSustrato/h·g
Biomasa

Discusión.

Los gráficos nos permiten ver el comportamiento del B. subtilis, en las condiciones
específicas que se dio a la fermentación, de tal manera en que incluso el tipo de
agitación es importante, ya que en nuestro caso se utilizó agitación neumática,
desplazando la fase de latencia hasta 4 horas, casi 5, comparando con otro equipo
que utilizando agitación mecánica (la cual es más eficiente en la homogenización
del medio), permitió una fase de latencia de 2 horas, por lo que podemos
comprobar la variación de μ respecto con las condiciones, otro factor que también
afecto el sistema fue la continuidad de transferencia de calor, ya que el módulo del
equipo que se encarga de regular la temperatura, presentaba fallas, por lo que la
temperatura no se encontraba regulada, siendo en algunos casos mayor o menor
al óptimo de crecimiento, sin embargo, a pesar de estos errores, el
comportamiento, tanto del crecimiento bacteriano y reducción de la cantidad de
sustrato, se encuentra acorde a lo visto en teoría, como se observa, el crecimiento
presenta una primera fase donde el crecimiento no es significativo hasta llegar al
intervalo de la hora 3 y 4, donde tiene un despunte, presentándose la fase
exponencial, hasta el intervalo de las horas 9 y 10, donde se equilibra, llegando a
la fase estacionaria. De manera análoga se presenta la disminución de la
concentración de azúcar en el bioreactor(2).

Ahora bien esta práctica nos permitió determinar algunas variables útiles dentro el
cultivo continuo, por ejemplo, el tiempo que dura la fase latente ya que en un
proceso continuo, no es factible, además de ser un desperdicio, alimentar y
extraer medio en la fase latente, ya que el microorganismo, apenas se está
adaptando al medio y no se permite un crecimiento deseable, sin embargo a partir
del final de la fase latente, donde los microorganismo, crecen de manera
exponencial, comienza a darle flujo de medio de tal manera que permite al
organismo aprovechar el medio que recibe; también es importante conocer a μ, ya
que en el sistema continuo μ=D y D=F/V, pudiendo determinar el flujo adecuado
para que el microorganismo tenga el medio el tiempo suficiente para aprovechar el
sustrato(1).

Conclusiones.

 El desarrollo de los microorganismos se divide en 4 etapas: latente,

exponencial, estacionario y decaimiento.
  Dentro de la etapa exponencial la generación de biomasa y de
metabolitos es mayor, por lo que esta fase es fundamental para los
bioprocesos.
 La información que proporciona el cultivo por lote es base para los
procesos en continuo.
 Para optimizar el desarrollo de los microorganismos no solo se debe
fijarse en la materia prima (el medio de cultivo) sino en las condiciones
de temperatura, pH, mezclado, oxígeno disuelto.

Cuestionario.

1. Investigar otros 3 métodos para determinar la biomasa o el número de

células.

Volumen empacado. Se realiza centrifugando la muestra en tubos graduados, y

después de la centrifugación leer el volumen del sedimento.

Recuento en placa. La muestra se pasa en una caja Petri con medio nutritivo y se
determinan las UFC.

Análisis de componentes. A la muestra se le determina un analito determinado

dentro de la fermentación que se encuentre relacionado con el crecimiento del
microorganismo (1).

2. ¿Cuál de todos los métodos se puede aplicar a hongos y por qué?

El de volumen empacado, porque en este no es necesario que se presente las

células de manera individual, como es el caso de placas o por tubidimetria(1).

3. Investigar cómo sería la curva de crecimiento para células animales y

vegetales

Presenta la misma forma, sin embargo, los tiempos son más largos debido a
sus velocidades de crecimiento, ya que los valores de células animales y
vegetales, trabajan en valores con unidades de horas y días, mientras que en los
microorganismos son de minutos u horas (2).
 4. Calcular el tamaño del inoculo en cel/mL si al cabo de 10hrs de cultivo la
concentración celular es de 1x1015cel/mL y el tiempo de doblado es de 30
min.

Ln2 0.693
 t   0.0231min-1
d 30mi
n

td  30 LnX10hrs  LnX 0 X10hrs *t

min  t X0 e
X10hr  1*1015 cel X10hrs X
Ln  *t X  10hrs
mL
t  10hrs X 0
e*t
0
1*1015 cel mL
X0? *t  0.0231min-1 *10hr  60 min 
s X 
td  Ln2  1hrs
0
e13.86
 *t  13.86  X 0  9.564 *108 cel mL

5. En que se fundamenta la determinación de azúcares totales por el método

usado.

El reactivo DNS (ácido 3,5 - dinitrosalisílico) es un oxidante, que actúa sobre

los azúcares reductores, formando un compuesto colorido que es directamente
proporcional a la concentración de azúcares reductores.

Bibliografía.

1. Acevedo, F.; Gentina, J. C. (2002).Tecnología de las Fermentaciones, 3ª

Ed.,Reverté, España, 56-80.
2. Bulock, J.; Bjorn, K. (1991). Biotecnología Básica, 2ª ed., Acribia, España, 49-
55.
3. Oakes J.; Gratton P. (1998). Kinetic investigations of azo dye oxidation in
aqueous media J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2 (9), 1857-1864.

Apéndice.

Obtención de μ, ν, Yx/s, y P
X X0
ln 
 S 1
 ·
t X
t
0.00047 grsmL  1.926 1.856 mgSustrato 1

l
grs

mL
·  grsBiomasa
n 0.00028 mL 
  6  5hrs 5  4hrs 0.00023 0.00040 mL

2
  0.5063
  221.02 mgSustratohrs
·grsBiomasa

Yx/s
X X
 S P t
0.00093  0.00047  grsBIOMASAmL grsBIOMASA

Yx/s 
1.578 1.509 mgAZUCARmL P  0.00196  0.00006 mL
14hrs
Yx/s  0.00662 grsBIOMASAmgAZUCA
R
P  0.00014 grsBIOMASAhrs·m
L

Obtención de los tiempos entre fase y fase. Se tomaron en cuenta las

ecuaciones obtenidas en la gráfica “Linearización del comportamiento de B.
subtilis” y bajo el principio de donde cambian de pendiente (que sería μ) es el
punto donde cambia la fase, tenemos:

Ln[x]  0.3173h1·t  9.4668 Fase Lag

Ln[x]  0.4457h1·t 10.104 Fase
Ln[x]  0.0562h1·t  6.8101 Exp
Primer punto Fase Est
0.3173h1·t  9.4668  0.4457h1·t 10.104
- 0.1284h1·t  0.6372
 0.6372
t  - 0.1284h1  4.96 h
Segundo punto
0.4457h1·t 10.104  0.0562h1·t  6.8101
0.3895h1·t  3.2939
3.2939
t  0.3895hrs1  8.45h
 CONTENIDOS DE APRENDIZAJE

Las prácticas programadas para este laboratorio son:

PROGRAMA DE PRACTICAS
FECHA
No. PRACTICA OBJETIVO (S) PROBABLE
Presentación con los alumnos, Información
Presentación, criterios de
de las prácticas que integran el programa, los
0 evaluación y entrega de 25 enero
criterios de evaluación, el formato de los
manual.
reportes y las reglas en el laboratorio
Determinar los valores de los parámetros pH,
Caracterización de muestra de
temperatura, conductividad, sólidos totales,
agua (1): pH, temperatura,
sólidos sedimentables y sólidos disueltos, que 27 ene-08
1 conductividad, sólidos
son importantes para caracterizar la calidad feb
disueltos, Sólidos totales,
de una muestra de agua residual.
sólidos sedimentables.
Determinar los valores de oxígeno disuelto, la
Caracterización de muestra de la demanda bioquímica de oxigeno (DBO 5) y
10 feb-17
2 agua (2): Oxígeno disuelto, la demanda química de oxígeno de una
feb
DBO5 y DQO. muestra de agua.

Determinar la capacidad de remoción de los

Remoción de colorantes colorantes rojo directo 81 y negro directo 22
3 22-24 feb
textiles en agua con quitosano por el biopolímero quitosano.

Remoción de plomo en agua Determinar la capacidad de remoción del ion

4 01-08 mar
con quitosano Pb2+ en agua por el biopolímero quitosano.
El alumno determinará la capacidad de
Remoción de colorantes remoción de los colorantes textiles rojo
5 textiles con biomasa de lirio directo 81 y rojo reactivo 180 por la biomasa 10-30 mar
acuático (Eichornia crassipes). de tres partes del lirio acuático: hoja, raíz y
peciolo.
Identificar las cepas de hongos ligninolíticos
Biorremediación de aguas
capaces de biodegradar colorantes.
contaminadas con colorantes
Realizar el proceso de biodegradación de los 05 abr-03
6 textiles con hongos de la
colorantes empleando medio liquido (medio may
podredumbre blanca de la
GMY).
madera (WRF).
Disminuir la contaminación en una muestra
de agua contaminada con residuos de la
Tratamiento de vinasas con 05 mayo-31
7 industria tequilera (vinasa) mediante la
alginato y P. ostreatus. mayo
aplicación de alginato de sodio y el hongo
ligninolítico P. ostreatus.
El alumno conocerá una planta de tratamiento
de lodos activados y comprenderá los
Planta de tratamiento de lodos
8 fundamentos biológicos de su 02 jun
activados (visita).
funcionamiento.

Entrega de manuales 09 junio

 METODOLOGÍA DE ENSEÑANZA - APRENDIZAJE
Al iniciar la práctica, el alumno deberá llegar con el protocolo leído a fin de comprender los
objetivos específicos y como los llevará a cabo, en un orden lógico, realizar la toma de datos
completa, y optimizar el tiempo. Por su parte el maestro apoyará a los alumnos durante la
realización de la práctica y ayudará a resolver las cuestiones que se presenten.
EVALUACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
El reporte tendrá un valor del 80%. La asistencia, puntualidad y desempeño equivalen al 20%. El
laboratorio corresponde al 25% de la calificación total de la materia.
Se prohíbe el uso de aparatos electrónicos (celulares, tablets, lap tops, etc. o cualquier otro
dispositivo electrónico), en acciones que no estén relacionadas con el laboratorio.
El uso del equipo de seguridad necesario para que los alumnos trabajen en el laboratorio (bata,
lentes, casco, botas de seguridad, etc.), deberá utilizarse en toda la sesión de laboratorio y es
REQUISITO PARA ENTRAR Y PERMANECER EN EL LABORATORIO. Si algún alumno no
cumple con lo anterior, no podrá asistir a la práctica ni permanecer en ella. En caso de dejar de
utilizar dicho equipo de seguridad en la sesión de laboratorio, tendrá falta en dicha sesión.
Al final del curso de laboratorio los alumnos deberán entregar en engargolado o disco todas las
prácticas entregadas durante el semestre.
No se aceptarán reportes en que los resultados, discusión y conclusiones sean bajados
textualmente de software o internet.
En introducción y discusión deberán anotarse las citas bibliográficas.
En caso de que dos o más reportes sean iguales o muy similares se anularán.
El alumno deberá entregar al menos el 80% de los reportes para aprobar laboratorio.
La asistencia a las prácticas es obligatoria; abandonar el laboratorio sin previo aviso se
considera una falta.
Los reportes deberán entregarse en la siguiente sesión. No se aceptarán los reportes de una
práctica a la cual no se haya asistido, ni fuera de la fecha indicada. De igual forma el maestro
regresará los reportes calificados en la siguiente sesión.
La calificación mínima aprobatoria es de seis punto cinco (6.5).

En caso de que el laboratorio sea cursado en línea, se deberá revisar todos los videos donde se
explica cómo se realiza el procedimiento y se obtienen los resultados. Con este material,
elaborarán los reportes respectivos. La calificación final será el promedio de las calificaciones de
los reportes entregados y revisados.
Los reportes se entregarán a los 8 días después de haber visto el video de la práctica y del
mismo modo, se les regresará vía correo o aula virtual los reportes revisados a los 8 días de
haber sido entregados por parte de los alumnos. El valor del laboratorio será el resultado del
promedio de todos los reportes revisados.
Finalmente, es necesario que se entregue un compilado de todas las prácticas al final del
laboratorio, para asignar la calificación final del laboratorio.
De la misma manera que en el modo de impartición presencial, debido a que esta materia es
teórico-práctica, la calificación de laboratorio se archivará en la Jefatura del Departamento, la
Coordinación de las Academias y con la secretaria del departamento.
 Centro de Ciencias Básicas

Departamento de Ingeniería

Bioquímica

Manual de prácticas de:

BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL

CARRERA: LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGÍA

ENERO-JUNIO 2021

MANUAL DE PRÁCTICAS ELABORADO

POR: Dr. JUAN ANTONIO LOZANO

ALVAREZ
 CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS

DEPARTAMENTO DE: INGENIERÍA BIOQUÍMICA

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

PROGRAMA DE PRACTICAS
No. PRACTICA Pagina
0 Presentación, criterios de evaluación y entrega de manual.
Caracterización de muestra de agua (1): pH, temperatura, conductividad,
1 17
sólidos disueltos, sólidos totales y sólidos sedimentables.
2 Caracterización de muestra de agua (2): Oxígeno disuelto, DBO5 y DQO. 19
3 Remoción de colorantes textiles en agua con quitosano. 24
4 Remoción de plomo en agua con quitosano. 26
Remoción de colorantes textiles con biomasa de lirio acuático (Eichornia
5 crassipes). 28
Biorremediación de aguas contaminadas con colorantes textiles con
6 30
hongos de la podredumbre blanca de la madera (WRF).
7 Tratamiento de vinasas con alginato y P. ostreatus. 33
8 Planta de tratamiento de lodos activados (visita). 37
 PRACTICA No. 1
TITULO: CARACTERIZACIÓN DE MUESTRA DE AGUA (1)
pH, temperatura, conductividad, sólidos disueltos, sólidos totales, sólidos sedimentables.

OBJETIVO (S)
Determinar los valores de los parámetros pH, temperatura, conductividad, sólidos totales, sólidos
sedimentables y sólidos disueltos, que son importantes para caracterizar la calidad de una muestra
de agua residual.

INTRODUCCIÓN
Hoy en día el agua es un recurso que presenta problemas de escasez y de contaminación. Los
mantos freáticos están siendo sobreexplotados ya que se extrae una mayor cantidad de agua de la
que se carga en ellos. Los cuerpos de agua naturales están siendo contaminados por diferentes
sustancias que resultan de la actividad industrial, comercial y urbana. Desgraciadamente muchas
de las descargas que se producen en estas actividades son vertidas sin previo tratamiento a los
cuerpos de agua y provocan daños ecológicos considerables.
El uso que se quiera dar al agua depende de su calidad y esta última está determinada por
diferentes parámetros que se pueden determinar mediante diferentes técnicas. En esta primera
práctica se determinará algunos de los parámetros que brindan la información para conocer esl
grado de contaminación del agua.

MATERIAL REACTIVOS
1 potenciómetro Solución amortiguadora de pH 4.00 y
1 Termómetro 10.00.
1 Conductímetro Solución de KCl de conductividad
1 Cápsula de porcelana. conocida
1 Parrilla
1 probeta de 50 mL
1 probeta de 100 mL
1 Crisol Gooch
1 filtro de fibra de vidrio ( 0.45 µm)
1 cono Imhoff
1 Pipetas de 10 mL.
1 Desecador
1 Balanza analítica
1 pinzas para crisol
1 Horno
1 soporte universal con anillo
1 baño María
1 agitador

PROCEDIMIENTO
I. pH y temperatura.

1. Calibre el potenciómetro utilizando el o los buffers de referencia.

2. Enjuague el electrodo y mida el pH de la misma.
3. Mida la temperatura de la muestra.

II. Conductividad.
 1. Calibre el conductímetro utilizando una solución de referencia (KCl) con conductividad conocida
a la temperatura indicada. Recuérdese que la conductividad es función de la temperatura y es
importante tener la temperatura en un valor fijo para medir la conductividad del agua.
2. Anote la lectura en mS/cm, µS/cm, etc.

III. Sólidos totales.

Seque una cápsula de porcelana a 180 °C (1-2 h), colóquela en el desecador y determine su peso.

5. Coloque 50-100 mL del agua bien mezclada en la cápsula de porcelana y lleve a sequedad en
un baño de María. Posteriormente introduzca la cápsula con el residuo en un horno a 103 °C (10-
30 min).
Coloque la cápsula con el residuo en el desecador y posteriormente determine su peso.

Cálculos:
Sólidos totales (mg/L) = (peso capsula + residuo en g)- (peso capsula en g) * 1000
Volumen de muestra (L)

IV. Sólidos disueltos

1. Preparación del disco de fibra de vidrio.
2. Coloque un disco de fibra de vidrio en un crisol Gooch con la superficie corrugada hacia arriba,
cuidando que el disco se coloque en el fondo del crisol y cubra completamente las perforaciones.

3. Coloque el crisol con filtro en un equipo de filtración y aplique vacío. Lave con aproximadamente
5-10 mL de agua destilada. Posteriormente lleve este crisol con filtro a peso constante a una
temperatura de 103°C (aproximadamente 1 h y posteriormente dejar en desecador).

4. Aplique vacío, moje el filtro con agua destilada para que se adhiera al crisol, filtre la cantidad
suficiente de agua bien mezclada para tener una pesada exacta posterior al secado (2.5-200 mg de
pesada, de 10-100 mL de agua). Lave con agua destilada el filtro (2-3 lavados de 10 mL).

5. Coloque el filtrado en una cápsula de porcelana previamente puesta a peso constante y lleve a
sequedad en un baño María. Posteriormente seque a 180°C, 20-30 min, pase la cápsula al
desecador, enfríe y determine el peso de la cápsula junto con el residuo de los sólidos disueltos.

Cálculos:
Sólidos disueltos (mg/L) = (peso capsula + residuo en g)- (peso capsula en g) * 1000
Volumen de muestra (L)

V. Sólidos sedimentables.
4. Vierta 1 L de agua en un cono Imhoff y deje que los sólidos se sedimenten en un lapso de 45
min.
2. Agite suavemente sobre la pared del cono para desprender algunos sólidos adheridos al cono.
3. Deje que se sedimenten estos sólidos por 15 min más. Lea los sólidos sedimentables
directamente en mL/L.

RESULTADOS
REPORTAR:
1. Valores de pH, temperatura, conductividad, sólidos totales, sólidos disueltos y sólidos
sedimentables.

CUESTIONARIO
1. Anote los parámetros incluidos en la norma oficial NOM-001-SEMARNAT 1996.
 PRÁCTICA No.2
TÍTULO: CARACTERIZACIÒN DE UNA MUESTRA DE AGUA (2): OXÍGENO DISUELTO, DBO 5
y DQO.

OBJETIVO (S)
Determinar los valores de oxígeno disuelto, la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) y la
demanda química de oxígeno DQO de una muestra de agua.

INTRODUCCIÓN
Los diferentes parámetros que caracterizan una muestra de agua son esenciales para
determinar si un cuerpo de agua está contaminado o si está en condiciones aptas para algún uso
que normalmente tiene (recreación, pesca, fuente de agua potable, agua para riego, etc.). La
normatividad vigente determina los valores de cada uno de los parámetros que deben ser
cumplidos para darle el uso indicado en la misma.
Entre estos parámetros se encuentran el pH, la temperatura, la conductividad, sólidos en todas sus
formas, la demanda bioquímica de oxígeno, la demanda química de oxígeno, el nitrógeno y el
fósforo en todas sus formas, grasas y aceites, detergentes (SAAM), metales, coliformes totales y
fecales, etc.
También estos parámetros permiten evaluar si un cuerpo de agua ha recuperado la capacidad de
auto purificación y algunos de los parámetros aquí mencionados se han empleado para determinar
la eficiencia de depuración de las aguas residuales en las plantas de tratamiento.

MATERIAL REACTIVOS
5 Frascos de Winkler Solución de sulfato manganoso
3 pipetas graduadas de 5 mL Solución de álcali-yoduro
2 probetas de 100 mL H2SO4 concentrado
2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL Solución de almidón soluble
1 pipeta Pasteur con bulbo Solución de tiosulfato de sodio 0.025N
1 bureta de 50 mL con punta de teflòn Solución nutritiva (agua de dilución)
1 jarra graduada de 1 L
2 mangueras rígidas de plástico

PROCEDIMIENTO
1. OXÍGENO DISUELTO (método de Winkler).
Tome la muestra de agua con el frasco de Winkler de tal forma que esté sumergido en el cuerpo de
agua y en dirección contraria a la corriente (en caso de haberla), cuide que no queden burbujas en
el frasco.
Tape el frasco y derrame el exceso de agua de la boca del mismo evitando la introducción de
burbujas de aire.

1.1. Fijación del oxígeno:

Fije la muestra para la posterior determinación de oxígeno disuelto de la siguiente manera:
Añada 2 mL de solución de sulfato manganoso cuidando que la punta de la pipeta quede
introducida en la muestra de agua.
Adicione 2 mL de reactivo álcali-yoduro, si la muestra contiene oxígeno disuelto se empezará a
formar un precipitado de color café parduzco, cuya intensidad está relacionada con la cantidad de
oxígeno disuelto (a mayor color café mayor cantidad de oxígeno disuelto en el agua).
Tape el frasco, elimine el excedente de agua del frasco y mezcle por inversión varias veces ( 20-30
s).
Espere a que el precipitado de color café llegue a la mitad de la botella de Winkler y añada 2 mL de
H2SO4 concentrado sin introducir la pipeta en la solución acuosa.
Tape el frasco, elimine el exceso de solución cuidando no tener contacto con la misma y mezcle
por inversión del frasco varias veces hasta observar que el precipitado café pierde la apariencia
parda y se torna de color café transparente. En este momento se dice que el oxígeno ya está fijado
y la muestra lista para transportarse para la determinación del oxígeno disuelto en la muestra.
1.2. Determinación del oxígeno disuelto por valoración con tiosulfato

De la solución color café transparente producto de la fijación del oxígeno, tome 100 mL y vacíelos
en un matraz Erlenmeyer. Añada tiosulfato de sodio 0.025 M hasta que la disolución contenga un
color amarillo pálido.
En este momento añada de 0.5 a 1 mL de solución de almidón soluble al 0.5-1%, enseguida se
observara que la solución se torna de color azul. Continúe añadiendo más tiosulfato 0.025 N hasta
que la solución contenida en el matraz cambie de color azul a incolora.
Anote el volumen de tiosulfato empleado en la valoración y determine la cantidad de oxígeno
disuelto mediante la siguiente fórmula:

Oxigeno disuelto (ppm) = mL de tiosulfato (N tiosulfato) (8) (1000)

Volumen de muestra (mL)
Considerando la corrección por los reactivos añadidos (MnSO 4 y el álcali-yoduro, el volumen de
muestra tomado es de 98.7 mL , la normalidad de la solución de tiosulfato es 0.025 N entonces la
relación entre ppm de oxígeno disuelto y el volumen en mL de tiosulfato es la siguiente:

Oxigeno disuelto (ppm) = mL tiosulfato (0.025)(8,000)/98.7 mL

Oxigeno disuelto (ppm) = (mL tiosulfato) (2.026)

1. 2 OXÍGENO DISUELTO (método de Winkler).

Tome la muestra de agua con el frasco de Winkler de tal forma que esté sumergido en el cuerpo de
agua y en dirección contraria a la corriente (en caso de haberla), cuide que no queden burbujas en
el frasco.
Tape el frasco y derrame el exceso de agua de la boca del mismo evitando la introducción de
burbujas de aire.

1.1. Fijación del oxígeno:

Fije la muestra para la posterior determinación de oxígeno disuelto de la siguiente manera:
Añada 2 mL de solución de sulfato manganoso cuidando que la punta de la pipeta quede
introducida en la muestra de agua.
Adicione 2 mL de reactivo álcali-yoduro, si la muestra contiene oxígeno disuelto se empezará a
formar un precipitado de color café parduzco, cuya intensidad está relacionada con la cantidad de
oxígeno disuelto (a mayor color café mayor cantidad de oxígeno disuelto en el agua).
Tape el frasco, elimine el excedente de agua del frasco y mezcle por inversión varias veces ( 20-30
s).
Espere a que el precipitado de color café llegue a la mitad de la botella de Winkler y añada 2 mL de
H2SO4 concentrado sin introducir la pipeta en la solución acuosa.
Tape el frasco, elimine el exceso de solución cuidando no tener contacto con la misma y mezcle
por inversión del frasco varias veces hasta observar que el precipitado café pierde la apariencia
parda y se torna de color café transparente. En este momento se dice que el oxígeno ya está fijado
y la muestra lista para transportarse para la determinación del oxígeno disuelto en la muestra.

1.2. Determinación del oxígeno disuelto por valoración con tiosulfato

De la solución color café transparente producto de la fijación del oxígeno, tome 100 mL y vacíelos
en un matraz Erlenmeyer. Añada tiosulfato de sodio 0.025 M hasta que la disolución contenga un
color amarillo pálido.
En este momento añada de 0.5 a 1 mL de solución de almidón soluble al 0.5-1%, enseguida se
observara que la solución se torna de color azul. Continúe añadiendo más tiosulfato 0.025 N hasta
que la solución contenida en el matraz cambie de color azul a incolora.
Anote el volumen de tiosulfato empleado en la valoración y determine la cantidad de oxígeno
disuelto mediante la siguiente fórmula:
Oxigeno disuelto (ppm) = mL de tiosulfato (N tiosulfato) (8) (1000)
Volumen de muestra (mL)
Considerando la corrección por los reactivos añadidos (MnSO 4 y el álcali-yoduro, el volumen de
muestra tomado es de 98.7 mL , la normalidad de la solución de tiosulfato es 0.025 N entonces la
relación entre ppm de oxígeno disuelto y el volumen en mL de tiosulfato es la siguiente:

Oxigeno disuelto (ppm) = mL tiosulfato (0.025)(8,000)/98.7 mL

Oxigeno disuelto (ppm) = (mL tiosulfato) (2.026)

2. DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO (DBO5)

Este parámetro se determina mediante la determinación del oxígeno disuelto de una muestra de
agua al inicio y a los cinco días de incubación a 20 °C. Si la muestra de agua no está contaminada
considerablemente (aproximadamente una DBO menor a 7 mg/L) se llenan dos frascos de Winkler
con la muestra de agua, a una muestra de agua se le mide el oxígeno disuelto de la manera
descrita arriba y a la otra muestra se le deja en una cámara de incubación a 20 °C y
posteriormente se le determina el oxígeno disuelto de la misma forma que a la muestra del otro
frasco.
La DBO5 se determina con la siguiente fórmula:

DBO5 (mg/L)= O2 disuelto inicial – O2 disuelto al quinto día

Si la muestra tiene una carga de materia orgánica que demandará una cantidad mayor de oxígeno
disuelto, entonces se hará una mezcla de la muestra con agua de dilución. El agua de dilución
contiene todos los nutrientes necesarios para que la materia orgánica presente en el agua pueda
ser oxidada hasta CO2 y agua.

Por ejemplo si se considera que una muestra puede tener una DBO 5 de 500 mg/L, se hace una
dilución 1:100 de la muestra de agua, se determina la cantidad de oxígeno disuelto al inicio y al
quinto día y se obtiene la DBO5 de la muestra con la siguiente fórmula:
DBO5 (mg/L)= O2 disuelto inicial – O2 disuelto al quinto día
0.01

El valor numérico de 0.01 es debido a que la muestra se diluyó al 0.01 % ( o se obtuvo una dilución
1:100).

El procedimiento de dilución se realiza de la siguiente manera:

Se sifonea el agua de dilución en una jarra graduada de 1L, se añade la cantidad necesaria de
muestra para obtener la dilución adecuada y se afora con agua de dilución cuidando de no hacer
espuma ni producir burbujas de aire.
Se añade la muestra diluida con la solución nutritiva (agua de dilución) a dos frascos de Winkler
por medio de un sifón cuidando no formar burbujas de aire. Tapar y determinar el oxígeno disuelto
en la muestra de agua diluida de uno de ellos.
Incubar a 20 °C el otro frasco con muestra diluida (5 días) y determinar el oxígeno disuelto al
terminar este periodo.

Determinar la DBO5 mediante la misma fórmula descrita anteriormente.

Determinación de la DBO5 del agua de dilución.

Es necesario determinar la DBO 5 del agua de dilución, esta se procesa como si fuera una muestra
de agua sin diluir (llenar dos frascos de Winkler, determinar oxígeno disuelto al inicio y al quinto día
y calcular su DBO5). La DBO5 del agua de dilución normalmente posee una DBO5 máxima de 0.4-
0.5 mg/L y de preferencia debe ser de 0.2 mg/L.
Restar esta DBO5 a la de la muestra para obtener la DBO5 corregida.

DBO5 corregida (mg/L)= DBO5 de muestra- DBO5 de agua de dilución.

En ocasiones si no se tiene un conocimiento previo de la DBO 5 aproximada de la muestra se
acostumbra hacer varias diluciones de la muestra en solución nutritiva (agua de dilución), la
dilución adecuada es la que consume el 50% del oxígeno inicial. Por ejemplo si la dilución 1:50
contenía inicialmente 7 mg/L y al final de los 5 días presentó un valor de 3-4 mg/L, se toma esta
dilución como la adecuada para evaluar la DBO5 de la muestra.

2. DEMANDA QUÍMICA DE OXIGENO.

Si la muestra de agua residual contiene sólidos gruesos (suspendidos o sedimentables),
homogenice la muestra (en una licuadora de 30 a 60 segundos). Vacíe la muestra homogenizada a
un vaso de precipitados de 250 mL y manténgalo en agitación con una barra magnética en una
parrilla de agitación encendida.
Si la muestra se encuentra dentro del rango de los viales HACH para medir DQO (20-1500 mg/L),
añada 2 mL de muestra a uno de los viales HACH y 2 mL de agua destilada a otro vial HACH
(blanco). Si la muestra está muy concentrada, haga las diluciones correspondientes para que la
DQO esperada se encuentre dentro del rengo de los viales de DQO y tome de dicha dilución 2 mL,
el blanco se realiza de la misma manera descrita anteriormente (con 2 mL de agua destilada).

Tape ambos viales con el tapón de rosca y mezcle por inversión del tubo HACH tapado 5-6 veces
(tenga cuidado porque el tubo se calentará por la reacción del ácido sulfúrico y el dicromato de
potasio presentes en el vial con la muestra de agua residual).

Encienda el digestor e incube ambos tubos, el del blanco y el de la muestra a 150 °C (durante 2 h).
Apague el digestor, mezcle por inversión los tubos (tomándolos con guantes de asbesto o de
algodón) y posteriormente deje que se enfríen los tubos en una gradilla.

Encienda el espectrofotómetro HACH y elija el método para medir DQO en el rango de DQO de 20-
1500 mg/L (435). Introduzca el blanco en el portaceldas del espectrofotómetro y oprima “zero”.
Introduzca la muestra problema en el portaceldas y oprima “read”, de manera automática el equipo
mostrará el valor de la DQO en la pantalla (en mg/L).

RESULTADOS
REPORTAR: O2 disuelto de la muestra de agua (mg/L), la DBO5 (mg/L) y la DQO (mg/L).

CUESTIONARIO

1. Describa algún otro método para medir el oxígeno disuelto.

 APÉNDICE: PREPARACIÓN DE SOLUCIONES
1) Solución de MnSO4
Disuelva 480 g de MnSO4 . 4 H2O, o bien 400g de MnSO4 . 2H2O o 364 g de MnSO .H
4 2O en agua y
afore a 1L.

2) Solución de álcali-yoduro-azida de sódio

Disolver 500g de NaOH y 135g de NaI (o 150 g de KI) en agua y aforar a 1L (solución I).
Pesar 10 g de NaN3 (azida de sodio) y disolverlos en 40 mL de agua. Añadir esta disolución a la
solución I.

3) Solución de almidón
Añadir 5-6 g de almidón soluble a 1L de agua caliente. Deje enfriar y filtre. Utilice el sobrenadante.

4) Solución de tiosulfato de sodio 0.025N

Pesar exactamente 6.205 g de tiosulfato de sodio (Na2S2O3 . 5 H2O) en água recién hervida y fria,
aforar a 1L.

5) Solución nutritiva (agua de dilución):

Primero prepárese las soluciones de nutrientes:

a) Solución amortiguadora.
Disuelva 8.5 g de KH2PO4, 21.75 g de K2HPO4, 33.4 g de Na2HPO4 . 7H2O y 1.7 g de NH4Cl en
500 mL de agua destilada y afore a 1L. El pH de esta solución debe ser de 7.2.

b) Solución de sulfato de magnesio.

Disuelva 22.5 g de MgSO4 . 7 H2O en agua destilada y afore a 1L.

c) Solución de cloruro de calcio.

Disuelva 27.5 g de CaCl2 anhidro en agua destilada y afore a 1 L.

d) Solución de cloruro férrico.

Disuelva 0.25 g de FeCl3 . 6 H2O en agua destilada y afore a 1 L.

Para preparar 1L de solución añádase las siguientes cantidades de soluciones de nutrientes a 900
mL de agua destilada que fue previamente aireada durante 30 min.
1mL de solución amortiguadora
1 mL de solución de MgSO4
1 mL de solución de CaCl2
1 mL de solución de FeCl3

Afórese a 1 L con agua destilada aireada (durante 30 min). Esta solución servirá para diluir las
muestras de agua con una DBO5 elevada.
 PRÁCTICA No. 3
TITULO: REMOCION DE COLORANTES TEXTILES CON QUITOSANO

OBJETIVO (S)
Determinar la capacidad de remoción de los colorantes rojo directo 81 y negro directo 22 por el
biopolímero quitosano.

INTRODUCCIÓN
La industria textil es de importancia notable en ciertas regiones del país, en particular en
nuestro estado es una de las más importantes de la entidad. Sin embargo las actividades de teñido
y deslavado que se realizan en las mismas arrojan colorantes a la red de alcantarillado que son
difíciles de degradar en las plantas de tratamiento convencionales (aeróbicas) y cuando se somete
a tratamientos vía anaerobia desgraciadamente los productos de biotransformación son incluso
más tóxicos que los colorantes mismos.
Lo anterior ha dado lugar a diferentes metodologías de remoción de colorantes en agua. Entre ellos
se encuentra la utilización de biomasa y/o materiales de origen biológico como: hongos, bacterias,
algas, biopolímeros (quitina, quitosano, alginato, xantana, etc.). La ventaja de estos materiales es
que son biodegradables y la ventaja principal en el uso de ellos es que el residuo generado es
potencialmente biodegradable.

El quitosano es obtenido cuando se desacetila a la quitina mediante condiciones alcalinas, lo

anterior deja libre una gran cantidad de grupos amino que le confieren a este biopolímero una alta
capacidad de remoción de colorantes.
En particular se realizarán ensayos de remoción de los colorantes rojo directo 81 (RD81) y negro
directo 22 cuya aplicación es la tención de fibras naturales como el algodón, la lana, etc.

MATERIAL REACTIVOS
2 matraces volumétricos de 100 mL Colorante rojo directo 81
2 pipetas volumétricas de 5 mL Colorante negro directo 22
2 matraces Erlenmeyer de 250 mL Agua
1 balanza analítica HCl al 1%
2 pipeta Pasteur con bulbo NaOH al 1%
1 microcentrífuga Agua destilada
Celdillas de cuarzo de 1 cm parafilm
Tubos eppendorf Toallas secantes (sanitas)

PROCEDIMIENTO
1. Prepare 100 mL de solución de cada colorante con una concentración de 50 ppm a pH=7.0 a
partir de una solución madre de 2000 ppm. Tome el volumen adecuado (2.50 mL) de la solución
de 2000 ppm añada agua (90 mL), ajuste a pH=7 con NaOH al 1% o HCl al 1% y afore a 100 mL.

2. Transfiera 50 mL de cada disolución a un matraz Erlenmeyer de 250 mL. Añada 0.20g de

quitosano a 50 mL de cada solución de colorante, deje reposar de 5-10 min. para lograr que el
quitosano se hidrate.

3. Tape el matraz con parafilm y déjelo en agitación (80 rpm) en la oscuridad a 28°C durante 24 h.

4. Al término de este periodo tome una muestra del sobrenadante (3 mL) y centrifugue a 5,000 rpm
durante 3 min.
5. Mida la absorbancia de la disolución original (50 ppm) y la del sobrenadante a la longitud de
onda de cada colorante:
a) Colorante rojo directo 81 (509 nm).
b) Colorante negro directo 22 (540 nm).

6. Determine el porcentaje de remoción de cada colorante utilizando la siguiente fórmula:

% Remoción = (ABS inicial – ABS 24 h)*100

ABS inicial

RESULTADOS
REPORTAR:
1. El porcentaje de remoción de cada colorante el RD81 y el ND22 cuando se utiliza el
quitosano.

CUESTIONARIO
1.- Dibuje la estructura del quitosano y anote que tipos de grupos funcionales posee su molécula.
 PRÁCTICA No. 4
TITULO: REMOCION DE PLOMO EN AGUA CON QUITOSANO

OBJETIVO (S)
Determinar la capacidad de remoción del ion Pb2+ en agua por el biopolímero quitosano.

INTRODUCCIÓN
La generación de residuos industriales en las grandes zonas urbanas genera desechos
que contienen diferentes contaminantes, desde materia orgánica como grasas y aceites,
colorantes, pigmentos, residuos de alimentos,etc. hasta compuestos inorgánicos como sales de
metales tóxicos (Cadmio, mercurio, plomo, cobre, cromo, etc.) y otros compuestos varios
(hormonas, agentes antisépticos, antibióticos, etc.).
Aunque existen diferentes métodos para remover estas sustancias, muchas de las veces lo que se
hace es mover la contaminación del agua residual hacia un “lodo” o residuo que muchas de las
veces solo se confina y no es factible de que sea biodegradable.
La utilización de materiales biodegradables cada vez es más común debido a que ventajas como
abundancia, alta biodegradabilidad, costo bajo, etc. facilita que los materiales como el quitosano, la
quitina, alginato, etc. puedan aplicarse cada vez con mayor frecuencia en la remoción de
diferentes contaminantes.
Se ha reportado que el quitosano es un excelente agente removedor de iones metálicos como
plomo (II), cobre (II), cromo (VI), cadmio(II) y zinc(II). De esta manera, el uso de este material
barato, biodegradable y abundante puede ser una opción biotecnológica en la remoción de iones
metálicos tóxicos presentes en agua residual.

MATERIAL REACTIVOS
1 matraz volumétricos de 100 mL Nitrato de plomo anhidro
1 matraz volumétrico de 250 mL Agua destilada
1 matraces Erlenmeyer de 250 mL Papel filtro
1 balanza analítica
1 probeta de 50 mL parafilm
1 embudo Marcador indeleble
1 microespátula

PROCEDIMIENTO
1) Prepare 100 mL de solución de nitrato de plomo que contenga una concentración de ion Pb 2+ de
1000 ppm.

2) A partir de esta solución madre prepare 250 mL de solución de 50 ppm de Pb (II).

3) De esa solución tome 50 mL viértala en un matraz Erlenmeyer de 250 mL y añada 0.20 g de
quitosano, deje reposar de 5-10 min para que el quitosano se hidrate.

5) Tape el matraz con parafilm y déjelo en agitación (80 rpm) en la oscuridad a 28°C durante 24 h.

6) Al término de este periodo filtre la muestra (papel whatman de filtración lenta, No. 541 o
equivalente) y determine la concentración de plomo (II) en el filtrado mediante espectrofotometría
de absorción atómica (EAA).

7) Mida la concentración real del ion plomo (II) en la solución de 50 ppm por EAA y determine la
capacidad de remoción de plomo (II) por parte del quitosano de acuerdo a la siguiente fórmula:

qe (mg de Pb(II)/g de quitosano)= (Conc inicial (mg/L) – Cfinal (mg/L))(volumen de solución, L)

g de quitosano
 RESULTADOS
REPORTAR: Qe en mg de Pb (II) removidos por gramo de quitosano.

CUESTIONARIO
1. Se sabe que la quitina tiene capacidad de remover iones metálicos en agua, describa
ampliamente las diferencias estructurales existentes entre el quitosano y la quitina.
 PRACTICA No.5
TITULO: REMOCIÓN DE COLORANTES TEXTILES CON BIOMASA DE LIRIO ACUÁTICO
(Eichornia crassipes).

OBJETIVO (S)
El alumno determinará la capacidad de remoción de los colorantes textiles rojo directo 81 y rojo
reactivo 180 por la biomasa de tres partes del lirio acuático: hoja, raíz y peciolo.

INTRODUCCIÓN
El lirio acuático (Eichornia crassipes) es una planta nativa de Brasil, que ha sido introducida
en casi todo el mundo. Llega a crecer de 30 a 40 cm de largo, posee tallos cortos y raíces
adventicias.
El lirio acuático es considerado maleza por la serie de problemas que acarrea su presencia
y, sobre todo, por el crecimiento tan rápido de su población. Sustituye con frecuencia elementos de
la flora nativa, entorpece la navegación por ríos y lagunas. Incrementa el índice de evaporación e
impedimento del paso de la luz al fondo de los estanques lo que provoca la eliminación de algas y
por lo tanto agota las posibilidades de alimentación de los peces.
En años recientes esta planta ha sido usada para tratar diferentes tipos de aguas
residuales, en la producción de alimento para ganado, pulpa, papel, fibra y se ha hecho la
propuesta para utilizarlo en la producción de biogás como fuente de energía.
Las descargas de aguas residuales provenientes de la industria textil arrojan colorantes en
su mayoría tóxicos. Estos impiden la penetración de la luz, lo cual puede afectar la actividad
fotosintética y disminuir la cantidad de oxigeno disuelto en los cuerpos de agua contaminados. De
estos colorantes, los directos son de los más utilizados. Los colorantes rojo directo 81 (RD81) y
rojo reactivo 180 (RR180) son utilizados en la tinción de diferentes sustratos. Desafortunadamente
una cantidad considerable (5-10%) no es adsorbida a la prenda textil y contamina los cuerpos de
agua debido a su alta resistencia a diferentes tratamientos.
Recientemente varios autores han propuesto al lirio para remover diferentes colorantes, por
lo cual se considera que este tipo de “maleza” puede tener un uso importante en biorremediación.

MATERIAL REACTIVOS
6 matraces Erlenmeyer de 250 mL Agua destilada
2 probetas de 100 ml NaOH al 1% (p/v)
Licuadora HCl al 1% (v/v)
3 espátulas Colorantes: rojo directo 81 y rojo reactivo 180.
Recipientes para pesar muestras
Potenciómetro Vitafilm, Marcador
indeleble Buffer de referencia pH= 4.0 y 7.0
Agitador orbital
Cuchillo o navaja
Balanza analítica
Bolsas de plástico negras
Guantes de látex
Tubos eppendorf de 2 mL
Centrífuga eppendorf

PROCEDIMIENTO
1. Colecte el lirio acuático en lugares donde exista de manera regular (la presa El Niágara y
cuerpos de agua con alta cantidad de nutrientes). Colecte de 10-15 ejemplares para asegurarse de
que se obtenga la suficiente biomasa para hacer los estudios de remoción.
2. Lave los ejemplares de la planta (utilice guantes) y separe las diferentes partes del lirio: El
peciolo (P), raíz (R) y la hoja (H).
3. Seque a temperatura ambiente (48h) y posteriormente a 60°C durante 24 h (en el secador de
charolas). Homogenice cada una de las partes en licuadora y tamícelas a través de una criba de 50
mallas, obteniéndose el polvo que será utilizado para remover a los colorantes RD81 y RR180.

4. Prepare 300 mL de solución de cada uno de los colorantes (RD81 y RR180) a una concentración
de 100 ppm y pH=4.
5. Reparta los 300 mL de cada colorante en tres matraces Erlenmeyer de 250 mL. Al primer matraz
de cada serie añádale 0.5g de hoja, al segundo 0.5g de raíz y al tercero 0.5g de peciolo.

6. Tape los matraces con vitafilm y deje en agitación (100 rpm, 24h) a 28°C en la oscuridad.
7. Centrifugue a 17,000 rpm durante 10 min al menos 4 mL (llene dos tubos eppendorf con cada
muestra) y mida la absorbancia del sobrenadante a 544 nm (utilice agua como blanco).
8. Mida la absorbancia de la solución original de colorante de 100 ppm (utilice agua como blanco).
9. Determine el % de remoción de cada colorante con la siguiente fórmula:

% remoción muestra = (Abs inicial- Abs final * 100)/ Abs inicial

RESULTADOS

REPORTAR: El porcentaje de remoción de cada colorante a las 24 h de incubación con cada parte
de la biomasa del lirio: Hoja, raíz y peciolo.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué otro tipo de contaminantes puede remover el lirio acuático?.

 PRACTICA No.6
TITULO: BIORREMEDIACIÓN DE AGUAS CONTAMINADAS CON COLORANTES TEXTILES
CON HONGOS DE LA PODREDUMBRE BLANCA DE LA MADERA (WRF).

OBJETIVO (S)
Identificar las cepas de hongos ligninolíticos capaces de biodegradar colorantes.
Realizar el proceso de biodegradación de los colorantes empleando medio líquido.

INTRODUCCIÓN
Generalmente se emplean microorganismos o plantas capaces de degradar o acumular
sustancias contaminantes utilizando los microorganismos tales como bacterias y hongos que
puedan degradar con facilidad una gran variedad de compuestos como el petróleo y sus derivados
(benceno, tolueno, acetona, etc.).

Por esta razón se ha utilizado a diferentes hongos ligninolíticos como T. versicolor,

Pleurotus ostreatus, Pleurotus spp, etc. como parte de la biorremediación microbiana, que es son
hongos ligninolíticos que es conocido que son unos de los principales responsables organismos de
la biósfera en reciclar el carbón contenido en la lignina.

Los hongos ligninolíticos son los principales responsables en reciclar el carbón contenido
en la lignina. Siendo la lignina un polímero insoluble en agua, representa un reto especial, ya que
los sistemas enzimáticos pueden no tener acceso al sustrato y las reacciones involucradas pueden
presentar serios problemas por limitaciones en la transferencia de masa. La naturaleza resolvió
este problema diseñando sistemas enzimáticos extracelulares e inespecíficos, que producen
mediadores oxidantes que pueden difundir dentro de la estructura de la lignina y oxidar las
moléculas de polímero.

Estos mediadores son moléculas orgánicas pequeñas en forma de radicales libres o iones
metálicos. Una batería de enzimas que son responsables de producir estos mediadores para la
oxidación de la lignina han sido caracterizadas. Este grupo de enzimas está compuesto
principalmente por lignino peroxidasas, manganeso peroxidasas, peroxidasas versátiles, y lacasas
como proteínas extracelulares, así como el sistema enzimático intracelular citocromo P450.

Un sistema oxidativo inespecífico y eficiente es muy atractivo para fines ambientales. Se ha

demostrado que los sistemas enzimáticos de los hongos ligninolíticos son capaces de oxidar una
gran variedad de compuestos xenobióticos contaminantes, como son los plaguicidas, bifenilos
policlorados, explosivos, hidrocarburos aromáticos policíclicos, colorantes industriales y otros
compuestos de preocupación ambiental. En el presente trabajo se ejemplifican y discuten las
aplicaciones de las enzimas ligninolíticas fúngicas, en procesos transformación y de detoxificación
de compuestos contaminantes. Además, se plantea el uso de herramientas moleculares y químicas
para diseñar nuevos biocatalizadores más estables y con un espectro de sustratos más amplio.

MATERIAL: REACTIVOS
1 potenciómetro p/

4 espátulas

1 pipeta graduada de 1 mL

1 hoja de bisturí con mango

1 frasco Gerber con agua estéril

1 blender (homogenizador)

1 recipiente de acero inoxidable

Cepa de T. Colorantes: Negro directo 22 (ND22),
versicolor , P. rojo directo 81 (RD81), azul cuba 6
ostreatus, p. (VB6) y azul directo 79.
chrysosporium y
B. adusta en PDA. Reactivos para GMY: Glucosa, extracto
de levadura, extracto de malta, fosfato
Agar dextrosa papa en polvo. diácido de potasio, sulfato de
magnesio, peptona, solución stock de
homogenizador sales.

1 pipeta de 10 mL con punta truncada estéril Cinta testigo, masking tape, algodón,
gasa, rollo de aluminio, vitafilm, papel,
tijeras, etc.
1 probetas de 50 mL

4 Matraces Erlenmeyer de 250 mL

1 mechero Fischer

Par de celdillas de cuarzo

Dispositivo para esterilizar colorantes por
filtración (con membrana de 0.45 µm)
1 balanza analítica
1 balanza granataria

PROCEDIMIENTO
1. Preparar 150 ml de medio agar dextrosa papa (PDA) y añadirle 20 ml de solución de
colorante, (se utilizaran 3 colorantes diferentes) cuya concentración sea de 1000 ppm.
Esterilizar a 15 lb/in2 por 15 min., enfriar y llenar 10 cajas de Petri que tengan división central.

2. Inocular en cada caja 2 cepas diferentes colocando un pequeño trozo de agar con micelio en
el centro de cada compartimiento.

3. Incubar a 28 °C por un periodo máximo de 20 días y hacer observaciones diariamente.

4. Preparar 100 ml de medio líquido GMY que contiene: Glucosa 10 g/l, extracto de malta 3.5 g/l,
extracto de levadura 2 g/l, fosfato diácido de potasio 2 g/l, sulfato de magnesio 0.5 g/l, peptona
0.1 g/l y solución stock de sales 1 ml/l. Vacíelo en un matraz Erlenmeyer de 250 ml, ajuste a
pH=4.5 y esterilice a 15 lb/pulg 2 (15 min). Prepara 100 ml por cada cepa identificada como
biodegradadora del colorante.

5. Enfriar e inocular con un trozo de micelio previamente molido junto con el medio GMY estéril,
usando una licuadora de acero inoxidable (realizar esta operación en la campana de flujo
laminar).

6. Colocar los matraces en un agitador orbital y agitar a 100 rpm a una temperatura de 28-30 °C
durante 4 a 5 días.

7. Preparar 100 ml de medio GMY por cada cepa biodegradadora. Añadir 5 ml de colorante con
una concentración de 1000 ppm esterilizado por filtración en una membrana estéril de 0.45
μm.

8. Inocular 10 ml de cultivo del hongo GMY previamente molido en la licuadora.

9. Colocar el medio GMY inoculado en agitación orbital a las mismas condiciones que en el
cultivo GMY por 10-15 días y observar diariamente el crecimiento y cambio de color.
10. Anotar todas sus observaciones de cada una de las cepas biodegradadoras.

11. Incluir un control que será un medio de cultivo sin el colorante (medio GMY) y después se
esteriliza y se le añade la biomasa (pellets de hongo homogenizados en GMY), dejar en
incubación igual que en el paso 11.
12. Centrifugar a 10,000 rpm durante 5 min y leer absorbancia del sobrenadante de los cultivos
con el colorante a sus respectivas longitudes de onda los días 0,1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 y 15. El
blanco será el sobrenadante proveniente del cultivo con pellets en medio GMY sin colorante.

RESULTADOS

REPORTAR:
Observaciones de cepas inoculadas en PDA con colorante (fotos)
Observaciones diarias de decoloración de la solución y de la biomasa (pellets)
Reportar % de disminución de color (absorbancia) en cada uno de los colorantes con cada hongo
en los diferentes tiempos.

CUESTIONARIO
1.- Anote los nombres científicos de tres hongos diferentes a los utilizados aquí que sean capaces
de decolorar efluentes textiles o aguas contaminadas con colorantes.
 PRÁCTICA No. 7
TITULO: TRATAMIENTO DE VINASAS CON ALGINATO Y T. versicolor.

OBJETIVO (S):

Disminuir la contaminación en una muestra de agua contaminada con residuos de la industria

tequilera (vinasa) mediante la aplicación de alginato de sodio y el hongo ligninolítico P. ostreatus.

INTRODUCCIÒN:

Las vinasas provenientes de la industria tequilera contienen una gran cantidad de materia
orgánica que ocasiona que los valores de la demanda bioquímica de oxígeno (DBO 5) y de la
demanda química de oxígeno sean muy elevados para efluentes que las contienen. Aunque esta
materia orgánica es potencialmente biodegradable, la cantidad de la misma exige que los
tratamientos de dichos efluentes sean muy eficientes y en tiempos relativamente cortos para que
sean factibles de aplicarse y obtenerse valores de DBO 5 y DQO dentro de los límites permisibles
para poder descargar el agua residual a cuerpos de agua como rios, lagos, presas, etc.

El alginato es un polisacárido que se obtiene de organismos como algas y bacterias, está

formado por cadenas lineales de β-D-manuronato unidos (1 →4) y α-L-guluronato unidos también
por enlaces glucosídicos (1→4) como se muestra a continuación:

M=residuo de β-D-manuronato; G=residuo de α-L-guluronato.

Las moléculas de β-D-manuronato y α-L-guluronato pueden encontrarse formando bloques

homopoliméricos de polimanuronato (poli M), poliguluronato (poli G) o formando secuencias mixtas
(M-G-M-G-M), el orden en que se encuentren en la molécula varía con la fuente de donde se
extrajo (Draget, 2000). La adición de sales de calcio a disoluciones de alginato promueve la
gelificación de este biopolímero obteniéndose el alginato de calcio. Este gel es formado por la
interacción de los residuos de poliguluronato (poli G) con el ion Ca2+, dicha unión está
representada por el modelo de la caja de huevos (Grant y Morris, 1973). Debido a la alta eficiencia
del alginato para atraer sólidos suspendidos y moléculas en solución es que se puede utilizar en la
depuración de efluentes contaminados con vinasas.
Como ya se ha visto anteriormente (consultar prácticas anteriores), los hongos de la podredumbre
blanca de la madera (WRF) tienen una alta capacidad para descomponer la lignina de la madera
con el objetivo de tener acceso a la celulosa presente en la madera. El material ligninocelulósico
presente en la vinasa proveniente de la industria tequilera es un sustrato que es potencialmente
biodegradable por la acción de estos hongos, luego se espera una disminución de la carga
orgánica del agua contaminada con vinasa cuando se pone en contacto con este tipo de
organismos.

MATERIAL REACTIVOS
MATERIAL PARA TRATAMIENTO CON ALGINATO y P. ostreatus.
1 potenciómetro Solución de alginato al 2.5%. Pese 2.5
g de alginato de sodio de alto PM
(Golden Bell) y añádalo a 100 ml de
agua destilada. Deje hidratar por 72 h.
1 vaso de pp de 250 mL 100 mL de NaOH al 10% p/v

100 mL de HCl al 10% p/v

100 mL de HCl al 1% p/v

1 probeta de 50 mL Citrato de sodio dihidrato
(cristales) 1 probeta de 100 mL
1 Pipetas Pasteur con bulbo
1 agitador de vidrio
2 pipetas graduadas de 10 mL
2 pipetas graduadas de 2 mL Cepa de T. versicolor en PDA.

2 pipetas graduadas de 5 mL Reactivos para GMY: Glucosa, extracto

de levadura, extracto de malta, fosfato
2 Pipetas Pasteur con bulbo diácido de potasio, sulfato de
magnésio, peptona, solución stock de
sales.
1 pipeta de 10 mL con punta truncada estéril

Cinta testigo, masking tape, algodón,

gasa, rollo de aluminio, vitafilm, papel,
tijeras, etc.
1 probeta de 100 mL

4 probetas de 50 mL

5 Matraces Erlenmeyer de 250 mL

1 espátula
1 embudo de vidrio
1 Cápsula de porcelana.
1 Parrilla
Papel filtro cualitativo

MATERIAL PARA CARACTERIZACION DE AGUA TRATADA

1 Termómetro.
1 Conductímetro.
1 balanza analítica
2 filtros de fibra de vidrio ( 0.45 µm) p crisol
Gooch
2 Crisol Gooch
1 Desecador
1 Balanza analítica
1 pinzas para crisol
1 Horno
1 soporte universal con anillo
1 baño María con anillos Solución amortiguadora de pH 4.00 y
10.00.
5 Frascos de Winkler Solución de KCl de conductividad
conocida
3 pipetas graduadas de 5 mL
2 probetas de 100 mL Solución de sulfato
manganoso 2 Matraces Erlenmeyer de 250 mLSolución de álcali-yoduro
1 pipeta Pasteur con bulbo H2SO4 concentrado
 1 bureta de 50 mL con punta de teflòn Solución de almidón soluble
1 jarra graduada de 1 L Solución de tiosulfato de sodio 0.025N
2 mangueras rígidas de plástico Solución nutritiva (agua de dilución)

PROCEDIMIENTO:

A) TRATAMIENTO CON ALGINATO:

1. Mida 100 mL de vinasa (tomando la precaución de agitar el garrafón antes de vaciar la vinasa) y
vacíelos en un vaso de pp de 250 mL.

2. Mida el pH y ajústelo a 9.0 con NaOH al 10% (añada gota a gota con pipeta Pasteur).

3. Añada 2g de citrato de sodio dihidratado a la vinasa y agite hasta disolverlo completamente.

4. Añada lentamente y con agitación 50 mL de solución de alginato de sodio al 2.5% a la vinasa. A

medida que la cantidad de solución de alginato añadida se incremente la vinasa adquirirá una
mayor viscosidad. Una vez terminada la adición siga mezclando 3 minutos para asegurar la
distribución homogénea del biopolímero en la vinasa.

5. Añada 30 mL de CaCl2 al 5%. Al mismo tiempo que se está añadiendo el cloruro de calcio
mueva suavemente el vaso de precipitados donde se encuentra la mezcla vinasa-alginato. La
formación del gel se percibe como un cambio en la resistencia de la disolución vinasa-alginato a la
agitación.

6. Deje reposar 24 h para que ocurra la consolidación del gel.

7. Decante el filtrado y oprima suavemente el gel con una espátula para promover la liberación de
la mayor cantidad de líquido (vinasa tratada con alginato). Si la decantación del gel libera partículas
pequeñas filtre con papel cualitativo y recupere el filtrado.

8. Deje secar el gel a 55-60 C durante 48-60 h para eliminarle la humedad.

9. Mantenga en refrigeración el filtrado (24 h) para promover la formación de un precipitado que es

eliminado por filtración.

B) TRATAMIENTO CON HONGO LIGNINOLÍTICO:

1. Prepare 100 ml de medio líquido GMY que contiene: Glucosa 10 g/l, extracto de malta 3.5 g/l,
extracto de levadura 2 g/l, fosfato diácido de potasio 2 g/l, sulfato de magnesio 0.5 g/l, peptona 0.1
g/l y solución stock de sales 1 ml/l. Vacíelo en un matraz Erlenmeyer de 250 ml, ajuste a pH=4.5 y
esterilice a 15 lb/pulg2 (15 min).

2. Corte un cuadro de 1 cm2 de micelio crecido en PDA, añádalo a un recipiente de acero

inoxidable estéril con 30 GMY estéril. Tape y homogenice con el homogenizador (Blender) a 1500-
2500 rpm 30 seg. Vacíe el homogenizado en el matraz Erlenmeyer en que se encontraba el medio
GMY tape y enrolle con vitafilm para asegurar que el tapón de algodón no se desprenda de la boca
del matraz, (realice todo lo anterior en la campana de flujo laminar).

4. Coloque el matraz en un agitador orbital y agitar a 100 rpm a una temperatura de 28-30°C
durante 4 a 5 días. Durante el transcurso de este tiempo se observará la formación de pellets del
hongo.

5. Mida 100 mL de vinasa tratada con alginato y ajuste el pH=6.0. Inocule 5 mL de cultivo del
hongo (pellets homogenizados en GMY previamente) y deje incubar a 28°C a 100 rpm durante 15-
22 días. Observe diariamente el cambio de color de la vinasa (tome fotos si es necesario).
7. Decante o filtre con gasa para eliminar la biomasa del hongo y colecte la suspensión resultante
en un vaso de precipitados de 250 mL.

8. Determine los siguientes parámetros a la muestra de vinaza original y a la muestra tratada con
alginato y con el hongo: pH, conductividad, sólidos totales, sólidos disueltos, demanda bioquímica
de oxígeno (DBO5 ) y demanda química de oxígeno.

12. Compare los valores del filtrado con los obtenidos anteriormente a la muestra de agua
contaminada con vinasa y discuta que tan eficiente es el tratamiento con alginato-hongo.

RESULTADOS:

REPORTAR: Valores de pH, conductividad, sólidos totales, sólidos disueltos y la DBO5 antes y
después del tratamiento de la vinasa con alginato-hongo.

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué otros tratamientos se pueden aplicar al tratamiento de agua contaminada con vinasa
proveniente de la industria tequilera?.
 PRACTICA No.8
TITULO: PLANTA DE TRATAMIENTO DE LODOS ACTIVADOS (VISITA).

OBJETIVO (S)
El alumno conocerá una planta de tratamiento de lodos activados y comprenderá los fundamentos
biológicos de su funcionamiento.

Los alumnos realizarán una visita a una planta de tratamiento y elaborarán un reporte que
contenga lo siguiente:

Título: PLANTA DE TRATAMIENTO DE LODOS ACTIVADOS (VISITA).

INTRODUCCIÓN: Una cuartilla donde se aborde el tema y se describa las características de una
planta de tratamiento (lodos activados).

MATERIAL Y MÉTODOS: Anotar los materiales y métodos o procedimientos realizados durante la

visita.

RESULTADOS: Incluir esquemas o fotografías de la planta de tratamiento, diferentes partes de la

planta, tipo de agua residual que se trata en ellas, datos importantes como capacidad (en L/s),
etc.
En caso de no ser posible, por alguna contingencia sanitaria, se proyectará un video acerca del
tratamiento de aguas residuales y se elaborará un reporte donde se anoten las partes de la planta
y el funcionamiento de las diferentes partes que forman una planta de tratamiento ya sea de lodos
activados, de filtro percolador o de biodiscos.

BIBLIOGRAFÍA: Anotar las referencias consultadas para la elaborar el reporte de esta práctica.

38 Código: FO-121500-20
Revisión: 00
Emisión: 16/06/2009

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