BIO103 GUIA - 2 Microscopía

Curso: Biología (BIO 103)
Ciclo: 2017-1
Práctica No. 2: Microscopía: Descripción y Manejo de

Microscopio Óptico
I Objetivos
Familiarizarse con el manejo y aplicaciones del microscopio compuesto.
II. Fundamento teórico
El conocimiento de las células y de los microorganismos ha progresado paralelamente al

perfeccionamiento de los instrumentos de observación citológica; así, la mayoría de las
descripciones de células, virus y microorganismos son el resultado de las observaciones hechas
con el microscopio óptico o con el microscopio electrónico.
El primer microscopio utilizable fue construido por el holandés Zacharias Janssen en la
última década del siglo XVI (1590). Más tarde, Leeuwenhoek mejoró considerablemente la técnica
del pulido de lentes, siendo el primero en observar protozoarios y bacterias. Con la invención del
microscopio óptico en el siglo XIX y el advenimiento del microscopio electrónico a mediados del
siglo XX, se amplió enormemente el poder de observación de las estructuras celulares,
subcelulares, moleculares y atómicas.
En la actualidad el avance científico logró la creación de microscopios de alta resolución que

utilizan moléculas fluorescentes lo que ha permitido el desarrollo más preciso y extenso de
investigaciones sobre Parkinson y Alzheimer. El método permite un estudio de "moléculas
individuales dentro de células vivas", algo imposible hasta la creación de este tipo de microscopio.
-1-
III. Descripción del microscopio óptico
El microscopio es un instrumento óptico que sirve para visualizar objetos pequeños de
dimensiones inferiores a las 70 ó 100 micras (milésimas de milímetro).
El microscopio está constituido de dos partes: una mecánica y la otra óptica.
A) Parte Mecánica: comprende los siguientes dispositivos:

1) Base o pie: sirve de soporte al microscopio y suele tener el peso suficiente para darle
estabilidad al aparato.
2) Columna o brazo: une la platina con la base y sostiene al condensador y al diafragma
3) Tubo: sostiene a los oculares y al objetivo y mantiene a uno y a otro separados por la
distancia de trabajo correcta.
4) Cremallera: es un sistema que está en conexión con los tornillos.
5) Platina: sostiene a las preparaciones con el espécimen colocado sobre una perforación que
tiene al centro y que deja pasar la luz que viene del condensador o del espejo.
6) Pinzas: sostienen con firmeza a la preparación sobre la platina.
7) Revólver: permite colocar en posición de trabajo, alternativamente, los objetivos con los
que cuenta el microscopio.
8) Tornillo macrométrico o de avance rápido: mueve la platina hacia arriba y hacia abajo,
acercando rápidamente el objetivo a la distancia de trabajo aproximada con respecto al
espécimen.
9) Tornillo micrométrico o de ajuste fino: permite enfocar con precisión, moviendo muy
lentamente el tubo o la platina hacia arriba o hacia abajo.
B) Parte Óptica: comprende los dispositivos siguientes:

1) Ocular, compuesto por lentes que multiplican el aumento; puede ser reemplazado por otro
ocular de mayor aumento o menor aumento. Está en la parte superior del tubo.
2) Objetivos: compuestos por lentes de diferentes aumentos, ubicados en la parte inferior del
tubo (sistema revólver). Los objetivos son tres, llamados lentes objetivos, y son
independientes e intercambiables:
i) Objetivo de menor aumento: 4/5 X
ii) Objetivo de mayor aumento: 10 X
iii) Objetivo de mayor aumento: 40 X
iv) Objetivo de gran aumento u objetivo de inmersión: 100 X
-2-
3) Condensador: concentra el haz luminoso sobre la preparación.
4) Diafragma-disco: regula la cantidad de luz que va pasar a través de la preparación.
5) Espejo: refleja hacia arriba la luz que habrá de atravesar el diafragma, la platina, la
preparación y el sistema óptico del microscopio. El espejo plano se usa cuando hay
bastante luz y el espejo cóncavo cuando hay poca luz.
Identifique las partes del microscopio en el siguiente diagrama
Conceptos sobre los Sistemas Ópticos
1.- Poder de Resolución

Es la capacidad de un sistema óptico para separar detalles.
2.- Límite de Resolución

Es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos para que aparezcan
individualizados. Por ejemplo, dos partículas separadas 0,3 micrones aparecen individualizadas
cuando se les examina con un sistema óptico con límite de resolución de 0,2 micrones; pero si el
-3-
examen se hace con un sistema resolutivo de 0,5 micrones aparecerán fusionadas como si fueran
una sola partícula de mayor tamaño. El límite de resolución de los mejores lentes utilizados en los
microscopios ópticos comunes es de 0,2 micrones.
La discriminación de detalles de las imágenes proporcionadas por un sistema depende de
su poder de resolución y no de la capacidad de amplificación del tamaño de los objetos. La
propiedad de aumentar sólo tiene valor práctico si va acompañada de un incremento paralelo del
poder resolutivo.
El poder de resolución depende esencialmente del objetivo, ya que el ocular no puede
mejorar detalles de la imagen. La función del ocular es exclusivamente aumentar el tamaño de la
imagen proyectada en plano focal por el objetivo.
Aumento del microscopio: Para saber cuánto de aumento posee un microscopio, basta multiplicar
el aumento dado por el ocular por el objetivo. Ejemplo, si el ocular es de 10x y el objetivo de 40x,
entonces tendremos:
10 x 40 = 400 aumentos
IV. Material de Laboratorio:

- Microscopio compuesto - Gotero
- Papel lente - Vaso de precipitados
- Porta-objeto - Trozo de papel impreso
- Cubre objetos o laminilla - Láminas con cortes histológicos
V. Procedimiento:
1.- Manejo del microscopio
a) Limpie con papel lente las lentes, el condensador y el espejo.
b) Compruebe si el objetivo correspondiente al MENOR AUMENTO está a continuación del tubo, de lo
contrario póngalo en dicha dirección haciendo girar el revólver.
c) Encienda la fuente de luz.
d) Coloque y sujete la preparación de modo tal que el espécimen a observar se encuentre en el
centro de la perforación que tiene la platina.
e) Haga ascender la platina con el MACROMÉTRICO hasta que el objetivo 10X se encuentre a 0,5 cm
de distancia de la preparación.
f) Mientras mira por el ocular, haga ascender o descender la platina hasta que aparezca la
imagen.
-4-
g) Enfoque la imagen, moviendo suavemente el MICROMÉTRICO. NUNCA TRATE DE USAR EL
MICROMETRICO PARA DESPLAZAMIENTOS DE LA PLATINA, para eso está el macrométrico.
h) Para observar con el objetivo de mayor aumento (40 X), una vez conseguido el enfoque con
menor aumento y teniendo cuidado de que la imagen a observar se encuentre en el centro del
campo, haga girar el revólver cambiando así el objetivo. Mientras mira por el ocular haga
ascender la platina muy despacio hasta que aparezca la imagen.
i) Para usar el objetivo de inmersión, haga girar el revólver para colocar el objetivo de menor
aumento a continuación del tubo.
j) Retire la preparación y DEJE LIMPIO EL MICROSCOPIO, PRINCIPALMENTE LAS LENTES.
2.- Tamaño de la imagen obtenida con el microscopio

a) Coloque un trozo de papel milimetrado debajo de cada objetivo (de menor a mayor aumento).
El número de milímetros que pueda contar da el tamaño de todo el campo iluminado en
milímetros para cada objetivo. Mientras mayor sea el aumento del objetivo, se verán menos
líneas del papel milimetrado.
b) Cuente las líneas para cada objetivo y anote los números para emplearlos en los siguientes
laboratorios y, de esta manera, poder medir el tamaño de la imagen observada.
3.- Imagen obtenida con el microscopio

a) Recorte una letra pequeña de papel impreso, colóquela en el centro del porta objeto y fíjela con
una gota de agua. Coloque el cubre objeto formando un ángulo agudo y presione levemente,
procurando que no queden burbujas de aire en la zona de la letra.
b) Coloque la preparación sobre la platina del microscopio, sujetándola con las pinzas y céntrela.
Emplee el objetivo de menor aumento. Desplace la preparación al norte y luego al sur. ¿Qué
sucede cuando hace esto? De igual manera, desplácela de izquierda a derecha
Coloque en su informe
1. Trabajo de investigación sobre Nanomicroscopia.
2. El microscopio nominando sus partes
3. Elabore dibujos que ilustren sus observaciones
4. Haga anotaciones acerca de lo observado
5. ¿Qué función tiene el micrométrico, macrometrico, la cremallera?
-5-

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II. Fundamento teórico

El conocimiento de las células y de los microorganismos ha progresado paralelamente al

En la actualidad el avance científico logró la creación de microscopios de alta resolución que

A) Parte Mecánica: comprende los siguientes dispositivos:

B) Parte Óptica: comprende los dispositivos siguientes:

Identifique las partes del microscopio en el siguiente diagrama

Conceptos sobre los Sistemas Ópticos

1.- Poder de Resolución

2.- Límite de Resolución

IV. Material de Laboratorio:

2.- Tamaño de la imagen obtenida con el microscopio

3.- Imagen obtenida con el microscopio

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