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    Métodos de Detección de Mesófilos Aerobios

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    Método de detección de Mesófilos aerobios: El método a usar es recuento por vertido en placa. En este grupo se incluyen todos los microorganismos, capaces de desarrollar en presencia de oxígeno a una temperatura comprendida entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30ºC y 40ºC

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    MÉTODOS DE DETECCIÓN DE MESÓFILOS AEROBIOS

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    Método de detección de Mesófilos aerobios: El método a usar es recuento por vertido en placa. En este grupo se incluyen todos los microorganismos, capaces de desarrollar en presencia de oxígeno a una temperatura comprendida entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30ºC y 40ºC

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    ASIGNATURA:

    MICROBIOLOGÌA
    TEMA:
    EXPLICAR LOS MÉTODOS DE DETECCIÓN DE MESÓFILOS AEROBIOS, COLIFORMES
    FECALES, ESCHERICHIA COLI Y ANALIZAR LOS RESIDUOS ANTIBIÓTICOS EN
    ALIMENTOS.
    Método de detección de Mesófilos aerobios: El método
    a usar es recuento por vertido en placa. En este grupo se
    incluyen todos los microorganismos, capaces de desarrollar
    en presencia de oxígeno a una temperatura comprendida
    entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30ºC y 40ºC.

    Método de detección de Coliformes


    Análisis de residuos de fecales: El método del número más
    antibióticos: Los residuos de probable es usado para detectar
    antibiótico en alimentos de origen coliforme fecales. El grupo coliforme
    animal, como leche, huevos o INTRODUCCION constituyen un grupo heterogéneo con
    carne, representan un riesgo hábitat primordialmente intestinal para
    potencial para la salud del la mayoría de las especies que involucra,
    consumidor. es constante, abundante y casi exclusivo
    de la materia fecal.

    Métodos de detección de Escherichia Coli: Para detectar el


    Escherichia coli se usa el método del numero mas probable.
    Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentra
    clasificado dentro de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entéricas),
    existe como comensal en el intestino delgado de humanos y animales.
    MÉTODO DE DETECCIÓN
    DE MESÓFILOS AEROBIOS

    El método que se usa para la detección de Mesófilos Aerobios es el recuento por vertido en placa.
    Procedimiento (Aerobios mesófilos ISO 4833 Recuento por vertido en placa)

    SIEMBRA E
    INOCUVADORA RECUENTO GENERALIDADES
    INOCULACIÓN
    MÉTODO DE DETECCIÓN DE
    COLIFORMES FECALES

    La demostración y el recuento de organismos


    El grupo de coliformes fecales, está constituido
    coliformes, puede realizarse mediante el
    por bacterias Gram-negativas capaces de
    empleo de medios de cultivo líquidos y sólidos
    fermentar la lactosa con producción de gas a
    con características selectivas y diferenciales.
    las 48 h de incubación a 44.5 ± 0.1°C. Este
    Los Coliformes Fecales son un subgrupo de
    grupo no incluye una especie determinada, sin
    los Coliformes totales, capaces de fermentar la
    embargo la más prominente es Escherichia
    lactosa a 44º C en vez de 37 ºC como lo hacen
    coli.
    los totales.

    Aproximadamente el 95% del grupo de los Coliformes presentes en


    heces están formados por Escherichia coli y ciertas especies de
    Klebsiella. Ya que los Coliformes Fecales se encuentran casi
    exclusivamente en las heces de los animales de sangre caliente, se
    considera que reflejan mejor la presencia de contaminación fecal.
    DETECCIÓN DE
    ESCHERICHIA COLI

    Este grupo de bacterias se encuentra constituido por las siguientes cepas: E. coli enterotoxigénica
    (ETEC), E. coli enteropatógena (EPEC), E. coli enterohemorrágica (EHEC), E. coli enteroinvasiva
    (EIEC), E. coli enteroagregativa (EAEC) E. coli enteroadherente difusa (DAEC).

    Escherichia coli Escherichia coli


    enterotoxigénica ETEC enteropatógena Escherichia coli enteroinvasiva
    es reconocida como el ECEP. Es causa EIEC. Este microorganismo se
    agente causal de la diarrea importante de diarrea encuentra estrechamente
    del viajero, la cual se en los lactantes relacionado con el género Shigella,
    caracteriza por diarreas particularmente en los produce una enfermedad similar a la
    acuosas con o sin fiebre. países en vías de shigelosis. La enfermedad se
    Este tipo de infecciones es desarrollo. La ECEP presenta comúnmente en niños de
    muy frecuente en países se adhiere a las células países subdesarrollados y en
    subdesarrollados y afecta de la mucosa del personas que viajan a dichos lugares.
    principalmente a los niños. intestino delgado.
    TÉCNICA DE NÚMERO MÁS PROBABLE
    (NMP) PARA DETERMINACIÓN DE E. COLI

    Escherichia coli • En esta primera etapa se procedió a hacer diluciones seriadas


    enterohemorrágica EHEC (10-1,10-2,10-3).
    produce verotoxina, • cada dilución se tomaron 3 tubos. para un total de 9 tubos
    denominada así por su efecto • se sembraron en caldo brilla verde brillante 2% el cual es
    citotóxico sobre las células específico para la determinación de Coliformes.
    Vero, una línea de células • Se agitaron suavemente y se incubaron a 43°C +/- 2°Cpor 24-
    renales de monoverde africano. 48 horas.
    • Pasadas las 48 horas, se anotaron los tubos que mostraron
    turbidez y producción de gas.
    • se observaron por el desplazamiento del medio en el tubo de
    durham.
    • Si a las 24 horas todos los tubos muestran producción de gas
    se debe confirmar con la prueba confirmatoria;
    • Por contrario, a las 24 horas no se observan estas
    características, se debe esperar hasta las 48 horas para realizar
    la lectura.
    PRUEBA CALDO INTERPRETACIÓN
    CONFIRMATORIA TRIPTÓFANO DE LOS
    RESULTADOS

    1. Observar la producción de gas en


    el caldo lactosa bilis verde brillante
    Prueba de indol. A partir de Se mezclaron suavemente
    al 2%.
    los tubos positivos con los tubos y se incubaron a
    2. Revelar el caldo triptofano de los
    producción de gas y turbidez 44.5°C +/-0.5°C por 24
    tubos gas positivos adicionando 0.2
    de la prueba anterior de NMP horas, en baño de agua de
    mL de reactivo de kovacs, agitar
    de Coliformes se trasfirió a rotación, teniendo cuidado
    suavemente y observar la presencia
    cada tubo de tres a cuatro de que el nivel del agua del
    de un anillo rojo cereza en la
    asadas de cultivo a caldo baño no sobrepase el nivel
    superficie de la capa de alcohol
    triptófano. del medio del cultivo.
    amílico indicando la presencia de
    indol, cuando la prueba es positiva,
    o el color original del medio, cuando
    la prueba es negativa.
    ANÁLISIS DE RESIDUOS DE
    RESULTADOS ANTIBIÓTICOS

    De acuerdo con los requisitos Los residuos de antibiótico en alimentos de origen animal,
    microbiológicos exigidos por el como leche, huevos o carne, representan un riesgo
    INVIMA para cárnicos crudos, se potencial para la salud del consumidor.
    consideran como muestras Los antibióticos son metabolitos que se generan de forma
    contaminadas con E.coli aquellas natural a partir de hongos o bacterias. Las sustancias no
    que superan el valor del naturales producidas mediante modernos procesos
    indicador tomado como límite de biotecnológicos y síntesis química también se denominan
    aceptabilidad de NMP, el cual antibióticos. Los antibióticos son capaces de matar
    corresponde a un valor entre microorganismos o inhibir su crecimiento.
    120-1100 NMP/gr.

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