Práctica 2

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA

Departamento de Formación Básica Disciplinaria

Academia de Bioquímica Médica I

PRÁCTICA 2

“SOLUCIONES”

EQUIPO 4

Grupo:

2CM2

Profesores:

Díaz Martínez Arturo

Hernández Ramos Argentina

López Gloria Cristina

Semestre:

2022-2

PRÁCTICA No. 2

SOLUCIONES

Una solución es un sistema homogéneo, formado por dos o más sustancias


químicas. Está formada por un solvente en el cual se dispersa uno o más solutos.
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Cuando ambos son líquidos miscibles, se acostumbra a nombrar solvente al que se


encuentra en mayor cantidad. En las soluciones acuosas siempre se considera el
agua como solvente.

La relación que existe entre las cantidades de soluto y solvente en una solución se
llama concentración.

Existen varias formas de expresar la concentración de una solución. Las de uso más
frecuente son:

● MOLARIDAD (M). Número de moles de soluto en un litro de solución. Un mol


se define como el peso molecular en gramos de una sustancia, o sea la masa
de una sustancia que contiene el mismo número de átomos o moléculas que
hay en 12 g de 12C. (6.022 x 1023 o Número de Avogadro).
● MOLALIDAD (m). Número de moles de soluto en 1000 g de solvente.
● NORMALIDAD (N). Número de equivalentes químicos de soluto en un litro de
solución. Si dividimos los gramos de un mol entre la valencia del compuesto
se obtiene el peso equivalente químico.
● OSMOLARIDAD (OsM): Número de osmoles en un litro de solución. Un
osmol es la cantidad de soluto en gramos que proporciona el número de
Avogadro de partículas en solución.
● PORCENTUAL (%). Expresa el porcentaje de soluto en una solución. Existen
diferentes tipos:
○ Por ciento en peso (% p/p). Número de gramos de soluto en 100 g de
solución. Esta es la forma como se expresa la pureza de los reactivos
químicos.
○ Por ciento en volumen (% v/v). Número de mililitros de soluto en 100
mL de solución.
○ Por ciento en peso-volumen (% p/v). Número de gramos de soluto en
100 mL de solución. Si no se indica expresamente la relación de
porcentaje, esta es la concentración porcentual que se debe usar.
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○ FRACCIÓN MOLAR (xi). Número de moles de una sustancia en una


solución entre la suma de los moles de todos los componentes de
esta.

DIÁLISIS

Ejemplos de membranas dialíticas son el celofán y el colodión. La base del


tratamiento de pacientes renales descompensados es la diálisis, la cual es útil
también para eliminar sustancias nitrogenadas, medicamentos en exceso o exceso
de acidez en sangre. Médicamente se refieren diversos tipos de diálisis tales como:
hemodiálisis y la diálisis peritoneal.

ÓSMOSIS Y PRESIÓN OSMÓTICA

Si dos soluciones de diferente concentración están separadas por una membrana


semipermeable, el solvente de la solución menos concentrada difunde a la de mayor
concentración. Esto se explica termodinámicamente porque la solución diluida tiene
una tendencia de escape o presión de vapor muy grande. Esta tendencia de escape
o presión de vapor es muy baja cuando la solución está concentrada. Este
fenómeno es conocido como ósmosis y ejerce una presión osmótica, propiedad
coligativa de gran importancia fisiológica ya que interviene en la regulación del
volumen de sangre circulante, así como en la formación o eliminación de edemas
tisulares, y es la razón por la cual el paciente diabético elimina frecuentemente
grandes cantidades de orina (poliuria). Esta última está ocasionada por la alta
concentración de glucosa en sangre y forma parte de la triada sintomática clásica
del diabético: polifagia, polidipsia y poliuria.

La medición de la presión osmótica se lleva a cabo mediante el dispositivo llamado


OSMÓMETRO. Este requiere de una membrana semipermeable y aunque las que
más se acercan a la perfección son las de ferrocianuro de cobre y las de pergamino,
por ser más fácil de conseguir, se utilizará una membrana dialítica de colodión
(celulosa) que proporciona una medida aproximada de la presión osmótica.
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La columna de sacarosa ejercerá finalmente una presión que se opone al paso del
agua (Presión Hidrostática). Calculando ésta, se puede conocer la presión osmótica
ya que ambas son iguales.

Esto se hace mediante la fórmula: π = hρg donde,

π = presión osmótica

h = altura a la que asciende la solución de sacarosa (en metros) ρ = densidad de la


solución de sacarosa (1.088 g/mL), (convertirla a kg/m 3) y g = aceleración debida a
la gravedad (9.81 m/s2)

Efectuando esta operación encontramos la presión osmótica en Pascales.


Para obtener atmósferas usamos la siguiente equivalencia: una atmosfera igual a
1.013 x 105 Pascales

SOLUCIONES REGULADORAS

A las soluciones reguladoras se les pueden añadir cantidades relativamente


grandes de ácidos o álcalis sin alterar de manera significativa su pH. Esta acción
amortiguadora se debe a la presencia en la solución de un sistema formado por un
ácido o una base débil y su sal correspondiente.

Si se toma como ejemplo una solución que contenga un ácido débil, al que
representaremos por HA y su sal, representada por BA los hidrogeniones existentes
en ella procederán únicamente de las moléculas ácidas, que se disocian como
sigue:

El equilibrio de la reacción está dado por la siguiente ecuación:

Donde Ka es la constante de disociación del ácido. De esta ecuación se


deduce que la concentración de hidrogeniones (también conocidos como protones)
es:
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La relación entre estas dos constantes es, sin embargo, tan sensiblemente
constante en condiciones ordinarias que podemos afirmar que la concentración de
A- es igual a la concentración de la SAL. Sustituyendo una expresión por otra en la
ecuación anterior tenemos:

Si se toman logaritmos negativos en ambos términos de la ecuación,


(manipulación matemática para manejar números muy pequeños o grandes), queda
así:

Ahora bien, si -log [H+] es igual a pH, por analogía podemos decir que –log de
Ka es igual a pKa por lo que:

Por otra parte, por las leyes de los logaritmos, las expresiones –log de ([Ácido]/[Sal])
y + log de ([Sal]/[Ácido]) son iguales y la segunda puede reemplazar a la primera, de
tal modo que hechas todas las modificaciones la ecuación queda finalmente como
sigue:

Esta ecuación se conoce con el nombre de Ecuación de Henderson–


Hasselbalch y nos indica que el pH de una solución que contenga un ácido débil y
su sal está determinado por el valor de pK a (constante para cada ácido) y por el
logaritmo del cociente que resulta de dividir la concentración de la sal entre la
concentración del ácido.

Por ejemplo, el valor de la constante de disociación K a del ácido acético es de


1.8 x10-5. El valor de su pKa es por lo tanto igual a 4.74. Si tenemos una solución
reguladora que posea iguales cantidades de CH 3COOH y CH3COONa en
concentración 0.1N, el pH de esa solución sería de:

Además de servir para la preparación de soluciones de pH conocido, las


soluciones reguladoras tienen dentro del organismo un papel de importancia capital
que es el de evitar que aumente o disminuya de manera importante la concentración
de iones hidrógeno, ya que la vida humana es posible en límites muy estrechos de
pH, es decir, para la sangre arterial un pH de 7.40 y para sangre venosa y líquidos
intersticiales 7.35.
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Este último es menor por tener más CO 2 y por lo tanto más H 2CO3 producido
metabólicamente. Se sabe que los límites máximos de pH en los que por algunos
minutos puede permanecer el organismo sin sufrir muchas alteraciones son de 7.0 a
7.8. En los líquidos donde existen y actúan al mismo tiempo varios sistemas
amortiguadores, como sucede en la sangre, el ácido o la base que entra es
amortiguado por todos los sistemas presentes de manera proporcional a la eficacia
de cada uno de ellos.

La regulación fisicoquímica tiene lugar en todos los medios que contienen


reguladores, constituidos principalmente por ácidos o bases débiles y sus sales. Por
ejemplo, el de fosfatos H2PO4-/HPO4= con un pKa2 de 7.2 (o de 6.8 a la temperatura
corporal), es el principal amortiguador intracelular.

El principal amortiguador extracelular en la sangre y líquidos intersticiales es


el sistema bicarbonato H2CO3/HCO3- con un pKa de 6.1.

En el interior del eritrocito, además del bicarbonato, el amortiguador de mayor


importancia es el de hemoglobina reducida / oxihemoglobinato (HHb/HbO 2). Otros
sistemas son los de proteínas y aminoácidos.

Todos estos sistemas funcionan de manera inmediata cuando existen


excesos de álcali ó ácido ya que un cambio del pH afecta la estructura y la actividad
de las proteínas, la distribución de otros iones entre las células y el líquido
extracelular, la actividad de hormonas y fármacos, etc.

Comportamiento ácido-base de la glicina. Existen sustancias de mucha


importancia en bioquímica como son los aminoácidos y las proteínas los cuales
tienen grupos ácidos y básicos, por lo que actúan como anfolitos. En esta práctica
se determinarán las curvas de titulación de la glicina con HCl y con NaOH.

La glicina es un aminoácido que tiene un carboxilo cuyo pk a se denomina pka1


y un grupo amino cuyo pka se denomina pka2. Una propiedad conocida de los
aminoácidos es el punto isoeléctrico (pI) que es el pH en que el aminoácido tiene
carga neta 0 en solución, y en este caso se calcula con la siguiente fórmula:
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EXPERIMENTO 1. DIÁLISIS

Utilizando la cantidad de NaCl que pesó en la práctica anterior preparé una solución
de NaCl al 5% considerando que la pureza del reactivo es de 100%. Conserve esta
solución ya que se utilizará más adelante en este mismo experimento.

Evidencias de aprendizaje:

1) Describa detalladamente los cálculos que hizo para conocer la


cantidad de agua destilada que es necesario añadir al NaCl del sobre
para que la solución sea al 5%.

2) Al considerar que la solución de NaCl es al 5%, calcule las


concentraciones siguientes y detalle los cálculos correspondientes.
Molaridad, Normalidad, mEq/mL, mg/mL, moles%, Osmolaridad.

a) En un vaso de precipitados de 250 ml de capacidad, humedecer por


inmersión en agua destilada durante 10 minutos el tubo de colodión o
celofán, que actuarán como nuestra membrana, de aproximadamente 6
cm de largo por 2.5 cm de diámetro.

b) Durante este tiempo de inmersión, preparar dos tubos de ensayo limpios


y etiquetarlos. Añadir al tubo uno 2 mL de la solución de NaCl al 5%
preparada anteriormente y 5 gotas de AgNO 3. Al tubo número dos agregar
2 mL de solución de almidón al 1% y 2 gotas de solución de lugol. Agitar y
observar la reacción que ocurre en cada tubo. Etiquetar como testigo de
cloruros y testigo de almidón respectivamente.

c) Pasado los 10 minutos de inmersión del colodión, cerrar un extremo de


la membrana con un hilo de algodón para obtener un saco. Desechar el
agua destilada utilizada, enjuagar el vaso y llenar con agua destilada
nuevamente hasta un tercio de su volumen.
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d) Llenar la membrana con una mezcla de 1 mL de solución de NaCl al 5%


y 10 mL de solución de almidón al 1%.

e) Cerrar cuidadosamente el otro extremo de la membrana, enjuagar con


agua destilada y sumergir en el vaso de precipitados con agua destilada,
cuidando de no tocar las paredes.

f) Determinar la presencia de almidón y de cloruros en el líquido que rodea


a la membrana del vaso de precipitados, esto pipeteando 4 ml a tiempo 0
(inmediatamente después de sumergir el saco), 15, 30, 45 y 60 minutos y
colocando 2 ml en un tubo de esta solución del vaso de precipitados y 5
gotas de AgNO3 (serie de cloruros) y 2 ml en otro tubo de la solución del
vaso de precipitados con 2 gotas de lugol (serie de almidón).

Tiempo (min) Presencia de cloruros Presencia de almidón

15

30

45

60

Evidencias de aprendizaje:

1) Ilustrar el montaje del experimento.


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2) Explicar los resultados de la diálisis.

EXPERIMENTO 2. MEDIDA DE LA PRESIÓN OSMÓTICA POR EL MÉTODO


DIRECTO

El osmómetro consiste en un recipiente que contiene una solución de


sacarosa 1 M teñida con rojo neutro conectado a un capilar de polietileno por el cual
asciende el nivel del líquido (ver esquema de la tabla). El recipiente es el cuerpo de
una jeringa hipodérmica de 5 mL que presenta dos bandas de hule; la del extremo
inferior permite la fijación de una membrana de celofán humedecido previamente
durante 5 minutos en agua destilada. La banda superior sirve para sellar el orificio
de llenado de la cámara. Por la parte correspondiente al pivote, se le agrega el
trocar metálico de un catéter el cual se introduce en el extremo de un capilar de
polietileno. El extremo inferior de la jeringa se sumerge en un vaso de precipitados
con agua destilada. El dispositivo lo instala el personal técnico del laboratorio. Nota:
cualquier error en el montaje del osmómetro se manifestará por salida de solución
coloreada del dispositivo.

a) Cuando el Profesor le indique, en el osmómetro marcar el nivel de la solución


de sacarosa contenido en el tubo capilar, el cual será el tiempo cero.

b) Medir cada 15 minutos el nivel ascendido hasta los 90 minutos.

c) Registrar sus resultados en la tabla siguiente:

Tiempo Altura π

(min) (mm) (Atm)

0
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15

30

45

60

75

90

Evidencias de aprendizaje:

1. Graficar el tiempo en minutos en el eje de las abscisas (eje x) y la altura en


milímetros en el eje de las ordenadas (eje y).

2. Calcular la presión osmótica en atmosferas y complete la tabla.

3. ¿Cuándo deberá detenerse el proceso osmótico?

4. ¿Depende sólo de la altura la presión osmótica? Explique.

5. ¿Influye el radio del capilar en la presión osmótica? Explique.

6. ¿La sacarosa y el colorante dializan? Explique.


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7. Identificar en el esquema de la tabla de resultados todas las partes del


osmómetro.

EXPERIMENTO 3. APRECIACIÓN DEL PODER REGULADOR Y EFECTO DE LA


CONCENTRACIÓN.

· Preparar 50 mL de una solución amortiguadora con el valor de pH que le indicará


su profesor (7.0, 7.2, 7.4 y 8.0), emplear KH 2PO4 0.01 M y Na2HPO4 0.01 M (pKa2
= 7.2).

De la ecuación de Henderson Hasselbalch pH=pKa+log([sal]/[ácido]

pH =pKa+log([sal] v sal/[ácido]v ácido

(1): 7.0 = 7.2+log(0.01 M*v sal) / (0.01 M*v ácido). Preparar 50 mL. (Volumen total).
VT = Va +Vs

Va= VT-Vs

7.0-7.2 = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (VT-Vs)) = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (50-Vs))

Antilog(-0.2) = Antilog log (0.01 M*y s)/ (0.01 M* (50 mL-Vs))

0.630957 = (0.01 M*v s) (0.01 M* (50 mL-Vs)

(0.630957)* (0.01 M* (50 mL-Vs) = (0.01 M*v s)

(0.315478mLM-0.006309MVs)/0.01 M= Vs

31.5478mL-0.63090mL Vs=1Vs

1Vs + 0.63090 Vs=31.5478mL

(1.6309Vs =31.5478mL)

Vs = 31.5478mL/ 1.6309 = 19.3437 mL


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Va = 50 mL - 19.3437 mL = 30.6563 mL

(2): 7.2= 7.2+log(0.01 M*v sal) / (0.01 M*v ácido). Preparar 50 mL. (Volumen total).
VT = Va +Vs

Va= VT-Vs

7.2-7.2 = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (VT-Vs)) = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (50-Vs))

Antilog(0) = Antilog log (0.01 M*y s)/ (0.01 M* (50 mL-Vs))

0.1 = (0.01 M*v s) (0.01 M* (50 mL-Vs)

(1)* (0.01 M* (50 mL-Vs) = (0.01 M*v s)

(0.5mLM-0.01MVs)/0.01 M= Vs

50mL-1mL Vs=1Vs

1Vs + 1 Vs=50mL

(2Vs =50mL)

Vs = 50 mL/ 2ml= 25mL

Va = 50 mL - 25 mL = 25 mL

(3): 7.4 = 7.2+log(0.01 M*v sal) / (0.01 M*v ácido). Preparar 50 mL. (Volumen total).
VT = Va +Vs

Va= VT-Vs

7.4-7.2 = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (VT-Vs)) = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (50-Vs))

Antilog(0.2) = Antilog log (0.01 M*y s)/ (0.01 M* (50 mL-Vs))

1.584893 = (0.01 M*v s) (0.01 M* (50 mL-Vs)

(1.584893)* (0.01 M* (50 mL-Vs) = (0.01 M*v s)


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(0.792446mLM-0.0158489MVs)/0.01 M= Vs

79.2446mL-1.58489mL Vs=1Vs

1Vs + 1.58489 Vs=79.2446mL

(2.58489Vs =79.2446mL)

Vs = 79.2446mL/ 2.58489 = 30.6568 mL

Va = 50 mL - 30.6568 mL = 19.3432 mL

(4): 8 = 7.2+log(0.01 M*v sal) / (0.01 M*v ácido). Preparar 50 mL. (Volumen total).
VT = Va +Vs

Va= VT-Vs

8-7.2 = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (VT-Vs)) = log(0.01 M*v s)/ (0.01 M* (50-Vs))

Antilog(0.8) = Antilog log (0.01 M*y s)/ (0.01 M* (50 mL-Vs))

6.309573 = (0.01 M*v s) (0.01 M* (50 mL-Vs)

(6.309573)* (0.01 M* (50 mL-Vs) = (0.01 M*v s)

(315.478mLM-6.309MVs)/0.01 M= Vs

315.478mL-6.309mL Vs=1Vs

1Vs + 6.309Vs=315.478mL

(7.309Vs =315.478mL)

Vs = 315.478mL/ 7.309 = 43.16 mL

Va = 50 mL - 43.16 mL = 6.84 mL
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· Medir el pH potenciométrico y colorimétrico de las soluciones anteriores y anotar


los resultados en la tabla.

· Armar dos dispositivos de titulación (llenar, purgar y aforar), uno será para titular
con HCl 0.1 N las soluciones amortiguadoras preparadas previamente y el otro
dispositivo será para titular con NaOH 0.1 N.

· Añadir una alícuota de 10 mL de la solución amortiguadora que preparó en un


matraz Erlenmeyer de 250 mL, medir con una pipeta volumétrica de 10 mL.
Añadir 5 gotas de azul de timol y titular con HCl 0.1 N hasta observar el cambio
de color de amarillo a rojo. Repetir la titulación para cada solución amortiguadora
preparada por duplicado.

· Agregar una alícuota de 10 mL de la solución amortiguadora que preparó en otro


matraz Erlenmeyer de 250 mL, medir con una pipeta volumétrica de 10 mL.
Añadir 5 gotas de azul de timol y titular con NaOH 0.1 N hasta observar el cambio
de color de amarillo a azul. Repetir la titulación para cada solución amortiguadora
preparada por duplicado.

· Registre los resultados en la siguiente tabla.


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Concentració Valor de pH
n (N) Gasto de
Gasto de
pH
Potenciométric HCl [0.1 NaOH [0.1
teórico Colorimétrico o N] en mL N] en mL

7.0 0.01

7.0 0.1

7.2 0.01

7.2 0.1

7.4 0.01

7.4 0.1

8.0 0.01

8.0 0.1

Evidencias de aprendizaje:
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1) Describir detalladamente los cálculos que realizó para cada uno de los pH
solicitados.

2) Explicar la coincidencia o no, entre sus resultados y el cálculo teórico.

3) Explicar los resultados con base en la teoría.

EXPERIMENTO 4. CURVAS DE TITULACIÓN DE LA GLICINA.

· Añadir 30 mL de solución de glicina 0.1 N en un vaso de precipitados de 100 mL,


con la ayuda de su profesor agregar una barra magnética y colocar sobre una
placa de agitación, medir el pH y sin retirar el electrodo titular con NaOH 0.1 N
como se encuentra indicado en la tabla y registrar sus resultados.

· Añadir 30 mL de solución de glicina 0.1 N en otro vaso de precipitados de 100


mL, con la ayuda de su profesor agregar una barra magnética y colocar sobre el
agitador, medir el pH y sin retirar el electrodo titular con HCl 0.1 N, como se
encuentra indicado en la tabla y registrar sus resultados.

Titulación con Glicina 0.1 N Titulación con Glicina 0.1 N

HCl 0.1N NaOH 0.1 N

mL Acumulativo pH mL Acumulativo pH

0 0 0 0

2 2 2 2
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3 5 3 5

4 9 4 9

5 14 5 14

5 19 5 19

5 24 5 24

1 25 1 25

1 26 1 26

1 27 1 27

1 28 1 28

0.5 28.5 0.5 28.5

0.5 29 0.5 29

Evidencias de aprendizaje:
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1) Graficar los valores acumulativos de HCl con signo negativo y a los de


NaOH con signo positivo, en el eje de las abscisas (X) y el pH en el eje de las
ordenadas (Y).

2) Identificar en la gráfica los valores de pK 1 y pK2.

3)

Calcular el punto isoeléctrico (pI) sabiendo que: pK 1 + pK2.

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