Crecimiento Bacteriano

Aumento de número
(no de tamaño)
Multiplicación
bacteriana: fisión
simple o binaria orm .o del · ·o

Elongación
Auto duplicación de ADN
cromosómico
Tabicado central
Invaginación membrana
celular
Síntesis de pared
 Tiempo de generación
• Tiempo necesario para la duplicación
celular
• Distintiva de cada especie
• Puede influirse por factores estimulantes
• Varían de 20 minutos (Escherichia coli)
hasta 24 horas
 Curva de Crecimiento
Bacteriano
•Bacteria en medio Curw de 1crecirnienro1bacteria.no

adecuado Fo
Hhl.a Oi'lllñ ll

•Gráfico de coordenadas: r
número de bacterias
(logaritmo) versus lapso de
tiempo.
g
o Fa.,e de
adapt.x:ión
j_l(I~

•Distinta para cada bacteria

•En todas se identifican Ti po

cuatro etapas
 Fase de Latencia

• El número de microorganismos no varía

• Adaptación al medio, producción de
enzimas
• Tiempo variable: entre una hora a días.
• Tamaño relativo aumentado por división
Fo
1Mla.=>tlíldl"lli2
 Fase exponencial o de crecimiento
logarítmico
• Relación casi lineal entre el
tiempo y el número de
elementos.
• Actividad metabólica
incrementada
• Depende del tiempo de Fou

generación de cada bacteria

it:'1lllll01'111fía!

• Los antimicrobianos son mas

activos
Fo...,de
o.dapt.x,ón
(L,g)

• Puede haber variaciones

 Fase Estacionaria
En determinado punto el crecimiento disminuye
La población no aumenta
Células nuevas reemplazan a las células muertas
Actividad metabólica mas lenta
Células en animación suspendida F...
e:s'fl100l"lllr"IG

Producción de metabolitos secundarios

Antibioticos
Toxinas
Fase de Esporogenesis para las especies
productoras de esporas
 Fase de declinación o muerte
• Recuento de células disminuye
sensiblemente
• El numero de células muertas supera al
número de células vivas
• Acumulación de productos tóxicos
• Disminución de nutrientes
• Aparición rápida : autolimitar diseminación
infecciones
Fd"" do
o.dapt<1«60
(lo9)
 Técnicas para determinar el
número y viabilidad de las células
• Contar al microscopio el
número de células en un
volumen conocido
(a) /b)

• Establecer el número de
células por turbidimetria
• Recuento de elementos
(e)
(d)

viables por cultivo

(Unidad Formadora de
Colonias o UFC)
• NMP
 Efecto de la Temperatura
• Temperatura mínima de crecimiento
• Temperatura óptima de crecimiento
• Temperatura máxima de crecimiento
 Sicrófilos
• Requieren bajas temperaturas
• 15 – 20 ºC
• La mínima puede ser muy baja
• Bacterias en el fondo del mar y en los
polos
 Mesófilos
• Rango de temperaturas: 25 – 40 ºC
• Temperatura óptima: 37 ºC ± 1 ºC
• Agentes que afectan al hombre y los
animales
 Termófilos
• Toleran altas temperaturas
• Temperatura óptima: 55 ºC
• Temperatura máxima: 80 ºC o mas.
 Condiciones de pH
• pH : Potencial Hidrógeno. Va desde 0 a
14.
• pH < 6,5 ácido
• pH > 7,5 básico o alcalino
• pH 6,5 – 7,5 neutro Mas adecuado para
crecimiento bacteriano
• Bacterias que crecen hasta pH 4
Acidófilas (Por ejemplo: Lactobacillus)
• Vibrio cholerae : medio alcalino
 Presión Osmótica
Los solutos (sales y azúcares) disueltos se
desplazan a zonas de menor concentración.
El agua se desplaza a zonas de mayor
concentración de solutos
Una presión osmótica alta causa pérdida de
agua y plasmólisis de la célula
Halófilas: bacterias que toleran altas
concentraciones salinas
Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 %
de sales
 Condiciones atmósféricas
• Potencial de óxido-reducción o Redox
(Eh)
• Respiración bacteriana : reacciones de
óxido-reducción, en cadena
• El aceptor final de electrones o
hidrogeniones es variable
 Aerobios
• Requieren oxígeno, aceptor final de
hidrógeno
• Formación de H2O y CO2
• Producción de enzima Catalasa :
desdoblamiento del Peróxido de
hidrógeno (H2O2) en H2O y oxígeno
• Prueba de Catalasa para diferenciar
microroganismos (Staphylococcus de
Streptococcus)
 Anaerobios
• Viven en ausencia de oxígeno
atmosférico
• Aceptor final de hidrógeno : compuesto
inorgánico (NO3 o SO4)
• Fermentación: la fuente de carbono
provee energía, el donador de hidrógeno
y el aceptor final (un compuesto orgánico
como ácidos o alcoholes)
• Muy frecuente en microorganismos orales
 Anaerobios
• Anaerobios obligados: no utilizan O2
• Anaerobios moderados: toleran de un 2 a
un 8 % de O2
• Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un
tiempo en presencia de O2
• Anaerobios facultativos: aceptan
indistintintamente una situación u otra
 Microaerófilos
 Requieren bajas concentraciones de O2 para crecer
 Utilizan el O2 como fuente de energía pero a
concentraciones < 15 %
 Susceptibles a radicales superóxido
 Enzima Superóxido Dismutasa (SOD) : transforma
radicales superóxido en H2O2
 Capnofilas: desarrollan mejor con concentraciones de
CO2 elevadas
 La cavidad oral presenta todas estas variantes
 Las especies capnófilas aumentan en personas con
alteraciones periodontales
 Control de Microorganismos
• Muchos factores estimulantes del
desarrollo bacteriano se usan para
preservar alimentos:
– Baja temperatura
– Salmueras
– Dulces
– Salados
– Ahumados
 Metabolismo Bacteriano
• Conjunto de reacciones o
transformaciones quimicas que tienen
lugar en un microorganismo para
mantener su viabilidad
• Procesos o reacciones Catabólicas
¿ . . "~, ._
lar .rgl" - - - - - L_ _ _ _ S llo!rsl"de

– Degradan nutrientes
·Prcaducffl • d+s+:ho
,Plódut4"bt d• tt11t'4n611tioh
-1o;HW)s.. ,c;Q_ 11,tp{'(ilt,: rjij,
MdrC!f'IÉS,•

– Liberan energía
• Procesos o reacciones Anabólicas
– Tienden a unir moléculas
– Reacciones de síntesis que consumen
Pruebas bioquímicas de
identificación
Bioq. María de los Ángeles Sosa
 Pruebas
Pruebas de
de Identificación
Identificación
rápidas
rápidas

1.
1 . Prueba
Prueba dede la
la catalasa
catalasa
2.
2. Prueba
Prueba dede la
la coagulasa
coagulasa
3.
3. Prueba
Pru,e ba de
de PYR
PYR
4.
4. Prueba
Prueba dede oxidasa
oxidasa
 Pruebas
Pruebas de
de Identificación
Identificación para
para
Cocos
Coc,o s Gram
Gram ++
1.
1. DNasa
DNasa
2.
2. Prueba
Prueba del
del manitol
manitol salado
salado
3.
3. Bilis
Bilis esculina
esculina
4.
4. CAMP
CAMP
5.
5. Hidrólisis
Hidrólisis del
del hipurato
hipurato
6.
6. Voges
Voges –Proskauer
-Proskauer

Pruebas
Pruebas de
de sensibilidad
sensibilidad a
a ATB
ATB

1.
1. Disco
Disco de
de Optoquina
Optoquina
2.
2. Disco
Disco de
de novobiocina
novobiocina
3.
3. Disco
Disco de
de Bacitracina
Bacitracina
catalasa
 Prueba
p de la catalasa
Fundamento: Detecta la presencia de la enzima
catalasa.
Procedimiento: En portaobjetos colocar sobre una
colonia unas gotas de H202 3 %.
H202 H20 + 02
Liberación de burbujas rápida y sostenida indica
la producción de oxígeno molecular = prueba (+)
Consideraciones:
No Agar sangre (peroxidasa en los eritrocitos).
 ccoagulasa
oagulasa

-
 Prueba de la coagulasa
Fundamento: Detecta un factor de agregación “clumping
factor” en la superficie de la bacteriana.
Procedimiento: se coloca una colonia sospechosa de
pertenecer a una especie de Staphylococcus y se
emulsifica en una gota de plasma de conejo.
Interpretación: “arracimamiento” bacteriano en 1 minuto =
prueba (+).
Si el resultado es negativo ensayar la producción de
coagulasa en tubo.
Consideraciones:
Utilizar plasma con EDTA y no citratado, ya que
organismos capaces de metabolizar el citrato
(Enterococcus spp.) pueden dar resultados falsos (+).
Las pruebas (-) luego de 4 hs de incubación a 35ºC, dejar
a temperatura ambiente y leer luego de 18-24 hs a fin de
evitar la fibrinólisis que producen algunas cepas al ser
incubadas en forma prolongada a 35ºC.
Prueba de PYR
 Prueba del PYR:
Fundamento: detecta la enzima pirrolidonil arilamidasa se utiliza
como sustrato el reactivo L-pirrolidonil- beta-naftilamida (PYR), para
la identificación rápida de enterococos.
Procedimiento: Realizar un alto inóculo (2 MacFarland) e introducir
un disco de PYR.
Tiempo y Tº de incubación: 30 minutos a 35º C.
Tiempo de lectura: 5 minutos.
Interpretación:
Disco rosado o rojo (+)
Disco y/o solución amarillo a incoloro (-).
Consideraciones: Algunas especies de Staphylococcus y los
estreptococos del grupo A dan, también, una prueba positiva.
DNAsa
 Prueba de la DNAsa
Fundamento: El S. aureus produce una DNAasa
termoestable que hidroliza DNA. La producción de
DNAsa puede determinarse incorporando ácido
desoxirribonucleico (DNA) en agar nutritivo .

Procedimiento: Se inocula el microorganismo en

manchas densas sobre agar DNA y después de 18 a 24
hs de incubación. Revelar con HCl al 1%, que precipita
el DNA nativo del medio.

Interpretación: colonias rodeadas por una zona clara

donde el ADN ha sido despolimerizado e hidrolizado =
prueba (+)
Manitol salado
 Agar Manitol salado
Fundamento: el medio contiene manitol (1%), cloruro de sodio (7,5
%), rojo de fenol y peptonas.
Procedimiento: Sembrar la cepa e incubar 18 a 24 hs a 35ºC.
Interpretación:
Crecimiento y viraje
S. aureus

Crecimiento sin viraje.

S. epidermidis

Consideraciones:
La alta concentración de sal inhibe otros microorganismos excepto
enterococos (por lo tanto usar la placa para identificación, no para
aislamiento).
Bilis Esculina
 Prueba de la bilis-esculina:
Fundamento:
~ ~ = = ~ Se Se basa
basa en
en la
1 capacidad de ciertas bacterias
(estreptococos del del grupo
grupo D)
O para hidrolizar la esculina en presencia
de
de 1-4%
1 % dede sales
sales biliares.
bfti
Procedimiento:
Procedimiento: Se inocula el microorganismo en la superficie de
un
un pico
pico de
et., flauta.
flaota. Incubar 24 hs.
Interpretación:
Interpreta · La beta glucosidasa escinde la esculina en glucosa
y esculetina.
1' escul . Esta ultima es soluble en el medio y forma un complejo
de
<te color
CCSI negro con Fe 3+ .La hidrólisis de esculina se observa como
un
u oscurecimiento del medio (color negro) en 24 hs de incubación a
35ºC, raramente se requieren 48 hs de incubación hasta que la
hidrólisis sea aparente.
Consideraciones: Es importante que el medio contenga 40% de
bilis, ya que algunos productos contienen menos cantidad lo que
lleva a confundir algunos estreptococos viridans con enterococos
 Prueba de CAMP
Fundamento: Los estreptococos grupo B secretan el factor CAMP
que interactúa con la ß-hemolisina secretada por una cepa ß-
hemolítica de S. aureus (ATCC 25923) lo que causa un
acrecentamiento o sinergismo de la hemólisis.
Procedimiento: En placa de agar sangre sembrar una estría de la
cepa de S. aureus y perpendicularmente a ésta (lo más cerca
posible,
pos sin llegar a tocarla) sembrar la cepa de estreptococo en
estudio.
es
Tiempo y Tº de incubación: Incubar 24 hs a 35ºC en aerobiosis
(en CO2 aumentan los falsos positivos).
Interpretación: El sinergismo se observa como un área de ß-
Hemólisis en forma de “punta de flecha” en la zona
de desarrollo más cercana a ambas estrías.
Prueba
Prueba de
d CAMP
 Prueba del hipurato de sodio
Fundamento: Ciertas cepas son capaces de hidrolizar el hipurato
de sodio. La producción de hipuricasa resulta en la hidrólisis del
hipurato de sodio con la formación de benzoato de sodio y glicina.
Procedimiento:
Inocular un tubo con medio hipurato de sodio con el
microorganismo. Incubar 24 hs a 35ºC. Centrifugar. Pipetear 0.8 ml
el sobrenadante. Agregar 0.2 ml de cloruro férrico 7%.
Inocular un tubo con 0.4 ml de medio hipurato de sodio con el
microorganismo. Incubar 2 hs a 35ºC. Agregar 0.2 ml de Ninhidrina.
Interpretación:
La formación de un precipitado denso y persistente por 10 minutos
= prueba (+) Benzoato de sodio
La aparición de un color púrpura profundo = prueba (+) glicina.
Hidrólisis de hipurato
Prueba de la susceptibilidad a
la Novobiocina
Fundamento: Se
~~=~~ Se basa en que ciertas bacterias son sensibles a la
novobiocina.•
Procedimiento:
Procedimiento: Se Sé inocula
noa. el microorganismo en agar Mueller
Hinton
Hinton según
S99ún técnica de Kirby-Bauer, utilizando discos de
Novobiocina
Novobiogna (5 (5 µg).
Interpretación:
lnte,pretacl Sensible: inhibición del desarrollo con un diámetro
mayor o igual
41nayoro · a 16 mm
Staphylococcus
Sta R
Micrococcus S

Consideraciones:
Kirby Bauer (Difusión en disco)
Inoculo sin incubación previa
Tiempo de lectura: 24 hs.
Tº de incubación: 33º a 35º
 Prueba de la Bacitracina:
~Fundamento:
· Se
~ ~ ~:!::r. Se basa
basa en
en que
que ciertas
ciertas bacterias son sensibles a la
bacitracina.
ac1 rac1na.
Procedimiento:
Procedimiento: Se Se inocula
inocula el
el microorganismo
mi en AS según técnica
de
de Kirby-Bauer
Kirby-Bauer utilizando
utilizando discos
discos de
da Bacitracina (0.04 U).
Interpretación:
Interpretación: Sensible:
Sensible: Cualquier zona de inhibición del
desarrollo.
desarrollo.
Consideraciones:
Con§ldefaclo_Dea: Kirby KI Bauer (Difusión en disco)
Inoculo
Inoculo sin
siA incubación
incuba previa
Tiempo
TierRpO dede lectura:
1 18 a 24 hs.
Tº de incubación: 33º a 35º en CO2
"T°dein
Recordar
R630(:.lar que el uso de discos de Bacitracina en forma directa en
las
las placas primarias de cultivo puede dar como resultado un 40% a
50%
50 de falsos negativos.
Prueba de la Bacitracina
Prueba de la optoquina
 Pruebas
Pruebas de
de Identificación
Identificación para
para
enterobacterias
enterobacterias
1.
1. Prueba
Prueba OFOF
2.
2. Prueba
Prueba dede la
la oxidasa
oxidasa oo citocromooxidasa
citocromooxidasa
3.
3. TSI
TSI
4.
4. SIM
SIM (Sulfhídrico-
(Sulfhídrico- Indol-
lndol- Movilidad)
Movilidad)
5.
5. Rojo
Rojo de
de metilo
metilo -- Voges
Voges –Proskauer
-Proskauer
6.
6. ONPG
ONPG (O-nitrofenil-b-galactopiranosido)
(O-nitrofenil-b-galactopiranosido)
7.
7. Citrato
Citrato
8.
8. Ureasa
Ureasa
9.
9. Fenil-alanina-desaminasa
Fenil-alanina-desaminasa
10.Descarboxilasas
10.Descarboxilasas
Oxidasa

NEG POS
 CITOCROMOOXIDASA
CITOCROMOOXIDASA O O
PRUEBA
PRUEBA DE
DE LA
LA OXIDASA
OXIDA
Fundamento: El sistema citocromooxidasa, se halla en
microorganismo aerobios, microaerófilos y anaerobios facultativos.

Procedimiento: Hacer una suspensión del microorganismo con

solución fisiológica (inóculo) en un tubo de vidrio, agregar un disco
(disco comercial de papel impregnado de tetrametil-para-
difenilamina) se agita y antes de los 2 minutos se debe leer.

Interpretación: Un
Un cambio de color del disco a rosado o violeta =
ha cambio de color el microorganismo es oxidasa
prueba (+). Si no hay
~~~~~

negativo.
negativo.

Consideraciones Esta prueba no puede realizarse con colonias

que provengan de medios de cultivo que contenga hidratos de
carbono ni indicadores, por lo que si se la va a realizar se debe
incubar los microorganismos en un placa de AS o bien un TSA
(tripteina-soya-agar)
Prueba OF
 PRUEBA
PRUEBA DE
DE OXIDACIÓN
OXIDAC
FERMENTACIÓN
FERMENTACIO (O-F)
Fundamento: Determinan el metabolismo oxidativo o fermentativo
de un hidrato de carbono o su falta de utilización. Se usa el medio
O-F de Hugh y Leifson que contiene peptonas e hidratos de
carbono en una relación 1:5. Al ser menor la concentración de
peptonas, hay menor producción de productos de oxidación a partir
de los AA que tienden a elevar el pH y pueden neutralizar los ácidos
débiles producidos por los microorganismos no fermentadores.
Procedimiento: Se utilizan 2 tubos con el medio O-F, se hace la
siembra con ansa de punta hasta el fondo de los dos tubos. Uno de
los tubos queda expuesto al aire, y el otro se cubre con vaselina
estéril.
Interpretación:
Microorganismos oxidativo: producen ácido solo en el tubo
abierto, expuesto al O2 atmosférico. Por lo que solamente el tubo
expuesto al aire atmosférico cambia su color original a amarillo.
Microorganismos fermentadores: producen ácido en los 2 tubos.
O sea que los dos tubos viran del verde al amarillo.
Bacterias sacarolíticas: son inertes a este medio que conserva su
pH alcalino después de la incubación, conservando su color
original.
Triple Azúcar Hierro

CITRO . ARIZ .

- -
TSI
TSI (TRIPLE
(TRIPLE AZÚCAR
AZÚCA HIERRO
AGAR)
AGA
Fundamento: Sirve para detectar la
fermentación de hidratos de carbono. El medio
contiene: glucosa al 0.1%, lactosa 1%, sacarosa
al 1% y peptonas; también tiene un indicador
rojo de fenol y sulfato de hierro para evidenciar
la formación de SH2.
Procedimiento: El medio se fracciona en picos
de flauta con una capa basal profunda (2 cm.
por lo menos). Con el ansa en punta se siembra
por punción y estría.
El medio no inoculado es anaranjado-rojizo o
rojo pálido. Incubar 24 hs a 35º C.
TSI (TRIPLE AZÚCAR HIERRO
AGAR)
Interpretación:
Fermentación de la glucosa (alcalino/ácido)
Primero los microorganismos empiezan a fermentar la glucosa, produciendo
ácidos y virando totalmente el medio a color amarillo. Como solamente
utilizan la glucosa, no pueden usar la sacarosa ni la lactosa, cuando la
glucosa que se halla en baja concentración se consume (antes de las 24hs)
los microorganismos comienzan a utilizar la peptonas con producción de
amoníaco que alcaliniza el medio dando un color rojo, pero solamente en el
pico, quedando el fondo ácido.
Fermentación de glucosa, lactosa y sacarosa (ácido/ácido)
Como la lactosa y sacarosa están en una proporción 10 veces mayor que la
glucosa, en un período de 24hs., la lactosa y sacarosa, aún no se
consumen quedando ácido el medio o sea totalmente amarillo.
3) No fermentación de lactosa, sacarosa ni glucosa (alcalino/alcalino). Un
microorganismo incapaz de obtener sus nutrientes de los hidratos de
carbono, lo obtiene de las peptonas. Cuando las peptonas son degradadas
libran amoníaco y alcalinizan el medio. Produciéndose entonces
intensificación del color.
K/A A/A A/A+H2S
 Consideraciones del TSI
Es importante respetar el tiempo de lectura, porque si el caso 1 se
lee antes de las 24hs. se va a interpretar como ac/ac y no lo es. Si
el 2 se lee después de las 24hs, los microorganismo ya se quedan
sin hidratos de carbono, entonces comienzan a utilizar las peptonas
y se alcaliniza el medio.
Con respecto al sulfhídrico pueden presentarse distintas
modalidades:
Pico rojo, fondo amarillo con precipitado negro y formación de gas,
esto se puede dar en Salmonella, se lee: alc/ac (SH2) (gas)
También se puede ver totalmente amarillo y el fondo negro: se lee:
ac/ac (SH2).
Además se puede visualizar en el tubo la producción de gas por
parte del microorganismo, entonces en el medio se observan
burbujas, resquebrajamiento, o si no todo el medio de cultivo
aparece levantado.
SIM
SIM (SULFHÍDRICO – INDOL –
MOVILIDAD)
Fundamento: Es un medio semi-sólido transparente que pone en
evidencia la movilidad, la producción de triptofanasa y de SH2. Contiene:
Triptofano: la enzima triptofanasa, lo desdobla, produce indol, que se pone
de manifiesto con el reactivo de Erlich o Kovac
Citrato de hierro y amonio: los microorganismos productores de SH2
ennegrecen el medio de cultivo
Si los microorganismos son móviles, al ser éste un medio semi-sólido se
produce enturbiamiento del medio de cultivo, caso contrario solo crece en
la punción.
Procedimiento: se inocula el microorganismo por punción con ansa de
punta. Se deja incubar a 35ºC durante 24hs. y luego de este tiempo se
agregan unas gotas del reactivo de Erlich o Kovac dejándolo resbalar por
las paredes del tubo.
Interpretación:
Triptófano (+): observar la interfase, la aparición de un color rojo fucsia
brillante por la formación de un complejo entre el indol y el p-
dimetilaminobenzaldehido.
M (+) / SH2 (-) enturbiamiento del medio
M (+) / SH2 (+), se ennegrece todo el medio
M (-) / SH2 (-) se observa crecimiento solamente en la estría
M (-) / SH2 (+), se observa precipitado negro alrededor de la estría (pero no
ennegreciendo de todo el medio).
SIM
SH2+ Ind+ SH2+ Ind- SH2- Ind+ SH2- Ind-
Mot+ Mot- Mot+ Mot-
Prueba de VP y RM
 ROJO DE METILO – VOGES
PROSKAUER:
Fundamento: El acido pirúvico, un compuesto fundamental formado en la
fermentación de la glucosa, es metabolizado aún mas a través de cierto
numero de vías metabólicas. Una de ellas da como resultado la producción
de acetoína (acetil-metil-carbinol) un producto final de reacción neutra. En
presencia de oxigeno e KOH al 40%, la acetoína es convertida en diacetilo
y el α naftol sirve como catalizador para producir un complejo de color rojo.
Procedimiento: Se usa el mismo caldo de enriquecimiento para las dos
pruebas (2ml), se hace la inoculación del microorganismo, y se lleva a
incubar a 35ºC durante como mínimo 24-72hs..
Luego se lo divide en dos partes, una para la prueba de RM y otra para la
de VP.
Rojo de metilo: se agregan 3 gotas del reactivo de metilo, si en la
superficie del medio aparece un color rojo intenso es RM (+) =
microorganismos que utilizan la glucosa fermentándola hasta llegar a un pH
menor a 4,4.
VP: Se agrega 0.6 ml de alfa-naftol seguidos de 0,2 ml de KOH al 40%. Es
esencial que los reactivos se agreguen en este orden. El tubo se sacude
suavemente y luego se deja quieto de 10 a 15 min. La aparición de color
rojo = prueba (+) (presencia de acetil-metil-carbinol).
ONPG
 ONPG (O-NITROFENIL-β-
GALACTOPIRANÓSIDO)
Fundamento: Lo microorganismos lactosa (+) tienen β-galactosidasa y
permeasa, dos enzimas necesarias para la formación de ácidos a partir de
la lactosa
La permeasa es necesaria para que la molécula de lactosa ingrese en la
célula bacteriana.
Hay algunos microorganismo que son falsos lactosa (-) por carecer de
permeasa, pero sí tienen β-galactosidasa, en realidad son lactosas (+).
Esta prueba se hace con los microorganismo que dan lactosa (-)

Procedimiento: Hacer un inóculo con SF estéril, agregar un disco de papel

comercial, se agita y antes de los 2 minutos se debe leer.
Interpretación: Un color amarillo intenso nos indica que el microorganismo
es productor de β-galactosidasa= prueba (+).
Consideraciones
Se hace un inóculo del microorganismo en solución fisiológica estéril, se
agrega un disco de papel. Se lleva a incubar a 37ºC durante 24hs.
Citrato
C itrato
 CITRATO

Fundamento: Sirve para poner de manifiesto aquellos

microorganismos que utilizan el citrato como única
fuente de carbono, el indicador es azul de bromo timol.

Procedimiento: El color original del medio es verde, y

se encuentra fraccionado en pico de flauta, la siembra
se hace por estría, se incuba 24-72hs a 35ºC.

Interpretación: Si el microorganismo utiliza citrato, se

produce alcalinización del medio de cultivo pasando éste
a color azul intenso, lo cual indica prueba positiva para
el citrato.
 Ureasa
Positivo Negativo
 UREA:

Fundamento: Sirve para poner de manifiesto aquellos

microorganismo que poseen la enzima ureasa.

Procedimiento: El medio fraccionado en pico de flauta

contiene urea y rojo de fenol como indicador, el color
original del medio es amarillo (o sea ácido) La siembra
se realiza con ansa de punta tanto en profundidad como
en la superficie. Se deja incubar 24 hs a 35º C.

Interpretación: Si el microorganismo es productor de

ureasa, desdobla la urea produciendo amoníaco,
consecuentemente produce alcalinidad que se
manifiesta porque el medio toma un color fucsia.
Fenilalanina

(-) (+)
FENIL-ALANINA-DESAMINASA:

Fundamento: Sirve para poner de manifiesto aquellos

microorganismo que poseen la enzima FENIL-
ALANINA-DESAMINASA. El medio se prepara con un
pico de flauta largo, pues la lectura se hace sobre la
superficie del medio de cultivo.

Procedimiento: Se siembra sobre la superficie del

medio solamente, se incuba 24 hs a 35º C, se revela
con cloruro férrico.

Interpretación: El color original es amarillo, si el

microorganismo es productor de la enzima, al agregar
sobre el medio cloruro férrico, ésta se pone de
manifiesto, dando a la superficie un color verde intenso.
Lisina Decarboxilasa
 AMINOÁCIDOS:
AMINOACIDOS:
DESCARBOXILASAS:
DESCARBOXILA
Fundamento: Las descarboxilasas
· ~as
~ ~!::::: descarboxilasas son son enzimas sustrato-
~específicas
es~p~ec~ cas (presentes
presentes oo no no en
en los
los microorganismos)
micro capaces de
reaccionar
reaccionar con con lala porción
porción carboxilo
carbo>.dlo--((COOH) de AA formando
aminas
aminas de de reacción
reacción alcalina. Esta reacción, conocida como
alcalina. Esta
descarboxilación,
descarboxilación, forma forma C02
C02 como producto secundario. Cada
descarboxilasa
descarboxilasa es específica para un aminoácido.
es-espe.s:(fldl
Lisina,
Lisina, arginina
arginina Y.y ornitina
omitina son los aminoácidos evaluados de rutina
en
en la identificación de
la-identiflcaetón de enterobacterias.
El
El medio
medio Moeller
IOloeller es la base (semi-sólida) que se emplea con más
frecuencia.
frea1encia. El El aminoácido se agrega a la base. El color original es
lila.
lila.
Procedimiento: Se inoculan por punción 2 tubos y se sellan con
aceite mineral. Uno de los tubos contiene el AA y el otro no.
Interpretación: Si el aminoácido es descarboxilado, se forman
aminas alcalinas y el medio pasa a violeta más intenso. Si no es
descarboxilado pero fermenta la glucosa, vira al amarillo por la
formación de ácidos
 Lisina Hierro Agar (LIA)

LIA – SH2 - LIA + SH2 - LIA + SH2 -

LIA:
Agar de ensayo para la demostración simultánea de lisina decarboxilasa
(LD) y de la formación de hidrogeno sulfurado (H2S) para la identificación
de enterobacterias.
► La lisina puede ser descarboxilada por microorganismos LD positivas
que la transforman en la amina cadaverina. Esto produce un viraje al
violeta del indicador de pH púrpura de bromocresol,puesto que la
descarboxilación sólo tiene lugar en medio ácido (pH inferior a
6.0). Es necesario que se produzca previamente la acidificación del medio
decultivo, por fermentación de la glucosa. Este medio de cultivo solo
puede utilizarse para la diferenciación de bacterias que fermentan glucosa.
► Los microorganismos LD negativos, pero fermentadores de la glucosa,
producen un viraje al amarillo de la totalidad del medio de cultivo. La
incubación prolongada puede ocasionar alcalinización en la zona de la
superficie del medio de cultivo y en consecuencia, se produce un viraje al
violeta. La formación de H2S produce una coloración negra debido al
sulfuro de hierro producido.
 ión
( mit ndri

A B e D E

... T

2 "C 1;:-.:t .--i; - - "!':p...,n- ·~ -

v.,..~
¡..;¡;;;;:;_-'.....C
il'! '
-1.;;h. .l'
3 • •\¡I•
l\"-;,-
4

0 el ·tosol
6

ADP

¡
ll
ATP

_..-- -+--- ~ -Glucosa-6-fosfato

~
co /' Ruta de las
Ribulosa-5-fosfato
Pentosas.fosfato Glucollsls

·x11u1osa-5-fosfato
/ ¡
Fructosa-6-fosfato
ATP

Bioquímica de las Fermentaciones IRibosa-6-fosrato

\
"t f
Fructosa• 1, -S-bisfosfato

Dra. Yenizey Merit Alvarez Gliceraldehido-3-fosfato

2 NADH
+t
ATP
-4 t
+t
+t
ATP
'+t
Piruvato
 (deshidrogenación)

(hidrogenación)

F
• Es un proceso que libera energía a partir de azucares u otras
moléculas orgánicas (aa, ag, purinas y pirimidas).

• No necesita oxigeno (pero a veces tiene lugar en su presencia).

• No presenta ciclo de Krebs ni cadena transportadora de electrones.

• Utiliza una molécula orgánica como aceptor final de electrones.

• Produce pequeñas cantidades de ATP ( solo se produce en la glucolisis)

• Existe regeneración de NAD+ y NADP+ que pueden ingresar

nuevamente a la glucolisis, transfiriendo los electrones de moléculas
reducidas al ácido pirúvico o sus derivados.
• La principal función es garantizar una provisión constante de NAD+ y
NADP+ para que pueda continuar la glucolisis.
Respiración celular y fermentación
aerobia

anaerobia

NADH,
FADH2
NADH
 E II co111itei1r11j¡d,o, de NA D + de kt célull111 ,e s I imitado y p1..1ede agotarse

La r ,e .spir,o c1ió,111i y 111a feif'me111itació,1r1 so1r1 ¡::i:r rooe.sos

q1..1e r ,e cupero.líl el co111t,e rüdo cemular de N lAIOrt

E 1r1 la RESPIRACIÓN, elll [NADH 2 ] se ox1Ílda usando un aoepto:r de elect1rrone.s EXTERNO 1

En la FERMENTACIÓN, eJI [NADH 2 ] se oxido usando un aoep,to:11" de ,e lectlrrone.s INTERNO

“Cuando el aceptor de electrones es un ácido orgánico (molécula

orgánica) se le llama fermentación, cuando el aceptor es una
sustancia inorgánica (NO2, NO3, SO4, CO3 y fumarato) se llama
respiración anaerobia “
 Diferentes rutas de fermentación

GLUCOSA

Ácido acético
Ácido succínico Ácido pirúvico + Ácido fórmico

Ácido láctico
Acetona

Acetil CoA Ácido fórmico

H2
.______I
Alcohol etílico Ácido acético
. _ _ _ _ I_
CO2
 r si dad de f ,e r1
• Dive.1 1 me1
n ta c1i·01
n,es:: 1 1

- all coh,óHca,,
- h,omoláctilca,
- h,etero 11a ctI1ca,,
,1' ' .

: o-mI1. xt a,,
' 1.d
- acI
- butanod1 i1
óllilc1
a,
- IProp,1
i ónica
1

- ac etonaJb,ut an1ol,..
1 1

1. BACTERIAS HOMOFERMENTATIVAS

2. BACTERIAS HETEROFERMENTATIVAS
Fase Glucosa
preparatoria ATP
1
•
·- · - ·-·- · - · - · -·1
!hexoq uinasa ¡
Extracelular ADP ;?_l~-~<:>~.~i-~~~~j Fosforilación
--------------------
Citosol Glucosa-6-fosfato

l f~sfohexosa
tsomerasa
Fructosa-6-f osfato Reestructuración
ATP ~1tosi~, -·cto~-~
*
ADP ~ uinasa-1 ¡
·- · - · - · -·- · - ·-
Fructosa-1 6-d · sfosfato
Escisión

Gliceraldeh ·do-3-fosfato - 4 - - - - - - - -Dihi d roxiaceto na

traosafosfato fosfato

j isomerasa
copyright 1996 M.W.K' g
 Glicerald ehído-3-f osfato
+
NAO + P;
g icera de ·do..,3-fosfat o
Reducción
deshidroge nasa

1 3-bisfosf oglicerat o
ADP
fosfog ·ce rato
@) ____ qu asa Fosforilación a nivel sustrato

3-fosfogl icerato

l f osfog icerato
mutasa
2-fosfo~licerato
¡ enolase
Fosf oenol piruvato
Fosforilación a nivel sustrato
ADP .- • - • - • - • - • - • 1

~ piruvato ¡•
1
• •
, qu1nasa .
1 Fase de conservación de
energía (2 moléculas de
'-·-·-·-·-·-·J

copyrlgh 1996 M. .King Piruvat o ATP)

Tres destinos del piruvato producido en la glucólisis

o- o- o o-
/ u / /
e e e
1 1 1
e-o e-o C=O
1 1 1
CH 3 e
C A-S
co

1 d d
C=0
1
S-Co e
r Ac 1-CoA
o /
o- C=O
J ~
e eª
1
HO-C-
1
1
CH
-e-o
1
e
 Rutas alimentadoras de la glucólisis

Gran número de glúcidos (aparte de la glucosa)

entran finalmente a la ruta glucolítica:

• polisacáridos: glucógeno y almidón

• disacáridos: maltosa, lactosa, trehalosa,

sacarosa

• monosacáridos: fructosa, manosa,

galactosa
 Lacto
L

Gly ogen · tarch

✓

ucrose P-galac o
-u as H OH P-gluco e
D-Glucose
luc -

D-Marunos1e
Fructo- - - - 1/h
TPlñ u
e 6-pho phate

cto e 1
isomcras

Gl TAREA
ceraldehyde
-ph . h t
 ,
Fermentaci·ones
,ALCOHOt ICA:
- En la f erim,entac ión etanó 11ic1a o al coh6I1ic a: 1el pi r uvato sie 1

r'educ,e para for1mar ,etanol Y' C0;2 :

Gfuoosi
'' a + 2AD,P
- + 2P-
1 _ _..,. 2etanol + C0 2 + 2A.TP
- Es, ,el! proces'o de fer'm,entaci'ón que lileva a cabo 1

Saccharomyces cer:e visiae (¡pooas biacteri'as) ..

' '

,' '

◄ '' '
·21
' '

.• •.

'
2; '
' '

. ·. .·
 Fermentac iones
1

HOM 0LÁCTICA:
1

-SU' iú1nico pr,o ducto fjnal es ell ácido ldctico Su ecuación 9lobal es:
1 1 1•

Glluco,s'a + 2AD P + 2P¡,

1
_ __,. 2 ác ido ldcticei +, 2 ATP

Estias bacterias ¡p roducen el piruvato p1o r c atabol i,s,mo de la :9lucosa

1

sigu~1endo lla rurtia de E1m bden-Meyerh0if

- Proc,esei ptiesent e 1e n 1m ucnas bactie rias' lld cticas: Strieptococcus (grup,0
1 1

enter1oco co,s ), Pediococcus y v1a r1ios, grupios de lactobacil/us.

1

(a) lactobac1 lus _ _...

,. rruc [P
.· .·.

. .

r'\l
. .

- lll

~
 • Su producto, f inal no es e.xclllusivament ie
ácido [lláctioo.

• El p,r,ocreso t iene un rendimiento menor 1

que lla f er mentiad ón ho,moMictic,a.

• El p,1iruvato, de esta ruta p,r ociedre de la vi10.

de los pentosas.

·La r eocdón global es:

Glucosa Ac. Láctico + et anol
ADP + Pi co 2 + ATP

• Estre prooeso lo llevan a c,abo, bacteir ias

del g,r upo l,ác:t ico, per tenec1i1ent 1es 10. lo,s
géner ,os l ,eucono.stoc y lactobaci/lus .

Ruta de la Fosfocetolasa o
de Warburg-Dickens (WD)
 Fermentaci.ón ácido mixta
1

·-1 .
,. OII

2Míl' ~ PI M IAil
• Produce ácido acético , ie tono~, H 2 , 00 2 y
,.~)¡(,_ proporciones djf 1e rentes de áddo, lló cti co
r.
atDM -• _
._ llllt~
· · .........:..
'--,_.. ✓- · -c•o
y1, o propiiéni co (f 6r1mico) siegún las esp,e des.
1 1
....,
COCil

• En esta ruta de 'f ermentac ir6n s e

1 1

¡p roduce ATP además de l1a reox idadón

~-
e =-o
Hidrogenolllrasa ·
fórmi,oa
del NA~)H+IW .
!-- 1

-.-c....

.Y~
,-·
-®
~
-
 • V:ari[a nte de la f erment.ac.ion ácido mixt'a.

• Pres:é nte en algunas enterobacterias como

Kfebsie(la, Serrct_tia y Erwinip.
• En esto ruta se pr9duce acetoína .que se
detecta mediante fa reacción de Voges-
1

Proskciüe•r

Voges-Proskauer
- r

C:ll

r1
l
0,
CII 1
t.,,
1, l I Id
 H OH
Fermentación
Oluc

1 del ácido propiónico

1
• ""'º"· ""º
e-o OH

!oo.,.
.. . aclalo

CH,
,, A"
' "'
Á
',, ✓ eit,
co,
e, - o
. '
ec,o,i
u CoA ac• •·

QQOlt COOH
1 H NAQ 1
CH1
CH1 ':,, ✓
b..o ' 1
CHOH
• Proceso complejo en e l que se genera
'
ClOOM 'COOtl+
,..,.,. o
O•• 1c1 to acetato , CO 2 y ácido propiónico como
yi◄>
y►•, ~HtO productos finales.
Q.-o
1 COOl!I QO()tt

-
IC
Plloc,I 1~
1
CH, ' • Ruta fermentat iva la presentan las
'
r·•· 'r
ucc
eo0fl
~
COOH
bacterias del tipo Propinobacterium y
, - ·· · o
fOOM otras anaerobias estri.ctas presentes en
i~·
r"º
el rumen de herbf voros
IC
IICCll'llU;:
fHt
fHt
COOM
A~ldo ;f~c:e
 Fer mentac ión de
acet ona-·butanol
1

• T i¡po, de f ,ermentaci6n llevado,

,a c,abo por bact,e rias
,anaer,obi,as ,e strictos del'
g·éner,o Clostrídium.

• Se producen compuestos
origdnic,os disolventes de gran
import,ancia ~ndustrial

Ruta metabólica en Clostridl1u1

m
acetobu ylicum AT CC824T
1
 Ferm entaci Ón de amin oáci·dos:
1 1 1

reacci.ón de Stickland
Reacdón de Stkkllond ll1ev1ada 10
oabo por algunos bacterias de~
géner,o Clostridium
~--~ ---,,,.-""""='"""-1
2 Acet1il-P 2 Acetato- + 2 H3 1

NADH -1 --~- - - 2 ADP

1 2 ATP 1

INAD·I~ ~
~-~ NADH .

CoA 1 iGlicitm 1

· ce.1tl-<CoA 1 Am inoácidos que participan en la reacción de St ickkmd

P.
1
Aminoácidos oxidados Am inoácidos reducidos

Alan ina Glicina

Leucino Prolina
Isolellcina H idroxiprolina
Valina Tript óf ono
H istid ina Arginina
 R uta de Entner-Doudoroff
1
- Presente en ciertas Gram-negativas aerobias.
g I uco.se-6-p hosp hal e - Muy rara en hongos
- Relativamente infrecuente como vía de
1

fermentación

l _,,.o
fi~pho "¡pho, lu o ni1. add

2-keto-3-deoxy-6-phosphogluicon ic add (ll<DPG)

pyruvlc ad 'I - - - -
1~41~ ¡a, gl rceraldehyde-3-phospha te
1·

J"'.;;;~;;;;;,'11 [Emlulc:1-M • _rt1of

acelaldeh yde + OO.: ,1ull11wayl1

l . . . __. .
1
p ru\kadcl
etha, ol
nr: .taJdeh 1de: + OO.
~ r.::==::.i·

ethano
EFECTO PASTEUR:
Inhibición de la fermentación por la respiración. La aireación
induce a un aumento en la cantidad de biomasa, a una disminución
de la producción de alcohol y de consumo de azúcar.

Cond. Anaeróbicas: 2ATP/Glucosa

Cond. Aeróbicas: 36 a 38 ATP/Glucosa

EFECTO CRABTREE:
Cuando la concentración de azúcar es elevada, S. cerevisiae sólo
metaboliza los azúcares por vía fermentativa; incluso en presencia de
oxígeno la respiración es imposible.

22
 Área Académica: BIOLOGÍA AVANZADA

Tema: REINO PLANTAE

Profesor(a)
MC. MARÍA DEL CARMEN MERCEDES CARRILLO RODRÍGUEZ

Periodo: Enero – Junio 2014

11 Unlvenldad Aut6noma del Esfado de Hidalgo

Abstract

In the following slides the theme "Kingdom Plantae" will be addressed. The main objective is to give
the students the necessary skills to have the ability to identify any organism belonging to the Kingdom
Plantae.

Keywords:
Autotrophs -. Organisms that produce their own food
Chlorophyll -. Characteristic pigment plant, it is located in the chloroplasts
Cotyledon -. Embryonic first leaves on a flowering plant
Anemofilia -. Kind of fertilization of a gymnosperm
11 Unlvenldad Aut6noma del Esfado de Hidalgo

Abstract

En las diapositivas siguientes se abordará el tema "Reino de las Plantas". El objetivo principal es dar
a los estudiantes las habilidades necesarias para tener la capacidad de identificar cualquier
organismo perteneciente al reino de las plantas.

Keywords:
Los autótrofos -. Los organismos que producen su propio alimento
Clorofila -. Pigmento planta característica, que se encuentra en los cloroplastos
Cotiledón -. Primeras hojas embrionarias en una planta con flores
Anemofilia -. Tipo de la fertilización de una gimnosperma
3 !Xl&O!?!J@ !P!1iiJ!?!JUiiJ&
 CARACTERÍSTICAS GENERALES
DEL REINO PLANTAE

Organismos Eucariotas, Pluricelulares

Nutrición Autótrofos
Nivel de organización: tejido, órganos,
aparatos y sistemas.
Reproducción sexual, ciclos alternantes
una generación haploide y otra diploide
Hábitat.- terrestres y acuáticas
 CLASIFICACIÓN

A) Plantas sencillas acuáticas no vasculares.

Algas verdes, CLOROFITAS
Algas pardas, FEOFITAS
Algas rojas, RODOFITAS

B) Plantas terrestres no vasculares

Briofitas
Hepáticas
Musgos
OTRA FORMA DE CLASIFICAR

CLOROFITAS
FEOFITAS
RODOFITAS

BRIOFITAS
MUSGOS
HEPÁTICAS

TRAQUEOFITAS
HELECHOS
GIMNOSPERMAS
ANGIOSPESMAS
 ~a
3 Llamadas * Algas Verdes * (7000)

Hábitat.- acuáticas , marinas o de agua dulce.

Nivel de organización celular a tejidos simples
Células eucariotas
Nutrición fotosintéticos
Poseen clorofila a y b
Otros pigmentos xantofilas y carotenoides
Reproducción sexual y asexual
 EJEMPLOS

3
Clamidomonas .- unicelulares
Spirogyra.-filamentosa
Ulva
Codium
3 Son importantes desde el punto de vista ecológico
porque junto con las crisófitas representan la
base de las pirámides alimenticias en el medio
acuático.

En el aspecto evolutivo , porque a partir de ellas

se derivan las plantas superiores.

Y económicamente se empiezan a utilizar como

alimento para el hombre
 IPEOPrTAS
3
Llamadas * Pardo doradas *(1500)
Algas macroscópicas
Llegan a medir hasta 100 metros de
largo
Hábitat.-marinas de zonas costeras
Pigmentos.- clorofilas a y c
Otros pigmentos ficoxantina le da color
dorada, café, y hasta negra.
Estructura.- rizoides, cauloides, y filoides
3

Filoide
Cauloide
Rizoide
 ROOOFrrAS
3 Llamadas * Algas Rojas * (4000)

Poseen clorofila a y d así como ficoeritrina

que le da el color rojo a las algas.

Son de vida marina de aguas frías y profundas.

De cuerpo laminar o filamentoso

Algunas producen agar sustancia con la que

fabrican dulces y medios de cultivo
 IMÁGENES DE
3 RODOFITAS
 BRIOFITAS
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Terrestres, viven en lugares húmedos y
cercanos al agua
Nivel de organización hasta tejidos
Reproducción. ciclos alternantes, una
generación diploide ( por gametos ) y una
haploide ( x esporas )
Presentan desarrollo embrionario
25000 – 15000 viven en humedad
CLASIFICACIÓN
MUSGOS
HEPÁTICAS
 . •'
•
~-, ·· REPA
'~ z '4 .

3
Su estructura esta representada
por un cuerpo filamentoso que
crece sobre la tierra y de la cual
sale un eje vertical, la planta se
fija a la tierra por medio de
rizoides
 MUSGOS
3
 HEPATICAS
3
Cápsuh

\
·-
Diploido
.' . . .. . .

.:~i i~7 .
•• a O • ·• O

\ Espermatozoides
,~---¡ (nJ
Haploido

J
Gametófito / (~ Germinación
(n/ ~ 1de la espora
..........._R ~ _ , t'}/4 <ni
~ ñ;;:oides Filamentos
~ (n/
 TRAQUEOFITAS

Plantas superiores, la mayoría terrestres

aunque hay especies acuáticas

Nivel de organización de órganos hasta

aparatos y sistemas

Ciclo de vida alternante domina el esporofito y

el gametofito es reducido

Existieron 4 grupos del cual sólo sobreviven

las pterópsidas.
3
TRAQUEOFITAS

HELECHOS GIMNOSPERMAS ANGIOSPERMAS

 HELECHOS
Pertenecen al grupo del Filo Pterofitas, incluye
aprox. 12000 especies

Hábitat terrestre

Ciclo de vida alternante asexual esporofita, sexual

gametofita.

Raíz fibrosa

Tallo subterráneo

Frondas, envés con soros

 CICLO DE UN }ffiL
HELECHO
RCJ-{e>
3
Esporas
(haploides)_••. ···, ..!l:i ;\)
.- t,j ~ --►

/~
Esporangio
Prótalo
(Gametofito haploide)

~,
Soros
Nuevo esporofito
o planta
Brote
joven
Fronde
3
SOROS
3 HELECHO
}ffiL-SC}te) MACHO
'MilC}te)
 GIMNOSPERMAS
GI MNOSPERMAS
También llamadas Pinófitas o Coniferas

Del griego gimnos = desnudo

sperma = semilla

Significa “ Semilla desnuda “

Se conocen alrededor de 700 especies

Presentan óvulos y semillas desnudos

Los conos masculinos producen polen

Los conos femeninos o piñas producen óvulos

Los conos masculinos se encuentran en la parte
baja

Los conos femeninos o piñas se encuentran en

la parte alta de los pinos

El polen contiene 2 bolsitas llenas de aire que

les permite flotar y ser arrastrados por las
corrientes

Fecundación llamada anemófilia

(anemos = viento, filo = amor inclinación )

Hábitat terrestre abundantes en zonas muy

altas de clima frío.
 CICLO
CICLO DE
DE GIMNOSPERMA
GIMNOSPERMA
3 Cono masculino

Sacos
polinfoos
Flores o
m.aseulin.as o
o
o o
femeninas o o O 0
o o o o
00
0 °Pole n
o
o
, " --,. .-
Oosfera Eso.a'!1a de :<..... . . ..-·•,Grano de ,teridio

~
la bractea ·.\ ~ / polen
. - ' .. ,,
Fecundac,ón
Cono femenino
t o piña
vo o cigoto
Germinación . Granos
Cigoto de polen ./
Ala - Escama f~c.undado ~ , Escama

~ - ~ --- Tubo polínico

Nueva planta Semilla O ' Óvulo
 PIÑA DE PINO
3
 Hojas
Hojas yy Fruto
Fruto de
de Ciprés
Ciprés común
común
3

Rama con hojas escuamiformes Fruto

 TRONCO
TRONCO DE
DE GIMNOSPERMA
GIMNOSPERMA
3
Médula
Xi lema

Floema

, - - - Cámbium
suberoso
3

Gynco

Alerce
 IMPORTANCIA

Proporcionan oxígeno

Se obtiene madera y derivados: papel,

resinas, alcohol de madera etc.

Sirven de hábitat para otras especies

Conservan el suelo por su gran extensión

 ANGIOSPERMAS
ANGIOSPERMAS
3 También llamada Magnolio fiítas del filo
antofitas.

Del latín angi = encerrada

Y el griego sperma = semilla

Es decir semilla encerrada

Se distinguen por presentar óvulos y

semillas cubiertas y flores.
Existen alrededor de 200 000 a
300 000 especies de árboles, arbustos,
enredaderas, hierbas, cactus, cañas y
otras

Hábitat. Terrestres y Acuáticas

Actualmente es el grupo dominante

 CICLO
CICLO DE ANGIOSPERMA
DE ANGIOSPERMA
3
Flor

Estambre
(/A, ,_ Grano de
l ~! polen
·ª •
0
Polinización o o :
•
Pistilo Tubo
polínico

Ovar io

Óvulo

Embrión

Plántula
3

MONOCOTILEDÓNEAS

DICOTILEDÓNEAS
3
CARACTERÍSTICA MONOCOTILE DICOTILEDÓNEAS
DÓNEAS

RAÍZ FIBROSA TÍPICA

TALLO Y VASOS DESORDEN CIRCULO

 HOJAS NERVADURA PARALELAS NERVADURA EJE
CENTRAL

3
FLORES TRÍMERAS PENTÁMERAS
.JI l~:it

\
SEMILLAS 1 COTILEDÓN 2 COTILEDONES
3
REFERENCIAS
GAMA Fuertes Ma de los Ángeles, Biología II Nivel
Bachillerato Enfoque Constructivista
Ed. Prentice Hall. 2005. ISBN 970-17-0051-1..270 pp.

ALONSO Erendira. Biolgía Un Enfoque Integrador. 2ª. ed.

2003. Ed Mc Graw Hill. ISBN-970-10-4125-9, 279 pp

VILLE, Claude A. et. Al. Biologìa Ed. Interamericana

Mexico D:F:
 Í&\ niversi a
Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
A~.i:.: de Alcalá

HONGOS FILAMENTOSOS Y LEVADURAS

Los hongos constituyen un conjunto de seres vivos que incluye desde

organismos unicelulares a organismos pluricelulares macroscópicos.
Están formados por células eucariotas con pared rígida, son inmóviles,
tienen nutrición heterótrofa por absorción y reproducción asexual y
sexual.

Los hongos unicelulares son microscópicos, poseen forma redondeada

y se denominan levaduras. La mayoría de los hongos sin embargo, son
pluricelulares, están formados por células alargadas que se disponen
linealmente y forman largos filamentos denominados hifas. Las hifas al
crecer forman micelios visibles macroscópicamente como en los
denominados mohos u hongos filamentosos, en otros las hifas se
disponen con un cierto grado de organización, pero sin llegar a formar
una verdadera estructura tisular, y pueden alcanzar un tamaño
macroscópico constituyendo las setas, algunas de las cuales son bien
conocidas por ser comestibles o venenosas.
 Í&\ niversi a
Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
A~.i:.: de Alcalá

Los hongos filamentosos se dividen en inferiores y superiores según las

características de sus hifas.

Los hongos inferiores poseen hifas anchas sin o con escasas tabicaciones, por lo
que tiene muchos núcleos para una misma unidad citoplasmática.

Los superiores están formados por hifas compartimentadas por septos

transversales que separan las células, pero que poseen poros que permiten una
comunicación del citoplasma

Los hongos tiene reproducción asexual, en las levaduras la división es por

gemación y en los filamentosos las células hijas se forman en el extremo apical de
los filamentos donde se diferencian los esporóforos que forman las esporas.

Pero como son células eucariotas, muchas levaduras y hongos filamentosos se

reproducen sexualmente, la observación en el laboratorio de este tipo de
reproducción es difícil, tenemos que recordar que trabajamos con cultivos puros,
por lo que este modo de reproducción se ha ido descubriendo lenta y
progresivamente en muchos hongos, aquellos de los que se conoce la
reproducción sexual se denominan hongos perfectos y de los que se desconoce se
denominan imperfectos.
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Hongos Inferiores

Zygomycetes
Organización micelial sin tabiques o septos
Esporas asexuales dentro de esporangios
La reproducción sexual da lugar a zigosporas
esporangios zigosporas
Hongos superiores

Ascomycetes
Poseen micelio septado o son levaduras
Esporas asexuales externas o conidios
La reproducción sexual da lugar a ascosporas
que se forman en el interior de unas estructuras
llamadas ascas

Basidiomicetos Ascosporas
Poseen micelio septado complejo o son levaduras
Esporas asexuadas externas o conidios
La reproducción sexual da lugar a basidioesporas,
que se forman en estructuras especializadas llamadas
basidios

Deuteromycetes
Poseen micelio septado o son levaduras
Esporas asexuadas externas o conidios
Reproducción sexual desconocida
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Zigomicetos: Las hifas no presentan septos. Producen esporas

sexuales (zigosporas) o asexuales (conidioesporas).

Mucor

Rhizopus
 vers1 a
Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
::::.@
.~ -~~: de Alcala
:! '

Ascomicetos: Las hifas presentan septos. Producen esporas sexuales (ascosporas) en el

interior de una bolsa denominada asca o asexuales (conidioesporas).

Claviceps purpurea afecta a cereales, produce

alcaloides tóxicos que contienen ácido lisérgico
cuya ingestión causa alucinaciones.

Es el causante del ergotismo o Fuego de San Antonio, frecuente en la edad

media. Síntomas: convulsiones, escalofríos, alucinaciones, parálisis en las
extremidades y aborto en embarazadas.
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Ascomicetos: Neurospora crassa

vegetativo

El nombre deriva de las características

ascosporas acanaladas.
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Basidiomicetos: Las esporas de origen sexual, se producen en los basidios, a los

que se unen por medio de unos esterigmas.
Dentro de este grupo se encuentran los hongos, algunos son cultivados para
obtener setas comestibles (champiñones, Pleurotus ostreatus, etc.), o bien son
recolectados en el campo (con la posible confusión e ingestión de setas
venenosas, que todos los años ocasionan algún accidente).

Pleurotus Champiñon

Boletus edulis Amanita phalloides

 Í&\ niversi a
Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
A~.i:.: de Alcalá

Deuteromicetos: Carecen de fase sexual conocida. Las hifas presentan septos. Son
ascomicetos o basidiomicetos sin reproducción sexual.
Alternaria sp.

Se caracteriza por sus esporas de color

oscuro. Es uno de los hongos principales en
la corrupción de los tomates en el campo.
Dada la tonalidad negra que adquieren se
conoce como podredumbre negra
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Botrytis cinerea

Se le conoce
como moho gris,
afecta a frutos y
hortalizas
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Aspergillus sp.
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Cladosporium
u

conidium

conid iophore
,M Universidad Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
.... /!:.: e ca

Fusarium
~ Universidad
.. .. de Aleala' Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
E:. .:::.:

Geotrichum

El crecimiento
en placas es
parecido a una
levadura. Se le
conoce como
moho lácteo por
su presencia en productos lácteos
r..Í!\,., Universidad
Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología
::::.~.:":!.: de Alcalá

Helminthosporium

Hoja de maiz
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Penicillium
 Dra. M. L. Ortiz. Dep. Microbiología y Parasitología

Levaduras: Son hongos de forma unicelular. La reproducción vegetativa

normal es por gemación
Sacharomyces cerevisiae
Factores que afectan
el crecimiento
bacteriano
~@~ «~@~ @@ITi)@lf~~D@ITi)
~@(Q](Y]@ITi)~@» f~~
 Efecto de la Temperatura
• Temperatura mínima de crecimiento
• Temperatura óptima de crecimiento
• Temperatura máxima de crecimiento
Crecimiento

4 30°C 50°C
temperatura
 Sicrófilos
• Requieren bajas temperaturas
• 15 – 20 ºC
• La mínima puede ser muy baja
• Bacterias en el fondo del mar y en los
polos
 Mesófilos
• Rango de temperaturas: 25 – 40 ºC
• Temperatura óptima: 37 ºC ± 1 ºC
• Agentes que afectan al hombre y los
animales
 Termófilos
• Toleran altas temperaturas
• Temperatura óptima: 55 ºC
• Temperatura máxima: 80 ºC o mas.
Crecimiento

Acido Neutro Basico

pH
 Condiciones de pH
• pH : Potencial Hidrógeno. Va desde 0 a
14.
• pH < 6,5 ácido
• pH > 7,5 básico o alcalino
• pH 6,5 – 7,5 neutro Mas adecuado para
crecimiento bacteriano
• Bacterias que crecen hasta pH 4
Acidófilas (Por ejemplo: Lactobacillus)
• Vibrio cholerae : medio alcalino
 Presión Osmótica
Los solutos (sales y azúcares) disueltos se
desplazan a zonas de menor concentración.
El agua se desplaza a zonas de mayor
concentración de solutos
Una presión osmótica alta causa pérdida de
agua y plasmólisis de la célula
Halófilas: bacterias que toleran altas
concentraciones salinas
Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 %
de sales
 Condiciones atmósféricas
• Potencial de óxido-reducción o Redox
(Eh)
• Respiración bacteriana : reacciones de
óxido-reducción, en cadena
• El aceptor final de electrones o
hidrogeniones es variable
 Aerobios
• Requieren oxígeno, aceptor final de
hidrógeno
• Formación de H2O y CO2
• Producción de enzima Catalasa :
desdoblamiento del Peróxido de
hidrógeno (H2O2) en H2O y oxígeno
• Prueba de Catalasa para diferenciar
microroganismos (Staphylococcus de
Streptococcus)
 Anaerobios
• Viven en ausencia de oxígeno
atmosférico
• Aceptor final de hidrógeno : compuesto
inorgánico (NO3 o SO4)
• Fermentación: la fuente de carbono
provee energía, el donador de hidrógeno
y el aceptor final (un compuesto orgánico
como ácidos o alcoholes)
• Muy frecuente en microorganismos orales
 Anaerobios
• Anaerobios obligados: no utilizan O2
• Anaerobios moderados: toleran de un 2 a
un 8 % de O2
• Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un
tiempo en presencia de O2
• Anaerobios facultativos: aceptan
indistintintamente una situación u otra
• EJM. Porfiromona gingivalis
 Microaerófilos
 Requieren bajas concentraciones de O2 para crecer
 Utilizan el O2 como fuente de energía pero a
concentraciones < 15 %
 Susceptibles a radicales superóxido
 Enzima Superóxido Dismutasa (SOD) : transforma
radicales superóxido en H2O2
 Capnofilas: desarrollan mejor con concentraciones de
CO2 elevadas
 La cavidad oral presenta todas estas variantes
 Las especies capnófilas aumentan en personas con
alteraciones periodontales
 Control de Microorganismos
• Muchos factores estimulantes del
desarrollo bacteriano se usan para
preservar alimentos:
– Baja temperatura
– Salmueras
– Dulces
– Salados
– Ahumados
 Metabolismo Bacteriano
• Conjunto de reacciones o
transformaciones quimicas que tienen
lugar en un microorganismo para
mantener su viabilidad
• Procesos o reacciones Catabólicas
– Degradan nutrientes
– Liberan energía -Pi CGKffl • d,u..:h-o
¡.6tlutl'bt d• r.1moan1.ariaft
•iiNloS-. C0. ;1,¡¡•pt~H i:tili
~ D n l l iS,\

• Procesos o reacciones Anabólicas

– Tienden a unir moléculas
– Reacciones de síntesis que consumen
energía
 BACTERIAS
Dra. Yenizey M. Alvarez

Microbiología General 11-P

 Bacterias
Procariotas
Archaea

Microorganismos
Protozoos
Eucariotas Hongos
Algas microscópicas

Virus (Agente acelulares)

 Características
Bacteria Archaea
Tipo celular procariota procariota
Reproducción asexual asexual
Pared celular Contiene peptidoglucano No contiene
peptidoglucano
1 1
Lípidos de membrana Compuesto por cadenas Compuesto por cadenas
rectas de carbono unidas de carbono ramificadas
al glicerol por enlaces unidas al glicerol por
éster. cualquier enlace.
Primer aminoácido en la Formilmetionina Metionina
síntesis proteica
Histonas No Si
 Archaea o arqueobacterias
• Morfología (bacilos, cocos y hélices)

• Propiedades fisiológicas
1. Aerobios

2. Anaerobios facultativos

3. Anaerobios estrictos

• Habitan en ambientes extremos

1. Metanógenos (Methanobacterium)
2. Halófilos extremos (Halobacterium y Halococcus)
3. Termófilos extremos o (Thermoplasma acidhophilus)
 Bacteria o eubacteria
Características:
Estructura de la célula procariota
• Célula procariota
• Ribosoma 70S
• Pared bacteriana de peptidoglucano
• Ausencia de esteroles en la membrana
• Ausencia de mitocondrias, RE y AG.
• Órganos de movilidad simples
• Cromosoma único y plásmidos
 Morfología
Definición:
Es la disciplina que se ocupa del estudio de la forma y la estructura externa
de un organismo o sistema.

1 '
b
*
Tamaño:
 0.2 a 5 µm de diámetro
 2 a 8 µm de largo
Formas:
 cocos (del griego kókkos, grano)
1. Diplococo
2. Tetracoco
3. Estreptococo
4. Estafilococo
 bacilos (del latín baculus, varilla)
1. cocobacilos
2. bacilo
3. diplobacilo
4. estreptobacilo

 Formas helicoidales:
1. vibrio: ligeramente curvados y en forma de
coma, judía o cacahuete.
2. espirilo: en forma helicoidal rígida o en
forma de tirabuzón.
3. Espiroqueta: en forma de tirabuzón
(helicoidal flexible).
 Estructura celular
Estructura de la célula procarlota

Estructuras permanentes
1• Pared celular 1
• Membrana citoplasmática
• Citoplasma
• Ribosomas
• ADN

Estructuras variables
• Flagelos
• Fimbrias y pili
• Exopolisacáridos (cápsula y glicocalix)
• Endosporas
Membrana plasmática:
La membrana delimita el territorio de la célula y controla el
contenido químico de la célula.

Modelo del mosaico fluido

50%

40%
 Fosfolípidos: son lípidos anfipáticos compuestos por una molécula
de glicerol, a la que se unen dos ácidos grasos (saturado e
insaturado) y un grupo fosfato unido a un grupo orgánico.

Colina, serina o
etanolamina
-r-.

glicerol t.'
•1 1
pola!____ _
1
., ti,
1
CH• .
ño_0_01ar
Ácido graso saturado

/
lii~
l
Ácido graso insaturado

Bicapa lipídica en la
/
(';H_.
Hz;;
/
1.:1.. representación de
una membrana
·1
/
ll l{;
,~,! /
,
IIC
/
H, ~
n-
~ HC:..._ ~H
/ l
CII
...
l
/ H. C
. ' ;,,11~
li, /
/ ..e
ti$
/ b

Fosfatidilcolina
La membrana plasmática realiza las siguientes funciones:
1) Aísla el citoplasma del medio externo (permeabilidad selectiva)
2) Regula el flujo de materiales entre el citoplasma y su medio
(adquisición de nutrientes y eliminación de desechos).
 Pasivos (difusión simple, difusión facilitada y osmosis)
 Activo ( transporte activo y traslocación)
3) Permite la interacción con otras células.

Gases
Pe rmeable

Moléculas Amino ácidos, ATP,

polares glucosa 6 fosfato,
con carga proteínas, ácidos nucléicos
Im p erm eable
Citoplasma:
 Componente líquido que se encuentra dentro de la membrana
plasmática.

 Compuesto principalmente por 80% agua y moléculas orgánicas e

inorgánicas, material genético (plásmidos) y ribosomas.

Ribosomas:
Contienen todos los componentes
necesarios para la síntesis proteica.

Ribosoma 70S
(2 subunidades 30S y 50S)

Compuestos por RNA y proteínas

Flagelos:
 Son apéndices filamentosos relativamente largos que propulsan a
las bacterias.
 Compuestos por tres elementos fundamentales: un filamento
(flagelina), el gancho y el cuerpo basal.
 Clasificación:
1. atricas 2. monotricas 3. anfitricas
4. lofotricas 5. peritricas

Filamento

Gram - Gancho
Gram +
B

Cuerpo Basal e
D
Fimbrias y pili:

 Apéndices pilosos más cortos, rectos y delgados que los flagelos.

 Cumplen funciones de fijación y transferencia de ADN.
 Compuestas por “pilina”
 Las fimbrias nacen en los polos de las células bacterianas
 El pili es mas largo que las fimbrias y solo se encuentran uno o
dos por célula.
 Participa en la transferencia intracelular de ADN (conjugación)
Conjugación
Exopolisacáridos:

 Cubierta de naturaleza polisacárida que rodea una bacteria.

 Sintetizados en la membrana citoplasmática, y atraviesan la
pared celular para localizarse en la parte externa.
 Clasificación:
1.Cápsula (Rigidez)
• Protege de la fagocitosis
• Factor de virulencia
• Tinción negativa
1.Glucocáliz (Flexibles)
• Participa en la formación de biopeliculas
• Protege de fagocitosis o de la acción de antimicrobianos
Endosporas o células en reposo:
 Son cuerpos deshidratados con una gruesa pared o capas
adicionales.

 Producidas bajo condiciones adversas para la célula (carencia de

nutrientes o falta de agua)

 Se forman en el interior de la membrana celular y son liberadas al

medio ambiente

 Pueden sobrevivir a temperaturas extremas, falta de agua y

exposición a muchos compuestos tóxicos y radiaciones.
 • Clostridium sp.
Pc1rc<I ocll1l ar ~ ctnbrnua
[)I asm :il lea
• Bacillus sp.
(a)

Tabiq ue

i bi~rt;{ de J:t cn<.losporn - -~

-- ~ ::==='-"_¿y-=-:=
<'.~....
..
_~ - .:'
-

/
E
®
l!ndospora libre

esporulación o esporogénesis

(b}
Pared celular:

 Es una estructura compleja y semirrígida responsable de la

configuración de la célula.
 Rodea a la membrana plasmática protegiendo el interior de la
célula de cambios adversos en el medio externo.
 Contribuye al mantenimiento de la forma de la bacteria
 Actúa como sitio de anclaje para los flagelos
 Compuesta por peptidoglucano “mureína”
 PEPTIDOGLUCANO:
 Formado por cadenas lineales de disacárido (NAG + NAM) que
constituyen un esqueleto de hidratos de carbono unido por
polipéptidos mediante un puente transversal peptídico.
NAM NAG
N- Acetil N-Aceti/
muramico g/ucosamina

peptidoglycan CH 20H
monome,
o
NAM NAG

o peptidogtycan
een I monome,
cross-links betw H3C - cH
tetrapeptide cñains I
e ==o
1
l•Alanlna
I
D-Acido glutám ico
I élito en G(,)
eso . d1aminopim
88 3
00 3
{ Addo. . men G(•)
1 Uisma
0-Alanlna
s-links
pentag/ycine cros
 Diferencia entre Gram positivas y negativas
Gram (+) Gram (-)
• Varias capas de peptidoglucano • Una sola capa de peptidoglucano
localizada en el periplasma
• Ácidos teicoicos
 Poliglicerol fosfato • Tiene una membrana lipídica externa
(ácido lipoteicoico)  Lipoproteínas
 Poliribitol fosfato  Lipopolisacáridos (LPS)
(ácido teicoico de la pared)  Fosfolípidos
Proteínas (porina)
• Retiene el colorante cristal
violeta (mo de azul-morado) • No se tiñe con cristal violeta, pero si
con safranina (mo de rosa-rojo)

Polisacárido O
Lípído A } LPS

Porina
Ácido teicoico

Outer membrane
Peptidoglycan Peptidoglycan
Ácido lipoteicoico Periplasmic space
Plasma membrane Plasma membrane
 Gram negativa Gram positiva

___,.....,....Mesosoma
h-1embrana e}:~rna __,,.J
·-. . . ,~~ Cito p I asma
/ '-,
·. Cuerpo de
inclusión

( ---

., j

~ Pili
-~ Flagelos
-...._ :. Flagelos
1

r,¡;._ Pa.-ed celula.- ~

Tinción de bacterias Gram positivas y negativas
G ram Positive Gram Negative

Fixation

l
Crystal violet

l
lodine treatment

l
Decolorízation

l
Cou nter stai n
safranin
Jerarquía taxonómica
BACTERIA
Dominio )

No asignado
Reino )

Proteobacterias
Filo )
Gamma-
proteobacterias
Clase )

Enterobacteriales
Orden )

Familia )
Enterobacteriaceae

Escherichia
Género )

E. coli
Especie )
 Clasificación
Manual Bergey: Bacteriología Sistemática
(Bergey's Manual of Systematic Bacteriology)

BACTERIA
Halófilos
Bacterias Gram (+) extremos
ARCHAEA
Proteobacterias
Cianobacterias Metanógenos

Espiroquetas Thermotoga Hipertermófilos

Bacteroides

Antepasado
universal
 PROTEOBACTERIAS
• Sus miembros son bacterias Gram negativas
• Cinco clases (letras griegas):
1. Alfaproteobacterias: Crecen con concentraciones muy bajas de
nutrientes y son bacterias importantes en la agricultura
Rickettsiales Rickettsiaceae Rickettsia R . typhi

l
l

l
1
2.- Betaproteobacterias: Utilizan como nutrientes los compuestos
obtenidos de la descomposición anaerobia de materia orgánica (gas
hidrógeno, metano y amoníaco).
Neisseriales Neisseriaceae Neisseria N. gonorrheae

l
l

l
1
 3.- Gammaproteobacterias:

t
t
Pseudomonadales Pseudomonadaceae

i
Pseudomonas P.aeruginosa
Vibrionales Vibrionaceae Vibrio V. cholerae

1
1
1

i
Enterobacteriales Enterobacteriaceae
Escherichia t t E. coli
Salmonella S. typhimurium
i
Klebsiella K. pneumoniae
4.-Deltaproteobacterias: Microorganismos que son predadores de
otras bacterias y contribuyen en el ciclo del azufre.
5.- Epsilonproteobacterias:
Campylobacterales Campilobacteraceae
Campylobacter C. jejuni
Helicobacteraceae
Helicobacter H. pylori
 BACTERIAS GRAM POSITIVAS

Contenido bajo de G + C Contenido alto de G + C

1,
Firmicutes Actinobacteria
1 1
,...
Clostridia

,- Mollicutes

,...
Bacilli
 Bacillales Bacillaceae Bacillus B. cereus

t
Bacilli
Listeriaceae Listeria L. monocytogens
Brochothrix B. thermosphacta

iV
l

➔
Staphylococcaceae Staphylococcus S. aureus
i

➔
Lactobacillales Lactobacillaceae Lactobacillus L. casei
V
i i

Pediococcus P. parvolus

Enterococcaceae Enterococcus E. faecium

¡i i

Streptococcaceae Lactococcus L. lactis

i ~
t

Streptococcus S. thermophilus
Jerarquía taxonómica
BACTERIA
Dominio )

No asignado
Reino )

Proteobacterias
Filo )
Gamma-
proteobacterias
Clase )

Enterobacteriales
Orden )

Familia )
Enterobacteriaceae

Escherichia
Género )

E. coli
Especie )
 Bacterias de interés Biotecnológico
• Bacterias fermentadoras
1.- Fermentación lactica (obtención de derivados lácteos y cárnicos)
 Streptococcus thermophillus
 Streptococcus lactis
 Lactobacillus bulgaricus
 Lactobacillus acidophilus
 Lactococcus lactis
 Enterococcus faecium
 Pediococcus parvolus
 Leuconostoc cremoris

2.- Fermentación acética (vinagre)

 Acetobacter aceti

3.- Fermentación alcohólica

 Lactobacillus sakei
 Leuconostoc mesenteroides
•Actinomicetos:
Actúan en la descomposición de residuos animales y vegetales
liberando amoníaco y ácidos orgánicos.
Ayuda en la nutrición vegetal, ya que tienen una gran movilidad y
capacidad quelante para ceder a las raíces el nutriente que se
requiera.
 Secreción de sustancias antibióticas (estreptomicina y tetraciclina)
 Streptomyces griseus
Biofertilización (aumento del número de microorganismos en un
suelo para acelerar los procesos microbianos y aumentar la cantidad
de nutrientes asimilables por la planta)

• Biorremediación: Es cualquier proceso que utilice microorganismos o

sus enzimas para retornar un medio ambiente alterado por
contaminantes a su condición natural.
Pseudomonas, Flavobacterium y Arthrobacter
• Producción de antibióticos

Bacillus brevis
Bacillus cereus
Bacillus circulans
Bacillus laterosporus
Bacillus licheniformis
Bacillus polymyxa
Bacillus pumilus
Bacillus subtilis

• Producción de etanol, acetona y biobutanol.

 Clostridium thermocellum
 Clostridium acetobutylicum
 Clostridium Ijungdahlii
• Biolixiviación: Es una tecnología que emplea bacterias especificas
para lixiviar (extraer) un metal de valor (uranio, cobre, zinc, níquel y
cobalto) presente en un concentrado mineral.
Thiobacillus ferrooxidans
 Thiobacillus thiooxidans
 Thiobacillus acidophilus
 Leptospirillum ferrooxidans
 Sulfolobus
 Metallogenium

• Productoras de metano
 Methanobacterium ruminantium
 Methanobacterium formicum
 Methanobacterium sohngenii
 Methanobacterium suboxydans

•Ingeniería Genética
Escherichia coli
Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología
CÁTEDRA 1

Microbiología I

VIROLOGÍA
Seminario 12

Generalidades de Virología
 OBJETIVOS
OBJETilVOS
1. Reconocer los componentes estructurales de una partícula viral
2. Comprender los eventos de la replicación viral
3. Conocer las vías de ingreso, diseminación y eliminación viral
4. Analizar los principales mecanismos de daño
5. Reconocer los tipos de infección según temporalidad y
espacialidad
6. Evaluar la importancia de la respuesta inmune antiviral
 Importancia médica
méd·ca de las Argen •1na
as infecciones virales en Argentina

■ Virus in c:a ses

Virus in cointrols

SO% ~
■ Cryptosporidium in cases
Chlamydla pneumonlae O%
Adenovlrus 70/o
40% ~ Crvptosporldlum in con trols

Mycop/asma pneumonlae 9% 30% ■ Shigella/E IEC In cases

0< Shigella/E IEC in controls

Haemophilus influenzae 60/o 20% -1

■ Giardia intestinalis in cases

10%
H. paralnfluenzae 2%
io Giardla int e~tinal.s In control<
Influenza B 20/o
0%
0-11 meses 12-23 meses 24-59 meses

Breurec S, et al. (2016) PLOS Neglected Tropical Diseases 10(1): e0004283.

Streptococcus pneumonlae 8%

Ca os posIt1vos gun agente

Gi Piedimonte, M. Perez Pediatrics in Review 2014;35:519-530 tiológico. 2010 . 2011 . Argentin
N=4005

Influenza A no subtipificado
Virus sincicial
■ Influenza A HlN l cepa 2009
respiratorio (RSV) ■ Ro v1n.1~ mbul to o
Influenza A H3 Estacional
Influenza B, Linaje Yamagata
Ro virus int rn dos
Influenza B, Linaje Victoria
a,22,. ■ Influenza B sin linaje
1
■ Parainfluenza
■ VSR
■ Ad n 1n s O l m m dos
■ Adenovirus
6
■ Metapneumovlrus

■ ,94~
 ¿Qué son los
o virus?

PARÁSITOS GENÉTICOS
INTRACELULARES OBLIGADOS

Arenavirus budding resulting from viral-protein-associated cell membrane curvature. J R Soc Interface. 2013.10: 20130403
 Hospedadores
(3) Spillback lnto
enzootic cycle

Control of urban

Control of urban Control of

vectors or arboreal vectors
modulation of or modulation of
urban vectorial their vectorial
capacity; capacity;
lmmunlza on of lmmunízation or
urban enzootic NHP
popu lations hosts
Bacteriófagos
Ta rgeted
vaccination of
Control of urban people exposed
vectors or to enzootic
modulation of spillover;
urban vectorial reduction of
capaclty; exposure to
A. aegypti enzootic vectors
lmmunization of
urban A. a/bopidus
populations

(2) Human urban amplification (1) Spillover from enzootic cycle

Trends in Microbiology 2013, (21): 8 TRENOS In M/crobiology

Virófago Sputnik
Figura 1. Patrón llplco de mosaico sobre hojas de labaco flue-cured lnfecladas con
Tobacco masa/e virus. (Cortesía de H.D. Shew)
[Close]
 Viroma:
Viroma genomas virales encontrados en la virobiota

Respiratory tract: Oral/nasopharyngeal:

bacterio ha es, retroviruses · herpes viruses,
and Epstein-Barr virus 35•36 Coronaviruses, respiratory
syncytial virus, adenoviruses,
influenza A virus, picornaviruses
and uncharacterized eukaryotic
Virus procariotas y virus eucariotas viruses 1º• 24- 27

Gastrointestinal tract:
Skin: bacterio ha es, adenoviruses,
bacterio ha es, polyomaviruses, parvoviruses caliciviruses
and ~ and y-papillomaviruses 7 23 astroviruses, picornaviruses
papillomaviruses plant viruses
and uncharacterized eukaryotic
virusess.s.a, 1s,28-30

Nature Immunology Volume: 14, Pages:654–659 :(2013)

 Componentes
o en es estructurales
Co COMPONENTES es de un virus
estr e ur VIRALES
•

Envoltura Cápside
Derivado de la membrana de la célula huésped
durante la gemación. Cubierta protectora para el genoma
Proteínas específicas de unión a receptores de la Señales específicas para empaquetar del AN
célula. Optimización del volumen interno
Secuencias que median la fusión de
Determinantes antigénicos*.

Enzimas (Polimerasa, Integrasa,

Proteasa, Topisomerasa) .
Componentes celulares
Histonas, glicoproteínas, lipidos,
Genoma tRNAs
ADN or ARN
PROTEÍNA ESTRUCTURAL es
Simple o doble cadena aquella que codificada por el virus se
Linear o circular encuentra formando parte del virión
PROTEÍNAS NO ESTRUCTURALES
Contiene la información para replicar sus macromoléculas (NS o NSP) son requeridas para la
replicación, pero no están en el virión.
 Estructura viral: virus envueltos
a lV-1 b In ue nza vi rus

gpl20

R~V~r!~
n-a"senp ase

Nat Rev Microbiol. 2008 Feb;6(2):143-55.

 Estructura viral: virus desnudos

Pentamer

Myristate
(VP1)
....-.--~ - -VPI/VP3 Canyon
Pore
VP2
(VP2)

Protomer

-.
Picornavirus
«VP»: proteína viral
Rotavirus

Nature Reviews Microbiology 5, 529-539 (2007) Fields Virology, 3rd ed. Lippincott-Raven, 1996.
 Estructura viral: simetría
(disposición espacial de la cápside)
ICOSAÉDRICA HELICOIDAL COMPLEJA MIXTA
 Estructura viral: tipos de genomas
RNA
HIV (2 copias de RNA +)
a
Sarampión
DNA ,--- Genomlc RNA (RNA lineal simple cadena -)
- Llpid "l'lembrane
Herpes (DNA lineal doble cadena)

Influenza
(RNA segmentado simple cadena -)

Portal

150-200 nm

Nat Rev Microbiol. 2008 Feb;6(2):143-55. Nature Reviews Microbiology 4, 900-908 (2006)
 Estructura viral: clasificación
Tipo de AN R A
ta leos h dra l l,cal
.., Simetría
·t
1
·eV 1
Envuelto o
=
o desnudo
En loped
.l
tO
1
!E
~
wt
Organización ds ( SS ( SS ) SS SS SS - s - ) SS ( SS

-u del genoma
10- 18
s .
con con con
1
2 co ,es con con con seg

1 1 1 1 1
Clase de Baltimore IU 111

~
Familia o rn hci P,com lilYI Toga e ro Corona Filo Bun o o- Para- A en
rn o
Polimerasa en 1 1 1 1 1 1 1 1 1

el virión? -) (- -) (- ) (

Diámetro del 1 1 1 1 1
CL 60 O 60 35,-,40 30 4 50 0-70 80 130 160 0-110 15~300 50 300
0
1-
virión
~
Tamaño del 1 1
genoma (en 22- 27 12 11.7 13.6 20 10 1
kpb)
7 8 7.2 4 10 .S- 9 16-2 1
'
 Estructura viral: clasificación
Tipo de AN D

Simetría leo
Envuelto o
desnudo

Organización del ds s
genoma hn c,rde I e r circula
g p ed
1 1
Clase de Baltimore

Familia de o H dn culo
Polimerasa en 1 1 1
el virión?
Diámetro del
virión ◄ s
Tamaño del
genoma (en
kpb) 5-8 36-38 3 10..: 15 350
 CICLO DE REPLICACIÓN
(virus sólo quiere perpetuarse)

2 objetivos

l. Generar copias de genoma para la progenie viral

2. mRNAs para sintetizar proteínas estructurales y no

estructurales
 Replicación viral
1) Adsorción
2) Penetración
3) Desnudamiento •
~~ ~ºo
4) Replicación del Tr "•l•t
1
º" 0 o0

genoma/Síntesis de 1

proteínas virales
5) Ensamblaje
6) Egreso Replicación en núcleo  ADNvirus (excepto Pox)
Replicación en citoplasma ARNvirus (excepto Orthomixo,
Retrovirus, virus hepatitis D)
¿Un
¿Un virus
v·rus puede
puede infectar
ºnfectar cualquier
cualquie célula?
cé ula? ¿Todo
¿Todo virus
v· us que
que ingresa,
·ngre a, genera
genera progenie?
progenie?

Tropismo: Capacidad de un virus de infectar una población

determinada de células de un órgano o tejido. Está influenciada
por factores virales (puerta de entrada) y del huésped (cofactores
celulares, co-receptores).

120
Susceptibilidad no es lo mismo que Permisividad

Una célula es susceptible si tiene el receptor para el virus.

Una célula es permisiva si tiene todos los factores celulares

requeridos para completar una infección productiva.
 Replicación viral
Picornavirus [desnudos, RNA sc (+)]. Ejemplos: virus polio, ECHO, Coxsackie

Mnrmn, rmmrmnn11
11 1111IIJ I11111l1111UI11:

1'50S
V1IRION f B
3' 1
AAAAAA ,VPg
G
__,,---, e
IP1
5' 1'50S
P3 P2 ✓ ,¡
PiROVIR,1:0:N VP.OVP1 VP3

F ,l /
14'S - 5S
IPE:NTA1MER PiROTOME:R
 Replicación viral
Paramixovirus [envueltos, RNA sc (-)]. Ejemplos: virus sarampión, paramixovirus, RSV

tlgen me
(· ) genom c ~
R@pllcation (+)
J
.J'°VV "V'

Tran5crlption 1 Repllc atiol}

mRNA rnp ~
Cdp ~
~P ~

M
A ----
AA Transcrlption
M
~
(-) , ome
l
: 9
,,,
Ttan,l otion\ :

F HN# H, G
P N, N ~
 Replicación viral: Síntesis
S' e dee proteínas •

DISTINTAS ESTRATEGIAS SEGÚN EL GENOMA VIRAL

RNA(· )

mR A

¿Por qué es importante distinguir

distingu·r si participa una polimerasa viral
v·ral durante la
la replicación?
replicación?
Clasificación de Baltimore
¿Es inevitable que aquellos
aq e os virus que ingresan
ingresa al
a núcleo
úcleo deban
INTEGRAR
1 TEGRAR su genoma
geno a al
a celular
ce ular para replicarse?
replica se?
RNA virus (ej:retrovirus)
DNA virus (ej: HBV, HPV,) taturation

/ .. er Tran criptlon

embl
, Buddlng
• 1. Con respecto a la relación entre estructura y función de los componentes virales:
• a) Los virus con genoma a DNA integran su genoma al de la célula
• b) Los virus con genoma a RNA integran su genoma al de la célula
• c) Los virus con genoma a RNA generan cuasiespecies al replicarse
• d) Los virus con genoma a DNA que integran su genoma poseen una integrasa
• e) Los virus necesitan una polimerasa viral para multiplicarse
• f) Los virus que codifican una polimerasa viral poseen dicha enzima asociada al virión
• g) Los virus que reasocian su genoma poseen RNA como material genético.
• h) Los virus que poseen RNA como material genético reasocian su genoma
• i) Algunos virus con genoma a RNA o a DNA pueden recombinar el material genético con
agentes de la misma especie
• j) Los virus que poseen envoltura son más resistentes al ambiente intestinal que los virus
desnudos
2. Con respecto a la replicación viral:
a) Los virus tiene una etapa de replicación extracelular
b) Los virus con genoma a RNA tienen más variabilidad genética que los virus con
genoma a DNA
c) La envoltura viral proviene de la célula huésped y se adquiere durante la
brotación viral
d) Los virus replican en una única especie de ser vivo
e) Algunos virus brotan a partir de membranas celulares internas
f) Los virus utilizan siempre una polimerasa celular
g) Las proteínas estructurales son codificadas por el virus y se encuentran
formando la partícula viral
h) Los virus replican en una sola estirpe celular
i) Distintos virus pueden usar un mismo receptor
j) Algunos virus pueden usar más de un tipo de receptor
 Replicación viral: Mecanismos
ecan1
•
generadores
osge er o es de

MUTACIONES
VARIABILIDAD
VA IABI 1 ADG GENÉTICA
CA
DELECIONES
INSERCIONES
X
RE-ASOCIACIONES
RECOMBINACIONES
Attenualed Dooor Virus New Arlllgenlc Varlan t

PRR
5' -------*----*-------------------------
•-----------------, 3'
(p Hemagglutinin
1
1
1 [)::i Neuraminidase

PRS
1
I RTR
= Viral gene
segment
5' ------------------------* -*---*- ---- 3'
'-------------------
Attenual e<1 Vaccine Virus

additional reverse
transcription steps

RTR
** *
 •
Tipos
1po de infección a nivel celular

INFECCIÓN PRODUCTIVA
ODUC IVA
Ciclo de replicación completo con producción de progenie
viral.

INFECCIÓN ABORTIVA
El virus infecta una célula susceptible pero no completa su
ciclo de replicación por carecer de algún gen viral esencial o
celular no expresado
No necesariamente es benigna para la célula
3. Con respecto a la infección viral a nivel celular:
a) Una célula es susceptible si tiene el receptor para el virus
b) Una célula es permisiva si tiene el co-receptor para el virus
c) En una infección productiva se produce el ciclo de replicación completo con producción de
progenie viral
d) Una célula es permisiva si tiene todos los factores celulares requeridos para completar una
infección productiva
e) En una infección abortiva no se produce progenie viral
f) Una infección abortiva siempre es benigna para la célula
g) Los virus que producen un efecto citopático en cultivos celulares in vitro, son también
citopáticos in vivo
h) Los virus que producen in vivo sincicios celulares, evaden la respuesta inmune de los
linfocitos T citotóxicos
i) Los virus con genoma a DNA causan mutagénesis insercional en el DNA celular
j) Los virus que infectan linfocitos in vivo producen linfopenia
Noo todos los virus
vir s exhiben la misma
m·sma estrategia
estrateg·a de
e replicación
reprcación y
como consecuencia
consecuenc·a de e ello,
el o, la dinámica
dinám·ca con la que evolucionan
es diferente
dªferente

----► 1
Selección del más apto
_I_ _ _ (fitness
__ )_ _ _I MULTIPLICACION
MULTIPLICACION VIRAL 1

Presiones
Presiones
Mutaciones
(rta. inmune; drogas) 1

Diversidad genética
Cuasiespecies
Genotipos
Serotipos
 Distribución global de genotipos. JOU NAL O H PA OLOGY

Diversidad
(ejemplo: virus hepatitis C)

Variabilidad
Var"abºlidad
En un hospedador infectado, la población viral
vira está integrada
in egrada por
virus idénticos?
idéntic,os?

Virus sensible

Virus resistente
Respuesta
inmune

Inicial Resistente Bajo fitness Fitness

Escape recuperado
9. Con respecto a la variabilidad y la diversidad viral:
a) Las cuasiespecies son variantes genéticas cercanamente relacionadas y viables
b) La reasociación génica acontece en las infecciones por virus con genoma a DNA
c) La recombinación genética es un mecanismo utilizado tanto por virus con genoma a
RNA como por aquellos que tienen genoma a DNA
c) La reasociación génica ocurre en los eventos de replicación de virus con genoma
segmentado
e) Un único serotipo puede incluir varios genotipos
f) Un único genotipo puede incluir varios serotipos
g) Las mutaciones genéticas acontecen exclusivamente al replicarse los virus con
genoma a DNA
h) Los virus que exhiben múltiples serotipos son los más variables
i) La infección por un serotipo de un virus determinado habitualmente no protege al
hospedador frente a la subsiguiente infección por serotipos distintos del mismo agente
j) Un virus que posee un único serotipo es poco variable
 Vías de entrada al organismo: modo
m o d ode
d transmisión
ransm1s1on
■ • ,

CONJUNTIVA

ARTROPODOS
SANGRE
TRACTO RESPIRATORIO

INJURIA
TRACTO GASTROINTESTINAL
TRACTO UROGENITAL
PIEL y MUCOSAS

VERTICAL
Transmisión: sanguínea/percutánea
a /p

Ej: HIV, HBV, HCV

 Transmisión: percutánea
perc ea mediada
e a por vectores
eco,
Mosquito infection Extrinsic incubation
Mosquito takes a blood meal from Virus infects the midgut and
a person with acute dengue eventually travels to the salivary
glands (usually 8-10 days)

virus Midgut

virus Zika

ZIKV infection ZIKV breach of placenta! barrier

during any stage • Mechan ism unclear
of pregnancy • ZIKV can cause placenta! insufficiency

on ,~
lntrinsic incubati2 '
The onset of
symptoms usually
takes 4-7 days
Human infection ZI KV neurotropism
One mosquito can infect • Observed in
human neural
several humans organoids
Virus dengue • Mouse models

Potent ial adverse

outcomes
• Microcephaly
• lntrauterin e
growth rest riction
• Ocular
abnormalities
• Fetal demise
• Long-term
. ' outcome:
unknown
Nature Reviews Disease Primers 2, 16055 (2016) ',,1 __ --·---... ··--· --- -........... ------ --- ---
Nature Reviews Microbiology 14, 707–715 (2016)
 ,
Transmisión: aéreaa
H mans

nza vir s

. ---- -----
A

Fo ite

S ar d spac s

Distance

Influenza, sarampión, rinovirus, sincicial respiratorio, adenovirus, coronavirus

Nature Medicine (2012) 18 (10)

 Transmisión: sexual
HIV-1 HSV-2 HPV

Lu, e

ul ilaye ed vaginal onolayered cervical

squ rnous pi hellum or rectal epit elium Skin Skin

Macrophage
,gral on to Ul29 genes
lymp nod s

Ly ph nocles Tcell Ga ha

S nsory neuron
J Invest Dermatol 130:352-361 . 2009
 Transmisión: fecal-oral
a
Consumo de alimentos

Virus Hepatitis E (HEV),

enterovirus, rotavirus Preparación de
comidas
Alimentos de agua

o
Cosecha

Dir et
transmission

Plgs,

Animals
Goats, sheep, cows, cats, dogs

Lancet 2012; 379: 2477–88

 Espacialidad de la Infección Viral:
Infección Diseminada vs. Localizada

)
Virus sarampión

H hhy lvn

Rinovirus

Front. Microbiol., 2012

 Diseminada vs. Localizada

Apical INFECCIÓN LOCALIZADA

,
la progenie viral que se libera infecta células
ce u as

---- adyacentes,
a yace tes desde el sitio primario de
replicación.

Basolateral
INFECCIÓN DISEMINADA
se disemina más
mas allá
all del sitio
si io primario
prima(o de
.
replicación.
rep Icac1on Cuando varios órganos son
afectados se hace referencia a una
infección sistémica.
 Polaridad
claridad celular
cel ar y
.,
liberación
10 de
e la progenie
e
•

Rotavirus: liberación por polo

apical de enterocitos
Vías de diseminación: neural
a

T cell

Periphery
,l.

~ndothelial
,J.
TNF

T NFR * Q - IFNy
,l.
IFNG R

LJ Tight
junction * LJ
CNS parenchyma

Direct infection of BBB

endothelial cells
• PV
* IFNl3

Regulation of BBB permeability

M i c r oglia l
cell

• MV by cytokines Trojan horse' approach

• Flaviviruses • WNV • HIV-1
b Endothelia l or
0 - RABV
- -----------+-- epithelial cell

Muscle
cell Peri phery

Receptor binding
Receptor binding and uncoating
and endocytosis
• HSV
• VZV

Dynein
Microtubu l es

• RABV
• PV
11
• PRV

llll PNS

11
• VSV

CNS

Nature Reviews Neuroscience 17, 766–776 (2016)

 .
Vías de diseminación: hemática
em t ca
,

,- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - '
: Skin Keratinocyte ' Fibroblast infection
and virus replication

~-~ Brain
,1 Fibroblast
,-, Epithelial and
Blood endothelial e ~

CHIKV disseminates
through the bloodstream 1

Lymphoid tissue
Stromal cells:
liver macrophages
Endothelial cells and DCs?

Muscle
Satellite cells
and fibroblasts

Nature Reviews Microbiology 8, 491-500 (2010)

 ,
Tipos de infección: segúnn temporalidad
o a
A. Infección Aguda D. Infección persistente crónica

T1ime

B. Infección persistente latente

Time
T1ime
B. Infección persistente lenta
C. Infección persistente crónica

T1ime T1ime
 Tipos de infección según temporalidad: agudas
ag das
a s f-e e te H · '1 · f e ·on

-X

s
Self- im· ed e i e H V infe t·o

E
*---

-
Tipos de infección según temporalidad: persistentes
persi ten s
e Self- li ite acu e C · fec-t·o

e::::

s
o ic y evolvi g ac te CV i fec io

3
 Mecanismos de lesión
1 por virus
Infección viral Respuesta inmune

DAÑO

DIRECTO INDIRECTO

Rabia: corpúsculo de Negri

Coilocito por HPV

4. Con respecto a la infección viral a nivel del hospedador:
a) En la infección localizada, la progenie viral liberada infecta células adyacentes al sitio
primario de replicación
b) Los virus utilizan una única vía de diseminación en el organismo
c) Una infección aguda es aquella que dura menos de 30 días
d) En la infección diseminada, el virus se disemina más allá del sitio primario de replicación
e) Los virus que producen habitualmente infecciones localizadas no pueden producir
infecciones diseminadas
f) En la infección viral persistente, la población viral perdura en el organismo por períodos
prolongados de tiempo
g) En una infección viral persistente la producción y eliminación viral es continua
h) Las infecciones persistentes siempre son asintomáticas
i) Las infecciones virales persistentes acontecen como consecuencia exclusiva de la
inmunosupresión del hospedador
j) Las infecciones virales lentas son producidas por agentes que exhiben tiempos de
replicación prolongados en las células que infectan
5. Con respecto a los mecanismos de lesión producidos durante una infección viral
a) El mayor daño acontecido durante una infección viral es producido directamente por el virus
b) En algunas infecciones virales se produce daño mediado por la respuesta inmune mediada
por células
c) Un ejemplo de efecto citopático directo es el inherente al incremento de la permeabilidad de
membranas celulares
d) En algunas infecciones virales se produce daño mediado por la respuesta inmune humoral
e) En las infecciones virales persistentes el daño puede ser directo o indirecto
f) Otro ejemplo de efecto citopático directo puede ser la inducción de la muerte celular por
apoptosis
g) En las infecciones agudas no hay daño celular
h) Para que haya daño de la célula hospedadora debe existir producción de progenie viral
i) Los virus que poseen envoltura promueven la formación de sincicios
j) Los virus que inducen la apoptosis celular no pueden promover la piroptosis
Cinética de la respuesta inmune antiviral

Células T citotóxicas
IFN / Anticuerpos
TNF Células NK
IL-12

Carga viral

2 3 4 5 7 8
Días post-infección
 Interferón (IFN) tipo I

ARN
doble cadena

Activating TICAM-1 + = TRIF (Tir [Toll IL-1

Transcription
Factor
i ~ nasas
receptor]-domain-
containing adaptor
inducing interferon) l cinasas

Gv INFp
00 INFp

-t ' 1' 1' 1' 1' 1' 1

.. ..
Promotor INFP
1
1
-t Promotor INFP
1
1
,RegulaclOn del slatema,'FN ap
Acción de las prolei:nas efectoras de los IFN o/P

............... ....--..
01P _. liiit~'ª OllllilAna
+
l l ..,
.,_,,,.,,,
1 i
1 1 ... lilA. . . . . CMttl
.J
' .....,,,..
~CIIHIIO'llnll 1
~
6. Con respecto a la inmunidad antiviral innata
a) La inmunidad innata es inespecífica
b) Los mecanismos disparados por los interferones constituyen la primera respuesta inmune contra las infecciones virales
c) La inhibición de la síntesis de proteínas es uno de los mecanismos desencadenados por el interferón
d) Los virus con genoma a RNA no desencadenan la respuesta mediada por interferón
e) El interferón se produce al cabo de 3 semanas post-infección
f) En la inmunidad innata no hay reconocimiento alguno por parte del sistema inmune
g) La edición del RNA por parte de ADAR es un mecanismo inducido por interferón
h) El sistema complemento es imprescindible para producir la virólisis de los virus envueltos
i) La actividad de la RNAsa L es inducida por el interferón e inhibe la transcripción de genes virales y celulares
j) La PKR es inducida por el interferón y promueve la apoptosis

7. Con respecto a la inmunidad antiviral mediada por anticuerpos

a) La respuesta inmune humoral es la principal responsable de la limitación y eliminación de la infección celular
b) La acción de los anticuerpos neutralizantes puede producir la virólisis inmune sin participación del complemento, mediante la interacción con sitios críticos
de la superficie viral
c) En las infecciones virales localizadas no se produce IgG
d) La neutralización de los virus por parte de los anticuerpos neutralizantes puede darse tanto en el espacio extracelular como en el intracelular
e) La neutralización viral puede acontecer dentro de la célula o en la circulación
f) Sólo los anticuerpos dirigidos contra las glicoproteínas de envoltura de un virus determinado tienen efecto neutralizante
g) Los anticuerpos dirigidos contra epítopes virales expresados en la superficie celular son neutralizantes
h) Los anticuerpos dirigidos contra componentes críticos de la replicación viral (por ejemplo, una polimerasa viral) pueden neutralizar su infectividad en el
compartimiento intracelular
i) La presencia de IgG específica contra un virus indica que la infección es crónica
j) La detección de IgM específica contra un virus indica que la infección es aguda

8. Con respecto a la respuesta inmune antiviral a nivel celular

a) La eliminación viral se puede producir mediante mecanismos líticos (Fas/Fas-L; perforina-granzima B)
b) Si la respuesta de los LT citotóxicos es vigorosa, policlonal y multi-específica, habitualmente se logra limitar la infección
c) La eliminación viral se puede producir mediante mecanismos de inhibición no lítica de la replicación viral mediada por citoquinas (IFN-γ y TNF-α)
d) En una infección persistente crónica, generalmente la respuesta de los LT citotóxicos es vigorosa, policlonal y multi-específica.
e) En las infecciones persistentes se produce un agotamiento de los LT
f) Un exceso en la actividad de los linfocitos T regulatorios (Treg) se asocia frecuentemente a la persistencia viral y a la protección frente al potencial daño
celular que pudiera ser causado por LT citotóxicos
g) En las infecciones persistentes crónicas pueden observarse niveles elevados de IL-10
h) Las células NK son cruciales para la limitación inicial de muchas infecciones, ante la inhibición de la expresión de moléculas HLA-I
i) La respuesta inmune humoral puede participar en el daño hístico de células infectadas y aun no infectadas
j) Las subpoblaciones de células NK CD56dimCD16bright y CD56bright CD16dim cumplen un rol decisivo en la respuesta innata mediante la inducción de efectos
citotóxicos y la producción de interferón gamma, respectivamente.
 Metodologías de estudio de virus
Aislamiento
Aislamien o de virus en laboratorio

Animales de laboratorio Cultivos celulares

Suspensión

Condiciones de
bioseguridad
y esterilidad

Monocapa
¿Cómo se evidencia la presencia de un agente viral
en un cultivo celular?
Efecto o Acción Citopática (ECP o ACP)
B
A

Metapneumovirus

Chikungunya
Pediatr Rev. 2013; 34(12): 558–565 ; PLoS One. 2013; 8(12): e83014.
 Inmunomarcación

body

!! - . . - - -- ,,! r-al

ilpt i'l n t i

Inmunofluorescencia- Virus respiratorio sincicial (RSV)

.J=---- Pi.nti ■ l1,

- -- - . {i yi) 1 !)le lgG

Inmunoperoxidasa-virus Epstein-Barr (EBV)

 Ultraestructura viral
Microscopio electrónico
Influenza

Ebola

Hepatitis B
CARACTERIZACIÓN DE PROTEÍNAS ESTRUCTURALES
Western Blot

----· ...........
....,_..._.:._...
-- .........
t•••·líl•:.-111·,.,
...,,,.1 -
_,....,.
----1•---t1Jaapn211trt .
 CARACTERIZACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Muestras
Extracción de Ácidos nucleicos
Gel de agarosa
DNA Amplification Us ing Polymerase Chain Reaclion

TARGET DNA

4.J.J. 1111111111111111111 ~
Pt e Taq P2
Reaction mixture is heatecl
iJ,f~º~.:~~~~= ~Pi~~ - 0 ii iiiiiii l iiiiiiiiii • ::::- . . .
~~~(~~ea~l~~~J;;~~~;~t~ry ~ ~ I i l i i i i i i 1111111 iJ.!J. #

...
s e q L-eno es in !ar gel D NA

d
b
- rm
~
W
11111111
11~ 1!! 1111111111111 . .#.
W hen heated to /2'''C, Taq polyner ase extendsoomp lemertary
,,..,,. _ strands from pri mers • ,.,,,,,.

~ # l l ll l 111111111111111 Fir3t~n;~~~~~f~1ªofesul~ l l l l l 111111111111111

,J ~ • " a,get DNA seqoeooe ,J 1./.J.r.J. • "

. . ,~ ~ ii iiiiii iiii
\-
· -
i i i 1111 111 1111 I W
DEN¡j'J_}RE

HYBRI DZE t iliiiiiiii i iiii iiiii

.w,¡.e
8 ,.,,.,_
i 111111 i i i i i i i ,, ,;((

~
~ t ~ ii ii i iiii

ilii i l~ lfllllllllll
J ;;;;~ STRANDS (
11111111111111¡1~111

tj llllllllllllllllll
J
ti! 11111111111111111111 J 11111111111111111111
Seoond synthesis oyole
J
11111111111111111111 results n four copies ::,f 11111111111111 1111 11
ta r g et DNA sequenoe

Secuenciación Souroe: DNA Science, see Fig. 13.

nucleotídica
Amplificación (PCR)
10. Con respecto a las características generales de los virus
a) Son agentes infecciosos que carecen de metabolismo propio
b) Todos los virus pueden ser propagados en cultivos celulares in vitro
c) El efecto citopático producido por un mismo virus pueden ser diferente en distintas
estirpes celulares
d) Todos los virus pueden ser propagados en animales de laboratorio
e) Todos los virus son específicos de especie de hospedador
f) Toda célula procariota y eucariota puede ser infectada por un virus en particular
g) Los virus asociados a la mayor patogenicidad son los de mayor tamaño, dado que
codifican más genes.
h) Los virus asociados a la mayor virulencia son los que poseen genes solapados, dado que
codifican más genes por unidad de genoma.
i) Los viriones y las partículas virus-símil (Viral like particles o VLPs) de la misma especie
exhiben en común la posibilidad de infectar células susceptibles
j) Los virus que se forman por la asociación entre la envoltura de una especie y la
nucleocápside de otra, se denominan viroides