Practica 4

Infecciones Respiratorias
Introducción
Para el manejo y proceso de infecciones respiratorias tomaremos en cuenta que existen dos
tipos de infecciones de acuerdo a su ubicación. Las de vías respiratorias altas que incluyen
amigdalitis, faringitis, otitis, sinusitis y se inlcuyen también las infecciones oculares. En las
vías respiratorias bajas encontraremos infecciones del tipo de las neuomonías (NAC),
infecciones respiratorias nosocomiales y tuberculosis

I. Vias respiratorias bajas

Las muestras que usualmente se reciben en el laboratorio son los esputos, principalmente si
el paciente es ambulatorio. En pacientes hospitalizados suelen recibirse Lavados
Broncoalveolares (BAL) y con menor frecuencia cepillados broncoalveolares

Muestras del tracto respiratorio inferior

Expectoración (Esputo)
En las condiciones habituales de la clínica diaria, no es una muestra representativa de la
situación por su mezcla con secreciones procedentes de todo el árbol traqueo-bronquial y
con la flora saprófita de la orofaringe. No obstante es un método fácil y rápido

Procedimiento de obtención de la muestra

a) Colectar la muestra en frasco estéril de boca ancha y hermético
b) Enjuagar la boca con agua destilada estéril o solución salina
c) Obtener el esputo tras una expectoración profunda luego de un esfuerzo de tos,
preferentemente matinal
d) La muestra debe provenir del sector bajo del tracto respiratorio
e) La saliva no sirve para realizar este estudio

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 f) De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse el esputo con
nebulizaciones de suero fisiológico estéril tibio (15 ml durante 10 minutos), siendo
útil además realizar fisioterapia respiratoria
g) El volumen mínimo deberá ser de 2 a 10 ml, si es posible. Y debe enviarse
inmediatamente al laboratorio (no superior a 2 horas).
Observaciones
- Es preferible realizar la toma antes de instaurar el tratamiento antibiótico
- No es útil para anaerobios
- La expectoración debe rechazarse hasta obtener un esputo de calidad suficiente
(más de 25 leucocitos polimorfonucleares y menos de 10 células epiteliales por
campo 10x) analizada por prueba de tamizaje
- Si no se obtiene muestra representativa del tracto respiratorio inferior, es inútil
insistir con esta técnica diagnóstica

Procesamiento
a) Prueba de tamizaje: debe ser realizado para evaluar la calidad de la muestra y
considerar si la presencia de saliva es un factor importante de contaminación que no
permitirá el crecimiento de patógenos debido al exceso de población de la flora
microbiana normal presente en la saliva. Para realizar esta prueba, ayudado con una
pipeta transportadora desechable, colocar una gota de muestra entre porta y cubre y
observar a 10x
b) La muestra apta para siembra es aquella en que se cuentan mas de 25 leucocitos
PMN y menos de 10 células epiteliales por campo a 10x
c) Una vez realizado el tamizaje, escoger la parte más purulenta de la muestra y
realizar una descarga con el asa en los diferentes medios.
Medios utilizados: Gelosa sangre con base de Casman, McConkey y Gelosa
chocolate por el método de siembra de Frobisher e incubar 24-48 hrs en atmosfera
de CO2

Frotis para tinción de Gram

• Seleccionar la porción más purulenta de la muestra, tomar con asa

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• Suavemente, extenderla en la lámina portaobjetos
• Dejar secar el frotis al aire
• Fijar al calor y colorearlo por Gram
• Establecer el tipo y predominio de leucocitos y observar el predominio de las morfologías
bacterianas o micóticas observadas. Los hallazgos se reportarán en cruces o con las
palabras “escasa”, “moderada” o “abundante” cantidad tanto de leucocitos como de
morfologías encontradas

Interpretación de los cultivos

Si no hubiese crecimiento transcurridas las 24 horas, incubar por 24-48 horas más
La interpretación de los cultivos se realiza en relación a los hallazgos de la tinción de
Gram, es decir, se estudian aquellos agentes presentes en la tinción de Gram
(identificación y estudio de sensibilidad)
Adicionalmente se estudian aquellos agentes con recuento semicuantitativo alto, con
crecimiento desde el tercer cuadrante en adelante. Si el recuento es bajo, pero la
bacteria que creció se corresponde con la morfología observada en la tinción de Gram y
está asociada a presencia de leucocitos PMN en el Gram, también se reporta.
En caso de tener recuentos semicuantitativos altos y no observarse la morfología que
creció en el Gram, se deberá advertir en el informe y presumir que se trata de una
colonización respiratoria

Aspirado Traqueal o Secresiones traqueales

Esta muestra se utiliza fundamentalmente para valorar la colonización del tracto
respiratorio en el paciente ventilado. Tiene valor análogo al esputo por su contaminación
con la flora orofaríngea. No obstante un resultado de cultivo semicuantitativo de 3 o 4
cruces (desarrollo en 3 o 4 cuadrantes de la placa de Petri) se correlaciona bien con la
etiología de la neumonía en el paciente ventilado
Esta muestra se obtiene con sonda de aspiración por personal de médico debidamente
entrenado. Se enviará al laboratorio en tubo estéril
Se procesa igual que la muestra de esputo, utilizando los mismos medios, método de
siembra, tiempo y temperatura de incubación

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 Lavado Broncoalveolar
Indicado especialmente en procesos pulmonares intersticiales. (Neumonía en pacientes en
asistencia respiratoria mecánica). De escasas complicaciones, pero no obvia la
contaminación orofaríngea cuyo problema puede disminuirse si se inserta un tubo
endotraqueal para pasar el broncoscopio. La muestra es tomada por personal médico
entrenado y enviado al laboratorio en tubos estériles.
Para su proceso no es necesaria el tamizaje que si se hace necesario en las muestras de
esputo. Se siembran directamente en los medios establecidos para muestras respiratorias,
utilizando el método de Frobisher e incubando a 37ºC por 24/48 horas/CO2

II. Vias respiratorias altas

Exudado Faríngeo
Se utiliza para el diagnóstico de faringitis estreptocóccica. Excepcionalmente se pueden
requerir búsqueda de otros patógenos (por ejemplo: Neisseria gonorrhoeae). También
sucede excepcionalmente que un potencialmente patógeno pueda producir infección, esto
se presume cuando este potencialmente patógeno está en crecimiento puro o en franco
predominio

Procedimiento para la toma de muestra

a) Deberá utilizarse un medio de transporte (Stuart , Amies), cuando la muestra no es tomada
en el laboratorio. Su transporte no debe ser mayor de 2 horas
b) Bajo visión directa, con la ayuda del bajalengua, se tocará con el hisopo en todas las partes
con exudado, membranas o inflamación. Se deben frotar las criptas tonsilares y la faringe
posterior. Por ningún punto se debe tocar la mucosa oral, lengua, úvula ni dientes

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c) Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemolítico del grupo A
(S.pyogenes) y otros grupos beta hemolíticos como C y G. Tambien observar pureza o
predominio de potenciales patógenos (ejemplo Klebsiella pneumoniae, S.aureus,
Pseudomonas, levaduras como Candida)

Procesamiento
a) Una vez tomada la muestra se procede a la siembra en medio de Gelosa sangre con base
de Casman por el método de Frobisher. Se incuba a 37ºC en atmosfera de CO2 por 48
horas
b) Después de incubar se buscan colonias β hemolíticas en la cantidad que sea, estamos
obligados a investigar asi solo haya crecido una colonia. Hacer prueba de sensibilidad a
la bacitracina

Senos paranasales

Es un procedimiento médico. Se realiza la punción-aspiración de los mismos, lo que

requiere un especialista en Otorrinolaringología. Este tipo de muestra no se realiza de rutina
en caso de sinusitis aguda, sino que en general se reserva para casos de sinusitis crónica,
para aquellos casos que no responden al tratamiento instaurado y en aquellos casos que el
especialista considere necesario.

Procedimiento
- Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
- Una vez obtenida la muestra, sembrar, incubar y hacer frotis para colorear

Exudado Nasal:

Esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de S.aureus o en el diagnóstico

etiológico de impétigo. No es útil para el diagnóstico etiológico en casos de rinitis,
rinosinusitis. Alrededor del 30% de la población es portadora de este microorganismo a

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nivel nasofaríngeo por lo cual su hallazgo no tiene habitualmente significancia clínica salvo
en situaciones especiales. En el personal de salud sólo se realizará la búsqueda de
portadores en el caso de brotes de infecciones en los que no se ha encontrado otra fuente de
infección. Este tipo de investigación se realizará en coordinación con el Comité de
Infecciones Hospitalarias, quien determinará la oportunidad de su realización

Procedimiento
a) Muestra: Hisopo de algodón húmedo con medio de transporte
b) Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo,
previamente embebido en suero fisiológico estéril y enviar de inmediato al
laboratorio (no superior a 2 horas)
c) Una vez obtenida la muestra, sembrar por Frobisher en G. sangre, McConkey, G.
Chocolate si no tuviese una buena base como la de Cassman. Incubar y hacer frotis
para colorear
Observaciones
- Se deberá consignar en la boleta de pedido si hay lesiones o costras a nivel nasal
(muy importante por infecciones producidas por Klebsiella ozaenae). Esta misma
muestra se obtiene para citología de moco nasal la cual consiste en realizar una
coloración de Wright de frotis de moco nasal y hacer un recuento (100x) de
Neutrófilos, eosinófilos y células del epitelio.

Muestras de oído
I. Conducto Auditivo Externo
Solo se utiliza para conocer la etiología en caso de otitis externa. Suele tratarse de muestras
de mala calidad y en ningún caso resultan representativas de los microorganismos
existentes en el oído medio

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 Procedimiento
Tipo de muestra: Hisopos de algodón con medio de transporte. Se requiere un hisopo
para cada oído y se envía inmediatamente al laboratorio (no superior a 2 horas)
Limpiar posibles restos de pus o secreciones del conducto auditivo externo con hisopo
humedecido en alcohol y posteriormente con suero fisiológico y descartar. Luego tomar
muestra del oído indicado o de ambos por separado frotando con nuevo hisopo contra
las paredes
Una vez obtenida la muestra, sembrar por Frobisher (G.sangre, McConkey, G.chocolate
o G.sangre con base de Cassman), incubar y hacer frotis para colorear

II. Oído medio-Timpanocentésis

Se reserva para el diagnóstico etiológico en casos de otitis media que no ha respondido
al tratamiento, que se presenta en pacientes inmunodeprimidos, en otitis crónica y en
aquellos casos que el médico considere necesario
Procedimiento
Tipo de muestra: Debe realizarse una timpanocentésis y obtenerse por un especialista en
otorrinolaringología. Se puncionará el tímpano a través de un otoscopio estéril. La
muestra se enviará en un tubo estéril

III. Muestras Oculares

Por vecindad estas muestras se estudian con las del tracto respiratorio superior.
Exudado Conjuntival
Este tipo de muestras sirve para el diagnóstico de conjuntivitis de causa bacteriana. Estas
son a menudo unilaterales. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de

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ambos sacos conjuntivales por separado, de manera de poder valorar la flora normal.
Siempre que sea posible se realizará la toma de muestra en el Laboratorio de
Microbiología.

Procedimiento
Muestra: Debe obtenerse antes de la instalación de analgésicos locales, colirios o
antibióticos. Utilizar hisopos con medio de transporte y usar un hisopo por cada ojo
Con una asa bacteriológica de platino o con hisopo estéril desechable frotar sobre la
conjuntiva tarsal inferior y el fórnix de afuera hacia adentro. Generalmente la toma el
especialista y de preferencia sembrarse al momento de la toma
Una vez obtenida la muestra, sembrar, incubar y hacer frotis para colorear

Raspados corneales
Es un procedimiento médico. La toma de muestra la realizará un Oftalmólogo en el
Laboratorio de Microbiología en coordinación con un Microbiólogo. Si esto no es
posible se avisará previamente al Servicio de Microbiología que desplazará al personal
y/o material necesario para ello.

Reporte
Para búsqueda e investigación de S. pyogenes usar disco de bacitracina
Si la prueba es negativa informar No se aislaron bacterias patógenas
Si la prueba es positiva informar: Se aisló Strptococcus pyogenes. No necesita
prueba de drogo susceptibilidad a menos que el médico lo solicite
Si se aisla un organismo potencialmente patógeno, informar Género y especie junto
a su respectivo antibiograma

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Cuestionario

Mencione la utilidad del estudio de secreciones nasofaríngeas y del moco nasal

Categorice los microorganismos de las vías respiratorias superiores como:

Habitantes normales:

Potencialmente patógenos

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 ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA. LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA CLÍNICA MB-180
INFORME DE EXAMENES BACTERIOLOGICOS DE LABORATORIO

Nombre del estudiante:________________________________________________________

Fecha de reporte de resultados: (d/m/a) ___________________________________________

Nombre del Paciente: Edad: Sexo: Expediente:

Tipo y Procedencia de la muestra Hospitalizado Consulta Fecha de

Si ⃝ No ⃝ externa recepción:
Si ⃝ No ⃝
Sala:

Exámenes Solicitados: Examen en fresco ⃝ Gram ⃝ KOH ⃝

Cultivo de bacterias ⃝ Cultivo de hongos ⃝ Otros:

Resultado de exámenes directos Resultado de Cultivo

Antibiograma:

Observaciones:

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 ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA. LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA CLÍNICA MB-180
INFORME DE EXAMENES BACTERIOLOGICOS DE LABORATORIO

Nombre del estudiante:________________________________________________________

Fecha de reporte de resultados: (d/m/a) ___________________________________________

Nombre del Paciente: Edad: Sexo: Expediente:

Tipo y Procedencia de la muestra Hospitalizado Consulta Fecha de

Si ⃝ No ⃝ externa recepción:
Si ⃝ No ⃝
Sala:

Exámenes Solicitados: Examen en fresco ⃝ Gram ⃝ KOH ⃝

Cultivo de bacterias ⃝ Cultivo de hongos ⃝ Otros:

Resultado de exámenes directos Resultado de Cultivo

Antibiograma:

Observaciones:

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