Lipasa Pancreática

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UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Escuela Profesional de Ingeniería en Industrias Alimentarias

 Docente: Blga. Mblga. Teresa Margarita Lanchipa Ale


 Tema: Lipasa Pancreatica
 Curso: Bioquimica
 Nombres y Apellidos: Priscila Ninaja Lizama

TURNO

2 “B”

TACNA – PERÚ

2022

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PRÁCTICA 9

LIPASA PANCREÁTICA

1. INTRODUCCION
Gran parte de los alimentos que ingiere un individuo está constituido por grasas, en las
cuales los triglicéridos representan un 90%. Los triglicéridos al nivel del intestino proximal se
hidrolizan en sus componentes debido a la acción de la lipasa pancreática, cuya acción se
incrementa por la presencia de sales biliares que favorecen su emulsión. El pH para la lipasa
pancreática es aproximadamente 8. Los triglicéridos se hidrolizan en ácidos grasos, glicerol,
mono y diglicéridos.
Todos estos componentes son emulsionados hasta pequeñas micelas (40 a 100Ǻ) que se
absorben fácilmente.
Los aceites son líquidos constituidos básicamente de ácidos grasos insaturados, como el
palmítico, esteárico y el ácido mirístico.
La hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva usando pancreatina, liberará ácidos grasos
que podrán ser titulados.

2. OBJETIVOS
• Demostrar la hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva por la lipasa pancreática.
• Demostrar la acción activadora de las sales biliares sobre la lipasa pancreática la
importancia del pH.

3. MATERIAL Y METODOS

3.1. MATERIALES
3.1.1. Materiales biológicos
• Emulsión de aceite

3.1.2. Materiales de vidrio


• Tubos de ensayo
• Pipetas
• Vaso de precipitación

3.1.3. Reactivos
• Solución de sales biliares
• Fenoltaleína 1%
• Solución de pancreatina
• Hidróxido de sodio 0,1N
• Buffer fosfato pH 8
• Agua destilada

3.1.4. Equipos y otros


• Cocina
• Guantes

3.2. METODOS
Mediante la observación y exploración se aplicará el método de titulación que nos
demuestra la cantidad de ácidos grasos libres por acción de la enzima, con la ayuda del
indicador fenoltaleína.

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4. PROCEDIMIENTO

4.1. Titulación de ácidos grasos libres.


• En 6 tubos de ensayo medir lo siguiente:
1 2 3 4 5 6
Emulsión de aceite 3mL 3mL 3mL 3mL 3mL 3mL
Buffer fosfato pH 8 2mL 2mL
Sales biliares 2mL 2mL
Pancreatina 2mL 2mL 2mL
Pancreatina hervida 2mL 2mL 2mL
Agua destilada 2mL 2mL
• Mezclar los sistemas y colocarlos en baño maría a 37°C durante 30 minutos,
agitando los.tubos de ensayo a intervalos.
• Al finalizar el tiempo de incubación, retirar los tubos de ensayo del baño y agregar a
cada uno 3 gotas de fenoltaleina.
• Luego realizar la titulación de los ácidos grasos liberados con hidróxido de sodio
0,1M hasta que aparezca una coloración rosada.
• Anotar las cantidades gastadas de la base en mililitros.

5. RESULTADOS
• Esquematizar el procedimiento de los experimentos.

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 Calcular el número de miliequivalentes de ácidos grasos de cada tubo.
Luego interpretar sus resultados.
TUBO 1: Se dio en mayor eficiencia que los demás ya que cumple con todas las
condiciones para que la catálisis se de óptimamente, y eso lo hemos comprobado
con la Fenolftaleína que es un indicador del pH del medio y el NaOH0,1M que nos
ayuda a indicar la cantidad de ácidos Grasos liberados, para lo cual se gasta
3,9mL.

TUBO 2: Si se liberaron los ácidos grasos pero en pequeñísimas cantidades,


supuestamenteno debería contener ácidos grasos debido a que la enzima fue
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desnaturalizada, pero a la acciónde agitar el tubito, como que hizo que la catálisis
se de, bueno, para este sistema hubo un gastode 0,5 mL de NaOH.

TUBO 3: El sistema se dio con normalidad, tiene las condiciones necesarias para que
lacatálisis funciona, a pesar de que no tenga el Buffer Fosfato que da las
condiciones, pudo generaracidos grasos, para este sistema se uso 2,3 mL de
NaOH.

TUBO 4: La liberación de ácidos grasos fue gracias a la ayuda de las sales biliares, y
por elapoyo mecánico de la depresión del tubo, ya que la desnaturalización de la
enzima pancreatinaimpedia un catálisis optimo, para este sistema usamos 0,6 mL

de NaOH.

TUBO 5: Si hubo liberación de ácidos grasos pero en pequeñas cantidades ya que solo
esta laenzimita, y esta reacción no puede catalizarse debidamente ya que no tiene
condiciones óptimas,para este sistema se uso solo 0,1 mL de NaOH

TUBO 6: Si se sintetizaron los ácidos grasos pero al igual que la 2 y 4, no cuenta con
lascondiciones optimas para la catálisis, el sistema por lo tanto dejo de funcionar, y
solamentegracias al movimiento mecanico para agitar el tubo se obtuvo minimas
cantidades de acidosgrasos, y esto lo comprobamos con el NaOH para lo cual solo
usamos 0,2 m

6. CONCLUSIONES
 Durante el experimento hemos demostrado la catálisis de ácidos grasos a partir de
laenzima pancreatina donde participaron varios factores para que tenga
optimascondiciones.
 En la experimentación observamos que las sales biliares son como un tipo
depotenciadores que ayudan a la reaccion ya que reducen las micelas, asi liberando
mascantidad de acidos grasos, ademas es esencial saber el pH del medio ya que de
estepensó si la reacción funciona de manera óptima o no

7. CUESTIONARIO
7.1. ¿Encontró hidrólisis de aceite de oliva en ausencia de sales biliares? Explique
Claro que si, durante el experiemto, vimos que en el tubo 1, 2, 5 y 6 aunque no haya ventas
biliares, se pudogenerar acidos grasos, debido a que''La hidrólisis de los triglicéridos
continúa en el duodeno, por la acciónsinérgica de las lipasas gástricas y sobretodo
pancreática, y la secreción de las sales biliares. Mediante la lipólisisen el estomago se
hidrolizan entre el 10 y el 30 % de los triglicéridos, produciendo diglicéridos (DG) y
ácidosGrasos Libres (FFA). Esto facilita la emulsión lipídica y la acción posterior de la lipasa
pancreática''
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7.2. ¿Es esencial para la digestión la función de sales biliares en el tracto digestivo. Sería
normal la absorción de lípidos en esas condiciones?.
La bilis ayuda a la digestión y ayuda a las enzimas en su cuerpo para descomponer las
grasas en ácidosgrasos, que pueden introducirse en el cuerpo a través del tracto digestivo.
Por lo tanto, es propicio que si estenlas sales biliares, para que haya una mayor generación
de ácidos grasos, ya que estos aporten energía alcuerpo, entre otras funciones
7.3. Comente el rol del ATP y Mg en la beta-oxidación de los ácidos grasos.
El ATP se usa para darle energía a la reacción ya que se necesita romper enlaces, para asi
activar la reacción ycreo que el Mg tiene la misma funcion, como un activador.
7.4. ¿Cómo realizaría usted la misma práctica con otra metodología?
Desconozco otros métodos para generar ácidos grasos. A menos que la ciencia crea otras
formas de sintetizaracidos grasos a partir de lo visto.
7.5. ¿Cómo se inhibe la reacción enzimática? Explique
En la experimentación, la única inhibición que se observa, es la desnaturalización de la
enzima pancreatina

8. BIBLIOGRAFIA

Beatriz Bermúdez Pulgarín, SL (sf).dialnet. Obtenido de


https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=1034581
Desconocido. (sf).MeDlineplus. Obtenido de
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002237.htm
Desconocido. (sf).Wikipedia. Obtenido de
https://es.wikipedia.org/wiki/Oxidaci%C3%B3n_de_%C3%A1cidos_grasos

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