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RESUMEN
El análisis sanguíneo en aves es una evidencia que permite evaluar su estado de salud y es una herramienta
diagnóstica para el médico veterinario clínico. El objetivo de la investigación fue conocer las variables
hematológicas de aves comunes, deportivas, ganso común, pato doméstico, pato azteca, guajolote y pollo de
engorda por sexo, especie y la diferencia entre las especies. Se tomó una muestra de sangre a 88 aves por
venopunción de la vena ulnar usando ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) como anticoagulante. Se contaron
los eritrocitos y los leucocitos totales por el método de Natt y Herriks. El diferencial de leucocitos se realizó por
medio de un frotis sanguíneo, se midió la concentración de hemoglobina con la técnica de cianometahemoglobina
y el porcentaje de microhematocrito. Los datos fueron comparados con un análisis de varianza en un diseño
completamente al azar y las diferencias se compararon con la prueba de Tukey (P<0.05). Para eosinófilos y
basófilos se utilizó la prueba de Kruskal-Wallis debido a que los datos no presentaron normalidad. Las variables
hematológicas en aves deportivas, ganso común, pato doméstico, pato azteca, guajolote y pollo de engorda
fueron similares para hembras y machos de la misma especie. Pero hubo diferencias en células blancas de las
especies estudiadas.
Palabras clave: aves domésticas, hematología, Natt y Herriks.
ABSTRACT
Blood analysis in birds is an evidence that allows evaluating their health status and is a diagnostic tool for the
clinical veterinarian. The objective of the research was to know the hematological variables of common birds, sport
birds, common goose, domestic duck, Aztec duck, turkey and broiler chicken by sex, species and the difference
between species. A blood sample was taken from 88 birds by venipuncture of the ulnar vein using EDTA as
anticoagulant. Erythrocytes and total leukocytes were counted by the method of Natt and Herriks. Leukocyte
differential was performed by blood smear, hemoglobin concentration was measured by the cyanomethemoglobin
technique and microhematocrit percentage. Data were compared with an analysis of variance in a completely
randomized design and differences were compared with Tukey's test (P<0.05). For eosinophils and basophils, the
Kruskal-Wallis test was used because the data did not present normality. The hematological variables in sport
birds, common goose, domestic duck, Aztec duck, turkey and broiler chicken were similar for females and males
of the same species. But there were differences in white cells of the species studied.
Keywords: domestic fowl, hematology, Natt and Herriks.
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INTRODUCCIÓN
En México, las aves deportivas, el ganso común, el pato doméstico, el pato azteca, el guajolote
y el pollo de engorda son encontrados en granjas comerciales, pequeñas explotaciones de
traspatio, reservas animales o incluso son adoptados como animales de compañía (Cuca-
García et al., 2015; Pineda-Leyva et al., 2015). El conocimiento de sus parámetros
hematológicos es una herramienta general para conocer su estado de salud con usos básicos
en la clínica de aves e investigación científica (Mitchell y Johns, 2008).
La sangre es un tejido que consta de una parte liquida y de componentes celulares; se encarga
principalmente de captar, transportar y distribuir nutrientes en el organismo a través de los
vasos sanguíneos. Su evaluación se realiza a través de un hemograma donde se expresa la
población de eritrocitos y leucocitos, además, permite identificar alteraciones morfológicas y
valorar su funcionamiento (Campbell, 2013; Montalvo, 2017).
En las aves y los reptiles el hemograma se realiza manualmente debido a sus eritrocitos y
trombocitos nucleados. Además, los leucocitos presentan múltiples formas y el tamaño celular
es distinto en comparación a los mamíferos, por lo que el conteo total de células rojas (CCR)
y blancas (CCB) es directo a través de un hematocitómetro (Martínez-Silvestre et al., 2011).
Para facilitar su conteo se utiliza la solución de Natt y Herriks que tiñe a las células mejorando
su contraste, para leucocitos se obtiene un resultado general y para conocer la población
especifica se realiza un frotis sanguíneo (Campbell, 2013). Para identificar heterófilos (Het),
eosinófilos (Eos), basófilos (Bas), linfocitos (Linf), monocitos (Mon) y trombocitos (Trom)
(Martinho, 2009).
De manera indirecta evaluamos la serie roja midiendo el porcentaje de hematocrito (Hto) que
demuestra la proporción de glóbulos rojos presentes en la sangre, además reporta alteraciones
en el suero como hemolisis, ictericia o lipemia, un hematocrito bajo puede sugerir anemia,
deshidratación o policitemia (Agustí, 2015). La hemoglobina (Hb) es una proteína contenida en
los eritrocitos y da el color rojo a la sangre, sirve para transportar el 02 y si la cantidad es
reducida indica (hipocrómico), si es normal (normocrómico) y por lo tanto su funcionamiento
(Gálvez et al., 2009). En aves la heterofilia y linfopenia son indicadores de estrés,
inmunosupresión e infecciones activas (Garbus et al., 2019). Sin embargo, en las aves las
variables hematológicas pueden modificarse por diferentes factores como es la edad, raza de
ave, locación de las especies y su comportamiento migratorio (Pistone et al., 2017; Bílcová et
al., 2017). Por lo tanto, es necesario conocer los parámetros hematológicos por zona
geográfica y el objetivo de la investigación fue conocer las variables hematológicas de las
especies más comunes de aves domésticas para tener valores de referencia clínica.
MATERIAL Y MÉTODOS
Ubicación del estudio
Las muestras sanguíneas se colectaron de aves obtenidas en el municipio de Irapuato,
Guanajuato, México, localizado a 1,715 msnm, con clima cálido subhúmedo y precipitaciones
en verano (INEGI, 2017). Las muestras se analizaron en el laboratorio de Avicultura de la
Universidad de Guanajuato, en la División Ciencias de la Vida, Campus Irapuato- Salamanca,
km 9 carretera Irapuato-Silao en Irapuato, Guanajuato.
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Aves
Se realizó un muestreo por conveniencia de 88 aves adultas, de las cuales 20 aves fueron
deportivas (Gallus gallus) 10 hembras y 10 machos, 20 Guajolotes (Meleagris gallopavo) 10
machos y 10 hembras, 8 patos azteca (Cairina moschata) 5 machos y 4 hembras, 20 patos
domésticos (Anas platyrhynchos) 10 machos y 10 hembras, 20 gansos (Anser anser) 10
hembras y 10 machos, 20 pollos de engorda (Gallus gallus domesticus), 10 hembras y 10
machos.
Frotis sanguíneo
Para el extendido se utilizaron portaobjetos comerciales deslizando la sangre sobre el
portaobjetos y secado al aire para teñir posteriormente con la tinción Dip Quick stain®.
Diferencial de leucocitos
Para realizar el diferencial de leucocitos se contaron 100 células, observando con el objetivo
100 x con aceite de inmersión, siguiendo un patrón de observación en forma de zigzag, para
obtener resultados más precisos de la población de células blancas.
Hematocrito
El capilar se colocó en la centrífuga (TG12M, microhematocrit centrifuge) de manera horizontal,
dejando el extremo sellado hacia afuera, se programó a 2500 rpm durante 10 min y se utilizó
la siguiente fórmula para obtener el porcentaje: Hto (%) = L2 (hematíes en mm) / L1 (hematíes
+ plasma en mm) * 100 (Campbell, 2013).
Hemoglobina
Se colocaron 5 mL de reactivo Drabkin (Hycel) (cianometahemoglobina) y 20 µl de sangre con
anticoagulante en un frasco ámbar, se mezcló de manera gentil para homogeneizarlas, se dejó
reposar durante 5 minutos y se midió la absorbancia a 540 nm en un espectrofotómetro (Epoch,
Biotech), el resultado fue multiplicado por 36.77 para obtener la concentración de hemoglobina
en g/dL (Samour, 2007).
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Análisis estadístico
Se realizó un análisis de varianza con un diseño completamente al azar (P<0.05), donde se
consideraron como variables dependientes el conteo de eritrocitos, leucocitos, heterófilos,
linfocitos, monocitos, trombocitos, hematocrito y hemoglobina en las aves y como variables
independientes el sexo y la especie. Para eosinófilos y basófilos se utilizó la prueba de Kruskal-
Wallis debido que los datos no presentaron normalidad. Posteriormente, se realizó una
comparación múltiple de medias con el método Tukey (P<0.05) con el programa estadístico
statgraphics centurión XV.
RESULTADOS
Las variables hematológicas en aves deportivas, ganso común, pato doméstico, pato azteca,
guajolote y pollo de engorda fueron similares para hembras y machos de la misma especie
(Cuadro 1).
Hembras
En el Cuadro 1 el número de eritrocitos totales del ganso común fue menor al compararlo con
el del pato doméstico, pato azteca y guajolote (P<0.05); así mismo, el conteo de leucocitos en
las aves deportivas fue mayor (P<0.05) que en el ganso común y pato doméstico. En el
diferencial de leucocitos, la cantidad de heterófilos fue similar entre las seis especies. Por otro
lado, los eosinófilos presentaron mayor diferencia (P<0.05) entre el ganso común y el
guajolote. El porcentaje de basófilos resulto mayor en el pato doméstico (P<0.05) en relación
a las aves deportivas y pollo de engorda. El índice de linfocitos en aves deportivas y pollo de
engorda sobresalió de lo registrado para patos domésticos, patos azteca y guajolote (P<0.05).
El número de monocitos en el guajolote fue más que el observado en el pollo de engorda, ave
deportiva y ganso común (P<0.05). Además, se observó el hematocrito más alto en el pato
azteca (P<0.05) y el más bajo en el pollo de engorda, guajolote y ganso común. La presencia
de trombocitos aumentó en el ganso común y pato azteca (P<0.05) comparado con las aves
deportivas, la concentración de hemoglobina fue mayor en el pato azteca (P<0.05).
Machos
En el Cuadro 1 el conteo de células rojas en aves deportivas y pato doméstico fue mayor
(P<0.05) que lo observado en ganso común y pollo de engorda, pero en células blancas el
pato doméstico y guajolote son mayores (P<0.05) comparados con el ganso común y ave
deportiva. Por otro lado, en el diferencial de leucocitos los valores de heterófilos, basófilos y
monocitos fueron similares para las seis especies estudiadas. Los eosinófilos fueron más
frecuentes en el pato doméstico (P<0.05) comparados con el guajolote. La cantidad de
linfocitos es mayor en aves deportivas (P<0.05) en relación al ganso común, pato doméstico,
pato azteca y pollo de engorda. El porcentaje de hematocrito resultó más elevado en aves
deportivas (P<0.05) comparadas con el ganso común, pato doméstico, guajolote y pollo de
engorda. Los trombocitos se presentaron en mayor medida en ganso común, pato doméstico
y pato azteca (P<0.05), seguidos por las aves deportivas y guajolotes, la menor cantidad
(P<0.05) la presentó el pollo de engorda. La concentración de hemoglobina destacó en el pato
azteca (P<0.05) con respecto a las demás especies.
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Cuadro 1. Parámetros hematológicos en hembras y machos de aves deportivas, ganso común, pato doméstico, pato
azteca, guajolote y pollo de engorda.
Parámetro
Ave deportiva Ganso común Pato doméstico Pato azteca Guajolote Pollo de engorda EE
%
Hembras
CCR mm3 337.3 ± 49.1 bc 313.0 ± 55.6 c 437.9 ± 77.8 a 461.0 ± 83.9 a 417.8 ± 83.9 ab 361.7 ± 38.9 abc 20.6
CCB mm3 565.9 ± 176.9 a 271.5 ± 92.2 c 356.2 ± 147.7 bc 405.2 ± 72.9 abc 442.2 ± 187.2 abc 540.5 ± 145.1 ab 47.9
Het 19.4 ± 7.6 a 27.8 ± 11.1 a 27.6 ± 8.5 a 31.7 ± 4.5 a 25.7 ± 5.9 a 22.4 ± 5.3 a 2.4
ab a ab ab b ab
Eos 1.2 ± 1.6 3.3 ± 2.6 2.9 ± 3.3 1.0 ± 1.1 0.2 ± 0.6 1.5 ± 1.9 0.6
Bas 0.0 ± 0.0 b 0.2 ± 0.7 ab 1.0 ± 1.1 a 0.0 ± 0.0 ab 0.3 ± 0.9 ab 0.0 ± 0.0 b 0.2
a ab b b b a
Lin 40.0 ± 11.5 28.3 ± 15.1 19.4 ± 6.9 21.0 ± 5.9 21.4 ± 10.8 39.5 ± 8.4 3.3
Mon 39.1 ± 9.5 bc 40.2 ± 7.0 bc 49.2 ± 6.3 ab 46.2 ± 7.8 abc 52.4 ± 7.8 a 36.6 ± 8.2 c 2.5
ab bc ab a bc c
Hto 46.6 ± 5.7 41.8 ± 3.9 47.4 ± 4.4 54.6 ± 2.0 45.1 ± 4.0 39.4 ± 4.1 1.4
Tromb µL 33.3 ± 5.9 b 43.2 ± 6.7 a 39.1 ± 6.7 ab 45.0 ± 7.6 a 39.8 ± 5.5 ab 40.7 ± 4.3 ab 1.9
c
Hb g/dL 11.9 ± 2.9 16.8 ± 5.5 b 15.0 ± 2.2 bc 32.4 ± 2.6 a 12.1 ± 0.9 c 14.0 ± 1.8 bc 0.9
Machos
CCR mm3 440.9 ± 89.8 a 318.5 ± 54.9 cd 426.7 ± 96.4 a 424.2 ± 73.0 ab 358.5 ± 55.6 ab 257.2 ± 48.3 d 22.7
bc c a abc a ab
CCB mm3 234.8 ± 63.0 221.7 ± 57.5 424.4 ± 96.8 335.2 ± 117.0 434.6 ± 120.1 379.6 ± 167.4 34.6
Het 22.6 ± 9.4 a 21.3 ± 8.3 a 28.9 ± 9.1 a 29.8 ± 3.1 a 23.9 ± 10.8 a 23.6 ± 8.8 a 2.8
Eos 0.4 ± 0.8 ab 2.3 ± 2.9 ab 2.5 ± 2.4 a 0.8 ± 1.0 ab 0.0 ± 0.0 b 0.3 ± 0.6 ab 0.5
a a a a a a
Bas 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 1.2 ± 2.2 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 0.0 ± 0.0 0.2
Lin 37.9 ± 12.1 a 27.1 ± 17.2 b 18.9 ± 8.4 b 22.4 ± 7.1 b 28.3 ± 12.5 ab 21.6 ± 6.3 b 3.6
a a a
Mon 38.9 ± 11.3 48.9 ± 16.1 48.6 ± 10.1 47.0 ± 6.0 a 47.9 ± 11.2 a 54.4 ± 12.2 a 3.8
Hto 54.1 ± 4.9 a 40.4 ± 3.4 cd 45.0 ± 3.3 bc 51.2 ± 4.3 ab 46.4 ± 4.9 b 34.6 ± 5.4 d 1.4
Tromb µL 34.5 ± 4.8 b 41.5 ± 3.6 a 42.4 ± 7.1 a 42.6 ± 1.8 a 33.8 ± 5.0 b 19.9 ± 2.1 c 1.4
Hb g/dL 16.1 ± 2.9 b 17.3 ± 6.0 b 14.3 ± 1.8 b 33.5 ± 4.1 a 14.0 ± 2.29 b 14.4 ± 1.2 b 1.0
a-d
Literales distintas por fila refieren diferencia estadística significativa (P<0.05).
CCR mm3= Eritrocitos totales por mm3, CCB mm3=Leucocitos totales por mm3, Het=heterófilos, Eos=Eosinófilos, Bas=Basófilos, Lin=Linfocitos, Mon=Monocitos,
Hto=Hematocrito, Tromb µL =Trombocitos por µL , Hb g/dL= Hemoglobina en g por dL.
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DISCUSIÓN
Las variables hematológicas son elementos básicos para conocer y evaluar la salud general
de las aves, saber los parámetros por especie y las diferencias que tienen las hembras
comparadas con los machos permite identificar desequilibrios en sus poblaciones celulares
(Fairbrother y O´Loughlin, 1990; Mitchell y Johns, 2008). Okeudo et al. (2003), Aengwanich y
Tanomtong (2007), Azeez et al. (2011), Albokhadaim (2012), Lashev et al. (2015) reportan
diferencia en eritrocitos totales, hemoglobina y hematocrito relacionado al sexo del ave. En
machos el índice aumenta y en hembras disminuye debido al nivel de testosterona que tiene
efecto directo sobre la eritropoyesis (Gonzales, 2011; Campbell, 2015). Fairbrother y
O´Loughlin (1990), Moreira et al. (2009) y en el presente estudio el efecto hormonal no fue
significativo, pero mostro tendencias similares. Es posible que haya especies de aves que
puedan manifestar de esa forma y otras no presenten el mismo efecto como se presenta el
dimorfismo sexual en aves.
Conteo de eritrocitos totales
Los eritrocitos transportan y distribuyen el oxígeno y dióxido de carbono en el cuerpo (Scanes,
2015). Okeudo et al. (2013) reportan menos CCR comparado a nuestro estudio en hembras y
machos del pato azteca. Campbell (2015) menciona que los patos tienen valores más altos de
CCR comparados con los gansos debido al fotoperiodo. Pineda-Leiva et al. (2015) obtuvieron
valores menores en machos de combate. Pero Moreira et al. (2009) describen valores mayores
a los observados en nuestro estudio para hembras y machos de guajolote. La cantidad de
eritrocitos puede asociarse al tipo de alimentación en las especies domésticas (Lashev et al.,
2015). Además, se puede presentar variación entre las especies debido a la temporada de cría
y la relación entre su peso y tasa metabólica (McKechnie, 2007).
Azeez et al. (2011) han descrito altos conteos de CCB en aves jóvenes como es para pollo de
engorda en este estudio indicando las diferencias con las otras especies puede deberse a la
edad y hematopoyesis no madura. Foo et al. (2017) indican que los caracteres sexuales
secundarios en las especies son desarrollados por el nivel de testosterona que en aves tiene
efecto inmunomodulador. Por lo tanto, la diferencia entre las especies puede ser a causa por
el desarrollo del plumaje, su color e incluso el grado de agresividad que pueden manifestar.
Diferencial de leucocitos
Es un estudio que permite distinguir los tipos de leucocitos para interpretar de manera más
precisa el hemograma (Galvez et al., 2009). Lashev et al. (2015) no observaron diferencias
entre codornices, aves de combate, pollo de engorda, guajolote y faisán. Los parámetros
observados en el presente estudio fueron menores a los promedios reportados por Scanes
(2015), excepto, en los monocitos que se presentan en cantidades mayores. Okeudo et al.
(2003) reportan menos heterófilos en hembra y macho en pato azteca, eosinófilos más altos y
linfocitos en mayor cantidad comparado a los nuestros. Oloyemi y Arewolo (2009) reportan en
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Hematocrito
Esta variable refleja el volumen que ocupan los glóbulos rojos referente a la sangre entera
(Galvez et al., 2009). De acuerdo a Lashev et al. (2015) su cantidad se relaciona directamente
con el conteo de eritrocitos y hemoglobina, pero se ha Abdi-Hachesoo et al. (2011) reportaron
diferencia entre hembras de la misma especie asociado a la altura de residencia. Okeudo et
al. (2003) observaron menor Hto en hembras y machos de pato azteca respecto a nuestro
estudio. Moreira et al. (2009) describen menor Hto en hembras y machos de guajolote que en
el presente estudio. Nuestros parámetros para esta variable corresponden a los establecidos
por Campbell (2015) para pollo de engorda, guajolote y pato doméstico. Así mismo nuestro
porcentaje observado en machos de ave deportiva es similar al grupo control de Pineda-Leyva
et al. (2015), también Oloyemi y Arewolo (2009) señalan una cantidad similar de esta variable
en pato doméstico en temporada que no llueve. Es posible que el porcentaje de Hto puede
ser diferente entre las especies debido sus hábitos de consumo de agua (Oloyemi y Arewolo,
2009), la masa corporal, adaptación a las condiciones ambientales y su tasa metabólica
(McKechnie, 2007).
Hemoglobina
La hemoglobina es una proteína que transporta oxígeno hacia los tejidos. Okeudo et al. (2003)
en pato azteca observaron menor concentración respecto a nuestros resultados. Por otro lado,
nuestros parámetros para pollo de engorda, pato doméstico y guajolote están dentro de lo
establecido por Campbell (2015). Moreira et al. (2009) reportan en guajolote una concentración
de Hb mayor comparada a este estudio, de la misma forma Pineda-Leyva et al. (2015) señalan
mayor concentración de Hb en machos de combate. La diferencia mencionada radicar en que
el hto responde a la aclimatación por la diferencia de la altura sobre el nivel del mar y al nivel
de testosterona presente en las diferentes especies de aves que responde a la eritropoyesis
(Gonzales, 2011). La hemoglobina puede variar según la disponibilidad de hierro en la dieta y
la capacidad intestinal para su absorción (Tako et al., 2010).
CONCLUSIÓN
Las variables hematológicas en aves deportivas, ganso común, pato doméstico, pato azteca,
guajolote y pollo de engorda fueron similares para hembras y machos de la misma especie.
Pero mostraron diferencias en las células blancas entre las especies estudiadas. Por los
hallazgos encontrados es necesario seguir estudiando las células sanguíneas entre las
especies debido a la localidad, la alimentación y el dimorfismo sexual.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen el apoyo recibido del Zoológico de Irapuato, Granja Mogotes, Granja
San José de la Chiripa, Granja avícola de la Universidad de Guanajuato y a todos los
particulares que colaboraron para realizar la investigación.
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