Fonaments de Nanotecnologia (G.

Biotecnología UdL)
Carlos Rey Castro (carlos.rey@udl.cat)

Tema 1: Introducción

Definición de bionanotecnología: un área interdisciplinar que combina biología, física,

química, farmacología, ciencia de materiales, ingeniería, etc. Se caracteriza por estudiar

las características y aplicaciones de materiales nano-estructurados en relación con sus

posibles aplicaciones en las ciencias de la vida: agricultura, medioambiente,

biotecnología, biomedicina, alimentación y productos farmacéuticos.

1.1. Definiciones. Escala de tamaños de partícula en la naturaleza.

Figura 1: Diagrama mostrando el rango de tamaños típicos de diferentes partículas acuáticas. Se muestran los
intervalos de longitud de onda de diferentes tipos de radiación electromagnética y los procesos de separación
más adecuados para cada rango de tamaños. (D.A.F.: “dissolved air flotation”). Fuente: (Gregory, 2006)

1
Definición de nanomaterial (NM): no existe un consenso unánime sobre el término

‘nanomaterial’. Por ejemplo, en la norma ISO/TS 80004, un nanomaterial se define

como aquel "material con cualquier dimensión externa en la nanoescala o que tiene una

estructura interna o una estructura superficial en la nanoescala", definiéndose la

nanoescala como el "rango de longitud aproximadamente de 1 nm a 100 nm". Esto

incluye tanto los nano-objetos, que son piezas discretas de material (partículas), como

los materiales nanoestructurados, que tienen una estructura interna o superficial en la

nanoescala (por ejemplo, un recubrimiento superficial de espesor o con rugosidades en

la escala nano).

En Octubre de 2011, la Comisión Europea adoptó la siguiente definición (v. Bibliografía

del Tema 1, en la carpeta de Recursos del Campus Virtual): Por «nanomaterial» se

entiende un material natural, secundario o fabricado que contenga partículas, sueltas o

formando un agregado o aglomerado y en el que el 50% o más de las partículas en la

granulometría numérica presente una o más dimensiones externas en el intervalo de

tamaños comprendido entre 1 nm y 100 nm.

En casos específicos y cuando se justifique por preocupaciones de medio ambiente,

salud, seguridad o competitividad, el umbral de la granulometría numérica del 50%

puede sustituirse por un umbral comprendido entre el 1% y el 50%.

• Partícula: una parte diminuta de materia con límites físicos definidos.

• Aglomerado: un conjunto de partículas débilmente ligadas o de agregados en

que la extensión de la superficie externa resultante es similar a la suma de las

extensiones de las superficies de los distintos componentes.

2
 • Agregado: una partícula compuesta de partículas fuertemente ligadas o

fusionadas.

Un material debe considerarse incluido en la definición de nanomaterial cuando la

superficie específica por unidad de volumen del material sea superior a 60 m2/cm3. No

obstante, un material que, según su granulometría numérica, es un nanomaterial debe

considerarse que respeta la definición incluso si tiene una superficie específica inferior

a 60 m2/cm3.

Figura 2: Algunos ejemplos de nanomateriales: Pigment red 101, Fe2O3 (arriba izda.); Pigment yellow 42, FeOOH
(arriba dcha); Gold nanorods from JRC (abajo izda.); Ag nanoparticles from JRC (abajo dcha.). Fuente: Towards
a review of the EC Recommendation for a definition of the term "nanomaterial" (Part 1), p.124-125

En ocasiones se distinguen los nanomateriales según su origen: antropogénico vs.

natural, y en el primer caso también puede diferenciarse según si han sido diseñados

con un propósito específico (‘engineered NMs’), o si se producen incidentalmente como

3
subproductos en procesos mecánicos o industriales (‘incidental NMs’). En el Tema 2

veremos una clasificación más detallada de los diferentes tipos de nanomateriales.

A menudo se emplea el término coloide para referirse a ciertos sistemas en la escala

nano. Un coloide es un tipo de sistema disperso. Un sistema disperso consiste en un

material o una fase dispersa, distribuida de manera continua en un medio o dispersión.

El material dispersado puede estar formado por partículas con tamaños que pueden

abarcar desde las dimensiones atómicas o moleculares hasta otros que se pueden medir

en milímetros. En consecuencia, un medio conveniente de clasificar los sistemas

dispersos se basa en el diámetro medio de las partículas del material dispersado. Según

el tamaño de la fase dispersada habrá dispersiones moleculares, dispersiones coloidales

y dispersiones gruesas (v. Figura 3).

Figura 3: Características de los sistemas dispersos según el intervalo de tamaño (Estelrich, 2002)

Los límites de tamaño son algo arbitrarios, por lo que no hay ninguna transición

evidente entre las dispersiones moleculares y las coloidales o entre las coloidales y las

gruesas. Así, ciertas macromoléculas, como los polisacáridos, proteínas y polímeros en

4
general, tienen el tamaño suficiente para ser clasificados tanto en las dispersiones

coloidales como en las dispersiones moleculares. Por otra parte, hay suspensiones y

emulsiones que contienen un intervalo ancho de tamaño de partícula, por lo que las

partículas más pequeñas pertenecen al intervalo coloidal y las más grandes se clasifican

como gruesas. Cuando se hace referencia a una partícula coloidal, el significado de esta

palabra se extiende tanto a las partículas duras (las típicas partículas sólidas) como las

partículas blandas, constituidas por gases (burbujas) o líquidos (emulsiones y

dispersiones), y a las agrupaciones de moléculas (micelas).

¿Cuál es el interés de los nanomateriales y los sistemas coloidales?.

Por una parte, los sistemas vivos están formados por una gran cantidad de proteínas,

polielectrolitos y moléculas anfifílicas que se encuentran en medio acuoso. El tamaño

de estas moléculas les confiere propiedades coloidales. Los procesos vivos implican el

control y la transformación de los conjuntos coloidales, y muchas enfermedades están

asociadas con funcionamientos anómalos del ámbito coloidal. Las propiedades de

muchos fluidos biológicos (sangre, fluidos digestivos, líquido sinovial, etc.) se deben a

su carácter coloidal. Los virus son microorganismos que se encuentran en la escala de

tamaños característica de los NMs. La adhesión entre células y la interacción antígeno-

anticuerpo puede tratarse con los mismos modelos matemáticos que se aplican a la

coagulación de partículas coloidales.

Por otra parte, numerosos procesos industriales están relacionados con sistemas

coloidales y/o incluyen nanomateriales. En este sentido, cabe destacar la industria

alimentaria, con una dependencia muy grande de la química coloidal. Por su parte, los

técnicos agrícolas necesitan un conocimiento profundo de las propiedades coloidales

5
del suelo con el fin de obtener un crecimiento óptimo de las plantas. En la industria

papelera, tanto las fibras celulósicas utilizadas como malla, como la arcilla que sirve de

apoyo para mejorar la opacidad del papel y proporcionarle brillo y textura, son coloides.

Las tintas utilizadas en los bolígrafos y en las impresoras deben su fluidez a sus

propiedades coloidales, así como una gran cantidad de cosméticos y pinturas. Los

productos cerámicos, desde la porcelana china hasta los sencillos ladrillos, están

formados por arcilla. Muchas de las industrias textiles y de plásticos dependen también

de la química coloidal. Los principios coloidales se aplican también en la preparación

de la cerveza y la clarificación del vino, en la preparación de pasteles, en la obtención

de la goma de los neumáticos, en la extracción del petróleo y derivados de los depósitos

geológicos, y en la fabricación de nuevos materiales cerámicos con aplicaciones

electrónicas y espaciales. Los aerosoles usados en productos domésticos, como las

cremas de afeitar y las lacas para el pelo, así como los sprays insecticidas o plaguicidas

son sistemas coloidales. La clarificación del agua y del aire son problemas esencialmente

coloidales y las propiedades adsorbentes de los coloides y NMs serán empleadas en el

futuro para la eliminación y recuperación de productos industriales que contaminan el

aire y las aguas. En el Tema 6 veremos con más detalle algunos ejemplos de aplicaciones

concretas de los NMs en estos ámbitos.

1.2. Morfología. Tamaño. Área superficial.

Una de las características más importantes de los nanomateriales es su dimensión física.

Muchas de las propiedades de las dispersiones de nanopartículas (y las dispersiones

coloidales en general) de importancia científica e industrial (por ejemplo, el área

superficial específica, la viscosidad, la velocidad de difusión y sedimentación, la

6
velocidad con que se filtran, los procesos de agregación, la capacidad de adsorción o su

actividad farmacológica) dependen de su tamaño y/o de su forma. Además, y

especialmente en la industria alimentaria y la farmacéutica, el tamaño de la partícula

puede afectar tanto al proceso de fabricación como a las características organolépticas

del producto y también tiene una gran influencia sobre la estabilidad de este (esta

influencia es extrema en las suspensiones y las emulsiones, pero también es importante

en los sólidos, cuya reactividad está determinada por el área superficial).

1.2.1. Descriptores de la forma y el tamaño de los nanomateriales.

La forma de las nanopartículas y coloides también tiene una importancia capital. Puede

ser muy variada e influye en su comportamiento. Veamos un ejemplo: el ácido

cromoglícico1 (un fármaco administrado por inhalación para controlar los ataques de

asma) se ha comprobado que se deposita de manera adecuada sobre el tracto

respiratorio cuando se presenta como cristales en forma de varilla.

Para relacionar el comportamiento fisicoquímico de los nanomateriales con su tamaño

y su forma, hay que reducir la forma a una forma sencilla. La más sencilla, pero no

siempre la más frecuente, es la forma esférica. En muchos casos sirve de modelo para

estudiar las nanopartículas en dispersión ya que, con una única dimensión, el radio, se

define el tamaño. Representa muchos casos reales, como las gotas de las emulsiones o

las de las dispersiones de polímeros en agua (por ejemplo, el látex de poliestireno2), si

bien en el caso de las partículas blandas puede haberse deformado por la acción de

1https://en.wikipedia.org/wiki/Cromoglicic_acid
2https://www.thermofisher.com/es/es/home/life-science/cell-analysis/qdots-microspheres-
nanospheres/idc-surfactant-free-latex-beads/latex-bead-technical-overview.html
No confundir con el látex natural, que es una resina vegetal: https://es.wikipedia.org/wiki/Látex

7
fuerzas mecánicas o de un empaquetamiento de alta densidad. Todas las partículas con

un elevado grado de simetría pueden asimilar su forma a la de una esfera (proteínas

globulares, glóbulos de grasa, gránulos de almidón, fullerenos…). En estos casos, el

diámetro que se obtiene es el diámetro equivalente de la esfera, que se define como el

diámetro de una esfera que es equivalente al de la partícula en alguna propiedad

medible.

Cuando la forma se desvía del esférico, se pueden considerar como modelos los

elipsoides de revolución. El elipsoide de revolución es un cuerpo tridimensional que se

obtiene de la revolución completa de una elipse alrededor de uno de sus ejes (Figura

4). Definamos ‘c ’ como el semidiámetro del elipsoide medido a lo largo del eje de

rotación (1/2 de la distancia entre polos), y ‘a ’ como el semidiámetro medido en el

plano ecuatorial. Cuando c<a tenemos una partícula de tipo elipsoide oblato

(achatado); cuando c >a, tenemos un elipsoide prolato (elongado). La relación axial (o

‘relación de aspecto’) del elipsoide (c:a)3 es una medida de la desviación de la

esfericidad de una partícula.

Figura 4: Elipsoides de revolución (esferoides): oblato si c < a (izda); prolato si c > a (dcha).
Fuente: Ag2gaeh - Own work, CC BY-SA 4.0, https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=44044008

3 En los esferoides se suele definir como el cociente entre la longitud polar y la ecuatorial. Sin embargo,
la convención más extendida para definir la relación de aspecto es el cociente longitud máxima /
longitud mínima.

8
Evidentemente, cuando a=c tenemos una partícula esférica. Si la partícula se aplana

mucho, se parecerá a un disco caracterizado por su radio y su grosor. Si se alarga

mucho, tomará la forma de una varilla de radio y longitud determinados. En cambio, si

las partículas se aplanan y se alargan (en cuyo caso tendríamos elipsoides con 3 ejes de

diferente longitud), su forma será similar a la de unas tablillas o cintas. En el límite en

el que una de las dimensiones se alarga mucho en comparación con las otras dos, se

obtienen filamentos (V2O5, muchos polímeros, como el polietileno y el caucho, etc.) o

agujas (cristales de grasa, azúcar o hielo). También existen formas mucho más

complejas, con diferentes grados de asimetría. En general, las partículas de formas

diferentes a la esférica se denominan anisométricas. Algunos materiales (como p.ej. los

óxidos magnéticos de hierro) se pueden diseñar con diferentes formas de partícula

(Figura 5) mediante un control cuidadoso de las condiciones de síntesis (Alejandro G.

Roca, 2019)4.

Figura 5: Representación ideal de diferentes tipos de nanopartículas magnéticas

de óxido de hierro anisométricas (Alejandro G. Roca, 2019).

4 https://doi.org/10.1016/j.addr.2018.12.008

9
En el caso de las macromoléculas, se pueden encontrar en estructuras compactas y

altamente organizadas (proteínas), o también en forma de cadenas desorganizadas

(muchos polisacáridos y proteínas desnaturalizadas). Además, pueden formar

agregados (Figura 6) que pueden ser tan grandes que pueden llegar a tener dimensiones

macroscópicas, lo que dará lugar a un entramado tridimensional (gel). Las

macromoléculas (especialmente las proteínas) pueden adsorber en la superficie de

partículas sólidas, gotas o burbujas, o pueden hacer de puente entre estas entidades y

contribuir a la agregación de las partículas.

Resulta evidente que la descripción de la forma y al tamaño están asociadas entre sí.

Con frecuencia, no es posible definir ambas magnitudes de una forma sencilla. Por lo

tanto, existen multitud de descriptores diferentes (maneras de caracterizar la forma y

el tamaño de las partículas). Tan sólo nos limitaremos a los más empleados.

Figura 6: Tipos de entidades estructurales encontrados en coloides alimentarios: (a) partículas esféricas
dispersas; (b) partículas esféricas agregadas; (c) partículas no esféricas; (d) macromolécula desorganizada; (e)
macromolécula compacta; (f) macromoléculas asociadas a un gel, (g) macromolécula adsorbida sobre la
superficie de una partícula; (h) macromoléculas que unen partículas (Estelrich, 2002)

10
Generalmente, los NMs poseen inherentemente un cierto grado de dispersión de

tamaño, y por lo tanto el tamaño reportado debe reflejar este grado de dispersión

reportando tanto el tamaño NM como la distribución de tamaño del material, es decir

el valor medio ± la desviación estándar (v. sección siguiente).

Además, las diferentes técnicas analíticas miden diferentes parámetros de tamaño, lo

que hace que cualquier comparación entre estudios sea una cuestión difícil. Otro

aspecto importante que debe notificarse es si el tamaño medido es el de los NM

primarios o el de sus agregados. Mientras que el tamaño de las partículas primarias

determina las propiedades inherentes de los NMs, el tamaño de las partículas agregadas

influye en el destino, el transporte, la biodisponibilidad y la absorción de los NMs. Por

lo tanto, el tamaño de las partículas puede ser una propiedad dinámica sujeta a cambios

temporales y que depende del medio de dispersión.

Figura 7: Diámetros equivalentes a partir de una forma de partícula irregular (James Ranville, 2015)

11
Como ya hemos dicho, sólo una partícula esférica puede ser descrita por un solo número

(el diámetro o el radio). Una partícula no esférica puede poseer múltiples medidas de

longitud y, por lo tanto, presentar una mayor complejidad para su caracterización. A

menudo, el tamaño de las partículas no esféricas se describe como la "esfera

equivalente" que comparte alguna propiedad de la partícula real (Figura 7). Esta

propiedad compartida puede ser una característica física como el volumen equivalente

de la partícula o puede ser una respuesta equivalente del método instrumental de

medida del tamaño, como el área transversal en una medición de microscopía

electrónica (EM). Por lo tanto, al utilizar distintos equipos de medición debe esperarse

como resultado distintos valores de diámetro. También hay que señalar que dos

partículas de formas y tamaños diferentes podrían poseer el mismo diámetro

equivalente. Por este motivo, podría ser necesario recurrir a otras métricas y

descriptores para analizar posibles diferencias sutiles en las propiedades de ambos NMs.

Algunos tipos de diámetros equivalentes:

a) Diámetro de la esfera de volumen equivalente:

Diámetro de una esfera que posee el mismo volumen (V) que la partícula analizada:

1/3
⎛ 6V ⎞
dV = ⎜ (1.1)
⎝ π ⎟⎠

b) Diámetro de la esfera de superficie equivalente:

Diámetro de una esfera que posee la misma área superficial (S) que la partícula

analizada:

12
 1/2
⎛ S⎞
d SA = ⎜ ⎟ (1.2)
⎝π⎠

c) Diámetro de la esfera de masa equivalente:

Diámetro de una esfera que posee la misma masa (m) que la partícula analizada (de

densidad r). Esta fórmula sólo es válida si todas las partículas tienen la misma densidad.

1/3
⎛ 6m ⎞
dW = ⎜ (1.3)
⎝ πρ ⎟⎠

d) Diámetro de la esfera de área proyectada equivalente:

Diámetro de una esfera que posee la misma área proyectada (A) que la partícula

analizada. Esta medida depende de la orientación de la partícula en el momento de la

medición.

1/2
⎛ 4 A⎞
dA = ⎜ (1.4)
⎝ π ⎟⎠

La Figura 8 muestra una proyección de una partícula irregular (trazo azul). Si se

establece el área de dicha proyección es posible estimar el diámetro de un círculo

equivalente (figura de trazo rojo). La microscopía electrónica permite la estimación de

dA. En la misma Figura se puede ver cómo dependiendo en qué dirección se obtenga el

área proyectada, las áreas serán diferentes y consecuentemente se obtendrán distintos

diámetros equivalentes.

13
 a

Figura 2.5 indica que dependiendo en que dirección se obtenga el área proyectada, las
count a large number of pmicles in order to generate meaningful data
áreas serán diferentes y called
diameters are consecuentemente se obtendrán distintos diámetros
statistical diameters.
equivalentes. ~fthe projected areas of the particles are compared with the areas of
series of circles the projected area diameters generated describe the
in two dimensions for the orientation in-which they are
measured. In microscopy this is usually the projected area in stable
orientation but in certain cases the particles may be in a less stable
to generate a lower value (Figure 2.2).
For a single particle the expectation of a statistical diameter and its
coefficient of variation may be calculated from the following equations
[I] (Figure 2.3).

Figura 2.4. Conceptualización de área proyectada.

Fig. proyectada
Figura 8: (Arriba) Área 2.2 The projected
equivalentearea a particle
(líneaofroja) is orientation
de una partícula irregulardependent.
(línea azul). (Abajo) Vista de
Martin's diameter ( d ~is) 246 pm,the Feret diameter ( d ~ is
) 312 pn
lasand the proyectadas
áreas projected area diameter
según in stable
la orientación en orientation
tres ejes cartesianos is 2521997)
(do,,& (Allen, pn
(the particle is the same as in Figure 2.1).
e) Diámetro de la esfera de velocidad terminal de sedimentación equivalente (Diámetro
Figura 2.5. Vista de las áreas proyectadas según la orientación. Fuente: Allen, 2003.
de Stokes):

Diámetro de una esfera que posee la misma velocidad de sedimentación5 (vg) y densidad

(r) que la partícula analizada. Esta medida es característica de los métodos basados en

la centrifugación.
Fig. 2.3 (a) Definition of unrolled diameter d~ [radius R = ( d /2)1;
~
(b) unrolled curve.
1/2
⎡ 18vg µ ⎤
dsed = ⎢ ⎥ (1.5)
⎢⎣ ( ρ − ρ0 ) g ⎥⎦

f) Diámetro de la esfera de coeficiente de difusión equivalente (Diámetro de Stokes-

Einstein):

A menudo también se denomina diámetro hidrodinámico. Es el diámetro de una esfera

que posee el mismo coeficiente de difusión6 (D) que la partícula analizada. Esta medida

5 En un fluído de las mismas características (viscosidad µ y densidad r0) en régimen laminar.

6 En un fluído de las mismas características (viscosidad µ) en régimen laminar.

14
 es característica de los métodos basados en dispersión de luz dinámica (DLS), que

veremos más adelante.

k BT
dh = (1.6)
3πµtrace
clarificar este concepto. Dependiendo en que dirección se D la línea de bisección
del área, se obtendrán diferentes diámetros de Martin.
Donde kB y T son la constante de Boltzmann y la temperatura absoluta, respectivamente.

g) Diámetro de Feret (dF).

dM
Línea que bisecta
el área
El diámetro de Feret es usado con proyectada
frecuencia en microscopía electrónica. Este parámetro

representa la distancia entre dos líneas paralelas que son tangenciales al contorno de la
Figura 2.6. Diámetro de Martin
proyección de la partícula, tal como puede observarse en la Figura 9. Pueden

determinarse diferentes diámetros de Feret de acuerdo a la dirección con la que se

2.2.8. Diámetro de Feret (dF)
tracen las tangentes, aunque lo más habitual es tomar los valores mínimo (dF,min) y
El diámetro de Feret, al igual que el diámetro de Martin, es usado en microscopía.
máximo
En este caso (dF,max).
representa Dichos valores,
la distancia nolíneas
entre dos obstante, pueden
paralelas depender
que son del plano
tangenciales al de proyección
contorno de la proyección de la partícula, tal como puede observarse en la Figura 2.7.
de la partícula (Figura 9).
Como sucede con el diámetro de Martin, pueden determinarse diferentes diámetros de
Feret de acuerdo a la dirección con la que se tracen las tangentes.

dF

Figura 2.7. Diámetro de Feret

Figura 9: Diámetro de Feret7

2.2.9. Diámetro de tamiz (dA)

Ejemplo: Supongamos que tenemos un cierto nanomaterial de oro cuyas partículas
Veremos adelante que un método de medición de tamaño de partículas es
(idénticas)
tamizar partículastienen formaque
en tamices de paralelepípedo rectangular,
poseen mallas con aperturas con dimensiones
cuadradas, tal 5´10´30 nm.
como se observa en la Figura 2.8. El diámetro del tamiz se corresponde con la
apertura de la malla.
7 https://en.wikipedia.org/wiki/Feret_diameter

15
Calcula los diámetros equivalentes de una esfera con el mismo volumen (dv), la misma

masa (dw) y la misma área superficial (dSA). Densidad macroscópica (Au) = 19,3 g/cm3.

Solución: el volumen de un paralelepípedo rectangular

(ortoedro) es igual al producto de sus aristas, mientras

que el área total es la suma de las áreas de sus seis caras

(simétricas dos a dos):

V = a × b × c = 5 × 10 × 30 nm 3 = 1500 nm 3 (1.7)
3
g ⎛ 1 cm ⎞
m = ρ × V = 19,3 3 × ⎜ 7 ⎟ × 1500 nm 5 = 2,895 × 10−17 g (1.8)
cm ⎝ 10 nm ⎠

S = 2 × (ab + bc + ac) = 2 × (50 + 300 + 150 ) nm 2 = 1000 nm 2 (1.9)

Así, obtenemos los siguientes valores:

1/3
⎛ 6 × 1500 nm 3 ⎞
dV = ⎜ ⎟⎠ = 14,2 nm (1.10)
⎝ π
1/3
⎛ 6 × 2,895·10−17 g ⎞
dW = ⎜ = 14,2 nm (1.11)
⎝ π × 19,3·10 g·nm ⎟⎠
−21 −3

1/2
⎛ 1000 nm 2 ⎞
d SA = ⎜ ⎟⎠ = 17,8 nm (1.12)
⎝ π

Como podéis observar, los valores de dV y dW coinciden (si la densidad del material es

correcta), pero son diferentes de dSA. Cada criterio de esfera equivalente proporciona

un resultado diferente, por lo tanto, diferentes métodos instrumentales de análisis

pueden dar lugar a descripciones del tamaño diferentes. ¡No es sencillo responder a la

pregunta de cuál es el tamaño de un nanomaterial…!

Para entreteneros, podéis pensar cuál sería el valor de dFmin, dFmax, o dA (suponiendo el

área proyectada según cada uno de los tres ejes ortogonales paralelos a las aristas del

cristal).

16
Por último, definiremos los factores de forma más sencillos empleados habitualmente:

h) Esfericidad8.

Es una medida del grado de cercanía de la forma de la partícula a la de una esfera

perfecta. Se define como el cociente entre el área superficial de una esfera equivalente

del mismo volumen y el área superficial real de la partícula:

2
⎛d ⎞
ψ = ⎜ V ⎟ ; ψ ≤1 (1.13)
⎝ d SA ⎠

Donde y = 1 corresponde a una partícula perfectamente esférica.

Ejemplo: ¿Cuál sería la esfericidad de las partículas del nanomaterial de oro del ejemplo

anterior? Respuesta:

2
⎛ 14,2 nm ⎞
ψ =⎜ = 0,634 < 1 (1.14)
⎝ 17,8 nm ⎟⎠

i) Circularidad.

Otra medida de la forma de la partícula es la “cercanía” a un círculo perfecto. El

parámetro que cuantifica esta propiedad se denomina circularidad y se define como el

cuadrado del cociente entre el perímetro de un círculo que tiene igual área proyectada

(A) que la partícula y el perímetro de la partícula (P):

4π A
f circ = ; f circ ≤ 1 (1.15)
P2

8 https://en.wikipedia.org/wiki/Sphericity

17
Si nos fijamos en la Figura 8 (arriba), la circularidad sería igual a (perímetro círculo

rojo/perímetro azul de la partícula)2.

Figura 10: Circularidad de diferentes partículas (www.malvern.com)

Es posible observar (Figura 10) que partículas que tienen una forma en el área

proyectada muy diferente conducen al mismo valor de circularidad. Esto indica que la

observación de un único factor de forma puede conducir a errores importantes. Por esta

razón es recomendable evaluar diferentes factores de forma. Entre otros factores de

forma conocidos cabe mencionar la “convexidad”, “elongación”, “cubicidad”, etc.

j) Relación de aspecto (alargamiento): ‘aspect ratio’.

Es uno de los factores de forma más comunes. Se define como el cociente entre los

valores mínimo y máximo del diámetro de Feret9:

d F ,min
AR = ; AR ≤ 1 (1.16)
d F ,max

La relación de aspecto varía desde casi cero para una partícula muy alargada (p.ej., un

nanotubo), hasta casi la unidad para una partícula equiaxial.

9Según norma ISO/DIS 19749(en) Nanotechnologies — Measurements of particle size and shape
distributions by scanning electron microscopy. NOTA: podéis encontrar autores que definen el AR
como el valor inverso (dF,max/dF,min).

18
Ejemplo: ¿Cuál sería la relación de aspecto de las partículas del nanomaterial de oro

del ejemplo anterior? Respuesta: depende de qué plano de proyección de la partícula

consideremos. Los valores máximo y mínimo10 serán:

5 nm 5 nm
ARmax = = 0,5 ; ARmin = = 0,167 (1.17)
10 nm 30 nm

Si consideramos un promedio estadístico de una población suficientemente grande de

partículas orientadas al azar de forma paralela sobre cualquiera de sus caras, podríamos

estimar un valor medio de la relación de aspecto:

1 10 nm 1 5 nm 1 5 nm
ARmedio = × + × + × = 0,333 (1.18)
3 30 nm 3 30 nm 3 10 nm

1.2.2. Distribuciones de tamaño de partícula. Polidispersidad.

En la mayoría de los casos, las diferentes partículas de una dispersión tendrán tamaños

diferentes, en mayor o menor grado. Estos sistemas se denominan heterodispersos o

polidispersos. Casi todos los coloides y nanomateriales son polidispersos. Las escasas

excepciones en las que todas las partículas de una dispersión son exactamente del

mismo tamaño son los sistemas denominados homodispersos o monodispersos (ej.

disoluciones de una proteína pura, ciertos látex sintéticos diseñados para aplicaciones

específicas, etc.). En principio, los sistemas heterodispersos pueden ser fraccionados

mediante una técnica adecuada para obtener fracciones más o menos monodispersas.

En un sistema polidisperso existe una distribución de valores de la propiedad

característica de cada partícula (tamaño, forma, masa, volumen, superficie específica,

10 Suponiendo planos de proyección paralelos a las caras de la partícula

19
etc.) en torno a un valor promedio. P.ej., en el caso del tamaño, hablamos de

distribuciones de tamaño de partícula (‘particle size distribution’, PSD). Veamos cómo

pueden caracterizarse estas distribuciones en una población heterodispersa.

• Distribuciones discretas de tamaño.

A menudo, lo más conveniente desde el punto de vista práctico es suponer que la

suspensión contiene cantidades conocidas de partículas en rangos de tamaño discretos.

De esta forma, la distribución de tamaños de la población de partícula puede

representarse en forma de histograma, como en la Figura 11. De hecho, los métodos

experimentales para determinar el tamaño de las partículas suelen dar resultados en

esta forma.

Figura 11: Distribuciones discretas del tamaño de partícula representadas en forma de histogramas.

Intervalos de tamaño: a) 3 μm; b) 1 μm (Gregory, 2006)

Si asignamos un valor medio de tamaño a cada intervalo del histograma, di, y

denominamos Ni al número de partículas que tienen tamaños comprendidos en dicho

intervalo, entonces podemos calcular el valor medio y la varianza del tamaño de la

población como:

20
 k k

∑N d ∑N d
i i i i k
dn = i=1
k
= i=1
= ∑ f i di (1.19)
NT
∑N i
i=1

i=1

∑ N (d − d )
k 2

( )
i i n k 2
σ =
2
n
i=1
= ∑ f i di − d n (1.20)
NT i=1

Donde d puede ser cualquiera de las formas de determinar el tamaño de las partículas

k
que hemos visto (dW, dV, dsed, dh, dFmax, etc.), N T = ∑ N i es el número total de partículas
i=1

de la muestra, k es el número de intervalos de tamaño empleado en el histograma, y fi

es la fracción de partículas que tienen un tamaño comprendido en la clase i. Esta forma

de promediar está basada en el número de partículas (indicado con un subíndice ‘n’ en

las ecuaciones) y por eso se denomina ‘tamaño promedio en número’ : ‘number average

size’, ‘number-weighted mean diameter’, etc.). Pero hay otras formas de presentar las

distribuciones de tamaño de partícula, como p.ej. los promedios en masa (o volumen)11:

k k

∑ N i di4 ∑m d i i
dw = i=1
k
= i=1
(1.21)
mT
∑N d i
3
i
i=1

Donde mi es la masa de las partículas que pertenecen al intervalo i.

En este último caso, estamos describiendo la población de partículas como la masa (o

volumen) de partículas con un diámetro comprendido en un cierto intervalo de valores

(en lugar del número de partículas con dicho diámetro). En el caso de partículas del

mismo material, las distribuciones en volumen y en masa son idénticas (ya que la masa

11 ‘mass (or volume) weighted mean diameter’

21
es proporcional al volumen, y la densidad es constante). La ventaja práctica de este tipo

de distribuciones es que, a menudo, es más fácil determinar la masa de las fracciones

que el número de partículas.

No obstante, es importante señalar que las distribuciones en número y en volumen (o

masa) de una misma población de partículas son muy diferentes (v. Figura 12): la

distribución en volumen da mucho más ‘peso’ a las partículas grandes que la

distribución en número (debido a que el volumen es proporcional al cubo del diámetro).

Por lo tanto, la distribución ponderada en peso habitualmente es más ancha y con picos

mucho menos pronunciados que la distribución ponderada en número.

Figura 12: Distribuciones del tamaño de partícula promediadas con respecto al número y la masa,
para una misma población de partículas. (Gregory, 2006)

De hecho, el cociente entre los valores de d w y d n es una medida de la amplitud de la

distribución. Únicamente en el caso de que la dispersión sea exactamente

monodispersa, coincidirán ambos valores.

22
• Distribuciones continuas de tamaño:

Como puede observarse en la Figura 11, a medida que el espesor de los intervalos de

tamaño elegidos se reduce, el histograma se aproxima a la forma de una curva continua,

que denominaremos función de probabilidad, o función de frecuencia, f(x). Esta función

se define de forma que la fracción de partículas12 con un tamaño comprendido entre x

y x+dx es f(x)dx. Así, las ecuaciones equivalentes a las ecs. (1.19) y (1.20) en la

formulación continua son:

d = ∫ x ⋅ f (x) dx (1.22)
0

( )
∞
2
σ2 = ∫ x−x f (x) dx (1.23)
0

Los valores de la media y la varianza se pueden calcular tanto para distribuciones en

número como en masa. En las ecs. anteriores, la variable x puede representar cualquiera

de los descriptores del tamaño que hemos visto (dFmax, etc.).

En ocasiones, también se define la función de distribución acumulativa, F(x), como la

fracción de partículas con tamaño inferior a x:

F(x) = ∫ f (x) dx; F(∞) = 1 (1.24)

0

Cuando se expresa la función acumulativa como porcentaje, se suele expresar como “%

de partículas menores que…”. La relación entre f(x) y F(x) se muestra en la Figura 13.

12 Se puede definir como fracción en número, en masa, etc.

23
 Figura 13: Función de frecuencia y distribución acumulativa. La distribución mostrada es log-normal, Ecuación
(2.11), con mediana, xg = 10 y desviación estándar logarítmica, Ln σg = 0,75. (Gregory, 2006)

Descriptores del valor central de la PSD:

Tres importantes descriptores de una PSD son la media, la mediana y la moda de la

distribución. En el caso de una PSD perfectamente simétrica estos descriptores tienen

el mismo valor (v. Figura 14). Los valores numéricos de estos descriptores de tamaño

dependen de la métrica utilizada para cuantificar la cantidad de NM en cada clase de

tamaño (número de partículas, el área de superficie, masa o volumen).

• Moda: La moda la característica más obvia de una PSD y representa la clase de

tamaño más frecuente (la barra más alta del histograma). Aparece como el "pico"

obvio en la distribución y, por lo tanto, es la característica de la PSD que más a

menudo atrae la atención en un sentido descriptivo. Si la PSD presenta un único

máximo relativo, decimos que la PSD es unimodal (monomodal). Si presenta más

de un valor máximo (relativo) decimos que es multimodal (bi-modal, tri-modal…).

En este caso, las modas múltiples pueden definirse como los puntos medios de los

diversos picos. No se suele utilizar de manera cuantitativa, favoreciéndose la media

y las medianas. Tampoco es visible en la distribución acumulativa.

24
• Mediana: El valor de la mediana es el tamaño que divide la población de NM en la

mitad. A menudo se representa como d50 o x50. El valor depende claramente de qué

parámetro se utiliza para informar sobre la población de partículas. La mediana

tiene un valor mínimo en los PSD basados en número, mayor en los PSD basados en

superficie y el valor más grande en los PSD basados en masa (volumen). Es el valor

central que se muestra en un gráfico de PSD acumulativo. Otros descriptores

comunes de la PSD acumulativa son d10 (‘10% de las partículas tienen un diámetro

más pequeño de’) y d90 (‘90% de las partículas tienen un diámetro más pequeño

de’).

• Media: La media es posiblemente el descriptor más valioso del "centro" de la PSD.

Representa un valor numérico del tamaño promedio de la PSD. La media es

"ponderada" por el parámetro utilizado para informar la cantidad de partículas en

cada clase de tamaño (número, superficie, masa/volumen). V. eqs. (1.19), (1.21) y

(1.22).

Figura 14: Relación general entre la media, la mediana y la moda en distribuciones unimodales de diferente tipo
de asimetría (skewness). Fuente 13

13 Diva Jain - https://codeburst.io/2-important-statistics-terms-you-need-to-know-in-data-science-

skewness-and-kurtosis-388fef94eeaa, CC BY-SA 4.0,
https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=84219892

25
Descriptores de la amplitud de la PSD:

En los sistemas polidispersos un descriptor clave de la PSD es su ancho, y se pueden

tomar varios enfoques para definirlo. Para las macromoléculas es común reportar un

índice de polidispersidad (PDI). Éste se obtiene a partir de la relación entre el peso

molecular promedio (en peso) y el peso molecular promedio (en número), con valores

que aumentan a partir de 1 a medida que aumenta la polidispersidad. La amplitud

(‘span’) del PSD entre dos valores concretos se utiliza a menudo y viene dada por:

d90 − d10
Span = (1.25)
d50

Los valores de d10, d90 y d50 se obtienen fácilmente a partir de la distribución cumulativa.

La PSD también puede describirse numéricamente por la moda (es decir, el máximo de

pico) y el ancho de pico a media altura (a la mitad del máximo). Así pues, en los dos

puntos del eje vertical que representan 1/2 de la altura de la moda, el rango de tamaños

puede usarse como un descriptor del ancho de la PSD.

El descriptor típico de la heterogeneidad de tamaño en una PSD es la varianza, s: v.

ecs. (1.20) y (1.23). Cuanto mayor es la varianza, mayor es el grado de polidispersidad

de la PSD. Si la PSD se distribuye de forma normal alrededor de un valor medio, se

puede aplicar un análisis estadístico para describir el ancho del PSD. Por ejemplo, en

una distribución Gaussiana podemos decir que el 68,27% y el 95,45% de la población

de NM se encuentra dentro de ±1s o ±2s de la media, respectivamente.

La distribución normal o Gaussiana sigue la siguiente ecuación:

26
 ⎛ ⎡ 2
⎞
1 x− x⎤
f (x) = ⎜
exp − ⎢ ⎥ ⎟ (1.26)
σ 2π ⎜⎝ ⎢⎣ 2σ ⎥⎦ ⎟⎠

Descriptores de la forma de la PSD:

A menudo los PSD no representan un conjunto de diámetros normalmente distribuidos.

Por lo tanto, la asimetría y la forma no-gaussiana del pico deben ser descritas por los

parámetros de asimetría (Figura 15) y curtosis (que no veremos en este curso).

Figura 15: Distribuciones unimodales de diferente tipo de asimetría (skewness). Fuente 14

• Asimetría (skewness): Las PSD pueden estar a menudo distribuidas de forma no

uniforme alrededor del valor central (por ejemplo, la media). La presencia de unas

pocas partículas grandes puede crear una "cola" en el tamaño más grande de la

distribución y, por lo tanto, causar que la PSD esté positivamente sesgada.

Un efecto similar podría verse con una cola en el tamaño más bajo de la distribución,

lo que daría lugar a un sesgo negativo. El sesgo, que es el tercer momento estadístico

central de la PSD se define como (en una distribución en número):

14 https://es.wikipedia.org/wiki/Asimetr%C3%ADa_estad%C3%ADstica

27
 ∑ N (d − d )
k 3

( )
i i n k 3
µ3 = i=1
= ∑ f i di − d n
NT i=1 (1.27)

A menudo se emplea el valor normalizado µ3 σ 3 (coeficiente de asimetría de Fischer).

La asimetría de una distribución normal es cero. A medida que las colas de la

distribución se vuelven más importantes (mayor polidisperidad) la asimetría puede

verse muy afectada.

Distribución log-normal:

A menudo la PSD de NMs reales no está distribuida normalmente cuando los datos se

presentan en una escala de tamaño lineal. Si los datos abarcan un amplio rango, la PSD

puede representarse mejor examinando la población de partículas frente el logaritmo

de los diámetros. De hecho, con frecuencia la PSD se distribuye normalmente cuando

se utiliza el diámetro logarítmico. En estos casos, se dice que la PSD es una distribución

log-normal o normal logarítmica:

⎛ ⎡ 2
⎞
1 ln x − ln xg ⎤
f (x) = exp ⎜ − ⎢ ⎥ ⎟ (1.28)
x ln σ g 2π ⎜ ⎢ 2 ln σ ⎥ ⎟
⎝ ⎣ g ⎦ ⎠

Donde xg es la media geométrica de los tamaños (o sea, ln xg es el valor medio de los

valores de ln x ) y ln σ g es la desviación estándar de ln x . En otras palabras, cuando la

PSD es log-normal, al representar los valores de x·f(x) frente a ln(x) se obtiene un pico

gaussiano (v. Figura 16), aunque la representación f(x) vs. x es claramente asimétrica

(especialmente para valores altos de s).

28
 Figura 16: Distribución log-normal representada como x·f(x) vs. ln(x) (Gregory, 2006)

Las distribuciones de tamaño observadas mediante Dynamic Light Scattering en

dispersiones de NMs sintéticos relativamente poco polidispersos con frecuencia se

aproximan a distribuciones de tipo log-normal. Una característica útil de la distribución

normal logarítmica es que si una muestra sigue esta forma sobre la base de, por ejemplo,

la concentración numérica, entonces las distribuciones sobre cualquier otra base (por

ejemplo, masa o volumen) tendrán todas la misma forma (log-normal).

1.2.3. Masa molar media.

En el caso de los biocoloides, especialmente en los sistemas macromoleculares

polidispersos, a menudo interesa más describir la distribución de masas de partícula

antes que la distribución de tamaños. Los conceptos presentados en la sección anterior

se pueden generalizar a las funciones de distribución de masa. Por ejemplo, la masa

molar promedio (en número) se define como:

k k

∑N M ∑N M i i i i k
Mn = i=1
k
= i=1
= ∑ fi M i (1.29)
NT
∑N i
i=1

i=1

29
Donde Mi es la masa molecular de la categoría i.

La masa molecular promedio (en masa) se define como:

k
k Ni Mi k

∑ wi M i ∑ Mi ∑N M 2

i=1 N A
i i
Mw = i=1
k
= k = i=1
k
(1.30)
Ni Mi
∑w i ∑ N ∑N M i i
i=1 i=1 A i=1

Donde wi es la masa de partículas con peso molecular dentro del intervalo i, y NA es el

número de Avogadro. De forma análoga a los tamaños de partícula, se pueden definir

las correspondientes distribuciones de masa discretas (histogramas) y continuas

(distribuciones gaussianas, log-normales, etc.).

Las técnicas de caracterización sensibles al número de partículas (como las basadas en

medidas de las propiedades coligativas, como la osmometría, etc.) permitirán obtener

valores ponderados en número. En cambio, las técnicas sensibles a la masa de las

partículas (como la dispersión de luz dinámica) proporcionan valores ponderados en

masa. En los sistemas heterodispersos, los diversos tipos de promedios (en número o en

masa) difieren entre sí, y en mayor medida cuanto mayor sea el grado de

heterodispersidad. Por lo tanto, se suele tomar la relación Mw/Mn como una medida de

la polidispersidad del sistema.

1.2.4. Área superficial específica.

El área superficial específica (superficie específica, ‘specific surface area’ o SSA) de un

NM (tanto un polvo como una dispersión líquida o un aerosol) se define como el área

total de la superficie de las partículas sólidas dividida por la masa del material, y por lo

tanto tiene unidades de m2·kg-1. El cociente entre el área superficial total de las

30
partículas y el volumen total de las mismas se denomina relación superficie/volumen

(‘surface-area-to-volume ratio’ o SA:V) y tiene unidades de m2·m-3=m-1.

La SA:V es mayor para las partículas más pequeñas y por lo tanto, la SSA es mayor para

un sistema más fino.

En un sistema monodisperso que contiene n esferas perfectas de diámetro d y densidad

ρ, la superficie específica se calcula como:

n4π ( d / 2 )
2
6
SSA = = (1.31)
n 3 π ( d / 2) ρ ρd
3
4

En el caso de sistemas polidispersos, la SSA se calcula sumando las áreas superficiales

y las masas de cada fracción (monodispersa):

6∑ N i di2
SSA = i
(1.32)
ρ ∑ N i di3
i

A la inversa, si se conoce el valor experimental de la superficie específica de un sistema

heterodisperso, se puede estimar un diámetro promedio calculado como:

6
d SSA = (1.33)
ρ·SSA

De tal forma que el tamaño está ponderado en base a la superficie específica de las

partículas (o la relación superficie/volumen, ya que ambas son proporcionales):

∑N d i
3
i
d SSA = i
(1.34)
∑N d i i
2

31
En temas posteriores veremos el fundamento de alguna de las técnicas que se emplean

para determinar experimentalmente la SSA.

Ejemplo: ¿Cuál sería el valor de la SA:V en un material monodisperso formado por

partículas idénticas y perfectamente esféricas de tamaños iguales a los considerados

como límite inferior (1 nm) y superior (100 nm) en la definición de NM según la UE?

Respuesta: utilizaremos la siguiente ec.:

n4π ( d / 2 )
2
6 6 nm 2 10−18 m 2 nm 3
SA :Vmin = = = × × × = 6 × 103 m 2·cm -3 (1.35)
n 4 3 π ( d / 2) 10−21 cm 3
3
d 1 nm nm 2 nm 2

Para el límite superior de tamaño:

6 6 nm 2 10−18 m 2 nm 3
SA :Vmax = = × × × = 60 m 2·cm -3 (1.36)
d 100 nm nm 2 nm 2 10−21 cm 3

1.3. Determinación experimental del tamaño.

El número de técnicas que hay en la actualidad para determinar el tamaño de las

partículas sobrepasa las cuatrocientas. Evidentemente, no todas tienen la misma

importancia ni aplicabilidad. La Figura 17 resume las más habituales en la

determinación del tamaño de los coloides y nanopartículas.

32
 Figura 17: Intervalo aproximado de aplicación de las principales técnicas
de análisis del tamaño (Estelrich, 2002)

Como ya se explicó en la sección anterior, el tamaño de una partícula no esférica se

asocia al diámetro de una esfera equivalente (diámetro equivalente). Existen muchas

maneras de definir los diámetros equivalentes, muchas de las cuales tienen sus orígenes

en algunas medidas de tamaño. Por ejemplo, el diámetro equivalente de Stokes es el

diámetro de una esfera que en un experimento de sedimentación tiene la misma

velocidad de caída libre que la partícula en cuestión. Cada una de las técnicas

anteriores, por lo tanto, está asociada a un tipo de diámetro equivalente. Sin embargo,

los diámetros equivalentes disponibles serán diferentes para una determinada partícula

irregular. Por consiguiente, para obtener una buena descripción de un sistema de

partículas se debería seleccionar un diámetro equivalente (y una técnica de medida

asociada) que fuera relevante a la propiedad de la partícula que interesa. Así, por

33
ejemplo, si se quieren estudiar las propiedades de sedimentación de un material, se

debería seleccionar el diámetro de Stokes como descriptor; si lo que interesa es la

capacidad de recubrimiento de un pigmento, el diámetro debería ser sensible al área

proyectada por microscopía. Si lo que interesa son las propiedades de las partículas de

un aerosol y su deposición en los pulmones, el diámetro aerodinámico medido por

impacto inercial debería ser el parámetro más relevante.

Podéis encontrar una breve descripción de cada una de las técnicas de la Figura 17 en

el Capítulo 6 del libro de texto del Prof. Estelrich (Estelrich, 2002). Nosotros veremos

con más detalle en temas posteriores las técnicas basadas en la microscopía electrónica,

la ultracentrifugación y ultrafiltración, la microscopía de fuerza atómica (AFM) y la

dispersión de luz dinámica (DLS), principalmente.

Bibliografía
Alejandro G. Roca, L. G.-V. (2019). Design strategies for shape-controlled magnetic
iron oxide nanoparticles. Advanced Drug Delivery Reviews, 138, 68-104.
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Estelrich, J. (2002). Dispersions col·loïdals. Edicions Universitat de Barcelona.
Gregory, J. (2006). Particles in Water. Properties and Processes. CRC Press.
James Ranville, M. D. (2015). Size distributions. En J. R. Mohammed Baalousha,
Characterization of nanomaterials in complex environmental and biological
media (págs. 91-122). Elsevier.
Norde, W. (2011). Colloids and Interfaces in Life Sciences and Bionanotechnology.
CRC Press.

34