Anteproyecto Ambroxol

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Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Anteproyecto para la determinación del porcentaje de contenido de ambroxol tabletas de


marca Oxolvan con número de lote 2010199, realizando por comparación de un estándar y
utilizando la técnica de espectrofotometría

Grupo:1502 Lab. No. L-402 Fecha de emisión: 22/09/2022 Pág. No. 1 de 25

OBJETIVO:
Determinar el porcentaje de contenido de ambroxol tabletas de marca Oxolvan con número
de lote 2010199, realizando por comparación de un estándar y utilizando la técnica de
fluorometria

HIPÓTESIS:
Contienen no menos del 95.0 por ciento y no más del 105.0 por ciento de la cantidad de
C13H18N2Br2O indicada en el marbete.
De acuerdo a la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 5ta edición..

MARCO TEÓRICO:
Fundamento de la técnica:
-Luz
Es energía, y se propaga como una radiación electromagnética que presenta un
comportamiento dual: de onda y de partícula. En ciertas condiciones, la luz, al interactuar
con la materia, se comporta como onda, pero en otras ocasiones como partícula. Se
propaga por el movimiento ondulatorio, es decir, por ondas. Y, sin embargo, también está
formada por partículas diminutas, los fotones.

-Espectro electromagnético
El espectro electromagnético es el conjunto de longitudes de onda de todas las radiaciones
electromagnéticas. La radiación ultravioleta (UV) se define como la porción del espectro
electromagnético que se encuentra entre los rayos X y la luz visible. La luz visible —también
espectro visible— es la parte del espectro electromagnético que los ojos humanos son
capaces de detectar. Cubre todos los colores del azul a 400 nm al rojo a 700 nm. La luz azul
contiene más energía que la roja.

-Interacción radiación-materia
Las radiaciones ionizantes, tienen niveles de energía suficientes para ionizar los átomos de
la materia sobre la que inciden y pueden excitar y romper enlaces químicos en moléculas

Realizó. Revisó Aprobó


Martinez Cuevas Mitzi Gaspar Torres Diego Rodriguez Mendez Uriel.
Vanessa. Emanuel.
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orgánicas. Las radiaciones pueden ser electromagnéticas o corpusculares. Al interaccionar


la radiación con la materia puede llegar a producir en ella algún efecto que dependerá de
características propias de la radiación (carga eléctrica, masa, energía) y del tipo de material
sobre el que incide. La Teoría del Orbital Molecular (TOM) explica el paramagnetismo del
oxígeno y muchos otros fenómenos que no pueden ser explicados por la teoría de Lewis,
entre ellos, las excepciones a la regla del octeto que presentan muchas especies químicas
que hemos citado previamente. En comparación con la Teoría del Enlace-Valencia (TEV), la
TOM supera la idea de orbitales híbridos localizados entre dos átomos para hablar de
orbitales extendidos a toda la molécula.

-Ley de Lambert
Declara que la absorbancia de una muestra de material es directamente proporcional a su
espesor (longitud de la trayectoria).

-Ley de Beer
Declara que la absorbancia es proporcional a las concentraciones de las especies
atenuantes en la muestra de material.

-Ley de Lambert y Beer


Es una relación empírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material
atravesado. Se puede expresar de distintas maneras:

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Dónde:
• A es la absorbancia (o absorbencia)
• I0 es la intensidad de la luz incidente • I1 es la intensidad de la luz una vez ha atravesado
el medio
• l es la distancia que la luz atraviesa por el cuerpo
• c es la concentración de sustancia absorbente en el medio
• α es el coeficiente de absorción o la absorbancia molar de la sustancia
• λ es la longitud de onda del haz de luz
• k es el coeficiente de extinción, la ley explica que hay una relación exponencial entre la
transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia, así como
también entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos l y
α, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz
transmitida. Las unidades de c y α dependen del modo en que se exprese la concentración
de la sustancia absorbente. Si la sustancia es líquida, se suele expresar como una fracción
molar. Las unidades de α son la inversa de la longitud (por ejemplo, cm-1). En el caso de los
gases, c puede ser expresada como densidad (la longitud al cubo, por ejemplo, cm-3), en
cuyo caso α es una sección representativa de la absorción y tiene las unidades en longitud
al cuadrado (cm2, por ejemplo). Si la concentración de c está expresada en moles por
volumen, α es la absorbencia molar normalmente dada en mol cm-2. El valor del coeficiente

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de absorción varía según los materiales absorbentes y con la longitud de onda para cada
material en particular. Se suele determinar experimentalmente. La ley tiende a no ser válida
para concentraciones muy elevadas, especialmente si el material dispersa mucho la luz. La
relación de la ley entre concentración y absorción de luz está basada en el uso de
espectroscopía para identificar sustancias.

-Desviaciones de la ley de Lambert y Beer


En la práctica, no siempre se obtiene una recta que pase por el origen. Puede obtenerse
una función del tipo A= m + pc. Además, se presentan desviaciones, positivas - si la
absorbancia medida es mayor que la real o negativas - si la absorbancia medida es menor
que la real. Esto lleva a que no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la
concentración, debido a factores instrumentales y químicos:

Imagen.1 Desviaciones verdaderas y aparentes de Lambert y Beer

Análogamente cuando la especie que absorbe radiaciones es un complejo se debe


mantener una concentración grande de ligante (por ejemplo unas 100 veces mayor). En lo
referente a desviaciones de índole instrumental debe mencionarse que las radiaciones que
llegan a la cubeta se apartan en mayor o menor grado de la condición de ser “cuasi”
monocromáticas, como lo establece la ley de L. Beer.

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Imagen ll. Desviación negativa o aparente de Lambert y Beer

(+) verdaderas= error o no se puede usar/no cumplen 100%


(-) aparentes= errores o no se pueden usar.

-Grupo cromóforo
En un colorante, el cromóforo es un grupo funcional que cuenta con una alta densidad
electrónica y por lo tanto se pueden clasificar de la siguiente manera:
• Dobles y triples enlaces carbono-carbono
• Anillos aromáticos
• Grupos carbonilos, imino, diazo y nitro
• Estructuras que presentan enlaces entre el carbono y átomos con pares de electrones
libres.
Por su parte, los auxocromos, son sustituyentes del cromóforo y alteran los valores de las
longitudes de onda en las que se presentan las absorciones de la luz. Generalmente, los
auxocromos son grupos mucho más sencillos que los cromóforos, como es el caso de
grupos metilo (-CH3), halógenos (-X), hidroxilos (-OH), y amino (-NH2). Dependiendo de la

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sustitución en el cromóforo y el sustituyente o auxocromo, los efectos que se logran en la


molécula del colorante se han clasificado de acuerdo al desplazamiento de la banda de
absorción en el espectro. Si el auxocromo causa una absorción del cromóforo hacia
longitudes de onda mayores se denomina batocrómico. Si el auxocromo causa una
absorción del cromóforo hacia longitudes de onda menores se denomina hipsocrómico

-Espectro de absorción
El espectro de absorción de un determinado compuesto se define como un espectro de la
radiación electromagnética o luminosa que presenta porciones de radiación que fueron
absorbidas y que aparecen bajo la forma de rayas o bandas negras

-Banda de absorción
Una banda de absorción es un rango de longitudes de onda, frecuencias o energías en el
espectro electromagnético. que son característicos de una transición particular del estado
inicial al final en una sustancia.

-Error fotométrico
Representación gráfica del porcentaje de error en función de la absorbancia

Características instrumentales:
-Espectrofotómetro
El espectrofotómetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromático a través
de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.
Clasificación:
● El tipo más simple de espectrofotómetro de absorción se basa en la operación con
un solo haz en el cual la muestra se examina para determinar la cantidad de
radiación absorbida a una longitud de onda dada.

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● En cambio, en la configuración de espectrofotómetros de doble haz, el haz de luz de


la lámpara se divide en dos haces de intensidades iguales: un haz de referencia y un
haz de muestra. Cada haz pasa por una cubeta diferente, la de referencia (con el
solvente) y la de muestra, de forma simultánea. Las intensidades de ambos haces
se miden al mismo tiempo mediante dos detectores (o fotodiodos). En otros
instrumentos, los dos haces pasan a través de un bloqueador que impide el paso de
un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra y la de referencia.

Imagen lll. Espectrofotómetros de un solo y doble haz

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Espectrofotómetro

● Espectrofotómetro con arreglo de diodos: el haz de radiación que ha atravesado la


columna cromatográfica es dispersado por medio de una red de difracción fija,
siendo recogidas simultáneamente todas las longitudes de onda dispersadas
mediante una matriz de fotodiodos. Utilizan una óptica invertida respecto del
convencional: toda la luz de la fuente atraviesa la muestra y luego es dispersada en
lugar de una ranura de salida tiene en el plano focal un dispositivo que integra en un
pequeño circuito varios cientos de detectores tipo fotodiodo de silicio.

Imagen lv. Espectrofotómetro con arreglo de diodos

❖ Partes del espectrofotómetro simple

FUENTES DE RADIACIÓN.
Las fuentes de radiación deben poseer dos condiciones básicas. Primero deben
proporcionar la suficiente energía radiante a lo largo de toda la región de longitudes de onda
en la que se medirá la absorción. Y segundo, deben mantener una intensidad constante por
encima del intervalo de tiempo durante el que se realicen las medidas. Si la intensidad es

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baja en la región donde se determina la absorción, el intervalo de longitudes de onda que


pasa a través de la muestra, debe ser relativamente amplio, a fin de obtener el rendimiento
necesario de energía, lo que puede provocar errores en las medidas de la absorción.
Generalmente en las regiones ultravioleta y visible del espectro, utilizadas normalmente en
colorimetría, la intensidad de las fuentes no constituye problema. Las medidas en la región
visible y hasta el infrarrojo cercano se realizan generalmente con lámparas de filamento
incandescente que dan un espectro continuo en todo el intervalo. El filamento se calienta
por medio de una corriente eléctrica, y se encuentra en un bulbo de vidrio herméticamente
sellado al vacío o con gas inerte. Los filamentos, generalmente, se enrollan para aumentar
su emisividad, eficacia y luminancia media

SELECCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA


La mayoría de los métodos espectrofotométricos requieren generalmente el aislamiento de
bandas discretas de radiación. Para aislar una banda estrecha de longitudes de onda, se
utilizan filtros, monocromadores o ambos. Los filtros proporcionan un alto rendimiento de
radiación. Su montaje es relativamente fácil para, quizá, hasta cinco longitudes de onda,
aunque en colorimetría se llega en algunos casos a 16 longitudes de onda. El paso de
banda puede ser similar al que se obtiene con el montaje de redes de difracción. Los tipos
de filtros más utilizados son los filtros de absorción y los filtros interferenciales. En los filtros
de absorción los efectos se derivan de las interacciones totales de la radiación con el
material. Algunos tipos se basan en dispersiones selectivas y en otros predomina la
absorción iónica. La transmisión de radiación es una función que decrece uniformemente
con el espesor y se describe mediante una ley exponencial. Los filtros de absorción se
fabrican en una gran cantidad de materiales como: gelatina, vidrio, plástico, etc. Los filtros
de vidrio son los más utilizados en equipos automáticos de análisis y en colorimetría. Los
filtros interferenciales se basan en las interferencias ópticas y en su caso más simple

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consiste en una película espaciadora dieléctrica insertada entre dos películas paralelas de
metal parcialmente reflejante, generalmente plata. El espesor de la película dieléctrica es
controlado para tener una, dos o tres medias ondas.

MONOCROMADORES
Un monocromador consiste, en general, de una rendija de entrada que proporciona una
imagen estrecha y casi coherente de la fuente de radiación, un colimador que hace paralela
la radiación procedente de la rendija de entrada, una red o prisma para Instrumentos para la
medida práctica del color- 6 - dispersar la radiación incidente, otro colimador para formar la
imagen de la rendija de entrada sobre la rendija de salida y una rendija de salida para aislar
la banda espectral deseada.

Imagen V. Monocromador de un espectrofotómetro

La función primordial del monocromador es proporcionar un haz de energía radiante con


una longitud de onda y una anchura de banda dada. La salida espectral de cualquier
monocromador usado como una fuente de radiación continua, independientemente de su
distancia focal y anchura de rendijas, consiste en una gama de longitudes de onda con un
valor promedio de longitud que se presenta en el indicador del monocromador. La función
secundaria consiste en el ajuste del rendimiento de energía. El flujo lumínico que emerge de

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la rendija de salida puede variar ajustando el ancho de la rendija, sin embargo, esta
dimensión también controla la anchura de banda espectral.
DISPERSIÓN
Se define como la separación de una mezcla de longitudes de onda en sus
monocomponentes. Esto se logra por medio de un prisma (refracción) o por medio de una
red (difracción)

RESOLUCIÓN
La resolución, o poder de resolución, es la capacidad que tiene el monocromador para
distinguir aspectos espectrales adyacentes, como las bandas de emisión de absorción o las
líneas de emisión. La resolución está determinada por el tamaño y las características
dispersivas del prisma o de la red, el diseño óptico que contiene el dispositivo dispersor y la
anchura de la rendija del monocromador. En los espectrofotómetros con registro, la
resolución también depende del sistema de registro y de la velocidad de barrido.
La definición de resolución, R, más ampliamente utilizada es:
R = - λ dλ = w (dθ dλ )
donde - λ es la longitud de onda promedio entre las dos líneas resueltas, dλ es la diferencia
de dos longitudes de onda entre las líneas, w es la anchura efectiva de la apertura y dθ es
el intervalo angular
PODER DE CAPTACIÓN DE RADIACIÓN
Cuando se trata de anchuras de banda muy estrechas, se pueden resolver algunas señales
espectrales muy cercanas. Sin embargo, la razón señal-ruido resulta muy importante. Será
necesario que una cantidad suficiente de radiación llegue al detector para que se pueda
distinguir por encima de la señal de fondo. El poder de captación de radiación de un
instrumento resulta crítico en este caso. El llamado número f, o velocidad de un
espectrofotómetro, es una medida de la capacidad del espejo colimador para captar y
colimar la radiación que procede de la rendija de entrada y se expresa:

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F =fc / dc
donde fc y dc representan la distancia focal y el diámetro del espejo colimador,
respectivamente. Cuanto menor sea el número f, tanto mayor será la capacidad de
captación de radiación del instrumento.
RENDIJAS
En la práctica, el módulo del monocromador no es capaz de aislar una sola longitud de onda
de la radiación del espectro continuo emitido por la fuente. Por el contrario, es una banda
definida de radiación la que pasa por el monocromador. La entrada o apertura de un
monocromador es una rendija larga y estrecha cuya anchura es generalmente ajustable.
Dentro del monocromador, los rayos divergen desde la rendija de entrada e iluminan el
espejo colimador, el cual los enfoca sobre el elemento dispersante. Después del colimador,
el haz de rayos paralelos es una versión ampliada de la rendija de entrada que debe ser lo
bastante grande como para iluminar el lado completo del prisma o de la red de difracción.
Posteriormente el elemento dispersante separa la radiación incidente en función de la
longitud de onda con un ángulo distinto, pudiendo en el caso de las redes provocar la
superposición de órdenes de dispersión. El haz disperso es interceptado por un segundo
espejo colimador similar al primero, el cual se utiliza para enfocar y producir una serie de
imágenes casi monocromáticas de la rendija de entrada, que se forman en el plano focal,
donde se coloca la rendija de salida.

DETECTORES
Un detector es un transductor que convierte la radiación electromagnética en un flujo de
electrones y, posteriormente, en una corriente o voltaje en el circuito de lectura. En muchos
casos la fotocorriente requiere amplificación, particularmente cuando se miden bajos niveles
de energía radiante. Existen detectores de un solo elemento como los fotodiodos de estado
sólido, los tubos fotoemisores y los tubos fotomultiplicadores y otros detectores con
elementos múltiples, como los detectores de estado sólido. Las características más

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importantes para cualquier tipo de detector son: sensibilidad espectral, respuesta a la


longitud de onda, ganancia y tiempo de respuesta
Tubos fotoemisores
Los tubos fotoemisores de vacío son combinaciones simples de fotocátodo - ánodo alojados
en una cubierta con vacío. El fototubo de vacío de un solo paso contiene un cátodo sensible
a la radiación y un ánodo delgado situado en el eje del cilindro rodeado por el cátodo. El
fotocátodo opera según el principio de que se emiten electrones desde algunos materiales
en proporción directa al número de fotones que incide en su superficie. Para una eficiencia
óptima, la superficie del fotocátodo debe tener el máximo coeficiente de absorción posible
para la radiación incidente. El material que recubre la superficie también deberá tener baja
la función de trabajo con objeto de extender su cobertura espectral hacia mayores
longitudes de onda.
Tubos fotomultiplicadores.
Los fototubos multiplicadores de electrones, o tubos fotomultiplicadores, son una
combinación de un cátodo fotoemisor y una cadena interna de dínodos multiplicadores de
electrones. La radiación incidente expulsa fotoelectrones del cátodo que son enfocados por
un campo electrostático y acelerados hacia un electrodo curvo, que corresponde al primer
dínodo, el cual está recubierto por un material que expulsa varios electrones como resultado
del impacto de un electrón de alta energía. La forma redondeada que tienen los dínodos
hace converger a los electrones sobre el siguiente dínodo.

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Vl.Tubos fotomultiplicadores

Fotodiodos
Los fotodiodos operan según un principio completamente distinto al de los detectores
anteriormente descritos. Una unión semiconductora p -n posee una polarización inversa, de
modo que no existe flujo de corriente. Cuando un fotón interactúa con el diodo, los
electrones son llevados hasta la banda de conducción donde pueden actuar como
portadores de carga. De esta manera, la corriente generada es proporcional a la potencia
radiante incidente. La mayoría de estos dispositivos detectan únicamente radiación en el
visible y en el infrarrojo cercano y su respuesta es, al menos, un orden de magnitud superior
a los tubos fotoemisores de vacío, pero muchos órdenes de magnitud menor que los tubos
fotomultiplicadores. Muchos fotodiodos pequeños se pueden ensamblar en disposiciones
lineales o bidimensionales, en los cuales cada diodo capta una señal en forma simultánea
con los demás. Un condensador pequeño se acopla a cada diodo y se carga hasta un nivel
dado antes de que el diodo se ilumine. Al iluminarse se produce la descarga del
condensador. Después de que se obtienen las señales, se barre cada elemento del
conjunto, se registra la pérdida de carga y se recarga el condensador. De esta forma se
obtienen datos en una y, en algunos casos, dos dimensiones.

MÓDULOS DE LECTURA
En los instrumentos más sencillos se producen señales de corriente continua (DC) que se
amplifican mediante amplificadores de DC y se registran en medidores analógicos,
registradores, voltímetros digitales o en monitores de sistemas informáticos. Para obtener
una mejora en la relación señal-ruido es deseable modular la señal y transformarla en una
señal alterna (AC) lo suficientemente alta que impida los problemas de ruido. Después de la
amplificación, realizada en un amplificador de AC, la señal se demodula y se vuelve a
convertir en una señal DC, ya que la mayoría de los registros requieren señales en DC.

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❖ Partes del espectrofotómetro con arreglo de diodos:


Detector para medir intensidad de la radiación: El detector es el ojo del espectrofotómetro,
el cual produce una señal luminosa (señal análoga) y una señal eléctrica (señal digital). Este
dispositivo consta de: un tubo fotomultiplicador, fotodiodos, y una matriz de diodos (arreglo
de diodos) montados en cerámica resistente que evita las interacciones de temperatura y
eléctrica. Existe un detector para cada longitud de onda y 0.9 nm por cada fotodiodo.

Factores que afectan a la determinación


Para evitar interferencias en la operación del espectrofotómetro. Se describen a
continuación las condiciones básicas para el correcto funcionamiento del equipo.
• El vidrio absorbe en la región baja de UV y causa ruido elevado. Asegurar que las celdas
son de cuarzo.
• Verifique que la celda de 1 cm esté perfectamente limpia, si la observa manchada déjela
en jabón aproximadamente 15 minutos, enjuague y realice un lavado con H2SO4 al 5% y
enjuáguese perfectamente con agua desionizada, purgue con agua ultra-pura.
• Confirme que en la celda y en las paredes de la celda, la solución está exenta de burbujas.
• La celda debe estar orientada de la misma manera en las medidas del blanco y de la
muestra.
• Verifique que el equipo tenga el Mantenimiento preventivo y se encuentre en las
condiciones óptimas para su operación.
• Se deben limpiar las lámparas cuando la lectura no se estabiliza rápido (también cuando la
intensidad de las lámparas ha disminuido o cuando la celda está sucia). Las lámparas se
limpian con un trapo de algodón que no suelte motas y humedecido con isopropanol. Las
Lámparas se encuentran ubicadas en la segunda compuerta en el equipo se abre hacia
abajo (las lámparas se apagan automáticamente). Para quitarlas primero hay que retirar los

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conectores y luego los tornillos. Cada lámpara tiene una ranura que establece la posición.
NOTA: Nunca tocar las lámparas con la mano.
• Asegurarse de que todos los componentes del PC están conectados y que se realiza la
conexión adecuada con el espectrofotómetro y la impresora.
• Para medidas de alta precisión, esperar hasta que el espectrofotómetro y las lámparas
hayan alcanzado el equilibrio térmico. El tiempo necesario dependerá de las condiciones
ambientales. El espectrofotómetro debería estar preparado al cabo de 45 minutos – 60
minutos.
• Para obtener los resultados más precisos, utilizar la misma celda, orientada en la misma
dirección para reducir al mínimo los problemas de no uniformidad de la celda.

MÉTODO OFICIAL:

Preparación de referencia. Pesar una cantidad de la SRef FEUM de clorhidrato de ambroxol


equivalente a 35 mg de clorhidrato de ambroxol, pasar a un matraz volumétrico Preparados
farmacéuticos 1449 de 100 mL, disolver, llevar al aforo con solución de ácido clorhídrico 0.1
N Y mezclar. Pasar una alicuota de 10 mL de la solución anterior a un matraz volumétrico
de 50 rnL, llevar al aforo con solución de ácido clorhídrico 0.1 N Y mezclar. Esta solución
contiene 70 flg/mL de clorhidrato de ambroxol. Preparación de la muestra. Triturar hasta
polvo fino no menos de 20 tabletas, pesar una cantidad del polvo equivalente a 35 mg de
clorhidrato de ambroxol, pasar a un matraz volumétrico de 100 mL, agregar 60 mL de
solución de ácido clorhídrico 0.1 N, agitar durante 15 min, llevar al aforo con solución de
ácido clorhídrico 0.1 N, mezclar y filtrar. Pasar una alícuota de 10 mL del filtrado a un matraz
volumétrico de 50 mL, llevar al aforo con solución de ácido clorhídrico 0.1 N Y mezclar.
Procedimiento. Determinar las absorbancias de la preparación de la muestra y de la
preparación de referencia, a la longitud de onda de máxima absorbancia de 307 nm,
utilizando celdas de 1 cm y solución de ácido clorhídrico 0.1 N como blanco de ajuste.
Calcular la cantidad deC13H18N2Br2O en la muestra tomada, por medio de la siguiente
fórmula:

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Martinez Cuevas Mitzi Gaspar Torres Diego Rodriguez Mendez Uriel.
Vanessa. Emanuel.
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Anteproyecto para la determinación del porcentaje de contenido de ambroxol tabletas de


marca Oxolvan con número de lote 2010199, realizando por comparación de un estándar y
utilizando la técnica de espectrofotometría

Grupo:1502 Lab. No. L-402 Fecha de emisión: 22/09/2022 Pág. No. 17 de 25

Fórmula

CÁLCULOS:
Cálculos para el coeficiente de absortividad del ambroxol:
Concentracion de HCl: 0.1N
Concentracion: 60μg/mL
Tamaño de celda: 1cm
Absorbancia: 0.450
Longitud: 307nm
Con la fórmula para coeficiente de absortividad:
𝐴
ε= (𝑙)(𝑐)
Donde:

ε=Coeficiente de absortividad (mL/μg cm)


A=Absorbancia
l=Longitud (cm)
c=Concentración (μg/mL)
Sustituyendo:

ε= (0.450)/(60μg/mL x 1cm)=0.00751mL/μg cm

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utilizando la técnica de espectrofotometría

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Cálculos para la concentración con absorbancia de 0.5


Con la fórmula
𝐴
𝑐= ε𝑙
Donde:

ε=Coeficiente de absortividad (mL/μg cm)


A=Absorbancia
l=Longitud (cm)
c=Concentración (μg/mL)
Sustituyendo:
c=(0.5)/(0.00751mL/μg cm x 1cm)=66.5778 μg/mL
Cálculos para las diluciones:

Se utilizará 10402 microgramos de ambroxol

Cálculos para la preparación de 350 mL de una disolución 0.1N de


HCl.

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utilizando la técnica de espectrofotometría

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Con la fórmula:

m=(N)(V)(Peq)

Donde
m=masa del HCl (g)
N=normalidad del HCl (eq/L)
V= volumen por preparar la disolución de HCl (L)
Peq=Peso equivalente del HCl (g/eq)

Sustituyendo:

mHCl=(0.1eq/L)(0.350 L)(36.45 g/eq)


mHCl=1.2757g

Con la densidad del HCl calcular los mL necesarios

mL HCl= (1.2757g x 1mL)/ 1.416g= 1.2757 mL

MÉTODO PROPUESTO:
Preparación de la disolución HCl 0.1N
1.- En un vaso de precipitados de 1L, poner una pequeña base de agua destilada (20 ml
aproximadamente).
2.- Posteriormente en la campana tomar con una pipeta graduada de 2 ml,
aproximadamente con exactitud 1.2757 ml del ácido clorhídrico y verterlo al vaso de
precipitado.
3.- Agitar cuidadosamente con una varilla de vidrio y poner agua destilada hasta los 500 ml.
4.- Seguir agitando cuidadosamente hasta disolver.

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utilizando la técnica de espectrofotometría

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Preparación del estándar.


1.- Pesar en la balanza analítica (previamente calibrada) aproximadamente con exactitud
10402 microgramos de ambroxol de estándar de Ambroxol con la ayuda de una espátula
de acero inoxidable.
● Se debe asegurar de que la balanza analitica este nivelada para proceder con las
pesadas adecuadamente, de no estar nivelada se debe calibrar de la siguiente
manera: La balanza analitica debe estar apagada, debe asegurarse de que la
burbuja que se encuentra detrás de la balanza a un lado del display se encuentre en
el centro del círculo de nivelación. Ya nivelada la balanza analítica, limpiar el plato
con una brocha pequeña para tener más exactitud en nuestras pesadas.
2.- Agregar los 10402 microgramos de ambroxol pesados de estándar de ambroxol a un
matraz aforado de 25mL, aforar a 25mL con la disolución de HCl 0.1N agitando
vigorosamente hasta disolver (este será el matraz 1).
3.-De la disolución del matraz 1, tomar una alícuota de 10ml en un matraz aforado de 25ml,
aforando hasta los 25ml con la solución de HCl 0.1N agitando vigorosamente hasta disolver
(este será el matraz 2).
4.- Del matraz 2, tomar una alícuota de 4ml en un matraz aforado de 10ml, aforando hasta
los 10mL con la solución de HCl 0.1N agitando vigorosamente hasta disolver.

Preparación del problema.


1.- Pesar 5 tabletas de ambroxol en la balanza analítica (previamente calibrada) y calcular
su peso promedio.
● Se debe asegurar de que la balanza analitica este nivelada para proceder con las
pesadas adecuadamente, de no estar nivelada se debe calibrar de la siguiente
manera: La balanza analitica debe estar apagada, debe asegurarse de que la
burbuja que se encuentra detrás de la balanza a un lado del display se encuentre en
el centro del círculo de nivelación. Ya nivelada la balanza analítica, limpiar el plato
con una brocha pequeña para tener más exactitud en nuestras pesadas.
2.- Triturar las tabletas en un mortero hasta conseguir un polvo fino.
3.- Posteriormente pesar en la balanza analítica aproximadamente con exactitud la cantidad
de polvo de tableta equivalente a 10402 microgramos de ambroxol con la ayuda de una
espátula de acero inoxidable.
4.- Agregar los 10402 microgramos de ambroxol pesados a un matraz aforado de 25mL,
aforar a 25mL con la disolución de HCl 0.1N agitando vigorosamente hasta disolver (este

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será el matraz 1).


5.-De la disolución del matraz 1, tomar una alícuota de 10ml en un matraz aforado de 25ml,
aforando hasta los 25ml con la solución de HCl 0.1N agitando vigorosamente hasta disolver
(este será el matraz 2).
6.- Del matraz 2, tomar una alícuota de 4ml en un matraz aforado de 10ml, aforando hasta
los 10mL con la solución de HCl 0.1N agitando vigorosamente hasta disolver.

*todo este procedimiento se debe realizar por triplicado*

Uso del espectrofotómetro.


1.- Encienda el aparato girando la perilla de control de encendido/apagado 15 minutos antes
de utilizarlo.
2.- Seleccione la longitud de onda a la cual se van a determinar las absorbancias, la cual
aparecerá en la pantalla.
3.- Ajuste la aguja en cero de la escala de transmitancia por medio de la perilla de control de
encendido/apagado; cuidando de no apagar el equipo. Asegúrese que el equipo se
encuentre en modo transmitancia.
4.-Levante la tapa del compartimiento para la muestra y coloque la celda (seca) que
contenga únicamente el blanco, que incluye todos los reactivos menos la sustancia
problema).
5.- Tape el compartimiento donde colocó el blanco y ajuste a 100 la transmitancia con la
perilla de control de 100% de transmitancia o cero de absorbancia.
6.- Retire del porta muestras la celda que contiene el blanco e inmediatamente coloque la
celda que contiene la muestra que desea leer.
7.- Cierre la tapa y oprima el botón de modo para elegir el modo absorbancia.
8.- Registre el valor de absorbancia de su muestra.

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MATERIAL, REACTIVOS E INSTRUMENTOS:

Material Reactivos Instrumentos

1 pipeta volumétrica de Ambroxol Espectrofotometro


10mL

1 pipeta volumétrica de 4mL HCl 0.1N Balanza analitica

1 pipeta graduada de 2mL

1 agitador de vidrio Agua destilada

8 matraz aforado de 25mL

4 matraz aforado de 10mL

1 vaso de precipitado de 1Lt

Papel glassine

1 espátula de acero
inoxidable

1 varilla de vidrio

1 mortero

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PROPIEDADES FÍSICAS, QUÍMICAS Y TOXICOLÓGICAS:

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DIAGRAMA DE FLUJO:

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BIBLIOGRAFÍA:
1. Uncor.edu. [citado el 23 de agosto de 2022]. Disponible en:
http://www.facultad.efn.uncor.edu/webs/departamentos/divbioeco/anatocom/B
iologia/Los%20Tejidos/propiamentedicho.htm
2. Tipos de espectrofotómetros [Internet]. Labprocess | Productos de laboratorio
y control de procesos. 2020 [citado el 24 de agosto de 2022]. Disponible en:
https://www.labprocess.es/tipos-de-espectrofotometros
3. Espectrofotómetro de Arreglo de Diodos [Internet]. Scribd. [citado el 24 de
agosto de 2022]. Disponible en:
https://es.scribd.com/document/291084428/Espectrofotometro-de-Arreglo-de-
Diodos
4. Unirioja.es. [citado el 24 de agosto de 2022]. Disponible en:
https://www.unirioja.es/cu/fede/color_de_vino/capitulo05.pdf

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