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Título: ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA
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1. OBJETIVO

Se ha establecido una instrucción operativa para garantizar el manejo adecuado del

espectrofotómetro de Absorción Atómica dentro del contexto de las buenas prácticas de
Laboratorio y normas de seguridad y ambiente.

2. CAMPO DE APLICACIÓN

La presente instrucción es de aplicación al Espectrofotómetro de Absorción Atómica Marca

Agilent Technologies 200 Series AA ubicado en el Laboratorio Químico.

3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

3.1 Manual del Equipo: Software Utilities, Quick Installation Guide and Setup Guide y Sotfware for
the Espectr AA Instruments

3.2 Preparación de Soluciones Estándares AAS.

4. RESPONSABILIDADES

4.1 El Jefe y/o Asistente de Laboratorio y el asistente de laboratorio son los responsables de
implementar, mantener y hacer cumplir la presente instrucción.

4.2 Los analistas son responsables de conocer y aplicar la presente instrucción.

5. NORMAS DE SEGURIDAD SALUD Y MEDIO AMBIENTE

5.1 Las recomendaciones específicas de identificación de peligros, equipos de protección para

manipulación, almacenamiento y acciones en caso de accidentes se encuentran en el IPERC
de seguridad del Laboratorio Químico y las recomendaciones medio ambientales en la Matriz
de Evaluación y Clasificación de Aspectos Ambientales Significativos. Para realizar esta
actividad usar los siguientes Equipos de protección Personal.

- Lentes de seguridad
- Guantes de Nitrilo / Látex
- Zapatos de seguridad.
- Respirador de media cara con filtros para gases
- Overol

5.2 Llenar Matriz IPERC Continuo/ATS

5.3 Verificar la operatividad del equipo de absorción atómica y del sistema de extracción de gases
según lo establecido
5.4 Conocimiento de MSDS de productos del área de trabajo
5.5 En caso de emergencias aplicar el Plan de Seguridad y Salud Ocupacional
5.6 Los desechos peligrosos como no peligrosos generados durante el desarrollo de esta
instrucción deben disponerse en los tachos indicados según el código de colores.
5.7 Realizar el uso responsable del recurso eléctrico
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6. ESPECIFICACIONES

6.1 EQUIPO

6.1.1 Sistema óptico de doble haz.

6.1.2 Peso: 69 kg Altura: 73.5 cm Ancho: 78 cm Fondo: 60 cm.

6.1.3 Sistema de Atomización con Flow Spoiler e Impact bead.

6.1.4 Rango Longitud de onda 189 nm - 851 nm.

6.1.5 Requerimiento eléctrico: 220 o 240V, 50 o 60 Hz, 230 VA.

6.2 SISTEMA DE EXTRACCION DE GASES

6.2.4 El sistema de descarga de gases debe proporcionar un flujo mínimo de 6 m3/min con 16 mm
de presión de agua estática (entrega libre de 11 m3/min).
6.2.5 Distancia entre conducto y chimenea del equipo de 10 cm.
6.2.6 Ventilador localizado a menos de 3 metros de la llama.
6.2.7 Diámetro del ducto de extracción de 15 cm <> 6”.
6.2.8 Abertura máxima del conducto 27.5 cm

6.3 CONDICIONES AMBIENTALES

6.3.4 Temperatura de operación: 20º C – 25º C con una variación constante no mayor a 2° C
durante todo el día de trabajo.
6.3.5 Humedad Relativa 20% - 80%

6.4 MATERIALES Y REACTIVOS

6.4.1 Acetileno especial 99.0%, grado instrumental. Presión 11 PSI. Flujo 0 – 10 L/min.
6.4.2 Óxido Nitroso especial 99.5%, grado instrumental. Presión 50 PSI. Flujo 11 – 16 L/min.
6.4.3 Aire limpio, libre de aceite. Presión 50 PSI. Flujo 13.5 – 20 L/min.
6.4.4 Agua Desionizada y/o purificada.
6.4.5 Solución de Cobre 5 ppm.
6.4.6 Lámparas de Cátodo Hueco.
6.4.7 Alambre de cobre.
6.4.8 Silicona en pasta.
6.4.9 Lámpara de Deuterio
6.4.10 Quemador
6.4.11 Kit de o´ring para ácidos.
6.4.12 Nebulizador 5 cm y 10 cm.
6.4.13 Venturi y extractor de venturi.
6.4.14 Trampa de líquido con flotador.
6.4.15 Impact bead.
6.4.16 Flow spoiler.
6.4.17 Cámara de mezcla.
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7. REQUISITOS DE PRE - INICIO

7.1 Purgar compresoras de suministro de aire.

7.2 Verificar que todas las conexiones mecánicas y eléctricas se encuentren en buen estado.
7.3 Verificar presión de acetileno, las presiones según los manómetros de los cilindros deben
estar por encima de 90 PSI (700 KPa) y la de los manómetros de ingreso al equipo deben
estar seleccionadas de acuerdo a la tabla siguiente:

Recomendado Permisible
kPa Psi kPa Psi
Acetileno 75 11 65 – 100 9.5 – 14.5
Aire 350 50 245 – 455 35 – 65
Oxido nitroso 350 50 245 – 455 35 -65

Si la presión fuera menor a la indicada cambiar el balón.

7.4 Cada vez que se cambie balón de acetileno verificar el estado de las mangueras de gases
para detectar posibles fugas, usando agua jabonosa, abra la alimentación del gas al equipo
y pruebe todo los seguros y conexiones. Si detecta una fuga, cierre la llave del gas
inmediatamente y cambie la manguera.

7.5 Verificar que las condiciones Ambientales se encuentren dentro del los rangos establecidos y
anotar en el registro de control de condiciones ambientales
7.6 Verifique la operatividad del sistema de extracción de gases, ayúdese usando una delgada
hoja de papel y diríjala a la chimenea de extracción, la hoja de papel debe ser atraída hacia la
chimenea; o use el humo de una cerilla extinguida.

7.7 Lavar la cámara y el quemador al inicio de cada turno o cuando el analista lo considere
necesario.

7.8 Verificar la operatividad del equipo con una solución estándar de Cu de 5 ppm, la absorbancia
debe ser mayor a 0.600.

7.9 Registrar la presión del acetileno, operatividad de Cu

7.10 Registrar el funcionamiento de compresoras, seguridad eléctrica , sistema de extracción y el
funcionamiento del equipo ( Sistema de atomización, sistema de Alimentación de gases ,etc)
.

7.7 OPERACION

7.7.1 ENCENDIDO

7.7.1.1 Presionar el botón blanco para poner en funcionamiento el extractor.

7.7.1.2 Encender el equipo, presionar el interruptor de encendido, localizado en la parte de adelante

del equipo, en la esquina inferior izquierda. Presione " I " para arrancar el sistema. El
encendido de la luz verde nos indica que el equipo esta prendido.

7.7.1.3 Cargue la página de método.

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7.8 INICIO DE TRABAJO

7.8.1.1 Abrir el software Agilent SpectrAA 240 AA.

7.8.1.2 Abrir Hoja de trabajo, Seleccionar “Nueva Desde”.
7.8.1.3 Seleccionar la Plantilla de Verificación a usar, para Operatividad Seleccionar la de Cobre.
7.8.1.4 Seleccionar el Método luego optimizar.
7.8.1.5 Alinear el quemador:
 Use una de las tarjetas Agilent para limpieza y alineación del quemador, localizar la posición
correcta que debe seguir el haz de luz.
 Gire el quemador usando la manija de rotación, hasta que la ranura este en paralelo con el
haz de luz.
 Ponga la tarjeta en forma perpendicular en el medio de la ranura del quemador y ajuste la
altura del quemador hasta que el haz de luz este dentro de la zona objetivo (determinado para
cada elemento).(Ver anexo 2)
 Verifique que el haz de luz continúe paralelo a la ranura del quemador poniendo la tarjeta
Agilent al inicio, centro y al final de la ranura. Reajustar si es necesario.

7.8.2 ENCENDIDO DE LLAMA

7.8.2.1 Ante de encender la llama se deberá tener en cuenta lo siguiente:
 El área de trabajo debe estar completamente libre de todo material peligroso llámese los
líquidos corrosivos y solventes inflamables.
 La trampa debe estar llena de un solvente compatible con las soluciones a leer.
 El tubo de drenaje debe estar situado correctamente en el envase de desechos
correspondiente.
 El quemador debe ser seleccionado de acuerdo a lo solicitado.
 El compartimiento protector de la llama y la chimenea deben estar ajustados.
 Verificar el sistema de descarga y provisiones de gases.
 Para encender la llama: presione el botón de encendido (mantenga presionado el botón
negro ubicado en la parte izquierda e inferior del equipo hasta que encienda la llama).
7.8.2.2 Optimización de llama
 Presione la tecla Optimizar y escoja el elemento requerido.
 Presione ajuste Escala, y busque la máxima energía de la lámpara.
 Aspire el blanco y presione “optimizar señal”, luego presione “cero instrumental” para el
respectivo ajuste.
 Aspire una solución patrón de la curva a leer.
 Buscar la máxima absorvancia ajustando la posición del quemador (usar las perillas de
dirección para dicha acción, la altura del quemador controla la sensibilidad e influye mucho
en la atomización y en la presencia de interferencias) y la bola de impacto (Impact bead)
 Puede encontrar la mejor optimización usando una solución de 5 ppm de cobre.

7.8.2.3 Calibración de la curva

 Seleccionar “Empezar” y seguir los pasos que indica el equipo
7.8.2.4 Lectura de Muestras
 Abrir la orden a leer y ubicar al analito correspondiente.
Nota: Proceder a lecturas de acuerdo a las condiciones instrumentales. Ver anexo No.2 y
Anexo 3 (Condiciones de trabajo para lectura de absorción atómica en el equipo
Aligent Tecnologies 200 y Rangos de absorvancia)

7.8.2.5 Apagar el sistema

 Antes de cerrar el sistema aspire solvente puro (agua) durante 10 minutos.
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 Cierre cada accesorio según sus manuales.

 Apague el instrumento.
 Cierre las llaves de los gases. No manipular los manómetros.
 Descarte el líquido de la trampa y agregue agua destilada.
 Apague el sistema de extracción de gases.

7.9 DESARROLLO DE UN MÉTODO NUEVO

7.9.1 Un método almacena los parámetros para ser usado para análisis, tales como mensurando y
los parámetros de calibración. Usted debe tener un método cargado para poder correr las
muestras. Existe dos tipos de métodos -- métodos de "usuario" (definido por el usuario) y
método del "CookBook" (estos poseen los parámetros recomendados por el fabricante para
cada elemento escogido).

7.9.1.1 Escoger el idioma del software.

7.9.1.2 Antes de proceder quizás sea necesario cambiar el idioma del software, este se realiza
durante el proceso de instalación.
7.9.1.3 Cargar un método.
7.9.1.4 Puede cargar un método del “Cookbook” según las recomendaciones del fabricante o del
método del usuario.
 Abrir una plantilla.
 Escoja seleccione desarrollar método " Cookbook " Escoja el grupo apropiado de elemento.
 Escoja el elemento requerido de la lista.
 El método del Cookbook será cargado y los parámetros siguientes: corriente de lámpara
activa, tipo de gas, longitud de onda y anchura de ranura.

7.9.1.5 Para acomodar según especificaciones un método:

 Cargue el método del Cookbook para el elemento requerido como descrito previamente y
modifique los parámetros.
 Guardar los parámetros del instrumento en la plantilla cargada.
7.9.1.6 Para cargar y modificar un método existente.
 Cargue el método o plantilla.
 Escoja el método de usuario.
 Modifique el método a modificar.
 Defina los parámetros del instrumento.

7.9.1.7 Las especificaciones de cada elemento son definidas en la página de parámetros del
instrumento, para ingresar dichos parámetros realizar lo siguiente:
 Escoja los parámetros de instrumentos en los métodos y especificar:
 El “modo del instrumento” (absorbancia o emisión).
 La “lámpara activa” (coloque la ubicación de la lámpara).
 La “corriente activa” para la lámpara activa.
 Si la “corrección de la lámpara de Deuterio debe estar apagada o encendida” (Si esta
disponible).
 El “tipo de gas”.
 La “longitud de onda”.
 El ancho de banda espectral, slit (la anchura de la “ranura”)

7.9.1.8 Poner los parámetros de medida, todos los parámetros de medida deben estar en esta
sección, dichos parámetros a excepción del modo de medida y el uso del SIPS, están en las
páginas de opciones. Para colocar los parámetros de medida:
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 Escoja las opciones y especifique:

 El “modo de medida”
 Si “SIPS” habilitado o no, si se opta por habilitar el SIPS, es necesario poner los parámetros
SIPS.
 El “tiempo de lectura”.
 El número de “duplicados” (solo en el modo de integración).
 La “precisión” (solo en los modos de integración y PROMT).
 La “demora de pre-lectura”.

7.9.1.9 Definir los estándares de calibración.

 Los estándares de calibración son ingresados en la opción parámetros de calibración, los
cuales deben ser únicos y deben entrar en forma creciente. El cálculo del cero no es editable,
el valor de este es siempre cero.

7.9.1.10 Para ingresar dicha información se procederá de la siguiente forma:

 Escoja los parámetros de calibración.
 Ingrese en forma creciente los estándares utilizados para dicha determinación.
 Coloque “Reslope” para ser utilizado (si amerita).
 Alinear la lámpara de cátodo hueco.

7.10 Lámpara de Cátodo Hueco.

7.10.1 Si se esta desarrollando un nuevo método, instale la lámpara y anote la posición donde se
instalara, asegurando que la posición escogida concuerde con la ubicación física de la
lámpara. Los números de cada ubicación deben estar marcados claramente.
7.10.2 Si se esta utilizando una lámpara con un método ya existente, verifique que en el método la
ubicación de la lámpara concuerda con la ubicación física.

7.10.3 Se debe alinear la Lámpara si ha realizado una de las siguientes acciones:

 Instalación de una nueva lámpara.
 Necesita mejor relación entre señal ruido.
 Uso de una lámpara que no es Varian.
 Cambio de ubicación de la lámpara dentro del equipo.
7.10.4 Si se utiliza el equipo en modo de emisión no es necesario alinear las lámparas ya que en este
modo dichas lámparas no se utilizan
7.10.5 Para alinear una Lámpara de Cátodo Hueco.
 Cargar un método apropiado, asegurarse de tener la lámpara requerida ubicada dentro
del equipo.
 Caliente la Lámpara 10 a 15 minutos. Si es que la lámpara no se encuentra activa o
encendida, revisar “corriente activa” en la página de parámetro del instrumento.
 Observar la barra de energía y empezar a girar lentamente uno de los botones de ajuste
de la lámpara, buscando siempre la mayor energía.
 Si la señal de la lámpara es demasiado pequeña, primero verificar si posee la lámpara
correcta para el método actual. Si es así entonces presione “Ajuste escala” y esto hará
que la señal se nivele, realizar lo mismo cuando la barra de señal es muy grande.

7.10.6 Lámpara de deuterio

La lámpara de deuterio solo deber ser alineada después que se haya instalado una
nueva, para alinear una lámpara de Deuterio seguir los siguientes pasos:
 En la página optimizar, escoger la opción “lámpara de deuterio”.
 Mientras se observa la barra de señal de la lámpara lentamente gire una de las perillas
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(localizados en el frente del compartimiento de la lámpara de deuterio).

 Si se observa una disminución de la señal, gire la perilla en la otra dirección hasta que se
encuentre la máxima señal.
 Si la señal de la lámpara es muy pequeña, primero verificar si esta instalado
correctamente, si es así, apriete reajustar, esto nivelara el rango en la pantalla. Realizar
esta acción si es que la señal también es muy grande.
 Esta acción se deber realizar con ambas perillas.

7.10.7 Disposición del nebulizador.

El nebulizador es enteramente ajustable, permitiendo cambiar la posición del capilar interno
para así poder variar el flujo de absorción de la solución (0 – 8 ml/min).

7.10.8 Calibración del método.

Todas las calibraciones usan el nuevo algoritmo racional, que proporciona un mejor ajuste
abs/conc vs abs:
A/C = a + b*A + c*A (donde A=absorbancia; C=concentración; y a, b, c son los coeficientes
de la curva).

Los estándares de calibración son medidas que se pueden encontrar en la página calibración
de parámetros.

7.10.9 Reslope en la calibración.

El reslope es un método rápido de ajuste para la posible desviación de la curva durante el

proceso de lectura.
Cuando se recalcula la pendiente los puntos de la curva son recalculados con un factor de
corrección de c/C.

8. RECOMENDACIONES

8.1 Asegurarse de que todo el sistema se encuentre limpio.

8.2 Colocar una bandeja o depósito bajo la campana al finalizar el trabajo de rutina para evitar
condensación sobre la máquina.

8.4 Descargar el recipiente de drenaje cuando sobrepase aproximadamente las dos terceras
partes de su volumen.

8.5 En el caso de detectar alguna anomalía durante la ejecución del procedimiento informar
inmediatamente al Supervisor.

8.6 Evitar mirar frontalmente las lámparas cuando se encuentren encendidas.

8.7 Evitar salpicaduras o derrames sobre el equipo y accesorios (monitor, CPU, teclado, mouse)

8.8 Lavar la cámara pre-mezcla con solución jabonosa y secar con aire periódicamente en
función del tipo de soluciones aspiradas.

8.9 Lavar los cabezales con solución de ácido nítrico 10%, enjuagar y secar con aire
periódicamente en función de soluciones aspiradas.
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8.10 Limpiar el nebulizador con mucho cuidado y lubricar debidamente de manera periódica y en
función de las soluciones aspiradas o deficiencia de absorbancia.

8.12 Manejar con cuidado las lámparas. Mantener constantemente actualizado el Inventario de
lámparas y Control de lámparas de absorción Atómica)

8.13 Mantener siempre el equipo en buenas condiciones de operatividad y presentación (Aplicar

silicona en pasta en las partes exteriores).

8.14 Mantener siempre el área de trabajo ordenada y limpia.

8.15 Mantener siempre llama laminar. En caso necesario, apagar para limpiar o lavar el cabezal.

8.16 Usar cuidadosamente alambre de cobre para eliminar obstrucción del sistema de aspiración.

8.17 Usar lentes de seguridad oscuros cuando se trabaje con óxido nitroso.

8.18 Verificar que exista volumen de agua en el loop de seguridad del drenaje.

8.19 Enjuagar el capilar entre muestra y muestra para evitar el arrastre

8.20 Llevar un inventario de insumos que se utilizan.

8.21 Verificar la ganancia de las lámparas en uso antes de comenzar la labor de lectura por AA,

8.22 Para ver las condiciones instrumentales para la lectura por AA Ver Anexo N ° 2.

9. REGISTRO Y ARCHIVO

Los registros generados por esta instrucción operativa son:

Tiempo
Código Nombre/Título Categoría Responsable Lugar Clasificación de
retención

CHECK LIST DE EQUIPOS Analistas Por Mes Anual

A
DE INSTRUMENTAL

INVENTARIO Y CONTROL [
] DE OPERATIVIDAD DE Analistas Por Mes Anual
A
LAMPARAS DE
ABSORCION ATOMICA
OPERATIVIDAD DEL
EQUIPO : AGILENT Analistas Por Mes Anual
A
TECHNOLOGIES 200
SERIES AA
CONDICIONES
AMBIENTALES SALA DE A Analistas Por Mes Anual
INSTRUMENTACIÓN

INVENTARIO DE INSUMOS Analistas Por Mes Anual

A
SALA INSTRUMENTAL
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ANEXO Nº 1

GANANCIA DE LAMPARAS DE ABSORCIÓN ATOMICA

SpectrAA
50/55/110/22
SpectrAA
Hollow 0 Series &
Element 880 (Flame) Limits % Gain
Cathode AA280
Symbol Instruments
Lamp (Flame)
Instruments
% Gain EHT Volts min max
Ag Silver 34 231 24 44
Al Aluminium 25 221 15 35
As Arsenic 70 284 60 80
Au Gold 49 285 39 59
Ba Barium 32 235 22 42
Bi Bismuth 61 376 51 71
Ca Calcium 25 225 15 35
Cd Cadmium 57 283 47 67
Co Cobalt 51 331 41 61
Cr Chromium 42 259 32 52
Cu Copper 50 255 35 65
Fe Iron 75 365 65 85
Hg Mercury 50 260 40 60
K Potassium 62 279 52 72
Li Lithium 24 14 34
Mg Magnesium 23 205 13 33
Mn Manganese 51 307 41 61
Mo Molybdenum 40 279 30 50
Na Sodium 35 223 25 45
Ni Nickel 389 -10 10
Pb Lead 46 296 36 56
Sb Antimony 64 382 54 74
Se Selenium 46 304 36 56
Sn Tin 61 373 51 71
Zn Zinc 34 270 24 44

ANEXO Nº 2
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Condiciones de trabajo para Lectura de Absorcion atomica en el equipo Aligent Tecnologies 200

Long Onda Corrector Curvas de Calibración

Analito Cabezal cm Deflector Slit nm Flama Tipo Flama
nm Fondo Nº01 Nº02 N°03
Cobre Operatividad 324.8 10 IB/FS 0.5 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 5
Oro 242.8 10 IB/FS 1 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 1, 2, 5, 10 0, 10, 20, 30
Oro Cianurado 242.8 10 IB/FS 1 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 0.5, 1, 2 0, 2, 5, 10
Plata 328.1 10 IB/FS 0.5 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 0.5, 1, 2 0, 2, 5, 10
Plata Cianurada 328.1 10 IB/FS 0.5 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 0.5, 1, 2 0, 2, 5, 10
Cobre 327.4 10 IB/FS 0.5 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 2, 5, 10 10,20,50 20,50,100
Cobre Cianurado 327.4 10 IB/FS 0.5 Aire/C2H2 Oxidante CON BG 0, 2, 5, 10 0,5,10,20,
Arsenico 193.7 5 IB 0.5 N2O/C2H2 REDUCTORA CON BG 0,2,5,10 0,10,20,50
Arsenico Cianurado 193.7 5 IB 0.5 N2O/C2H2 REDUCTORA CON BG 0,2,5,10 0,10,20,50
Hierro 248.3 5 IB/FS 0.2 N2O/C2H2 OXIDANTE CON BG 0,0.5,1,2 0,1,3,5 20,50,100
Mercurio 253.7 10 IB/FS 0.5 AIRE/C2H2 OXIDANTE CON BG 0,5,10,20 0,20,50,100

AU AG CU-FE-HG-AS

ANEXO Nº 3

RANGOS DE ABSORVANCIA ABSORCION ATOMICA

Curva 1 Curva 2 Curva 3 Curva 4

Elemento Rango de absorvancia Rango de absorvancia Rango de absorvancia Rango de absorvancia

Puntos Puntos Puntos Puntos
Medio Minimo Maximo Medio Minimo Maximo Medio Minimo Maximo Medio Minimo Maximo
2 5 10 20
Cobre 5 0.380 0.360 0.400 10 0.380 0.360 0.400 20 0.380 0.360 0.400 50 0.380 0.360 0.400
10 20 50 100
0.5 1 10
1 2 20
Oro 0.130 0.110 0.170 0.475 0.450 0.500 0.475 0.450 0.500
2 5 30
10
0.5 2
Plata 1 0.340 0.300 0.360 5 0.340 0.300 0.360
2 10
2 20
Arsenico 5 0.110 0.080 0.13 40 0.3 0.290 0.33
10 50
0.5 1 20
Hierro 1 0.160 0.140 0.200 3 0.380 0.360 0.400 50 0.380 0.360 0.400
2 5 100
5 20
Mercurio 10 0.050 0.040 0.060 50 0.290 0.270 0.330
20 100