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VEGETAL "ESTABLECIMIENTO DE EMBRIONES VEGETALES"

Angie Liseth Lindarte Sarmiento 1611535’;Daniela Álvarez 1611398’;Hugues Daniel


Castilla Duran 1611335’ & Vanessa Monsalve Barajas 1611512’.
02/12/22- 07/12/22
Grupo 4B
Universidad Francisco de Paula Santander
RESUMEN
El cultivo in vitro consiste en tomar una porción de una planta, puesto a que el ápice, una
hoja o segmento de tallo, meristemo, embrión, nudo, semilla, antera, etc, sea para colocarla
en un medio nutritivo estéril que se procede en una practica de laboratorio de vegetal, se
emplea por 2 fases, como: Fase preparativa y fase establecimiento.
Es muy importante tomar en cuenta la fase preparativa en cada paso, ya que juega un papel
donde depende que el cultivo in vitro tenga obtención en corto tiempo, para pasar a una
multiplicación exitosa. En la fase establecimiento es donde se debe tener en cuenta que
Dentro de la cabina de flujo laminar, se efectué los pasos e instrucciones para la siembre
impartidas por el profesor e estudiantes, sobre el medio la extracción del embrión e
implante,(colocar 2 explantes por frasco) seguido de esto repita el procedimiento de la fase
establecimiento por las indicaciones que haya dado el profesor de cuantos frascos de
cultivo se pueda hacer. Para finalizar Salga de la cabina y rotule (Nombre, Fecha y
Descripción). Ubique en el cuarto de crecimiento con las condiciones adecuadas para el
crecimiento y desarrollo del explante para que luego se haga lectura.
INTRODUCCIÓN
El cultivo in vitro de vegetales se basa en el aislamiento de órganos, tejidos o células
vegetales y en el ajuste de las condiciones necesarias para la obtención de respuestas
fisiológicas o morfogénicas a partir de estos explantes (Höxtermann, 1997). El cultivo de
células y tejidos in vitro (CCTV) involucra diferentes técnicas a partir de diferente material
vegetal tales como cloroplastos, células, tejidos, órganos e incluso plantas completas. 
El CCTV es una forma de reproducción asexual, la cual se puede realizar gracias al
mecanismo de división mitótico de las células vegetales. La división celular mitótica
implica una replicación de los cromosomas de las células hijas, por lo que poseen un
genotipo idéntico al de la célula madre. La potencialidad de una célula diferenciada para
generar tejidos nuevos y eventualmente un organismo completo, disminuye con el grado de
diferenciación alcanzado por esa célula, pero puede revertirse parcial o completamente
según las condiciones de cultivo a las que se la someta. De este modo y desde la óptica de
la conservación de especies vegetales la aparición de la variación espontánea no controlada
y al azar durante el proceso del cultivo in vitro se convierte en un fenómeno inesperado y
no deseado en la mayoría de los casos. Contrariamente a estos efectos, su utilidad en la
mejora de los cultivos mediante la creación de nuevas variantes también ha sido bien
documentada (Bouharmont, 1994; Mehta y Agra, 2000; Predieri, 2001).
RESULTADOS
La siembra fue realizada el día 2 de diciembre, se hace una sola lectura por cuestión de
tiempo, la observación se hizo el 6 de diciembre donde se ve que hubo crecimiento en el
maíz y tomate, no se encontraron contaminados pero si el de tomate con un poco de
engrosamiento. Para lograr un buen resultado , se toma cada paso estableciendo una buena
actitud.

Coleóptilo
Raiz principal

Figura 1. Crecimiento del embrión de maíz Zea mays


Figura 2. Brote formado por cotiledón de tomate Solanum lycopersicum
DISCUSION
En la presente práctica, se aplica el conocimiento adquirido de la práctica anterior, donde
nos permitíamos practicar la extracción de los explantes de los materiales vegetal. En
cuanto a los resultados obtenidos, se observan desde la primera lectura no hubo
contaminación, pero si engrosamiento atribuyéndose a una buena práctica en el
establecimiento del explante al medio, según (Benitez,2007), mejoramiento de las plantas,
una de las posibilidades más atractivas que ofrece la Biotecnología es la transformación
genética, También (Rivas-Morales, C. 2016) para unos buenos resultados se requiere una
esterilización mas efectiva en las herramientas de disección y la completa limpieza de las
instalaciones, un laboratorio de tejidos in vitro debe tener unos estándares de limpieza por
encima del laboratorio promedio, pues son delicados y pueden generar pérdidas
económicas.
CUESTIONARIO
1. Señale la composición del medio de cultivo utilizado. Justifique por qué se usaron las 
hormonas usadas.
R=

TIPO DE COMPOSICIÓN DE MEDIO HORMONA


EMBRION

maíz AG3 (2mg/l) y ácido ascórbico 2,4D; promueve el


(25mg/l) alargamiento celular, es
un regulador de crecimiento
y estima la
formación de raíces y
formación de callo.
tomate AG3 (2mg/l) y ácido ascórbico El AG3; promueve el
(25mg/l) alargamiento celular
especialmente en tallos y
entrenudos
(proceso de floración).

Frijol 2,4D (3mg/l) y ácido ascórbico El AG3; promueve el


(25mg/l) alargamiento celular
especialmente en tallos y
entrenudos
(proceso de floración).

2. A partir de este tipo de explante que tipo de crecimiento o formación se deberá


desarrollar? 
Justifique su respuesta.
R=

EXPLANTE DE FRIJOL EXPLANTE DE MAIZ Y TOMATE

formación de callos por el uso de la formación raíces, crecimiento y desarrollo


hormona 2,4D normal de la planta. Gracias a la adición de
la hormona AG3

3. Por qué considera usted que se escogió como explante el tejido seleccionado? ¿Se puede
considerar este procedimiento como embriogénesis somática? Justifique su respuesta en
cada caso.
R=Sí, ya que en ellas se consigue la acumulación de sustancias de reserva en el embrión
somático y células embrionarias que darán origen a todos los tejidos de la nueva planta
después del proceso de germinación, considerándose así, una técnica de embriogénesis
somática.
4. Los individuos resultantes serán libres de patógenos? Justifique su respuesta.
R=La técnica de embriogénesis somática permite la obtención de cultivares totalmente
libres de agentes patógenos, incluidos los virus, sin embargo, siempre se consta con
probabilidades de que se presente una contaminación de patógenos, ya sea por
contaminación exógena u otros factores.
5. Los individuos resultantes serán idénticos genéticamente entre sí. Justifique su
respuesta. 
R=Pueden emplearse mejora genética, y también pueden ser utilizados para la hibridación
somática a través de la fusión de protoplastos, transformación genética, producción de
semillas sintéticas, eliminación de agentes patógenos y preservación de germoplasma in
vitro artificiales.
6. Los individuos resultantes serán idénticos genéticamente al que le dio origen (planta
madre). Justifique su respuesta.
R=Si porque poseen la misma combinación genética que la planta madre.
CONCLUSIONES

 En la presente práctica, se aplica el conocimiento adquirido de la práctica anterior,


donde nos permitíamos practicar el aprovechamiento de los granos para el
desprendimiento de las semillas y así poder tomar los explantes. Siendo así los
brotes, un condicionante para el resultado a obtener en estos cultivos posteriores,
dejando en claro que se cumplía con el proceso de desinfección indicado.
 Las causas posibles de que no haya tenido contaminación, es porque se hizo el paso
a paso con bastante cuidado en la desinfección, también esta en la parte del
microrganismo que esta en el interior de la célula y en los espacios intercelulares y
por ello no hubo contaminación.
 Como consecuencia de esta practica se han determinado las mejores condiciones de
regeneración en una variedad de las semillas.
REFERENCIA
Kosky, R.G. (1998). Embriogénesis somática. En: Propagación y mejora genética de
plantas por biotecnología. Instituto de Biotecnología de las Plantas. Santa Clara, Cuba.
Höxtermann, E. 1997. Cellular “Elementary Organisms” in vitro. The Early Vision of
Gottlieb Habertlandt and its Realization. 100: 716-728.
Bouharmont, J. 1994. Application of Somaclonal Variation and in vitro Selection to Plant
Improvement. Acta Hortic. 355: 213-331.

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