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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERU

FACULTAD DE INGENIERIA QUÍMICA

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE INGENIERIA QUIMICA

MANUAL DE LABORATORIO DE QUÍMICA

ORGANICA II

Dr. Abel Filomeno Inga Díaz

HUANCAYO- PERU

2022

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ÍNDICE

PROLOGO 3

INSTRUCCIONES GENERALES 4

PRACTICA 1 : Aldehídos y cetonas 6

PRACTICA 2 : Ácidos carboxílicos 9

PRACTICA 3 : Síntesis de Ester 11

PRACTICA 4 : Saponificación 13

PRACTICA 5 : Síntesis de ácido acetilsalicílico. 15

PRACTICA 6 : Aminas aromáticas 17

PRACTICA 7 : Determinación de grasas. 19

PRACTICA 8 : Determinación cuantitativa de azúcar 23

PRACTICA 9 : Determinación de proteínas 25

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PROLOGO

El presente manual de laboratorio es elaborado esencialmente como un facilitador

del aprendizaje para el curso de Química Orgánica II.

Con este manual se pretende alcanzar y consolidar las metas de enseñanza que
brinda la Facultad de Ingeniería Química, contando con la participación activa de
los estudiantes.

Así mismo el permanente interés de lograr profundizar, complementar e interpretar

las experiencias realizadas en el laboratorio.

Entendiendo que el laboratorio es un lugar donde se fortalece la capacidad

procedimental de la asignatura, aprende esta ciencia observando, manipulando el
comportamiento de la materia en las condiciones que están determinadas.

Se tiene que entender que este manual es una adaptación que han sido propuestos
por otros autores.

Las sugerencias, opiniones aportes y comentarios que puedan formular los

docentes, alumnos serán tomados en cuenta para mejorar las posteriores
publicaciones.

El autor.

Huancayo, 2022.

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INSTRUCCIONES GENERALES

1. Leer con anticipación el manual de laboratorio.

2. Anotar datos y medidas directamente en el cuaderno de notas.
3. Tomar precauciones al encender el mechero de gas.
4. Consultar con el profesor cuando no este explicada una operación o reacción química.
5. Utilizar gafas de protección cuando se manejen compuestos químicos peligrosos.
6. Leer con cuidado los rótulos y etiquetas de los reactivos químicos.
7. Dejar limpios los materiales y la mesa de trabajo, después de terminada la práctica.
8. Limpiar de inmediato el sitio donde haya derramado un compuesto químico.
9. Abrir el caño para diluir los ácidos o soluciones sobrantes que se echan al lavadero.
10. Depositar los papeles inservibles. Palitos de fósforo y otros sólidos sobrantes en el
cesto de basura.
11. Informar de los por menores que se desarrollan en el laboratorio al docente.
12. Familiarizarse con los materiales de vidrio y otros, así como de la forma correcta de
operar la mayoría de pasos del experimento.

SE RECOMIENDA:

1. Usar mandil, para protegerse de las salpicaduras de sustancias químicas o soluciones.

NO SE RECOMIENDA:
1. Conversar o hacer ruidos que molesten el normal desenvolvimiento de la práctica.
2. Efectuar experiencias que no estén en la práctica desarrollada en el día.
3. Arrojar desperdicios al lavadero.
4. Tocar con las manos compuestos químicos.
5. Fumar en el laboratorio.
6. Devolver reactivos o soluciones sobrantes a sus frascos originales.
7. Oler o gustar compuestos químicos o soluciones salvo que esté autorizado.

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Para que el lugar de trabajo sea un lugar seguro y eficiente se deben cumplir ciertas reglas:
1. Los productos químicos no se deberán arrojar al tacho de la basura. Las sales solubles
deberán ser disueltas en agua y vaciadas en el desagüe, los materiales insolubles
deberán ser vaciados en un vaso de precipitación u otro recipiente destinado
específicamente para ese fin. Cuando haya duda de cómo desechar un producto
químico, consultar al docente.

2. No toque ningún producto químico con las manos al descubierto ni con su ropa. Si
accidentalmente cae un producto químico sobre su piel, inmediatamente aplíquese un
chorro de agua fría y notifique al docente. Si se trata de un ácido o una base fuerte,
ponga inmediatamente agua sobre su piel, cúbrala con bicarbonato de sodio y
notifique al docente.

3. Cualquier derrame de sustancias en la mesa debe limpiarse inmediatamente.

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4. Los experimentos en los que se libera gas corrosivo, deberán hacerse debajo de la
campana.

5. Cuando se está calentando un tubo de ensayo nunca debe apuntarse hacia ninguna
persona.

6. No se deben realizar experimentos no autorizados.

7. En caso de salpicadura de un reactivo a los ojos, lávelos profusamente con agua

corriente. Informe al profesor.

8. Para quemaduras de la piel use solución de ácido pícrico, o úntese con pomada de
picrato de butesin.

Para pequeños cortes en los dedos, lave la herida con un poco de agua oxigenada y de
unos toques con aseptil rojo y cubra la herida con una curita.

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PRACTICA N° 1

ALDEHIDOS Y CETONAS
OBTENCION DEL BUTIRALDEHIDO
Los aldehídos y cetonas (compuesto carbónico) constituyen una clase muy importante
de compuestos orgánicos debido a su alto grado de reactividad por la presencia del grupo
funcional C=O
La reactividad de los aldehídos y cetonas debido a su carácter insaturado del grupo
carbónico, da lugar a reacciones químicas comunes en ambos tipos de sustancias, siendo
las más importantes las de adición, oxidación y polimerización.
Los aldehídos alifáticos pueden obtenerse a partir de los alcoholes primarios y las
cetonas, a partir de los alcoholes secundarios mediante oxidación.
Como agente oxidante se emplea una solución acuosa de ácido sulfúrico y bicromato de
sodio y potasio. Los aldehídos hierven a temperatura inferiores a los alcoholes y ácidos,
por carecer de hidrogeno adecuado que pueda formar puentes de hidrogeno.
Los aldehídos fácilmente se oxidan. Esta propiedad sirve para diferenciar de las cetonas,
que son resistentes,
Los aldehídos de pequeño peso molecular poseen olores desagradables en combinación
con otras funciones y las de mayor peso molecular poseen olores desagradables. Los
aldehídos de C8 a C11 son utilizados en la preparación de perfumes.

MATERIALES:
• Tubos de prueba
• Baño María
• Mechero
REACTIVOS:
• Amoniaco
• Nitrato de plata
• Formaldehido (formol)
• Fehling A
• Fehling B
• Reactivo de Schiff
• Permanganato de potasio
• Fucsina
• Benzaldehído
• Bisulfito de sodio
• Resorcina (resolcinol) m-𝐶6𝐻4(𝑂𝐻)2

OBTENCION DEL BUTIRALDEHIDO (BUTANAL)

Se procederá con el método de oxidación de alcoholes reacción:

3CH3CH2CH2CH2OH + K2Cr3O7 +H2SO4 → 3CH3CH2CH2COH + K2SO4 +

Cr2(SO4)3 +7H2O

MATERIALES:
• Matraz de tres bocas
• Tubo de ensayo
• Vaso de precipitación de 250 ml.
• Embudo con llave

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• Equipo de destilación
• Probeta graduada
• Mechero bunsen
• Termómetro

REACTIVOS:
• Dicromato de potasio
• Ácido sulfúrico
• Alcohol butílico (butanol)
MONTAJE DEL EQUIPO:

PROCEDIMIENTO:
Disolver 50 g de dicromato de potasio en 265 ml de agua con agitación y enfriamiento
continuo, poco a poco añadir 35 ml de ácido sulfúrico concentrado.
En un matraz de tres bocas de 500 ml adaptar el termómetro, en un embudo de llave y
en una cabeza de destilación colocar en el matraz 37 ml de alcohol n-butílico, con
trocitos de piedra pómez, con mucho cuidado agregar la solución de bicromato
contenida en el embudo poco a poco, en 20 minutos cuando los vapores del alcohol
alcancen la parte baja de la columna de fraccionamiento. La temperatura del líquido en
el matraz o debe superar los 75 % si tiene menos de 65 °C puede ser necesario calentar
suavemente.
El destilado consta de dos etapas, la capa superior de aldehído, y la inferior de agua, se
decanta la capa acuosa en un embudo de llave, la capa de aldehído se separa por
decantación y se destila recibiéndose el destilado en un frasco tarado.

1. ACCION REDUCTORA:
a.) REACCION DE TOLLENS: ESPEJO DE PLATA. -
Tomar 2 ml de reactivo de tollens recientemente preparados agregar 0,5 ml de
formol (formaldehido) calentar a baño María observar e interpretar la reacción.
b.) REACCION DE FEHLING
Tomar 1 ml de la solución A y 1 ml de solución B, mezclar bien y observar, agregue
0.5 ml de formol, calentar en baño María, observar e interpretar la reacción.
c.) ENSAYO DE SCHIFF (FUCSINA DECOLORADA)
A una solución de fucsina de color violáceo agregar una solución de bisulfito de
sodio (𝑁𝑎𝐻𝑆𝑂3), se decolora; y al añadir una gota de butiraldehido, la solución
adquiere color primitivo de fucsina.
d.) REACCCION CON 2,4 DINITROFENILHIDRACINA
Disuelve 2 gotas o 3 gotas de muestra en 2 ml o 3 ml, de etanol y agregue gota a gota
(hasta 10 gotas) de una solución de 2,4 DNFH; si no se forma precipitado inmediato,

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añada 2 gotas más de 2,4 DNFH y espere 13 minutos.

e.) REACCION CON PERMANGANTO DE POTASIO
A un tubo que contenga 2 ml de permanganato de potasio, más 3 gotas de H2SO4
concentrado, adicionar 5 gotas de acetaldehído. Agite la mezcla y observe. Repita
la experiencia utilizando cetona y comparar.
f.) REACCION CON ACIDO SULFURICO
En un tubo de ensayo coloque 2 ml, de acetaldehído. Añada cuidadosamente con 1
gota o 2 gotas de 𝐻2𝑆𝑂4 concentrado; mezcle bien y observe el cambio de
temperatura, deje enfriar y añádase 3 ml o 4 ml de agua y observe los resultados,
que cosa es el producto o insoluble ¿Qué propiedad del acetaldehído es el que se ha
demostrado? Repita con acetona.
g.) REACCION DEL HALOFORMO
Agregue 5 gotas de muestra a 2 ml de una solución de 𝑁𝑎𝑂H al 5 %. Agregar una
solución de lugol hasta que la solución se torne de color amarillo. Agitar y calentar
en un baño de agua aprox. 70 °C, durante 5 minutos. Observe.
h.) ACCION DEL FORMOL SOBRE LAS SUSTANCIAS PROTEICAS
En un tubo de ensayo con butiraldehido agregar clara de huevo esta se endurece, de
aquí la aplicación del formol para conservar piezas anatómicas.
i.) INVESTIGAR LA PRESENCIA DE FORMOL EN LA LECHE
Tomar 5 ml de leche, agregar 1 volumen de HCl concentrado mezclado con unas gotas
de FeCl3 mezclar y poner el tubo en agua hirviente, si aparece un color morado, si hay
formol.
RECONOCIMIENTOS DE ACETONAS:
1) REACCION DE BEGAL:
Tomar en un tubo de ensayo 2 ml de cetona, agregar 2 gotas a 3 gotas de solución
de nitroprusiato de sodio al 10 % agitar para uniformizar el color, inclinar el tubo y
por las paredes agregar 1ml de amoniaco, repetir el ensayo con formol y comparar.
2) REACCION DE LIEBEN:
Tomar en un tubo de ensayo 3 gotas a 5 gotas de cetona, agregar 2 ml de lugol luego
2 ml de solución de NaOH al 10 % se formará un precipitado de olor característico
(yodoformo), repetir con el formol y comparar.
3) REACCION DE LA ACETONA:
Calentar en un tubo de ensayo 3 gotas de acetona, en otro tubo 5 gotas de cloroformo
y 0,05 g de NaOH, observar el carácter del resultado y su olor.

CUESTIONARIO:
a. Formula y ajuste la ecuación a la oxidación del alcohol n-propionaldehido cuando se
utiliza como agente oxidante una solución de Dicromato sódico.
b. Formule las ecuaciones que representan la oxidación del acetaldehído por medio de:
a) El reactivo de Tollens b) La solución de Fehling
c. Mediante las respectivas ecuaciones químicas interprete los resultados de los
experimentos de aldehídos y cetonas.
d. ¿Qué propiedades químicas diferencian a los aldehídos de las cetonas?
e. Calcular el peso de Dicromato de potasio teóricamente necesario (teniendo en
cuenta la reacción ajustada), para oxidar 60 g de alcohol n-butílico a butiraldehido.
f. ¿Cómo se prepara la solución sulfocrómica y realice la ecuación?
g. ¿Realice la reacción de identificación del aldehído con permanganato de potasio?

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PRACTICA N° 2

RECONOCIMIENTO DE ACIDOS CARBOXILICOS

I. OBJETIVOS
Reconocer e identificar ácidos con reacciones cualitativas en las que interviene el
grupo funcional COOH.

II. FUNDAMENTO TEORICO

LOS ÁCIDOS CARBOXÍLICOS

Son compuestos orgánicos que se caracterizan por tener el grupo funcional
CARBOXILO (-COOH).
Para el reconocimiento de los ácidos carboxílicos los ensayos con bicarbonato de
sodio e indicadores, son muy útiles pues permiten establecer el carácter ácido de
la sustancia analizada.

III. MATERIALES
1. 10 tubos de ensayo
2. Una Pipeta graduada de 1 ml
3. Una pipeta graduada de 5 ml
4. Un vaso de precipitados de 500 ml
5. Una Varilla de vidrio
6. Una plancha de calentamiento
7. Una gradilla para tubos de ensayo
8. Una pinza metálica para tubo de ensayo
9. Un aro con nuez
10. Una espátula
11. Perlas de vidrio

Reactivos
1. Muestras problema: alcohol, un aldehído, una cetona, un éster o un ácido.
2. Bicarbonato de sodio al 10 %
3. Solución indicadora de rojo congo KI 1%
4. Almidón 10 %
5. HCl 1N
6. FeCl3 10 %
7. Clorhidrato de hidroxilamina en metanol con timolftaleina KOH 2 N en metanol
8. Reactivo para anhídridos (25 ml de HNO3 concentrado, 100 ml de ácido acético
glacial y 1 g de úrea)
9. Ácido mercaptoacético
10. Anhídrido acético.
11. Ácido sulfúrico concentrado Cloroformo
12. Ácido acético al 1 %.
13. Ácido ascórbico.
14. Acetato de etilo
15. Acetato de butilo
16. Benzoato de sodio
17. Papel tornasol rojo y azul

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IV. PROCEDIMIENTO

ÁCIDOS
Realice todos los ensayos que se describen a continuación en tubos de ensayo
LIMPIOS y SECOS, con cada una de las siguientes sustancias: ácido acético,
ácido ascórbico, benzoato de sodio y acetato de etilo.

Ensayo con bicarbonato de sodio: Coloca una pequeña cantidad de la sustancia

a analizar (0,1 g o 0,2 ml) y luego adicione 3 ml de solución de bicarbonato de
sodio al 10 %. Si se produce una efervescencia por el CO2 liberado es porque la
sustancia tiene características ácidas o es fácilmente hidrolizable (haluros de ácido
y anhídridos).

Ensayo con indicadores: Coloque una pequeña cantidad de la solución a analizar

(0,1 g o 0,2 ml) en un tubo de ensayo y adicione 3,0 ml de agua destilada. Primero
verifique el pH de la solución con papel indicador universal y con papel tornasol
rojo y azul. Luego adicione una gota del indicador rojo congo. Observar.

Ensayo de yodato-yoduro: Coloque en un tubo de ensayo 0,1 g o 0,2 ml de la

sustancia a analizar, añada dos (2) gotas de la solución de KI al 1 % y dos (2)
gotas de KIO3 al 1 %. Coloque el tubo al baño maría por un minuto y deje enfriar;
luego añada dos a tres (2-3) gotas de solución de almidón y observe la aparición
de una coloración azul. Si hay exceso de yodo la solución se torna casi negra.

V. BIBLIOGRAFÍA

• Hart H., Craine L. y Hart. D. Química Orgánica. McGraw Hill. Novena

edición. España. 1997. McMurry, J. Química Orgánica. Quinta edición,
Thomson editores, México, 2001
• The Merck Index: an encyclopedia of chemical. Drugs and Biologicals.
Budavari S. Guide for safety in the Chemical Laboratory.
• Carey Francis A. Química Orgánica Mc Graw Hill, Tercera Edición. España.
2000

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PRACTICA N° 3

ESTERIFICACION

Introducción
Los ésteres se preparan generalmente por la reacción de alcoholes o fenoles con ácidos o
sus derivados. El método más importante para preparar un éster es la reacción catalizada
por un ácido y un alcohol, conocido como esterificación de Fischer. La ecuación general
es:

Este método es útil debido a que la mayoría de los alcoholes pueden conseguirse en el
mercado y no son caros. La reacción se lleva a cabo usando exceso de alcohol y una
pequeña cantidad de ácido sulfúrico como catalizador.
El alcohol sirve como disolvente para la reacción.

Objetivo
Preparar un éster mediante la reacción de condensación de un ácido carboxílico con un
alcohol.

Lee el procedimiento con cuidado y selecciona el material y las sustancias que utilizarás
en esta actividad.

Materiales
1. 03 tubos de ensayo
2. 1 mantilla de calentamiento
3. 03 vasos de precipitación
4. 1 probeta graduada de 50 mL
5. 1 propipeta
6. 1 embudo de separación
7. 1 espátula
8. Papel filtro
9. Papel pH

Reactivos
1. Ácido acético
2. Alcohol amílico
3. Alcohol etílico
4. Ácido sulfúrico concentrado.
5. Alcohol octilico

Procedimiento:

Ensayo 1
1. En un tubo de ensayo vierte 1 mL de ácido acético y agrega 2 mL de alcohol pentílico
(alcohol amílico) y mezcla perfectamente.
2. Agrega de dos a tres gotas de ácido sulfúrico concentrado y agita nuevamente.

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3. Estando completamente homogenizada la mezcla, se introduce el tubo de ensayo durante

10 a 15 min a baño maría, observa si hay algún cambio y oler jalando el aroma hacia la
nariz con la mano (anota tus resultados).

Ensayo 2
1. En un tubo de ensayo vierte 1 mL de ácido acético y agrega 1 mL de alcohol octílico y
mezcla perfectamente.
2. Repite los pasos 2 y 3 del ensayo 1.

Ensayo 3
1. En un tubo de ensayo vierte 1 g de ácido salicílico y agrega 1 mL de alcohol amílico y
mezcla perfectamente.
2. Repite los pasos 2 y 3 del ensayo 1.

Cuestionario
1. ¿Qué características tiene el olor de los ésteres formados?
2. ¿Para qué se agrega ácido sulfúrico?
3. ¿Por qué se caliente?
4. ¿Qué esteres se formaron?
5. ¿Cuáles son las ecuaciones que representan estas reacciones de esterificación?

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PRACTICA N° 4
SAPONIFICACION

OBJETIVO
Descubrir la reacción de saponificación a partir de la elaboración de jabón

INTRODUCCION
La saponificación es un proceso mediante el cual los ácidos grasos reaccionan con álcalis
o bases (NaOH, KOH, Ca(OH)2, etc.) dando sales denominadas jabones.
Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose
en los dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con
los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en definitiva las sales
sódicas o potásicas de los ácidos grasos. La reacción es la siguiente:

PROCEDIMIENTO
A.Reacción de la saponificación
✓ En un vaso de precipitado ponga 6 g de aceite de coco.
✓ Caliente hasta que la grasa se funda totalmente.
✓ Deje enfriar.
✓ Cuando la temperatura de la grasa sea de 40 °C (no mayor) adicione 4 ml de la
solución de hidróxido de sodio al 30 % procurando que esta adición sea gota a
gota y agitando.
✓ Se deja enfriar y se le va tomando la temperatura. Se enfría el resultado con
poquita agua de poco en poco y de vez en cuando.
✓ Enfríe mediante una corriente de agua.

B. La pasta que se forma es el jabón.

C. Pruebas con el jabón obtenido.

1. Prueba de solubilidad.
✓ En dos tubos de ensayo, ponga cantidades aproximadamente iguales de jabón
referencia o patrón y el recientemente preparado adicione 5 ml de agua
destilada a ambos tubos.
✓ Tape los tubos y agítelos vigorosamente observe que sucede.
✓ En dos tubos de ensayo, ponga cantidades aproximadamente iguales de jabón
referencia o patrón y el recientemente preparado, adicione 5 ml de una
solución diluida de cloruro de calcio.
✓ Tape los tubos y agítelos vigorosamente observe que sucede

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2. Obtención de los ácidos grasos

✓ En un tubo de ensayo, coloque una pequeña cantidad de jabón.
✓ Añada 5 ml de agua destilada.
✓ Añada 1 ml de ácido clorhídrico.
✓ Se puede observar cómo se separan las mezclas una de cada forma diferente
y la que más se separa es la del aceite de coco.

Cuestionario

1. ¿Qué es la saponificación, cuáles son sus reacciones?

2. ¿Qué son las saponinas?
3. ¿Porqué al agregar cloruro de sodio o una solución jabonosa se separa el jabón?
4. Explica brevemente como los jabones ejercen su acción limpiadora.
5. Que diferencia estructural existe entre un jabón y un detergente, cuáles son las
ventajas que presenta el detergente.

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PRACTICA N° 5

SINTESIS DE ÁCIDO ACETILSALICÍLICO

1. OBJETIVOS
• Efectuar la síntesis de un derivado de un ácido carboxílico como lo
es un éster.
• Sintetizar el ácido acetilsalicílico por un proceso de química verde.

2. FUNDAMENTO TEORICO:
• El ácido acetilsalicílico es un éster de ácido acético y ácido
salicílico (actúa como alcohol) aunque se pueden obtener esteres de
ácido por interacción directa de ácido acético con un alcohol o
fenol, se suele usar un sustituto de ácido acético, anhídrido acético,
como agente acetitante. Este permite producir esteres de acetato con
velocidad mucho mayor, por acción directa del ácido acético.
• Reacción de esterificación que tiene lugar como se indica a continuación:

3. METODOS DE SINTETIZADO:
• Esterificación (es la condensación de un alcohol anhídrido de ácido
carboxílico con un catalizador H2SO4)
• Cristalización
• Filtración al vacío
• Determinación del punto de fusión (140 °C)
Nota: es una reacción reversible porque al ser sometido a recristalización
se obtiene nuevamente el ácido acetilsalicílico.
¿CÓMO FUNCIONA EL MECANISMO?
Por una sustitución (ADICION) nucleofílica, donde el H2SO4 protona a
un grupo carbonilo, dejándolo con deficiencia de 𝑒 − y el ataque se realiza
en el C del carbonilo, ya que cuenta con una deficiencia de 𝑒 − porque
está unido al oxigeno que es más electronegativo.

4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
4.1) MATERIALES:
✓ Agitador magnético
✓ Termómetro 150 °C
✓ Balanza
✓ Vaso de precipitación
✓ Probeta

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✓ Luna de reloj
✓ Varilla
✓ Papel filtro
4.2) REACTIVOS:
✓ Ácido salicílico
✓ Anhídrido acético
✓ Tricloruro férrico
✓ Ácido sulfúrico
4.3) PROCEDIMIENTO:
SINTESIS:
- En un vaso de 100 ml colocar...g ácido salicílico +...ml de
anhídrido acético, añadir 2 gotas de H2SO4
- Agitar la mezcla para que la T° se eleve y todo el ácido de disuelva
- Llevar aproximadamente 5 minutos en baño María.
- Someter a baño de agua fría o baño con hielo, hasta que cristalice.
- Añadir 50 ml de agua fría hasta desaparecer el olor del ácido
acético y filtrar al vacío en un embudo Buchner.
- Pesar la cantidad de ácido acetilsalicílico.

DETERMINACION DE LA PUREZA DE ACIDO

ACETILSALICILICO MEDIANTE PUNTO DE FUSION
- Colocar una porción de ácido acetilsalicílico sintetizado en un
tubo capilar aproximadamente hasta una altura en el tubo de
1mm.
- Introducir el tubo capilar en el equipo correspondiente para la
determinación del punto de fusión del sólido.
- En el equipo se programa una temperatura de 127 °C y a partir
de ese valor, observar cuando se produce la fusión de la
muestra (anotar el valor de la T°)

TEST DE PUREZA
Para ver si la aspirina obtenida está contaminada con el reactivo
inicial, utilice el FeCl3 para detectar fenoles (color violeta
intenso).
SI HAY REACTIVO QUE NO REACCIONARON
Transferir el producto en un vaso de 100 ml + 50 ml de solución
saturada de bicarbonato de sodio y se agita hasta terminar el
burbujeo, se filtra y se lava con 5 ml de agua.
En un vaso preparar 7 ml de HCl, añadir 20 ml de agua y añadir
agitando el producto, hasta que la aspirina se precipite, enfriar
en un baño de hielo y filtrar.

CUESTIONARIO.
1. Que significa el termino analgésico
2. Explicar porque otros métodos se obtiene el ácido acetil salicílico

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PRACTICA N° 6

AMINAS AROMATICAS

FENILAMINA O ANILINA

INTRODUCCION
En el laboratorio la reducción del nitrobenceno a anilina se realiza corrientemente con
estaño como reductor en presencia de HCl.
Mediante este procedimiento se obtiene la anilina con buen rendimiento y no se requiere
de un motor de agitación, aunque los productos químicos son más caros que cuando se
utiliza hierro como reductor, para esto se utiliza un buen motor de agitación.
En la industria el procedimiento más empleado es el que se utiliza hierro como reductor
es presencia de HCl, es el procedimiento Bechamp.
Brimmeyer mucho más económico y simple.
La anilina o fenilamina se prepara por reducción del nitrobenceno, empleado estaño y HCl
para la producción del hidrógeno. En la industria emplea hierro y agua.
C6H5NO2 + 3H2 → C6H5NH2 + 2H2O
La reducción de los nitrocompuestos aromáticos es un método general de preparación de
aminas.
La anilina se utiliza para tintas, en base de los colorantes.
OBJETIVO
El estudio de la fenilamina o anilina tiene como fin primordial, los métodos de obtención
y son muy importantes en el campo industrial.
PREPARACIÓN DE LA ANILINA POR REDUCCIÓN DEL NITROBENCENO

MATERIALES
• Un matraz de dos bocas de 500 mL
• Agitador mecánico
• Refrigerante de Reflujo
• Mechero de bunsen
REACTIVO

• Hierro en polvo 500 ml.

• HCl concentrado
• Nitrobenceno

PROCEDIMIENTO

• Un matraz de dos bocas de 500 ml de capacidad, se provee de un agitador

mecánico y un refrigerante de reflujo.
• En el matraz se colocan 20 g de hierro en polvo,
• 17,5 ml de H2O, 1ml de HCl concentrado y 1 ml de nitrobenceno.
• Se pone en funcionamiento el agitador y se regula su velocidad de modo que la
agitación sea vigorosa.
• El matraz se calienta con un mechero de bunsen hasta que se inicia una reacción

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exotérmica y el líquido llegue a su punto de ebullición.

• Por el extremo superior del refrigerante se añaden proporciones de 1 ml – 2 ml,
de nitrobenceno a intervalos de 1 hasta un total de 20 ml de nitrobenceno.
• Cuando se ha añadido todo el nitrobenceno, la mezcla se continúa calentando a un
reflujo suave durante 30 minutos.
• Al final de la reacción se deja agitar, se deja agitar, se añade
• 50 ml de H2O a través del refrigerante y el aparato se modifica para un arrastre de
vapor.
• Después de recoger 175 ml de destilado, separar la anilina con embudo de llave.

CUESTIONARIO
1) ¿Qué es la anilina?
2) La anilina se prepara por reducción del nitrobenceno ¿Cuál será su fórmula?
3) Indique qué pruebas se realiza para reconocer la anilina.
4) Indique la fórmula del nitrato de diazobenceno.
5) ¿Cuántos gramos de fierro se necesitarán para reducir 0,8 moles de nitrobenceno
a anilina, suponiendo que todo el hierro se oxida a Fe3O4?
6) Si el nitrobenceno hidrogena en presencia de platino o níquel como catalizadores
¿Qué volumen de hidrógeno, medido 0 °C 760 mmHg de presión será necesario
para reducir 0,6 moles de nitrobenceno?

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PRACTICA N° 7

DETERMINACIÓN DE GRASAS

I. OBJETIVOS:
⯍ Reconocer la presencia de lípidos y colesterol en las diferentes muestras.
⯍ Diferenciar ácidos grasos saturados de insaturados.
⯍ Evaluar exactamente el grado de acidez de un aceite comercial.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los lípidos son sustancias que, a diferencia de los carbohidratos y proteínas, no presentan
una estructura básica típica sino que pueden clasificarse en subgrupos con características
muy singulares. La cualidad en común de todos los lípidos en su solubilidad en solventes
no polares.
Los lípidos pueden clasificarse de acuerdo a su capacidad de hidrolizarse en
medioalcalino en:
⯍ Lípidos saponificables (triglicéridos, ceras, glucolípidos, prostaglandinas)
⯍ Lípidos no saponificables (terpenos, esteroides)
En nutrición es muy común relacionar como principal fuente de lípidos a los aceites y
grasas, compuestos por ácidos grasos insaturados y saturados respectivamente. Por ello,
una forma de medir el grado de insaturación de los componentes de una grasa o aceite
es el ÍNDICE DE YODO. El índice será mayor mientras más enlaces dobles posea el
ácido graso. Por ejemplo: El índice de yodo del ácido oleico (C18:1∆9) es de 90, mientras
que el del ácido linoléico (C18:1∆9,12) es de 181 y el del ácido linolénico (C18:1∆9,12,15)
es 274.

El yodo se adiciona a los carbonos con dobles enlaces formando un compuesto saturado.

Fuente Índice de Yodo Fuente Índice de Yodo

Ácido Esterárico 0 Aceite de oliva 75-95
Ácido Oleico 90 Aceite de Linaza 175-205
Ácido Linoléico 181 Mantequilla 25-40
Ácido Linolénico 274 Manteca 45-90

2.1 Tinción de Sudán III

El Sudán III es un colorante soluble en
grasas que, al tener una gran afinidad
por los compuestos no polares, tiñe de
color rojo- anaranjado los
triglicéridos.

Estructura del
colorante Sudán III
2.2 Reacción de colesterol (Liebermann-Burchard)
El colesterol es un esterol, es decir una molécula formada por un conjunto
de anilloso núcleo esteroidal y un grupo hidroxi. En presencia del anhidrído
acético (CH3CO)2O y ácido sulfúrico (H2SO4) puede condensarse formando
compuestos intensamente coloreados de color verde.

2.3 Grado de acidez

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 20

El aceite es el líquido obtenido por presión o extracción de la materia grasa

de diversos frutos y semillas, como los aceites de oliva, maíz, pepita de uva,
girasol, entre otros. El más familiar nos resulta el aceite de oliva en sus
diversas calidades como virgen, extra virgen, puro.

La acidez de las sustancias grasas es muy variable. Generalmente las grasas

frescas o recién preparadas no contienen ácidos grasos libres o si los
contienen los tienen en muy pequeñas cantidades. Al envejecer,
especialmente sino han estado protegidosde la acción del aire y la luz, su
acidez crece lentamente al principio y con cierta rapidez después.

El grado de acidez equivale al % de ácidos grasos libres en un aceite, que se

expresa como si todos los ácidos libres (oleico, palmítico, entre otros) fueran
ácido oleico.

En la presente práctica se determinará la concentración de ácido oleico en

algunas muestras de aceite comercial por titulación con KOH, esto es,
calcularemos la concentración en ácido oleico de las distintas muestras a
partir de la reacción ácido - base:

C17H33 - COOH + KOH C17H33 - COO- K+ + H2O

III.RECURSOS MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Reactivos:
⯍ Ácido sulfurico (H2SO4) conc.
⯍ Ácido clorhídrico (HCl) conc.
⯍ Anhídrido acético ((CH3CO)2O)
⯍ Mezcla cloroformo-metanol-ácido clorhídrico (200:100:1)
⯍ Solución de almidón
⯍ Lugol
⯍ Tetracloruro de carbono (CCl4)
⯍ Sudam III
⯍ Mezcla éter-etanol neutralizado
⯍ NaOH (para titulación)

Materiales:
⯍ Tubos de ensayo (10)
⯍ Plancha de calentamiento
⯍ Centrífuga
⯍ Homogenizador
⯍ Pipeta graduada de 10 mL y propieta
⯍ Bagueta
⯍ Vaso de precipitado (250 mL)
Muestras:
⯍ Yema de huevo
⯍ Aceite de oliva

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 21

⯍ Aceite vegetal simple

⯍ Aceite vegetal PREMIUM
⯍ Otros aceites (linaza, sacha inchi)
⯍ Tocino o grasa de pollo
⯍ Mantequilla
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
4.1 Prueba de solubilidad y tinción de lípidos
1. Vierte 2mL de aceite en un tubo de ensayo y añade 2 mL de agua. Observa.
2. Añade 2 gotas de colorante azul o verde para alimentos. Observa la
partecoloreada ¿cuál es?
3. Ahora añade 3 gotas de Sudán III. Observa la parte coloreada por el reactivo
¿cuál es?
4. Agita el tubo y déjalo reposar dos minutos.
5. Finalmente añade 2 mL de alcohol, agita y observa.
4.2 Extracción de lípidos
1. Pesa la yema de huevo (como referencia)
2. Homogeniza la yema de huevo con 30 m L de una mezcla de
cloroformo-metanol-ácido clorhídrico (200:100:1)
3. Centrifuga. Recoge la fase inferior.
4. Vierte todo el contenido de la fase inferior en un vaso de precipitado.
5. Reserva el contenido.
6. Repite esto con las otras muestras sólidas de lípidos: tocino, grasa
de pollo ymantequilla.
4.3 Reacción de colesterol (Liebermann-Burchard)
1. Toma 1 mL del extracto obtenido en el experimento anterior, evapora
en laplancha y añade 2 m L de anhídrido acético y 0,2 mL de H2SO4.
2. Observa y anota tus resultados.
3. Repite el procedimiento con las otras muestras centrifugadas.

4.4Índice de Yodo
1. Toma 1 mL de aceite vegetal
2. Disuelve la muestra en 4 mL de CCl4 (tetracloruro de carbono).
3. Añade 2 gotas de almidón recientemente preparado.
4. Añade gota a gota una solución de Lugol hasta que la solución se
vuelva de color azul/morado oscuro.
5. Anota el número de gotas de Lugol empleadas.
6. Repite la prueba con otros tipos de aceites.

4.5 Grado de acidez

1. Toma 2 mL de aceite vegetal.

2. Disuelve la muestra en 5 mL de éter-etanol neutralizado.
3. Añade 2 gotas de fenolftaleína.
4. Titula con NaOH de 0,1 M hasta que aparezca la coloración ligeramente
rosada.
5. Anota el volumen de NaOH gastado.
6. Repite la prueba con los otros tipos de aceite.
7. Repite la prueba con una muestra de aceite Premiun calentada
previamente aebullición por 1 minuto.

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 22

El objetivo es calcular el % de ácido oleico que contiene el aceite valorado.

Para ello seguir la siguiente secuencia:

Como hemos indicado anteriormente el grado de acidez se expresa en

gramos de ácido oleico por 100g de masa (%m/m), se consideran todos los
ácidos libres como si fueran ácido oleico.
En la reacción que tiene lugar, un mol de NaOH reacciona con un mol de
ácido oleico, de modo que:

Dónde:
VNaOH: Volumen de KOH gastado expresado en litros.CNaOH: Concentración de KOH
expresado en mol/L.
M Ác. Oleico: Masa de ácido oleico expresado en gramos. PM ác. Oleico: Peso molecular del
ácido oleico (en gramos)

Despejando la masa del ácido oleico:

Podemos poner la masa del aceite en función a la densidad:

Dónde:
Maceite: Masa del aceite. daceite: Densidad del aceite.
Vaceite: Volumen de aceite usado.

Como el grado de acidez es el porcentaje de masa de ácido oleico en el aceite, se

expresa como:

CUESTIONARIO
1. Indica la composición lipídica de cada una de las muestras a utilizarse en
la presente práctica (tipo de ácidos grasos, % de cada tipo de ácido graso
por composición, entre otros).
2. Busca los diferentes tipos de aceite de oliva que existen en el mercado y
explica las diferencias químicas en cada uno de ellos.
3. ¿Cuál es la densidad del aceite? ¿Es la misma para todos?
4. Por cada ácido graso mencionado hasta el momento indica la
representacióntaquigráfica y fórmula gráfica.
5. ¿Cómo se metabolizan las grasas y aceites en el cuerpo humano?
6. Explique los fundamentos químicos de las pruebas a estudiarse.

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 23

PRACTICA N° 8

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE AZÚCARES: METODO DE

FEHLING

DEFINICIÓN
Es la cantidad de azúcar reductor necesario para reducir totalmente el cobre conteniendo
en un volumen determinados de S. R. Fehling hasta el estado de óxido cuproso.
FUNDAMENTO
Poder reductor del azúcar sobre la sal cúprica del reactivo.
MATERIALES
• Erlenmeyer de 250 ml
• Pipeta de 5 ml y 10 ml
• Probeta de 1000 ml, 100 ml
• Bureta de 25 ml
• Fiola de 500 ml
REACTIVOS
• Solución de Fehling A y B
• Solución estándar (S. T.) de glucosa al 0.5%
• FeCl3 (C)
ESTANDAR O PATRÓN DE GLUCOSA
Poner cuidadosamente 2,5 g de glucosa anhidro, colocando en una fiola de 500 ml.
Agregar unos 100 ml de agua destilada, disolver y completar a volumen.

DETERMINACIÓN DEL TITULO DE FEHLING

1. Colocar en una bureta el (S. T.) glucosa
2. Medir exactamente en un Erlenmeyer 5 ml de Fehling (A) y 5 ml de (B) y 2,5 ml de
(C).
3. Añadirle 30 ml – 40 ml de agua destilada y someter a fuego directo hasta ebullición,
en constante agitación, mientras que de la bureta se deja caer gota a gota la solución
de glucosa basta que el fehling vire de color azul al amarillo (el viraje se manifiesta
pasando por los dos tonos, verde, amarillo, momento el cual se suspende el goteo del
St. Y luego termina en color pardo ocre). Anotar el gasto, el cual se multiplica por 2
para hacer los cálculos.

• En la técnica original dice medir 10 ml de “A”, 10 ml de “B” y de 5 ml de “C”,

pero para economizar reactivo usaremos en las prácticas la mitad del reactivo y
por este motivo se tiene que multiplicar por 2 para hacer los cálculos.

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CÁLCULO DEL TITULO FEHLING (T.F.)

En el cálculo original ( 10, 10, 5 ), el número de ml. Gastados se multiplica por la
cantidad de glucosa contenido en un ml expresado en gramos ( 0,005 ) del St. Se deduce
de:
1000 ml 5g
G (gasto) T. F. 𝑇. 𝐹. = 𝐺 × 0.005
Como en la práctica usamos la mitad de Fehling, el gasto multiplicamos por 2. Si en la
titulación hubiéramos gastado 4,5 ml, tendremos:
T. F. == 𝐺 × 2 × 0.005 = 9 × 0.005 = 0.045

VALORACIÓN DE AZUCARES REDUCTORES

Para hallar el % de glucosa o de azúcar reductor cualquiera, la solución problema se
prepara en iguales condiciones que se hizo para el St. O sea, al 1% y luego se hace la
titulación siguiendo los pasos indicados para el título del Fehling y se aplica la fórmula
deducida:
𝐺 … … … 𝑇. 𝐹.
100 … … % % = 𝑇. 𝐹.× 100 ( 1)
Como usamos la mitad de los reactivos, el gasto se multiplica por 2. Ejemplo: determine
el 1 % de azúcar reductor contenido en un líquido en el cual el gasto es 2.1 ml (𝐹 = 5; 5;
2; 5 ) sabiendo que el 𝑇. 𝐹. es 0.045.

𝑇𝐹𝑥100 0,045𝑥100
%= = = 1,07
2𝐺 4,2

Si el gasto fuera inferior a 1ml, significa que la muestra en la bureta está concentrada
y para obtener datos más exacta, es necesario diluir a 2,4 o más veces que viene a ser
el factor de dilución; en este caso, a la fórmula anterior se le multiplica este factor. Si
hubiéramos tenido un gasto por ejemplo de 0,7 ml en el cálculo nos dará 3,2 %. Al
diluir en 4 veces su volumen obtenemos 2,9 ml de gasto entonces aplicando la formula
tendríamos:
0,045𝑥100𝑥4
%= = 3,103
2, ,9𝑥2

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PRÁCTICA N° 9

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

I. OBJETIVOS:

Reconoce mediante ensayos característicos la presencia de proteínas, αaminoácidos y

aminoácidos específicos en diferentes muestras de alimentos.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las proteínas son macromoléculas biológicas formadas por la unión de decenas o

cientos de aminoácidos mediante enlaces peptídicos. Los aminoácidos que forman las
proteínas son 20 α-aminoácidos de configuración L.
La importancia de las proteínas está implícita en su nombre, que proviene de la palabra
griega proteios, que significa “primer lugar”. Las proteínas representan más del 50%
de la masa seca de la mayoría de las células e intervienen en casi todo lo que los
organismos efectúan.
Algunas proteínas aceleran las reacciones químicas, mientras que otras desempeñan
un papel en el sostén estructural, el almacenamiento, el transporte, las comunicaciones
celulares, el movimiento y la defensa contra sustancias extrañas.

2.1 Coagulación de proteínas

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones
coloidales que pueden precipitar formándose coágulos a temperaturas superiores a 70°
C al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las
proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes
indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de las
estructuras terciaria y secundaria.

2.2 Prueba de Biuret

La prueba Biuret es una prueba general para proteínas, no especifica. Cuando una
proteína reacciona con sulfato de cobre (II) (color azul) se forma como respuesta
positiva un complejo color violeta.

La prueba Biuret trabaja para cualquier tipo de compuesto que posea uno o más de
los grupos siguientes:

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2.3 Reacción de la Ninhidrina:

Sirve para reconocer la presencia de alfa aminoácidos. La ninhidrina reacciona con
el grupo amino de un alfa aminoácido para producir un complejo de color azul o
morado.

2.4 Reacción Xantoproteica:

Esta reacción se debe a la formación de un compuesto aromático nitrado de color
amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado.
Generalmente, se forma primero un precipitado blanco que cambia a amarillo al
calentarlo. El color se empieza a tornarse anaranjado cuando la solución se vuelve
básica. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos
portadores de grupos bencénicos, tirosina, fenilalanina y triptófano, obteniéndose
nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio fuertemente
alcalino (formación del ácido pirámico o trinitrofenol). En esta prueba se produce la
nitración del anillo bencénico presente en dichos aminoácidos.

2.5 Reacción con Acetato de Plomo:

Sirve para reconocer la presencia de aminoácidos azufrados. Estos reaccionan con el
plomo produciendo un precipitado negro de sulfuro de plomo. . Se basa esta
reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al
reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

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III. RECURSOS MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Reactivos:
• Reactivo de Biuret en gotero
• Ninhidrina en gotero
• HNO3 conc.
• NaOH al 10%
• NaOH al 40%
• Acetato de plomo al 5%
• Cisteína al 10%
• Tirosina al 10%
• Alanina al 10%
• HCl conc.
• Alcohol etílico

Materiales:
• Tubos de ensayo (20)
• Baño María a 100° C
• Baño de agua fría
• Pipeta de 5mL
• Propipeta
• Vortex
•
Muestras:
• Clara de huevo (2 unidades por mesa de trabajo)
• Leche descremada fresca
• Miel
• Aspartame diluido al 10%.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

a) Desnaturalización de proteínas
1. En 4 tubos de ensayo coloca 1 mL de clara de huevo.
2. El primer tubo, caliéntalo en baño María.
3. Al segundo tubo, agrégale 1 mL de alcohol.
4. Al tercer tubo, viértele unas gotas de ácido clorhídrico concentrado.
5. Al cuarto tubo, somételo a un agitamiento rápido empleando para ello el vortex.
6. Observa y anota los cambios observados.
b) Ensayo de Biuret
¿Sabías cómo se prepara el reactivo de Biuret? Por cada gota de sulfato
de cobre (CUSO4) y agrega 2 mL de solución de NaOH 10%.
1. Coloca en un tubo de ensayo 1mL de muestra de clara de huevo, añade 20 gotas
del reactivo de Biuret.
2. Repite el procedimiento con las otras muestras (leche, miel y aspartame).
3. Observa y anota los resultados.

c) Reacción de la Ninhidrina (para alfa-aminoácidos)

Una prueba para reconocer y cuantificar alfa aminoácidos es la reacción con
ninhidrina, una coloración azul intenso indica la presencia de un alfa aminoácido.

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1. En un tubo de ensayo coloca unas gotas de muestra de clara de huevo y 1 mL de

solución de ninhidrina.
2. Calienta la mezcla en ebullición. Observa y anota los cambios observados.
3. Repite con las otras muestras (leche, miel y aspartame).

d) Reacción con Acetato de plomo

1. En un tubo de ensayo coloca 1mL de cisteína al 10%, agrega 2 mL de
hidróxido de sodio al 10% y luego 10 gotas de acetato de plomo al
10%.
2. Calienta el tubo hasta ebullición.
3. Repite con las muestras de alanina, albúmina, leche, aspartame y miel.

e) Reacción Xantoproteíca
1. En un tubo de ensayo coloca 1mL de tirosina al 10 %, agrega 1 mL de HNO3 conc.
2. Calentar a baño María por 3 minutos.
3. Calienta el tubo hasta ebullición.
4. Enfriar en agua fría.
5. Añadir 20 gotas (una a una) de NaOH al 40%
6. Repite con las muestras de alanina, albúmina, leche, aspartame y miel.

CUESTIONARIO

1. Averigüe en que consiste y para qué sirven las siguientes reacciones:

a. Ehrlich
b. Hopkins
c. Sakaguchi
2. La yema de huevo se conoce principalmente por su contenido graso. Sin embargo,
¿también contendrá proteínas? Realice un cuadro comparativo entre las proteínas
de la yema y la clara de huevo.
3. Indique la composición de la leche, la miel y el aspartame en cuanto a proteínas
presentes.
4. Indique la composición de algún tipo de aceite vegetal y la grasa animal,
especificando el tipo de grasas presentes.
5. ¿Qué aminoácidos son ramificados, ¿cuáles aromáticos y cuáles azufrados?
6. En qué consiste la desnaturalización de una proteína. Indique métodos caseros de
desnaturalización de las misma

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PARTES DEL INFORME DE LABORATORIO

1. Presentación
2. Objetivos
3. Fundamento teórico
4. Relación de materiales, equipos y reactivos
5. Procedimiento experimental
6. Cálculos, resultados y discusión de resultados
7. Conclusiones
8. Recomendaciones
9. Gráficos, tablas, etc.
10. Bibliografía
Desarrollo del cuestionario y problemas.

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