Laboratorio1 - BGA-2023 - Microscopía

ASIGNATURA: BIOLOGIA GENERAL
Cod. 241147 – 2023 I Semestre
Guía de Laboratorio N° 1
Propiedades y uso del microscopio óptico
PROFESORA ENCARGADA:
Javiera F. De la Paz Montt
¿Qué es y para que sirve el microscopio?
El Microscopio en palabras simples, es un instrumento que amplifica una imagen y permite ver
más detalles de lo que es posible a simple vista. Es el principal instrumento utilizado en el
estudio de la arquitectura de lo viviente a una escala que el ojo humano no puede ver, por lo
tanto desde su invento hace más de 400 años hasta hoy, ha sido y sigue siendo una herramienta
esencial para el desarrollo científico en distintas áreas, desde la microbiología hasta la geología.
El ojo humano no puede distinguir objetos que estén a una distancia menor a 0,2 milímetros
(mm), pero el microscopio óptico, que es el más comúnmente utilizado en la mayoría de los
laboratorios (incluyendo el que usted utilizará en este trabaja práctico) permite distinguir objetos
o particulas que esten una distancia de 0,2 micrometros (µm). A esta distancia que define lo
que nuestros ojos pueden distinguir, se le denomina poder de resolución. Así, podemos decir
entonces que el microscopio es una herramienta que permite aumentar el poder de resolución
del ojo humano, en este caso hasta 1000 veces1.
¿Cuál es el origen del microscopio?
El primer microscopio fue inventado por un par de

constructore de gafas holadeses (Hans y Zacharias
Janssen) quienes a fines del siglo XVI, crearon un
instrumento que permitía ver objetos más
pequeños, este consistía en dos lente convexos en
un tubo oscuro abierto en sus extremos. Este
instrumento fue ampliamente utilizado y conocido
en todo el mundo en esa época, incluso Galileo
Galilei utilizó este principio en astronomía, y en 1609 construyo el primer microscopio simple. A
partir de ahí el microscopio ha sido perfeccionado y
modificado muchas veces, hasta llegar a la actualidad donde
contamos con una diversidad de instrumentos que se basan
en diferentes sistemas y maneras de observar el mundo
microscopico, respondiendo a las diversas interrogantes que
el estudio de la vida y la naturaleza se han planteado
constantemente, hasta el día de hoy (no importa cuando leas
esto).
Actualmente existen diversos tipos de microscopios, siendo

el microscopio óptico el más ampliamente utilizado en el
estudio de diversas ciencias, y especialmente a las ciencias
biológicas.
1
Un milimetro es igual a 1000 micrómetros y 1/1000 de un metro.
Los diferentes tipos de microscopios (que son muchos) se diferencian
escencialmente en la manera en que las imagénes llegan a nuestros ojos. Mientras la
microscopía óptica utiliza una serie de lentes para aumentar la imagen y espejos para dirigir
una luz sobre la muestra y que luego esa luz llegue a nuestros ojos, existen microcopios que
en vez luz impactan la muestra con un haz de electrones para construir las imágenes en base
a la densidad de estructuras, y no a colores. Así, los microscopios de tipo óptico utilizan un haz
de luz (clara o fluorescente) sobre la superficie de la muestra permitiéndonos ver colores
claros o la emisión de fluorescencia; en cambio los microscopios electrónicos (de transmisión,
y de barrido) utilizan un haz de electrones permiten más bien ver formas, densidad y relieve
de las estructuras. Así los distintos tipos de microscopio nos entregan distinta información sobre
la estructura de organos, tejidos y células.
Observe como ejemplo las siguientes imágenes de glomérulos renales humanos (la estructura
de los riñones que filtra nuestra sangre), obtenidas con los distintos tipos de microscopia
mencionada.
El objetivo de este trabajo de esta sesión de laboratorio es conocer la estructura y
funcionamiento básico del microscopio óptico de campo claro, que utilizaremos en todos los
trabajos de laboratorio en este curso. Para ello lea con atención la descripción de las partes y
estudie los esquemas a continuación.
El microscopio consiste en tres sistemas:
El sistema mecánico, conformado por aquellas piezas que no intervienen en la formación de

la imagen ni en el camino de la luz (Ej.: tornillos micrométrico y macrométrico, brazo, base,
platina, revolver, etc.).
El sistema de iluminación, integrado por aquellos componentes encargados de colectar la luz,
dosificarla y dirigirla a través del preparado (Ej.: Lámpara, condensador, diafragma).
El sistema óptico que incluye todos los elementos que colaboran en la ampliación de la
imagen: lentes objetivos y lentes oculares.
¿Cuáles son las partes básicas del microscopio óptico?

1) SISTEMA MECÁNICO:
Es el armazón metálico que sostiene el Sistema óptico, dándole la posición adecuada y

permitiendo una correcta coordinación entre ambos sistemas para la mejor observación del
preparado.
En este sistema se distinguen:
Base ó pie: que da la base de sustentación al Microscopio. Generalmente metálico, macizo,

para conferirle estabilidad, generalmente es el asiento de la lámpara de iluminación.
Brazo o columna: es el pilar que sostiene el tubo, platina, condensador y sobre el cual están
montados los tornillos focalizadores macro y micrométricos.
Platina: la plataforma horizontal con apertura central que permite el paso de la luz y sobre el
cual se coloca el portaobjetos (delgada lámina rectangular de vidrio) con la muestra cubierta
por un vidrio mas pequeño y delgado: el cubreobjetos. Posee dos pinzas para sujetar la
preparación y un sistema de tornillos que permite desplazarlo con movimientos horizontales
en el eje X e Y del plano.
Revólver o tambor: mecanismo que lleva los diferentes lentes objetivos (típicamente 4x – 10x
– 40x -100x), que posee el microscopio. Al girar el revólver se coloca en posición el objetivo
que permitirá el aumento deseado.
Tornillos para la focalización o ajuste: Tornillos adaptados sobre una cremallera en el brazo
del microscopio, que permiten mover la platina junto con parte del sistema de iluminación
hacia arriba y hacia abajo, a modo de encontrar la distancia precisa entre la muestra, la
fuente de luz y el lente objetivo que permita enfocar la imagen que llega al ojo a través del
lente ocular: uno para movimientos rápidos o de enfoque aproximado o grueso (el
macrométrico) y el otro para movimientos lentos destinados al enfoque de precisión o fino
(el micrométrico).
2) SISTEMA OPTICO:
Todas las piezas del sistema de iluminación que se encuentran ubicadas bajo la platina. Consta
de una ampolleta o lámpara, un diafragma y un condensador.
Condensador: Sistema de lentes ubicado bajo la platina que concentra los rayos luminosos
sobre la muestra, permitiendo la observación más nítida dela muestra.
Diafragma: Es una pieza que tiene por función
regular el diametro del haz luminoso que llega
a la muestra permitiendo darle mayor o menor
contraste a la imagen. Es una suerte de iris que
se abre y cierra manualmente. En general a
mayor aumento se requiere que el diafragma
este más abierto, y a menor aumento más
cerrado, aunque esto depende mucho del
grosor y tinción de la muestra.
Sistema de lentes: Está montado en el cabezal y está formado por el sistema de lentes que
forman la imagen. El lente ocular (que es sólo uno en el microscopio monocular, y dos en el
microscopio binocular) está montado en el extremo superior del tubo y generalmente tiene un
aumento de 10x, mientras los lentes objetivos que están en el extremo inferior y que usted
puede cambiar al mover el revolver, generalmente son cuatro para distintos aumentos: 4x, 10x,
40x y 100x.
IMPORTANTE: El lente objetivo mayor (100x) requiere su uso con un “aceite de inmersión” especial,
debido a que debe estar casi en contacto con la muestra, por lo tanto NO DEBE USARLO a no ser,
que sea instruido expresamente por la docente a cargo del laboratorio, sino puede dañarlo
irreparablemente y además, romper la muestra.
a) Objetivo: está formado por asociaciones de lentes que van montadas en el revólver.
Generalmente el revólver lleva tres o cuatro objetivos. Estas asociaciones de lentes que
constituyen un objetivo forman un sistema centrado que actúa como si fuera una sola lente con
determinada distancia focal y demás propiedades, equivalentes a la de una lente. La imagen
dada por el objetivo es invertida.
b) Ocular: son sistemas ópticos centrados, colocados en el extremo superior del cabezal al
cuál el observador acerca su ojo.
Actividades
Esta actividad práctica consistirá en aprender a reconocer las diferentes partes del microscopio
y entender su funcionamiento básico, para luego practicar su uso con la observación de dos
preparaciones histológicas que permitan visualizar diferentes preparaciones de células y tejidos
humanos.
Recuerde que debe registrar en dibujos en un cuaderno con su nombre, todas sus
observaciones, señalando claramente la identidad de la muestra, la tinción utilizada y el
aumento total utilizado.
Instrucciones prácticas para observar una muestra histológica (o cualquiera portaobjetos) en el

microscopio
1. Limpie el preparado para eliminar el polvo.

2. Verifique que el cubreobjetos esté orientado hacia arriba. Si el cubreobjetos esta hacia
abajo no le permitirá enfocar con el aumento mayor (40x).
3. Siempre inicie la observación con el aumento menor (4x) y la platina en su posición mas
baja.
4. Encuentre la altura apropiada de la platina para el objetivo ajustando con el
macrométrico, a la vez que observa por el ocular.
5. Una vez encontrada la altura apropiada, enfoque la muestra ajustando con el
micrométrico.
6. Ahora si lo desea, puede cambiar a un objetivo mayor.
7. Vuelva a enfocar.
8. Recorra toda la muestra e identifique los “artefactos” del preparado (pliegues,
precipitados, mella de cuchillas, etc.), y descarte esa zona en su observación.
9. NO utilice el objetivo máximo (100x) a no ser que sea instruido explícitamente por él o la
profesora encargada.
10. Antes de cambiar de muestra o al momento de apagar su microscopio, vuelva al objetivo
menor (4x) y baje la platina.
11. Recuerde que el aumento total es la multiplicación del aumento del objetivo y el aumento
del lente ocular.
Muestra 1: Corte de lengua de cerdo.
Recorra la muestra con los diferentes aumentos: menor (4x), mediano (10x), y mayor (40x).
Ajuste la luz de la lámpara a los diferentes aumentos, observe la diferencia de contraste en la
imágen cuando abre y cierra el diafragma.
IMPORTANTE: Recuerde NO utilizar el aumento 100x.
Reconozca la diversidad de tejidos y celulas presentes en este órgano, distinga los núcleos
celulares.
Muestra 2: Frotis de espermatozoides humanos
Enfoque la muestra con los diferentes aumentos 4x, luego 10x, hasta llegar a 40x. Ajuste la luz
de la lámpara y el diafragma para tener un buen contraste de estas pequeñas células que NO
PODRA distinguir en aumento bajo o medio, solo en aumento mayor. Recorra la muestra en el
aumento mayor.
IMPORTANTE: Recuerde NO utilizar el aumento 100x.
Reconozca la presencia de espermatozoides y otros tipos celulares presentes en la muestra.

ANEXOS
UNIDADES DE MEDIDA UTILIZADA EN MICROSCOPIA
1 metro (m) : 10 = decímetro (dm) = 10-1 m

: 100 = centímetro (cm) = 10-2 m
: 1.000 = milímetro (mm) = 10-3 m
: 1.000.000 = micrómetro µm) = 10-6 m
: 1.000.000.000 = nanómetro (nm) = 10-9 m
: 1.000.000.000.000 = picómetro (pm) = 10-12 m
: 10.000.000.000 = Angstrom (Å) = 10-10 m
EQUIVALENCIAS DE LAS MEDIDAS
metro (m) : 10 decímetros (dm)

1 dm : 10 centímetros (cm)
1 cm : 10 milímetros (mm)
1 mm : 10-3 m = 103 micrómetros (µm)
1 µm :10-6 m = 10-4 cm = 10-3 mm = 103 nanómetros (nm)
1 nm : 10-9 m = 10-7 cm = 10-6 mm = 10-3 µm = 10 Angstroms (Å)
1Å : 10-10 m = 10-8 cm = 10-7 mm = 10-4 µm = 10-1 nm
TAMAÑO DE ALGUNAS ESTRUCTURAS BIOLOGICAS
Célula nerviosa humana = 1 metro de largo

Huevo de Avestruz = 11-15 cm
Huevo de Gallina = 70 mm
Huevo de rana chilena = 2.7 mm
Ovocito humano = 120-150 µm
Ameba = 80 µm
Célula muscular lisa = 60 µm
Célula hepática = 18 µm
Glóbulo rojo humano = 7 µm
Cloroplasto = 6 µm de diámetro
Núcleo de célula hepática = 6 µm
Mitocondria = 1-3 µm de longitud
Escherichia coli (bacteria) = 2 µm de longitud
Lisosoma = 600 nm
Cilio = 250-300 nm
Virus grandes = 100 nm
Ribosoma = 25 nm (diámetro)
Membrana plasmática = 8.0 nm (grosor)
Proteína globular = 4.0 nm
Doble hélice de ADN = 2 nm (grosor)
Alfa-hélix de proteína = 0.6 nm
Átomo de hidrógeno = 0.1 nm (diámetro)

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Cod. 241147 – 2023 I Semestre

Propiedades y uso del microscopio óptico

¿Cuál es el origen del microscopio?

El primer microscopio fue inventado por un par de

Actualmente existen diversos tipos de microscopios, siendo

El microscopio consiste en tres sistemas:

El sistema mecánico, conformado por aquellas piezas que no intervienen en la formación de

¿Cuáles son las partes básicas del microscopio óptico?

Es el armazón metálico que sostiene el Sistema óptico, dándole la posición adecuada y

Base ó pie: que da la base de sustentación al Microscopio. Generalmente metálico, macizo,

Instrucciones prácticas para observar una muestra histológica (o cualquiera portaobjetos) en el

1. Limpie el preparado para eliminar el polvo.

Muestra 2: Frotis de espermatozoides humanos

Reconozca la presencia de espermatozoides y otros tipos celulares presentes en la muestra.

UNIDADES DE MEDIDA UTILIZADA EN MICROSCOPIA

1 metro (m) : 10 = decímetro (dm) = 10-1 m

EQUIVALENCIAS DE LAS MEDIDAS

metro (m) : 10 decímetros (dm)

Célula nerviosa humana = 1 metro de largo

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