Practica 11

TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO
Instituto Tecnológico de Tehuacán
MICROBIOLOGÍA
INGENIERÍA BIOQUÍMICA
EQUIPO 6
PRÁCTICA No. 11
SIEMBRA DE HONGOS
PRESENTAN:
PACHECO FLORES ARELY 20360438
ORTIZ MARTINEZ AIDEE JACQUELINE 20360609

MARROQUÍN REMIGIO ALEJANDRA 19361430
MONFIL CANSECO JULIO LIZANDRO 20360424
CASTRO VILLEGAS JAIR 20360348
ASESORA:
ING. ROSA MARÍA ZAVALETA MARTÍNEZ
ENERO – JUNIO
TEHUACÁN, PUEBLA, ABRIL DEL 2023

 Objetivo
.
- Realizar la preparación de agar acidificado para la siembra y crecimiento de
hongos filamentosos.
- Realizar el procedimiento de siembra y observación macroscópica y
microscópica de hongos filamentosos.
 Fundamento teórico.
Los hongos son organismos heterotróficos, es decir, para alimentarse

requieren transformar compuestos orgánicos, los cuales obtienen por medio de
sus paredes celulares, a través de un proceso de absorción. Los hongos tienen
características propias que los distinguen de las plantas y animales, por lo que
ahora son clasificados en un reino aparte, el Fungi (fungus=hongo).
Los hongos son un grupo de organismos fundamentales para la vida en la
tierra, descomponen la materia orgánica facilitando y acelerando el ciclaje de
nutrientes, en otras palabras, permiten la vida después de la muerte. Algunos
generan diferentes tipos de asociaciones, a través de sorprendentes y
contrastantes relaciones con otros organismos vivos como las plantas y los
animales: desde una benéfica simbiosis entre las raíces de un árbol y un hongo,
a preocupantes plagas o enfermedades que afectan otros seres vivos. La
humanidad ha aprendido a utilizarlos desde los tiempos antiguos. El pan, el vino,
la cerveza y los antibióticos, son sólo algunos ejemplos de cómo los hongos
participan en nuestra vida cotidiana.
La siembra o inoculación de los hongos filamentosos es la transferencia de
éstos a un medio de cultivo en el cual crecerán para ello se emplea un dispositivo
especial denominado asa micológica.
A pesar de la utilidad del examen directo para la identificación de hongos el
método definitivo en la mayoría de los casos es el cultivo, ya que permite
establecer el género y especie del hongo lo que tiene utilidad tanto
epidemiológica como en el tratamiento de la infección, el examen microscópico
puede ayudar a saber que medios emplear para sembrar al hongo y se pueda
recuperar. Cuando se trata de hongos levaduriformes se pueden sembrar por
técnicas de agotamiento en las placas Petri, en muestras como cabellos,
fragmentos de uñas o escamas estas se depositan en el centro del agar
asegurando que estén en contacto para que exista crecimiento, esto se hace
presionando un poco con unas pinzas de disección. Para la investigación de
levaduras usualmente se incuban las placas, mientras que para dermatofitos u
hongos ambientales se emplea una temperatura de 25°C.Las levaduras crecen
habitualmente dentro de las 48 horas posterior a la siembra mientras que los
hongos filamentosos pueden requerir días e incluso semanas.
Los hongos filamentosos o mohos se caracterizan por tener un soma

vegetativo (talo) similar a las plantas, filamentos microscópicos continuos más o
menos alargados y ramificados con paredes celulares definidas, la mayoría,
constituidas por quitina, dispuestas en microfibrillas como la celulosa, además de
otros polisacáridos como mananos, galactanos y quitosán reemplazan a la
quitina en algunos grupos, con una la pared celular formada por carbohidratos
(80-90 %), y son las proteínas, los lípidos, poli-fosfatos e iones inorgánicos.
Materiales
 Microscopio
 Mechero de Bunsen
 Cinta adhesiva transparente
 5 Portaobjetos
 5 Cubreobjetos
 Asa bacteriológica.
 Pipeta Pasteur.
 Material biológico:
 Agua de charco.
 Fruta contaminada con hongo (Pulque/tortilla con moho, Yogurt natural.)
 Reactivos
 Lugol.
 Safranina.
 Azul de algodón de
 lacto fenol
 Metodología
Nuestra práctica de laboratorio fue dividida en tres sesiones

1ra sesión
1. Para comenzar tenemos que limpiar muy bien nuestra zona de trabajo al igual que
nuestras manos, una vez concluido con la limpieza precedimos a pesar nuestro
agar papá dextrosa con ayuda de una charola de aluminio y espátula.
2. Ahora con ayuda de un matraz Erlenmeyer, dispersamos el medio de cultivo en el

volumen correspondiente de agua destilada y colocamos un tapón de gasa con
algodón al matraz para eso también preparanos el volumen adecuado de ácido
tartárico al 10% de acuerdo a nuestro volumen de medio a preparar esto se hizo
únicamente uno para todo el equipo por último también preparamos una solución
salina isotónica en esta Preparamos el volumen requerido

distribuida en tubos y para finalizar acomodamos todo muy bien en la canastilla y
esterilizamos en condiciones estándares.
3. Después de esterilizar, entibiamos las soluciones y mantenemos el agar a una

temperatura promedio de 45°C. Adiciónanos en condiciones de esterilidad 1.4ml
de ácido tartárico al 10% por cada 100 ml de medio de cultivo. Homogeneízanos
el medio y vertimos en nuestras cajas Petri.
4. Por último para esta sesión dejamos gelificar nuestro agar para posteriormente
voltear nuestra cajas y enfriar.
2da sesión
1. En esta segunda sesión necesitaremos una muestra de algún hongo, para esto
cada equipo trajo consigo una. en nuestro caso como nuestra cajas se
encontraron contaminadas de ello, procedimos a usar ese mismo para trabajar.
2. Para comenzar encendemos nuestro mechero y a partir de nuestro cultivo de

hongo, cortamos una pequeña sección con un bisturí estéril. Nuestra muestra se
corto la n forma cubo de medio centímetro de diámetro y colocamos dentro de uno
de los tubos que contiene solución salina estéril. Agitamos suavemente el tubo
para desprender las esporas y facilitar la inoculación.
3. Siguiendo con el proceso tomamos una gota de suspensión de esporas y

depositanos en el centro de una caja Petri que contenga agar papa dextrosa.
4. Dejamos secar la gota añadida para así invertir la caja e

incubar a una temperatura de 25 a 30°C y hacer un seguimiento del crecimiento
a los 3, 5 y 7 días.
5. Para el segundo procedimiento de la inoculación tomamos una asada de cultivo

de hongo con un asa estéril y realizar una siembra por picadura al centro de la
caja Petri. Cada integrante dividió su caja en las partes que quisieron e hicieron
su picadura por cada una de ellas.
6. Por último invertimos las cajas e incubamos bajo las mismas condiciones
indicadas en el punto anterior.
3ra sesión
1. Por último realizamos una tinción simple con azul de metileno

o azul de algodón y observamos al microscopio con los objetivos 4X, 10X y 40X.
2. De acuerdo a nuestra observación cada integrante realizó un cuadro

dependiendo de su hongo.
 Resultados
Hongo filamentoso Desarrollo:

medio
Color:
verde
Aspecto
del micelio
superficial:
lanoso
Color del
micelio
profundo:
verde
Aspecto
del micelio
profundo:
con
anillos
concéntricos
 Cuestionario
1.- Investigar cuales son los tipos de esporas asexuales en hongos.
Primero decir, que, a las esporas asexuales, también se les conoce como
Conidias, y se dividen en:
*Talosporas; Artrosporas, Blastosporas, Clamidosporas.
*Conidias; Macroconidias, Microconidias.
2.-Investigar cuales son los tipos de esporas sexuales en hongos.

Estas se producen por meiosis y son:
*Zigosporas
*Ascosporas
*Basidiosporas
3.- Presentar una imagen del crecimiento macroscópico de los siguientes

hongos filamentosos: Aspergilus niger, Trichoderma harzianum, Penicillium
chrysogenum.
1. Aspergilus niger
Fig. 1 Genetic Characterization of Mutations Related to Conidiophore

Stalk Length Development in Aspergillus niger Laboratory Strain N402. Demirici et, al.,
April (2021).
Trichoderma harzianum
Fig. 2 https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Desarrollo-de-las-colonias-de-
Trichoderma-harzianum-en-medios-quimicamente_fig1_353714672.
Penicillium chrysogenum
Fig.3 https://hotcore.info/babki/penicillium-chrysogenum-penicillin.htm.
 Conclusión
Para concluir, se usaron dos formas de siembra para crecimiento de hongos,
uno por picadura y otro por gota, en el primero se tomaron las cepas del hongo
y se introdujeron en el agar, mientras que en el segundo se cortó con un bisturí
un pequeño cuadro de hongo y se colocó en una solución para posteriormente
sembrar 4 gotas de ese hongo en las cajas y dejar secar. Se comprobaron las
diferentes características con las que cuentan los hongos filamentosos con la
ayuda del microscopio. Así como también se pudo comprobar la utilidad que
tienen cada uno de ellos y donde se pueden encontrar, a partir de esta práctica
se comprobó que es muy fácil de encontrar y cultivar este tipo de hongos debido
a que son muy abundantes en el medio ambiente. Este tipo de

microorganismos tienen la capacidad de viajar a través del aire. Explicación del
porque a veces las corrientes de aire pueden contaminar un medio de cultivo
 Referencias web
Gutierrez Romero A., et,al, 2020.Manual de Microbiologia General I, México, UNAM

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la//1020082549/1020082549_023.pdf
http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microgeneral/wp-content/uploads/2017/02/02-
MICROSCOPIA.pdf
La práctica fue realizada en dos sesiones el día 28 de marzo del presente año,
en el laboratorio de biología de las instalaciones académicas.

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Los hongos son organismos heterotróficos, es decir, para alimentarse

Los hongos filamentosos o mohos se caracterizan por tener un soma

Nuestra práctica de laboratorio fue dividida en tres sesiones

2. Ahora con ayuda de un matraz Erlenmeyer, dispersamos el medio de cultivo en el

salina isotónica en esta Preparamos el volumen requerido

3. Después de esterilizar, entibiamos las soluciones y mantenemos el agar a una

2. Para comenzar encendemos nuestro mechero y a partir de nuestro cultivo de

3. Siguiendo con el proceso tomamos una gota de suspensión de esporas y

4. Dejamos secar la gota añadida para así invertir la caja e

5. Para el segundo procedimiento de la inoculación tomamos una asada de cultivo

1. Por último realizamos una tinción simple con azul de metileno

2. De acuerdo a nuestra observación cada integrante realizó un cuadro

Hongo filamentoso Desarrollo:

2.-Investigar cuales son los tipos de esporas sexuales en hongos.

3.- Presentar una imagen del crecimiento macroscópico de los siguientes

Fig. 1 Genetic Characterization of Mutations Related to Conidiophore

a que son muy abundantes en el medio ambiente. Este tipo de

Gutierrez Romero A., et,al, 2020.Manual de Microbiologia General I, México, UNAM

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