Tinciones Bacterianas

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA
DE GUERRERO
Analisis clinicos
ESCUELA:
Preparatoria No. 8
MAESTRO:
José Alberto Santana Ramírez
ALUMNO:
Javier de Jesús Aviles Montaño
GRUPO:
“603” FECHA: 22 / 03 / 2024
a) TIPOS DE TINCIONES
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para
mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son
sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de
diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados
para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido o poblaciones
celulares.
Tipos de tinciones:
Tinción Simple: Utiliza un solo colorante, es decir, implica aplicar una sola mancha
a la muestra. Esto debe hacerse después de la fijación para que se pueda observar
la morfología de las bacterias. Uno de los colorantes más adecuados es el azul de
metileno. Actúa rápida y suavemente en todas las células bacterianas y no oscurece
los detalles celulares. Además, no tiñe la mayoría del material no celular, lo que lo
hace particularmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras
naturales.
Tinción negativa: Un método sencillo de tinción para bacterias, que además es un

claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aun cuando los métodos de
tinción positiva fallan, es la tinción negativa. Esto puede ser conseguido
simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente
sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra
humedecida con un cubreobjetos. Luego de esto, los microorganismos pueden ser
observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro como inclusiones
claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea
Tinciones diferenciales: Por lo general requiere una fijación térmica preliminar.
Además, se utilizan dos colorantes, siendo el último colorante un colorante de
contraste. Una de las características más importantes es la capacidad de observar
la composición de la pared bacteriana, la resistencia al blanqueo ácido, etc., además
de la visualización morfológica.
Tinción de Ziehl-Neelsen: Se ha demostrado que algunas bacterias contienen un
alto porcentaje de sustancias lipídicas o serosas, por lo que se tiñen con dificultad
por procedimientos usuales como Gram. Se usa especialmente para la identificación
de Mycobacterium tuberculosis o Mycobacterium leprae.
Tinción de Giensa: La tinción de Giensa es un método habitual para el examen de

frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Este
método tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las rickettsias
localizadas dentro de las células huéspedes. El colorante se aplica a un frotis de
sangre y se utiliza cuando se sospeche de protozoos en la sangre para observar
materias núcleos de las células.
Tinción de Esporas: Se usa verde de malaquita en contraste con safranina. La

envuelta de la endospora es más compleja e impermeable que la envuelta de las
células vegetativas en las que se forma. Sólo se puede teñir el contenido de la
espora alterando su envuelta. La impermeabilidad de las cubiertas dificulta que las
endosporas se decoloren una vez teñidas. El verde de malaquita es un colorante
débilmente básico (tiene una carga positiva débil) y por tanto, se une débilmente a
la bacteria. Penetra en las células vegetativas. Cuando se calienta la preparación
también penetra las endosporas.
Tinción de Wright: La tinción de Wright es una técnica que se emplea generalmente
para la diferenciación de elementos celulares de la sangre y es clasifica cada como
una tinción policromática, dado que puede teñir compuestos ácidos básicos
presentes en una célula.
Tinción de Cápsula: La cápsula bacteriana es una capa de material viscoso o

mucoide. El tamaño de estas cápsulas está influenciado por el medio en el que
crece la bacteria. En algunos casos el grosor de la cápsula es sólo una fracción del
diámetro de la célula, en otros casos la cápsula es mucho mayor que la célula. Las
cápsulas bacterianas son importantes tanto para la bacteria como para otros
organismos. A las bacterias les proporcionan una cubierta protectora y además
sirven de reservorio de alimento almacenado.
Tinción de Flagelos o leifson: Es una tinción para lograr observar flagelos de

bacterias. Es usada en laboratorios, pero no de rutina. Los pasos que sigue son el
de usar pararosanilina sirve como tinción principal, y ácido tánico es agregado a la
solución como mordiente. Los componentes de la tinción son: Fucsina básica en
Alcohol etilico al 95%, en 1.27%; ácido tánico en agua destilada, en 3%; Cloruro de
sodio en agua destilada, 1.5%. Se usa mordiente el cual aumenta el tamaño del
microorganismo.
Tinción indirecta: Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un
mordiente. Un mordiente habitual es el ácido tánico.
Tinción directa: Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona
directamente con el sustrato, sin otro tratamiento previo.
b) TINCION DE GRAM
Esta tinción es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios
donde se manejan pruebas microbiológicas. Es definida como una tinción
diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes
grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. Fue desarrollada por
el científico danés Hans Christian Gram en 1884. En microbiología clínica resulta de
gran utilidad, ya que a partir de muestras clínicas directas provenientes de sitios
estériles se puede saber de manera rápida las características de la muestra y hacer
una diferencia de los potenciales microorganismos causantes de una infección.
Los principios de la tinción de Gram están basados en las características de la pared
celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada
microorganismo. La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida
por una capa fina de peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que
las bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa constituida por
peptidoglicano, pero no cuentan con membrana celular externa; así pues, la
composición química y el contenido de peptidoglicano en la pared celular de las
bacterias Gram negativas y Gram positivas explica y determina las características
tintoriales
La tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal violeta, el
cual tiene afinidad con el peptidoglicano de la pared bacteriana. Posteriormente, se
coloca lugol, el cual sirve como mordiente e impide la salida del cristal violeta por la
formación de un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios del
peptidoglicano de la pared bacteriana. En seguida, se coloca una mezcla de alcohol-
acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y cierra los poros de la misma,
también destruye la membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a
que ésta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla de alcohol
acetona. Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de
peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram
negativas no lo pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglicano. Por
último, se coloca safranina, la cual funciona como un colorante secundario o de
contra tinción y sirve para teñir las bacterias que no pudieron retener el complejo
cristal violeta-yodo.16 Hay bacterias de un mismo género que pueden observarse
en la misma muestra como Gram positivas y como Gram negativas, a este evento
se le llama tinción Gram variable secundaria a alteración en nutrientes, temperatura,
pH o concentración de electrolitos.
No todas las bacterias se pueden teñir por esta técnica, ya que carecen de pared
celular (micoplasma) o su pared celular tiene una composición química diferente
(micobacterias, que cuentan con una gran cantidad de ácidos micólicos). Las
muestras útiles para su uso son líquidos estériles, biopsias para cultivo, abscesos,
hisopados, crecimiento de colonias aisladas en medios de cultivo. Las bacterias
Gram positivas se observan de color azul obscuro a morado, mientras que las Gram
negativas se observan de color rosa a rojo.
BIBLIOGRAFÍA
https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-y-tipos-de-tinci-n
https://institutodelagua.es/microbiologia/tipos-de-tinciones-en-
microbiologiamicrobiologia/

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