Universidad de Los Andes

Facultad de Farmacia y Bioanálisis

Escuela de Bioanálisis
Cátedra de Parasitología

Tema 10:
Protozoarios intestinales
y cavitarios flagelados
Objetivos:
Contenido

• Clase Zoomastigophorea: Generalidades y Clasificación

• Dientamoeba fragilis
– Historia y morfología
– Hábitat y ciclo biológico; Transporte dentro de huevos
– Acción patógena y sintomatología
– Epidemiología
– Diagnóstico, tratamiento y profilaxis
 Clase Zoomastigophorea Calkins, 1909

• Sin cloroplasto
• Uno a varios flagelos (organela)
• Formas ameboides con o sin flagelos en algunos grupos
Familias de interés médico:

- Trypanosomatidae

- Chilomastigidae

- Trichomonadidae

- Octomitidae
 Clase Zoomastigophorea

• Presencia de flagelos durante la mayor parte de su existencia

(locomoción y prehensión de alimentos)
• Pueden ser parásitos o de vida libre
• Entre los parásitos del hombre, algunos producen
enfermedades (Trypanosoma cruzi, Leishmania spp.,
Trichomonas vaginalis) y otros son comensales (Chilomastix
mesnili, Trichomonas tenax)
• Hábitat: intestino, sangre y tejidos
 Clase Zoomastigophorea
Morfología:
• Varia con la especie, inclusive dentro de una misma
especie (Ejemplo Trypanosoma cruzi)
• Ovoide, piriforme, fusiforme o esférica
• Tamaño: unicelulares microscópicos

Constitución celular
• Membrana (rodea al parásito) más o menos rígida
• Citoplasma homogéneo, no hay diferencia
entre ecto y endoplasma
• Núcleo: generalmente 1, voluminoso, esférico
• Flagelo (órgano permanente) es la
base para la clasificación de estos organismos;
El número varia según la especie
 Clase Zoomastigophorea
Origen y estructura del flagelo

Origen
Corpúsculo llamado Blefaroplasto (uno para cada flagelo)

Estructura
• El Kinetoplasto es el conjunto formado por la unión del blefaroplasto +
cuerpo parabasal (estructura corpuscular)
• El flagelo está constituido por un axonema (filamento axial), rodeado de
una vaina citoplasmática hasta emerger por el extremo anterior del
parásito.
- Porción intracitoplasmática= Rizonema
- Porción extracitoplasmática= Flagelo libre

Blefaroplasto

Rizoplasto

Núcleo

Axostilo
Kinetoplasto = Blefaroplasto + cuerpo parabasal

Extremo anterior
Flagelo libre Extremo anterior

Cuerpo parabasal

Kinetoplasto

Núcleo Extremo posterior

Extremo posterior

Amastigota Promastigota

Extremo anterior Extremo anterior

Flagelo libre

Kinetoplasto

Extremo posterior
Extremo posterior

Epimastigota Tripomastigota
 Clase Zoomastigophorea

• Membrana ondulante ()

Desplazamiento del axonema sobre la
membrana celular  Movimiento ondulatorios

• Axostilo (►)
Estructura (bastón) rígida que recorre el cuerpo del
parásito. Termina en una extremidad aguda libre
(Trichomonas vaginalis)

• Mionemas
Fibrillas contráctiles localizadas en el citoplasma;
Confiere movimientos (Trypanosoma spp.)
 Blefaroplasto
Flagelos
Núcleo

Membrana Ondulante
Aparato de golgi

Costa

Fagolisosomas

vacuolas
Fibrilla
Axostilo parabasal

Blefaroplasto+cuerpo parabasal= Kinetoplasto

 Clase Zoomastigophorea
• Hábitat:
Intestinal: Giardia intestinalis; Trichomonas hominis y Chilomastix mesnili
Cavitario (vagina): Trichomonas vaginalis, (boca): Trichomonas tenax
Tisular y hemático: Trypanosoma cruzi; Leishmania spp.

• Locomoción (Flagelos/Extremo libre en la parte anterior del cuerpo

celular)

• Alimentación
Citostoma (boca): Intestinales
Saprozoica (ósmosis): tisulares y hemáticos

Citostoma
 Clase Zoomastigophorea
• Enquistamiento:
Algunos pierden el flagelo y se rodean de una
pared quística (estadio resistencia e infectante)

Flagelados tisulares y hemáticos= son parásitos

permanentes; transmiten por un hospedador
intermediario hematófago (vector)
No forman quistes

• Reproducción:
Fisión binaria, el cuerpo del flagelado
se divide por bipartición longitudinal:
División del kinetoplasto
Universidad de Los Andes
Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Escuela de Bioanálisis
Cátedra de Parasitología

Tema 10:
Dientamoeba fragilis
 Dientamoeba fragilis Jepps y Dobell, 1918

- Hasta 1982 fue considerada una amiba (sarcodino)

- Estudios recientes de microscopia electrónica han confirmado su
correcta clasificación como flagelado, debido al hallazgo de estructuras
de sostén y quinéticas (rudimentarias)
Reino Protista
Filo Metamonada
Clase Zoomastigophorea
Orden Trichomonadida
Familia Dientamoebidae
Género Dientamoeba
Especie fragilis
Morfología

- Trofozoíto:
Pleomórfico
5-15 µm
Binucleados (mononucleados)
Cariosoma: 4 gránulos de cromatina
(Configuración de tétrada) 
Cromatina: Ausente
Citoplasma: Granuloso (vacuolas alimenticias)
Movilidad lenta; seudópodos

-Quistes (Reciente descripción)

5 µ de diámetro
Espacio petitrófico entre la pared quística y la forma
trófica que está en el interior
Núcleo idéntico a la forma trófica
Morfología

binucleados

mononucleados

Tricrómica de Gomori Hematoxilina férrica

Hábitat y ciclo biológico
Hábitat Transmisión:
Ciego y colon ascendente Ruta oro-fecal

Trofozoítos ingeridos
Estadio infectivo
Estadio diagnóstico

Se ha postulado que
la transmisión ocurre ¿Transmisión a
a través de huevos de través de las
helmintos tales como formas quísticas?
Enterobius vermicularis y Fisión binaria
Ascaris lumbricoides

Trofozoítos en la luz
intestinal del colon

Trofozoítos en heces
Acción patógena y Sintomatología

• Considerada como comensal debido a la existencia de

portadores asintomáticos
• Sin embargo, se ha observado fibrosis de la mucosa intestinal,
cambios histopatológicos en el apéndice
• Invasión de la pared intestinal (?)
• Eosinofilia
Estudios moleculares (SSUrRNA) muestran dos grupos
genéticamente diferentes (dos especies?)
Sintomatología

Infección por D. fragilis se conoce como Dientamoebosis.

Población pediátrica:
• Diarrea (fase aguda) y dolor abdominal (fase crónica)
• Aumento de eosinófilos en fase crónica

Adultos:
• Diarrea persistente y dolor abdominal
• Anorexia, fatiga, nausea y vómito
• Pérdida de peso, flatulencia
• Heces blandas con moco, en ocasiones sangre

Complicaciones: Apendicitis, edema,

colitis eosinofílica y ulcerosa
Descarte de D. fragilis en pacientes con Síndrome de Intestino Irritable
 Australia
Stark et al., 2010

Figure 1. Age distribution of Dientamoeba fragilis -infected patients.

Epidemiología
• Cosmopolita
• Prevalencia real no se conoce (2% - 52%)
• Mayores cifras en población que vive en hacinamiento y con deficiente
aseo personal
• Antecedentes de enterobiosis (transporte para el flagelado)
• Coexistencia frecuente de ambos parásitos (Enterobius
vermicularis+Dientamoeba fragilis)
• Se cuestiona la transmisión oro-fecal debido a la ausencia de quistes
(labilidad de los trofozoítos en el medio ambiente)
Guidetti et al., 2010
Italia
Diagnóstico
•Presuntivo
•Confirmatorio
 Diagnóstico presuntivo
Muestra fresca

Lectura con objetivo de 40X

Solución yodada Solución salina

¿Esa estructura será un
parásito o un artefacto?
Examen Directo Diagnóstico presuntivo
(solución salina)

Detallar la estructura y
compararla
con otros elementos
presentes en una
muestra de heces

Núcleo
D. fragilis E. nana

Blastocystis spp. Leucocitos PMN E. histolytica/E. dispar

 Diagnóstico presuntivo

Examen Directo con Quensel

(100X)

Trofozoíto de Dientamoeba fragilis [] (citoplasma azul)*

Quiste de Endolimax nana [] (incoloro)
Forma vacuolar de Blastocystis spp. [] (citoplasma azul)

* La solución de Quensel no tiñe el núcleo de D. fragilis

 Diagnóstico presuntivo

Examen Directo con Quensel

(100X)
Trofozoíto de Dientamoeba fragilis [] (citoplasma azul)
Quiste de Endolimax nana [] (incoloro)
Forma vacuolar de Blastocystis spp. [] (citoplasma azul)
 Diagnóstico presuntivo

Examen Directo con Quensel

(100X)

Trofozoíto de Dientamoeba fragilis [] (citoplasma azul)

Quiste de Endolimax nana [] (incoloro)
Forma vacuolar de Blastocystis spp. [] (citoplasma azul)
 Diagnóstico presuntivo

Examen Directo con Quensel

(Imagen aumentada de tamaño)

Trofozoíto de Dientamoeba fragilis [] (citoplasma azul)

Quiste de Endolimax nana [] (incoloro)
 Diagnóstico presuntivo

Examen Directo con SSF

Dientamoeba fragilis. seudópodo hialino Dientamoeba fragilis. Los trofozoítos

(flecha) y citoplasma granular. Con ED con muestran una considerable variabilidad en
SSF los núcleos no son visibles. La correcta forma y tamaño dentro de una misma
identificación del trofozoíto se realiza con muestra
tinciones permanentes (i.e. tricromica,
hematoxilina, Giemsa).

http://www.atlas-protozoa.com/gallery.php?SOT_CAP=F_DIENT#0
 Diagnóstico presuntivo
Examen Directo con SSF y SY

Dientamoeba fragilis. Dos trofozoítos en la última fase Dientamoeba fragilis. Trofozoítos de forma y tamaño
de división celular (Citodéresis). Estas peculiares variable
formas nunca se observan en las tinciones
permanentes, posiblemente debido a la ruptura de los
puentes intracitoplasmáticos durante la preparación
del frotis.

Dientamoeba fragilis. Con esta tinción nunca se observan

http://www.atlas-protozoa.com/gallery.php?SOT_CAP=F_DIENT#0 los núcleos y distorsiona el trofozoíto
Diagnóstico confirmatorio
Lámina portaobeto

Frotis fecal

Tinción de Hematoxilina Férrica

o Tricrómica
 Tinción Tricrómica

A B

Dientamoeba fragilis. Trofozoítos mononucleados [A] Dientamoeba fragilis. Trofozoíto binucleado de forma
y binucleados [B]. Núcleo con cromatina dispuesta en elongada con los núcleos conectado. Este aspecto es
forma de tétrada indicativo de la detención de la división nuclear en
telofase.

Dientamoeba fragilis. Trofozoítos mononucleados Dientamoeba fragilis. Citodéresis, donde se observa

[]. Núcleo con cromatina dispuesta en forma de en puente citoplasmático.
tétrada
http://www.atlas-protozoa.com/gallery.php?SOT_CAP=F_DIENT#0
 Tinción de Hematoxilina Férrica

A
B

Dientamoeba fragilis. Trofozoítos binucleados. Dientamoeba fragilis. Trofozoítos mononucleados [A]

Núcleo con cromatina dispuesta en forma de y binucleados [B]. Núcleo con cromatina dispuesta en
tétrada y ausencia de cromatina en la membrana forma de tétrada
nuclear

Dientamoeba fragilis. Trofozoíto fijado durante Dientamoeba fragilis. Hematoxilina de Mayer’s .

movimiento mediante seudópodos [] Citodéresis, última fase de división citoplasmática.
Pequeño puente de citoplasma es visible entre las dos
células [ ]
http://www.atlas-protozoa.com/gallery.php?SOT_CAP=F_DIENT#0
 Tinción con Giemsa

► ►
►

Dientamoeba fragilis. Trofozoíto de gran tamaño () Dientamoeba fragilis. Trofozoítos fagocitando
fagocitando otro de menor tamaño () Blastocystis spp. [►]

A Dientamoeba fragilis.
Trofozoítos mononucleado [A]
y binucleado [B]. Núcleo con
cromatina dispuesta en forma
de tétrada
http://www.atlas-protozoa.com/gallery.php?SOT_CAP=F_DIENT#0
 ¿Inconvenientes
en el diagnóstico de
Dientamoeba fragilis?
Diagnóstico

• DIFICIL
• Examen directo (SSF y SY) baja sensibilidad
• Experiencia del Licenciado en Bioanálisis en el
diagnóstico presuntivo
• Examinar varias muestras de heces (seriado) para
aumentar la sensibilidad diagnóstica
• Tinción permanente (Hematoxilina o Giemsa) para
confirmar los casos
• Ausencia de quistes (diagnóstico basado en trofozoítos
que son muy lábiles)
• Confusión con leucocitos, quistes de protozoos,
Blastocystis spp. y artefactos
Diagnóstico
I) Número de muestras a analizar Stark et al., 2010
Australia

II) Posible confusión con otros protozoos

Trofozoítos mononucleados de
Dientamoeba fragilis

Detallar el cariosoma
(compacto o fragmentado)

Trofozoítos de
Endolimax nana
Tratamiento

• Yodoquinol (vía oral):

Adultos: 650 mg/8h durante 20 días
Niños: 30-40 mg/Kg/d (máximo 2 g)/ 3 dosis durante 20
días

Mecanismo de acción: Intraluminal y de baja absorción.

Contraindicado en pacientes con intolerancia al Yodo o con
lesión hepática.

• Secnidazol: Derivado imidazólico

Adultos: 2 g
Niños: 30 mg/Kg
Se recomienda la administración de una 2da dosis
Tratamiento

• Metronidazol: Derivado Imidazólico

Adultos: 500-750 mg/8h durante 10 días
Niños: 20-40 mg/Kg/día en 3 dosis durante 10 días
Contraindicado en los primeros meses de embarazo
cuestionado su eficacia para la cura clínica y
parasitológica

• Paramomicina: Aminoglucósido utilizado como

terapia alternativa a los restantes fármacos
Adultos: 500 mg/8h durante y días
Niños: 25-35 mg/Kg/día en 3 dosis durante 7 días
Profilaxis

• No es posible hacer recomendaciones claras desde el punto de vista

preventivo hasta que no se disponga de una información más
específica respecto al mecanismo de transmisión

• Sin embargo, se debe considerar las medidas profilácticas

recomendadas para las restantes enfermedades parasitarias
intestinales (lavado de las manos, consumo de agua potable o
hervida, lavado adecuado de los alimentos, etc.)