Guía de Práctica 3

PROGRAMA ACADÉMICO
DE ENFERMERIA
GUÍA DE PRÁCTICA No 3
EXPERIENCIA CURRICULAR: MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

CICLO: IV
TURNO: NOCHE
SEMESTRE: 2024-II
SESIÓN Nº: 3
DOCENTE: MILTON CESAR PARDO ABAD
LUGAR: A53
AMBIENTE: LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
INTEGRANTES:
I. TEMA: Antimicrobianos: Quimioterápicos y antibióticos. Mecanismos de acción de los

antimicrobianos. Resistencia antimicrobiana. Antibiograma y espectro antibiótico
II. RESULTADO DE APRENDIZAJE: Explica el crecimiento microbiano considerando los

procesos de desinfección, esterilización y antisepsia que se utiliza para el control de
microorganismos.
III. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:
• Realizar el antibiograma y espectro antibiótico
• Interpretar el antibiograma y espectro antibiótico
IV. FUNDAMENTO TEÓRICO SOBRE EL TEMA
La resistencia a los antimicrobianos es un fenómeno biológico que ocurre de manera

natural, pero que se ha incrementado enormemente debido al uso inapropiado y
negligente de estos fármacos. Los ensayos de susceptibilidad están indicados para
apoyar la quimioterapia antimicrobiana de tratamiento en procesos infecciosos por
bacterias en las que la identidad del microorganismo no es suficiente para predecir en
forma confiable su susceptibilidad. Estos ensayos son a menudo indicados cuando se
piensa que el organismo causante pertenece a una especie capaz de mostrar resistencia
a los agentes antimicrobianos más comúnmente usados. Los mecanismos de resistencia
incluyen la producción de enzimas inactivantes del antibiótico, que alteran el objetivo, o
alteran la acción.
El método que actualmente recomienda el CLSI está basado en el método originalmente

descrito por Bauer et al., (método de Kirby-Bauer). Este es el método de difusión en
disco en que se han desarrollado estándares para su interpretación y está apoyado por
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datos clínicos y de laboratorio. Las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos se

han convertido en procedimientos de rutina en la práctica clínica y la información
generada a partir de ellas es fundamental para la vigilancia de los perfiles de sensibilidad
y la detección de nuevos patrones de resistencia por el laboratorio. Existen vanos
métodos para probar la susceptibilidad de los microorganismos a los antibióticos siendo
la difusión en disco el más utilizado. Se realiza en un medio transparente y simple como
el agar de Mueller Hinton. Se fundamenta en la liberación del antibiótico al medio e
inhibición del crecimiento bacteriano en áreas concéntricas a la del disco
V. METODOLOGÍA:
Recojo de saberes previos:

• ¿Qué es el antibiograma?
• ¿Para qué sirve el antibiograma?
• ¿Cómo se interpreta el antibiograma?
VI. RECURSOS:
1. Material de Laboratorio (por mesa de práctica).
• 01 Mechero de alcohol.
• 01 Asa bacteriológica
• 02 Placas con Agar Mueller Hinton sembradas para lectura de antibiograma (una con
Staphylococcus aureus y otra con Escherichia coli)
• 02 Placas con Agar Mueller Hinton sembradas para lectura de espectro antibiótico (una placa
con un antibiótico de amplio espectro y otra con un antibiótico de espectro reducido)
• 02 Placas con Agar Mueller Hinton
• Discos de sensibilidad: para Gram positivos y Gram negativos
• 02 Tubos con Solución Salina Fisiológica Estéril (5mL c/u)
• 02 Cultivos Bacterias Gram Positivas
• 02 Cultivos Bacterias Gram Negativas
• 04 Hisopos estériles
• 01 Pinza
2. Material individual
• Guía de prácticas
• Guantes descartables, mascarilla descartable y gorro
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• 01 Marcador indeleble
3. Material grupal
• 01 Regla
• 01 Jeringa de 5 ó 10mL
VII. DESARROLLO DE ACTIVIDADES:

Actividad 1. Antibiograma
Se realiza a mediante el método de Kirby Bauer modificado, para lo cual, a partir de una
suspensión bacteriana (concentración aproximada a 1,5 cél. /mL), utilizando un hisopo
estéril, se siembra por superficie en placas con Agar Mueller Hinton, luego se lleva a secar a
la estufa por 10 minutos aproximadamente. Posteriormente se coloca, equidistantemente,
discos de antibióticos, en la superficie del Agar Mueller Hinton contenido en las placas de
Petri, y luego se incuba a 37º C por 24 horas. Finalmente se mide el halo de inhibición de
crecimiento.
3 PUNTOS
BACTERIA ANTIBIÓTICO HALO DE INTERPRETACIÓN

INHIBICIÓN DE
CRECIMIENTO (mm)
Staphylococcus aureus
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Escherichia coli
Actividad 2. Espectro antibiótico

Se coloca en el centro de una placa con Agar Mueller Hinton un disco de antibiótico,
posteriormente se siembra, por estría, 4 especies bacterianas (2 Gram positivas y 2
Gramnegativas) desde el borde del disco del antibiótico hacia el borde de la placa y luego se
incuba a 37º C por 24 horas.
2 PUNTOS
ANTIBIÓTICO INTERPRETACIÓN
Pág. 4 de 5
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Actividad 3. Plenaria – Retroalimentación

Se realiza la plenaria de las actividades desarrolladas, por un representante de cada grupo y
el docente realiza un resumen de los temas absolviendo dudas de los estudiantes.
VIII. PROTOCOLO DE SEGURIDAD / NORMAS BÁSICAS PARA LA PRÁCTICA
• Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos

vivos peligrosos.
• Portar la bata y equipo de protección (guantes)
• Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
• Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
• Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante

que parezca.
• No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.
IX. BIBLIOGRAFÍA
• Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid: Elsevier

España; 2009.
• Madigan M, Martinko J, Parker J. Biología de los Microorganismos de Brock. 12ava
ed. Madrid: Pearson; 2009.
• Koneman E et al. Diagnóstico Microbiológico Texto y Atlas. 6ta ed. Argentina: Médica
Panamericana S.A; 2008.
• Bauer AW, Kirby WM, Sherris JC, Turck M. Antibiotic susceptibility testing by a
standardized single disc method. Am. J. Clin. Pathol. 1966, 45: 493
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EXPERIENCIA CURRICULAR: MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

I. TEMA: Antimicrobianos: Quimioterápicos y antibióticos. Mecanismos de acción de los

II. RESULTADO DE APRENDIZAJE: Explica el crecimiento microbiano considerando los

III. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:

• Realizar el antibiograma y espectro antibiótico

• Interpretar el antibiograma y espectro antibiótico

IV. FUNDAMENTO TEÓRICO SOBRE EL TEMA

La resistencia a los antimicrobianos es un fenómeno biológico que ocurre de manera

El método que actualmente recomienda el CLSI está basado en el método originalmente

datos clínicos y de laboratorio. Las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos se

Recojo de saberes previos:

• ¿Para qué sirve el antibiograma?

• ¿Cómo se interpreta el antibiograma?

VII. DESARROLLO DE ACTIVIDADES:

BACTERIA ANTIBIÓTICO HALO DE INTERPRETACIÓN

Actividad 2. Espectro antibiótico

Actividad 3. Plenaria – Retroalimentación

VIII. PROTOCOLO DE SEGURIDAD / NORMAS BÁSICAS PARA LA PRÁCTICA

• Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos

• Portar la bata y equipo de protección (guantes)

• Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.

• Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.

• Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante

• No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.

• Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid: Elsevier

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