Tema 3

Sertesa
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1203
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Temas 1-9 desarrollados
3º Química Analítica II
Grado en Química
Facultad de Química
Universidad de Sevilla
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su
totalidad.
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Tema 3. Espectroscopía ultravioleta-visible.
1. Estructura química y absorción de radiación UV–V.

1.1. Transiciones tipo , , n (orbitales moleculares).
1.2. Transiciones d y f.
1.3. Transiciones de transferencia de carga.
2. Espectrofotómetros.
3. Espectroscopía derivada.
4. Aplicaciones analíticas.
4.1. Determinación cuantitativa de compuestos con grupos cromóforos.
4.2. Determinación cuantitativa de compuestos sin propiedades absorbentes útiles.
4.3. Análisis de mezclas.
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
4.4. Valoraciones fotométricas.
4.5. Determinación de constantes de acidez.
4.6. Determinación de la estequiometría de iones complejos.
1. Estructura química y absorción de radiación UV–V.

La absorción de radiación ultravioleta o visible por parte de una especie atómica o
molecular M se puede considerar como un proceso de dos etapas. La primera de ellas
consiste en una excitación electrónica (M + h → M*) donde el tiempo de vida de la
especie excitada es breve (10-8 a 10-9 s). Luego se produce la relajación de esa molécula
excitada. Las formas de relajación que pueden tener lugar son:
• La conversión de la energía de excitación en calor (M* → M + calor). Es la más

frecuente.
• Por medio de un proceso fotoquímico, como la descomposición de M* para dar
lugar a nuevas especies (M* → P).
• Dando reemisión de fluorescencia o fosforescencia (M* → M + h).
Excepto si tiene lugar la descomposición química, las mediciones de absorción no

perturban apenas el sistema ya que el tiempo de vida de M* y el calor emitido son
pequeños.
Por lo general, la absorción de radiación ultravioleta o visible es resultado de la

excitación de los electrones de enlace de moléculas e iones. Debido a esto, las longitudes
de onda de las bandas de absorción se pueden correlacionar con los tipos de enlaces de
la especie en estudio. Por tanto, la espectroscopia de absorción molecular es valiosa
para identificar grupos funcionales en una molécula. Pero lo más importante son las
aplicaciones en la determinación cuantitativa de especies con propiedades absorbentes.
Las transiciones electrónicas en moléculas y iones pueden incluir, a su vez

transiciones vibracionales y rotacionales. Es por eso por lo que se observan bandas
anchas en los espectros de absorción de estas especies.
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Las transiciones electrónicas se darán entre los electrones de enlace de iones y

moléculas orgánicas y algunos iones inorgánicos. Se clasifican en tres grupos:
1.1. Transiciones tipo , , n (orbitales moleculares)
➢ Transiciones  → *
Todos los compuestos orgánicos absorben radiación UV de longitud de onda < 185
nm (UV de vacío). Se trata de enlaces sencillos y tanto ellos como la atmósfera que los
rodea absorben a energías altas y, por tanto, las bandas no son útiles desde el punto de
vista analítico. Ejemplo, CH4 (C– H) max = 125 nm. CH3 –CH3 (C– C) max = 135 nm.
➢ Transiciones n → *
Son compuestos orgánicos saturados con átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre,

halógenos (tienen pares de electrones libres). Bandas en el intervalo 150 – 250 nm.
Tiene pocas aplicaciones analíticas.
➢ Transiciones n → * y → *
La mayoría de las aplicaciones de espectroscopía de absorción en compuestos

orgánicos se basan en transiciones de los electrones n y  al estado excitado * porque
la energía requerida para estos procesos tiene las bandas de absorción con máximos
dentro de la región ultravioleta-visible (200 a 700 nm). Las moléculas requeridas en estas
transiciones son aquellas que tienen grupos funcionales insaturados con electrones 
conocidos como cromóforos (dobles enlaces, C=C, C=O, N=N, C=S). Los espectros de
estas moléculas son complejos debido a que se superponen las transiciones
vibracionales con las electrónicas, dando bandas anchas que pueden parecer continuas.
Es por esto por lo que solo se pueden hacer análisis cualitativos o semicuantitativos.
Además, la información se puede ver distorsionada por los efectos del solvente, detalles
estructurales de la molécula, la conjugación de dos o más cromóforos, los efectos
vibracionales …
Absortividad molar () (L·mol-1·cm-1 ): 10 – 100 (n → *); 1000 – 10000 (→*)

La posición e intensidad de una banda puede cambiar de las siguientes formas:
• Desplazamiento hipsocrómico, hacia
el azul (aquel que disminuye )
• Desplazamiento batocrómico, hacia
el rojo (aquel que aumenta )
• Efecto hipercrómico (incrementa la
intensidad de la banda)
• Efecto hipocrómico (disminuye la
intensidad de la banda)
Los auxocromos son grupos de átomos unido a un cromóforo que modifica la

capacidad de absorber luz, pero no absorben por si mismos radiación UV-V. Son grupos
funcionales con e- disponibles para interaccionar estabilizando los estados *,
aumentando la . Ejemplo, –OH, –NH2
Por ejemplo, los desplazamientos batocrómicos provocados por la conjugación de los

dobles enlaces producen una mayor deslocalización de los electrones  y una
estabilización relativa del nivel *.
Así cuando comparamos la olefina
con la diolefina (conjugada), se
observa un aumento de la max
(desplazamiento batocrómico) y
un aumento de la max (efecto
hipercrómico) de la diolefina
conjugada debido a su mayor
estabilidad.
SI la absortividad aumenta se da un efecto hipercrómico y si la absortividad disminuye

se da efecto hipocrómico.

Así mismo también se pueden detectar grupos funcionales que actúan como
cromóforos. Por ejemplo, se puede detectar un grupo carbonilo si una banda débil de la
región de 280 a 290 nm tiene un desplazamiento hipsocrómico cuando aumenta la
polaridad del disolvente o la existencia de un anillo aromático en la región de 260 nm
con estructura fina vibracional.
Los espectros en la región UV de hidrocarburos aromáticos se caracterizan por tres
conjuntos de bandas que se originan a partir de las transiciones. La max depende de los
sustituyentes del anillo. Por ejemplo, el benceno tiene una banda intensa a 184 nm, una
banda más débil denominada banda E2 a 204nm y una banda aún más débil llamada
banda B a 256 nm. La intensidad de las bandas se observa con las max, ya que, en las
bandas intensas, la absortividad es más grande que en las débiles.
➢ Absorción aniones inorgánicos
Algunos aniones inorgánicos presentan bandas en UV, debidas a transiciones n →

*(e- no enlazantes que se excitan). Ejemplo, NO3- (313 nm), NO2- (280, 360 nm), CO32-
(217 nm). En general, los iones y complejos de las dos primeras series de transición
absorben bandas anchas en radiación visible en al menos uno de sus estados de
oxidación y son de colores (involucran orbitales d llenos)
1.2. Transiciones d y f
➢ Transiciones de electrones f
Los iones de elementos lantánidos y actínidos tienen bandas de absorción debidas a

transiciones de electrones en orbitales 4f y 5f. Las bandas están poco influenciadas por
los ligandos unidos a los iones porque las transiciones se dan en orbitales internos. En
consecuencia, las bandas son estrechas.
4
➢ Transiciones de electrones d
Los iones de elementos

de transición presentan
bandas anchas de
absorción que tienen una
fuerte influencia de los
ligandos unidos a ellos.
Solo van a cambiar en
disolución cuando se
forman los complejos con
el metal central y los
orbitales d se escinden.
El efecto de algunos ligandos

sobre la posición del máximo de
absorción de transiciones d → d se
representan en la siguiente tabla:
1.3. Transiciones de transferencia de carga
Algunos iones complejos dan bandas de transferencia de carga que, generalmente,

son intensas y con absortividades molares altas (produciendo elevada sensibilidad) Un
componente del complejo actúa como dador de electrones y el otro como aceptor. La
absorción de un fotón produce la transferencia del electrón desde el dador al orbital del
aceptor. El estado excitado es el resultado de un proceso redox interno.
Este comportamiento difiere del de un cromóforo orgánico en el que el electrón

excitado está en un orbital molecular y lo comparten dos o más átomos. Por ejemplo,
en el complejo Fe(III)–tiocianato la absorción de un fotón da como resultado la
transferencia de un electrón desde el ion tiocianato a un orbital que está muy
relacionado con el ion del Fe(III). El producto es una especie excitada que contiene
predominantemente Fe(II) y el radical neutro SCN. Como en otros tipos de excitación
electrónica, el electrón de este complejo vuelve a su estado original tras un breve
periodo. Pero, en ocasiones, podría tener lugar la disociación del complejo excitado,
originando productos de oxidación/reducción fotoquímica. En la mayoría de los
complejos de transferencia de carga que contienen un ion metálico, el metal actúa como
receptor de electrones. Unas excepciones son los complejos 1,10-fenantrolina con el
Fe(II) o el Cu(I), donde el ligando es el que acepta el electrón y el ion metálico es el
donador.

2. Espectrofotómetros
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a

través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.
Esto le permite al operador tanto dar información sobre la naturaleza de la sustancia en
la muestra como indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa
está presente en la muestra.
Primero se hace un registro de la línea base con el blanco. Después se obtienen las
absorbancias de la muestra y a esas se le restan las absorbancias del blanco a cada
longitud de onda obteniendo el espectro de la muestra (A vs ).
Hay varios tipos de espectrofotómetros:
• Los instrumentos de simple haz, que son aquellos en los cuales el haz de luz sigue
una única trayectoria entre la fuente y el detector. La banda de luz atraviesa la muestra
que se halla contenida en una celda, la luz transmitida por la muestra pasa al detector
originándose una corriente eléctrica que por medio de diferentes circuitos permite
observar una señal.
• En los instrumentos de doble haz la luz proveniente de la fuente está dividida en

dos haces después de salir del monocromador (se divide aquí) mediante un sistema de
espejos divisores. Esta división produce dos haces de luz, uno de ellos se dirige a
la cubeta blanco, que contiene el blanco, y el otro haz se dirige hacia la cubeta de
muestra. Los dos haces de luz después de atravesar la cubeta de blanco y la de muestra
llegan al detector para obtener la señal correspondiente. Los sistemas de doble haz
tienen la ventaja de que cualquier variación en la intensidad de la fuente, la eficiencia
de la red, la reflectividad de los espejos, la fotosensibilidad del detector, etc., afecta
simultáneamente a los dos haces. En consecuencia, la relación de energía de los dos
haces permanece siempre constante. Es una alternativa de mayor calidad.
• Otro tipo de espectrofotómetro es el de fila de diodos. Se basa en que la

radiación procedente de una lámpara de wolframio (V) y deuterio (UV) se enfoca sobre
el recipiente de muestra y luego pasa al monocromador fijo de red. La radiación
dispersada incide en el detector de fila de diodos (consta de una serie de varios

centenares de fotodiodos alineados a lo largo de un chip de silicio). La salida de cada

diodo corresponde a una  distinta y se observa un espectro de barrido de forma
secuencial (muy rápido). Se les conoce como detectores multicanal por dar medidas de
varias  simultaneas. Este tipo de instrumentos se usan para estudiar productos
intermedios lábiles que se forman en reacciones moderadamente rápidas, en estudios
cinéticos y en determinaciones cuantitativas y cualitativas de componentes que salen
de una cromatografía. Las desventajas son su limitada resolución y su coste alto. Utiliza
una óptica invertida: toda la luz de la fuente atraviesa la muestra y luego es dispersada
en un monocromador de red.
3. Espectroscopia derivada
En la espectrofotometría derivada los espectros se obtienen representando

gráficamente la primera o segunda derivada de la absorbancia respecto a la longitud de
onda. A menudo, estas representaciones gráficas revelan detalles espectrales que se
pierden en un espectro ordinario, es decir, mejora la resolución. Además, a veces se
puede medir la concentración de un analito en presencia de una interferencia, o de dos
o más analitos en una mezcla con más facilidad y exactitud mediante los métodos con
derivada. Da una mejor definición del máximo de absorción. Es util cuando el máximo
no esta bien definido o hay solapamiento de bandas. Desafortunadamente, existe una
degradación en la relación señal-ruido que acompaña a la obtención de las derivadas.
Sin embargo, en muchas zonas de las regiones ultravioleta y visible la relación señal-
ruido no es un factor limitante. Incluso si la relación señal-ruido se degrada por
derivación, se pueden aplicar métodos de suavización para ayudar a mejorar la
precisión. Para obtener los espectros con derivadas se utiliza una variedad de métodos,
como modulación de la longitud de onda, espectrofotometría de longitud de onda dual…

En el espectro de 1ª derivada, la línea

del espectro cruza el eje X en el valor de
max. La distancia entre el máximo y el
mínimo vecinos es proporcional a la
concentración. En el espectro de 2ª
derivada el valor de max viene dado por el
mínimo del espectro; la distancia entre el
mínimo y la línea que une los máximos es
proporcional a la concentración de las
especies absorbentes.
Muchas de las aplicaciones de este tipo de espectroscopía en el UV-V se relacionan

con las identificaciones cualitativas de especies. El detalle amplificado de un espectro
de derivadas hace posible distinguir entre compuestos que tienen espectros
superpuestos, esta técnica se llama intensificación de características (se debe usar un
espectro de alta calidad porque aumenta el ruido). También es útil para determinar de
manera simultánea dos o más constituyentes de mezclas (farmacéuicas, de trazas de
metales, vitaminas) y en la obtención de espectros de absorción en las regiones
ultravioleta/visible de analitos presentes en soluciones turbias, en las que la dispersión
de la luz elimina los detalles de un espectro de absorción. Sin embargo, estos picos claros
no se ven en los espectros de las preparaciones de proteínas características, como la
albúmina bovina o las del huevo, porque las moléculas grandes de la proteína dispersan
con fuerza la radiación, por lo que sólo hay un pico de absorción suave. La estructura
fina aromática también se descubre en los espectros de primera y segunda derivada.
4. Aplicaciones analíticas.
La espectrometría es una de las técnicas más utilizadas en los laboratorios químicos

debido a que se usa en la determinación tanto de compuestos orgánicos como de
especies inorgánicas, posee buena sensibilidad (10-4-10-5 M) y buena precisión (1-3%).
Además, los espectrofotómetros son instrumentos robustos de mantenimiento sencillo
y precios asequibles. Entre las aplicaciones más destacadas se encuentran:
4.1. Determinación cuantitativa de compuestos con grupos cromóforos.
Se trata, como ya se comentó anteriormente, de compuestos orgánicos con los

grupos, C=C, C=O, C=N o anillos aromáticos que poseen bandas útiles en la región UV
próximo y visible. Pero también de numerosas especies inorgánicas que absorben
radiación en esta región, por lo que son susceptibles a la determinación directa. Muchos
iones de los metales de transición son de colores cuando están en solución, por lo que
se pueden determinar por medio de mediciones espectrofotométricas. Pero además
existen otras especies que también presentan bandas de absorción características.
8
Como ejemplos se pueden

citar los aniones nitrito,
nitrato y cromato, los óxidos
de nitrógeno, los halógenos,
el ozono.
Las bandas de los grupos

cromóforos son anchas y
suaves, pero en el espectro del benceno no se observan así debido a que se encuentra
en fase vapor (el disolvente elimina las interacciones).
4.2. Determinación cuantitativa de compuestos sin propiedades absorbentes útiles.
Utilizando un reactivo adecuado se forma un producto coloreado con propiedades
absorbentes útiles en la región de estudio. La reacción que tiene lugar debe ser casi
completa para que la aplicación en el análisis cuantitativo sea satisfactoria. Si la cantidad
de producto está limitada por el analito, la absorbancia del producto es proporcional a
la concentración del analito. Los reactivos que generan color también se utilizan a
menudo para determinar especies absorbentes, como los iones de los metales de
transición.
Algunos de los ejemplos de reactivos inorgánicos son: el tiocianato (SCN-), forma

complejos coloreados con hierro, cobalto, molibdeno; el agua oxigenada, origina
compuestos coloreados con titanio, vanadio; la o-fenantrolina forma un complejo de
color naranja con Fe(II); la ditizona que forma compuestos coloreados, solubles en
disolventes orgánicos, con iones de metales pesados, Zn(II), Pb(II), Hg(II), Bi(III).
También, existen agentes quelantes orgánicos, que forman complejos coloreados
estables con los cationes
4.3. Análisis de mezclas
La absorbancia total de una disolución a una longitud de onda dada, es igual a la suma
de las absorbancias de los componentes individuales en la disolución.
A = εX·b·[X] + εY·b·[Y] + εZ·b·[Z] +…
Esta relación hace posible en principio determinar las concentraciones de los

constituyentes individuales de una mezcla (X e Y), incluso si su espectro se superpone
por completo. Las relaciones son válidas sólo si se cumple la ley de Beer en ambas
longitudes de onda y los dos constituyentes se comportan de manera independiente
uno del otro. La exactitud mayor se obtiene al elegir longitudes de onda a las cuales las
diferencias en absortividades molares son grandes. A mayor número de mediciones,
mayor error.

4.4. Valoraciones fotométricas.
Con este tipo de valoraciones se va a determinar el punto final (o punto de

equivalencia). Se hace una medida continua de la absorbancia de la disolución mientras
se está añadiendo reactivo valorante. El analito, el reactivo valorante o el producto de
la reacción deben tener propiedades absorbentes y cumplir la ley de Beer en el intervalo
de concentraciones de trabajo. Las curvas de valoración son lineales (relación lineal
entre la propiedad medida, absorbancia, y la concentración), poseen mejor definición
del punto final y tiene aplicación a disoluciones diluidas. Vamos a destacar dos tipos:
• Absorbe el valorante, pero no el analito ni el producto. Por ejemplo, valoración

de As(III) con BrO3 - , en presencia de Br-. Se mide absorbancia del Br2 . El Br2 oxida As(III)
a As(V). BrO3 - + 5 Br- + 6 H+ → 3 Br2 + 3 H2O
Se observa como la línea es constante hasta

que llega al peq y una vez que ya hay presencia de
Br2 la línea empieza a crecer.
• Absorbe el producto, pero no el analito

ni el valorante. Ejemplo, valoración de Cu(II)
con AEDT(Y), se forma el complejo CuY2- de
color azul. Cu2+ + Y4- → CuY2-
En este caso, una vez que llega al peq ya no

se forma más producto y la absorbancia es
constante.
4.5. Determinación de la constante de acidez.
Se mide la absorbancia, a una longitud de onda adecuada, de disoluciones del ácido

débil, que tengan valores de pH diferentes. AHA y AA- son los valores de absorbancia
correspondientes a la forma totalmente protonada y totalmente desprotonada,
respectivamente
Se utiliza el método de Stenstrom y Goldsmith donde el pKa es igual al valor de pH

para el que se cumple: A = (AHA + AA-)/ 2 . El procedimiento consiste en registrar los
espectros de disoluciones del ácido débil con distintos pH, a partir de los cuales se
deduce cuál es el valor de longitud de onda más adecuado, que es la que dé lugar a
variaciones grandes de los valores de absorbancia al cambiar el pH.
10

El cambio de protonación produce cambios en la estructura de la molécula. Para
medir la absorbancia se debe hacer antes o después del punto isosbéstico (longitud de
onda concreta en la que la absorbancia total de una muestra no cambia durante una
reacción química o un cambio físico de la muestra) pero nunca sobre este.
4.6. Determinación de la estequiometría de un complejo.
La reacción de formación del complejo es: M + nL → MLn
a) Método de las variaciones continuas.
Se mezclan disoluciones del ion M y

del ligando L de manera que |M| + |L|
sea constante (tanto el volumen como la
cantidad de moles totales). Se mide la
absorbancia a λmax del complejo en cada
disolución y se representa frente a la
fracción molar de M. El valor máximo de
absorbancia se obtiene para la fracción
correspondiente a la estequiométrica.
b) Método de la razón molar.
Para una concentración constante del

ion metálico M, se añaden cantidades
crecientes de ligando. Se mide la
absorbancia a λmax del complejo MLn y se
representa frente a la razón molar
|L|/|M|. La absorbancia máxima se
obtiene para la razón molar |L|/|M| igual
a la estequiométrica (punto de corte
entre dos rectas de distinta pendiente).
11

12

13
Principios de análisis instrumental. Sexta edición. Douglas A.Skoog, F.James Holler y
Stanley R.Crouch.
14

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Tema 3. Espectroscopía ultravioleta-visible.

1. Estructura química y absorción de radiación UV–V.

1. Estructura química y absorción de radiación UV–V.

• La conversión de la energía de excitación en calor (M* → M + calor). Es la más

Excepto si tiene lugar la descomposición química, las mediciones de absorción no

Por lo general, la absorción de radiación ultravioleta o visible es resultado de la

Las transiciones electrónicas en moléculas y iones pueden incluir, a su vez

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Las transiciones electrónicas se darán entre los electrones de enlace de iones y

1.1. Transiciones tipo , , n (orbitales moleculares)

Son compuestos orgánicos saturados con átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre,

La mayoría de las aplicaciones de espectroscopía de absorción en compuestos

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Los auxocromos son grupos de átomos unido a un cromóforo que modifica la

Por ejemplo, los desplazamientos batocrómicos provocados por la conjugación de los

SI la absortividad aumenta se da un efecto hipercrómico y si la absortividad disminuye

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➢ Absorción aniones inorgánicos

Algunos aniones inorgánicos presentan bandas en UV, debidas a transiciones n →

Los iones de elementos lantánidos y actínidos tienen bandas de absorción debidas a

Los iones de elementos

El efecto de algunos ligandos

1.3. Transiciones de transferencia de carga

Algunos iones complejos dan bandas de transferencia de carga que, generalmente,

Este comportamiento diﬁere del de un cromóforo orgánico en el que el electrón

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Hay varios tipos de espectrofotómetros:

• En los instrumentos de doble haz la luz proveniente de la fuente está dividida en

• Otro tipo de espectrofotómetro es el de fila de diodos. Se basa en que la

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Muchas de las aplicaciones de este tipo de espectroscopía en el UV-V se relacionan

La espectrometría es una de las técnicas más utilizadas en los laboratorios químicos

4.1. Determinación cuantitativa de compuestos con grupos cromóforos.

Se trata, como ya se comentó anteriormente, de compuestos orgánicos con los

Como ejemplos se pueden

Las bandas de los grupos

4.2. Determinación cuantitativa de compuestos sin propiedades absorbentes útiles.

Algunos de los ejemplos de reactivos inorgánicos son: el tiocianato (SCN-), forma

4.3. Análisis de mezclas

A = εX·b·[X] + εY·b·[Y] + εZ·b·[Z] +…

Esta relación hace posible en principio determinar las concentraciones de los

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4.4. Valoraciones fotométricas.

Con este tipo de valoraciones se va a determinar el punto final (o punto de

• Absorbe el valorante, pero no el analito ni el producto. Por ejemplo, valoración

Se observa como la línea es constante hasta

• Absorbe el producto, pero no el analito

En este caso, una vez que llega al peq ya no

4.5. Determinación de la constante de acidez.

Se mide la absorbancia, a una longitud de onda adecuada, de disoluciones del ácido

Se utiliza el método de Stenstrom y Goldsmith donde el pKa es igual al valor de pH

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El cambio de protonación produce cambios en la estructura de la molécula. Para