INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA

Unidad de aprendizaje: Biotecnología

Profesores:
Ramírez Ortega Francisco Arturo
Hernán Cortes Arroyo

Semestre: 25/1

Equipo: “Mar”

Nombre del alumno: Brenda Caballero

Fecha: 12/09/24
 PRÁCTICA 2.
ESTERILIZACIÓN DEL BIORREACTOR.
1. Define los términos de esterilidad y asepsia. ¿Cuál es la diferencia entre
esterilidad y asepsia?
Asepsia etimológicamente significa "sin putrefacción'. Ausencia de materia séptica;
estado libre de infección.
La asepsia produce la ausencia de todo germen y de cualquiera de sus formas de
resistencia, suprimiendo el aporte de microbios y su penetración. El resultado de
una técnica de asepsia correcta es la esterilización.
(definición del Diccionario de la Real Academia)
La esterilización es la “Técnica de saneamiento cuya finalidad es la desinfección
de toda forma de vida, aniquilando todos los microorganismos, tanto patógenos
como no patógenos, incluidas sus formas de resistencia (por ejemplo las esporas,
que son formas de resistencia de los gérmenes para poder sobrevivir en
condiciones desfavorables del medio ambiente, como calor o frío excesivo,
desecación, etc).La esterilización sólo se puede aplicar sobre objetos o material
inanimado, mientras que la desinfección se aplica sobre objetos (desinfectantes) y
sobre tejidos vivos (antisépticos). Un objeto aséptico es un objeto estéril y, al
trabajar con él, decimos que se actúa con asepsia. La piel no se esteriliza, sino que
se desinfecta.
2. Describe por lo menos otro método diferente, al realizado en la práctica,
para evaluar la esterilidad del medio de cultivo en biorreactores.
Ondas Supersónicas: (microondas odontológico): Este aparato está formado por
un foco emisor de alta frecuencia que causa vibraciones en las moléculas de
los microorganismos. Dichas vibraciones se transforman, por fricción interna, en
calor y de esta forma se altera y se desactiva todo tipo de estructura viva. El
instrumental se coloca en un contenedor cubierto por bolitas de vidrio
humedecidas con un líquido (ortobencil paraclorofenato de sodio). El tiempo de
esterilización es de 90 segundos.
Indicadores o controles físicos. El control de la esterilización mediante
indicadores físicos se lleva a cabo mediante su colocación en el interior del paquete
a fin de comprobar la temperatura, el tiempo de esterilización y la presión en
un equipo determinado y para lo cual estos indicadores son calibrados a fin
de detectar cualquier fallo, mediante la incorporación de termómetros,
manómetros, sensores de carga, etc., los cuales son de gran utilidad pero no
constituyen un medio eficaz para comprobar la esterilización y para lo cual se
hace necesario usar como complemento controles biológicos y demás métodos
de control.
 (López, 2013)
3. ¿Existe un número permitido de microorganismos presentes en el medio
de cultivo después de esterilizar? Explica y fundamenta tu respuesta.
En la práctica puede haber algunos microorganismos presentes en el medio de
cultivo después de la esterilización debido a varios factores:
Eficiencia del Proceso de Esterilización: Ningún proceso de esterilización es 100%
perfecto. La eficacia de métodos como la autoclave (esterilización por vapor a alta
presión), el calor seco, la filtración o la radiación puede verse afectada por factores
como la temperatura, el tiempo de exposición, la presión y la calidad del equipo.
Contaminación Post-esterilización: Después de la esterilización, el medio de cultivo
puede contaminarse durante su manipulación. Esto puede ocurrir si no se realiza en
condiciones estériles o si hay fallos en el sellado y almacenamiento del medio.
Microorganismos Resilientes: Algunos microorganismos, como las esporas
bacterianas (por ejemplo, Bacillus o Clostridium), son extremadamente resistentes
a los métodos de esterilización y pueden sobrevivir si el proceso no es
completamente efectivo.
Para asegurar la ausencia de microorganismos después de la esterilización, los
laboratorios realizan controles de calidad, como el uso de indicadores biológicos
(esporas bacterianas) y pruebas de esterilidad. Estos controles permiten verificar la
eficacia del proceso de esterilización y garantizar que el medio de cultivo esté libre
de contaminantes.
Se debe de tener en cuenta que es la definición de esterilidad que es la eliminación
completa, ya sea por destrucción o por separación, de toda forma de vida de un
objeto o material. Para garantizar la esterilidad se utilizan métodos comprobatorios
de esterilización que pueden ser físicos, químicos o biológicos y que estos
nos permiten conocer si se llevó a cabo una adecuada esterilización. Una
probabilidad comúnmente aceptada en fermentaciones industriales es de 1x10-3:
esto es, la probabilidad de que 1 en 1000 lotes se contaminen después de la
esterilización. Se pueden imponer mayor o menores criterios estrictos
dependiendo de la consecuencia de una falla.
(López, 2013)
4. ¿Cómo se lleva a cabo la esterilización de un biorreactor a nivel industrial?
Presenta el proceso.
Preparación Preliminar:
Limpieza: Antes de la esterilización, el biorreactor y sus componentes (como
tuberías, válvulas y accesorios) deben ser limpiados a fondo para remover residuos
y contaminantes visibles. Esto generalmente se hace con soluciones de limpieza
alcalinas o ácidas, dependiendo del tipo de residuos (Gibson et al., 2020).
Cierre del Sistema:
Montaje: Todos los componentes del biorreactor se ensamblan y se aseguran que
estén correctamente conectados. Esto incluye el tanque, las tuberías, las bombas
y los sistemas de aireación y control.
Sellado: El sistema se sella herméticamente para evitar la entrada de
microorganismos durante el proceso de esterilización.
Esterilización en Caliente (Autoclave o Vapor a Presión):
Método: La esterilización más común es mediante vapor saturado a alta presión,
usando un autoclave o un sistema de esterilización in situ.
Procedimiento:
➢ Vapor a Alta Presión: El biorreactor se somete a vapor a temperaturas de
alrededor de 121°C (250°F) y presiones de 1.2-1.5 atmósferas durante un
tiempo específico (generalmente 30-60 minutos). Esto asegura que todas las
áreas del biorreactor, incluidos los tubos y las válvulas, sean esterilizadas
(Baldwin et al., 2019).
➢ Ciclado: El vapor circula a través del biorreactor, garantizando que todos los
componentes internos se mantengan a la temperatura necesaria para matar
microorganismos.
Esterilización en Frío:
Químicos: En algunos casos, se pueden utilizar soluciones químicas esterilizantes,
como peróxido de hidrógeno o soluciones de ácido peracético, para esterilizar el
sistema, especialmente si el calor no es adecuado para algunos materiales del
biorreactor.
Proceso: Las soluciones esterilizantes se introducen en el sistema, se mantienen
en contacto durante un tiempo específico y luego se eliminan, seguido de un
proceso de enjuague para remover cualquier residuo químico.
Esterilización por Radiación:
Método: La radiación gamma o UV se puede usar para esterilizar componentes
individuales que no son aptos para calor o químicos. Este método se aplica en
situaciones específicas donde se necesita una esterilización rigurosa y precisa
(Sharma et al., 2021).
Enfriamiento y Verificación:
Enfriamiento: Después de la esterilización, el biorreactor debe enfriarse de manera
controlada para evitar el daño térmico a los componentes y permitir el manejo
seguro.
Verificación: Se realizan pruebas de esterilidad, usando cultivos de prueba o
indicadores biológicos, para confirmar que el proceso de esterilización ha sido
exitoso y que el sistema está libre de microorganismos (Madigan et al., 2017).
Consideraciones Adicionales
Control de Calidad: Monitoreo continuo de parámetros como temperatura, presión
y tiempo durante la esterilización es esencial para asegurar un proceso efectivo.
Mantenimiento: El mantenimiento regular del sistema de esterilización y la
calibración de equipos son críticos para mantener la eficacia del proceso..
(Juárez y at, 2016)

Bibliografía.
➢ Hernández, M; Celorrio, J; Lapresta, C y Solano, V. (2014).
“Fundamentos de antisepsia, desinfección y esterilización”. Servicio de
Medicina Preventiva y Salud Pública, Hospital Universitario Miguel Servet,
Zaragoza, España. https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-
infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-fundamentos-antisepsia-
desinfeccion-esterilizacion-S0213005X14001839
➢ Juárez, D; Tierrablanca, A y Toral, D. (2016) “Esterilización de
biorreactores”. https://prezi.com/9ey-xlorpbxo/esterilizacion-en-
biorreactores/?frame=9865274fd7eaff7ac6b297ddf1d005478fba85f5
➢ http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/1003/Capitulo7.pdf
➢ López, Z. (2013). “MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN”. Facultad de
Ciencias Médicas Manuel Fajardo. - Universidad de Ciencias Médicas
de la Habana. http://uvsfajardo.sld.cu/tema-7-metodos-de-esterilizacion