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INFORME MICRO PRACTICA N°3

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

Facultad de Ciencias Agropecuarias


Escuela Académico Profesional de Ingeniería Agroindustrial

INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO

Práctica N° 3
DESCRIPCIÓN Y EXPLICACIÓN DE PROTOCOLOS SOBRE ACCIÓN DE LOS
AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO

Autor(es):

Moreno Varas Miuller

Experiencia curricular: Microbiología general


Ciclo: IV - B
Coordinadora:
Rodríguez Haro Icela Marissa
Asesores:
Espinoza Ramírez Jessica Karina
Angulo Castro Ivan Alfredo
Díaz Zuñiga Gilberto Jesús
Trujillo – 2024

INTRODUCCIÓN

Los microorganismos, como bacterias, hongos y virus, son seres vivos capaces de provocar
enfermedades en humanos y animales. En la industria alimentaria, también pueden generar
pérdidas económicas debido al deterioro que ocasionan en alimentos, bebidas y otros
productos. Para evitar la propagación de enfermedades y el deterioro de productos, es
fundamental entender cómo actúan los agentes físicos y químicos sobre el crecimiento
microbiano. Este conocimiento es crucial para seleccionar los agentes apropiados que
permitan controlar el

Entre los agentes físicos se incluyen el calor, el frío, la radiación y la presión, aunque en
este caso nos centraremos en la temperatura. Por otro lado, los agentes químicos abarcan
desinfectantes, antisépticos, antibióticos, así como el control del pH (tanto alto como bajo).
Cada uno de estos agentes, físicos o químicos, posee características y ventajas
particulares. El calor, por ejemplo, es muy eficaz para eliminar microorganismos, pero puede
afectar a ciertos materiales o tejidos vivos. El frío, aunque menos efectivo que el calor,
resulta más seguro para los materiales biológicos. La radiación, por su parte, es muy
eficiente para destruir microorganismos, pero implica riesgos para la salud humana y el
medio ambiente.

En este informe, se analizará el efecto de diversos agentes físicos y químicos sobre el


crecimiento microbiano utilizando distintos cultivos y medios. Se detallarán los resultados de
la práctica en función de las situaciones específicas y las muestras tratadas.

I. OBJETIVOS:

 Demostrar el efecto de agentes físicos sobre el crecimiento microbiano

 Demostrar el efecto de agentes químicos sobre el crecimiento microbiano

 Conocer el procedimiento correcto para realizar los estudios

correspondientes
II. MATERIALES:

 Mechero

 Alcohol de 70°

 Bacteriología

 Hisopos previamente desinfectados

 Algodón

Muestras:

 E. coli

 Bacillus cereus

 Lactobacillus

 Stofliucopus

 Lejía

 Alcohol yodado

 Ácido clorhídrico

 Fenol

III. METODOS Y PROCEDIMIENTOS:

1. Acción de agentes físicos sobre el crecimiento microbiano:

a. Acción de la temperatura sobre el crecimiento microbiano:


Para esta práctica se usarán dos cultivos, serán de Bacillus cereus y
Staphylococcus Aureus
Bacillus Cereus: El medio de cultivo, tiene nutrientes con extracto de carne,
preparados con anticipación, se coloca la muestra a una temperatura
aproximada de 100°C por cantidades de tiempo de 0, 1, 5 y 10 minutos.
Staphylococcus aureus: Las muestras se colocan en los tubos de ensayos
que son puestos a baño maría por cantidades de tiempo de 0, 1, 5 y 10
minutos.
Ambas muestras luego del procedimiento son incubadas a por 24 horas.

b. Acción del pH sobre el crecimiento microbiano:


Para este caso se usaron Bacillus cereus y Escherichia coli, sembramos una
asada de cada cultivo en caldo nutritivo, en 3 tubos diferentes para cada
muestra, con el fin de tener tres pH distintos, con 2, 7, 10 de pH, los cuales
para el medio ácido se utilizó ácido clorhídrico y para el medio básico con
hidróxido de sodio. Todas las muestras son puestas en la incubadora a 37°C
por 24 horas

2. Acción de agentes químicos sobre el crecimiento microbiano:

a. Acción de agentes químico:


Primero realizamos la suspensión del microorganismo en SSFE, comparando
con el tubo 0.5 del nefelómetro de Mc Farland, se coloca con un hisopo
estéril con la suspensión, sembrando la placa estirando homogéneamente
hasta en tres direcciones, seguido, incineramos unas pinzas para colocar
cuatro filtros con cuatro agentes químicos distintos, se usó fenol (2%), formol
(10%), lejía (4%), alcohol (5%).

3. Determinación de funcionamiento de bacterias.

En esta práctica se usaron dos muestras, las cuales fueron Enterobacter y


Escherichia Coli, para saber cuál de las dos fermenta glucosa por la guía de los
ácidos mixtos y cuál produce acetoina por la guía de los butanoliolica. En el primer
caso se usó el indicador Rojo de Metilo, el cual colorea rojo en estado ácido.

capacidad de crecimiento en condiciones anaeróbicas, ya que el medio crea un


gradiente de oxígeno
IV. RESULTADOS:

En la tabla 1, se presentan los resultados de la primera práctica de acción de la


temperatura, para saber hay crecimiento o no, se observa la turbidez del agua.

0 minutos 1 minuto 5 minutos 10 minutos


Bacillus cereus Crecimient Crecimiento Crecimiento Crecimiento
o
Escherichia Coli Crecimient Crecimiento Crecimiento No hay crecimiento
o
Tabla1. Resultados de crecimiento en los diferentes tiempos.

Sabemos entonces que el Bacillus cereus, resiste temperaturas de 100°C hasta 10


minutos, esto por la presencia de esporas y para el caso de Escherichia Coli no
presenta crecimiento a partir de los 10 minutos a un tratamiento de 100°C.

En la tabla 2, se presentan los resultados de la segunda práctica de acción de pH,


para los resultados positivos y negativos, también se observa la turbidez del agua.

pH 2 6.5 7 8.6 10
Staphylococcus Negativo No Positivo Positivo Negativo
Lactobacillus No Positivo Negativo No Negativo
Vibrio Negativo No Positivo No No
Tabla2. Resultados de crecimiento en los diferentes medios.

Para estas tres muestras su pH óptimo es de 7, sabiendo que los pH extremos,


desnaturalizan las enzimas y proteínas.

En la tabla 3, se presentan los resultados de la practica de agentes químicos, en esta


sabemos que los agentes tuvieron el efecto deseado si es que existe un halo de
inhibición alrededor de los discos filtros.

Formol (10%) Lejía (4%) Alcohol Yodado Ácido Clorhídrico Fenol (2%)
Escherichia Coli Mayor efecto Efecto Menor efecto Efecto leve Sin efecto
Tabla3. Resultados de inhibición en diferentes compuestos químicos.

Nos damos cuenta que para esta muestra la mejor opción es el Formol a una
concentración del 10%, y que la lejía no tiene un buen efecto siendo la misma
concentración con la que es comercializada.

Sobre la práctica denominada determinación de funcionamiento de bacterias, los


resultados indicaron que el Enterobacter tenía una producción positiva de acetoina por
la guía butanoliolica, gracias a los indicadores KOH (40%) y Alfa Naftol. Para el caso
del rojo de metilo E.Coli fue positiva para la fermentación de glucosa por la guía de
ácidos mixtos.

V. DISCUSIÓN O COMENTARIO:

 El conocimiento adquirido a través de la práctica desempeña un papel crucial en


la industria, ya que las empresas de alimentos reconocen la importancia de
implementar prácticas que aseguren la calidad y seguridad de sus productos.
Estas prácticas incluyen la utilización de agentes para controlar los
microorganismos que pueden deteriorar los alimentos, lo que afecta sus
características sensoriales y reduce su vida útil.
 En la agroindustria, se emplean parámetros fisicoquímicos como el pH, ya que
se sabe que la mayoría de los microorganismos dañinos prosperan en un rango
de pH cercano a la neutralidad, que se encuentra entre 5 y 8. Además, se
considera la temperatura como otro factor crítico, dado que las bacterias tienen
una reproducción acelerada en alimentos que se encuentran en temperaturas
entre 5 y 65 grados centígrados

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

 Acción de los agentes físicos sobres las bacterias (I). (s/f). Edu.ar. Recuperado el 19
de septiembre de 2023, de
http://ww.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/17_micro.htm

 de la Catalasa, P. (s/f). Pruebas bioquímicas de identificación de bacterias. Ulpgc.es.


Recuperado el 19 de septiembre de 2023, de
https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35729/pruebas_bioquimicas_de_id
entificacion_de_bacterias.pdf
 De un microorganismo, E. P. se R. P. D. la C. (s/f). ROJO DE METILO Y VOGES
PROSKAUER. Ucv.ve. Recuperado el 19 de septiembre de 2023, de
http://portal.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/
proskauer.pdf

 (S/f). Redalyc.org. Recuperado el 19 de septiembre de 2023, de


https://www.redalyc.org/journal/944/94454631001/html/

VII. ANEXOS:

 Muestra de la tabla 1:

 Muestras con diferentes pH de la tabla 2:

 Inhibicion de las muestras tabla 3:

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