Clase 4 Replicacion Del Adn
Clase 4 Replicacion Del Adn
Clase 4 Replicacion Del Adn
Clase2.ReplicacindelADN.
Lic.LuisSnchez
TecnlogoMedicoenLaboratorioClnicoyAnatomaPatolgica
DNA
Synthesis
Quiescence
G1
S
G1
S
G2
S
M
S
Mitosis
II.HistoricalBackground
A.1953WatsonandCrick:LaestructuradelADNprediceelmecanismodelareplicacin
Ithasnoescapedournoticethatthespecificpairwehavepostulatedimmediatelysuggests
apossiblecopyingmechanismforthegeneticmaterial.
B.1958MeselsonandStahl:LareplicacindelADNessemiconservativa
ReplicacindelADN.Caractersticasgenerales
DNASynthesis:
1.RequiereunADNtemplate(molde)yunprimerconExtremo3OHend
(LasintesisdeADNnopuedeiniciarsedenovo)
2.RequieredNTPs.
3.Ocurreenladireccion53.
PequeosARNactuan
comoprimersenvivo
LaReplicacines:
Semiconservativa
Semidiscontinua
Bidireccional.
SEMICONSERVACION
themostbeautifulexperimentinbiology.
All
hybrids
1/2old:
1/2new
1/4old:
3/4new
1/2hybids:
1/2new
All
hybrids
LostresmodelospotencialesdereplicacionelADNysusresultadospredichos.
Theactualdata!
SEMIDISCONTINUA
Cadenalider
SntesisContinua
Cientosamilesdepb/tipocelular
Sntesisdiscontinua
Cadenarezagada
Continua+discontinua=
semidiscontinua
Bidireccional
Quieredecir,
queenalgn
momentoestas
dosHorquillas
sevana
encontrarantes
desepararse.
CmosellevaacabolareplicacinenelADNcircular
Mayoradelasbacterias
Usadoporlosvirus,
Nonecesitaprimers
Usadopormitocondrias
ycloroplasto
MapadelcromosomadeE.colicadanumeroesminuos(40000bp)
ComoseverealmenteunareplicacindeADNenE.coli.
ElcomplejoADNEnzima
Bsicoparalareplicacin
Recuerdanenquedireccinprocedalareplicacin?
ELREPLISOMAOSISTEMAADNREPLICASA
Comoseproducelareplicacin
enunabacteria
Puedeserdivididaen:
Iniciacin
Elongacin
Terminacin
Iniciacin(Bacteria)
AcomododesecuenciasenelorigendereplicacindeE.coli(OriC)
Fasedeelongacin
Escuandolacadenasealargaproductode
lasntesis.Sntesisdelasdoscadenasseda
enformasdiferentes:cadenaldery
rezagada.
Sntesisdelacadenarezagada
TERMINACIONDELAREPLICACION
SeqTeraprox20pb,actancomotrampa,
dondelashorquillasentranperonosalen.
LasprotenasTUS(sustanciadeutilizacindel
terminal)encuentranestassecuenciasTeryelcomplejo
TERTUSdetienelareplicacinporunsololado
LasADNpolimerasasse
equivocan?
Si.Perotienemecanismosquereparaneldao
(Proofreading=correccindelectura).
LaE.colitiene4,6x106pbensugenoma.
LaADNpolimerasaseequivocaen1/10001/10000pb.
Entonces,comoseexplicaquealfinaldelareplicacin,laADN
polimerasaseequivoque1x1091x1010xbase?
Primero,elemparejamientoATyCGhacequegeomtricamentesea
correctoello.
Segundo,estonoessuficiente,senecesitanenzimasqueayudana
mejorarlafidelidaddelareplicacin.
Tercero,apesardeestasenzimasdereparacinenlareplicacin,aun
haymasenzimasqueactanpostreplicacin.
IV.DNAPolymerasesofE.coli
ThefirstDNApolymerasewasdiscoveredbyArthurKornbergin1957DNA
PolymeraseI
A.E.coliDNAPolIhas3enzymaticactivities:
1)53DNApolymerase
2)35exoncuclease(Forproofreading)
KlenowFragment
3)53DNAexonuclease(ToeditoutsectionsofdamagedDNA)
1
5to3Exo.
323
KlenowFragment
aa928
5to3Pol&3to5Exo
HansKlenowshowedthatlimitedproteolysiswitheithersubtilisinortrypsinwillcleave
PolIintotwobiologicallyactivefragments.
FactsaboutDNASynthesisErrorRates:
DNApolymeraseinsertsoneincorrectnucleotideforevery105nucleotidesadded.
Proofreadingexonucleasesdecreasetheappearanceofanincorrectpairedbasetoone
inevery107nucleotidesadded.
Actualerrorrateobservedinatypicalcellisonemistakeinevery1010nucleotides
added.
ErrorrateforRNAPolymeraseis1/105nucleotides.
Mecanismodecorreccin
delecturas(Proofreading)
Ejm.FragmentodeKlenow
deE.coli
REPLICACIONEN
EUCARIOTAS
Hastaaqutodoloexplicadoespara
procariotas(bacterias).
Cmosucedeentonceslareplicacinen
organismosmascomplejoscomolos
eucariotas?
Enqudiferenciaunprocariotadeun
eucariota?
Entrminosdereplicacinenquese
diferencian?
Tienendiferentesorgenesdereplicacin.
Porqu?
Enelhumanocadaorigenestadistanciadaentre30000300000pb
SongenomasLinealesocirculares?
Seagrupanenverdaderoscromosomas?
entoncescualessonlaspartes?
OriC=ORC(Complejodereconocimientodelorigen)
Cualeselproblemaconlostelmeros
Mitosis
Apoptosis
loelimina
Meiosis
Terminandoeltrabajode
replicacinenloseucariotas