Técnica para El Recuento de Leucocitos

CUENTA DE
LEUCOCITOS
Para evaluar a los leucocitos primero se realiza un conteo
mediante métodos electrónicos o con la pipeta de Thoma.
Pipeta de
Thoma 1 11
0.5
Las pipetas se llenan de sangre hasta la marca de 0.5 y el
resto, con la solución de Turk (a base de ácido acético glacial
y violeta de genciana), hasta la marca de 11 para lograr una
dilución de 1:20; se mezcla perfectamente evitando que se
salga líquido.
Después de unos minutos, se eliminan tres gotas, y las
siguientes son empleadas para llenar el hemocitómetro.
Éste debe tener un cubreobjetos especial y limpio que se
coloca sobre las barras humedecidas con agua.
Barra de soporte
Muestra
Plataforma de conteo
Cubreobjetos 0.1 mm entre cubre objetos y plataform

Hay que dejar unos minutos en reposo para que
sedimenten las células y efectuar la cuenta de
manera cómoda (en caso de tener otras
actividades, dejar el hemocitómetro sobre un
papel húmedo y bajo una caja de Petri para
evitar que se deshidrate la muestra.
La plataforma de conteo tiene nueve grandes cuadros con
diferente número de divisiones.
Para la cuenta de leucocitos se toman los cuatro extremos,
que tienen 16 cuadros pequeños.
El conteo se realiza de izquierda a derecha, se debe tener
cuidado de no contar dos veces la misma célula, pues al
final se reflejará con una diferencia enorme de lo que tiene
en realidad el animal.
1mm2
El cuadro superior izquierdo a 400 aumentos.
Se requiere contar las células que estén sobre la
línea izquierda y la línea superior para incluirlas en
ese cuadro.
Por el contrario, las células que se encuentren sobre la línea
derecha o la inferior del cuadro no se incluyen en la
cuenta para evitar contarlas dos veces.
Cuando se tiene la cuenta final (en la cual no debe haber
una diferencia superior de 25% entre cada cuadro de las
esquinas), se emplea la siguiente fórmula para la obtención
de leucocitos: X109 /L:
Número de células contadas X dilución X distancia entre plataforma y
cubreobjetos
Número de cuadros de 1 mm3 X1000
Por ejemplo, si la cuenta es de 60, entonces:
60X20X10
4 x1000
12000
4000
= 3.0 X 109/L
También podemos contar el número de células en los 4
cuadrados grandes y multiplicar por 50 para obtener el
número total de leucocitos por mm3.
Por ejemplo si el número de células contadas en los 4
cuadrados grandes es de 234 lo multiplicamos por 50 esto
es igual a 11.700/mm3.
TÉCNICA PARA EL
RECUENTO DE LEUCOCITOS
Posteriormente se prepara la confección de extendidos
(frotis) sanguíneos.
1) Zona muy densa, no sirve para evaluar los leucocitos,
eritrocitos o plaquetas, pues se encuentran demasiado
encimados o contraídos y no permite su diferenciación.
2) Zona ideal para la evaluación del extendido, las células se

encuentran bien extendidas sin deformaciones, como en la
zona 3.
3) Zona muy delgada, se emplea para la búsqueda de

microorganismos en eritrocitos que hayan perdido su
hemoglobina, se verifica que no hayan agregados de
plaquetas, microfilarias o grandes células.

Antes de iniciar el diferencial, en un frotis teñido en Wright,

se debe hacer un reconocimiento panorámico (40 X, esto es,
el objetivo de 4X y ocular de 10X) del frotis (para detectar
microfilarias o agregados de plaquetas).
También para ver la distribución y seleccionar el campo
para iniciar el diferencial de 100 leucocitos (neutrófilos,
linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos), observar a
100 X y aceite de inmersión.
Empezar desde la parte intermedia hacia la parte más
gruesa.
La dirección en zigzag que debe llevar la evaluación
está relacionada con la repartición de las células en el
extendido, ya que ésta no es equilibrada.
Los eritrocitos pequeños y los linfocitos se van a ubicar en
el centro del extendido, mientras que sobre los bordes se
van a encontrar grandes eritrocitos, granulocitos y algunos
linfocitos, y sobre el borde final del frotis se van a
encontrar los elementos de mayor tamaño (monocitos,
agregados de plaquetas, microfilarias, etc.).

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Cubreobjetos 0.1 mm entre cubre objetos y plataform

2) Zona ideal para la evaluación del extendido, las células se

3) Zona muy delgada, se emplea para la búsqueda de

Antes de iniciar el diferencial, en un frotis teñido en Wright,

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