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    Inmunoelectrotransferencia (Iet) Western-Blotting: Equipo 4

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    Gibran Meza Castrejon
    Este documento describe el proceso de inmunoelectrotransferencia (IET), también conocido como Western blotting. La IET combina la electroforesis en geles de poliacrilamida con la reacción antígeno-anticuerpo en fase sólida para analizar antígenos proteicos. Se transfieren proteínas de E. coli desde un gel a una membrana de nitrocelulosa mediante electrotransferencia para su detección con anticuerpos específicos.

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    Inmunoelectrotransferencia (Iet) Western-Blotting: Equipo 4

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    Gibran Meza Castrejon
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    Este documento describe el proceso de inmunoelectrotransferencia (IET), también conocido como Western blotting. La IET combina la electroforesis en geles de poliacrilamida con la reacción antígeno-anticuerpo en fase sólida para analizar antígenos proteicos. Se transfieren proteínas de E. coli desde un gel a una membrana de nitrocelulosa mediante electrotransferencia para su detección con anticuerpos específicos.

    Descripción original:

    WESTERN

    Título original

    Iet

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    Este documento describe el proceso de inmunoelectrotransferencia (IET), también conocido como Western blotting. La IET combina la electroforesis en geles de poliacrilamida con la reacción antígeno-anticuerpo en fase sólida para analizar antígenos proteicos. Se transfieren proteínas de E. coli desde un gel a una membrana de nitrocelulosa mediante electrotransferencia para su detección con anticuerpos específicos.

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    Inmunoelectrotransferencia (Iet) Western-Blotting: Equipo 4

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    Este documento describe el proceso de inmunoelectrotransferencia (IET), también conocido como Western blotting. La IET combina la electroforesis en geles de poliacrilamida con la reacción antígeno-anticuerpo en fase sólida para analizar antígenos proteicos. Se transfieren proteínas de E. coli desde un gel a una membrana de nitrocelulosa mediante electrotransferencia para su detección con anticuerpos específicos.

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    INMUNOELECTROTRANSFERENCIA (IET)

    Western-Blotting
    EQUIPO 4.
    IET
    También conocida como inmunoblot, es un método analítico útil para análisis
    antigénico, y decir cuál de ellos puede ser útil para el diagnóstico.

    Combina el poder resolutivo de la electroforesis en geles de poliacrilamida, en


    presencia de SDS, con la reacción Ag-Ac en fase sólida.
    Técnica
    OBTENCIÓN DE
    rHSP60
    ● Se obtiene pasando el EPT de E. coli en
    una columna de afinidad niquelada.
    ● Obtención de antisueros: anti-HSP60 y
    anti-EPT
    ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA AL 12%
    Acrilamida: Estable en amplio rango de pH, fuerza iónica, insoluble en agua.

    SDS: Cambio a carga - de proteínas.


    ELECTROTRANSFERENCIA
    Prot. E. coli son ransferidas a NC con regulador de transferencias.

    Tras la transferencia, se suele proceder a la tinción del gel con rojo de Ponceau (un
    colorante de proteínas).
    DIAGRAMA DE FLUJO
    RESULTADOS

    1. Suero anti-HSP60
    2. Suero anti-proteínas totales
    3. Suero negativo (Ratón no inmunizado)
    4. Regulador de bloqueo

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