Blgo. Miguel Cobos Zelada micoboze@gmail.

com

GENERALIDADES
Virus que tiene su genoma ubicado en el ARN y no el ADN. Los retrovirus usan transcriptasas inversas para convertir el ARN en ADN. Contienen ARN de cadena nica como material gentico. La familia Retroviridae agrupa agentes virales que poseen una enzima la transcriptasa reversa Incluye varios gneros de virus, con las siguientes caracteristicas: doble cpside, virus envuelto y genoma con dos copias de RNA de cadena positiva. . Los retrovirus pueden causar muchas enfermedades, incluyendo algunos cnceres y el SIDA (VIH).

CLASIFICACION
FAMILIA GNERO Lentivirus Oncovirus VIRUS VIH-1, VIH-2 HTLV-1, HTLV-2 No se han reportado cepas patgenas para el hombre

Retroviridae Spumavirus

Virus de la inmunodeficiencia humana (VIH),

familia Retroviridae , subfamilia de los Lentivirius

VIH 1 denominado inicialmente LAV (virus asociado a linfadenopata), causa ms frecuente de infeccin por VIH en el mundo. VIH 2.. Tres aos ms tarde se aisl el VIH2 que se localiza fundamentalmente en la zona de frica occidental. El VIH 2 es menos patognico que el VIH1.

VIH- ESTRUCTURA
NUCLEOIDE envuelto en una matriz proteica que a su vez est encerrada por una envuelta lipdica. El nucleoide : material gentico del virus y la enzima transcriptasa inversa, necesaria para la replicacin vrica. Las glicoprotenas transmembrana gp 41 y de la envuelta gp 120, enlazadas con la envuelta vrica, permiten al VIH acoplarse y fundirse con la clula diana.

Qu Es el SIDA?
S -- Sndrome -- Porque cuando alguien se enferma de SIDA puede experimentar un amplio espectro de diferentes enfermedades e infecciones oportunistas.
I -- de Inmuno -- Porque afecta al sistema inmunolgico del cuerpo, la parte del cuerpo que usualmente trabaja para combatir invasores tales como grmenes y virus.

D -- Deficiencia -- Porque hace que el sistema inmunolgico sea

deficiente, es decir, que no funcione correctamente.

A -- Adquirida -- Porque es una afeccin que uno puede

contraer. La enfermedad no se transmite genticamente. .

Qu Es el VIH?
V -- Virus -- Porque este organismo, como todos los dems virus, es incapaz de reproducirse por s solo. El VIH se reproduce solamente al invadir clulas humanas. I -- de Inmunodeficiencia -- Porque el efecto de este virus es crear una deficiencia, un impedimento al funcionamiento apropiado del sistema inmunolgico del cuerpo. H -- Humana -- Porque el virus solo puede ser contraido por seres humanos.

Condiciones Para Que Pueda Transmitirse El VIH

.

El VIH Debe Estar Presente;

VIH Debe Entrar En Corriente Sanguinea.

Tiene Que Haber Suficiente Virus;

Fluidos Infecciosos
Se trasmite por
sangre * semen * secreciones vaginales * leche materna * fluido pre-eyaculatorio (pre-semen)
*

No se trasmite por

* heces * saliva * sudor * lgrimas * orina

AGUJAS CONTAMINADAS

VIA SEXUAL

Rutas Sexuales De Transmisin

Coito sexual anal o vaginal: Sexo oral (contacto boca-pene, bocavagina, boca-ano) transmisin heterosexual

Transmisin No Sexual

Compartir jeringas: Transfusiones de sangre: Tratamientos contra la hemofilia Otros productos sanguneos: (sangre entera, las plaquetas ) De madre a hijo: Inseminacin artificial:

Cmo No Se Transmite El VIH?

Insectos Compartiendo platos, utensilios o comida Donacin de sangre

Albercas, piscinas, etc. Animales domsticos Contacto con saliva, lgrimas, transpiracin, heces u orina

POBLACION EN RIESGO

SIDA en el mundo

Segn datos facilitados en el registro epidemiolgico semanal de la OMS (5 de julio de 1996)

EPIDEMIOLOGIA DEL SIDA EN EL PERU CASOS DE SIDA SEGN AO DE DIAGNSTICO PERU, 1983-2002

(Fuente: Organizacin Panamericana de la Salud OPS, Sesin Extraordinaria, Washington Junio 2001).

SIDA: RAZN HOMBRE / MUJER PERU, 1983-2002

casos de SIDA en el ao 2004. Fuente: Oficina General de Epidemiologa

Va de Transmisin

SINTOMATOLOGA CLNICA
Los sntomas de la infeccin con VIH y SIDA varan dependiendo de la fase de la infeccin.

1.- PRIMOINFECCION
Enfermedad parecida a gripa 1mes o 2 despus de la exposicin al virus VIH. Sndrome primario de VIH -Confunden con los snt. de otra infeccin viral. Aumento de tamao de los ndulos linfticos.

Aumento de tamao de los ndulos linfticos. Malestar general.

2.-PERODO "ASINTOMTICO" Es altamente variable de una persona a otra. *Edad , inculo, coinfeccin VIH est :activamente infectando matando a las clulas del sistema inmunolgico (ganglios linfticos). Rcto CD 4+: 750-1000/ ul Los sntomas persistentes o severos -podran no aparecer durante 10 aos o ms, tras la primera entrada del virus VIH en el cuerpo de los adultos, o en el plazo de dos aos en los nios nacidos con una infeccin por el virus VIH.

3.-FASE SINTOMATICO (+- 2 aos) - 10 a 11 aos despus de la inf inicial.. - Linfocitos CD4 de 200/ ul o menor ( normal 700 a 1,000). Si el recuento de cel. CD4 cae a menos de 50, hay un riesgo de sufrir infecciones oportunistas. Requisitos de la definicin oficial del SIDA (CDC), presencia de infeccin por VIH :prueba positiva para VIH y uno de los siguientes: *Candidiasis esofgica *Neumona por Pneumocystis carinii. *Leihmaniasis viseral *Toxoplasmosis encefalica *Criptococosis sistmica, etc..

Los Signos y Sntomas :

*Sudoracin nocturna . *Tos seca y dificultad para respirar *Diarrea crnica *Visin alterada *Prdida de peso

Rinitis por CMV

VIRUS VIH
Retrovirus, Subfam : Lentivirus El virus VIH mide 100 amstrong .

Formado por dos capas lipdicas.

Morfologic.madura esferas icosadricas con 72 proyecciones de 10 nm de longitud formadas por las glicoproteinas gp 120 y gp 41. La cubierta glicoproteica tiene un papel importante en la entrada del HIV en su clula hospedadora.

BIOLOGA DEL VIH Y CICLO DE REPLICACIN

El virin es una partcula esfrica constituida por 3 capas concntricas: 1. Interna constituida por una doble hebra de RNA.. 9.800 nucletidos , nucleoprotenas y enzima.

2. Intermedia formada por una nucleocpside icosadrica

3. Envoltura externa, derivada de la clula husped, donde se insertan las glicoprotenas y otras protenas celulares. gp120 y gp 41

PROPIEDADES BIOLGICAS Y CINTICA DE LA REPLICACIN VIRAL

Las tres propiedades VIH-1 entre s son: 1. El tropismo celular (propagacin en lneas celulares inmortalizadas de extirpe linfocitaria o monocitaria). 2. El fenotipo sincitial (formacin de sincitios o no tras la inoculacin en la lnea celular MT2). 3. La cintica de replicacin (rpida/alta, baja/lenta). Se ha calculado, que diariamente se producen de 109-1010 partculas virales lo que conlleva a una destruccin diaria de 107108 linfocitos T CD4+. Vida media de un virin es de 0.3 das y la de un linfocito activo de 1.2 das. Esta cintica de replicacin es muy diferente a la que presentan los lentivirus clsicos.

GENES
A.- GENES ESTRUCTURALES
Gen gag (antgeno especfico de grupo) codifica las protenas del core del virin.. p7, p9, p17, p24 Regin pol que codifica la retrotranscriptasa (o polimerasa RNA-dependiente de ADN), una proteasa y una endonucleasa (o integrasa). p11, p13, p34, p51 Genes del env que codifican las dos protenas principales de la membrana, gp120 y gp41. gp 41, gp120.VIH I gp36 , g 104 .VIH II

B.- GENES REGULADORES Tat Regulador positivo de Retroalimentacin RevInhibe transc. De genes reguladores Vif Incrementa la infectividad viral NefInhibe replic. Viral. Vpr FX desconocida. VpuRegula en forma negativa la replic. Viral. Los mecanismos patognicos son complejos, cambiantes y variables segn el estado de la infeccin, en el que la interaccin virus-clula depende de la expresin de diferentes genes reguladores

EL CICLO REPLICATIVO DEL VIH-1

Se divide en dos etapas bien diferenciadas: Fase temprana Adsorcin, Fusin, Internalizacin del virin, Transcripcin inversa, y Culmina con la integracin del DNA proviral en el DNA celular. Fase tarda Fases de latencia, Expresin temprana de los genes reguladores, Expresin tarda de genes estructurales y enzimticos, Morfognesis Finalmente supone la generacin de una nueva progenie infecciosa.

PRUEBAS DIAGNOSTICAS DEL VIH

DETECCIN DE Ac.
Tamizaje: ELISA Confirmacin: WB, IFI, RIPA, LIA

DETECCIN DE Ag. Cultivo en linfocitos ELISA DETECCIN DE RNA PCR

RECUENTO CD4

SEGUIMIENTO TERAPUTICO

PRUEBAS DE TAMIZAJE
OBJETIVO

Detectar la presencia de anticuerpos anti - VIH

Objetivo de la prueba SELECCIN DE LA TCNICA DEPENDE Sensibilidad y Especificidad Prevalencia de la infeccin VIH en poblacin estudiada.

PRUEBAS DE TAMIZAJE DEL VIH

(Screenig / Cribado)

Elisa

Pruebas Dot-blot
Pruebas de Aglutinacin Pruebas Inmunocromatograficas

PRUEBA DE ELISA
ELISA Indirecto

ELISA- VIH
I GENERACIN

Lisado viral Antgeno recombinante

Ppticos sintticos

II GENERACIN

III GENERACIN

IV GENERACIN

Lisado Viral, Ag.Recomb., P.Sinttico.

PRUEBAS DOT BLOT

P R U E B A R P I D A

PRUEBA DE AGLUTINACIN
PRUEBA RPIDA

Principio: Formacin de complejos

inmunes en la superficie de partculas (soporte slido)

PRUEBA RPIDA

INMUNOCROMATOGRAFA
Flujo lateral en el dispositivo: CORE HIV
Muestra: Suero (Anticuerpos a IgG)

Conjugado: Oro Coloidal conjugado a antgeno de VIH Lnea de control: Anticuerpos Anti-IgG/Oro coloidal

Control
Antgeno de VIH

Lnea de prueba: Antgeno de VIH

* La muestra fluye a lo largo de la membrana y los anticuerpos anti-VIH (si estn presentes) se unen al antgeno de VIH conjugado al oro coloidal formando una banda roja visible. * Los anticuerpos anti-IgG/Oro Coloidal en la lnea control se une a cualquier partcula de Oro coloidal no unido formando una banda roja visible.

PROCEDIMIENTO CORE-VIH
PASOS A SEGUIR:

1. Codificacin del test 2. Aadir 2 gotas de suero, plasma o sangre total en el pocillo marcado como A 3. Aadir 5 gotas de buffer en el pocillo B Positivo a VIH-1 4. Lectura e interpretacin a los 15 minutos
INTERPRETACION CORE - VIH
C T A B REACTIVO

Control reactivo

NO REACTIVO

PRUEBAS CONFIRMATORIAS

Western Blot

Inmunofluorescencia

Inmunoensayo en Linea

INMUNOFLUORESCENCIA

LIA
Identificacin y localizacin de los antgenos y controles recubiertos en la tira.
CN ( estreptovidina)

Controles internos

CP ( Lnea intensa = 3+)

CP (Lnea moderada = 1+ )
CP ( Lnea dbil = +/ - )

Antgenos

sgp 120 gp 41 p31 p24 p 17 sgp 105 gp 36

CONTROL POSITIVO

PRUEBAS CONFIRMATORIAS
WESTERN BLOT
Tcnica utilizada para la deteccin de anticuerpos

Prueba especfica y determina que protenas del patgeno son reconocida por el sistema inmune.

PRINCIPIO DE WESTERN BLOT

Tiras de Nitrocelulosa con protenas virales separadas por Electroforesis

Deteccin de Ac.
Muy especifica, poco sensible

ALGORITMO - VIH
Muestra: Suero / Plasma

ELISA
Reactivo Indeterminado
No reactivo

2 ELISA
Reactivo Indeterminado No reactivo

Pbas. Confirmatorias
Positivo

IFI / WB

Negativo

Indeterminado
Control en 3 meses / PCR

PREVENCIN
Prevencin de la transmisin sexual:

Usar el preservativo (nuevo y en buen estado, hay que verificar la fecha de vencimiento).
La presencia de otras enfermedades de transmisin (ETS) y de lastimaduras en los genitales aumentan las posibilidades de transmisin del virus, se deben tratar.

Prevencin de la transmisin por sangre:

No compartir elementos de inyeccin (drogas). Tatuajes, tener agujas propias Operados, sangre.. o transplante de rgano, tenemos derecho a exigir que la sangre, sus derivados o los rganos estn efectivamente controlados. Los trabajadores de la salud (normas de bioseguridad correspondientes).

Prevencin de la transmisin madre-hijo:

Si una pareja espera un hijo, es importante que los dos se hagan el test. Como la leche materna puede transmitir el virus, se recomienda que las madres que tienen VIH no den el pecho a sus bebs.

HTLV I/II
Familia: retroviridae Sub-familia: oncovirinae Tipo C Cpside icosaedrica Genoma con 2 segmentos lineales de ss RNA ++ Virin esferico 80 a 110nm de diametro. Realiza el ciclo lisognico en la clula afectada. Infecta los a linfocitos Th proliferando. Periodo de incubacin de 20 a 30 aos pero si la carga viral es alta se reduce a meses.

Estructura y composicin
Componente esencial en la replicacin viral: La transcriptasa reversa.

Genes

gag

env

pol

LTRs

Gen tax Rex

asociado a la virulencia:

Inhibidor de cinasas Efecto pleotrpico Ocasiona periodo de latencia largo Perdida del gen, produce muerte celular Infeccin celular contacto celular ICAM 1 ACAM-3 VCAM

Epidemiologa HTLV - I
20 millones de infectados en el mundo y desarrollan alguna enfermedad relacionada entre 3 y 5% de los infectados. Es endmico: Japn Caribe frica Amrica del Sur e Islas Seychelles Ms prevalente en : mujeres en edad .

Seroprevalencia HTLV - I
Chile Los Angeles 0,3% 0,1%

Washington
Japn Jamaica

0,06%
0 a 20% 6%

Si lo comparamos con otras enfermedades transmisibles esta prevalencia, lo convierte en una patologa bastante importante:

Chagas 0,6%;

VIH 0,075%

hepatitis B 0,05%

hepatitis C 0,25%

En algunas reas, donde la infeccin por el HTLV-I es endmica, la tasa de prevalencia es tan alta como un 15% de la poblacin general.

 Un nmero menor informa una historia de uso de droga inyectable o transfusin de sangre. Grupos de negros del sudeste de EUA y en emigrantes de reas HTLV-I endmicas, de algunas ciudades de Brasil con diagnsticos de bancos de sangre. HTLV-II prevalece entre los usuarios de droga inyectables, en EUA y en Europa ms del 80% de la seropositividad de HTLV-I/II en usuarios de drogas en EUA, es debida a la infeccin por el HTLV-II

 HTLV-II tambin parece: endmico en poblaciones indgenas americanas. Donadores de sangre infectados por HTLV-II informan, con frecuencia, una historia de uso de drogas inyectables o de contacto sexual con un usuario de droga inyectable

Cuadro clnico HTLV I/II

Se desarrolla en casi 5% de afectados Latencia > de 30 aos Asociado a inmunodeficiencia Surgimiento de enfermedades oportunistas: Pneumocystis jiroveci. Cryptococcus. Strongyloides. Dos dolencias fueron definitivamente asociadas con HTLV-I: leucemia/linfoma de clulas T del adulto (ATL) y un cuadro neurolgico degenerativo crnico, mielopata/ paraparesa espstica tropical asociada al HTLV-I (HAM/TSP). ATL es una malignidad de CD4+ T-linfocitos infectados por HTLV-I.

Paraparesia espstica tropical

ENFERMEDAD CRONICA DESMIELINIZANTE Asociado al GEN TAX produciendo Falta de movimiento rigidez 4 AL 10 % de Infectados con HTLV I afecta M.E y SNC

 Leucemia /linfoma de clulas T del adulto: Hay cuatro formas clnicas bastante definidas Leucemia subaguda de curso agresivo con presencia de clulas pleomrficas de estirpe T madura, con hipercalcemia, organomegalia y lesiones cutneas. Linfoma de curso agresivo pero sin evidencia de cuadro leucmico. Crnica, caracterizada por lesiones cutneas y linfocitosis T. Suele mantenerse estable durante meses o aos. Smoldering o latente, asintomtica o con algunas manifestaciones cutneas y/o pulmonares.

Cuadro clnico: HTLV I/II

Patologas linfoproliferativas: ( leucemia de cedulas pilosas T ) y enfermedades neurodegenerativas.

Transmisin
Va vertical Va horizontal Va parenteral

Todas la forma de transmisin de madre a nio

Trasmisin sexual

Por compartir agujas

hombre Leche 38 %

mujer Transmisin por sangre y hemoderivados

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
DIAGNOSTICO HISTOLOGICO: Infiltrado linfocitos anormales.
Marcadores tumorales

Celulas malignas

Linfocitos T

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
BIOQUIMICO Y HEMATOLOGICO: Presencia de leucocitos en sangre perifrica. Anemia y trombocitopenia moderada. Aumento de fosfatasa alcalina y LDH. Hipercalcemia.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
DIAGNOSTICO VIROLOGICO:
Sangre (LT transformados) MUESTRA

Tej.Ganglio linfatico

Se cultivan para conseguir el aislamiento del virus. IDX: Microscopia, transcriptasa inversa, deteccin de protenas vricas, deteccin de Acidos nucleicos.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
DIAGNOSTICO SEROLOGICO:
Determinacin de Ac. especficos en el suero del paciente. El HTLV-I es difcil de distinguir serologicamente del HTLV-II (PCR) Las tcnicas usadas son: IF, ELISA, Western blotting, RIPA y PCR. El diagnostico inicial de preferencia ELISAS de III-IVg. La S y E 97%. En la actualidad Se usan ELISAS (P.R +gp21) S y E

PRUEBAS USADAS

PRUEBAS DE RASTREO

PRUEBAS CONFIRMATORIAS

ELISA

Aglutinacion de particulas de latex o de gelatina

IFI

WB

LIA

RIPA

PCR

HTLV I/II
Protena p21e:
Pptido sinttico recombinante Presente en ELISAS y WB Su presencia aumenta (S) del test. Presente en casi 100% de infectados.
p19 HTLV I p24 HTLV II

Diferenciacin entre HTLV I/II

ELISA y WB no confiable como met. Diferencial Solo a travs de met. Moleculares puede haber diferenciacin diagnostica

INMUNOFLUORESCENCIA
IFI ,basada en la demostracin de anticuerpos frente a clulas infectadas. Como Ag. se usan linfocitos humanos infectados y fijados sobre portaobjetos . Se agrega la muestra. Luego del lavado, se incorpora el conjugado.

WESTERNBLOTTING
Es una tcnica usada para confirmacin.
Se basa en el principio del ELISA indirecto Tiras de nitrocelulosa con protenas virales separadas por electroforesis.

WESTERNBLOTTING
Se incuban las muestras-tiras, si hay Ac. se unirn a las protenas virales de la tira. Lavado Agrega anti IgG humana marcada con fosfatasa alcalina. Lavado Agrega la solucin de revelado La aparicin de bandas coloreadas permite reconocer la presencia de Ac.

WESTERNBLOTTING

WESTERNBLOTTING
Para interpretar los resultados seguimos los criterios recomendados por la OMS Muestra negativa: no se observa protena codificadas por el gen de Env. ni contra el gen Gag. Muestra positiva: cuando es reactiva en al menos una de las protenas codificadas por el gen Gag o al menos una protena codificad por el gen Env. Otros perfiles son Indeterminados

WESTERNBLOTTING
Las proteinas (p) codificadas por: El gen Gap, segn sus pesos moleculares en kD
p53,p26,p24,p19

El gen Env es una glucoproteina de 46KD, gp46

WESTERNBLOTTING
Duracin de la prueba 80min. El resultado se considera + cuando ha reaccionado con dos glucoproteinas. La lectura se hace por colorimetra. Si hay dudas, se recomienda hacer seguimiento al paciente.

TRATAMIENTO
No es curativo, se basa en la terapia antitumoral
INF+ zidovudina, trasplante alogenico, corticoides ,Inmunomoduladores (danazol)

La hipercalcemia se trata con glucocorticoides. A pesar de todo el tratamiento suele ser infructuoso, con un promedio de vida de 26 meses.