Cultivez votre spiruline

Manuel de culture artisanale pour la production de spiruline Par Jean-Paul JOURDAN (dernire mise jour 1/3/2006)

Table PRESENTATION ...................................................................................................................... 5 Liminaire .................................................................................................................................... 5 1) QU'EST- CE QUE LA SPIRULINE ?................................................................................... 6 2) INFLUENCE DU CLIMAT .................................................................................................. 7 2.1) Temprature ................................................................................................................. 7 2.2) Pluviomtrie .................................................................................................................. 8 2.3) Climat idal ................................................................................................................... 8 2.4) Saisonnalit .................................................................................................................. 8 3) BASSINS ............................................................................................................................... 9 3.1) Construction des bassins de culture......................................................................... 9 3.1.2) En bches plastique........................................................................................... 10 3.1.3) En "dur" (bton, parpaings, briques) ............................................................... 11 3.1.4) En argile (si on n'a vraiment pas d'autre possibilit) .................................... 12 3.2) Couverture du bassin de culture ............................................................................. 12 3.3) Nombre et surface de bassins ................................................................................. 14 3.4) Agitation du bassin .................................................................................................... 14 3.5) Containers, bassines, gaines................................................................................... 15 3.6) Rparation des films plastique ................................................................................ 16 4) MILIEU DE CULTURE...................................................................................................... 16 4.1) Prparation du milieu de culture ............................................................................. 16 4.2) Milieu "Zarrouk" .......................................................................................................... 21 4.3) Et si l'on n'a aucun produit chimique ? .................................................................. 22 4.3.1 Prparation de lacide phosphorique partir des os ..................................... 23 4.3.2 Prparation de sulfate de magnsium partir de cendre de bois ............... 25 4.4) Renouvellement du milieu de culture ..................................................................... 26 4.5) Epuration et recyclage .............................................................................................. 27 4.6) Utilisation de l'eau de mer ........................................................................................ 28 4.7) pH optimum ................................................................................................................ 28 4.8) Stockage de milieu de culture neuf et d'eau traite ............................................. 29 5) ENSEMENCEMENT .......................................................................................................... 29 5.1) Quelle souche de spiruline utiliser ? ....................................................................... 29 5.2) Ensemencement partir d'une quantit importante de semence ..................... 30 5.3) A partir d'une petite quantit de semence ............................................................. 31 5.4) Taux de croissance initial ......................................................................................... 32 5.5) Rserve de semence ................................................................................................ 33 5.6) Slection et culture monoclonale ............................................................................ 33 6) NOURRITURE MINERALE DE LA SPIRULINE ............................................................ 34 7) CONDUITE ET ENTRETIEN DE LA CULTURE ............................................................ 39 7.1) Rcoltes ...................................................................................................................... 39 7.2) Agitation ...................................................................................................................... 39 7.3) Evolution du pH .......................................................................................................... 40

7.4) Ombrage ..................................................................................................................... 40 7.5) Niveau d'eau ............................................................................................................... 40 7.6) Fer ................................................................................................................................ 41 7.7) Oligolments ............................................................................................................ 42 7.8) Comment augmenter la productivit par apport de carbone .............................. 43 7.9) Exopolysaccharide (EPS)......................................................................................... 46 7.10) Anomalies ................................................................................................................. 48 7.11) Contamination par petits animaux ........................................................................ 50 7.12) Contaminations par des droites ou des algues trangres .............................. 51 7.12.1 Droites ................................................................................................................ 51 7.12.2 Etrangres ......................................................................................................... 53 7.13) Contamination par micro-organismes .................................................................. 55 7.14) Empoisonnement chimique ................................................................................... 56 7.15) Manque d'oxygne (hypoxie) ................................................................................ 57 7.16) Maladies .................................................................................................................... 57 7.17) Mtaux lourds........................................................................................................... 58 7.18) Nettoyage des bassins ........................................................................................... 58 7.19) Epuration du milieu de culture ............................................................................... 58 8. RECOLTE............................................................................................................................ 59 8.1) Filtration....................................................................................................................... 59 8.2) Lavage et Essorage .................................................................................................. 63 8.3) Lavage des outils (voir aussi 11) ......................................................................... 66 9) SECHAGE ........................................................................................................................... 66 9.1) Extrusion ..................................................................................................................... 66 9.2) Schage ...................................................................................................................... 67 9.3) Broyage et test de schage ..................................................................................... 70 9.4) Conditionnement ........................................................................................................ 70 9.5) Contrle de qualit bactriologique ........................................................................ 71 10) CONSOMMATION .......................................................................................................... 71 10.1) Alimentation humaine ............................................................................................. 71 10.1.1) Biomasse fraiche .............................................................................................. 72 10.1.2) Spiruline cuite ................................................................................................... 73 10.1.3) Conserves de spiruline fraiche....................................................................... 73 10.2) Alimentation animale............................................................................................... 73 11) HYGIENE.......................................................................................................................... 73 12) PRIX DE REVIENT .......................................................................................................... 74 13) RECOMMANDATIONS FINALES ................................................................................. 75 ANNEXES ............................................................................................................................... 75 A1) Influence de la temprature, de la lumire,............................................................ 75 A2) Mesure de la concentration en spirulines ............................................................... 78 A3) Mesure de la salinit du milieu de culture avec un densimtre .......................... 80 A4) Mesure du pH d'un milieu de culture....................................................................... 81 A5) Mesure de l'alcalinit (alcalimtrie) ......................................................................... 83 A6) Tests de qualit faciles raliser ............................................................................ 84 A6.1) Test sur cultures .................................................................................................. 84 A6.1.1) Test de filtrabilit .............................................................................................. 84 A6.1.2) Mesure de la turbidit du milieu de culture.................................................. 84 A6.1.3) Mesure de l'aptitude au lavage de la biomasse.......................................... 84 A6.2) Tests sur spiruline ............................................................................................... 84 A6.2.1) Test de pH ........................................................................................................ 84

A6.2.2) Estimation des pigments ............................................................................... 85 A6.2.3) Test de couleur ................................................................................................ 85 A6.2.4) Dosage colorimtrique simplifi de la phycocyanine ................................. 85 A6.2.5) Dosage colorimtrique simplifi des carotnodes..................................... 86 A6.2.6) Dosage de l'humidit dans la spiruline sche (% d'eau) ........................... 86 A7-1) Absorption du gaz carbonique atmosphrique par le milieu de culture ......... 86 A7-2) Analyse du CO2 dans l'air ................................................................................. 87 A7-3) pH dun milieu de culture en quilibre avec latmosphre ............................ 88 A8) Interaction Photosynthse/Absorption de CO2 ..................................................... 88 A9) Productivit en fonction de l'ombrage ..................................................................... 89 A10) Consommation d'eau en fonction de l'ombrage .................................................. 89 A11) Correspondance entre pH et rapport molaire C = CO2/base ........................... 89 A12) Mlanges de carbonate et bicarbonate (de sodium) .......................................... 90 A13) Neutralisation de l'eau de cendre par le bicarbonate de soude ....................... 90 A14) Composition de divers produits ............................................................................. 91 A14.1 Sel de mer brut (non raffin) ............................................................................ 91 A14.2 Cendre de bois ................................................................................................... 91 A14.3 Eaux ..................................................................................................................... 93 A14.4 Urine humaine ................................................................................................... 93 A14.5 Nitrate du Chili (Salitre potsico) ..................................................................... 93 A14.6 Sang : Azote: 350 mg/l; phosphore: 30 70 mg/l; fer: 9 g/l...................... 94 A15) Matriel de laboratoire utile (cf annexe - A29) .................................................... 94 A16 Produits chimiques ................................................................................................... 94 A16.1 Principaux IONS utiles pour la spiruline ......................................................... 97 A16.2 Principaux cristaux peu solubles pouvant prcipiter dans les boues de spiruline ........................................................................................................................... 97 A16.3 Masse atomiques des lments intressant la spiruline ............................ 98 A16.4 Masses molculaires des principaux oxydes et ions intressant la spiruline ........................................................................................................................... 98 A17) Normes de la spiruline en France ......................................................................... 99 A18) Limites de concentrations dans le milieu de culture ......................................... 100 A.19) Composition lmentaire de la spiruline : ......................................................... 103 A20) Composition approximative de la spiruline en lments nutritionnels ........... 104 A21) Elments de prix de revient .................................................................................. 106 A22) Planche pour comparer les spirulines a d'autres algues : ............................... 117 A23) Spiruline vue au microscope ................................................................................ 117 A24) Pour ceux qui ont de l'lectricit: ........................................................................ 118 A24.1) Agitation par roue a aubes ............................................................................ 118 A24.2) Filtration sous vide......................................................................................... 119 A24.3) Filtration sous pression .................................................................................. 119 A24.4) Filtration continue ........................................................................................... 119 A24.5) Essorage par le vide (pour remplacer le pressage) .................................. 120 A24.6) Essorage par essoreuse (pour remplacer le pressage) ........................... 120 A25.7) Essorage par gaz comprime (pour remplacer le pressage) .................... 120 A25) Hivernage ............................................................................................................ 120 A26) Formules d'oligo-lments.................................................................................... 121 A26-1) Formule de Jacques Falquet, 1997 (Antenna Technologie, Genve) : . 121 A26-2) Formule de J.P. Jourdan (sans slnium, avec supplment de zinc) ... 122 A27) Plans de schoirs ................................................................................................... 122 A27.1) Schoir solaire modle "Bangui" .................................................................. 122

A27.2) Schoir solaire gaz...................................................................................... 124 A27.3) Schoir solaire chauffage indirect............................................................. 125 A28) Projet semi-artisanal de 5 kg/jour ........................................................................ 125 A28.1) Bassins ............................................................................................................. 125 A28.2) Btiment ........................................................................................................... 126 A28.3) Rcolte ............................................................................................................. 126 A28.5) Nourriture de la spiruline ............................................................................... 127 A28.6) Schage ........................................................................................................... 127 A28.7) Personnel ......................................................................................................... 128 A28.8) Prix de revient ................................................................................................. 128 A28.9) Conditions humaines pour la russite du projet ........................................ 128 A29) Check- list pour dmarrage de spiruline sur nouveau site .............................. 129 A30) Spiruline humanitaire dans les PVD ................................................................... 132 A31) Adoucissement de l'eau trop dure ....................................................................... 141 BIBLIOGRAPHIE ................................................................................................................. 143

PRESENTATION

J.P. Jourdan fait part ici de son exprience pratique de plus de douze annes de production de la spiruline et montre aussi comment appliquer les mthodes du gnie chimique pour perfectionner cette production mme petite chelle et sans moyen technique sophistiqu. Il donne une foule de dtails permettant de construire l'installation de culture et de conduire sa marche dans des circonstances trs varies, mais aussi d'valuer et d'optimiser le prix de revient de cette micro-algue si demande actuellement pour ses vertus alimentaires ou autres. Diplom du M.I.T., J.P. Jourdan a fait sa carrire dans l'industrie chimique avant de consacrer sa retraite dans le sud de la France au dveloppement de la spiruline en faveur des enfants du Tiers-Monde. Aprs avoir t "lve s spiruline" auprs de Ripley D. Fox et de Francisco Ayala, il est membre de Technap et il a collabor activement avec Antenna Technologies et plusieurs autres O.N.G. dans le domaine de la spiruline.

Liminaire
L'objectif de ce manuel est de former des formateurs pour diffuser et rendre accessible un plus grand nombre la culture et la consommation de la spiruline, et aider les futurs "jardiniers" (jardiniers du futur ?) contrler un certain nombre de paramtres pour produire l'chelle familiale, cooprative ou communautaire un aliment dont les qualits nutritionnelles sont aujourd'hui reconnues, mais qui leur reste pratiquement inaccessible, du moins l'tat frais. Il n'est pas de fournir les lments ncessaires pour une exploitation rpondant seulement des critres de rentabilit commerciale, spcialement en pays main-d'uvre chre, car le procd propos est trs gourmand en main-d'oeuvre du fait de son taux de mcanisation quasiment nul. Nous pratiquons la culture de spiruline petite chelle depuis 1991, dans le but de la mettre la porte de ceux qui en ont vraiment besoin. Nous souhaitons que ce document, essentiellement bas sur notre exprience personnelle et celles de quelques collgues travaillant de manire similaire, puisse vous initier, guider vos premiers pas dans ce nouveau type de culture. Nous vous conseillons de dmarrer votre culture petite chelle, pour vous faire la main, mieux apprhender des phnomnes naturels somme toute trs simples, et manipuler des outils de travail qui vous seront d'autant plus familiers que vous les aurez faits vous-mme.

Ajoutons que sans pouvoir garantir la qualit de la spiruline produite dans tel lieu, sous tel climat, dans telles conditions, nous pouvons affirmer n'avoir jamais eu connaissance d'un cas de toxicit d'une spiruline produite artisanalement sous les latitudes (entre 0 et 45) o nous avons travaill.

* * * 1) QU'EST- CE QUE LA SPIRULINE ?

C'est un petit tre aquatique (0,3 mm de long), vieux comme le monde dont le nom scientifique est "cyanobactrie Arthrospira platensis" (ne pas confondre avec la cyanobactrie marine dnomme scientifiquement "Spirulina subsalsa"), qui vit de photosynthse comme les plantes et prospre naturellement dans les lacs sals et alcalins des rgions chaudes du globe. Nourriture traditionnelle des Aztques du Mexique et des Kanembous du Tchad, plus riche en protines que la viande, la spiruline est maintenant cultive dans de grandes usines aux U.S.A., en Inde, en Chine, en Thalande, etc., car on lui dcouvre toujours plus de qualits intressantes pour l'alimentation et la sant, tant pour les hommes que pour les animaux. Par exemple un enfant souffrant de kwarshiorkor (malnutrition) peut tre rtabli en lui donnant une cuillre par jour de spiruline pendant un mois. La spiruline renforce les dfenses immunitaires et allge les souffrances des personnes atteintes du Sida. Elle permet aux tuberculeux de mieux supporter leur traitement. La spiruline est aussi utilise comme ingrdient actif en cosmtique. Dans la nature, la spiruline n'a besoin pour "pousser" que d'une cuvette argileuse retenant une eau saumtre et alcaline, sous un climat chaud, et de quelques djections animales. Les flamants roses de lespce "minor" (les plus nombreux) fournissent l'apport en djections et l'agitation ncessaire pour assurer la croissance de la spiruline naturelle qui est leur aliment exclusif, notamment dans des lacs dAfrique de lEst (Rift Valley). La spiruline se prsente sous forme de filaments constitus de cellules juxtaposes. La reproduction de la spiruline, asexue, se fait par division des filaments. La culture industrielle de la spiruline est intensive et trs technique. Son produit final, sch par atomisation, est infrieur en qualit au produit frais, et mme au produit

sch artisanalement, et ne plait pas certains consommateurs qui lui trouvent une odeur forte. De plus il n'est pas la porte des populations qui en ont le plus besoin. Pour des dtails sur les caractristiques, les vertus, la fabrication industrielle et le march de la spiruline, nous vous renvoyons aux ouvrages les plus rcents disponibles sur ces sujets, dont le classique "Earth Food Spirulina" de Robert Henrikson, dit par Ronore aux U.S.A (1997) et ceux de Jacques Falquet : "Spiruline, Aspects Nutritionnels", Antenna Technologie, Genve (1996), de Ripley D. Fox : "Spiruline, Production & Potentiel", Editions Edisud (1999), sans oublier "Spirulina Platensis (Arthrospira), Physiology, Cell biology and Biotechnology", d'Avigad Vonshak, aux Editions Taylor & Francis (1997). "Earth Food Spirulina" est maintenant disponible sur http://www.spirulinasource.com/ avec mise jour permanente. L'usine hawaenne est dcrite dans http://www.cyanotech.com/. La plus grande usine chinoise Yunnan Spirin Co est http://www.chinapages.com/yunnan/kunming/spirin/spirin_i.html http://www.luf.org/~melrod/fp3/spiru.htm. dcrite dans et

Voir aussi videmment les publications d'Antenna Technologie sur www.antenna.ch.

2) INFLUENCE DU CLIMAT
Les deux paramtres fondamentaux qui contribuent constituer le climat sont les tempratures et la pluviomtrie. Il ne faut pour autant pas ngliger les vents dominants, par exemple le mistral en valle du Rhne, qui peuvent avoir des consquences importantes sur l'vaporation d'un bassin de culture, sur la temprature de l'eau ou la "pollution" de ce bassin par tous les dbris et les poussires qu'il peut entraner. De mme certains lments comme les haies, la prsence de barres rocheuses, de forts, etc. peuvent entraner des consquences importantes sur le microclimat, consquences qu'il sera bon d'valuer avant l'implantation d'un bassin... comme d'un jardin potager.

2.1) Temprature
Les premiers repres concernant les tempratures sont peu prs les mmes que pour l'homme, 37C : temprature idale pour pousser. Au-dessus, c'est trop chaud (43C peut tre mortel). En dessous, la vitesse de multiplication baisse avec la temprature. A 20C la croissance est pratiquement stoppe. La temprature du milieu de culture doit donc se situer entre ces deux tempratures. Plus la "saison" est longue, plus la priode de rcolte est longue. Les climats continentaux ou d'altitude sont dsavantags. Le handicap d'un climat trop froid peut tre compens artificiellement, comme pour tous les vgtaux. La construction de bassins sous serre peut tre d'autant plus intressante que cet abri constitue non seulement une protection contre le froid, l'vaporation, les insectes et les poussires mais aussi contre les pluies diluviennes,

comme les orages, qui peuvent faire dborder les bassins et donc provoquer une perte, ou au moins une dilution du milieu de culture.

2.2) Pluviomtrie
La conduite de bassins de culture ncessite un minimum de ressources en eau. Les eaux de pluie sont intressantes car propres et neutres (pas de minraux en solution). Sous les climats faible pluviomtrie, ou saison sche longue, il peut tre ncessaire de prvoir une citerne pour stocker de l'eau de pluie et compenser ainsi l'vaporation des bassins. L encore, il faut un "juste milieu". Les excs de prcipitations devront tre prvus en construisant des bassins plus profonds ou en les protgeant. Le manque d'eau est videmment rdhibitoire. La carence en eau de pluie peut tre compense par l'utilisation d'eaux de provenances diverses, et plus ou moins "charges" (rivire ou fleuve, nappe phratique, eaux uses...). Il faudra alors tenir compte de la qualit de l'eau dans la mise au point, puis l'entretien du milieu de culture. La prsence d'une couverture translucide au-dessus des bassins pour viter une dilution du milieu de culture est une bonne solution dans les rgions fortes prcipitations.

2.3) Climat idal

Il existe des climats idaux o il ne fait jamais froid et o les pluies sont harmonieusement rparties et compensent l'vaporation, comme par exemple certains points du versant Est des Andes. Un autre type de climat idal est le dsert au pied de montagnes qui assurent un large approvisionnement en eau, comme par exemple le dsert d'Atacama au Chili. L'eau consomme par un bassin sert surtout maintenir la culture en dessous de 40C, par vaporation. Dans un climat dsertique sans eau la culture est impossible (sauf importer de l'eau), alors que dans un climat frais la culture sous serre est facile avec une faible consommation d'eau.

2.4) Saisonnalit
Dans les rgions tempres, l'hiver est gnralement trop froid pour cultiver la spiruline, sauf avec chauffage et clairage artificiels trop coteux. Mme dans des rgions chaudes un arrt annuel peut tre rendu ncessaire par l'importance des pluies ou de la scheresse ou par les vents de sable certaine saison. La culture de spiruline sera donc souvent saisonnire. Durant la mauvaise saison, une "souche" de spiruline devra imprativement tre conserve dans son milieu de culture. Les contenants (bocaux, bonbonnes, bassines) devront laisser passer la lumire et tre stocks dans un lieu clair mais l'ombre, ou tre sous clairage lectrique. Mme si les cultures de spiruline survivent des tempratures infrieures 10C, voire de brves geles, il est prudent de ne pas les stocker au-dessous de 18C pendant de longues priodes, car les risques de contamination augmentent.

Le fait que la spiruline prospre en milieu trs alcalin prsente deux avantages majeurs : - meilleure absorption du gaz carbonique de l'air - protection contre les contaminations. Cette protection nous a t involontairement dmontre au printemps 1997. Nous avions cte cte deux bassins de spiruline de 10 m, l'un l'air libre, l'autre protg de la pluie. Le bassin non protg ayant dbord a t vidang et s'est rempli d'eau de pluie, laquelle a t colonise par des algues vertes unicellulaires (chlamydomonas) et nombre d'animaux (vers rouges, larves de moustiques, insectes nageurs). L'autre bassin a gard ses spirulines sans contamination. Cependant il ne faut pas croire que seule la spiruline peut crotre dans son milieu de culture : d'autres algues, des microorganismes et des animaux peuvent y vivre, d'o ncessit de surveiller les cultures du point de vue contaminants, surtout aux changement de saisons. * * *

3) BASSINS
O implanter les bassins ? Il faut respecter quelques rgles pas toujours videntes : pas sous des arbres, ni en un lieu inondable, ni prs d'une route ou d'une industrie (pollution). A l'abri des curieux, souvent ignorants et pas toujours bien intentionns. Un terrain plat facilitera le travail, de mme que la proximit de l'eau, etc. Il vaut la peine de rflchir avant de dcider.

3.1) Construction des bassins de culture

Pour une production familiale ou artisanale on peut se contenter de bassins de petite taille, sans agitation roue aube, sans chicane mdiane. Il y a alors de nombreuses faons de construire un bassin adquat, variables selon les conditions locales.

Le bassin ne doit pas comporter d'angles vifs, mais des formes arrondies (au moins aux extrmits dans le cas de bassins rectangulaires). Le fond doit tre aussi plan que possible, avec une trs lgre pente vers un endroit plus creux d'accs facile (pour faciliter la vidange). Les bords du bassin doivent tre au-dessus du niveau du terrain, pour rduire l'entre des poussires et des animaux, et au moins 20 40 cm au-dessus du fond : mieux vaut prvoir une profondeur assez forte, pour encaisser les pluies, faciliter les transferts entre bassins et l'autopuration biologique du milieu de culture. Les bassins, surtout les plus profonds, doivent faire l'objet de prcautions pour viter l'accs des petits enfants. Il faut aussi faire en sorte qu'on ne puisse pas confondre les bassins avec un dpotoir, msaventure qui est malheureusement arrive dans plusieurs pays.

Une des plus grosses difficults pour russir un bassin est l'aplanissement du fond : en fait c'est l o rside surtout la limitation en surface pour un artisan ne disposant que d'outils ordinaires (pioche, rteau, rgle et niveau bulle). Une variante, qui ne sera pas dcrite ici car peu adapte aux conditions artisanales, consiste faire la culture en lame d'eau coulant sur un plan inclin.

3.1.2) En bches plastique

Une paisseur de film de 0,25 mm minimum, et de prfrence 0,5 mm, est recommande. Le film (PVC, polythylne, EVA, tissu enduit PVC ou PP, caoutchouc EPDM), de qualit alimentaire (ou au moins non toxique) et rsistant aux ultraviolets, peut tre simplement fix sur un cadre en bois ou en tubes d'acier ou de PVC, ou soutenu par un muret en planches, briques, parpaings (mme non ciments), terre crue stabilise (pis,"banco"). En fait la solution muret en dur ou au moins en bois est ncessaire en cas de risque d'attaque par des rongeurs. Eviter le plus possible les plis dans les angles donnant des zones qui ne seraient pas bien agites ou ares. Il est recommand de cimenter le sol supportant le bassin ou de le couvrir d'une couche de gravier et sable ou latrite broye bien dame. Si l'on doit utiliser du film plastique plus mince, le protger du contact direct avec le sol et la maonnerie, par exemple avec un feutre type "gotextile" ou deux ou trois couches de film usag. Il existe un film PVC, de qualit alimentaire, de 1,2 mm d'paisseur et 2 m de large pouvant tre assembl par soudure avec un pistolet air chaud spcial (ncessite de l'lectricit). Le film de caoutchouc EPDM, qui peut se coller, est une bonne solution mais de luxe. Les films pais et soudables ou collables rduisent les plis et facilitent l'installation d'une chicane centrale pouvant tre simplement soude ou colle au fond du bassin, mais ces films ont tendance rester hors de porte des petits producteurs. Pour la pose, tenir compte du fort coefficient de dilatation thermique des films plastique (en cas de pose par temps chaud, il y aura rtractation importante par temps froid, et vice-versa). En cas d'utilisation d'un film de qualit inconnue, le faire analyser pour vrifier qu'il est alimentaire ou au moins non toxique, et faire un essai de culture pour vrifier qu'il n'est effectivement pas toxique et qu'il rsiste au milieu de culture. S'il y a des termites il est recommand de mettre un lit de sable sur une couche de cendres sous le plastique et d'utiliser un muret en dur, ou au moins de traiter le bois, moins que l'on ne dispose d'un bois naturellement inattaquable ; on peut aussi poser le film sur une dalle d'argile sche ou mieux de ciment, ou le protger par du mtal. A noter que le chiendent africain est capable de percer le plastique. Il arrive que le plastique ne fuie pas mme s'il est perc d'un petit trou, qui se bouche spontanment. Il est possible de rparer un petit trou avec un mastic noir collant ( sec) vendu dans le commerce cet effet, ou mme avec une "rustine" de ruban adhsif rsistant l'eau.

Les rongeurs peuvent tre de redoutables dangers pour les bassins en film plastique non protg. Pendant des annes je n'ai pas eu ce problme Mialet, puis dans l'hiver 2000-2001 (trs doux) 4 bassins ont t percs de multiples trous sur les bords non protgs. Il existe des appareils lectriques repoussant efficacement les rongeurs. Pour vidanger et nettoyer un bassin constitu d'une bche plastique supporte par un muret en dur, un moyen facile est d'abaisser le bord de la bche prs du point de vidange (puisard). Photo d'un bassin en tissu polyamide enduit PVC, Ecopark, Madurai, Tamil Nadu (Inde), 18 m, 1998 :

3.1.3) En "dur" (bton, parpaings, briques)

Le fond d'un bassin en ciment doit tre construit sous forme d'une dalle en bton arm de 10 cm d'paisseur minimum, de trs bonne qualit, sur terrain bien compact. Les bords du bassin peuvent tre en briques, en parpaings ou en bton arm. Eviter les angles vifs. Soigner l'enduit d'tanchit (un adjuvant impermabilisant ou une peinture poxy sont pratiquement indispensable, ou sinon peindre l'enduit ciment la chaux dans ce cas laisser en place la chaux avant mise en eau). Il est bon d'attendre quelques jours, bassin plein d'eau, avant d'ensemencer en spirulines (sinon l'alcalinit de la chaux ou du ciment frais peut jaunir trs rapidement les spirulines). Il existe des techniques pour construire des bassins de grande longueur (50 100 m) sans joint de dilatation. Le mariage bton-film plastique est aussi une solution, soit que le film double le bton pour l'tanchiser, soit qu'une partie du bassin soit en film plastique et l'autre en bton (avec raccordement bton-film comme l'a pratiqu avec succs Bionor au Chili).

3.1.4) En argile (si on n'a vraiment pas d'autre possibilit)

Creuser sur 20 cm et faire un talus bien tass de 20 cm galement. Si le terrain n'est pas naturellement argileux, garnir la surface d'une couche d'argile humide de bonne qualit, de 3 5 cm d'paisseur, bien tasse pour viter les fissures. Garnir les rebords de tuiles ou briques cuites, ou de plastique pour viter les fissurations lors des baisses de niveau. La spiruline pousse trs bien dans un bassin en argile, mais sa puret bactriologique doit tre surveille de plus prs (risques accrus de prsence de microorganismes anarobies au fond). L'tanchit n'est pas complte, mais elle peut tre amliore avec un film plastique mme trs mince.

3.2) Couverture du bassin de culture

En l'absence de toute protection sur le bassin, une alimentation carbone, et une bonne agitation sont recommandes ; une bonne disponibilit d'eau (pour compenser l'vaporation), l'absence de pluies diluviennes (pluies de plus de 200 mm/jour) et de basses tempratures sont par ailleurs ncessaires. Il est en fait souvent utile, voire ncessaire, d'installer une serre ou au moins un toit sur le bassin, permettant de le protger contre les excs de pluie, de soleil ou de froid, et contre les chutes de feuilles, fientes d'oiseaux, vents de sable et dbris divers, tout en lui permettant de "respirer". Le toit peut tre en toile de tente blanche ou en tissu polyamide enduit PVC blanc laissant passer une partie de la lumire mais capable d'arrter suffisamment la pluie. Il peut aussi tre en plastique translucide : film de polythylne trait anti-U.V. utilis pour la construction des serres horticoles, ou plaques en polycarbonate ou fibre de verre-polyester. Si le toit est opaque, il faut le mettre suffisamment haut pour que le bassin reoive assez de lumire par les bords. Le toit est parfois complt par une moustiquaire sur les bords et/ou les cts. Si la pluie est tolrable, le toit peut tre remplac par un simple ombrage (filet ombrire, canisse, feuilles de palmier tresses). Le toit peut tre flottant si le bassin est trop large pour qu'on puisse construire une structure fixe pour le supporter. Installer une serre consiste recouvrir le bassin d'un film translucide avec une pente et une tension ou des supports suffisants pour viter la formation de poches d'eau de pluie et rsister aux temptes. Le film peut tre support par des montants rigides ou des fils de fer ou du grillage (par-dessous et aussi parfois par-dessus). Des orifices d'aration et/ou d'accs doivent tre prvus. Il est gnralement ncessaire de prvoir aussi un dispositif d'ombrage (filet ombrire en plastique tiss noir par exemple, de prfrence par dessus le plastique translucide). Le bois non trait et l'acier galvanis sont des matriaux convenables pour les structures de serre. Eviter les vis cadmies ( reflets jaunes). Poser et tendre le film par temps chaud pour viter qu'il ne se dtende par temps chaud. Un mode de ralisation conomique d'un bassin sous serre consiste faire un muret en lments rigides (parpaings ou briques ciments ou non, planches visses sur des piquets en acier, bottes de paille), poser le film d'tanchit en recouvrant le muret et en l'enterrant sur les bords puis tendre par-dessus un film de serre luimme enterr sur les bords. Une lgre pente (4 %) du film de serre suffit pour que mme par pluies trs violentes l'eau ruissellle sur le film sans s'y accumuler, la condition expresse que le film soit tendu comme une peau de tambour ou un tissu de

parapluie ; la pente peut tre fournie par des poutres ou chevrons en bois formant comme une charpente basse sur le bassin. N.B. : avec une faible pente, il est probable que la serre ne rsistera pas une chute de neige ou de grle importante. Pour accder un tel bassin et l'arer il est ncessaire d'installer en au moins un point (mais de prfrence deux) une "porte" d'accs, simple cadre vertical sur lequel repose le bord du film qui reste non enterr cet endroit ; la porte peut tre ferme par une moustiquaire (non seulement contre les insectes mais aussi les feuilles mortes). Prvoir la construction pour que la composante horizontale de la tension du film ne fasse pas basculer le muret. Le mode de ralisation le plus conomique d'un bassin sous serre utilise le mme film (film de serre) pour le fond, les cts et la couverture. Avec un film de serre de largeur standard (6,5 m) on ralise facilement des bassins jusqu' 30 m. Le fate peut tre un chevron en bois de 6 x 8 cm, de 5 m de long fix environ 1,5 m de haut. Le film est agraf sur le fate d'un ct, puis de l'autre avant d'tre fix par liteaux sur le fate. Aux deux extrmits on place un rebord en planches ou parpaings sur lequel est relev et fix solidement le bord du film, et on amnage deux "portes" d'accs munir de moustiquaires. Le cot des matriaux s'lve 5 $/m si la sous-couche de protection est ralise en film plastique de rcupration (usag), hors ombrage, protection latrale et agitation. Une protection latrale est en fait recommande contre les dommages causs notamment par les animaux : la placer au moins 50 cm des bords si elle est en matriau brut pouvant endommager le film lors de ses dplacements par grand vent. Pour assurer la stabilit par grand vent, remplir le bassin d'au moins 20 cm. Il est recommand de ne pas laisser les cts du bassin exposs la lumire car cela pourrait favoriser le dveloppement d'algues trangres sur les parois claires. Ce type de serre permet la rcupration automatique de l'eau condense sur le film de serre (important surtout la nuit dans les climats dsertiques). Exemple de ralisation en 20m ( Mialet, en 2000) :

L'utilisation de film de serre pose le problme de sa qualit du point de vue alimentaire. Il ne semble pas quil y ait de problme. Certains films (ceux qui sont lgrement jaunes) sont stabiliss contre les UV par un compos base de cadmium. D'aprs nos analyses le cadmium ne migre pas du plastique vers le milieu de culture et ne pollue pas la spiruline.

Un bassin sous serre suffisamment tanche prsente l'avantage de pouvoir tre aliment en gaz carbonique provenant de la combustion de gaz ou d'une fermentation (compost) grce son atmosphre contrlable. Une serre ombrable et arable est idale en tous climats car elle permet un contrle maximum tant de la temprature, de la lumire, de la pluie et de l'vaporation que des insectes et autres animaux, poussires, feuilles mortes ; elle est la protection la plus efficace pour rduire le plus possible la consommation d'eau en climat aride. Sous serre il ny a en gnral pas implantation de larves dans les cultures. En cas dinfestation il est facile de laisser monter la temprature 42-43C le temps de tuer les larves.

3.3) Nombre et surface de bassins

Mieux vaut construire deux ou plusieurs petits bassins qu'un seul grand : ainsi on pourra en vider un (pour le nettoyer ou le rparer par exemple) sans perdre son contenu, et si une des cultures se contamine, n'est pas en bonne sant ou meurt, l'autre permettra de continuer et de rensemencer. Il peut tre aussi pratique de puiser dans un bassin pour filtrer sur un autre. Un bassin de service est par ailleurs utile pour prparer les milieux de culture et effectuer des transvasements, ou pour vaporer des purges en vue de recycler les sels, ou encore pour purer du milieu de culture, mais il n'est pas absolument ncessaire. Un m de bassin couvre le besoin en spiruline d'une 5 personnes selon la dose. Le cot d'investissement au m dcrot quand augmentent la surface unitaire et le rapport surface/primtre des bassins. Par contre des bassins troits (largeur infrieure 3 m) sont plus faciles agiter et couvrir. Une surface unitaire de 5 20 m parait pratique au niveau familial ou pour un dispensaire (selon la dose journalire de spiruline, et selon la productivit des bassins). Pour une production artisanale la surface totale des bassins ne dpassera gure 50 100 m, mais un niveau "semiartisanal" est envisageable, pouvant dpasser 1000 m.

3.4) Agitation du bassin

L'agitation est ncessaire pour homogniser, favoriser l'limination de l'oxygne et assurer une bonne rpartition de l'clairage parmi toutes les spirulines. Sauf en cas de soleil trs fort, on peut se contenter d'agitations plus ou moins frquentes (quelques minutes toutes les heures, au moins 4 fois par jour), manuelles avec un balai ou une rame, ou par pompes n'endommageant pas les spirulines (pompes hlice, vis, palettes, diaphragme ou vortex). Une pompe d'aquarium entranement magntique de 800 l/h, 8 Watt, fonctionnant 15 minutes par heure ou par demi-heure (programmateur horloge), suffit pour agiter 5 10 m de bassin si elle est bien positionne (orientation de son jet en site et en azimut) et si les bords du bassin sont rguliers et ses angles arrondis. Une chicane mdiane peut faciliter la circulation, mais il faut en gnral la complter par des chicanes d'angles redirigeant les flux des bords vers le centre, ce qui complique l'installation : dans un petit bassin de dimensions bien choisies la chicane centrale est totalement inutile. L'installation d'une chicane mdiane dans les bassins en bche plastique (recouvrant la chicane)

pose le problme des plis qu'il faut viter au maximum. Ce problme est minimis si la chicane est de faible hauteur (20 cm) et ses extrmits arrondies. Mais certains prfrent des chicanes (en bois par exemple) poses par dessus la bche ; dans ce cas il faut veiller minimiser le by-pass sous la chicane. On amliore lefficacit des pompes en faisant passer leur jet dans un tube Venturi , mais cela complique linstallation et nest recommand quen cas dalimentation photovoltaque Nettoyer de temps en temps les crpines des pompes et les recoins du corps des pompes (je prfre enlever le capot qui ne sert qu' enjoliver les pompes d'aquarium). Avec les souches ondules (Paracas) les pompes vide-cave ordinaires sont utilisables sans risque de casser les filaments ; une telle pompe peut agiter un bassin carr ou rond de 50 m ; mais ces pompes ne sont pas entranement magntique et comportent donc un joint, ce qui peut provoquer des problmes d'tanchit et de corrosion au bout d'un certain temps). Attention : les pompes en 220 Volt ncessitent des prcautions pour viter de s'lectrocuter, surtout en serre humide (les constructeurs de pompes d'aquarium demandent qu'on dbranche avant de toucher l'eau) ; il est recommand de brancher le systme d'alimentation lectrique sur un transformateur " cran d'isolement" reli la terre (systme utilis pour les prises de rasoirs dans les salles de bains) ; on peut complter la scurit par un disjoncteur diffrentiel de 30 mV. Des pompes en 12 ou 24 Volts sont prfrables.. Mieux vaut une agitation discontinue nergique que continue mais faible. Mme une agitation nergique sera plus efficace si elle est intermittente car chaque redmarrage il se produit un brassage, alors qu'en continu la masse d'eau a tendance se dplacer d'un bloc (sauf si des chicanes sont installes en travers du courant). C'est une bonne pratique d'agiter au balai le bassin au moins une fois par jour, surtout s'il est assez profond. Les grands bassins industriels, trs longs, sont toujours munis d'une chicane mdiane et agits par roue aubes. Leur surface unitaire maximum est de 5000 m. Les cultures en lame d'eau sur plan inclin (cf. 3.1) sont agites par la turbulence due l'coulement. Un mode d'agitation nouveau a t propos rcemment par Franois Haldemann : la cloche air comprim. Il s'applique bien aux petits bassins assez profonds, de prfrence ronds. Il consiste faire arriver un dbit d'air comprim (d'un compresseur d'aquarium) sous une cloche lourde pose au fond du bassin (un plat en Pyrex fait bien l'affaire) : la cloche se soulve d'un ct, intervalles rguliers, en produisant une grosse bulle d'air ; en retombant la cloche provoque un certaine circulation du liquide. J'ai quip ainsi un bassin rond de 7 m avec un compresseur de 300 l/h en marche continue : l'agitation est bonne. Un avantage important de ce mode d'agitation est l'absence de fils lectriques. Dans la pratique ce mode d'agitation est limit aux bassines ou petits bassins mais peut rendre de vrais services.

3.5) Containers, bassines, gaines

Il arrive que l'on utilise comme petits bassins des rcipients translucides comme des bouteilles, bonbonnes, bassines, gaines en film plastique, containers jus de fruits (il en existe de 1000 litres). Il faut savoir que la vitesse de photosynthse paratra plus rapide dans de tels rcipients parce que le milieu de culture y reoit la lumire de plusieurs cts et s'chauffe aussi plus vite. Cela peut tre avantageux, mais il faut surveiller la temprature et le pH de plus prs que dans les bassins ordinaires. L'agitation dans de tels rcipients se fait de prfrence par air comprim (compresseur d'aquarium). N.B. Il s'agit l en fait de variantes de "photobioracteurs" grand rapport surface/volume.

3.6) Rparation des films plastique

Il est possible de rparer de petits trous dans les films : nettoyer et scher une zone autour du trou puis y coller un produit mou et collant (de qualit alimentaire) vendu cet effet, ressemblant du chewing gum. Le PVC peut aussi tre rpar par rustines colles ou soudes, ou par une bande adhsive rsistant l'eau. Certaines bandes adhsives s'appliquent aussi aux films de polythylne. Attention : utiliser des produits de qualit alimentaire. ***

4) MILIEU DE CULTURE
4.1) Prparation du milieu de culture
Les spirulines vivent dans une eau la fois sale et alcaline. L'eau utilise pour le milieu de culture doit tre de prfrence potable (mais ne sentant pas fortement le chlore) ou au moins filtre (sur bougie filtrante ou sable), le plus important tant l'limination des algues trangres. L'eau de pluie, de source ou de forage est en gnral de qualit convenable. Si l'eau est dure, il se produira des boues minrales (plus ou moins abondantes selon la teneur en calcium, magnsium et fer), qui dcantent rapidement et ne sont pas particulirement gnantes pour la culture, condition toutefois que l'ensemencement initial en spirulines soit assez concentr. Les limites de salinit et d'alcalinit (= basicit, les deux termes sont interchangeables) permises sont assez larges mais on se place en gnral vers les minima, pour des raisons d'conomie (sauf si la source d'alcali est trs bon march), avec une salinit totale de 13 g/litre et une alcalinit de 0,1 molcule-gramme/litre (b = 0,1) ; mais ces concentrations peuvent tre doubles sans inconvnient. Il peut mme tre avantageux de travailler une basicit double pour attnuer les fluctuations de pH dans l'aprs-midi, surtout en surface ou dans les angles du bassin quand l'agitation est dficiente. Un cas o b = 0,2 est prfr est celui du bassin ouvert dmarr en saison sche : la dilution par la pluie pourra ramener b vers 0,1 ou mme en dessous pendant la saison des pluies.

L'alcalinit est habituellement apporte par du bicarbonate de sodium, mais ce dernier peut tre remplac en partie par de la soude caustique ou du carbonate de sodium qui ont d'ailleurs l'avantage de relever le pH initial du milieu de culture (par exemple 5 g/l de bicarbonate + 1,6 g/l de soude donnent un pH de 10) ; le carbonate ou la soude peuvent mme tre la seule source d'alcalinit condition de les bicarbonater au gaz carbonique ou par exposition l'air avant usage. Le natron ou trona peuvent aussi tre utiliss (cf natron). La salinit complmentaire est apporte par les diffrents engrais et du sel (chlorure de sodium). Le sel de cuisine iod et fluor peut convenir mais souvent il contient jusqu' 2 % de magnsie insoluble : mieux vaut utiliser un sel n'en contenant pas, pour viter un excs de boues minrales. De mme si le sel apporte trop de magnsium soluble, il y aura formation de sels minraux insolubles, surtout pH assez lev ; des boues minrales excessives peuvent tre trs gnantes pour une culture qu'on ensemence peu concentre en spiruline : celle-ci est en effet facilement entrane par les flocons de boues au fond du bassin sans qu'on puisse la rcuprer. C'est aussi une raison qui milite pour ne pas ajouter de calcium en dbut de culture nouvelle. Par contre l'emploi d'un sel peu raffin est recommand cause de sa teneur en oligo-lments bnfiques. En plus du sel et de la soude, le milieu de culture contient des engrais pour assurer la croissance des spirulines, comme en agriculture habituelle : azote (N), phosphore (P), potassium (K) sont les trois principaux lments, mais soufre (S), magnsium (Mg), calcium (Ca) et fer (Fe) doivent aussi tre ajouts s'ils ne sont pas apports en quantit suffisante par l'eau, le sel et les engrais. Une analyse de l'eau et du sel est utile pour calculer la dose de Mg, Ca et Fe ajouter car un excs de ces lments peut tre nocif (perte de phosphore soluble, formation de boues). L'eau, le sel et les engrais apportent souvent assez d'oligolments (bore, zinc, cobalt, molybdne, cuivre, etc.), mais comme ceux-ci sont coteux analyser, on prfre, quand on le peut, ajouter systmatiquement les oligo-lments, au moins les principaux. Les sources d'azote prfres des spirulines sont l'ammoniac et l'ure, mais ces produits sont toxiques au-del d'une concentration limite (l'ure s'hydrolyse peu peu en ammoniac). C'est pourquoi on prfre souvent, au moins lors de la prparation du milieu de culture, utiliser du nitrate, dont on peut mettre sans danger une forte dose, constituant ainsi une rserve d'azote long terme. Les spirulines consommeront d'abord l'ammoniac ou l'ure s'il y en a de disponibles. Une lgre odeur passagre d'ammoniac rvle qu'on s'approche de la limite autorise ; une odeur persistante et forte indique qu'on l'a srement dpasse et qu'il faut s'attendre un mauvais tat de la culture (passager ou irrversible selon la dose d'ammoniac). Note : L'ure est le nom commun du carbamide ; certaines personnes confondant ure et urine, et prouvant de la rpugnance manger de la spiruline fabrique avec de "l'ure", il peut tre prfrable de remplacer pour elles le terme "ure" par son synonyme scientifique : "carbamide", tout aussi correct mais moins vocateur. Cependant l'ure est un produit trs propre et inodore, trs employ en agriculture. Le nitrate n'est pas rellement sans risque car il peut se transformer spontanment en ammoniac dans certaines conditions (en prsence de sucre par exemple et sans doute d'exopolysaccharides scrts par la spiruline elle-mme). Vice-versa

l'ammoniac (issu de l'ure par exemple) s'oxyde plus ou moins vite en nitrate par le phnomne naturel connu sous le nom de nitrification. Le phosphore est apport indiffremment par n'importe quel orthophosphate soluble, par exemple le phosphate monoammonique (NH4H2PO4), le phosphate dipotassique (K2HPO4) ou le phosphate trisodique (Na3PO4, 12 H2O), ou encore l'acide phosphorique lui-mme. De mme le potassium peut tre apport indiffremment par le nitrate de potassium, le chlorure de potassium, le sulfate ou le phosphate dipotassiques. La source de magnsium habituelle est le sulfate de magnsium appel sel d'Epsom (MgSO4, 7 H2O). Le calcium ventuellement ncessaire est apport par un peu de chaux teinte ou de pltre (sulfate de calcium), ou, mieux, d'un sel de calcium soluble (nitrate, chlorure); il faut en mettre de quoi saturer le milieu en calcium pH voisin de 10, mais pas plus, c'est--dire jusqu' formation d'un lger louche blanc. En cas d'ensemencement d'une nouvelle culture avec peu de spiruline, mieux vaut s'abstenir d'ajouter du calcium au dbut pour viter de perdre de la semence entrane dans les boues minrales. On notera la possibilit d'apporter plusieurs lments la fois par le mme produit, par exemple N et K par le nitrate de potasse, P et K par le phosphate dipotassique, ou S et Mg par le sulfate de magnsium. On voit l'importance de possder des rudiments de chimie pour pouvoir jongler entre les diffrents produits selon leur disponibilit et leur prix. Il suffit en gros de connatre les poids molculaires et de faire des rgles de trois. On peut aussi se passer du concept de poids molculaire et ne travailler qu'avec les % d'lments donns en Annexe A16. Le fer est apport par une solution de sulfate de fer acidule, ou, de prfrence, par du fer associ un chlatant comme il s'en vend couramment pour les usages horticoles. Ne pas utiliser les engrais agricoles ordinaires prvus pour tre peu solubles (et contenant de nombreuses impurets), mais seulement les engrais solubles ou les produits chimiques purs correspondants. En cas de doute, analyser la spiruline produite pour vrifier qu'elle ne contient pas trop de mercure, plomb, cadmium, ou arsenic). Les limites de concentration admissibles pour les diffrents lments dans le milieu de culture sont donnes en Annexe 18. Voici un exemple d'analyse de milieu de culture typique d'un bassin en cours de production :

Carbonate = 2800 mg/l Bicarbonate = 720 mg/l Nitrate = 614 mg/l Phosphate = 25 mg/l

Sulfate = 350 mg/l Chlorure = 3030 mg/l Sodium = 4380 mg/l Potassium = 642 mg/l Magnesium = 10 mg/l Calcium = 5 mg/l Ammonium + ammoniac = 5 mg/l Fer = 1 mg/l

Salinit totale = 12797 mg/l Densit 20C = 1010 g/l Alcalinit = 0,105 N (molcule-gramme/l) pH 20C = 10,4 Le milieu doit contenir en plus tous les oligolments ncessaires, apports gnralement par l'eau et par les impurets des sels, mais dont il est prudent d'ajouter un complment (voir annexe A26). Un peu d'argile peut tre un complment utile. Voici une formule pour milieu de culture neuf (pH proche de 8, cf 4.7: ph) convenant pour des eaux de duret nulle ou faible : Bicarbonate de sodium = 8 g/l Chlorure de sodium = 5 g/l Nitrate de potassium = 2 g/l (optionnel) Sulfate dipotassique = 1 g/l (optionnel ; 0,1 minimum) Phosphate monoammonique = 0,2 g/l Sulfate de magnsium MgSO4, 7H2O = 0,2 g/l Chlorure de calcium = 0,1 g/l (ou Chaux = 0,07 g/l) Ure = 0,009 g/l (ou 0,034 g/l pour extension de culture, par exemple bassin gomtrie variable.

Solution 10 g de fer/litre = 0,1 ml/l Solution d'oligolments (selon annexe A26) = 0,05 ml/l Le fer peut tre apport sous la forme chlate par 0,008 g de Ftrilon 13 ou de Ferfol 13, ou par 0,005 g de sulfate de fer FeSO4,7H2O par litre de milieu. Si le phosphore est apport par l'acide phosphorique ou un phosphate sans ammonium, l'ure passe 0,035 g/l (ou 0,070 g/l en cas d'extension de bassin). Le nitrate de potassium n'est en fait pas ncessaire, mais il facilite le travail en assurant une rserve d'azote et de potassium. Inversement, si on met du nitrate on peut omettre l'ure. Si on omet le nitrate, le potassium est apport par le sulfate dipotassique. Si l'eau est assez riche en sulfates, le sulfate dipotassique peut tre rduit 0,1 g/l et si de plus l'on met du nitrate de potassium il peut mme tre omis. La dose totale de chlorure de sodium + nitrate de potassium + sulfate de potassium dpend de l'alcalinit b ; elle doit tre environ gale : 12 - (40 x b), en g/l, avec un minimum de 4 g/l. L'alcalinit de 0,1 peut tre apporte par 5 g/l de carbonate de sodium ou par 4 g/l de soude, que l'on doit laisser se carbonater avant usage (environ 15 jours l'air en couche de 15 cm); on peut aussi mlanger le bicarbonate avec le carbonate ou la soude caustique (cf Annexes A12 et A13). Retenons qu'un mlange 50/50 de carbonate et de bicarbonate donne un pH voisin de 10 qui, la dose de 7 g/l correspondant une alcalinit de 0,1, convient trs bien au dmarrage d'une nouvelle culture. Le sesquicarbonate de sodium Na2CO3.NaHCO3.2H2O, produit naturel appel "trona" aux U.S.A., peut tre utilis 8 g/l et donne un pH de 10,15 convenant bien aussi (cf 4.7: ph). Le natron africain est un trona impur dont l'utilisation tel quel n'est pas toujours recommande. Les meilleurs natrons sont en gnral les moins colors. Avant dutiliser un natron il faut le tester : vrifier quune solution 20 g/litre filtre bien (sur papier filtre caf) et nest pas trop colore ni trouble ; doser lalcalinit et les sulfates. On trouve souvent jusqu 30 % dinsolubles (sable) et seulement 30 % de carbonate/bicarbonate. Le sable est facile liminer par dcantation. Le nitrate du Chili potassique ("salitre potsico", granuls colors en rose par l'oxyde de fer), produit naturel, peut remplacer avantageusement le nitrate potassium en apportant une riche dose d'oligolments, ainsi que du soufre et magnsium (voir analyse en Annexe A16.1). Le Chili exporte aussi du nitrate potassium purifi et du nitrate de sodium. de de du de

Lorsque le milieu contient simultanment les ions ammonium (NH4), magnsium (Mg) et phosphate (PO4), les concentrations de ces ions sont parfois (selon les concentrations et le pH) interdpendantes parce que la solubilit du phosphate mixte d'ammonium et de magnsium est extrmement faible. Le phosphate mixte insolubilis reste tout de mme disponible pour la spiruline puisqu'il se redissout ds que les conditions le lui permettent, mais s'il y a dsquilibre les concentrations d'un ou deux des trois ions impliqus peuvent tre trs faibles, ce qui ralentit la croissance et peut mme faire mourir la culture (aussi bien par manque de magnsium que de phosphate). Les cristaux de phosphate mixte se dposent normalement avec les

boues, mais il arrive qu'on en trouve en surface dans certaines conditions et mme parfois dans la spiruline rcolte. Ceci n'est pas grave. Ces cristaux se redissolvent immdiatement par acidification (comme c'est le cas dans l'estomac !). A noter qu'en l'absence d'ammonium les mmes phnomnes ont tendance se produire aussi, le phosphate de magnsium tant lui aussi fort insoluble aux pH > 9. Il est recommand de maintenir une concentration de Mg approximativement gale celle de P. Lorsque l'eau utilise est calcaire et surtout trs calcaire (100 et jusqu' 500 mg de Ca/l, voire plus), le phosphate a videmment tendance prcipiter sous forme de phosphates de calcium (trs insolubles), et ceci d'autant plus que le pH et la temprature de la culture seront levs. Mais les phosphates insolubles peuvent rester en sursaturation (en solution) sans prcipiter pendant trs longtemps, surtout en prsence de matires organiques, et mme si paralllement du carbonate de calcium prcipite. Il est donc trs difficile de prdire quand le phosphate en solution va tre insuffisant pour une bonne croissance de la spiruline. C'est pourquoi il est recommand, si on dispose d'un test permettant de doser le phosphate, de vrifier assez souvent la teneur en phosphate du milieu de culture si l'eau est trs calcaire. On trouve des kits pour doser le phosphate dans les boutiques d'aquariophilie. En cours de culture, surtout en cas de faible croissance ou de problmes, il est bon de mesurer la teneur en phosphate du milieu filtr et, si elle est < 5 mg/l, de rajouter du phosphate ; si on n'a pas de test phosphate on peut tenter de rajouter du phosphate pour ranimer la croissance. Dans le cas o l'eau est calcaire, la formule de milieu de culture donne ci-dessus doit de prfrence tre adapte : diminution ou suppression de l'ajout de calcium (cet ajout quivaut 36 mg de Ca/litre dans la formule), et majoration de l'ajout de phosphate (par exemple pour chaque mg de Ca excdentaire ajouter 0,5 mg de P, soit par exemple 1,6 mg d'acide phosphorique). On peut dire que les phosphates de Ca insolubiliss constituent une rserve de Ca et de P, car ils peuvent se redissoudre en cas de besoin ; cependant cette possibilit est limite par les boues organiques et les imperfections de l'agitation prs du fond ou dans les angles du bassin. Lorsque le pH d'un milieu en cours de prparation partir de bicarbonate et d'eau calcaire doit tre relev par ajout de soude, il est important de n'ajouter le phosphate qu'aprs la soude pour viter la formation d'un prcipit en flocons dcantant trs difficilement ou mme ayant tendance flotter. L'eau peut aussi tre traite pour diminuer sa teneur en calcium avant utilisation, ce qui complique un peu mais peut tre rentable (voir annexe A31). Prcautions pour le stockage d'eau traite : voir stockage . Prcautions pour le stockage de milieu de culture neuf : voir stockage .

4.2) Milieu "Zarrouk"

(thse Zarrouk (1966), page 4 : voir BIBLIOGRAPHIE) Le milieu standard de Zarrouk, trs souvent cit et servant de rfrence, mais pas trs conomique, est fabriqu partir d'eau distille et contient, en g/litre :

NaHCO3 = 16,8; K2HPO4 = 0,5; NaNO3 = 2,5; K2SO4 = 1,0; NaCl = 1,0; MgSO4 , 7 H2O = 0,2; CaCl2 = 0,04; FeSO4, 7 H2O = 0,01; EDTA= 0,08; solution A5 = 1,0; solution B6 = 1,0. Composition de la solution A5 , en g/l: H3BO3 = 2,86; MnCl2, 4 H2O = 1,81; ZnSO4, 7 H2O = 0,222; CuSO4, 5 H2O = 0,079; MoO3 = 0,015. Composition de la solution B6 , en g/l: NH4VO3 = 0,02296; K2Cr2(SO4)4, 24 H2O = 0,096; NiSO4, 7 H2O = 0,04785 ; Na2WO4, 2 H2O = 0,01794; Ti2(SO4)3 = 0,04; Co(NO3)2, 6 H2O = 0,04398. On peut remarquer que le produit de solubilit du phosphate tricalcique est trs largement dpass dans cette formule

4.3) Et si l'on n'a aucun produit chimique ?

Dans ce cas, ou si l'on veut produire une spiruline "100% biologique", utiliser des produits naturels. Par exemple on peut utiliser du bicarbonate naturel amricain, la trona ou le natron ou de la lessive de cendres de bois, et tout le reste peut tre remplac par 4 ml d'urine par litre, plus le sel et, si ncessaire, du fer. Voir dans le chapitre "Nourriture" les prcautions qu'implique l'utilisation d'urine. Si l'urine est proscrite pour une raison ou une autre, on a recours au nitrate du Chili et l'acide phosphorique extrait de la poudre d'os calcins (le phosphate naturel et le superphosphate contenant trop de cadmium) ; malheureusement le nitrate du Chili a t dclar "non bio" en Europe malgr son origine naturelle ; alors il y a encore une possibilit : les feuilles de vgtaux comestibles bon march (exemple l'ortie) qu'on met tremper dans la lessive carbonate et qui apportent tous les lments y compris du carbone, mais ont tendance salir le milieu. On peut aussi utiliser les "purins de feuilles", mais leur odeur est plutt dsagrable. A noter que l'eau de mer filtre ( la rigueur le sel brut) est une bonne source de magnsium et de calcium. La cendre de bois utilise doit tre propre (aussi blanche et sans suie que possible) et riche en sels solubles. Les meilleurs bois sont (en Europe) ceux de peuplier, orme, tilleul, bouleau, pin, eucalyptus; les branches sont plus riches que les troncs. En Afrique certaines parties des palmiers sont particulirement riches en potasse et servent traditionnellement l'extraction de potasse, notamment pour la fabrication du savon (il existe dailleurs des fours spcialement construits pour obtenir une cendre blanche cet effet). Pour fabriquer la lessive de cendre, on utilise par exemple le dispositif suivant: une bassine fond perc, une couche de cailloux sur le fond, une toile, et 30 50 cm de cendre dans la toile; on verse l'eau sur la cendre (environ 5 litres d'eau par kilo de cendre, et ceci plusieurs fois de suite) et on la fait percoler travers la couche de cendre; au dbut le jus coule concentr et trs caustique; s'en protger car il attaque rapidement la peau et ne doit jamais atteindre les yeux (en cas d'atteinte, rincer immdiatement et abondamment l'eau). On peut recycler les premiers jus. Jeter la vieille cendre quand elle est puise et recommencer avec de la neuve. Attendre une quinzaine de jours que la carbonatation de la lessive se fasse l'air, dans un bassin d'environ 15 cm d'paisseur de liquide. Pendant cette priode, veiller ce qu lair soit renouvel et agiter en remuant de temps en temps. Le temps

de carbonatation tant inversement proportionnel l'paisseur, si l'on veut aller plus vite il suffit d'taler la solution en couche plus mince; une autre possibilit pour gagner du temps est de neutraliser avec un peu de bicarbonate (voir Annexe A13) ou de gaz carbonique concentr. Mesurer la salinit (voir Annexe A3) ou mieux l'alcalinit (voir Annexe A5) de leau de cendre carbonate. Diluer et saler: La dilution normale est 8 g/l de sels de cendres (ou bien alcalinit = 0,1), plus 5 g/l de sel de cuisine, mais en cas de pnurie on peut diminuer considrablement la dose de sels de cendres tout en conservant la salinit totale 13 g/l en mettant plus de sel. Ne pas oublier de rajouter du fer. Pour mieux faire comprendre, voici un exemple donnant un milieu de culture pour 4 m, prt tre ensemenc: Lessiver 20 kg de cendres avec 3 fois cent litres d'eau Carbonater la lessive l'air quinze jours sous faible paisseur Diluer densit (20C) = 1,005 avec 300 litres d'eau Saler avec 3 kg de sel Ajouter 2 litres d'urine et 80 g de sirop de fer

4.3.1 Prparation de lacide phosphorique partir des os

(Mthode de Jacques Falquet, dcembre 2003) l'acide sulfurique

Matriel : Des os (de nimporte quel animal, mme de vieux os conviennent) De quoi faire un bon feu Un mortier Une balance de cuisine Une bassine ou un seau en plastique (le mtal ne convient pas, sauf si il est maill) dune contenance de 10 litres au moins. De lacide de batterie (= acide sulfurique 25%). Attention : ne JAMAIS prendre lacide qui se trouve dans une batterie : utiliser uniquement de lacide neuf, vendu en flacons.

Des rcipients pour le stockage du liquide obtenu (en verre ou en plastique, le mtal ne convient pas) Mthode : Calciner fortement des os dans un feu de braises Aprs refroidissement, retirer soigneusement les os (prendre le moins possible de cendres) Rduire ces os en poudre (si les os ont t bien calcins, ils sont blancs-gris et trs faciles broyer) Dans une bassine en plastique (et hors daccs des enfants !) : Pour 1 Kg de poudre dos calcins, ajouter 4 litres dacide de batterie, remuer et laisser au moins deux jours (en remuant de temps en temps). Attention : manipuler lacide avec prcautions, en ayant toujours de leau porte de main pour se laver immdiatement en cas de contact avec la peau. Ajouter ensuite 4 litres deau, remuer puis laisser reposer quelques heures. Prendre dlicatement autant de liquide clair que possible et le garder dans un bidon de plastique ou dans des flacons de verre. [NDLR : nous prfrons filtrer la boue blanche obtenue, puis la laver sur filtre avec une mme quantit d'eau ; en pressant le gteau de filtration, le rendement peut tre alors proche de 100 % et le volume obtenu est double] Attention ! Ce liquide (appelons-le extrait dos ) est corrosif : garder ce produit hors datteinte des enfants ou des personnes trangres au projet. Etiquetter et inscrire un signe davertissement sur chaque flacon ! L extrait dos contient environ 50 grammes dacide phosphorique par litre Pour prparer du milieu de culture de spiruline neuf, on utilisera (en remplacement du phosphate) deux litres dextrait dos pour 1000 litres de milieu de culture. Pour nourrir la spiruline aprs rcolte, on utilisera comme source de phosphore : 1 litre dextrait dos par Kg de spiruline sche rcolte. Ceci, bien sr, en complments des autres produits (nitrate, etc.)

au jus de citron
Matriel : Des os (de nimporte quel animal, mme de vieux os conviennent) et de quoi faire un bon feu. Un mortier, une balance de cuisine.

Une marmite Du jus de citron

Mthode : 1. Calciner fortement des os dans un feu de braises 2. Aprs refroidissement, retirer soigneusement les os (prendre le moins possible de cendres) 3. Rduire ces os en poudre (si les os ont t bien calcins, ils sont blancs-gris et trs faciles broyer) 4. Dans une marmite, mlanger 100 g de poudre dos par litre de jus de citron 5. Faire bouillir doucement pendant 15 minutes 6. Laisser reposer au moins un jour, en remuant de temps en temps. 7. Filtrer sur une toile fine 8. Le liquide rcupr contient environ 20 g/l de phosphate soluble. Si ncessaire, on peut le concentrer par bullition prolonge. Utilisation : Pour prparer du milieu de culture de spiruline neuf, on utilisera (en remplacement du phosphate) cinq litres de ce jus pour 1000 litres de milieu de culture. Pour nourrir la spiruline aprs rcolte, on utilisera comme source de phosphore : 2.5 litre de jus par Kg de spiruline sche rcolte. Ceci, bien sr, en complments des autres produits (nitrate, etc.) (N.B. 1 : se mfier des poudres d'os calcins vendues sur les marchs, en Afrique par exemple, dont la qualit peut tre douteuse ; mieux vaut la fabriquer soi-mme !) N.B. 2 : Cette mthode de prparation d'acide phosphorique est applicable aux phosphate e calcium naturels issus de la dcomposition du guano, comme le produit dnomm PHOSMAD Madagascar.

4.3.2 Prparation de sulfate de magnsium partir de cendre de bois

Aprs avoir extrait de la cendre les sels solubles (comme on vient juste de le dcrire), le gateau de filtration rsiduaire peut servir fabriquer une solution de sulfate de magnsium. Voici une recette qui a donn de bons rsultats (essaye Montpellier en Fvrier 2006). Diluer 1 kg de pte rsiduaire humide (rsidu de fabrication d'eau de cendre) dans 4,5 litres d'eau. Ajouter progressivement de l'acide sulfurique 32 % [Attention : manipuler lacide avec prcautions, en ayant toujours de leau porte de main pour se laver immdiatement en cas de contact avec la peau] : il se dgage beaucoup de gaz carbonique, veiller ne pas faire dborder le rcipient. Arrter l'addition d'acide quand il n'y a plus de dgagement de gaz (dans notre exemple il a fallu mettre 1,16 kg d'acide). Le pH est alors voisin de 5, mais il remonte vers 7,5 en quelques jours par fin du dgagement de gaz. Dcanter et filtrer la solution obtenue, environ 6 litres,qui titre : :

1,75 g de Mg / litre, soit en quivalent MgSO4,7 H2O : 18 g / litre 0,38 g de Ca / litre, sous forme de sulfate de calcium 0,015 g de phosphore / litre 2,6 g de soufre / litre

Le rsidu est constitu en grande partie de pltre (sulfate de calcium) sale (bruntre). L'utilisation de cette solution comme source de Mg apporte des quantits de Ca, P et S qui peuvent gnralement tre ngliges. Les 6 litres de solution suffisent pour faire 1000 litres de milieu ou produire 10 kg de spiruline.

4.4) Renouvellement du milieu de culture

Le milieu de culture doit rester peu color et peu trouble pour assurer la meilleure marche. Normalement les bactries et le zooplancton se chargent de la minralisation et du recyclage des dchets biologiques. Mais il arrive que la production de dchets dpasse leur limination (surtout dans les bassins productivit pousse) ; il se peut aussi que le milieu s'puise en oligo-lments ou que la salinit ait tendance devenir trop leve (en cas d'alimentation carbone sous forme de bicarbonate ou d'alimentation en azote sous forme de nitrates), ou encore si leau dappoint est saumtre : il faut alors remplacer le milieu de culture ou pratiquer une purge. Cette purge se fait de prfrence par le fond (par pompage ou siphonnage) en liminant en mme temps des boues, ou bien lors des rcoltes en ne recyclant pas le filtrat. Si les pluies font monter le niveau du bassin au point o il risque de dborder, il faut aussi pratiquer une purge pour faire baisser le niveau. Remettre dans le bassin la quantit de sels contenus dans la purge (sauf, videmment, ceux dont on veut ventuellement abaisser la concentration). Si on a purg parce que le niveau tait trop haut cause de la pluie, on ne remet videmment que les sels, sans eau. Si un bassin s'avre trop riche en un lment (ure mise en excs par exemple) et si son niveau est suffisamment bas, on peut lui ajouter du milieu neuf priv de l'lment en trop, de manire diluer celui-ci. La marche sans renouvellement du milieu de culture pendant plusieurs annes doit tre possible si les oligo-lments sont rgulirement apports, et si la productivit n'est pas excessive par rapport la profondeur de culture (la profondeur exprime en cm doit tre au moins le quadruple de la productivit moyenne exprime en g/jour/m) et de prfrence si l'agitation est maintenue la nuit pour amliorer l'oxygnation. Dans la pratique cependant un certain taux de renouvellement du

milieu aide maintenir ngligeable la concentration en contaminant ventuels (chimiques ou biologiques) et assurer l'alimentation en oligo-lments (par les traces contenues dans l'eau d'appoint ou les sels). Il est sage de tabler au minimum sur un renouvellement tous les 2 kg de spiruline produite par m de bassin, soit tous les 6 18 mois selon la productivit, en une fois ou, mieux, progressivement. Pour ne pas avoir d'ennuis, si on peut se le permettre, il vaut mieux renouveler le milieu tous les 3 mois (ou purge de 1 % / jour), mais il faut savoir que ce n'est pas une ncessit. N.B. a) La marche sans ou presque sans renouvellement ncessite de surveiller de plus prs les contaminants possibles. b) Le non-recyclage du jus de pressage quivaut un taux de purge de l'ordre de 0,02 %/jour. Si la moiti de l'azote est apporte par le nitrate, celui-ci apporte peu prs l'alcalinit perdue par cette purge.

4.5) Epuration et recyclage

Il est en principe recommand, pour des raisons cologiques, de ne pas jeter le milieu purg dans l'environnement mais soit de l'utiliser en alimentation animale, soit de le laisser s'vaporer sec dans un bassin part jouant le rle de "marais salant", de prfrence l'abri de la pluie sous serre. Les sels rcuprs, semblables au natron naturel, peuvent probablement tre purifis par calcination (attention au bon rglage de la temprature et l'apport d'oxygne, pour viter le noircissement par charbonnement) ou par recristallisation, et recycls, mais ceci reste essayer. Avec l'vaporation sec, un renouvellement tous les 3 mois ncessiterait une surface d'vaporation d'un tiers de la surface des bassins. Il est aussi possible de recycler le milieu de culture aprs puration partielle (procd F. Haldemann) : l'puration consiste en une combinaison de filtration, dcantation et traitement biologique par la flore naturelle, l'abri de la lumire, dans des bassins profonds de 1 2 m. avec un temps de sjour global de 2 4 semaines. Autre faon de procder (procd F. Ayala) : envoyer les purges dans un bassin "naturel" peu ou pas agit, de surface gale au tiers de celle des bassins actifs et profond de 2 m., rcuprer pour l'alimentation animale les (trs belles) spirulines qui s'y dveloppent et recycler le milieu aprs strilisation ventuelle. Un simple stockage du milieu de culture pendant 6 mois 20C, sans agitation et l'abri de la lumire, le purifie trs bien : en zone tempre, par exemple, le milieu de culture se purifie de lui-mme nettement pendant l'hiver o la production est nulle, et ceci malgr la basse temprature. Plutt que de construire une installation de purification, il parait plus simple, au niveau artisanal, de majorer la surface et/ou la profondeur des bassins pour y raliser l'puration biologique "in situ", au prix d'une productivit plus basse, mais avec un taux de purge du milieu trs faible, voire nul. Autre solution possible : utilisation des purges comme engrais par pandage agricole ou sur tas de compost. La forte concentration du milieu de culture en sodium est gnante pour de nombreuses plantes, mais pas pour toutes (par exemple pas pour le palmier cocotier). On peut aussi remplacer dans la formule du milieu de culture la majorit des ions sodium par des ions potassium. L'eau de cendre (assez concentre en potasse pour ne pas

ncessiter plus de deux ou trois grammes de sel par litre) convient. Sinon on peut utiliser un milieu contenant 10 g de bicarbonate de potassium + 2 g de nitrate de potassium + 1 g de sulfate dipotassique + 3 g de sel par litre (le reste comme au 4.1). Pour obtenir un milieu pH > 10, on pourra remplacer les 10 g de bicarbonate de potassium par 6 g de bicarbonate de potassium + 2 g de potasse caustique (attention : mmes prcautions de scurit qu'avec la soude !). Un milieu riche en potassium est au moins deux fois plus cher qu'un milieu riche en sodium, mais il a l'avantage supplmentaire de donner une spiruline qui peut tre utile pour certains rgimes "sans sodium" ; cet avantage pourrait plus que compenser le surcot du milieu.

4.6) Utilisation de l'eau de mer

Utiliser l'eau de mer pour tablir et maintenir une culture de spiruline, sans traitement pralable de l'eau de mer autre quune filtration, est possible mais condition de travailler un pH rgul avec une grande prcision au voisinage de celui de l'eau de mer, ce qui est techniquement trop difficile pour les producteurs artisanaux. En effet l'eau de mer contient une quantit excessive de calcium et de magnsium qui, aux pH levs, provoquent une prcipitation abondante de carbonates et phosphates. D'autre part la salinit leve de cette eau (35 g/l) interdit son emploi comme eau d'appoint pour compenser l'vaporation, sauf si celle-ci est maintenue trs faible par utilisation judicieuse de bassins sous serre. Ripley Fox a dvelopp le concept dune ferme de spiruline (gante) fonctionnant leau de mer traite au carbonate de soude, lui-mme produit sur place partir de soude lectrolytique. Le chlore et lhydrogne sous-produits de llectrolyse sont transforms en acide chlorhydrique utilis pour gnrer du CO2 pur partir de carbonate de soude. Le problme de la compensation de lvaporation est rgl en rejetant la mer le milieu de culture (pralablement neutralis) lorsque sa salinit est devenue trop leve. Ce concept sera peut-tre appliqu un jour, mais il demande de gros moyens, hors de porte dun petit producteur. Par contre l'eau de mer peut tre utilise avec profit, en petites quantits, pour apporter magnsium et soufre.

4.7) pH optimum
Le pH optimum d'un milieu de culture neuf confectionner dpend de son utilisation. S'il doit tre insmin pour dmarrer une nouvelle culture, son pH doit tre d'au moins 9 : s'il est trop bas la culture risque de mal dmarrer, avec formation de grumeaux ou prcipitation de la spiruline au fond. Le natron ou le mlange carbonate + bicarbonate, ou leau de cendre carbonate sont donc bien adapts ce cas. Par contre si le milieu neuf doit servir d'appoint une culture existante son pH peut tre avantageusement voisin de 8, ce qui contribue maintenir le pH de la culture suffisamment bas par apport de bicarbonate. C'est typiquement le cas des bassins en cours d'extension (" gomtrie variable"). Dans ce cas le milieu doit tre base de bicarbonate seul, si ce dernier est disponible. Si le milieu est bas pH on pourra

plus facilement utiliser du NPK non dsammoni sans risquer de tuer la spiruline, car ce qui est dangereux c'est NH3 ( bas pH c'est NH4 qui domine).

4.8) Stockage de milieu de culture neuf et d'eau traite

Il n'est pas recommand de stocker du milieu de culture neuf, mme l'abri de la lumire, car il constitue par nature un "bouillon de culture" o pourrait se dvelopper des micro-organismes indsirables. Cette remarque sapplique surtout aux milieux bas pH. Il est galement fortement dconseill de stocker de l'eau douce, par exemple de l'eau traite pour liminer l'excdant de duret, en prsence de lumire car des algues trangres et des cyanobactries s'y dvelopperaient en quelques jours. Or parmi ces dernires il en est de hautement toxiques (cas de certains lacs d'eau douce). ***

5) ENSEMENCEMENT
5.1) Quelle souche de spiruline utiliser ?
Il existe des spirulines de "races" (souches) diffrentes, bien qu'elles aient toutes des caractres communs qui les distinguent des autres algues. On reconnat trs vite au microscope ou mme la loupe de fort grossissement (25 fois) si les spirulines sont spirales ou droites mais il est moins facile de dire de quelle souche il s'agit car les spirulines ont une forte tendance changer de taille et de forme (spirale plus ou moins serre ou "ondule" ou droite). En prsence de formes droites il existe un doute : s'agit-il de spirulines ou d'algues Oscillatoria semblables aux spirulines droites et dont certaines sont toxiques ? Un il exerc ne peut confondre une droite avec une des Oscillatorias toxiques. Un trop fort pourcentage de droites conduit des difficults de rcolte. Donc prendre de prfrence une semence 100 % spirale, de grande taille, d'un beau vert tirant vers le bleu-vert, filtrant facilement. On peut se procurer des souches pures l'Institut Pasteur ou encore chez Antenna Technologies Genve. Toutes sont en fait des "Arthrospira platensis spp" selon la dnomination scientifique. Nous appelons "spirales type Lonar" les souches dont les filaments sont en "queue de cochon", telle la "Lonar". Nous appelons "spirales ondules" (ou "ondules" tout court) les souches dont les filaments sont en spirale tire, telle la "Paracas". Pour faciliter le choix de la souche, voici quelques lments utiles : - Les spirales type Lonar flottent plus que les ondules et les droites, ce qui permet ventuellement leur sparation. - Les spirales filtrent mieux et leur biomasse fait la boule sur le filtre, du moins lorsque le milieu de culture est assez pur.

- Les spirales ont plus tendance former des peaux et grumeaux verts flottants, surtout pH bas et en l'absence d'ammonium, ce qui est un inconvnient. - La teneur en matire sche dans la biomasse essore prte au schage est plus leve chez les ondules et les droites que chez les spirales type Lonar, ce qui est un avantage. - La biomasse des spirales type Lonar sche plus facilement. - Les ondules nont pratiquement pas tendance devenir droites. - les ondules rsistent au pompage par pompe centrifuge, alors que les spirales se cassent. Il n'y a pas de diffrences de composition ou de valeur nutritionnelle notables entre ces souches, par contre la couleur verte des ondules est plus sombre; certains prfrent la couleur et la saveur de l'une ou l'autre souche, mais ceci est affaire de got personnel. Les ondules et les droites ont des caractres communs, mais les ondules ne souffrent pas de la suspicion de ne pas tre de "vraies" spirulines. Au total, notre prfrence pratique va aux ondules, bien que les spirales soient plus belles daspect au microscope.

5.2) Ensemencement partir d'une quantit importante de semence

Pour ensemencer il suffit de transvaser dans du milieu de culture neuf un certain volume de culture provenant d'un autre bassin en production jusqu' ce que la couleur devienne verte (le "disque de Secchi" ne doit plus se voir 5 cm de la surface). On ensemence de prfrence le soir. On peut rduire le volume transfrer en prlevant du surnageant concentr ou encore en rcoltant de la spiruline sans l'essorer (bien la disperser dans un peu de milieu de culture avant de la verser dans le bassin, ceci pour viter de laisser des grumeaux, ce qui n'est pas facile avec les souches spirales : utiliser par exemple une hlice de mlangeur de peintures branche sur une perceuse). Pour russir le dmarrage dune culture, on a toujours intrt dmarrer aussi concentr que possible en spiruline. C'est pourquoi on dmarre avec le niveau minimum de liquide (par exemple 5 10 cm) si la disponibilit de semence est limite. Si la culture commenante est trop dilue ("Secchi" suprieur 5 cm), il faut ombrer, sinon on risque la mort des spirulines par photoxydation au soleil. Il faut aussi veiller viter les dpts minraux qui entranent avec eux des spirulines (pour cela filtrer au besoin le milieu neuf avant de l'ensemencer et maintenir l'agitation pendant la nuit si possible). Si le niveau initial est le niveau normal, et si le milieu neuf est base de bicarbonate, ne pas ensemencer trop concentr non plus, sinon il faudra rcolter

avant que le pH ait atteint le niveau minimum de 9,6 recommand ; mais il est facile de dmarrer avec un milieu de culture pH 9,6 ou plus en mlangeant au bicarbonate du carbonate de soude ou de la soude (cf Annexes A12 et A13). Un autre avantage d'un pH initial lev est la rduction de la tendance initiale la formation de grumeaux avec les souches spirales, avantage pouvant tre dcisif quand on a peu de semence : il ne faut pas en perdre en grumeaux ! Il est permis de stocker quelques jours et transporter une semence trs concentre (3 4 g/l par exemple, pas plus), condition de l'agiter et de l'arer au moins de temps autre sinon elle fermente et sent mauvais. A 2 g/l, le transport peut durer dix jours. A noter qu'une couche flottante prleve avec soin peut titrer 5 10 g/l. Dans une semence trs concentre le pH baisse et une odeur mercapte (odeur de choucroute) se dveloppe au cours du temps. Aprs l'ensemencement avec une spiruline ayant "souffert" au stockage, le nouveau bassin peut mousser excessivement, mais cela disparat normalement en un deux jours. La semence se conserve mieux basse temprature, vers 10C par exemple (rduction de la respiration).

5.3) A partir d'une petite quantit de semence

Pour implanter une culture de spiruline dans un site qui en est dpourvu, ou pour redmarrer avec une nouvelle souche, il n'est gnralement pas possible de disposer d'une grande quantit de culture pour ensemencer. Frquemment on ne dispose que d'un flacon rempli moiti seulement (pour maintenir assez d'oxygne). On peut se procurer une souche pure auprs de Jacques Falquet (jfalquet@antenna.ch). Si on a achet une souche lInstitut Pasteur, on naura que quelques millilitres de culture au dpart (N.B. le milieu de culture indiqu par lInstitut Pasteur dans sa documentation accompagnant ses souches correspond au maintien des souches et il diffre du milieu ce culture pour la croissance). Ou bien on doit mme partir d'un seul filament isol. Supposons que le point de dpart soit 150 g de culture 1 g/l de concentration en spiruline et que l'objectif soit de multiplier le volume de semence initial pour ensemencer un bassin de 1000 litres. Il va falloir faire au moins 4 cultures successives, en multipliant chaque fois le volume par 5, ce qui demande environ trois semaines au total (avec un taux de croissance de 35 %/jour, facile obtenir avec du milieu de culture base de bicarbonate). La premire mini-culture se fera dans un bocal de deux litres, la seconde dans une bassine de 10 litres, la troisime dans une bassine de 50 litres, la dernire dans un mini bassin provisoire en film plastique de 1 m (ou plusieurs grandes bassines). Si la concentration initiale de chaque culture est plus faible que Secchi = 5 cm, il faut non seulement ombrer mais agiter jour et nuit (sinon les spirulines peuvent s'agglomrer, notamment sur les bords, et ne plus pouvoir se disperser ensuite). Il est possible d'viter cette agglomration en relevant le pH, mais cela augmente les boues minrales qui peuvent piger aussi les spirulines. On arrive quand mme dmarrer une culture en partant de trs faibles concentrations (Secchi = 15).

L'agitation continue des cultures en petits rcipients (bouteilles, seaux, bassines par exemple) se fait au moyen d'un petit bullage d'air comme dans un aquarium et ncessite un rapport hauteur de liquide/diamtre lev, gal ou suprieur 1, avec si possible un fond conique, le tube d'amene d'air dbouchant tout prs du fond (il existe des compresseurs d'aquarium fonctionnant sur pile lectrique). Il est pratique de chauffer et clairer simultanment les petites cultures initiales en laboratoire par des lampes incandescence ou halogne places la bonne distance pour maintenir automatiquement environ 35C dans la culture. L'agitation de volumes importants (> 100 litres) de moyen d'une petite pompe d'aquarium, mais on a d'heure par heure pour ne pas abmer les programmateur horloge. Les souches ondules aux dgts des pompes. cultures dilues peut se faire au intrt ne pomper qu'un quart spirulines, donc utiliser un sont beaucoup moins sensibles

Pour viter la formation de grumeaux (surtout avec les souches spirales type Lonar et s'il n'y a pas d'agitation continue) au dbut de l'ensemencement, il faut diluer trs progressivement la semence concentre, en ajoutant des petites doses de milieu de culture neuf base d'ure, par exemple chaque agitation, en gardant une concentration leve en spirulines les deux premiers jours. On a ensuite intrt conserver une concentration en spiruline leve (0,3 g/l ou plus) et donc diluer le moins possible la culture chaque augmentation de volume: une dilution progressive (par exemple quotidienne) est la meilleure. On peut pour cela utiliser un "bassin gomtrie variable", extensible en surface, facile raliser avec du film plastique. Chaque augmentation de volume (donc surface) se fait par dilution l'aide de milieu de culture neuf (de prfrence base de bicarbonate). Le milieu neuf de dilution - s'il est base d'ure comme source d'azote - doit comporter une forte dose d'ure (0,05 g/l) ou, s'il est base d'urine: 8 ml d'urine/l. Si le milieu neuf est base de bicarbonate, donc de pH = 8, le pH de la culture se maintient autour de 9,6 pendant sa phase d'extension. Ce pH peut ne pas tre suffisant pour viter les grumeaux de spirales: dans ce cas relever le pH en ajoutant du milieu base de carbonate jusqu' pH = 10,3. N.B.: 1) Une culture peut mourir suite une dilution, un clairage ou un chauffage trop forts ou un excs d'ure. 2) L'augmentation de niveau d'un bassin doit se faire par ajout de milieu de culture. L'ajout directement dans le bassin des sels non dissouts peut tre trs dangereux pour la culture. 3) Si on prpare d'avance une rserve de milieu de culture de dilution, la garder peu de temps et ferme et l'obscurit pour qu'elle ne risque pas de se contaminer par des algues trangres.

5.4) Taux de croissance initial

La vitesse de croissance dpend de plusieurs facteurs dont le pH. Elle est maximum pH infrieur 10, donc on a intrt utiliser du bicarbonate pour dmarrer rapidement une nouvelle culture. On a aussi intrt maximiser la surface de culture (donc bassin peu profond si possible). La mthode d'extension progressive de la surface de bassin (" gomtrie variable") dcrite au prcdent favorise une croissance rapide. On caractrise au mieux la rapidit d'implantation d'une nouvelle culture en calculant le taux de croissance exponentielle dans la phase initiale de croissance qui prcde la phase des rcoltes. Ce taux s'exprime en %de croissance en poids par jour. Dans des conditions favorables, en milieu base de bicarbonate, il peut dpasser 30%/jour. A partir d'un gramme de semence (exprim en spiruline sche), un taux de 20%/jour permet d'obtenir 20 m de bassin de 15 cm de profondeur prte la rcolte en 40 jours, ou 120 m en 50 jours. N.B. On serait tent dclairer les cultures 24 heures par jour pour augmenter le taux de croissance, mais il ne faut pas soumettre les spirulines plus de 16 heures d'clairement par jour, mme si l'on dispose d'clairage artificiel.

5.5) Rserve de semence

En temps normal les bassins eux-mmes servent de rserve s'ils restent en bonne sant et sans contaminant, mais il faut prvoir les accidents et comment passer la mauvaise saison ventuelle. On a aussi intrt, parfois, vidanger compltement les bassins et les redmarrer zro pour assurer le maintien d'une bonne qualit de spiruline (sans contaminant, sans droites, filtrant bien). Pour cela il faut disposer de semence pure. Il est donc recommand de conserver un peu de souche pure "en laboratoire" (= dans la maison), temprature modre ou ambiante, sous faible clairage environ 12 heures/jour (en l'absence totale de lumire la spiruline meurt en quelques jours, par exemple en 2 jours 35C), lgrement agite, et renouvele ("repique") tous les 2 ou 3 mois : dans ces conditions, elle se conserve bien alors qu'en culture trop intensive elle a tendance muter et peut dgnrer. Une bouteille en plastique convient trs bien comme rcipient. Pour agiter et arer, le plus pratique est un petit compresseur d'air lectrique pour aquarium, qu'on peut ne faire marcher que de temps en temps grce un programmateur (il existe de tels compresseurs et programmateurs fonctionnant sur courant continu). Pour la fois clairer et chauffer la culture il suffit d'une lampe de chevet de 40 Watt dirige horizontalement vers la bouteille, la distance donnant une temprature correcte (< 30C). Pour conserver des quantits plus importantes de semence, on utilise des bassines ou aquariums, avec des lampes plus puissantes, incandescence ou halognes; les tubes luminescents chauffent peu et conviennent si la temprature ambiante est suffisamment leve.

5.6) Slection et culture monoclonale

L'ensemencement partir de n'importe quelle semence donne une culture ayant les mmes contaminant ventuels que la semence. Pour tre sr d'avoir une culture pure ("monoclonale"), il faut thoriquement partir d'un seul filament slectionn et lav avec du milieu strile.

Il est possible de sparer un filament individuel partir d'un mlange de souches. Diverses techniques, bases sur une dilution de la culture d'origine, sont utilisables pour effectuer cette sparation, qui reste une opration difficile pour un nonspcialiste. Il est plus facile et rapide de prlever dans une culture trs peu contamine (par des spirulines droites par exemple) une goutte sans contaminant : la slection se fait par examen au microscope faible grossissement, en rejetant les gouttes contamines ne serait-ce que par un seul filament tranger et en mettant les gouttes pures dans du milieu de culture filtr (en rinant la lame de microscope la pissette remplie de milieu de culture filtr). On collecte autant de "gouttes" pures que l'on peut dans le temps disponible : plus il y en aura, plus vite on obtiendra une semence utilisable. Il est prudent de faire cette opration de slection rgulirement pour maintenir ainsi un stock pur de scurit sans attendre qu'un % de contaminant (droites par exemple) trop lev rende l'opration de slection difficile.

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6) NOURRITURE MINERALE DE LA SPIRULINE

Bien que la nourriture principale de la spiruline soit le carbone, il ne sera question dans ce chapitre que de la nourriture non carbone, seulement minrale. Pour la nourriture en carbone voir 7.8. Le milieu de culture initial permet une croissance de la spiruline jusqu' une concentration en spiruline voisine de 1 g/l (sans nitrate) 2 g/l (avec nitrate), mais mieux vaut remettre dans le milieu les lments nutritifs absorbs par la spiruline sans attendre l'puisement du milieu. Ajouter l'ure (et le cas chant le CO2 et/ou le sucre comme apport de carbone) quotidiennement en fonction de la rcolte dsire ou escompte dans la journe, les autres nutriments pouvant n'tre ajouts qu'une fois par semaine, voire une fois par quinzaine. Veillez mettre l'ure (et le cas chant le sucre) tt dans la journe, juste aprs la rcolte et en respectant la rgle donne au N.B. c ci-dessous. L'utilisation du nitrate n'impose pas les mmes prcautions que l'ure mais celle-ci est moins chre et plus efficace, elle rduit la formation de grumeaux (important surtout chez les spirales type Lonar) et elle renforce la vigueur parfois dfaillante des spirulines (sans ammonium surtout les ondules risquent de ne pas se laisser essorer facilement par pressage) ; de plus l'ure apporte du CO2 "gratuit". L'ammoniaque peut videmment tre utilise au lieu d'ure, mais avec encore plus de prcautions : l, le goutte--goutte est pratiquement ncessaire. Par contre l'ammoniaque a un avantage sur l'ure : celle-ci ne s'hydrolyse que petit petit (une dose trop forte d'ure peut constituer une "bombe retardement" en produisant de lammoniac). Le bicarbonate d'ammonium est une possibilit intressante pour apporter la fois de l'azote et du CO2 "gratuit" (double de l'ure). Tous les ingrdients doivent tre dissous avant d'tre introduits dans la culture et pendant l'introduction la culture doit tre sous agitation. En se basant sur la composition lmentaire de la spiruline donne en Annexe A19 et les indications du 4.1 sur le milieu de culture, il est facile de calculer les besoins en nourriture minrale selon les produits (engrais) dont on dispose. On tient compte

de la puret chimique des produits, des pertes en cours de production (photoxydation, consommation par les parasites, pertes chimiques et physiques) et lors de la rcolte. On ne tient pas compte des apports par l'eau d'appoint sauf si l'vaporation est trs forte et si l'eau d'appoint est trs minralise. A titre d'exemple pouvant tre utilis assez couramment, voici une formule calcule pour le cas d'une eau non ferrugineuse et de faible duret, pour une vaporation moyenne et pour un taux de pertes courant dans les petites exploitations: Grammes par kg de spiruline produite (compte en sec) : Ure = 300 350 g Phosphate monoammonique = 50 Sulfate dipotassique = 40 Sulfate de magnsium = 30 Chlorure de calcium = 20 Ftrilon 13 (ou Ferfol) = 4 Solution d'oligolments (selon annexe A26-2) = 50 (le chlorure de calcium peut tre remplac par 30 g de nitrate de calcium si ce produit est disponible, ou par 13 g de chaux teinte) (Le fer peut tre introduit sous forme de 50 ml de solution de fer chlat 10 g de fer/l, soit 77 g de Ferfol/litre) . N.B. a) La formule de nourriture ci-dessus n'inclut pas les besoins en nutriments correspondant aux purges de milieu de culture, qui doivent donc ventuellement tre ajouts. b) La dose de fer ci-dessus correspond 500 ppm de fer dans la spiruline ; elle peut tre ajuste la demande, certains mdecins prfrant une teneur infrieure en fer, d'autres 1000 voir 1500 ppm. Pour ces hautes teneurs en fer, l'addition d'un chlatant (EDTA, jus de carambole ou de citron) ou l'usage de fer chlat (type Ferfol ou Ftrilon) est prfrable au sulfate de fer ordinaire. Il a t souvent rapport que l'introduction du fer sous forme de sulfate est beaucoup plus efficace au goutte--goutte (si l'agitation est continue), mais cette remarque ne joue pas si l'on utilise du fer chlat. c) La dose d'ure thorique est de 240 g/kg, mais surtout aux bas pH un excs s'avre ncessaire s'il y a tendance la formation de grumeaux, peaux, etc. Un excs d'ure inutilis se transforme en nitrate ou se perd l'atmosphre sous forme d'ammoniac. Mieux vaut supprimer l'injection d'ure ds qu'une odeur d'ammoniac devient perceptible sur la culture ou, si l'on peut doser l'ammonium,

suivre la rgle donne en annexe A18 (N.B. b). L'ure est la source de CO2 la moins chre ( part l'air) et si la temprature du bassin est assez leve on arrive en consommer jusqu' 0,8 kg/kg de spiruline, la partie non consomme par la spiruline se transformant en nitrate (en consommant de l'alcalinit, selon l'quation : CO(NH2)2 + 4 O2 + 2 Na OH = 2 NaNO3 + 3 H2O + CO2); en fait, de nombreux bilans d'azote nous ont montr que simultanment il semblait y avoir "fixation" d'azote atmosphrique avec formation de nitrate supplmentaire, de sorte que l'quation globale pourrait tre plutt : CO(NH2)2 + 2 N2 + 6,5 O2 + 4 NaOH = 4 NaNO3 + 4 H2O + CO2. Nous n'avons pas encore lucid si cette "fixation" d'azote se produit aussi en l'absence d'ure, mais des indices indiquent que non. Le nitrate form peut ensuite servir de source d'azote pour la spiruline par rduction biologique avec restitution de l'alcalinit : NaNO3 + 2H2 = NaHCO3 + NH3. Le bicarbonate d'ammonium NH4HCO3 est encore mieux que l'ure car il apporte le double de CO2 ; c'est un produit potentiellement trs bon march puisqu'il est l'intermdiaire oblig dans la fabrication du carbonate de soude Solvay, mais il n'est pas disponible commercialement partout (Solvay-Angleterre en vend). Il faut en poids 2,6 fois plus de bicarbonate d'ammonium que d'ure. Voir par ailleurs ci-dessous en N.B. j (phosphate) les effets possibles d'un excs d'ammonium sur l'quilibre PO4/Mg/NH4 du milieu de culture. d) Selon la quantit et l'analyse de l'eau apporte pour compenser l'vaporation, les doses de sulfates, de magnsium, de calcium et de fer peuvent tre rduites ou supprimes. Si l'eau est trs calcaire, il peut tre ncessaire de majorer la dose de phosphate pour compenser l'ventuelle prcipitation de phosphate de calcium, en suivant la recommandation nonce propos du milieu de culture : compenser le Ca par la moiti de son poids en P ; il est recommand de faire un dosage de phosphate dans ce cas-l environ une fois par mois ou quand la culture semble dprir. e) L'usage de certains engrais agricoles dissolution lente (slow release) ou peu solubles, superphosphate, phosphate diammonique (cf alina f ci-dessous), sulfate de potassium, n'est pas recommand car ils contiennent gnralement des additifs colors et/ou odorants et des huiles qui souillent le milieu de culture, formant une pellicule grasse en surface de bassin (freinant l'absorption du gaz carbonique et la dsorption de l'oxygne). Par ailleurs les engrais de ce type peuvent contenir des mtaux lourds (notamment cadmium prsent dans les phosphates naturels) dangereux parce que rapidement absorbs par les spirulines. Ces remarques ne s'appliquent pas : ure, sulfate de magnsium, sulfate de potassium, nitrate de potassium, nitrate du Chili, phosphate mono ou diammonique, chlorure de potassium vendus comme engrais agricoles solubles, mme granuls. Le sulfate de fer agricole est de qualit douteuse du point de vue puret (aprs dissolution il ncessite au moins une dcantation ou une filtration). f) Pour utiliser le phosphate diammonique granul comme source de phosphore, si l'on n'en a pas d'autre, F. Ayala procdait comme suit : dans un litre d'acide chlorhydrique 0,5 N (50 ml d'acide concentr 33 %, dilu dans un litre d'eau) ajouter 250 g de phosphate broy et porter l'bullition ; liminer la couche huileuse surnageant et rcuprer le liquide dcant; rpter une deuxime fois sur

les boues; mlanger les deux liquides dcants, soit environ 1,5 litres contenant peu prs 50 g de phosphore en solution utilisable, correspondant 5 kg de spiruline. Vrifier que la spiruline produite partir de cette source de phosphore rpond la norme en cadmium. g) L'apport des oligo-lments par les traces contenues dans l'eau d'appoint et les sels peut ne pas suffire. Si l'eau d'appoint est trop pure (eau de pluie par exemple), on peut utiliser du sel non raffin (plus ventuellement un peu d'argile et/ou d'eau de cendres) afin d'apporter des oligo-lments, sans oublier de pratiquer les purges correspondantes en cas de salinit exagre. Mais on peut aussi apporter une partie de l'azote par du nitrate du Chili (riche en oligo-lments) ou bien on peut utiliser des concentrs d'oligo-lments prpars partir de produits chimiques (cf 7.7 CULTURE - oligolments et annexe A26). h) L'apport de calcium (chaux ou mieux nitrate ou chlorure de calcium) n'est ncessaire qu'au cas o l'eau d'appoint n'en contient pas assez, ou si l'on veut une spiruline enrichie en calcium comme celle de plusieurs producteurs industriels. i) La consommation de chlorure est thoriquement de 7 g de NaCl/kg de spiruline, mais il est pratiquement inutile d'en ajouter, sauf longvit extraordinaire du milieu de culture. Il est strictement inutile d'en ajouter en cas d'utilisation d'urine ou d'eau de mer. j) Lorsque le milieu contient simultanment les ions ammonium (NH4), magnsium (Mg) et phosphate (PO4), ce qui est le cas habituel aux pH intermdiaires, les concentrations de ces ions sont interdpendantes parce que la solubilit du phosphate mixte d'ammonium et de magnsium est extrmement faible. Pour viter des dsquilibres, il faut maintenir la concentration en ammonium faible. La concentration en ammonium est automatiquement faible si l'ure est apporte par petites fractions et si le pH est lev (une partie de l'ammonium se transformant en ammoniac NH3 sous l'effet du pH lev). Il est recommand de maintenir la concentrations en Mg approximativement gale la concentration en P. En l'absence d'ammonium le phosphate de magnsium est lui-mme assez insoluble. h) Pour simplifier l'exploitation, on peut se contenter de nourrir la spiruline seulement une fois par mois mais cela entrane des fluctuations assez fortes dans la composition de la spiruline, notamment en fer. C'est pourquoi il est recommand de nourrir plutt hebdomadairement, voire quotidiennement. Si l'ure est utilise, elle doit tre apporte quotidiennement. La base de la nourriture apporter n'est pas la quantit rcolte mais celle produite par photosynthse (il y a une diffrence significative si la concentration en spiruline varie notablement). Et si l'on n'a pas de produits chimiques ? Il suffit d'ajouter 17 litres d'urine (c'est une dose moyenne puisque la concentration de l'urine est trs variable en fonction du sujet et de son rgime alimentaire) par kg de spiruline rcolte, plus le fer. L'urine apporte aussi du carbone, ce qui rduit la tendance du pH monter et permet d'augmenter la productivit de 2 g/m/jour en l'absence d'autre alimentation carbone. Cette solution n'est propose que pour rpondre des situations de survie, ou pour fournir de la spiruline destine

l'alimentation animale, ou encore pour ceux qui prfreraient une spiruline vraiment "biologique". Attention rpartir la dose rgulirement (comme pour l'ure) et ajouter l'urine juste aprs la rcolte (en tous cas pas le soir) et seulement par beau temps; en rgime de croisire, il est recommand de limiter la productivit 7 g/j/m, donc de ne pas ajouter de sucre, et de maintenir une hauteur de liquide assez leve (minimum 20 cm) et aussi une concentration en spiruline d'au moins 0,4 g/l. Pour une consommation personnelle de la spiruline produite, la strilisation de l'urine (personnelle) avant usage n'est pas une ncessit (l'auteur na jamais strilis), mais sinon elle parait indispensable au moins pour des raisons psychologiques. La strilisation peut s'effectuer par dissolution de 5 g de soude par litre quelques heures avant utilisation. Dans les pays o les parasites sont frquents (Afrique noire par exemple), il faut considrer que l'urine peut contenir certains parasites rsistant ce type de strilisation par pH lev. Par ailleurs voir les N.B. a), b) et e) ci-dessous. Une application spciale de l'utilisation de l'urine pour faire de la spiruline est le recyclage des dchets biologiques des spationautes dans les futures stations spatiales: la spiruline est le meilleur moyen la fois de retransformer le CO2 en oxygne et les dchets en nourriture. Ce procd est l'tude dans de grands laboratoires dans diffrentes parties du monde La production de spiruline "biologique" est galement possible sans recourir l'urine, en n'utilisant que des produits "naturels" (cf 4.3 MILIEU - bio) comme la trona, le nitrate du Chili, le sulfate de magnsium sous-produit des marais salants et l'acide phosphorique extrait de la poudre d'os, ainsi que les feuilles d'espces vgtales comestibles bon march. En Californie une spiruline dite biologique est dj en vente (mais la rglementation dans cet Etat est diffrente de celle en vigueur en France). Rcemment le nitrate du Chili s'est vu refuser l'agrment "bio" en Europe, alors que le Ferfol est admis. N.B. a) Comme l'urine ne contient pas de fer, son utilisation ne dispense pas d'ajouter du fer. b) L'urine utilise doit avoir une odeur et une couleur normales et provenir de donneurs sains et ne prenant pas de mdicaments pouvant entraner une toxicit pour les spirulines, comme les antibiotiques. c) On dit que le sang d'animal serait un bon aliment pour la spiruline et qu'on peut l'utiliser dose relativement importante (50 ml/l de milieu de culture). Attention aux contaminations possibles cependant. Nous navons jamais essay dutiliser du sang. d) Il est parfaitement possible de "panacher" produits chimiques et produits naturels. e) L'utilisation d'urine comme engrais unique convient surtout quand l'eau est un peu calcaire (20 mg de calcium/litre) mais pas trop calcaire ; en effet l'apport de calcium et de magnsium par l'urine est un peu faible et un appoint venant de l'eau

est le bienvenu, mais tenir compte aussi que l'urine apporte un excs de phosphore trop faible pour compenser une dose forte de calcium.

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7) CONDUITE ET ENTRETIEN DE LA CULTURE

7.1) Rcoltes
On rcolte de manire maintenir la concentration en spirulines au niveau dsir, par exemple entre 0,3 et 0,7 g/l, pas forcment tous les jours. Si le milieu est trouble, en tenir compte lors de la mesure de concentration au disque de Secchi (cf annexe A2). En l'absence de rcoltes, avec suffisamment de nutriments, la concentration en spiruline croit jusqu' l'quilibre entre photosynthse et respiration, correspondant environ 250 g de spiruline/m de bassin. Il n'est pas bon pour la culture de rester longtemps sans tre rcolte, trs haute concentration : cela peut mme tre une cause de mortalit pour elle. Inversement il n'est pas bon d'abaisser la concentration en dessous de 0,4 g/l, en tous cas de 0,3 g/l : la productivit est plus forte aux basses concentrations mais la culture y est moins stable, et la spiruline y est produite avec une teneur en phycocyanine moins leve.

7.2) Agitation
Agitation manuelle : on agite au moins 4 fois par jour, mais la frquence minimum dpend des conditions et de la souche ; elle augmente avec l'intensit de la lumire et de la flottation. Au milieu d'une journe trs chaude, sans ombrage, l'agitation d'une souche flottant fortement doit tre trs frquente (au moins deux fois par heure) ou mme continue. Si l'on dispose d'un mode d'agitation lectrique sans danger pour les spirulines (par exemple bullage d'air, hlice ou roue aubes), l'agitation peut tre continue (avec arrt 15 minutes/heure). Avec les pompes, il vaut mieux ne pas agiter en continu une souche spirale (type Lonar), mais seulement 15 minutes/heure. L'agitation continue est possible avec les ondules (Paracas). La nuit l'agitation peut thoriquement tre arrte, mais quand c'est possible deux ou trois agitations nocturnes sont bnfiques pour diminuer les risques de grumeaux et amliorer l'oxygnation du milieu (auto-puration). L'agitation continue nocturne, quand elle est possible, favorise nettement l'auto-puration du milieu. La productivit dune culture intensive dpend fortement de lagitation, sans que nous soyons encore en mesure de rellement quantifier cet effet. Plusieurs exprimentateurs rapportent des productivits records (jusqu 30, voire 40 ou 50

g/jour/m !) dans des conditions dagitation excellentes, en gnral en petits bassins, en tubes ou au laboratoire.

7.3) Evolution du pH
Un bon test de croissance d'une culture est son augmentation de pH. En l'absence de supplmentation en carbone et s'il n'y a pas de carences minrales, pour une basicit voisine de 0,1 N, une hauteur de liquide voisine de 20 cm et une concentration en spiruline voisine de 0,4 g/l, avec temprature et ensoleillement levs, l'augmentation de pH normale se situe au voisinage de 0,1 unit/jour dans la gamme de pH entre 10 et 10,6. Une autre faon de vrifier que la photosynthse est active est d'observer le dgagement d'oxygne la surface du bassin en l'absence d'agitation.

7.4) Ombrage
En l'absence de supplmentation en carbone le pH peut monter 11,5 et plus, mais la spiruline ne peut supporter longtemps un pH suprieur 11,3. Un demi-ombrage suffit gnralement maintenir le pH en dessous de 11. Si l'agitation est bonne, on peut empcher la monte excessive du pH sans mettre d'ombrage en maintenant un stock de spiruline lev (> 150 g/m), c'est--dire une concentration en spiruline suprieure environ 0,7 g/l pour une hauteur de liquide de 20 cm, ce qu'on peut appeler faire un "auto-ombrage". L'ombrage est par ailleurs ncessaire quand la temprature de la culture est trop basse (< 10C) par grand soleil, sinon la culture peut facilement mourir par photolyse. Il faut ombrer aussi pour conomiser l'eau en saison sche, ou si la temprature a tendance dpasser 38C dans la culture. Une culture sous ombrage est plus facile rcolter et la qualit de la spiruline est amliore (plus riche en pigments), moyennant une diminution de la productivit qui peut rester modeste.

7.5) Niveau d'eau

Veiller ajouter de l'eau dans le bassin (de prfrence le soir) pour maintenir le niveau voulu. Ne pas ajouter plus de 10 % du volume du bassin par jour. Si l'eau d'appoint est trs calcaire il se produit des boues minrales dans le bassin et la longue il est prfrable de les liminer. L'eau d'appoint contient aussi des sels solubles qui augmentent peu peu la salinit (de mme l'utilisation de nitrate comme source d'azote ou de bicarbonate comme source de carbone augmente la salinit) ; ceci peut obliger pratiquer des purges pour empcher la salinit de dpasser 30 50 g/l. Mais l'eau d'appoint (sauf l'eau de pluie) apporte aussi des oligolments bnfiques. Si l'vaporation est notable et si l'eau d'appoint est trs calcaire, du carbonate de calcium prcipite et se retrouve dans les boues, et cela a pour effet de baisser le pH et la basicit ; dans ce cas de figure il y a risque de coprcipitation de

phosphate de calcium : surveiller de prs la teneur en phosphate et la basicit du milieu et rajouter du phosphate et du bicarbonate au besoin. Dans les bassins ouverts, la pluie est bnfique tant qu'elle reste modre (par exemple 10 % du volume du bassin par jour), mais une dilution brusque trop forte du milieu de culture fait tomber les spirulines au fond. En fin de saison des pluies on a intrt garder le niveau maximum permis par le bassin (ce qui permettra d'conomiser de l'eau en saison sche). Si la source d'alcalinit n'est pas rare, et/ou si la pluviomtrie n'est pas excessive, on peut admettre dans le bassin toute la pluie qui tombe, en veillant pratiquer temps des purges de milieu de culture pour empcher le bassin de dborder ; ces purges se font en rcoltant sans recycler le filtrat ou en aspirant le fond pour liminer des boues, puis en remettant dans le bassin les sels correspondant au volume de milieu de culture limin. Ces purges maintiennent la qualit du milieu de culture et lui apportent des oligolments contenus titre d'impurets dans les sels d'appoint. Si on ne dispose pas de concentr d'oligolments, on peut tre amen pratiquer des purges dans le seul but d'introduire des oligolments par leau et les sels ! Un niveau d'eau lev (30 cm ou mme plus) rduit les surchauffes en climat trs chaud et est probablement utile pour faciliter l'autopuration du milieu de culture. Un niveau bas est intressant pour rduire la dpense en milieu de culture, mais ncessite un fond bien plat (avec un point plus creux pour faciliter la rcolte du flottant la bassine ainsi que la vidange), des purges suffisantes pour maintenir la qualit du milieu et une surveillance accrue du pH, de la temprature et de la concentration en nutriments pour ne pas dpasser les limites autorises. En bassin ouvert, si des purges ne sont pas ncessaires pour maintenir la qualit du milieu et si les bords sont suffisamment hauts, le niveau et la basicit varient en cours d'anne : s'arranger pour que le niveau minimum soit suffisant et pour que la basicit reste suffisante ( > 0,05) lors du niveau maximum.

7.6) Fer
La spiruline est un aliment des plus riches en fer. Il faut donc lui en fournir beaucoup, et sous une forme assimilable ce qui n'est pas vident cause du pH lev du milieu de culture. Si la spiruline n'est pas assez vert fonc, cela peut tre du un manque d'azote, mais aussi un manque de fer. Mme une spiruline bien verte peut se rvler faible en fer l'analyse (par exemple 200 ppm). Parfois, mais rarement, il y a assez de fer dans les sels et/ou l'eau utiliss. Il peut mme y avoir trop de fer dans leau si elle est ferrugineuse. Le moyen classique d'introduire du fer est de prparer une solution de fer 10 g/l de la manire suivante : dans 1/2 litre d'eau mettre avec 50 g de sulfate de fer heptahydrat + 20 ml d'acide chlorhydrique concentr ; complter un litre d'eau. [ N.B. La puret des sulfates de fer vendus pour traiter les gazons est souvent inadquate: il faut alors filtrer ou dcanter la solution ou recourir du sulfate pur]. L'emploi de 100 ml de solution de fer 10 g/l par kg de spiruline produite correspond 1000 ppm de fer. En pratique 50 ml suffisent gnralement .

On peut aussi faire tremper 50 g de clous rouills dans un litre de vinaigre additionn du jus de 4 citrons ou caramboles ; conserver en rcipient non hermtique (dgagement d'hydrogne), en agitant de temps en temps : on obtient au bout de deux semaines un "sirop de clous" environ 10 g/l de fer, qui peut tre utilis comme source de fer "biologique". Il est toujours prfrable d'introduire la solution de fer faible dbit dans le milieu de culture (au goutte--goutte si possible) et sous agitation. Voici une procdure convenable : faire une pr-dilution de la solution de fer (100 ml dans 10 litres d'eau), bien agiter et ajouter lentement (si possible au goutte--goutte) dans la culture en l'agitant trs bien (cette agitation est essentielle). Un chlatant comme l'EDTA rend le fer plus assimilable par la spiruline, mais rend galement le fer de la spiruline plus assimilable par l'organisme humain (cf BIBLIOGRAPHIE - Manoharan). L'emploi d'environ 50 mg de sel disodique de l'EDTA par litre de milieu de culture initial permet de porter facilement la teneur en fer de la spiruline 1000, voire 1500 ppm (ce qui est d'ailleurs jug excessif par certains mdecins); on peut ensuite rajouter un peu de chlatant de temps en temps. Les jus de citron (acide citrique) et surtout de carambole ont un pouvoir chlatant pour le fer, de mme que certains extraits aqueux de terre vgtale ou d'argile striliss par tyndallisation (ports 10 minutes 80C deux fois 24 heures d'intervalle). On peut aussi utiliser comme apport de fer des produits commerciaux contenant du fer chlat, comme le Fetrilon 13 ou le Ferfol 13 % de fer chlat l'EDTA (ce qui correspond un atome de fer par molcule de sel disodique de l'EDTA cristallis avec 2 H2O). Le Squestrne 100 SG 6 % de fer chlat l'EDDHA, rput plus efficace que l'EDTA pH lev, a l'inconvnient de fortement colorer en rouge le milieu de culture et n'est pas recommand. Le sang serait aussi une source de fer "biologique" rpute trs assimilable ( 9 g/l), mais nous ne l'avons pas essay. La dose de fer apporter est un sujet de discussion. Une dose moyenne de 500 ppm parat convenable. Il est possible, en cas de besoin, d'obtenir des spiruline extrmement riches en fer (jusqu' 5000 ppm).. Plus on ajoute le fer rgulirement plus la teneur en fer de la spiruline sera rgulire. Si on n'ajoute le fer (chlat) qu'une fois par mois, par exemple, la teneur en fer de la spiruline juste aprs l'ajout sera trs forte (par exemple 1000 ppm), alors qu'elle sera faible juste avant l'ajout (par exemple 300 ppm). Un article rcent de Puyfoulhoux B. et al. (2001) cf BIBLIOGRAPHIE - Puyfoulhoux tend prouver que la biodisponibilit du fer de la spiruline est quivalente celle de la viande.

7.7) Oligolments
Au lieu de compter sur l'eau d'appoint et les sels pour apporter les oligolments ncessaires la croissance de la spiruline, il peut tre plus sr et mme plus conomique de les apporter par une solution concentre toute prte (de cot trs

faible). L'ajout d'oligolments semble un facteur positif pour assurer une bonne rcoltabilit de manire habituelle. L'apport au moins des oligolments majeurs (bore, cuivre, manganse et zinc) parait recommand en cas de faible taux de renouvellement du milieu sur une longue priode. Le risque de dpasser la dose maximale permise pour un oligo-lment qui serait dj prsent en quantit notable dans l'eau ou les sels utiliss est faible si la solution d'oligolments est ajoute au prorata des rcoltes, concurrence par exemple du quart ou de la moiti des besoins thoriques. Il serait plus sr de n'ajouter que ce qui manque dans le milieu de culture, mais cela obligerait utiliser des moyens analytiques hors de porte de l'artisan. Il existe diffrentes formules d'oligolments. La plus cite est celle du milieu Zarrouk (cf Annexe A18) mais elle parait inutilement complique, tout en tant incomplte.. L'apport de slnium se fait gnralement par le slnite de sodium, de manipulation dlicate car trs toxique, que nous prfrons viter. Faut-il ajouter du cobalt ? C'est un sujet de discussion li au fait que la vitamine B12 (la cyanocobalamine, qui contient du cobalt) est abondante dans la spiruline, alors que certains rglements limitent l'ingestion de cette vitamine ; par ailleurs la vitamine B12 de la spiruline serait riche en "analogues de B12" dont il faudrait, selon certains, se mfier. Des claircissements scienifiques sur ce sujet sont souhaitables. De toutes faons le cobalt ne semble jamais tre dficitaire dans le milieu de culture. La formule "J.P. Jourdan" omet donc le cobalt. Il y a un bon consensus sur l'intrt d'une dose majore de zinc (incluse dans la formule "J.P. Jourdan"). Un autre moyen d'introduire du zinc, propos par J. Falquet, est d'ajouter 20 g de sulfate de zinc heptahydrat aux 50 g de sulfate de fer dans la prparation de solution de fer rapporte au prddent. Une dose de 500 ppm de zinc dans la spiruline serait convenable (il est possible de multiplier par 10 cette dose en cas de besoin). Il y a un peu de nickel dans la spiruline, mais on ignore si ce mtal doit tre considr comme un oligolment bnfique ou s'il est simplement absorb: il n'a pas t inclus dans la formule "J.P. Jourdan" en raison de risques possibles de toxicit sur l'homme.

7.8) Comment augmenter la productivit par apport de carbone

L'aliment principal de la spiruline est le carbone dont la source normale est le gaz carbonique. La mthode de culture la plus simple, o la nourriture carbone vient de l'air (qui contient du gaz carbonique, mais extrmement dilu), prsente une productivit modeste, mais qui, exprime en protines, reste trs suprieure celle des meilleures cultures agricoles ou horticoles, et qui, exprime en calories alimentaires, leur est quivalente, et ceci sans consommer plus d'eau, ou mme nettement moins. L'absorption du CO2 atmosphrique se fait nuit et jour, indpendamment des variations quotidiennes du temps, lequel n'influe donc pas sur la productivit moyenne de ces cultures ; cette dernire n'est pas non plus affecte

par une temprature exagre la nuit (le pH baisse cause de la respiration nocturne, mais sans perte de CO2, qui sera utilis plus tard). Dans ces cultures on maintient le pH vers10,6 ou moins en jouant sur l'ombrage, et lintensit de lagitation nest pas critique. Si l'atmosphre du bassin communique avec une source de CO2 dans l'air, comme un compost en fermentation, une table, une combustion de gaz propre ou encore une source d'eau gazeuse, le pH du bassin par beau temps sera plus bas et la productivit augmentera sensiblement. Mais il est aussi possible d'augmenter la productivit par beau temps, de la faire passer par exemple 12 ou 15, voire 20 g/jour/m, si lagitation est suffisante, en injectant du gaz carbonique pur directement dans la culture pour baisser son pH 10 ou moins. La consommation de CO2 est de l'ordre de 2 kg/kg de spiruline (thorie = 1,71). Le gaz est amen sous un morceau de film plastique tendu sur un cadre flottant sur le bassin, formant comme une "cloche" ou une "tente" quand le gaz s'y accumule. La surface du cadre flottant doit tre de 3 % de la surface du bassin. On rgle le dbit de gaz pour ne pas en perdre trop par les bords du cadre. Eviter l'entre de bulles d'air et purger une fois par jour l'oxygne qui s'accumule sous le plastique. On a intrt faire buller le gaz au fond du bassin travers un diffuseur donnant des bulles trs fines, ou mme au bas d'un puits pratiqu au fond du bassin (si la hauteur de barbotage est suprieure 30 cm on peut se passer de la cloche flottante en film plastique). A noter qu'on obtient un meilleur rendement d'absorption du CO2 la nuit en raison de l'absence de dgagement d'oxygne dans le milieu de culture. Une autre faon d'injecter le gaz est de l'introduire dans un venturi la sortie d'une pompe et de faire parcourir l'mulsion un ou deux mtres de tuyau. Si l'on ne dispose pas de gaz carbonique en cylindres mais d'une fermentation alcoolique proximit du bassin de spiruline, il est assez facile de capter le gaz carbonique pur produit par la fermentation, mais sa pression sera trop faible pour passer travers un diffuseur et la surface du cadre flottant devra tre majore de moiti, moins d'utiliser un compresseur d'aquarium ou une pompe d'aquarium munie d'un dispositif aspirant mulsionneur de gaz. Au lieu de gaz carbonique on peut utiliser du bicarbonate, mais alors il faudra pratiquer des purges pour maintenir la salinit un niveau acceptable (densit voisine de 1015 g/l) et rajouter les lments du milieu de culture (autres que le bicarbonate) correspondant au volume purg. Il faut environ 2 6 kg de bicarbonate par kg de spiruline, selon la productivit souhaite. Cette mthode est trs pratique ; elle vite notamment d'avoir surveiller le pH. Les purges prvues au 7.5 comptent dans le total des purges effectuer. On peut simplifier la procdure de purge en incluant dans la nourriture des spirulines les sels perdus dans la purge : il suffit alors de remplacer le volume purg par le mme volume d'eau ; la formule de nourriture fournie par les programmes de calcul en Annexes A27 et A30 est tablie sur cette base. La pratique des purges demande des prcautions vis--vis de l'environnement (voir 4.5). Si l'vaporation est notable et si l'eau d'appoint est trs calcaire, du carbonate de calcium prcipite et se retrouve dans les boues, et cela a pour effet de rduire les purges et de diminuer la consommation de bicarbonate, moyennant une augmentation de la quantit de boues minrales qui, elles, devront tre limines ; dans ce cas de figure il y a risque de coprcipitation de phosphate de

calcium : surveiller de prs la teneur en phosphate dans le milieu et rajouter du phosphate au besoin. La proximit d'un lac naturel sodique offre une trs intressante possibilit : celle d'y envoyer les purges et d'y puiser de quoi les remplacer. En gnral les lacs sodiques sont un pH voisin de l'quilibre avec l'air, c'est--dire proche de 10. Le pompage d'eau du lac dans la culture pH 10,5 lui apporte donc du CO2. L'eau du lac doit tre filtre (par exemple sur filtre sable) avant d'tre admise dans la culture, pour ne pas risquer de la contaminer. Si sa composition n'est pas correcte pour la spiruline, il convient de la corriger par les apports ncessaires (en gnral ce sera de l'ure et du fer) et de la diluer si sa salinit est trop leve. Les purges recycles au lac y sont pures biologiquement par un processus naturel. Le fait de disposer de CO2 pratiquement gratuit permet de faire des apports de carbone importants et de pousser la productivit par beau temps facilement 12 g/jour /m (moyennant un pompage de l'ordre de 3000 litres par kg de production, pour une salinit de l'ordre de 13 g/l). Le sucre constitue une autre possibilit d'introduction de nourriture carbone (BIBLIOGRAPHIE.htm - Jourdan1996). Sa consommation thorique, en l'absence d'autres sources de carbone, est de 1,11 kg/kg. Le poids de sucre qu'un bassin est capable d'oxyder dans la journe est du mme ordre que sa production de spiruline : c'est la dose ne pas dpasser de toutes faons. Ajouter le sucre le matin, les jours de beau temps seulement, afin de ne pas provoquer d'odeurs de fermentation, un mauvais rendement de transformation du sucre en CO2 et une production de boues flottantes excessives (cf 7.15 : boues), surtout si le milieu contient d'autres matires organiques. Pour que le sucre puisse fermenter en produisant du CO2, il est souvent ncessaire que le pH soit infrieur 10,8 (mais j'ai vu au moins une fois le sucre baisser rapidement le pH d'une culture qui avait atteint 11,1). Si les ferments ont t striliss par un pH trop lev, rensemencer la culture avec un "levain" prlev sur un autre bassin. Commencer "sucrer" ds que le pH atteint 10,4 ; il faut deux jours pour en voir l'effet ; rgler ensuite l'apport de sucre pour maintenir le pH autour de 10,4; une dose moyenne de 0,6 kg/kg de spiruline suffit en gnral, par beau temps. En fait il est recommand de ne pas dpasser la dose de 6 g de sucre/m/jour de beau temps (et mme de prfrence 3) si l'on veut viter des effets secondaires indsirables comme une turbidit excessive du milieu de culture et des difficults de rcolte pouvant aller jusqu' l'impossibilit d'essorer la biomasse par pressage, surtout en dbut de priode de sucrage. Ces difficults peuvent provenir d'un manque d'azote (provoquant une surproduction d'exopolysaccharides) du la consommation d'azote par les ferments ; en dbut de sucrage, il est donc bon de majorer l'ure. La teneur en protines de la spiruline obtenue avec le sucre est rigoureusement identique celle d'une production au CO2. Le sucre peut tre remplac par de la canne sucre crase, raison de 7 kg/kg de sucre (laisser tremper la canne une journe ou plus dans le bassin puis la retirer) ou par du jus de canne. Eviter d'utiliser la mlasse, trop impure ; par contre le miel ou le glucose pur seraient excellents s'ils taient moins chers. Le sucre peut aussi tre apport par divers produits en contenant comme le petit lait (ne pas dpasser la dose de 4 litres par kg de spiruline). Il peut aussi tre remplac par des feuilles de plantes fraches : des feuilles vertes mises tremper dans la culture (dans un filet de prfrence) subissent une attaque par le milieu basique qui dissout en quelques

jours tous leurs lments sauf la cellulose, ce qui constitue un moyen de nourrir la spiruline en carbone et aussi en lments minraux. Les feuilles doivent tre despces vgtales choisies pour leur non-toxicit et leur facilit de dissolution ; choisir de prfrences des plantes comestibles mais peu prises donc bon march comme l'ortie. A noter que le sucre et les feuilles forte dose provoquent une augmentation de la turbidit du milieu, dont il faut tenir compte lors de la mesure de la concentration par le disque de Secchi. Une telle culture est moins "propre" : plus de boues, filtration moins rapide, et risque plus grand de microbes pathognes devenus rsistants aux pH levs. Le remplacement du sucre par le glucose permet thoriquement de rduire les inconvnients du sucre. Le glucose est en effet rput tre directement assimilable par la spiruline ou bien il peut tre directement oxyd par l'oxygne de photosynthse : les ferments deviendraient inutiles, d'o une culture plus "propre" et filtrant mieux, et possibilit de travailler pH > 10,8 si on le dsire. La seule fois o nous avons voulu utiliser du glucose commercial pur la dose de 1 kg/kg il s'est en fait comport peu de chose prs comme le sucre ; au bout de 15 jours le pH tait bien maintenu 10 mais la turbidit du milieu de culture tait monte Secchi noir = 6 cm (la filtration restant facile). Cette turbidit disparat quelques jours aprs la rduction ou la suppression de l'ajout de glucose. Il semble que le glucose renforce la sant de la spiruline. Il faut mentionner l'apport non ngligeable en CO2 de l'ure, qui est mme la source de CO2 la moins chre. Voir au 6, N.B. c les prcautions d'emploi indispensables. Rappelons qu'en cas de nourriture de la spiruline par l'urine, celle-ci apporte du carbone supplmentaire quivalent 2 g de spiruline/jour/m. Les boues de fond de bassin elles-mmes sont petit petit oxydes, contribuant ainsi apporter du CO2. Enfin mentionnons qu'il est parfaitement possible de panacher les diffrentes sources de carbone. D'une manire gnrale il est recommand de ne pas chercher maintenir des productivits records, parce qu'elles augmentent la vitesse de salissure du milieu de culture et, semble-t-il, la frquence des mutations ; faible productivit le milieu a plus de possibilit de s'autopurifier. De toutes faons, les alas du temps et la faiblesse de lagitation font que la productivit moyenne ne dpasse gnralement pas 7 g/jour/m sur une saison de production.

7.9) Exopolysaccharide (EPS)

La spiruline scrte un exopolysaccharide sulfat (une espce d'alginate), qui forme comme une capsule la surface externe des spirulines puis est peu peu relch dans le milieu de culture o il se dissout dabord en le rendant plus pais et finit par former des peaux ou des grumeaux jaune-bruns de taille variable, microscopiques (visibles au microscope aprs coloration du milieu l'encre de Chine, l'EPS ne se colorant pas) ou visibles l'oeil nu. Il est probable que le fait de ne pas rcolter beaucoup, en laissant monter la concentration en spiruline, augmente

le passage dEPS dans le milieu. Les grumeaux ou peaux d'EPS sont plus denses que le milieu de culture et peuvent se dposer au fond du bassin sous forme de boues, puis finalement s'en dtacher en se chargeant de bulles de gaz de fermentation et flotter ; le tamis de rcolte arrte les amas suffisamment gros. La production normale d'EPS bas pH et sous forte lumire est de l'ordre de 30 % de celle de la spiruline, mais il semble se former encore de l'EPS des pH trs levs ; s'il y a carence d'azote, la photosynthse produit exclusivement de l'EPS (Cornet J.F., 1992). Mme en prsence de nitrates, la carence en ammonium parait favoriser la formation d'EPS, surtout si les conditions de luminosit et de temprature sont insuffisantes pour la rduction des nitrates. En prsence d'ammonium la protinognse est ralentie par une temprature insuffisante, mais moins qu'avec nitrates seuls. La carence en fer semble aussi gner la protinognse et donc favoriser l'EPS. D'aprs le rapport Melissa 2004, page 199, une concentration en azote ammoniacal suprieure 65 ppm avec un clairement suprieur 33 W/m (niveau trs faible !) favorise la formation d'EPS et la formation de grumeaux ; de fait chez Cdric Lelivre en juillet 2005 des grumeaux se formaient dans une culture 2,5 g de KNO3 + 80 mg d'ammonium, bien ensoleille. Pour lutter contre l'excs d'EPS et les grumeaux il faut de l'ammonium, mais pas trop : une dose de 3 15 ppm est convenable. L'idal serait d'alimenter en ure (ou ammoniaque) au goutte-goutte. Il est vident qu'une production forte d'EPS est gnante, non seulement parce que c'est une perte de rendement, mais parce qu'elle salit le milieu de culture et conduit des difficults de rcolte. L'EPS est biodgradable plus ou moins rapidement selon les circonstances, ce qui limite la quantit qui se retrouve dans la spiruline rcolte. Une spiruline 60% de protines contiendrait 30% d'EPS (Rapport Melissa 1996, page 90). La prsence d'une certaine quantit d'EPS parait faciliter la rcolte. Avec une souche spirale, l'excs d'EPS entrane parfois la floculation de spirulines avec formation de peaux ou grumeaux verts flottants. Ces derniers, lors de la rcolte sont facilement retenus par le tamis sur lequel ils se rassemblent en agglomrats faisant immdiatement "la boule": s'il n'y a pas simultanment de boues flottantes, on peut les joindre la biomasse rcolte en les tamisant l'aide de l'extrudeuse en remplaant sa filire par un tamis ; la qualit de la spiruline ainsi rcolte est un peu moins bonne que la normale (une analyse faite en juin 1999 sur le produit sch a donn 52 % de protines et un peu trop de microorganismes arobies). On pourrait craindre que la formation de grumeaux augmente le % de droites : l'exprience, lors d'une norme production de grumeaux (octobre 1999) nous a montr que non. L'augmentation du pH et de la temprature, l'ajout de fer (s'il y a carence) et surtout l'ajout d'ure combattent efficacement ces peaux et grumeaux ; suivre la rgle : "forcer l'ure s'il y a des grumeaux verts ou des peaux flottantes, baisser l'ure s'il y a odeur d'ammoniac". Une brusque dilution et/ou une brusque diminution du pH peuvent aussi provoquer la floculation des spirulines spirales en grumeaux verts flottants. Un excs d'EPS semble conduire une impossibilit d'essorer la biomasse par pressage, alors qu'un dfaut d'EPS semble conduire une biomasse trs collante mais facilement essorable.

Les peaux d'EPS peuvent tre confondues avec des amas d'algues trangres comme la microcystis trs toxiques, d'o ncessit de faire des tests de toxicit en cas de doute, bien que nous n'ayons jamais vu de cas de toxicit avre. Des publications semblent montrer que les polysaccharides (endo et/ou exo) de la spiruline ont des proprits thrapeutiques intressantes : en attente de confirmation.

7.10) Anomalies
En cas de faible croissance alors que tout est bien par ailleurs, il est bon de vrifier la teneur en phosphate du filtrat et, si elle est faible, de rajouter du phosphate ; et si on n'a pas de test phosphate on peut tenter de rajouter du phosphate pour ranimer la croissance. Ceci s'applique essentiellement si l'eau utilise est trs calcaire, car le phosphate de calcium a tendance prcipiter. Si une culture vire au brun-jaune kaki sans que la photosynthse s'arrte, il y a certainement un manque d'azote. L'excs de lumire, surtout froid ou en l'absence d'agitation, ou encore trop faible concentration en spiruline, ou le maintien dun pH > 11,3 sur une priode longue produisent une dcoloration, puis la destruction progressive de la spiruline. Si trop de spirulines ont t casses, ou dtruites, le milieu de culture devient sale (trouble, moussant jaune, ou un peu visqueux, ou "blanc" comme du lait dilu, ou au contraire brun, ou malodorant), fermente (dgagement de bulles mme la nuit) et/ou la filtration et/ou le pressage lors des rcoltes deviennent difficiles, voire impossibles. En gnral la culture peut gurir d'elle-mme en une trois semaines, de prfrence au "repos" dans des conditions de lumire et de temprature douces, condition qu'elle ne soit pas carence (en azote et en fer notamment). La pratique des purges du milieu peut aider la rcupration de la culture ; un rensemencement est particulirement efficace. Si le redmarrage ne se fait pas, le milieu est probablement devenu toxique pour les spirulines : vidanger. Une vidange totale de temps en temps est un moyen puissant, mais coteux, pour viter des anomalies de culture. Si la culture contient beaucoup de spirulines casses en petits fragments, cela peut tre du un excs de lumire (surtout matinale) ou une agitation trop brutale, ou encore un manque de potassium. Des spirulines anormalement longues peuvent tre signe d'un manque de fer, moins qu'il s'agisse d'une culture en croissance trs faible. Les spirulines de certaines souches (spirales par exemple) flottent habituellement fortement la surface du milieu de culture, tandis que d'autres (ondules, droites) restent plus volontiers dans la masse de la culture (mais flottent quand mme normalement). Si les spirulines tombent au fond du bassin, c'est souvent le signe qu'elles sont sous-alimentes en azote ou en fer; un changement brusque de pH ou de salinit peut aussi faire tomber les spirulines au fond, par exemple une grande pluie qui double le volume d'eau. Une temprature trs basse a le mme effet. Les spirulines au fond du bassin sont en grand danger de mourir et de se transformer en boues organiques brunes : pour augmenter leurs chances de survie il faut les remettre en suspension le plus frquemment possible. De mme la partie suprieure de la couche flottante est en danger de mort par photolyse (brunissement ou

blanchiment) en cas d'ensoleillement trop fort et trop prolong sans agitation suffisante. Les spirulines spirales ont assez souvent tendance s'agglomrer en grumeaux verts lorsque la production d'EPS est abondante ; ces grumeaux flottent s'ils sont trs riches en spirulines, contrairement aux boues brunes d'EPS. Mais si la proportion de spirulines dans les grumeaux est faible par rapport l'EPS (grumeaux de couleur tirant vers le brun), ils ne flottent plus et peuvent rester entre deux eaux et gner la rcolte en colmatant rapidement le tamis. Il peut arriver que la spiruline elle-mme (y compris de type ondul) flocule en minigrumeaux verts (comportant peu d'EPS) sous l'effet de particules minrales trs fines comme du carbonate de calcium en cours de prcipitation ou bien d'un excs de certains ions. Une dilution du milieu peut alors s'avrer bnfique. Pour contrer la tendance aux grumeaux il est prudent aussi d'agiter le bassin 2 ou 3 fois en cours de nuit. Des boues brunes remontent la surface, et flottent passagrement en priode de photosynthse active, surtout quand on agite le fond, mais normalement elles retombent au fond avant le lendemain matin. On peut les liminer par tamisage (puisette ou filet). La flottation nocturne de ces boues est due la fermentation anarobie d'une couche de boues trop paisse et manquant d'oxygne (hypoxie, anoxie), situation qui demande plusieurs jours pour se gurir (agiter plus frquemment les boues, et/ou en enlever la majorit). Le remde recommand est de transfrer le bassin dans un autre et de le nettoyer. Les boues sont un mlange de minraux insolubles (carbonates et/ou phosphates), de produits de dcomposition de spirulines mortes (contenant de la chlorophylle A et surtout des carotnodes qui donnent aux boues une couleur brune caractristique), d'EPS et de microorganismes biodgradeurs ; on y trouve aussi des filaments apparemment incolores, de diamtre beaucoup plus petit que les spirulines (valu 1,5 microns), mais de longueur du mme ordre. Une observation sous fort grossissement permet de distinguer des cellules dans ces filaments, qui apparaissent parfois verts ; il pourrait donc s'agir d'une algue. On n'a jamais dtect de toxicit sur des chantillons contenant ces filaments avec le test aux artmias. L'apparition de ces filaments "incolores" se fait trs vite dans les agglomrats contenant des rsidus de spiruline morte, et ceci mme en eau douce : si on met de la spiruline dans de l'eau douce, elle ne survit pas longtemps et se dcompose en boues brunes constitues de "pelotes" de filaments incolores trs serrs. La couleur des boues des bassins tire parfois sur le rose, mais elle est en gnral brune, couleur carotne. On trouve aussi frquemment dans les boues des cristaux en aiguille, souvent rassembls en faisceaux: il s'agit de phosphate mixte d'ammonium et de magnsium, soluble en milieu acide ; il arrive que ces cristaux soient entrans dans la couche flottante de spiruline et rcolts avec elle, mais ils se redissoudront sous leffet de lacidit stomacale. Pour empcher la formation de ces cristaux, il faut viter des doses trop fortes de phosphate, magnsium et/ou ammonium.

Une mauvaise odeur correspond gnralement un mauvais tat ou une rcolte insuffisante, ou une fermentation anarobie ou encore une addition excessive d'ure, de sucre ou d'urine. Une odeur modre d'ammoniac, correspondant 20-30 ppm d'ammoniac dans le milieu, n'est pas grave mais alerte sur un danger imminent possible. L'usage de sucre comme apport de carbone provoque parfois des odeurs de ferments ou de levures pas rellement dsagrables. Une culture de spiruline en bonne sant et temprature idale dgage souvent une odeur aromatique caractristique et agrable, tirant sur le granium ou la rose.

7.11) Contamination par petits animaux

Sauf protection complte du bassin, il est invitable que des insectes ou parfois de petits animaux (serpents, lzards, grenouilles, souris, escargots), des feuilles et autres dbris vgtaux tombent dans le bassin. On peut les enlever avec un filet, mais si on les laisse, ce qui n'est pas recommand, ils finiront par tre "digrs" par le milieu de culture et servir de nourriture la spiruline. Par contre certains vers et insectes sont capables de vivre dans le milieu de culture en parasites. C'est le cas des larves de la mouche Ephydra (petite mouche brune qui marche sur l'eau), des larves de moustiques, du zooplancton (rotifres, spcialement brachyonus, cyanophages et amibes capables de manger les spirulines), qui s'installent et vivent un certain temps dans le bassin: pour hter leur disparition on peut monter momentanment le pH jusqu' pH 12 puis maintenir ce pH pendant une nuit, en r-acidifiant le matin pH 10 ; mais ce choc de pH peut tuer aussi une partie des spirulines qui doivent ensuite tre mises en convalescence (ombres). Ce choc de pH nest gure efficace sur les amibes. Parfois il suffit d'une brusque augmentation de la salinit de 3 g/l pour faire disparatre les envahisseurs (spcialement les larves). On peut aussi monter la temprature 40C (avec pointes 44C). L'addition dune forte dose d'ammoniac, par exemple 100 ppm, tue les amibes mais aussi une partie des spirulines. La disparition des amibes se fait gnralement de manire naturelle en quelques jours de beau temps par bonne temprature et croissance rapide de la spiruline ; le maintien d'une concentration en spiruline pas trop leve et d'une bonne agitation favorise la disparition des amibes. En fait les amibes ne semblent cohabiter avec les spirulines que lorsque ces dernires sont affaiblies ou en croissance nulle. Par exemple dans un chantillon d'une culture en bon tat, on peut voir apparatre des amibes au bout de 24 heures de stockage en laboratoire. De mme les rotifres ne peuvent pas envahir une culture en bonne sant. En cas d'infestation par des larves, des cyanophages ou des rotifres, la rcolte reste possible car ils sont arrts par le tamis (ajuster au besoin la maille du tamis: pour les brachyonus il faut une maille de 120 ) ; on peut essayer d'liminer au maximum les larves et nymphes au tamis, ou de placer le bassin sous serre tanche ou moustiquaire. Parfois L'infestation par des larves dpend du lieu, du climat. Elle peut n'tre que transitoire. Certaines annes, elle ne se produit pas. Sous serre, le risque d'infestation est rduit ou annul. Nous n'avons jamais eu de rotifres Mialet, mais nos collgues indiens en ont eu assez souvent. A noter que les rotifres ne sont pas toxiques et ne mangent pas la spiruline spirale en bonne sant, mais

par contre se dveloppent rapidement en cas de mauvaise sant de la spiruline et finissent par envahir la culture en lui donnant une coloration rougetre. Les rotifres sont trs souvent prsents dans les cultures ciel ouvert, en petit nombre, et contribuent liminer les chlorelles et aussi les spirulines droites. Ripley Fox explique que les amibes ventuellement prsentes dans une culture ont une probabilit quasi nulle d'tre toxiques. Par prcaution, cependant, il est recommand de ne pas consommer frache la biomasse provenant d'une culture contenant des amibes. Lors du schage 65C elles sont tues de toutes faons. N.B.: 1) les moustiques mles issus des bassins de spirulines seraient striliss par le haut pH de la culture (selon une tude indienne) et les bassins constitueraient alors un moyen de lutte biologique contre les moustiques ; cette information est cependant mise en doute par le fait que des moustiques prolifraient dans le lac Nakuru avant l'introduction de tilapias justement pour les combattre, alors que ce lac tait plein de spirulines mais cohabitant sans doute avec d'autres algues 2) le zooplancton et les larves que nous avons vu cohabiter avec la spiruline n'taient pas toxiques pour l'homme. 3) les larves de moustique et les rotifres mangent les spirulines droites, mais pas les spirales type Lonar.

7.12) Contaminations par des droites ou des algues trangres

7.12.1 Droites Des "spirulines droites" apparaissent frquemment dans les cultures. Elles ressemblent aux cyanobactries Oscillatoria, dont il existe des varits toxiques (cf alina B suivant), mais nous avons vrifi que les "droites" que nous avons eues jusqu'ici sont bien des spirulines (Arthrospira platensis), d'ailleurs de composition normale, non seulement en utilisant des critres dimensionnels et morphologiques, nuance de couleur, etc., et en vrifiant leur teneur en acide gamma-linolnique (trs nettement suprieure celle des Oscillatoria), mais d'aprs une tude des "empreintes gntiques" par l'Universit de Genve cf. BIBLIOGRAPHIE - Manen. Les spirulines droites flottant moins, ou moins vite, que les spirales, on peut essayer de contrer leur prolifration en ne rcoltant pas la couche flottante mais en rcoltant la culture homogne et en grant la culture pour rduire le taux de croissance des droites. Une bonne agitation vite la photolyse des spirales, les plus flottantes donc les plus exposes au soleil, donc elle permet de rduire la prolifration des droites. Lorsqu'il y a peu de droites, la couche flottante peut les contenir toutes et on peut donc la rcolter ; mais au-del d'un certain % de droites, ce n'est plus le cas. En cas d'infestation avance, on peut essayer une rduction de l'agitation et un rensemencement massif en spirales flottantes. Les spirales ayant une tendance marque s'agglomrer en grumeaux dans certaines conditions (bas pH, basse temprature, absence d'ammonium), on pouvait craindre que la formation de

grumeaux augmente le % de droites : l'exprience nous a montr, lors d'une norme production de grumeaux en octobre 1999, que ce n'tait pas le cas. Les droites sont gntiquement de vraies spirulines mais elles ont des inconvnients dont, souvent, une difficult notoire se rcolter. Le problme n'est pas d'aujourd'hui puisquau colloque de Florence sur la spiruline, en 1980, BUSSON disait : Des formes droites apparaissent spontanment dans les cultures axniques de spiruline. Nous avons spar ces formes droites provenant aussi bien de Spirulina platensis que de Spirulina maxima. Depuis onze ans elles continuent se reproduire droites. Les "Petites Nouvelles de la Spiruline" de novembre 2002 disaient : "Les spirulines droites vaincues ? Un ml de Jean-Denis NGobo, de Bangui, du 4/11/02 donne une trs bonne nouvelle : a y est, nous n'avons plus que des spirales dans nos 3 bassins Un tlphone de Pierre Ancel le 8/11/02 nous annonce qu Koudougou (Burkina Faso) les spirulines de souche spirales type Lonar sont aussi 100 % spirales maintenant. On sait qu Madura (Inde) les droites ont disparu depuis 2001 et Mialet depuis 2000. Mais il y a encore des sites souffrant des droites, et on cherche toujours les remdes qui permettront le contrle des droites coup sr" Toutes les droites ne sont pas gnantes : il y a les "longues" qui ne gnent pas la rcolte et il y a les "endmiques", non virulentes, qui cohabitent avec les Paracas sans les envahir. Celles que nous redoutons par dessus tout sont les courtes virulentes, c'est--dire dont la vitesse de croissance est nettement suprieure celle des spirales. La seule vraie parade connue est une prophylaxie rigoureuse: vider et striliser le bassin infest et redmarrer avec une souche garantie sans droite comme celles provenant de l'Institut Pasteur ou de chez Jacques Falquet Genve. Mais pourquoi dans la nature ne trouve-t-on pas de droites ? Une explication possible : les droites ne flottant pas, ou moins, elles tombent au fond du lac et meurent par manque d'oxygne et de lumire. Autre explication possible : les larves d'insectes ou les rotifres mangent prfrentiellement les droites ; c'est l'explication avance pour expliquer la disparition de leurs droites par les gens de Madura en Inde, et qui pourrait tre applicable au cas de Koudougou o les larves se sont implantes au cours de l'anne 2002, en mme temps que disparaissaient les droites (et depuis les larves n'ont jamais disparues tandis que les droites n'ont pas r-envahi les bassins). A Pahou (Bnin) aussi on a constat une disparition des droites en mme temps qu'une prolifration de larves. Si cette dernire explication est vraie, ce

serait un argument pour ne pas mettre les bassins sous serre, puisque sous serre il n'y a pas, ou moins, de larves. Par ailleurs les serres ne favorisent pas les droites puisque de nombreux bassins sous serre fonctionnent d'anne en anne sans tre envahis par les droites (mme s'il y a, bien sr, des bassins sous serre pleins de droites). Une agitation trop faible expose plus les spirales, cause de leur flottation forte, la photolyse donc favorise indirectement les droites : dit autrement, les droites se contentent d'une plus faible agitation que les spirales ; mais une agitation trs efficace n'empchera pas les droites virulentes de dominer, si elles sont prsentes dans la culture. Concernant les ventuels "avantages" des droites : c'est vrai que certaines ont le potentiel de pousser plus vite que les spirales, mais cela ne se traduit pas forcment par une productivit accrue : la productivit est logiquement la mme lorsque le carbone est le facteur limitant dans l'alimentation (apport de carbone par l'air atmosphrique seulement). Par contre des droites virulentes, c'est--dire capables comme dans l'exemple ci-dessus d'envahir compltement une culture, permettent une production plus importante, voire trs importante, si on les alimente en carbone artificiel (CO2, bicarbonate) condition de pouvoir les filtrer et les essorer. Ceci est l'occasion de rappeler la msaventure que nous avons vcue la Socit Imade (Motril, Espagne), qui avait laborieusement slectionn une souche de spiruline (droite courte) particulirement virulente, laquelle avait reu le nom de M1 et une large publicit dans la presse locale ; elle poussait si vite que les larves, pourtant extrmement abondantes, ne pouvaient les consommer toutes, de sorte que la concentration en spiruline tait fort leve. Cette souche s'est avre irrcoltable et inessorable, et a du tre abandonne. Ceux d'entre nous qui ont connu cette triste affaire esprent que la disparition de la M1 a t totale et sont rests marqus par la phobie des droites. Auraient-ils tort ? Il ne faut pas tre sectaire : qui sait si une technologie un peu "high tech" ne permettra pas un jour de rcolter et d'essorer correctement des "M1" ? La rcolteuse mcanique tambour rotatif de Robert Nogier (Saint Paulet de Caisson, Gard) est un pas dans la bonne direction, quoiqu' encore insuffisant. Prserver des conditions faciles de rcolte avec les petits moyens artisanaux habituels nous parat prfrable. D'autre part la biomasse de droites tant trop difficile ou impossible essorer par pressage doit tre lave et goutt avant schage, et ce schage ne peut gure tre fait que par la mthode "indienne" dcrite au chapitre schage (talement en couche mince sur film plastique). Dans cette vieille affaire des droites, il faut rester trs humbles et reconnatre notre grande ignorance.

7.12.2 Etrangres
Tant que la spiruline est en croissance active, tant qu'elle est bien nourrie, rcolte, agite et pH > 9,5, d'un beau vert fonc et que le milieu est rgulirement purg, aucune espce d'algue concurrente ne russit habituellement envahir le bassin, du moins nous n'en avons jamais vu. L'apparition d'algues trangres peut toutefois se produire, par exemple l'hiver en zne tempre, et ne pas se voir. C'est pourquoi il est prudent de faire examiner (une ou deux fois par an par exemple) un chantillon

de culture dans un laboratoire quip d'un bon microscope et entran reconnatre ce qui n'est pas de la spiruline: il peut s'agir de simples chlorelles (algues vertes monocellulaires comestibles) ou d'Oocystis (grosses chlorelles), mais aussi de cyanobactries toxiques comme Oscillatoria agardhii (ressemble une spiruline droite mais de longueur de cellules double, Oscillatoria rubescens ou Oscillatoria nigri-viridis (ressemblent des spirulines droites mais de diamtre et longueur de cellules nettement plus grands et de couleur diffrente), Anabaena flos-aquae (ressemble une spiruline droite mais avec des indentations au niveau des parois entre cellules), Anabaenopsis arnoldii (ressemble une spiruline spirale mais avec des htrocystes, renflements lui permettant de fixer l'azote) ou Microcystis aeruginosa (cf Annexe A22 pour comparer les spirulines ces algues). Oscillatoria grunowiana articulata tenius, non toxique et trop petit pour rester dans la biomasse presse se voit au microscope, ventuellement aprs avoir teint l'chantillon l'encre de Chine. Si l'algue contaminante est eucaryotique (cellules noyau bien distinct), il s'agit d'une algue verte ou brune, lesquelles ne sont trs gnralement pas toxiques. Un il exerc peut distinguer facilement les principales Oscillatoria toxiques des spirulines droites. Un test biologique de toxicit, simple, a t propos par R. Fox si de jeunes larves d'artmias ne meurent aprs plus de 6 heures au contact d'une culture de cyanobactrie, celle-ci ne serait pas toxique. Pour avoir des larves d'artmias il suffit de tremper deux jours leurs ufs (qui en termes scientifiques s'appellent des cystes, et qui se vendent dans les magasins d'aquariophilie et se conservent au rfrigrateur) dans l'eau sale 30 g/l temprature ordinaire et sous faible lumire. On met de l'ordre de 10 % de culture de spiruline tester dans la culture de larves d'artmias, dans un rcipient transparent mince par exemple un "mini-aquarium" fabriqu avec deux lames de microscopes. Il est recommand de casser la membrane des micro-algues tester car les toxines ventuelles sont surtout l'intrieur (R.Fox a vrifi que les toxines d'une Oscillatoria toxique sortaient suffisamment mme sans casser la membrane, mais pour plus de scurit il vaut mieux la casser). Pour casser les membranes le moyen normal est la sonication aux ultra-sons, mais sinon on peut faire bouillir un court instant une suspension de la micro-algue. D'autres tests biologiques du mme type, encore plus simples et plus prcis sont en cours de dveloppement, et, nous l'esprons, seront mis sur le march. En cas d'infestation par l'algue verte non toxique chlorelle (par exemple suite utilisation d'eau brute non filtre, et/ou des rcoltes trop fortes), on peut essayer de jouer sur le fait que ces algues dcantent au fond o, prives de lumire, elles mourront : mais cette mthode reste dlicate d'application car l'agitation gnrale du bassin doit tre stoppe et remplace par une agitation trs modre, en surface, mais suffisante pour que les spirulines elles-mmes ne meurent pas par asphyxie ou photoxydation (l'ombrage est pratiquement ncessaire), et souvent les chlorelles ont tendance se remettre en suspension la moindre agitation, rendant cette mthode inapplicable. Par contre on peut plus facilement jouer sur le fait que la chlorelle tant trs petite passe travers le filtre : il est donc possible de rcuprer la spiruline en la rcoltant et en lavant la biomasse avec une solution isotonique (par exemple du milieu neuf), puis de rensemencer un nouveau bassin ; cette mthode s'est avre convenable si elle est pratique avec soin. L'limination des chlorelles du filtrat peut

se faire par plusieurs moyens: refiltration travers un filtre plus fin (filtre sable par exemple), strilisation par les U.V., par la chaleur ou chimique. Des traitements rpts 17 ppm d'ammoniac empcheraient la prolifration des chlorelles dans une culture de spiruline d'aprs Vonshak (BIBLIOGRAPHIE.htm Vonshak, page 91) ; la mme rfrence indique d'autres moyens pour prvenir, dans la plupart des cas, la contamination par les chlorelles : travailler une alcalinit leve (0,2), avec un milieu limpide et une haute temprature. Mais toutes ces mesures n'ont eu aucun effet chez Cdric Lelivre en 2005. La prsence de naviculas, diatomes (algues monocellulaires contenant de la silice) brunes en forme de navette, est assez frquente dans les cultures de spiruline contenant suffisamment dions silicate : laddition de 50 100 ppm de chlorure de calcium la combat efficacement en rduisant la concentration en silicate soluble, car le silicate de calcium est insoluble. Il parait prudent de faire une vidange totale ou une strilisation des bassins de temps en temps (par exemple tous les 2 ans), et de redmarrer la culture partir dune souche de qualit garantie (monoclonale) pour viter les risques dune ventuelle drive gntique de la souche cultive. Cependant cette recommandation reste un peu thorique, et probablement inutile : la grande similitude gntique des Arthrospira laisse penser que lon peut se fier de simple critres techniques (filtrabilit, rsistance, aspect, etc) pour estimer sil y a lieu de renouveler la souche [avis transmis par Jacques Falquet, Antenna Technologies le 25/02/2003].

7.13) Contamination par micro-organismes

Dans le milieu de culture, au pH lev (> 9,5) o l'on travaille, la majorit des microbes dangereux pour l'homme sont normalement inactivs en deux jours. Attention aux cultures pH < 9,5 (cultures jeunes base de bicarbonate, ou trop forte injection de CO2), qui risquent de ne pas bnficier de cet effet protecteur. Par ailleurs il a t signal le risque que certains microbes pathognes introduits dans des cultures de spiruline (sans doute par suite d'une mauvaise observation des rgles d'hygine) deviennent rsistants aux pH levs, ce risque pouvant tre augment si le sucre est utilis comme apport de carbone ; mais il n'a jamais t confirm. Il a t signal aussi l'existence de microbes ou parasites africains risquant d'tre rsistants aux pH levs : l non plus aucun cas rel n'a t observ si l'on suit des rgles normales d'hygine. Les cultures contiennent par ailleurs des microbes biodgradeurs adapts au milieu de culture et qui jouent un rle bnfique, ct du zooplancton, en purifiant le milieu et en recyclant des nutriments, tout en aidant liminer l'oxygne et en fournissant du gaz carbonique. Des germes de moisissures sont toujours prsents dans les cultures car des moisissures apparaissent rgulirement sur le flottant laiss longtemps sans agitation (comme la surface des confitures artisanales), et l'analyse bactriologique dcle couramment de 5 500 colonies/g, sans qu'aucune norme n'ait t impose dans la plupart des pays.

L'usage du sucre comme apport de carbone, ainsi que le fait de ne pas rcolter pendant longtemps, provoquent une augmentation dans la culture du nombre de microorganismes filamenteux apparemment incolores, qui gnent la filtration mais ne se retrouvent pratiquement pas dans le produit fini (N.B. ces filaments apparemment incolores semblent provenir des boues o ils sont prsents en grand nombre). Une analyse bactriologique de vrification devrait tre faite sur le produit fini de temps en temps (une ou deux fois par an ?). En raison des risques de contamination aprs rcolte, une pasteurisation du produit fini peut tre ncessaire mais elle doit tre vite si possible. Attention : dans certains pays, l'eau servant aux nettoyages, rinages, etc. pouvant tre contamine, cela peut tre une source de contamination pour le produit rcolt. Dans ce cas il est suggr l'emploi systmatique d'eau de Javel pour tous

les nettoyages, avec rinage final l'eau chlore (minimum 1 ppm de chlore actif libre : voir suivant ; soit environ 1 goutte d'eau de Javel (vendue au litre, 2,8% de chlore actif) dans un litre d'eau de rinage).

7.14) Empoisonnement chimique

Les dtergents et les sucres ne sont pas toxiques la dose de 100 ppm. Un gros excs d'ure ou d'ammoniac provoque la mort des spirulines, le milieu de culture devenant "laiteux", avec mousse jaune ou verdtre et des boues abondantes ; mais en gnral il y a assez de spirulines survivantes (sinon on peut rensemencer) pour rgnrer spontanment la culture en une dizaine de jours si l'on prend la prcaution d'ombrer. Dans une srie d'expriences on a trouv qu'une dose de 8 ppm de chlore actif apport par l'eau de Javel (hypochlorite de sodium) tue les spirulines dans leur milieu de culture pH < 9, mais qu'elles rsistent 4 ppm; pH 10,6 elles ont rsist une dose de 12 ppm (mais l'effet du chlore varie suivant la demande en chlore du milieu). Les doses algicides gnralement recommandes pour une eau pH neutre sont entre 0,5 et 1 mg de chlore actif par litre. N.B. : l'eau de Javel commerciale concentre en berlingots titre 11 % de chlore actif, l'eau de Javel ordinaire vendue au litre titre 2,8 %. Il faut savoir que le pouvoir algicide de l'hypochlorite est beaucoup plus fort bas pH qu' pH lev. Le thiosulfate (Na2S2O3, p.m. = 158) peut tre utilis pour neutraliser le chlore actif : il faut thoriquement 4,5 g de thiosulfate par g de chlore actif, selon la raction : 2 Na2S2O3 + Cl2 = 2 NaCl + Na2S4O6 (dithionate) Le thiosulfate est souvent vendu sous forme de pentahydrate (p.m. = 248), dans ce cas il en faut 7 g/g. Il est recommand d'utiliser un excs de thiosulfate, par prcaution.

7.15) Manque d'oxygne (hypoxie)

Si l'oxygne peut tre considr comme un poison pour la spiruline quand il est en forte sursaturation pendant la photosynthse active, ce n'est pas le cas en l'absence de lumire puisque la spiruline a alors besoin d'oxygne pour respirer, comme les autres microorganismes arobies prsents. La teneur en oxygne du milieu de culture en quilibre avec l'air atmosphrique est donne par la formule approche suivante: mg/l ou ppm d'oxygne = 0,616 x (pression atmosphrique en mmHg) x (1 0,0009 x altitude en m.)/(31,64 + TC) - 0,035 x (salinit en g/l), soit par exemple 8 ppm 25C. Au pic de la priode de photosynthse active la teneur en oxygne du milieu de culture peut largement dpasser la saturation et monter plus de 30 ppm. Mais la respiration de la spiruline consomme 1,2 g d'oxygne par g de spiruline "brle" soit facilement 3 g d'oxygne/m/nuit, et de l'oxygne est aussi consomm par les autres microorganismes, surtout si le milieu contient du sucre et d'autres produits biodgradables; de la sorte le taux d'oxygne dans le milieu chute rapidement aprs l'arrt de la photosynthse, surtout si la concentration en spiruline est leve. Comme l'a montr Falquet on atteint facilement l'anoxie en prsence de 100 ppm de sucre, mme en agitant la nuit. De l'oxygne de l'air se dissout dans le milieu ds que celui-ci est en dessous de sa concentration d'quilibre, mais cet effet est ngligeable s'il n'y a pas d'agitation. On value l'absorption d'oxygne de l'air, en g/heure/m, par la formule trs approche tire de l'exprience piscicole = 0,3 x (puissance d'agitation, W/m) x (concentration en oxygne l'quilibre concentration actuelle, en ppm), soit par exemple pour un bassin agit en continu avec 1 W/m et contenant 200 l/m 5 ppm d'oxygne : 11 g d'oxygne/m/nuit. Il n'est donc pas tonnant que le fond d'un bassin non agit pendant la nuit manque d'oxygne et que les boues subissent une fermentation anarobie avec formation de bulles de gaz insoluble (mthane) entranant des remontes de boues vers la surface. Pour combattre cette situation, on peut agiter le dpt de boues au balai et maintenir l'agitation de la culture la nuit, mais le plus efficace est d'enlever rgulirement l'excs de boues du fond du bassin. On enlve ces boues soit en transfrant la culture dans un autre bassin, soit en aspirant le fond par pompe ou siphon. Le mlange de boues et de milieu de culture limin peut tre recueilli dans une bassine pour dcanter les boues et recycler la majorit du milieu de culture. Les spirulines ne semblent pas souffrir en cas d'anoxie pendant quelques heures par nuit. Amos Richmond a montr que la respiration tait trs faible dans les cultures trs concentres, donc dans les couches flottantes.

7.16) Maladies
Il arrive, trs rarement, que des spirulines prsentent des dformations, ou une boursouflure, ou alors des excrtions jaunes une extrmit ou sur un ct des filaments, faisant penser un clatement de la paroi avec panchement du contenu des cellules (spirulines dites "tripes"). Dans la pratique, ces anomalies disparaissent d'elles-mmes au bout de quelques jours de marche dans des conditions normales.

7.17) Mtaux lourds

La spiruline absorbe trs facilement les mtaux lourds prsents dans le milieu de culture. Certains sont toxiques pour l'homme (mercure, plomb, cadmium). On trouvera en Annexe A17 les de teneurs maximum en mtaux lourds autorises en France dans la spiruline.

7.18) Nettoyage des bassins

Il est bon de nettoyer les bassins environ tous les 3 mois, ou quand les boues du fond sont suffisamment paisses pour donner des boues flottantes. La meilleure mthode de nettoyage est de transfrer provisoirement la majeure partie du contenu du bassin dans un bassin voisin, puis de vidanger les boues, et brosser les bords et le fond, en rinant. Attention aux recoins (plis du film plastique dans les angles). Il y a souvent un dpt blanc incrust sur le film : il s'agit dun dpt minral, qu'on peut enlever par badigeon d'acide chlorhydrique dilu, qui a l'avantage de striliser en mme temps (on y a recours surtout lors des changements de souche).

7.19) Epuration du milieu de culture

Au bout de 2 4 mois de culture (selon le niveau de productivit), sans purge, le milieu de culture, neuf et parfaitement clair au dpart, devient plus ou moins trouble, la vitesse de filtration baisse et le pressage de la biomasse devient difficile. La pratique des purges rgulires ou le remplacement total du milieu rgle ce problme mais cela peut gner lenvironnement, et coter trop cher en produits. Lexprience a montr quun milieu us peut tre partiellement rgnr par simple dcantation dans un bassin profond non agit, pendant un temps variable selon le degr dpuration dsir. Il est probable quune partie des EPS se biodgrade pendant cette opration, mais une partie se dpose au fond, sous forme dun dpt plus ou moins color qui peut tre envoy au compost. Il est facile dobtenir ainsi une turbidit trs faible (Secchi noir de plus de 30 cm), par contre il reste des produits organiques dissous (le test de filtration sur 400 g est tout de mme bon = 330 g filtrs en une minute par exemple). Avant de rutiliser le milieu pur il est bon de larer pour supprimer les bactries anarobies. Si le milieu envoy au bassin dpuration contient des spirulines, cela na pas dimportance : on pourra rcuprer la couche flottante. Cela peut mme tre un moyen complmentaire pour rduire le pourcentage de spirulines droites ou de chlorelles. Mais il y a mieux que la simple dcantation : la filtration sur filtre sable (par exemple de piscine ou d'irrigation au goutte--goutte).

Et il y a encore mieux : le milieu dcant ou filtr sur sable peut tre soumis une oxydation biologique par bullage d'air (aucun ensemencement en bactries spciales n'est ncessaire, les bactries ambiantes naturelles suffisent), suivi d'une nouvelle dcantation ou filtration pour liminer les rsidus de boues actives. Par ces moyens on arrive rduire la charge organique (DCO ou DBO) et la coloration du milieu pur suffisamment pour que son recyclage permette de ne jamais avoir besoin de renouveler le milieu de culture, comme cela se pratique dans la ferme de spiruline de BIORIGIN en Equateur (voir publication au Colloque des Embiez 2004). Signalons une possibilit d'puration chimique rapide et simple du milieu de culture us : l'ajout d'eau de Javel (environ 5 % d'eau de Javel 2,6 % de chlore actif) strilise et pure totalement le milieu en 24 heures, mais ncessite la neutralisation du chlore actif excdentaire par ajout de thiosulfate de sodium (Na2S2O3, 5 H2O) raison de 5 g/litre avant recyclage. Cependant cette mthode n'a pas t valide du point de vue risque de formation de chloramines ou autres produits ventuellement cancrignes et ne peut encore tre recommande. De mme l'oxydation chimique par l'ozone ou l'eau oxygne ne peut tre recommande tant qu'on n'aura pas vrifi qu'elle n'induit pas l'apparition de composs potentiellement dangereux pour le consommateur. L'puration par oxydation de la charge organique rduit le pH du milieu de culture, facilement de 0,2 unit, ou mme plus pour un milieu initialement fortement charg en DBO.

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8. RECOLTE
Il vaut mieux rcolter le matin car la teneur de la spiruline en protines y est gnralement plus leve que le soir, mais aussi pour d'autres raisons: chaleur excessive ensuite, ncessit de mettre la rcolte scher ds que possible (surtout en cas de schage solaire si le beau temps n'est pas assur l'aprs-midi). La filtration sous plein soleil est fortement dconseille car la biomasse sur les bords du filtre devient rapidement brune et salit la toile de filtration. Par temps couvert cette obligation de rcolte tt le matin est videmment moins imprieuse, et par beau temps on peut toujours ombrer le filtre. Quelque soit le temps, si l'on opre en plein air, il faut couvrir le filtre pour viter que la biomasse rcolte ne se dgrade et ne se salisse. Quand cela est possible il est trs avantageux d'amnager un poste de rcolte l'abri du soleil et des poussires, de prfrence dans un btiment.

8.1) Filtration
La rcolte consiste filtrer une partie de la culture sur une toile fine (maille 25 50 ), en recyclant le filtrat dans le bassin, directement ou travers un systme de purification (filtre sable, dcantation). La culture est envoye au filtre travers un

tamis de maille 300 destin intercepter les corps trangers tels qu'insectes, larves, feuilles, boues ou grumeaux de spirulines. Un tamis de maille plus fine peut tre ncessaire pour arrter d'ventuels rotifres (l'ouverture de maille est choisie pour ne pas arrter trop de spirulines). La toile de filtration peut tre simplement pose sur un grand tamis bords de 10 cm de haut ou une grande passoire, mais un sac ou bien un tube (cf fin de ce ) peuvent tre prfrs. Les cadres de srigraphie (toile trs tendue sur un cadre, comme une peau de tambour) peuvent servir aussi de filtres, mais sont trop coteux et fragiles, sans offrir d'avantage dcisif. Il est intressant, mais non obligatoire, que la toile de filtration soit tendue plane (dans le cas d'un sac c'est le poids du liquide qui tend la toile, sinon on soulve un bord de la toile la main si cest possible) pour faciliter son dcolmatage avec une pelle bord droit et aussi pour ramasser la biomasse si elle colle. Dans le cas de la filtration en tube on ne dcolmate pas. On peut pomper la culture (pompe d'un type ne cassant pas les spirulines ! vrifier au microscope), ou la siphonner ou la laisser couler par gravit si le filtre est sous le niveau du bassin ; pour la rcolte manuelle, on utilise des bassines bords de prfrence droits; de toutes faons il faut veiller ne pas remuer trop le fond du bassin, pour ne pas mettre en suspension les boues du fond, lors du prlvement. Bien que le tamis arrte les boues les plus visibles, de fines particules sont cependant presque toujours entranes dans la spiruline rcolte: il s'en dpose dans le tissu, surtout l'endroit de l'arrive de culture filtrer (s'il y en a beaucoup, la toile, surtout de maille fine, se colmatera assez vite en se colorant en brun et l'on peut tre amen alors la nettoyer au jet d'eau en cours de rcolte). On facilite la filtration, lorsqu'une couche de biomasse s'est forme sur la toile, en raclant la toile pour la dcolmater : on utilise pour cela une pelle en plastique et l'on a intrt, lorsque la filtration est lente, sortir le contenu de la pelle et le mettre goutter part. Pour les productions dj un peu importantes, on a intrt utiliser une pompe gros dbit, genre pompe vide-cave (au moins avec la souche type ondule ou Paracas peu sensible la cassure par pompe), en plaant le tamis l'aspiration ou sur le refoulement, et en envoyant un jet tangentiel sur la toile horizontale, ce qui dcolmate automatiquement cette toile. Aprs arrt de l'envoi de culture sur le filtre (viter d'abaisser la concentration en spirulines en dessous de 0,4 g/litre), on laisse goutter, puis on rassemble la pte verte obtenue, dite "biomasse". La biomasse de spirulines contenant moins de 75 % de spirulines droites et provenant d'une culture en bon tat, de pH et teneur en ammonium pas trop levs, se filtre facilement et s'essore facilement par pressage. Parfois la biomasse goutte sur le filtre se rassemble facilement en la faisant rouler sur elle-mme pour former une boule (comme pour faire une boule de neige) ou un cylindre ; cette biomasse ne colle pas au plastique. D'autres types de biomasses ne font pas de boule et collent au plastique mais se laissent essorer facilement. Au contraire, les biomasses trop riches en droites, ou provenant d'une culture "vieille" ou "fatigue" par trop de soleil ou une croissance trop rapide, ou trop riche en matires organiques dissoutes (sucres compris) donnent une "crme" collante, qu'on doit ramasser la louche ou la pelle en plastique, et qui, la limite, ne peut pas s'essorer par pressage..

On peut aussi laisser finir d'goutter la biomasse en sac suspendu. La biomasse goutte contient 8 12 % de matire sche pour un milieu de culture de salinit habituelle. Comme dcrit au 7.9, les grumeaux de spiruline ventuellement retenus sur le tamis peuvent tre rcuprs. Une toile de filtre en monofilaments polyamide (Nylon) ou polyester (Tergal) est prfrable une toile en coton parce qu'elle facilite le dcollement de la biomasse rcolte et se lave ensuite plus facilement. Les toiles en monofilaments dites usage industriel sont prfres, mais il est possible de se contenter de tissus d'habillement en nylon, tergal ou soie convenablement choisis (et beaucoup moins coteux). La dure de vie d'une toile de filtration en tissu synthtique sera d'autant plus courte qu'on la laissera plus expose au soleil. Les toiles finissent par se percer ou se dchirer. Il est possible d'utiliser un tissu en coton (drap) condition de bien le choisir et condition que la biomasse soit de "bonne" qualit (non collante) sinon elle passe travers la toile coton. Ne pas hsiter laver les toiles la machine laver de temps en temps pour dboucher les pores. Il peut tre bon aussi de repasser les toiles en tissu synthtique, fer pas trop chaud, pour liminer les plis qui se forment la longue et gnent la filtration. Ne pas abuser de l'eau de Javel qui acclre le vieillissement des toiles. La rcolte manuelle de la couche flottante (lorsqu'elle se forme) l'aide d'une bassine bord droit est tentante car elle permet l'obtention d'un concentr de spirulines environ 3 - 6 g/l, donc avec (par rapport au poids sec) environ dix fois moins des produits colmatant se trouvant ventuellement dans le milieu, et elle est rapide. Si l'on dispose de plusieurs bassins, on a intrt poser le filtre sur un autre bassin que celui dont la couche flottante est rcolte, de manire ne pas la perturber par le filtrat. Comme les spirulines spirales type Lonar flottent plus vite que les ondules et les droites, il ne faut rcolter la couche flottante qu'en cas de culture 100 % spirale ou flottation totale, sinon la culture s'enrichirait en spirulines non flottantes (droites par exemple) qui finiraient par prendre brusquement le dessus : surveiller l'volution du % des diffrentes formes - surtout des droites - dans la culture au cours du temps. Il arrive que mme les ondules et les droites flottent compltement (ceci se produit notamment l'obscurit lorsqu'il y a peu d'oxygne, par exemple en rcipient ferm ou trs peu ar, avec environ 1 ppm d'oxygne dissout). Il serait certainement intressant d'utiliser le dispositif suivant pour rcolter des spirulines flottant 100% (mais nous ne l'avons pas essay) : transfrer la culture dans une cuve profonde o se produirait une flottation totale, puis injecter de l'eau au fond pour rcuprer la couche flottante par dbordement. Si la flottation n'est pas totale (on s'en aperoit d'aprs l'aspect du milieu sous la couche flottante), ne pas rcolter la couche flottante seule ; homogniser la culture avant de rcolter (laisser seulement dcanter les boues 5 minutes), et rcolter de prfrence la pompe. Pour rduire la concentration en droites ou empcher quelle ne croisse, on peut rcolter par pompage prs du fond, l o il y a la plus grande concentration en droites.

Il est un cas o l'on peut rcolter la couche flottante sans hsiter : celui d'une culture de spirulines ondules (Paracas) ayant tendance se transformer en spirales (Lonar) alors qu'on prfre garder un maximum d'ondules. Filtration la Cooprative Agro-Piscicole de N'dress, Bangui (RCA), 1995 :

Un rapetissement de la taille des spirulines peut tre provoqu par une vitesse de croissance trs rapide ou une salinit ou un pH trop levs ou une trop forte luminosit, ou provenir de la souche (chez les spirulines spirales type Lonar les spires peuvent devenir tellement serres qu'elles se touchent). Dans ce cas, utiliser une toile de maille fine (25 35 microns), sinon il y aura des fuites importantes de spirulines travers la toile surtout lors des dcolmatages, d'o un mauvais rendement de filtration et une slection aboutissant enrichir le bassin en spirulines de plus en plus petites. Une toile maille fine convient d'ailleurs dans tous les cas, elle est donc recommande mais elle est deux fois plus chre ; elle s'impose pratiquement dans le cas de souche 100 % spirale en plein t. Un certain pourcentage de droites ou d'ondules facilite la filtration et peut viter la ncessit de la maille trs fine. Pour une filtration assez facile mme avec droites, il est bon d'avoir au moins un quart de formes spirales (ou ondules), de prfrence grandes. A 10 % de spirales et pH 11, ou 4 % et pH 10, la filtration est encore possible mais plus pnible. On peut apprcier la filtrabilit en faisant un test simple dcrit en Annexe A6.1. Si toutes les spirulines sont de forme droite, le colmatage est si rapide que la filtration peut tre juge impossible. Si la biomasse devient habituellement infiltrable, ne pas hsiter changer de souche. La vitesse de filtration par gravit varie suivant le type de filtre, la concentration de la culture, et les mouvements imprims la toile ou la biomasse pour dcolmater. Une vitesse de filtration considre comme bonne fournit de l'ordre de 300 g (de spiruline sche)/heure/m de surface filtrante. Pour acclrer la filtration on peut utiliser le vide produit par un aspirateur mnager (voir annexes) ou la pression.

La filtration sous pression se fait en tubes confectionns en tissu de filtration, de diamtre 5 6 cm, aliments par gravit ou par pompe et ferms par une pince ou un nud. Ces tubes peuvent tre disposs horizontalement dans le bassin mme, mais de prfrence ils sont suspendus verticalement au-dessus du bassin ou dans la salle de rcolte. Une rampe de plusieurs tubes d'une longueur de 1 mtre se rvle pratique. Le tamis est dispos en amont de l'aspiration de la pompe. Il est important que la pression dans le tube ne dpasse pas 1 m de colonne d'eau sinon la maille du tissu risque de s'agrandir sous l'effet de l'excs de pression et le rendement de filtration en souffrirait. Le choix entre filtres plats, en sacs ou en tubes est une affaire de got personnel, mais si le poste de filtration n'est pas l'abri des salissures (poussires, insectes) le tube doit tre prfr puisqu'il protge la biomasse. 8.2) Lavage et Essorage Certains producteurs tiennent neutraliser l'eau acidifie et/ou laver l'eau douce leur biomasse avant de l'essorer et de la scher, au risque d'en perdre une partie par clatement des cellules. Si certaines spirulines supportent le lavage l'eau douce, d'autres se dcolorent ou clatent son contact et ne peuvent tre laves qu' l'eau sale ou avec du milieu de culture neuf la mme salinit (ou plus exactement la mme force ionique) que le bassin rcolt. En effet les spirulines mises en contact avec un milieu de salinit diffrente de leur milieu d'origine ragissent quasi instantanment en absorbant ou perdant de l'eau pour se mettre en quilibre osmotique avec le milieu, ce qui peut faire clater leur paroi. Le lavage risque aussi de causer des contaminations microbiennes : d'une part si l'eau utilise n'est pas pure, d'autre part parce que la baisse du pH rend la biomasse plus fermentescible. Une biomasse provenant d'une culture en bon tat n'a nul besoin d'tre neutralise ni lave, seulement essore. Il ne faut laver la biomasse que si on doit rcolter alors que la culture est sale ou malodorante, ou si l'essorage est impossible. Par contre l'essorage est ncessaire en l'absence de lavage. L'essorage peut se pratiquer avec une essoreuse ou sur filtre vide (trompe eau ou pompe vide), mais plus simplement par pression de la manire suivante: la biomasse goutte est place dans une toile du mme type que celle utilise pour la filtration, double l'extrieur par une toile en coton solide - les deux toiles tant replies sur la biomasse - et elle est presse entre deux nattes ou planches rainures: la majeure partie de l'eau libre est exprime par la pression (0,2 kg/cm suffit mais on peut monter 1 kg/cm). La presse peut n'tre qu'une pile de poids, mais un pressoir vis suprieure est pratique et plus propre, surtout s'il est en inox. On peut aussi utiliser un cric de voiture pour exercer la pression, ou une presse fromage poids et levier. En augmentant la pression lentement et en l'arrtant temps (avant ou ds que le jus commence tre un peu vert), on rduit presque rien les pertes de spiruline travers la toile ; dans le cas de biomasse de bonne

qualit et riche en spirulines spirales, on obtient de trs beaux rsultats (biomasse presse de consistance bien ferme) sans prendre beaucoup de prcautions, mais toute la biomasse finirait quand mme par passer travers la toile si la pression tait exagrment augmente ; dans le cas de biomasses plus "fragiles" ou trop riches en droites, le jus coule vert plus facilement, la biomasse presse est molle et collante et si l'on presse trop les spirulines risquent d'tre rduites en bouillie trop molle pour pouvoir tre ensuite extrude. Mme une biomasse de qualit excellente peut donner une biomasse presse molle si la pression a t trop forte ou brutale : si l'on emploie un cric de voiture ce danger est rel et il est recommand d'tre trs prudent (un indicateur dynamomtrique serait utile). Il est bon d'observer le dbit d'coulement du jus de pressage pour se guider. L'essorage/pressage doit se faire sans tarder et il faut surtout viter que la biomasse souffre de la chaleur en attendant. Il ne faut pas presser trop de biomasse la fois, mme si elle n'est pas "fragile" : il ne faut pas charger plus de 8 cm de biomasse par couche (mais il est possible de superposer plusieurs couches spares par un intercalaire permettant le libre coulement du liquide). Sous la couche infrieure, mettre plusieurs intercalaires pour faciliter l'coulement du jus. Le pressage dure au moins 15 minutes, car il faut du temps au liquide pour cheminer travers les trs fins interstices ou capillaires entre les spirulines comprimes. Le jus de pressage n'est, de prfrence, pas recycl au bassin, surtout s'il est trouble. Le pressage de grumeaux verts donne toujours un jus "laiteux". Lors du pressage une partie des exopolysaccharides tapissant la face externe des spirulines se dtache et se retrouve dans le jus de pressage, mme si ce dernier nest ni trouble ni color (cela se constate facilement en pratiquant le test de filtration normalis sur le milieu de culture et sur le jus de pressage, ce dernier donnant en gnral un moins bon rsultat). La spiruline riche en spirales (moins de 50 % de droites), provenant d'une culture jeune, et essore convenablement, est de consistance trs ferme, non collante et donne une tranche nette au couteau, et son pH est de 7 9 (selon degr de pressage; en fait 9 parait prfrable pour le schage et la conservation, donc ne pas presser absolument fond). La spiruline spirale essore contient habituellement autour de 20 % de sec (plus pour les ondules et encore plus pour les droites) si elle provient d'une culture de salinit normale (10-13 g/l) et s'il n'y a pas eu de lavage ou si le lavage a t fait avec une eau la mme salinit (ou plutt la mme "force ionique") que le milieu de culture. Un milieu type Zarrouk ou une eau de lavage de salinit 20 g/l donne un % de sec major de 5 points, une eau sale 30 g/l donne un % de sec major de 10 points (et un got plus sal), par contre le lavage l'eau douce donnera souvent un % de sec minor de 5 points (et au got "fade"). Les milieux de culture base de cendres ou de bicarbonate de potassium donnent, salinit gale (mais force ionique infrieure puisque le poids atomique du potassium est suprieur celui du sodium), un titre en sec infrieur. Les spirulines ondules donnent des biomasses presses plus riches en matire sche (environ 2,5 points au-dessus des spirales type Lonar) ; leurs % de sec plafonnent cependant 33 % partir d'une salinit de 44 g/l (en NaCl). Bien distinguer six facteurs indpendants rgissant le % de sec du produit press : la souche, la forme des filaments au sein

d'une mme souche, la salinit du milieu de culture, la quantit de biomasse essore en une fois, la pression applique (ou le vide, ou la force centrifuge) et la dure du pressage. Si la biomasse est "fragile" ou trs riche en droites, ne pas presser plus de 2 cm dpaisseur initiale et n'appliquer qu'une pression (ou un vide ou une force centrifuge) modre et progressive et la laisser agir plus longtemps (par exemple 30 minutes) : cela est gnralement efficace et permet d'obtenir une biomasse extrudable. L'avantage de l'essorage par le vide ou par essoreuse est de permettre le traitement de biomasses gouttes peu concentres, par exemple 7 % de matire sche, presque liquides, alors que le pressage est difficile voire impossible mettre en uvre dans ce cas-l. Dans certains cas, surtout quand il y a de 90 100 % de droites, la biomasse ne se laisse pas essorer en une biomasse extrudable (les spaghetti, mme si on arrive les former, "fondent" au schage), mais elle peut tre lave, puis tale la spatule en couche mince (1 mm) sur un film de polythylne tendu horizontalement pour schage rapide au soleil ou sur un plateau d'tuve aration latrale. Cette mthode (cf 9 flocons) doit tre utilise avec prudence, surtout si le lavage se fait l'eau douce: le schage doit tre trs rapide parce que la biomasse lave l'eau douce fermente vite et il est recommand de faire des analyses bactriologiques plus frquentes sur le produit sch ainsi obtenu. La russite de ce type de schage dpend fortement de l'paisseur de la couche de biomasse tale: si la rpartition n'est pas bien faite, les parties les plus paisses scheront mal, prendront une mauvaise odeur, et ne pourront pas servir l'alimentation humaine. Cette mthode de schage, que j'appelle "mthode indienne" (parce qu'elle a t largement pratique dans l'Etat du Tamil Nadu en Inde du Sud), peut s'appliquer aussi aux biomasses qui se sont laisses presser correctement mais qui restent trop molles pour tre extrudes (dans ce cas, pas de lavage, mais ventuellement une petite redilution pour faciliter l'talement en couche mince). Cette mthode de schage donne des cailles ou flocons de spiruline d'un fort bel aspect, prfr par certains consommateurs, mais dont la densit apparente est trs faible. Elle prsente l'inconvnient que le support de schage (film plastique) est assez difficile nettoyer lorsqu'il n'est plus neuf, alors que les moustiquaires ou grilles n'ont pas besoin de nettoyage ou se lavent instantanment au jet d'eau. Enfin les flocons obtenus par cette mthode ont une fcheuse tendance se charger lectriquement ainsi que le film plastique, qui s'attirent alors mutuellement. A noter quune biomasse presse molle , pratiquement impossible extruder, reste gnralement bonne consommer frache. La biomasse non essore et non lave l'eau, ou pas assez, brunit rapidement au soleil. La biomasse essore/presse doit tre refroidie le plus tt possible pour qu'elle s'abme pas. Mme si elle doit tre sche, on a intrt la mettre au frigo attendant l'extrusion, sinon des odeurs dsagrables peuvent se dgager lors l'extrusion. Si elle doit tre consomme frache, on a intrt la refroidir prs ne en de de

0C le plus vite possible si on veut la conserver assez longtemps (jusqu' 15 jours par
exemple, ce qui est possible au moins en hiver en France).

8.3) Lavage des outils (voir aussi 11)

On a intrt rincer ds que possible, ou au moins mettre tremper, les outils, toiles, rcipients, instruments ayant t en contact avec la spiruline; sinon, si la spiruline sche avant nettoyage, elle devient trs difficile nettoyer et il peut s'ensuivre une consommation d'eau de lavage exagre. Les toiles de filtration et de pressage doivent tre laves et sches aprs usage pour garder leur efficacit et viter qu'elles ne prennent des odeurs; attention: pour qu'elles durent plus longtemps, ne pas les exposer trop longtemps au soleil. Un lavage des toiles de filtration et de pressage la machine laver avec dtergent est pratique et recommand au moins de temps en temps. ***

9) SECHAGE
Le schage est le seul moyen sr de conserver et de distribuer la spiruline sans chane de froid. Dans lindustrie la spiruline est classiquement sche par atomisation (spraydrying), dans un courant de gaz de combustion trs haute temprature mais pendant un temps trs court. Pour cela les filaments doivent tre pralablement rduits en bouillie pour casser leur membrane : cest en fait le jus de spiruline broye que lon sche. A moins que le gaz de schage ne soit trs pauvre en oxygne, le spray-drying risque fort daltrer le produit. Dans la production artisanale, au contraire, ce sont les filaments de spiruline entiers que lon sche : le temps de schage est plus long, mais lintrieur des cellules nest pas soumis au contact direct des gaz chauds. Si la spiruline presse ne peut tre sche de suite, il faut la conserver en rcipient ferm au rfrigrateur bien froid et pas trop longtemps (sinon elle dgage une odeur dsagrable lors de l'extrusion) ; attention ne pas la congeler, et viter les retombes de gouttes d'eau condense sur la biomasse en cours de stockage. En chambre froide 1C la biomasse peut se conserver jusqu' une semaine. La biomasse lave ne peut se conserver, mme au rfrigrateur.

9.1) Extrusion
Le schage doit tre suffisamment rapide pour que le produit sche sans fermenter. La biomasse issue du pressage est d'abord rpartie par extrusion en "spaghetti" sur un plateau form d'un cadre garni d'une moustiquaire en nylon ou mieux en inox (maille 1 mm) ou sur une grille en plastique ( maille de l'ordre de 5 mm). Si la biomasse est trop fluide, on l'tale en couche mince sur un film de polythylne

(mthode "indienne"). Puis la biomasse est sche au soleil, ou, beaucoup mieux, dans un courant d'air faible humidit relative et forte capacit d'absorption d'eau (schoir solaire indirect, ou lectrique, ou gaz, ou dshumidificateur), jusqu' ce qu'elle ne soit plus molle du tout, se dtache facilement du support, et se broie facilement. L'extrusion en spaghetti peut se faire l'aide d'un dcorateur de gteau, ou avec un instrument de cuisine courant en Inde ("idiyapam maker" au Tamil Nadu) et en Extrme-Orient (fait d'une boite fond perc de petits trous et d'un piston, ou l'aide d'un pistolet colle silicone professionnel type Sika, modifi (bouchon PVC de 50 mm perc de trous de 2 mm), ou avec un poussoir saucisses, etc. Choisir un modle ne comportant pas de pice en aluminium au contact de la biomasse. Pour des productions dj importantes, on aura intrt utiliser un "poussoir" en inox (appareil utilis par les charcutiers), actionn par une manivelle avec engrenage, muni d'une filire en plexiglass. En dposant les spaghetti sur le support (plateau de schage) viter de former de gros amoncellements de biomasse, qui ne scheraient pas assez vite. Si la biomasse est trs ferme on peut l'extruder avec une filire plus gros trous (ce qui est moins pnible) que si elle manque de fermet. Il existe un pistolet SIKA actionn par air comprim, qui vite la fatigue de la main, mais ncessite de mettre le produit en "saucisses" avant extrusion. Si l'on dsire obtenir des spaghetti bien droits il faut que l'paisseur du bouchon dans lequel les trous sont percs soit triple du diamtre des trous (utiliser une perceuse colonne). Dans le cas d'utilisation du pistolet SIKA de 300 ml, nous avons remarqu qu'il est ncessaire de boucher la fente du piston par un peu de plastique autocollant pour viter un by-pass excessif de biomasse derrire le piston.

9.2) Schage
On peut scher l'ombre simplement dans un courant d'air temprature ambiante, sous moustiquaire (il suffit que l'air soit temprature nettement suprieure son point de rose) ; c'est le mme principe que le schage du linge sur la corde ou de la vaisselle sur le vaisselier : ainsi nous avons pu scher trs bien dans une hotte de laboratoire munie d'un puissant ventilateur et d'un filtre 0,2 (arrtant les bactries), sans chauffage. Mais la teneur finale en eau du produit paraissant sec peut tre dcevante ; elle dpend essentiellement de la temprature et de l'humidit de l'air, du dbit de ventilation et de la dure du schage. Gnralement il faut terminer la dshydratation dans un schoir air chaud ou avec un dshumidificateur. Nous avons sch facilement la spiruline dans une armoire mtallique munie d'un dshumidificateur et d'un ventilateur recyclant l'air travers les plateaux de schage. Le dshumidificateur doit tre capable d'abaisser l'humidit relative de l'air 30 %. Ce dispositif, qu'on peut appeler "schoir thermodynamique", permet de s'affranchir totalement de l'humidit de l'air ambiant et des poussires. Il permet mme, si l'on veut, de remplacer l'air par un gaz neutre ou appauvri en oxygne pour rduire l'oxydation de la spiruline en cours de schage (meilleure prservation du btacarotne). Le seul problme est qu'il faut refroidir l'armoire pour viter de dpasser 45C l'intrieur. En climat chaud et humide cela peut obliger recourir un climatiseur, moins de scher de nuit. On obtient 40-50 g de spiruline sche par heure avec une puissance de 350 Watt (hors climatiseur).

Le schage au plein soleil en plein air est le plus rapide et le moins coteux, mais il a des inconvnients : le produit est expos aux poussires et aux animaux (il faut de prfrence le protger par une moustiquaire), et il risque de bleuir en surface par destruction de la chlorophylle par les ultra-violets ; aprs broyage ce bleuissement n'est plus perceptible, mais une altration du got reste sensible. Ce type de schage, qui a t longtemps pratiqu Madurai (Inde), russit bien si les conditions sont bonnes pour un schage trs rapide : s'il est suffisamment rapide ou si la lumire solaire est suffisamment pauvre en ultraviolets, l'altration de la couleur et du got peut tre imperceptible. Des plans de schoirs solaires plus labors sont donns en Annexe A27. Un schoir solaire amlior comporte une partie chauffage de l'air spare de la zone o se trouve la spiruline, l'abri de la lumire, de la pluie et des insectes ; l'air doit y circuler avec un bon dbit provoqu de prfrence par ventilateur. Le thermosiphon (effet de chemine) ne convient que s'il y a peu de "spaghetti" sur les plateaux. L'influence de la ventilation sur le schage est primordiale. Avec un fort dbit d'air on peut empiler jusqu' 3 cm de "spaghetti" sur les plateaux. Si un ventilateur moteur axial est utilis pour souffler de l'air travers des plateaux tout proches, bien tenir compte que le dbit est souvent trs faible proximit du centre du ventilateur : on a intrt interposer un plateau intercalaire vide servant de rpartiteur de flux d'air. Si l'air est chauff pour abaisser son degr d'humidit relative, la temprature doit tre limite 80C. En fait on sche souvent plus basse temprature (gnralement 65C) avec de bons rsultats, mais si l'on a des craintes sur la qualit bactriologique du produit il est possible de monter 80 C pour le "pasteuriser" sans que, semble-t-il, sa teneur en constituants sensibles comme l'acide gammalinolnique ou le bta-carotne ne diminue sensiblement. Le temps de schage varie selon l'paisseur de biomasse frache sur chaque plateau, mais aussi selon le nombre de plateaux superposs, le % de sec dans la biomasse, la souche (les spirales schent un peu plus vite), la temprature et l'humidit de l'air et, bien sr, le dbit d'air : dans la pratique, en gnral il se situe autour de 4 heures, mais il est parfaitement possible de scher en une heure si l'on veut. En cas de mauvais temps, si on utilise un schoir solaire, on peut lui adjoindre un radiateur lectrique ou gaz, ou bien le schage peut se terminer (ou se faire entirement) dans un schoir lectrique ou gaz ou bien mme dans un four pain basse temprature et ar. Un schoir lectrique pour fruits et lgumes, comme l'appareil suisse de marque Stoeckli, de puissance 450 Watt, avec plateaux de 30 cm de diamtre, a une capacit moyenne de schage de 20 g (compt en sec) par heure. Son dbit d'aration a tendance tre un peu faible et c'est dommage. Si l'on n'a pas d'lectricit, on peut utiliser un schoir chauff au gaz (butane ou mthane de digesteur) - dont une esquisse est reprsente en annexe A27. Il est trs important de munir le brleur d'une scurit. La temprature de la biomasse en cours de schage dans un schoir plateaux superposs sans recyclage de l'air (cas du Stckli) reste thoriquement proche de la temprature de rose de l'air, quelle que soit la temprature sche de celui-ci, tant

qu'il reste de l'eau libre la surface de la biomasse ; pratiquement la temprature de surface s'tablit mi-chemin entre cette temprature de rose et la temprature de l'air, en dbut de schage, puis monte graduellement pour rejoindre la temprature sche de l'air en fin de schage. La temprature au coeur du produit s'lve graduellement de sa temprature initiale jusqu' la temprature de l'air. Il est souhaitable de minimiser le temps o le produit humide est au voisinage de 37C, temprature la plus favorable la fermentation. Il faut aussi viter de porter plus de 60 C le produit encore humide (au cur des spaghetti) qui risquerait de "cuire" en se dcomposant (changements de couleur). Le premier plateau reoit l'air sa temprature maximum mais avec temprature de rose minimum (voisine de 20C habituellement), tandis que les plateaux suprieurs reoivent un air encore chaud mais charg d'humidit, donc temprature de rose leve et d'autant plus que le dbit d'air est faible. On voit l'intrt de limiter le nombre de plateaux superposs et de ne pas gner le dbit d'air (maintenir propres et dgags les filtres ou moustiquaires protgeant l'entre et la sortie de l'air de l'appareil). Dans la pratique, avec les schoirs Stoeckli, qui ont un faible dbit d'air, nous limitons absolument le nombre de plateaux 5 et leur charge individuelle 2 kg de biomasse frache par m de plateau (soit 150 g/plateau). Si l'on charge trop de biomasse frache par rapport au dbit d'air, ou si le ventilateur ne fonctionne pas bien, ou si la biomasse est trop molle, ou si le temps est trop humide, ou si le thermostat est rgl trop bas, le schage ne se fait pas assez rapidement, la spiruline commence se dtriorer avant d'tre sche, elle dgage une odeur anormale ("propionique" ou "butyrique") et parfois les "spaghetti" s'aplatissent ("fondent"), restent comme du plastique mou et ne se dcollent pas du plateau : dans ces cas, il vaut mieux rserver le produit l'alimentation animale ou carrment le jeter au compost. Une spiruline mal sche est gnralement trop molle pour pouvoir tre broye, ce qui est un indice, mais attention: il arrive que l'on ne s'aperoive pas qu'une dtrioration ait eu lieu car le produit peut quand mme paratre sec et bien vert en surface alors qu'il est mou et noirtre l'intrieur, ou bien il a pu changer de couleur et finir par scher quand mme ; il est donc important de vrifier la qualit du produit sec d'aprs son odeur et son got et de le piquer avec une pointe de couteau pour vrifier s'il est dur et vert cur. Le dgagement d'odeur en dbut de schage ne signifie pas forcment que le produit sec soit de mauvaise qualit ou de mauvais got. Souvent nous prfrons scher la spiruline en deux stades, surtout lorsque l'air est humide : a) un schage basse temprature (40-50C) mais gros dbit d'air (vitesse d'air de 1 m/s) autorisant une charge leve (20 kg de biomasse frache par m, en 5 plateaux), dure 2,5 3 heures pour une teneur en eau finale de 15 - 20 %, et une humidit relative de l'air sortant de 10 20 % b) un schage dbit d'air faible (par exemple en schoir Stoeckli) mais plus haute temprature (65-80C), assurant la fois une certaine pasteurisation et l'extraction de l'eau jusqu' 4 % d'eau en une heure (ou mme beaucoup moins). La charge maximum qui a t indique en a) ci-dessus s'entend pour une biomasse presse de bonne qualit (ferme) ; si elle est molle il faut rduire la charge 10 voire 5 kg/m.

Le schoir du premier stade a t ralis autour d'un ventilateur de 50 W de diamtre 30 cm correspondant celui des plateaux Stoeckli qui sont poss dessus. Ce ventilateur aspire travers un filtre poussires (ouate synthtique vendues pour garnir les hottes de cuisine) un air qui est rchauff par un radiateur lectrique soufflant (de puissance 1 2 kW). Le premier stade suffit lorsque l'air ambiant est trs sec (schage moins de 9 % d'eau en 4 heures). Un autre mode de schage, donnant des flocons d'un bel aspect, est celui o l'extrusion est remplace par un talement en couche mince avec une spatule sur un film plastique (longtemps pratique Madurai en Inde). Test de fin de schage : cf suivant 9.3. Pour tablir la courbe du % d'eau dans le produit en fonction du temps de schage, il suffit de mesurer le poids brut des plateaux en cours de schage, la tare des plateaux, le poids de biomasse scher, le poids net sec et de connatre le % d'eau en dbut ou en fin de schage. Au cas o le schage a t insuffisant il est possible de le complter soit par un nouveau passage au schoir 65-80C (en mettant le produit sur des assiettes s'il a dj t broy), soit de prfrence en l'enfermant dans un rcipient tanche en compagnie d'un sachet deshydratant (gel de silice ou tamis molculaires). Ces deshydatants sont rgnrables par passage au four.

9.3) Broyage et test de schage

La spiruline bien sche est craquante, se dtache toute seule du support de schage et se laisse facilement piler ou broyer au moulin caf en une poudre plus ou moins fine selon le got de chacun. Un broyeur manuel bien adapt est celui de marque Sfinx ou Corona trs rpandu dans beaucoup de pays d'Afrique et d'Amrique Latine. La densit apparente de la spiruline extrude, sche et broye est de 0,66 kg/litre. La spiruline doit contenir moins de 9 % d'eau pour bien se conserver. La mesure de la teneur en eau est trs facile et rapide avec le dispositif suivant (voir Annexe A6.2.6 ) : mettre le produit tester (environ 200 g) dans un rcipient genre "Tupperware" d'environ un litre, couvercle transparent pour permettre la lecture de l'hygromtre plac (scotch) l'intrieur. Un produit suffisamment sec doit donner un % d'humidit relative l'quilibre infrieur 45 (vers 25C). Pour que la mesure soit exacte il faut que l'ensemble de mesure soit en quilibre non seulement d'humidit mais de temprature, ce qui peut exiger un temps assez long (1 2 heures). Certains prfrent ne pas broyer la spiruline sche pour lui conserver sa "texture" en batonnets qui fait plus penser des "algues".

9.4) Conditionnement

La spiruline sche peut se conserver longtemps sans perdre trop de ses qualits condition d'tre stocke en sachets bien remplis et tanches, l'abri de la lumire, de l'air (emballage plastique mtallis et thermoscell pour viter la pntration de l'oxygne), et des fortes chaleurs. Il est prfrable de faire le vide dans le rcipient tout en le thermoscellant (des appareils commerciaux existent pour cela): dans ce cas le produit peut se conserver 5 ans. Si l'on ne peut pas sceller sous vide, l'absorption de l'oxygne restant dans le sachet convenablement scell provoquera souvent (mais pas toujours) sa mise sous vide spontane en quelques jours si le rcipient est bien scell; cette absorption d'oxygne s'accompagne de la destruction d'une fraction des composants oxydables de la spiruline, comme le bta-carotne, mais cette fraction "sacrifie" reste faible s'il y avait peu d'air rsiduel.Si le produit doit tre utilis rapidement (moins de 3 mois), l'emballage en sachets plastique non mtallis est possible. Attention : les rongeurs percent volontiers ces sachets de spiruline. Il faut les conserver en un lieu sr, par exemple dans une cantine mtallique.

9.5) Contrle de qualit bactriologique

Le schage basse temprature (40 50 C) a l'avantage de mieux prserver la qualit nutritionnelle du produit et donne dj un produit gnralement correct du point de vue bactriologique. Aucun microorganisme dangereux ne peut survivre longtemps dans un produit moins de 9 % d'eau correspondant une activit de l'eau infrieure 0,5 (< 50 % d'humidit relative dans l'air l'quilibre avec le produit 25C). La spiruline ne contient en principe pas de spores cause du pH du milieu de culture. La qualit microbiologique s'amliore au stockage. Le stockage en sachets scells permet une vrification a posteriori de la qualit du schage : si le vide se forme, c'est que le produit tait correct ; si le sachet parait gonfl (cela peut demander quelques mois), c'est qu'il y a fernentation ou volution enzymatique, ou simplement que la poudre sest densifie (tasse). En cas de doute sur la qualit bactriologique ou le degr de schage de la spiruline sche, il est possible de la chauffer 120C dans un four ou un strilisateur solaire. Mais la chaleur sche ne strilise pas bien et ne dtruit pas les spores de bactries ni les toxines ventuellement prsentes. C'est pourquoi il demeure ncessaire de travailler en respectant au moins les rgles d'hygine classiques (ne pas toucher le produit avec les mains, travailler loin du sol, avec des instruments et rcipients en inox ou plastique, etc.), et il est bon de faire vrifier de temps autre la conformit du produit par rapport aux normes bactriologiques en vigueur. * * *

10) CONSOMMATION
10.1) Alimentation humaine
La spiruline ne remplace pas les aliments caloriques tels que le manioc, le riz, le bl, la pomme de terre ou le mas, mais c'est un ingrdient idal de la sauce protine

qui accompagne la "boule" africaine, par exemple, apportant non seulement ses protines, mais de nombreux autres lments trs favorables la bonne sant de tous et notamment des petits enfants. Mille mlanges et recettes peuvent tre invents pour consommer la spiruline crue ou cuite, frache ou sche, de manire agrable. Il n'est pas exagr de prtendre pouvoir faire de la trs bonne gastronomie base de spiruline de qualit, surtout frache. La spiruline sche en spaghetti est gnralement prfre par les consommateurs au produit industriel sch l'atomiseur ("spray drier"), tant pour sa consistance physique que pour son odeur. La prsentation sous forme de spaghetti non ou peu broys plait gnralement beaucoup, mais n'est pas pratique pour l'emballage et le stockage.

10.1.1) Biomasse fraiche

La biomasse frache de bonne qualit peut tre directement consomme aprs pressage ou bien elle peut tre mise en conserve (congele, sale, sucre ou sche). Frache, elle peut se garder en rcipient ferm jusqu' 4 jours 1C, 2 3 jours 5C, un jour 8C, mais seulement si elle n'a pas t lave (avant de consommer une spiruline conserve au rfrigrateur, vrifier son odeur). Bien que le meilleur moment pour rcolter soit le matin, il est possible de retarder un peu la rcolte jusqu' un moment plus opportun pour la cuisine ou le repas si l'on n'a pas de rfrigrateur. En cours de stockage en rfrigrateur, en rcipient non ferm, il arrive que des sels rsiduaires migrent en surface du produit, lui confrant un got amer: dans ce cas enlever la "crote". Le meilleur mode de stockage en rfrigrateur est sous la forme de saucisses (sans contact avec l'air) qui vite tout risque de retombe de goutte d'eau distille sur la biomasse. En climat tempr, la spiruline frache rcolte l'hiver peut se conserver trs longtemps au rfrigrateur 5C, 10 15 jours par exemple. Dans l'option conglation, veiller ne pas congeler de trop grosses masses unitaires qu'il serait impossible de diviser lors de l'utilisation : le mieux est souvent de faire des "glaons" trs pratiques (on peut utiliser les bacs glaons classiques). Les personnes qui n'aiment pas l'odeur un peu forte de la spiruline sche (odeur rappelant le poisson sch) prfreront la spiruline frache (ou congele), qui n'a pratiquement ni odeur ni got si elle est de bonne qualit et qui semble possder un certain pouvoir exhausteur de got, un peu comme le glutamate de sodium, et permettre donc de relever le got de nombreux mets auxquels on l'ajoute. La spiruline frache de bonne qualit tant de consistance trs ferme on peut faciliter son emploi en lui rajoutant peu d'eau puis de crme ou d'huile pour en faire une sauce verte de la consistance souhaite, ventuellement assaisonne d'ail ou d'oignon. On prpare facilement une sauce dlicieuse pour accompagner des gateaux d'apritif en mixant spiruline frache + crme frache + un peu de fromage bleu, etc. La spiruline frache et crue est environ deux fois plus plus efficace que la spiruline sche et trois fois plus que la spiruline sche et cuite, car plus digeste et plus riche en certains lments actifs comme le bta-carotne, la phycocyanine, l'acide

gamma-linolnique et le fer assimilable. La spiruline congele doit tre dcongele et utilise trs rapidement, sinon elle se gtera: le mieux est de la plonger dans de l'eau bouillante pour en faire un bouillon ou une sauce "instantans" accommoder au choix. L'auteur consomme depuis sept ans de la spiruline frache ou congele de sa propre production, et en grande quantit, mais recommande de se mfier de celles dont on ignorerait le mode exact de production... S'il y a des risques d'infection par le cholra ou les amibes, par exemple, ne pas consommer la biomasse frache crue.

10.1.2) Spiruline cuite

En cas de doute sur la qualit bactriologique de la spiruline, frache ou sche, il est prudent de la cuire au moins une ou deux minutes, surtout pour les personnes affaiblies ou les enfants en bas ge: on peut pour cela l'ajouter la soupe ou la sauce en fin de cuisson. On peut prparer un bouillon en dlayant la spiruline dans l'eau bouillante, et arrter la cuisson ds que "a monte" (comme le lait). La phycocyanine (pigment bleu) est dtruite au-dessus de 70C en prsence d'eau. L'acide gamma-linolnique n'est pas dtruit lors de la cuisson (10 minutes l'bullition) d'une bouillie de sevrage base de farines de crales et de spiruline sche, comme l'ont montr des essais faits par le Dr Dupire (1998). Il arrive que la spiruline devienne brune dans l'eau bouillante, mais ce n'est pas toujours le cas.

10.1.3) Conserves de spiruline fraiche

On peut saler 10 % de sel la biomasse frachement presse; en homognisant soigneusement le mlange on obtient une pte assez fluide, prenant au bout de quelque temps une consistance de gel et une intense couleur sombre (la phycocyanine bleue apparat avec ses reflets rouges caractristiques), au got rappelant la pte d'anchois. Elle peut tre garde 20C plusieurs mois dans un bocal sous une couche d'huile: Nous avons vrifi une fois qu'un tel produit, conserv quatre mois 20 C, tait bactriologiquement correct; mais dans une autre exprience similaire il y a eu fermentation et il faut donc tre prudent. Des essais devraient tre entrepris sur la conservation par le vinaigre ou le miel et par lactofermentation.

10.2) Alimentation animale

La spiruline, notamment de second choix (grumeaux, balayures), peut se valoriser dans l'alimentation des animaux (poules pondeuses, poulets, vaches, chevaux de course, poissons, crustacs, larves de crevettes, etc.). Elle amliore leur sant, leur apparence, leur qualit ou leurs performances. Pour les poissons, elle peut tre donne en l'tat, frache ou sche ou, mieux, tre incorpore aux granuls. Pour les poules, on peut ajouter jusqu' 10 % de spiruline dans la ration: la qualit des ufs est amliore (jaune plus color).

11) HYGIENE

La production industrielle d'un produit alimentaire respectant les normes internationales ncessite le respect de rgles d'hygine draconiennes tant au niveau du matriel que du personnel et de l'emballage : - matriel en plastique alimentaire, verre ou inox - port de gants, masques, rsilles - filtration de l'air - strilisation des outils, du produit et des emballages. De telles prcautions paratront hors de porte des exploitations familiales ou artisanales, mais celles-ci doivent au moins s'efforcer de travailler le plus proprement possible. Le niveau d'hygine respecter s'apparente celui qui est habituel au niveau de la cuisine et de la vaisselle familiale ou communautaire dans la rgion. Voici quelques recommandations de bon sens: - Vrifier qu'il ne reste pas de la spiruline dans les recoins du matriel aprs nettoyage (par exemple sur les bords des cadres de filtration, ou dans l'extrudeuse). - Utiliser des ustensiles de couleur blanche de prfrence. - Eviter le contact de restes de spiruline sche avec de la biomasse fraiche. - Eviter le contact des ustensiles avec le sol ou le ciment qui sont des nids microbes. - Ne jamais toucher avec les doigts nus de la spiruline sche pour ne pas risquer de la contaminer par des staphylocoques dors. - Eloigner les rongeurs (il existe des appareils ultrasons pour cela). - Couvrir les rcipients contenant de la biomasse pour viter qu'elle se salisse. Une spiruline artisanale peut tre de trs bonne qualit. Mais si elle est produite et surtout sche et manipule dans un environnement riche en microbes elle ne pourra tre consomme que par des personnes habitues cet environnement: pas question de la commercialiser en ville ou sur le march international, sauf la striliser et/ou l'analyser pour vrifier qu'elle est conforme aux normes en vigueur.

12) PRIX DE REVIENT

Voir le programme de calcul du prix de revient CALCUL.htm - Prixspir

13) RECOMMANDATIONS FINALES

Aprs son long apprentissage dans des conditions de culture de la spiruline trs varies, l'auteur tient souligner celles qu'il considre comme les plus faciles pour l'artisan, et qui se rsument ne pas chercher faire des exploits de productivit ou de prix de revient. Pratiquement cela veut dire : o o o o o protgez vos bassins par une serre ombrable, utilisez l'air comme source de carbone principale, rsistez la tentation de rcolter la couche flottante, utilisez oligo-lments et chlatants, si vous devez vous absenter, ne confiez vos cultures qu' des mains sres.

De plus, pour les dbutants qui n'ont pas encore acquis du doigt : choisissez un milieu de culture assez concentr (b = 0,2) pratiquez un taux de purge assez lev (> 2%/jour) chargez peu votre schoir (< 5 kg/m de section)

***

ANNEXES
A1) Influence de la temprature, de la lumire,
de l'alcalinit, de la salinit et du pH sur la photosynthse de la spiruline On peut admettre que la vitesse maximum de photosynthse, dans un bassin bien agit, et dans les meilleures conditions de temprature, lumire, alcalinit, salinit et pH, est voisine de 1,8 g/heure/m de bassin. Cette vitesse peut d'ailleurs varier en fonction de la souche de spiruline et de la prsence de catalyseurs. Dans les programmes de simulation donns dans CALCUL.htm, on fait l'hypothse que la fonction photosynthse est directement proportionnelle des fonctions de la temprature, de l'clairement, de la salinit, du pH et du degr d'agitation : Vitesse de photosynthse = k x f(T) x f(klux) x f(salinit) x f(pH) x f(agitation) Cette hypothse n'a pas de vraie base scientifique, mais elle facilite les calculs et elle ne donne pas de si mauvais rsultats. Voici quelques exemples de ces fonctions, qui sont largement inspires de la thse de Zarrouk (en tenant aussi compte de rsultats exprimentaux) :

Vitesse photosynthse de la spiruline en fonction de l'clairement d'aprs la thse de Zarrouk, Fig. 3 cf BIBLIOGRAPHIE - Zarrouk

Vitesse de photosynthse de la spiruline en fonction du pH d'aprs la thse de Zarrouk, Fig. 20

Vitesse de photosynthse de la spiruline en fonction de la temprature de la culture d'aprs la thse de Zarrouk, Fig 19.

Vitesse de photosynthse de la spiruline en fonction de la salinit du milieu d'aprs la thse de Zarrouk, Tableau IV

Vitesse de photosynthse en fonction de l'agitation (fonction plus ou moins imaginaire, dans laquelle intervient aussi le pH, valable pour systmes dagitation habituels jusqu la vitesse de 30 cm/s; il est possible quavec des systmes perfectionns lon puisse majorer nettement la vitesse de photosynthse, mais nous nen avons pas encore lexprience : au del de 30 cm/s la fonction est prvue pour tenir compte de cet effet, mais sans aucune base exprimentale quantifie)

A2) Mesure de la concentration en spirulines

Le "disque de Secchi" (instrument constitu d'une baguette de 30 cm de long, gradue en centimtres, portant son extrmit infrieure un disque blanc) permet une mesure approximative, assez subjective, qui dpend du sujet, de l'clairage, de l'angle, de la dimension du disque et de la turbidit du milieu de culture ("turbidit" = trouble + coloration) et pour une large part de la morphologie des filaments de spiruline, laquelle dpend en partie de la salinit du milieu. Les donnes ci-dessous ont t tablies pour des salinits voisines de 12 g/litre. Avant de mesurer, agiter pour homogniser, puis laisser dcanter les boues quelques minutes. On note la profondeur, en centimtres, o il devient juste impossible de distinguer le disque. Chacun devrait dterminer sa propre corrlation profondeur-concentration-turbidit, dans des conditions standard : filtrer un volume connu sur papier filtre (pralablement sch l'tuve et pes), presser dlicatement et scher l'tuve, puis peser. Les deux tableaux ci-dessous ont t tablis par l'auteur avec un disque blanc de 3 cm de diamtre sous un clairage de 4000 lux (ombre pas trop sombre).

La turbidit est mesure sur filtrat sans spiruline, avec un disque noir (cf A6.1.2).
SECCHI POUR SOUCHE SPIRALEE

Turbidit nulle (>30 cm) 1,0 cm = 1,05 g/l 1,5 cm = 0,75 2,0 cm = 0,55 2,5 cm = 0,43 3,0 cm = 0,34 4,0 cm = 0,24 5,0 cm = 0,19 8,0 cm = 0,10 Turbidit 12 cm 2,0 cm = 0,5 g/l 3,0 cm = 0,3 4,0 cm = 0,21 5,0 cm = 0,16 Turbidit = 6 cm 1,0 cm = 0,75 g/l 2,0 cm = 0,35 3,0 cm = 0,19 4,0 cm = 0,10 5,0 cm = 0,05

SECCHI POUR SOUCHE ONDULEE Turbidit nulle (>30 cm) 1,0 cm = 1,0 g/l 1,5 cm = 0,55 2,0 cm = 0,40 3,0 cm = 0,24 4,0 cm = 0,16 5,0 cm = 0,11 8,0 cm = 0,06 Turbidit = 6 cm 1,0 cm = 0,85 g/l

1,5 cm = 0,50 2,0 cm = 0,35 3,0 cm = 0,20 4,0 cm = 0,10 5,0 cm = 0,05 Turbidit = 4 cm 1,0 cm = 0,70 g/l 1,5 cm = 0,36 2,0 cm = 0,20 2,5 cm = 0,11 3,0 cm = 0,06

N.B. 1) Jacques Falquet, d'Antenna Technologie, a mis au point un "Secchi lectronique" dont la rponse est indpendante de la lumire et de l'oprateur, mais pas des autres facteurs. 2) L'utilisation d'un instrument pour mesurer la concentration en spiruline devient en gnral inutile lorsque l'oprateur a acquis suffisamment d'exprience. Il sait juger la concentration d'aprs l'apparence de la culture. 3) La concentration en spiruline peut aussi se mesurer au spectrophotomtre la longueur d'onde de 560 nm comme l'a fait Zarrouk dans sa thse : il avait trouv que 1 unit de densit optique correspond 0,7 g de spiruline par litre.

A3) Mesure de la salinit du milieu de culture avec un densimtre

On admet que la prsence de spirulines dans un milieu de culture ne modifie pas sa densit. On utilise un densimtre pour densits suprieures 1 (comme ceux vendus dans les boutiques d'aquariophilie ou pour mesurer la densit des urines). La lecture se fait au niveau infrieur du mnisque. Attendre que les microbulles d'air soient limines avant de faire la lecture. La densit DT la temprature T C et la densit D20 20C sont relies par la formule: D20 = DT + 0,325 x (T - 20), g/l

La salinit SAL et D20 sont relies par les formules approches suivantes pour milieu de culture base de sels de cendres ou de bicarbonate de sodium : si D20 est suprieure 1007,6 : SAL = 1,250 x (D20 - 1007,6) + 10, g/litre ou sinon par: SAL = 1,041 x (D20 - 998), g/litre N.B. Il existe d'autres instruments, plus modernes, pour mesurer la salinit : le conductivimtre et le rfractomtre.

A4) Mesure du pH d'un milieu de culture

Seul un pHmtre de bonne qualit et bien talonn permet de suivre l'volution fine du pH d'une culture et de rgler ventuellement la marche de la culture tout prs du pH maximum autoris de 11,2. Le pH varie avec la temprature. Certains pH-mtres possdent une correction automatique de temprature. Le pH mesur TC doit tre major de 0,00625 x (T 25) pour obtenir la valeur la temprature standard de 25C. Certains pH-mtres sont quips d'une chelle en milliVolts plus robuste que l'chelle en pH. Elle permet de calculer le pH partir de l'indication en mV par la formule thorique: pH TC = (K1 - mV) x K2 /(273 + T) o K1 et K2 sont deux constantes dpendant de l'lectrode (lectrode de verre) qu'on dtermine par talonnage partir de solutions talons de pH. Cette formule peut s'crire, pour T = 25C: pH = A - mV/B o A est le pH pour 0 mV et B est la pente en mV/ unit de pH. Des valeurs usuelles sont par exemple A = 7 et B = 50. La valeur des mV mesurs ne dpend pratiquement pas de la temprature, ce qui est heureux car cela dispense de faire une correction de temprature: il suffit d'appliquer la formule la temprature de rfrence. Pour prolonger la dure de vie d'un pH-mtre, le conserver l'abri de l'humidit. Pour prolonger la dure de vie de son lectrode, maintenir l'extrmit sensible de l'lectrode dans une solution sature de chlorure de potassium dans l'eau distille, temprature suprieure 15C, et la rincer soigneusement avant et aprs les mesures, l'eau propre et si possible distille. Si des moisissures s'installent dans la solution de KCl, mieux vaut la renouveler.

La fragilit, la dure de vie limite des lectrodes, et leur cot lev, rendent difficile l'utilisation d'un pH-mtre professionnel dans beaucoup de situations. Un pH-mtre bon march, type "stylo", rtalonn frquemment, peut rendre service, mais sa dure de vie risque d'tre courte. Les papiers pH ne sont pas assez prcis. Les solutions talons de pH vendues dans le commerce sont coteuses, mais il est possible de les conomiser en utilisant les solutions talons approximatifs suivants (conserver celles pH moyens l'abri de la lumire pour viter que des algues s'y dveloppent spontanment) dont les pH indiqus correspondent 25C: - acide chlorhydrique N (36,5 g/l): pH 0,1; N/10: pH 1 ; N/100: pH 2 - jus de citron: pH 2,3 - vinaigre " 6 degrs" (6% d'acide actique, densit 1,01): pH 2,8 - solution aqueuse 5,8 g/l de phosphate monoammonique: pH 4 - jus de tomate: pH 4 - solution aqueuse 5,8 g/l de phosphate monoammonique + 11 g/l de bicarbonate de sodium: pH 7 - bicarbonate de sodium N/10 (8,4 g/l): pH 8,3 - solution aqueuse 5,3 g/l de carbonate de sodium + 4,2 g/l de bicarbonate de sodium (ou 1,4 g/l de soude + 5,46 g/l de bicarbonate) l'quilibre avec l'atmosphre (conserver en contact avec l'atmosphre extrieure, ne pas boucher le rcipient, rajouter de l'eau pour compenser l'vaporation): pH 9,8 (varie un peu selon teneur de l'air en CO2 et l'altitude) - carbonate de sodium N/10 (10,6 g/l): pH 11,6 - soude N/100: pH 12; N/10: pH 13; N (40 g/l): pH 14 N.B. Avec de l'exprience il est possible de se passer de pH-mtre pour conduire une culture de spiruline, surtout si l'on cultive sous ombrage ou avec addition de bicarbonate ou de sucre.

A5) Mesure de l'alcalinit (alcalimtrie)

On neutralise progressivement un chantillon du milieu de culture ou de l'eau de cendre tudier par un acide fort de normalit connue (par exemple 100 ml d'acide chlorhydrique concentr + 900 ml d'eau dminralise donne de l'acide "N", c'est-dire une molcule-gramme/litre) jusqu' pH = 4. Soit V le volume d'chantillon et V' le volume d'acide N utilis. L'alcalinit est gale V'/V, moles/litre. N.B.: la chute du pH est trs brusque en dessous de 4. Si le titre de l'acide n'est pas exactement N, corriger V' proportionnellement. Exemple: alcalimtrie sur 200 ml d'eau de cendre partiellement carbonate:

Sur ce graphique, pH 4 on lit V' = 96 d'o alcalinit totale 96/200 = 0,48 N (soit 0,48 mole de base/litre). A pH 12 on lit V' = 33 d'o potasse libre 33/200 = 0,165 N. A pH 8 on lit V' = 62 d'o carbonate de potasse = (62 - 33)/200 = 0,145 mole/l. L'inflexion pH 8 correspond la transition carbonate/bicarbonate (ici il n'y avait pas de bicarbonate dans l'chantillon, celui qu'on dose provient de l'acidification du carbonate). Ce qu'on appelle couramment "alcalinit" ou "basicit" correspond l'alcalinit totale mesure pH 4. N.B. Si l'on n'a pas de ph-mtre, on peut utiliser un indicateur color virant autour de pH = 4, comme le mthylorange (10 gouttes de solution aqueuse 1 % pour 100 ml d'chantillon tudier) qui vire de l'orange au rouge, ou le papier au "rouge Congo". Attention: L'acide chlorhydrique "concentr" vendu dans certains pays n'est qu' 20% d'HCl.

A6) Tests de qualit faciles raliser

A6.1) Test sur cultures A6.1.1) Test de filtrabilit
Pour caractriser la vitesse de filtration, un test standard a t tabli. Mesurer 400 g de culture tester et la verser en 5 secondes dans un filtre caf garni d'un papierfiltre type "Grand Jury" N 4 ou quivalent. Noter le poids filtr en une minute aprs la fin du versement. Un poids suprieur 250 g correspond une filtration facile. Ne pas ngliger l'effet de la temprature ni de la nature du papier sur ce test. Il est recommand d'tablir sa propre chelle de valeurs avec le type de papier disponible. Il est intressant de refaire le test sur le filtrat obtenu, ce qui donne une indication sur la part de rsistance la filtration due la biomasse et celle due aux impurets du milieu. Dans le cas de milieux trs peu sales, il faut affiner la comparaison, en prenant du milieu neuf comme rfrence, et en comparant avec le poids de milieu neuf filtr (il reste environ 10 g de liquide dans le papier filtre et les rcipients de
mesures, donc le meilleur rsultat possible est 390 g).

A6.1.2) Mesure de la turbidit du milieu de culture

Elle se fait l'ombre sur le filtrat obtenu lors du test de filtration (A6.1.1), comme une mesure de concentration au disque de Secchi. Un disque de Secchi noir est prfrable si la coloration est faible. Attendre que la mousse et les microbulles d'air soient limines avant de faire la lecture. Attention : les spirulines filtrant mal ont tendance passer travers le papier filtre, en rendant vert le filtrat ; dans ce cas il peut tre prfrable de refiltrer le filtrat sur papier double pour liminer les spirulines avant de mesurer la turbidit vraie du milieu. On constate que la dgradation initiale d'un milieu se dtecte bien plus finement par la turbidit que par le test de filtration. Ainsi un filtrat de turbidit 25 cm peut trs bien aller de pair avec un poids filtr pratiquement gal 100 % de la rfrence. Alors que la turbidit d'un milieu neuf est trs suprieure 35 cm.

A6.1.3) Mesure de l'aptitude au lavage de la biomasse

Aprs le test de filtrabilit ( A6.1.1), verser 400 ml d'eau douce dans le filtre en dlayant la biomasse et noter le volume filtr en une minute. Si la biomasse est du type "lavable" (ses cellules n'clatant pas au contact de l'eau douce) ce volume reste proche de celui du test de filtrabilit. Confirmer par un examen microscopique de la biomasse lave.

A6.2) Tests sur spiruline A6.2.1) Test de pH

Il est facile d'obtenir une ide de la qualit du lavage ou de l'essorage de la biomasse, soit en prenant le pH de la biomasse presse (qui doit tre entre 7 et 9), soit en mesurant le pH d'une suspension 4 % de spiruline sche dans l'eau. Lorsqu'une spiruline a t sche temprature assez haute (60 65C) et qu'elle est rhydrate, ses cellules clatent et le pH baisse, jusqu' 5 parfois. Le pH obtenu est d'autant plus bas que la spiruline est bien essore. Ce bas pH serait du l'acidit interne des cellules et/ou la fermentation commenante.

A6.2.2) Estimation des pigments

Dans le test de pH du prcdent les pigments sont librs et il est possible de les voir et de juger de leur concentration. Le bleu est parfois lent sortir (attendre 24 heures par scurit, en agitant de temps en temps). Parfois il faut pralablement au test chauffer quelques minutes la poudre 65 C pour mieux faire clater les cellules. Pour apprcier la concentration en phycocyanine (pigment bleu), il suffit de mettre une goutte de solution dcante sur un papier buvard ou papier filtre bien plat et horizontal: on obtient un chromatogramme trs net; la coloration et la surface de la tache bleue est une indication de la concentration en phycocyanine. Faire un test parallle avec une spiruline de concentration connue en phycocyanine, avec la mme concentration (4 % dans l'eau), et faire la comparaison des taches partir de gouttes de mme volume. Pour apprcier la concentration en carotnodes (donc en bta-carotne), mlanger la spiruline sche en poudre deux fois son poids d'alcool 90 ou d'actone, agiter, couvrir et attendre 15 minutes: les carotnodes passent en solution, dont la couleur jaune brun plus ou moins forte est une mesure de la concentration. Utiliser le systme de la tache sur papier filtre pour l'apprcier. Attention: la coloration de la tache est labile (oxydation).

A6.2.3) Test de couleur

La couleur verte de la spiruline de bonne qualit est facile reprer. On peut avoir en stock des chantillons de rfrence pour comparaison. La nuance de vert dpend de la souche (la spirale est moins fonce que l'ondule) et du traitement (pressage., extrusion, centrifugation).

A6.2.4) Dosage colorimtrique simplifi de la phycocyanine

Une mthode plus prcise pour mesurer la teneur en pigments est la colorimtrie. Partir de la mme solution type "test de pH" qu'en Annexe 6.3. Soit C % la concentration de spiruline sche mise tremper dans l'eau autour de 4 %. Laisser dcanter et prlever la solution bleue, la centrifuger si l'on dispose d'une centrifugeuse de laboratoire. Prlever la solution centrifuge ou bien dcante: environ 0,5 1 ml. Diluer ce prlvement d'un facteur de 100 environ avec de l'eau. Soit DIL ce facteur de dilution, en volume. Mesurer au colorimtre ou spectrophotomtre (cuve trajet optique 11 mm) la densit optique (DO) 615

nanomtre (nm) de longueur d'onde, DO615, et 652 nm, DO652. Calculer le % en poids de phycocyanine par la formule: 1,873 x (DO615-0,474 DO652) x DIL /C Une valeur correcte est: > 10 % de la spiruline sche. N.B. La DO est gale au logarithme (base 10) du rapport lumire incidente/lumire transmise ou du rapport 100 / (% de transmission) ou 100/ (100 - % d'absorption).

A6.2.5) Dosage colorimtrique simplifi des carotnodes

Ajouter 25 % d'actone ou, dfaut, d'alcool 90, une suspension type "test de pH" ci-dessus, et la maintenir 24 heures au rfrigrateur. Soit C la concentration en spiruline dans cette suspension. Dcanter, et si possible centrifuger, et prlever P ml de la solution (environ 0,5 ml). Diluer l'actone ou l'alcool. Soit DIL le facteur de dilution en volume. Mesurer la densit optique 450 nm. Soit DO450 cette densit. La concentration en carotnodes dans la spiruline s'obtient par la formule: DO450 x DIL / 2,8 / C, mg/g

Une valeur correcte est 2,5 mg/g. Le bta-carotne reprsente environ la moiti des carotnodes. N.B. La DO est gale au logarithme (base 10) du rapport lumire incidente/lumire transmise ou du rapport 100 / (% de transmission) ou 100/(100 - % d'absorption).

A6.2.6) Dosage de l'humidit dans la spiruline sche (% d'eau)

Mettre la spiruline tester (environ 200 g, inutile de peser) dans un rcipient genre "Tupperware" (deux litres maximum), tanche et suffisamment transparent pour pouvoir lire l'hygromtre digital plac (scotch) l'intrieur. Suivre l'volution du % d'humidit relative (% HR) de l'air dans le rcipient jusqu' l'quilibre (environ 2 heures) : si ce % est infrieur 45, la spiruline est conforme la norme (< 9 % d'eau). Pour que la mesure soit exacte il faut que l'ensemble de mesure soit en quilibre non seulement d'humidit mais de temprature autour de 25C. Dans le domaine qui nous intresse (%HR entre 10 et 60), le % d'eau dans la spiruline est gal 1 + (%HR)/6 d'aprs nos mesures et d'aprs BIBLIOGRAPHIE.htm - Lembi.

A7-1) Absorption du gaz carbonique atmosphrique par le milieu de culture

Nous avons mesur la vitesse d'absorption du CO2 de l'air en suivant la dcroissance du pH du milieu de culture sans spiruline, avec agitation faible et intermittente. Connaissant la surface expose l'air, la concentration en alcali, le volume par m et la correspondance entre pH et C = rapport molaire CO2/base (cf Annexe A11 ), il est facile d'en dduire la vitesse d'absorption du CO2 en fonction du

pH. On trouve des valeurs croissantes de 0 pour le pH correspondant l'quilibre avec l'air (vers pH 9,8), l'quivalent d'environ 4,5 g de spiruline/jour/m vers pH 11. La thorie dit que la vitesse d'absorption est proportionnelle au coefficient d'absorption et la diffrence des pressions de vapeur de CO2 dans l'air et sur le liquide. La pression de vapeur du CO2 sur une solution de carbonate/bicarbonate de sodium est donne dans la littrature. Kohl et Riesenfield (1960) donnent dans "Gas Purification" BIBLIOGRAPHIE. - kohl la page 117, une formule ayant comme variables la temprature, la basicit et le rapport c (moles de CO2/mole de base), en mmHg: pCO2 = 68,5 x b1,29x (2c - 1) / [(1 - c) x (333 - 1,8 x t) x (0,0487 - 0,0006 x t)] o b = basicit du milieu absorbant, gmoles de base forte/litre c = rapport molaire CO2/base correspondant au pH du milieu t = temprature du milieu,C L'absorption du CO2, exprim en g de spiruline/jour/m (en admettant 1,8 kg de CO2 par kg de spiruline) se calcule alors par la formule: 0,772 x ka x [0,00076 x vpm x (1 - alt/10000) - pCO2] o: ka = coefficient d'absorption, gmoles de CO2 absorbs/heure/m/atmosphre vpm = teneur de l'air en CO2, ppm volumiques alt = altitude, mtres 0,772 = (44 x 24)/(1,8 x 760) La valeur de ka moyenne rsultant des mesures d'absorption directes et indirectes (productivits des bassins de spiruline aliments en carbone uniquement partir de l'air) se situe autour de 23. Nos mesures directes effectues en 1991 en bassines donnaient ka = 25. En aot 1999 un bassin de 6 m a t rempli de 1000 litres de milieu de culture base de soude N/10 et agit comme une culture normale. Son pH est tomb de 12,44 10,68 en 16 jours, ce qui correspond ka = 24. Donc ka = 20 donne une marge de scurit importante.

A7-2) Analyse du CO2 dans l'air

La formule ci-dessus ( A7-1) donnant pCO2 permet de mesurer la teneur de l'air en CO2 avec un matriel trs simple, alors qu'un analyseur infrarouge cote 4000

U.S.$. Il suffit de faire barboter un petit dbit d'air (mini compresseur d'aquarium) travers un diffuseur au fond d'une prouvette contenant une solution de bicarbonate de sodium 8,4 g/l (basicit 0,1 N), et de mesurer le pH l'quilibre. Le rsultat dpend de la temprature de la solution. Cette mthode est videmment inadapte aux changements brusques de teneur de l'air en CO2, cause de l'inertie de la solution. Pour diminuer cette inertie on a intrt a rduire le volume de solution et diviser finement le gaz barbottant. Pour des mesures long terme, conserver l'prouvette l'abri de la lumire pour viter son verdissement et ajouter de l'eau distille pour maintenir le niveau s'il y a vaporation (si la temprature de la solution est infrieure la temprature de rose de l'air analys, la solution se diluera progressivement : dans ce cas il faut rajouter du bicarbonate pour maintenir sa basicit 0,1 N).

A7-3) pH dun milieu de culture en quilibre avec latmosphre

Il est facile de calculer ce pH en combinant les deux quations donnes au A7-1 (absorption).

A8) Interaction Photosynthse/Absorption de CO2

Ce graphique prsente des exemples de variation de la vitesse d'absorption du CO2 de l'air

en fonction de la teneur de l'air en CO2 et du pH du milieu de culture, calcule d'aprs la formule donne en Annexe A7 (formuleCO2), et exprime en quivalant spiruline raison de 1,8 g/g de spiruline, pour les conditions suivantes : altitude = 0, temprature = 30C, ka = 18 et basicit = 0,1 N. On voit qu'il y a peu gagner travailler pH > 10,3. Sur ce mme graphique ont t reportes des exemples de variation de la vitesse de photosynthse, exprime dans la mme unit que l'absorption du CO2 (en productivit de spiruline), en fonction du pH, pour une luminosit donnes, en l'absence d'autres facteurs limitant. Ces exemples ne sont donns qu' titre illustratifs sans valeur prcise des paramtres autres que le pH,

simplement pour faire saisir le mcanisme de l'interaction. photosynthse/absorption du CO2. Si l'on suit une de ces courbes de vitesse de photosynthse en partant du pH minimum, on voit que cette vitesse diminue au del de pH 10. Simultanment la vitesse d'absorption du CO2 croit et il vient un moment o les deux vitesses sont gales (les deux courbes se croisent): partir de l, le pH ne peut plus continuer crotre; ce point d'quilibre correspond la vitesse de photosynthse sous une atmosphre ayant la teneur en CO2 indique. Le pH l'quilibre correspondant est d'autant plus haut que les conditions de photosynthse (lumire, agitation) sont meilleures et que la teneur en CO2 de l'air est plus basse.

A9) Productivit en fonction de l'ombrage

calcule par Modle de simulation "SPIRULIN", avec taux de purge 1 % et avec ajout de 18 g CO2/jour/m :

0 50 75 80

% d'ombre % d'ombre % d'ombre % d'ombre

= = = =

14,3 13,3 9.9 8,4

g/jour/m g/jour/m g/jour/m g/jour/m

On voit la faible influence du taux d'ombrage jusque vers 50 %.

A10) Consommation d'eau en fonction de l'ombrage

calcule par Modle de simulation "SPIRULIN", avec taux de purge 1 % et avec ajout de 18 g CO2/jour/m : 0 65 75 80 % d'ombre % d'ombre % d'ombre % d'ombre = = = = 732 556 623 698 litres d'eau/kg de spiruline litres d'eau/kg de spiruline litres d'eau/kg de spiruline litres d'eau/kg de spiruline

Il existe un minimum de consommation d'eau vers 65 % d'ombrage.

A11) Correspondance entre pH et rapport molaire C = CO2/base

(soude ou potasse)

Cette relation est d'une grande importance pour de nombreux calculs intressant la culture de spiruline. Elle a t tablie exprimentalement dans la gamme usuelle d'alcalinit (autour de 0,1). Elle dpend faiblement de la valeur de l'alcalinit.

A12) Mlanges de carbonate et bicarbonate (de sodium)

a) Pour obtenir une solution aqueuse ayant les caractristiques suivantes : rapport molaire CO2/base forte = C et basicit b moles/litre, on peut dissoudre les produits suivants dans un litre d'eau : Carbonate de sodium = 106 x b (1 - C), grammes + Bicarbonate de sodium = 84 x b x (2C - 1), grammes

En mariant cette relation avec celle de l'Annexe A11 on peut calculer les mlanges carbonate + bicarbonate donnant un pH dsir pour un basicit donne. b) Pour passer d'une solution caractrise par Ci et b une solution caractrise par Cf et b, on peut ajouter un litre de la premire (Cf - Ci) / (1 - Cf) = E, litre d'eau + 84 x E x b, grammes de bicarbonate de sodium. Mise en garde : le carbonate achet peut tre un mlange de carbonate et bicarbonate (soit par bicarbonatation naturelle du carbonate stock dans certaines conditions, soit parce qu'il s'agit de natron ou trona) ; avant d'utiliser du carbonate vrifier sa teneur en bicarbonate en prenant le pH d'une solution 5 g/l.

A13) Neutralisation de l'eau de cendre par le bicarbonate de soude

L'extrait aqueux de cendres de bonne qualit prsente gnralement un trs haut pH lorsqu'il vient d'tre fait, jusqu' 13. Avant de l'utiliser comme base de milieu de culture il faut attendre longtemps (par exemple 15 jours) pour que son pH baisse suffisamment par absorption de CO2 de l'air. Un artifice pour rendre de tels extraits utilisables instantanment est d'y dissoudre du CO2 pur ou du bicarbonate de soude. La quantit de bicarbonate ("bicarb") ajouter pour abaisser le pH 10,5 peut tre calcule par l'une ou l'autre des formules suivantes: bicarb = 187 x (0,55 - C) x b, g/l bicarb = 1,83 x S - 234 x C x S / (56 + 26 x C), g/l formules o:

C = rapport molaire CO2/base, dtermin partir du pH (cf Annexe A11) b = normalit alcaline de l'eau de cendre, moles/l S = salinit alcaline (potasse + carbonate de potasse) de l'eau de cendre, g/l = b x (56 + 26 x C) N.B. La salinit alcaline S peut se calculer approximativement partir de la salinit totale dtermine par la densit (en gnral la salinit alcaline reprsente les 2/3 de la salinit totale), mais il est plus prcis de la dterminer par alcalimtrie partir de C et b. Exemple: Une eau de cendres a une densit de 1,013 et un pH de 12,45 25C, soit une salinit totale de 18 g/l et C = 0,4; l'alcalimtrie donne b = 0,2 soit une salinit alcaline S = 13,3; bicarbonate ajouter = 5,6 g/l. Application aux solutions de soude caustique : L'obtention de milieux de culture base de soude caustique peut tre considre comme un cas particulier de la neutralisation de l'eau de cendre (laquelle est une solution de potasse caustique). Ce cas peut tre utile lorsque le carbonate est plus rare que la soude, pour obtenir des milieux pH moyen. Exemples de mlanges de soude et de bicarbonate de soude pour b = 0,1 moles/litre: 6,1 g de bicarbonate de sodium + 1,2 g de soude par litre d'eau = pH 10,0 5,6 g de bicarbonate de sodium + 1,4 de soude par litre d'eau = pH 10,2 5 g de bicarbonate de sodium + 1,7 de soude par litre d'eau = pH 10,5 N.B. L'utilisation de soude caustique est sujette restriction (cf Annexe A16.1, N.B.).

A14) Composition de divers produits

(N.B.: ppm = mg/litre ou mg/kg)

A14.1 Sel de mer brut (non raffin)

Analyse du sel de La Salorge de Gurande: Phosphore: pratiquement 0; potassium: 1 2 g/kg; soufre: 3 7 g/kg; magnsium: 4 8 g/kg; calcium: 1 2 g/kg; cuivre: 2,5 ppm; zinc 0,5 2 ppm; manganse: 4 8 ppm; fer 30 100 ppm.

A14.2 Cendre de bois

Dumon donne la composition suivante de la cendre en g/kg: Phosphore: 43; soufre: 8; potassium 219; magnsium: 90; calcium 236; manganse: 50; fer: 14. Teneur en solubles trs variable (de 1 25 %). Analyse moyenne de sels solubles extraits de cendres, vendus sur les marchs burkinabs : mlange de carbonate et bicarbonate de potassium ( 15 % en poids de bicarbonate) avec 10 % de sulfate dipotassique, 0,1 % de phosphate et de calcium et des traces de magnsium. La solubilit du magnsium et du calcium contenus dans la cendre dpend beaucoup du pH: presque nulle pH 13, elle est notable pH 10 (environ 100 ppm de magnsium dans l'eau de cendre, qui est par ailleurs trs riche en soufre: 1500 ppm).
D'aprs http://www.woodash.net/chart.html :

Range in elemental composition of industrial fly ash and bottom ash samples Element Boron Potassium Arsenic Copper Nickel Cadmium Lead Selenium Cobalt Mercury Zinc Chromium Molybdenum Fly Ash 16.9 (8.6-22.4)
19236-29526

Bottom Ash 1.0 (0.7-1.3)

12572-19634

1.0 (1.0-1.0) 53.5 (39.5-81.5) 17.3 (14-24) 9.6 (3.0-21.1) 11.0 (4-20) 1.0 (1.0-1.0) 6.4 (5.3-8.7) 0.01 (.01-0.01) 886 (522-1529) 26.0 (17.0-40.7) 11.3 (7-18)

1.0 (1-1.0) 31.3 (24.8-28.0) 14.0 (13-15) 5.0 (2.0-13.1) 7.7 (5-10) 1.0 (1.0-1.0) 4.6 (4.2-4.9) 0.01 (0.01-0.02) 497 (348-896) 20.3 (16.0-25.4) 3.0 (1.0-6.0)

* Mean and (Range) taken from analysis of 7 ash samples * All results expressed as mg/kg unless otherwise stated La cendre de bois a une composition trs variable en fonction des essences mais aussi de la temprature de combustion, le potassium et le bore tant volatils audessus de 1000C, d'aprs "Wood ash composition as a function of furnace temperature", Mahendra K. Misra et al. in Biomass and Bioenergy Vol.4, N2, pp 103-116 (1993), Pergamon Press (http://www.fpl.fs.fed.us/documnts/pdf1993/misra93a.pdf). Cet article donne (page

111) les compositions lmentaires suivantes pour des cendres obtenues 600C, en g/kg de cendres: Pin : Ca = 290,5;K = 162,4 ; Mg = 70,3 ; S = 10,7 ; P = 8,4 ; Mn = 40,4 ; Zn = 3,6 ; Fe = 5,8 ; Al = 4,7 ; Na = 0,6 ; B = 0,6 ; Cu = 0,4 Peuplier : Ca = 256,7 ; K = 79,3 ; ;Mg = 90,9 ; S = 10,2 ; P = 9,5 ; Mn = 4,5 ; Zn = 0,4 ; Fe = 3,2 ; Al = 3,5 ; Na = 2,3 ; Si = 0,11 ; B = 0,5 ; Cu = 0,3 Chne blanc : Ca = 313,5 ; K = 102,5 ; Mg = 75,7 : S = 12,1 ; P = 5,6 ; Mn = 1,4 ; Zn = 0,8 ; Fe = 0,9 ; Al = <0,6 ; Na = <0,3 ; Si = 1,3 ; B = 0,4 ; Cu = 0,2

A14.3 Eaux
Les eaux de rivire ont en moyenne les teneurs typiques suivantes (en ppm): fer = 0,1; calcium = 40; magnsium = 14; soufre = 6. L'appoint d'eau au bassin apporte alors gnralement assez de magnsium et de soufre. L'eau du puits de la Ct du Pain de Vie Arequipa, Prou a les teneurs suivantes (en ppm): calcium = 72; magnsium = 16; soufre = 50; potassium et phosphore = ngligeables. Si l'vaporation est de 2,4 mm/jour, l'appoint d'eau apporte le soufre et le magnsium, et bien sr le calcium, pour 20 g de spiruline/jour/m. L'eau du puits du Foyer de Charit de Bangui (RCA) ne contient pratiquement ni calcium ni magnsium ni fer. Il en est de mme de l'eau de la ville de Linares, Chili. L'eau du puits de l'Ecole d'Agriculture de Catemu, Chili, contient 96 ppm de calcium, 34 de magnsium et 130 de soufre. Analyse de l'eau d'un lac spirulines prs de Tular (Madagascar) : sel = 35 g/l; bicarbonate + carbonates de sodium (pH 10) = 16 g/l; soufre (des sulfates) = 0,5 g/l; fer = 0,44 ppm; calcium = 6,5 ppm; magnsium = 80 ppm; phosphore = 3,6 ppm; azote = 0,3 ppm (dont 0,2 ammoniacal). Eau du Gardon de Mialet : 22 ppm de calcium et 2,4 ppm de magnsium Eau de mer (ppm): fer: 0,002 0,02 ; calcium: 400; magnsium: 1272; phosphore: 0,001 0,01; soufre: 900; bicarbonate < 150.

A14.4 Urine humaine

Elle contient : Azote = 7 12 g/l; phosphore = 0,5 0,7 g/l; potassium = 2 3 g/l; soufre = 0,8 1,2 g/l; sel (chlorure de sodium) = 12 g/l; calcium = 0,13 g/l; magnsium = 0,1 g/l; fer = 0,3 mg/l; sucres = 0,15 g/l. Sa "production" est d'environ un litre par jour par personne.

A14.5 Nitrate du Chili (Salitre potsico)

Ce produit naturel correspond 2 NaNO3.KNO3; il contient 15 % d'azote, 18,4% de sodium, 11,6% de potassium, 1% de soufre (sous forme de sulfates), ainsi que: 0,12% de calcium, 0,14% de magnsium et de nombreux oligo-lments (tous les micronutrients ncessaires pour la spiruline). Il est color en rose. A ne pas confondre avec le KNO3 (blanc) pur, extrait du salitre, donc galement "naturel". A14.6 Sang : Azote: 350 mg/l; phosphore: 30 70 mg/l; fer: 9 g/l

A15) Matriel de laboratoire utile (cf annexe - A29) A16 Produits chimiques
Produits chimiques utiles pour la spiruline (Les % indiqus sont les % en poids sur produit pur sauf indication contraire; pm = poids molaire)

- Acide chlorhydrique HCl, pm = 36,5 - Acide citrique COOH-CH2-C(OH)(COOH)-CH2-COOH, pm = 192 - Acide orthoborique H3BO3, pm = 61,8 (17,14 % de bore) - Acide phosphorique H3PO4, pm = 98 (31,6 % de phosphore) - Acide sulfurique H2SO4, pm = 98 (32,7 % de soufre) - Alum de chrome cristallis, CrK(SO4)2, 12 H2O, pm = 499,4 (10,3 % de chrome) - Ammoniac NH3, pm = 17 (82 % d'azote) - Bicarbonate d'ammonium NH4HCO3, pm = 79 (17,7 % d'azote) - Bicarbonate de sodium NaHCO3, pm = 84 - Bicarbonate de potassium KHCO3, pm = 100 - Butane C4H10, pm = 58 (82,8% de carbone) - Carbonate de potassium K2CO3, pm = 138 - Carbonate de sodium Na2CO3, pm = 106 - Chaux Ca(OH)2, pm = 74 (54 % de calcium)

- Chlorure de calcium CaCl2, pm = 111 (36 % de calcium) - Chlorure de manganse cristallis 4 H2O, MnCl2.4H2O, pm = 198 (27 % de manganse) - Chlorure de potassium KCl, pm = 74,5 (52 % de potassium) - Chlorure de sodium (sel de cuisine) NaCl, pm = 58,5 - Chlorure de zinc ZnCl2, pm = 136,3 (46,5 % de zinc) [hygroscopique!] - EDTA (acide thylne-diamino-ttractique), pm = 292 - EDTA, sel disodique cristallis 2 H2O, pm = 372 (78 % d'EDTA) - Gaz carbonique CO2, pm = 44 (27,3 % de carbone) - Molybdate de sodium MoNa2O4,2H2O, pm = 242 (39,7% de molybdne) - Nitrate d'ammonium ou ammonitrate (explosif sec) NH4NO3, pm = 80 (35 % d'azote dont la moiti ammoniacal) - Nitrate de calcium Ca(NO3)2, pm = 164 (24 % de calcium et 17 % d'azote) - Nitrate de sodium NaNO3, pm = 85 (16,5 % d'azote; 72,9 % de NO3; 27 % de sodium) - Nitrate de potassium KNO3, pm = 101 (13,9 % d'azote, soit 61,4% de N03; 38,6% de potassium; qualit technique 91 % de puret) - Oxyde de molybdne, MoO3, pm = 143,9 (66 % de molybdne) - Oxyde de slnium, SeO2, pm = 111 (70,4 % de slnium) - Phosphore, pm = 31 - Phosphate monoammonique NH4H2PO4, pm = 115 (27 % de phosphore et 12 % d'azote ou 15 % de NH4) - Phosphate diammonique (NH4)2HPO4, pm 132 = (23,4 % de phosphore et 21 % d'azote) - Phosphate dipotassique K2HPO4, pm = 174 (17,8 % de phosphore et 44,8 % de potassium, puret 97 %) [hygroscopique!] - Phosphate monopotassique KH2PO4, pm = 136 (22,7% de phosphore, 28,7% de potassium)

- Phosphate disodique Na2HPO4, 12 H2O, pm = 358 (8,7 % de phosphore) - Phosphate tricalcique Ca3(PO4)2, pm = 310 (20 % de phosphore, 39 % de calcium), insoluble - Phosphate trisodique, Na3PO4.12H2O, pm = 380 (8,1 % de phosphore) - Potasse KOH, pm = 56 (70 % de potassium) - Propane C3H8, pm = 44 (81,8 % de carbone) - Salitre potassique: 15 % d'azote (soit 66 % de NO3), 18,4 % de sodium, 11,6 % de potassium, 1,2 g de calcium/kg, 1,4 g magnsium/kg, 10 g de soufre (soit 30 g de SO4)/kg - Slnite de sodium (Na2SeO3), pm = 173 (45,6% de slnium) [toxique] - Soude NaOH, pm = 40 - Sucre (= saccharose = sucrose = C12H22O11), pm = 342 (42 % de carbone) - Sulfate de calcium CaSO4, pm = 136 (29 % de calcium, 23,5 % de soufre), trs peu soluble - Sulfate de cobalt 7 H2O, CoSO4.7H2O, pm = 281,1 (20,3 % de cobalt) - Sulfate de cuivre cristallis 5 H2O, SO4Cu.5H2O,pm = 249,7 (24,9 % de cuivre) - Sulfate de magnsium cristallis 7 H2O (sel d'Epsom) MgSO4.7H2O, pm = 246,5 (9,6 % de magnsium et 12,7 % de soufre, puret 98 %) - Sulfate dipotassique K2SO4, pm = 174 (44,8 % de potassium et 18,4 % de soufre) - Sulfate de fer cristallis avec 7 H2O, FeSO4.7 H2O, pm =278 (20 % de fer) - Sulfate de zinc cristallis 7 H2O, ZnSO4.7H2O, pm = 287,4 (22,7 % de zinc) - Ure CO(NH2)2, pm = 60 (46 % d'azote, qualit engrais agricole) OXYDES (dans les engrais) (pm = poids molaire) Anhydride phosphorique P2O5 : pm = 142 (43,7 % de phosphore) Anhydride sulfurique SO3 : pm = 80 (40 % de soufre) Oxyde de potassium K2O : pm = 94 (83 % de potassium)

Oxyde de magnsium MgO : pm = 40 (60 % de magnsium)

A16.1 Principaux IONS utiles pour la spiruline

(= poids d'un ion-g) Ammonium NH4+ = 18 Calcium Ca++ = 40 Chlorure Cl- = 35,5 Bicarbonate HCO3- = 61 Carbonate CO3-- = 60 Fer ferreux Fe++ , ferrique Fe+++ = 56 Hydrogne (proton) H+ = 1 Phosphate PO4---= 95 (32,6% de P) Potassium K+ = 39 Magnsium Mg++ =24 Nitrate NO3- = 62 (22,6 % de N) Sodium Na+ = 23 Sulfate SO4-- = 96 (33,3 % de S) Zinc Zn++ = 65

A16.2 Principaux cristaux peu solubles pouvant prcipiter dans les boues de spiruline
-

Carbonate de calcium CaCO3 Hydroxyde de magnsium Mg(OH)2 Hydroxyde de zinc Zn (OH)2 Phosphate de calcium Ca3(PO4)2 Phosphate de fer FePO4 Phosphate de magnsium et d'ammonium MgNH4PO4.6H2O

A16.3 Masse atomiques des lments intressant la spiruline

Liste des noms, des symboles et des masses atomiques (arrondies) des lments : Azote = N = 14 Bore = B = 11 Calcium = Ca = 40 Carbone = C = 12 Chlore = Cl = 35,5 Chrome = Cr = 52 Cobalt = Co = 59 Cuivre = Cu = 63,5 Fer = Fe = 56 Hydrogne = H = 1 Magnsium = Mg = 24 Manganse = Mn = 55 Molybdne = Mo = 96 Oxygne = O = 16 Phosphore = P = 31 Potassium = K = 39 Slnium = Se = 28 Sodium = Na = 23 Soufre = S = 32 Zinc = Zn = 65,4

A16.4 Masses molculaires des principaux oxydes et ions intressant la spiruline

CO3 = 60 (73,3 % de CO2) HCO3 = 61 (72,1 % de CO2)

K2O = 94 (83 % de K) NH4 = 18 (77,8 % de N) NO3 = 62 (22,6 % de N) MgO = 40 (60 % de Mg) P2O5 = 142 (43,7 % de P) PO4 = 95 (32,6 % de P) SO3 = 80 (40 % de S) SO4 = 96 (33,3 % de S)

A17) Normes de la spiruline en France

(Selon Arrt du 21/12/1979) Par rapport au poids sec, en ppm (mg/kg) : Arsenic <= 3 Plomb <= 5 Etain <= 5 Cadmium <= 0,5 Mercure <= 0,1 Iode <= 5000 Tant pour le produit frais que le sec : Germes arobies (30C) <= 100.000 / gramme Coliformes fcaux (44,5C) < 10/ gramme Anarobies sulfito-rducteurs (46C) < 100/ gramme Clostridium perfringens <= 1/ gramme Staphylococcus aureus <= 100/ gramme Salmonella : absence dans 25 g.

N.B. Exemples de limites suprieures de pH pour la croissance de microorganismes des aliments (en prsence de spirulines vivantes des valeurs diffrentes pourraient tre obtenues) : Staphylococcus = 9,8 Streptococcus Bacillus = 9,3 B. subtilis = 10 Clostridium botulinum Clostridium perfringens = 8,5 Clostridium sporogenes = 9 Lactobacillus = 8 E. coli = 10 Salmonella (y compris salmonella typhi) = 9 Vibrio parahaemolyticus (cause de gastroentrites) = 11 Vibrio cholerae = 9,6 Pseudomonas = 8 Candida = 9,8 Saccharomyces = 8,6 Penicillium = 11 Aspergillus = 9,3 Listeria monocytogenes = 9,6 = 8,5 = 9,3

A18) Limites de concentrations dans le milieu de culture

Tous les chiffres expriment des mg/litre (ou ppm). Ceux donns entre parenthses sont ceux du milieu de culture de base de Zarrouk dans sa thse (BIBLIOGRAPHIE.htm - zarrouk, page 4). Les maxi comportent en gnral une marge de scurit : Nitrate* = 440 6600 (1800)

Ammonium* = 0,3 30 Ure* < 50 Phosphate** = 0,1 300 (270) Potassium > 10 (665) et rapport pondral K/Na < 5 Magnsium*** = 1 30 (19) Sulfate** > 30 (675) Fer > 0,4 (2) Calcium**** > 0,6 (14) Bore = (0,5) Manganse = (0,5) Zinc < 1 (0,05) Cuivre < 0,001 ? (0,02) Molybdne = (0,01) Chrome = (0,01) Nickel = (0,01) Cobalt = (0,01) Notes: * a) La mesure de la concentration en ammonium par colorimtrie avec le ractif de Nessler donne en ralit la somme ion ammonium NH4 + ammoniac libre NH3. Il est convenu quammonium exprime ici la somme des deux. Les doses minimum ne s'appliquent que s'il n'y a pas d'autre source d'azote. Les maxima pour ammonium et ure ne sont pas indpendants puisque l'ure s'hydrolyse en ammonium ; c'est l'ammonium total potentiel qui compte, ou plus prcisment l'ammoniac libre. Il y a quilibre entre ammoniaque (NH4OH) et ammoniac (NH3) dans l'eau, l'ammoniaque se dissociant elle-mme en ions ammonium (NH4) et hydroxyle (OH) : cet quilibre dpend du pH et de la temprature. L'odeur d'ammoniac est perceptible ds 20 ppm de NH4 + NH3 pH 10 et 20 C. Plus le pH est haut, plus il y a d'ammoniac libre l'quilibre selon le tableau suivant ( 25C) : pH 6 = 0 % de NH3 (100 % de NH4)

pH 8 = 4 % pH 9 = 25 % pH 10 = 78 % pH 10,2 = 92 % On pense que c'est l'ammoniac libre NH3 qui est toxique plutt que l'ion ammonium NH4, ce qui expliquerait que des doses dammonium + ammoniac trs suprieures 30 ppm puissent ne pas tre toxiques bas pH. La souche ondule (Paracas) rsiste 75 ppm de NH3 pH 10,5 20 C, du moins pendant un ou deux jours. La vitesse d'hydrolyse de l'ure dpend elle-mme du pH et de la temprature. Il nous est arriv, en pleine saison de production, de mettre par erreur 350 ppm d'ure sans que la culture meure (hydrolyse lente ?, bas pH ?, vaporation rapide de NH3 ?, souche trs rsistante ?). D'aprs le rapport Melissa 2004 (page 195), une concentration en ammonium suprieure 80 ppm sous clairage > 3 Klux provoque une forte production d'EPS. b) Il y a rduction possible du nitrate en ammoniac selon la raction globale: NO3K + 2CH2O (hydrate de carbone) = NH3 + 2CO2 + KOH Notons en passant que la rduction du nitrate donne une augmentation de la basicit, quel que soit l'agent rducteur. Cette quation signifie qu'un kilo de sucre risque d'tre quivalant 500 g d'ure en tant que production potentielle d'ammoniac. C'est donc la somme ure plus sucre qu'il faut considrer pour calculer la limite de toxicit, soit la rgle pratique: "dose quotidienne d'ure + (dose quotidienne de sucre) / 2 < 50 - 1,7 x (concentration du milieu de culture en ammonium), o doses et concentration sont exprimes en mg/l (en l'absence de sucre ou de nitrates, inutile de tenir compte du sucre dans cette formule). On a constat des cas de rduction brusque de nitrates en labsence de saccharose : l agent rducteur serait dans ce cas lexopolysaccharide. Ceci conduit se mfier des teneurs en nitrates suprieures 200 ppm qui sont pourtant trs frquentes. ** D'aprs la thse de J.F.Cornet BIBLIOGRAPHIE.htm - Cornet : 0,7 ppm de phosphore et 3 ppm de soufre suffisent. Il est probable que 0,05 ppm de phosphore soit encore suffisant (cas de l'eau de mer). Mais il n'est pas recommand de travailler moins de 5 mg de PO4/litre, et, pour permettre une bonne productivit, il faut assurer plus de 20 mg/litre. *** Le phosphate mixte de magnsium et d'ammonium et le phosphate de magnsium, trs peu solubles, forment facilement des cristaux dans le milieu de culture si leur produit de solubilit est dpass.. **** A pH lev (> 10,5) la solubilit du calcium diminue par prcipitation de calcaire.

Les limites sont souvent soit inconnues ou mal dfinies. Par exemple le cuivre la dose utilise par Zarrouk devrait tre toxique. Il se peut que les limites dpendent des conditions de culture.

A.19) Composition lmentaire de la spiruline :

Carbone = 468 g/kg Oxygene = 279 g/kg Azote = 120 g/kg Hydrogene = 95 g/kg Potassium = 6,4 15,4 g/kg Phosphore = 6,7 - 9* g/kg Soufre = 6 g/kg Chlore = 4 g/kg Magnsium = 2 3 g/kg Sodium = 2 4,5 g/kg Calcium = 1** g/kg Fer = 600 - 1800 mg/kg (= ppm) Bore = 80 mg/kg (= ppm) Manganse = 25 - 37 mg/kg (= ppm) Zinc = 40 *** mg/kg (= ppm) Cuivre = 8 -10 mg/kg (= ppm) Molybdne = 7 mg/kg (= ppm) Nickel = 3 mg/kg (= ppm) Chrome = 2,8 mg/kg (= ppm) Vanadium = 2 mg/kg (= ppm) Cobalt = 1,5 mg/kg (= ppm) Selenium = 0,3 mg/kg (= ppm)

* ou 12 quand la spiruline est produite dans des conditions o peu d'EPS se forme (d'aprs Thse de J.F.Cornet BIBLIOGRAPHIE.htm - Cornet, page 166). ** trs variable: un ouvrage rcent donne une teneur en calcium de 7 g/kg (BIBLIOGRAPHIE.htm - Vonshak1997, page 149) et il est possible datteindre 14g/kg. *** peut tre augment jusqu' 1g/kg si souhait. La composition en produits nutritionnels est donne en Annexe A20. On notera certaines diffrences importantes avec le tableau ci-dessus, notamment sur le calcium, le sodium et le fer; la composition de la spiruline est sujette variations en fonction des conditions de culture. Ainsi Cornet (BIBLIOGRAPHIE.htm - Cornet, page 125) indique pour la spiruline produite faible flux lumineux (5 20 W/m), en g/kg:

Carbone = 505 g/kg Oxygne = 310 g/kg Azote = 100 g/kg Hydrogne = 67 g/kg

A20) Composition approximative de la spiruline en lments nutritionnels

Protines = 65 % en poids (norme : >50) Glucides = 15 % en poids Minraux = 7 % en poids (cendres totales : <10) Lipides = 6 % en poids Fibres = 2 % en poids Eau = 5 % en poids (norme : <10) Contenu nergtique = 5000 calories ou 20,9 kJ/ gramme sec. D'aprs notices Flamant Vert : VITAMINES Bta-carotne = 1400 mg/kg = 2330 Units Internationales (U.I.)

E (Tocophrol) = 100 mg/kg B1 (Thiamine) = 35 mg/kg B2 (Riboflavine) = 40 mg/kg B3 ou PP ( Niacine) = 140 mg/kg B5 (Acide pantothnique) = 1 mg/kg B8 ou H (Biotine) = 0,05 mg/kg B12 (Cobalamine) = 3,2 mg/kg (cette B12 ne serait pas totalement assimilable par l'organisme) Inositol = 640 mg/kg K (Phylloquinone) = 20 mg/kg ACIDES AMINES Alanine = 47 g/kg Arginine = 43 g/kg Acide aspartique = 61 g/kg Cystine = 6 g/kg Acide glutamique = 91 g/kg Glycine = 32 g/kg Histidine = 10 g/kg Isoleucine = 35 g/kg Leucine = 54 g/kg Lysine = 29 g/kg Mthionine = 14 g/kg Phnylalanine = 28 g/kg Proline = 27 g/kg Srine =32 g/kg Thronine = 32 g/kg

Tryptophane = 9 g/kg Tyrosine = 30 g/kg Valine = 40 g/kg PIGMENTS Phycocyanine = 150 g/kg Chlorophylle a = 11 g/kg Carotnodes = 3,7 g/kg (dont bta-carotne = 1,4 g/kg) ACIDES GRAS ESSENTIELS Acide linolique = 8 g/kg Acide gamma-linolnique (AGL ou GLA) = 10 g/kg ENZYME Superoxyde-dismutase = 1,5 millions d'units / kg MINERAUX Chrome = 3 mg/kg Calcium = 10000 mg/kg Cuivre = 12 mg/kg Fer = 1800 mg/kg Magnsium = 4000 mg/kg Manganse = 50 mg/kg Phosphore = 8000 mg/kg Potassium = 14000 mg/kg Sodium = 9000 mg/kg Zinc = 30 mg/kg

A21) Elments de prix de revient

(Prix en France TVA 20,6 % incluse et au dtail sauf indication contraire) (Ces prix sont exprims en U.S. $ sur la base de 1 Euro/U.S $ et correspondent 1999 ) (Les indications de fournisseurs n'ont aucun caractre d'exclusivit ni de publicit) Argile pure (densit 2,2 kg/l) = 0,5 $/kg Films - Polythylne noir, paisseur 0,15 mm, largeur 3 m = 0,35 $/m (Arequipa) - Polythylne noir, paisseur 0,15 mm, largeur 8 m = 0,3 $/m par lot de 300 m ou 1,17 $/m au dtail - Polythylne noir, paisseur 0,3 mm, largeur 6,5 m = 0,98 $/m par lot de 400 m - EVA noir piscicole, paisseur 0,5 mm, largeur 4, 6 ou 10 m, garanti 15 ans = 5,08 $/m au dtail - PVC vert alimentaire, paisseur 0,5 mm, largeur 4 ou 6 m, garanti 10 ans = 6,77 $/m au dtail - PVC noir, paisseur 0,5 mm, non alimentaire, largeur 2,05 m = 1,8 $/m par lot important - PVC noir, paisseur 1,2 mm, alimentaire et soudable facilement = 6,67 $/m en lot important - PVC gris, pais. 1,2 mm, 1150 g/m, pos par entreprise = 4,5 $/m (Espagne) - Gomembrane en PP souple qualit eau potable), paiss. 1,5 mm, pose par entreprise = 20 $/m - EPDM noir, pais. 1,14 mm, 1161g/m, en rouleau de 6,1 12,2 m de large = 10 $/m - Polythylne de serre (au Cd), paisseur 0,2 mm, largeur 6,5 m = 2 $/m au dtail ou 0,8 $/m par rouleau de 390 m (78 kg) - Polythylne de serre (au Cd), paisseur 0,25 mm, largeur 4 m = 0,6 $/m au dtail (Prou) - Polythylne de serre (incolore), 200 , largeur 8 m, en rouleau de 3500 m (713 kg) ou en rouleau de 400 m, largeur 6,5 m = ) = 0,75 $/m - Toile cire (qualit paisse) = 8 $/m au dtail

Fournisseurs de films et bches : Celloplast, Route du Praux, F53340-Balle, Tl 43984602 ou revendeurs (Mr Bricolage, Coopratives agricoles) Gotextiles - Bidim, 200 g/m, 4 m de large = 1,68 $/m au dtail Fournisseurs : Matriaux pour le batiment Couverture des bassins - Fibre de verre-polyester, ondule, largeur 0,9 m, longueur 2 m = 15,7 $/ m ou 11,3 $/m (Arequipa) - verre vitre 3 mm = 20 $/m - Tle ondule galvanise, largeur 0,9 m, longueur 2,5 m = 9,3 $/m - Toiture traditionnelle africaine en chaume sur piquets et charpente bois trait = 8 $/m couvert (Koudougou, Burkina Faso) - Serres "chapelle" accoles, couvertes en film de polythylne anti-UV (tout installes, ordinateur et ombrage compris) = 16 23 $/m utile couvert Tles - Fibre de verre-polyester translucide plane, largeur 1 m = 12,3 $/m - Tle galvanise plane, paisseur 0,5 mm, 1x2 m = 3,3 $/m Bois (sapin brut non trait) - Planches en bois brut, paisseur 27 mm, longueur 2,5 m = 5,8 $/m - Planches rabotes, pais. 14 mm, largeur 80 mm, long 2 m (en bois d'ayou) = 50 $/m (Mr Bricolage) - Liteaux en bois brut, 27 x 27 mm, long. 2 m = 0,3 $/m - Liteaux en bois brut, 3 x 4 cm, long. 2 m = 0,5 $/m - Liteaux en bois brut, 8mm x 27 mm, long 2,5 m = 0,27 $/m (Mr Bricolage) - Chevrons en bois brut, 6 x 8 cm, longueur 5 m = 1,4 $/m - Carrelet rabots, 14 mm x 14 mm, long 2 m = 0,83 $/m (Mr Bricolage) Piquets - acier (en t) peints, long. 1 m. = 2,5 $/pice

Tubes - acier galvanis 50 mm, en longueurs de 6 m = 3,5 $/m Vis galvanises - 4x40 mm = 10 $/200 pices - 4 x 30 mm (tirefond) = 0,05 $ pice - 5 x 30 mm = 5 $/100 pices - 8x60 mm (tirefond) =0,17 $ pice - 8x100 mm (tirefond) = 0,23 $ pice - 8x120 mm (tirefond) = 0,30 $ pice - 8x140 mm (tirefond) = 0,55 $ pice Parpaings ("blocs-ciment" en Belgique) de 50 x 20 x 20 cm (livrs sur chantier) = 1 $/pice Sable (livr sur chantier) = 43 $/mtre cube Filets d'ombrage - Canisse, largeur 2 m = 3,5 $/m; 1 $/m (Bangui, RCA) ; 1,2 $/m (Cotonou) - Ombrire ("Malla Rashel" = plastique tiss), noire, 80 %, largeur 4 m = 1,1 $/m (Chili) - Ombrire (plastique tiss), noire, 66 %, 50 m x 2,8 m = 1,45 $/m Fournisseurs : Celloplast, Route du Praux, F53340-Balle, Tl 43984602 ou revendeurs (Mr Bricolage, Coopratives agricoles) Lampes horticoles (systme complet avec ballast et rflecteur, ampoule Philips Son-T Agro garantie 10.000 heures, 13 W/klux/m) 400 Watt = 300 $ Isolants - flexible multicouche paisseur 20 mm (quivalent 200 mm de laine de roche), en rouleau de 1,58 m x 10 m = 15 $/m - rigide polystyrne extrud en plaque de 4 cm d'paisseur = 9 $/m Supports de toiles de filtre

-"Grille" Polythylne maille 5 mm NORTENE, largeur 1 m = 4,7 $/m au dtail - Moustiquaire fibre de verre, largeur 0,6 ou 1 m = 6 $/m au dtail - Moustiquaire nylon, largeur 1 m = 1,35 $/m (Arequipa, Prou) - Filet nylon maille 10 mm = 3 $/m Filtres - Toile de filtration Polyester monofilament, 30 microns, largeur 1,42 m. = 51,3 $/m - Toile de tamisage Polyester monofilament, 315 microns, largeur 1,58 m = 14,3 $/m - Toile de filtration Polyester (Tergal), tissu ordinaire pour doublure = 1,7 3,3 $/m - Cadre de srigraphie, toile polyester monofilament 25 microns = 165 $/m Fournisseur de toiles de filtration (30 ) : Nom du fournisseur : SEFAR FYLTIS Adresse : BP 3175 Lyon Cedex 03, France tel 33 4 72 13 14 15 fax 33 4 04 72 13 14 00 Compte chque postal : N 7878 45 Y, Centre Lille Rfrence de la toile 30 : Rfrence article : 72556AC Dsignation : Largeur 1420 mm, longueur 4 mtres, 07-30 /21 / PETEX Prix (le 21/01/2000) : 362 FF le mtre, plus 20,6 % de TVA (sauf pour l'export) + environ 4 % pour (assurance + transport + emballage). Aspirateurs - Aspirateur professionnel , 300 m. cube/h, 20 kPa, 1200 W = 1000 $ - Aspirateur mnager = 300 $ Pompes Pompe d'aquarium, 1000 l/h, 14 W, 220 V = 31 $

(Le prix peut descendre 24 $ pour des quantits importantes) (On trouve en Turquie des pompes valables un prix trs infrieur) - Pompe d'aquarium, 1200 l/h, 32 W, 220 V = 37 $ - Pompe vide-cave, vortex, 16000 l/h,1 kW, 220 V = 182 $ - Pompe vide-cave, vortex, 5000 12000 l/h, 300 400 W, 220 V = 100 $ - Pompe vide-cave ordinaire, 5000 l/h, 200 300 W, 220 V = 60 $ -Transformateur de scurit pour pompes d'aquarium ( cran d'isolement reli la terre), 500 W = 100 $ Fournisseurs (pompes d'aquarium Maxi-Jet) : Aquarium Systems 43 rue Gambetta, F57400-Sarrebourg, Tl 0387031098 ou magasins d'aquariophilie Pressoirs - Inox vis suprieure, jus de fruit, 4 litres = 190 $ Fournisseur : Etablissements J. Perraud, 7 route Nationale, F42470- SaintSymphorien-de-Lay, Tel 0477647879 Robinets - tout plastique, diamtre 25 mm = 30 $ Compteurs d'eau - tout plastique, diamtre 38 mm = 350 $ Compresseurs d'air - Type aquarium : 300 l/h, 6 Watt = 27 $ - Type aquarium : 150 l/h = 12 $ - Sans huile : 8 bars, 12000 l/h, 1100 Watt, rservoir 6 litres = 215 $ - Tuyau pour air comprim 8 bars sur enrouleur, 20 m = 48 $ - Tuyau pour air comprim 8 bars en ressort, 5 m = 20 $ - Tuyau PVC 4 mm pour aquarium = 0,53 $/m - Distributeur 3 robinets pour aquarium = 4,7 $ Programmateurs

- En 220 V alternatif = 20 28 $ (France et Chili) - En 12 V continu = 120 $ Photovoltaque - Panneau Si monocristallin, 12 V, 22 W = 270 $ ( + Rgulateur/chargeur de batterie = 100 $) - 12 V, 15 AH, tanche = 50 $ - Convertisseurs de courant lectrique de 12 V continu en 220 V puissance 40 W = 120 $ puissance 100 W = 230 $ Motorducteurs - 180 W, 220 V = 251 $ - 30 t/mn, 100 W, 220 V = 240 $ - 20 t/mn, 80 W, 220 V = 208 $ - 20,8 t/mn, 10 W restitus, 220 V, moteur asynchrone (Rf Crouzet 80667-009-INV) = 230 $ Extrudeuses (Pistolets extruder pour silicone en poches) - manuel, capacit 300 ml, modle SIKA = 37 $ (47 $ au Chili) - manuel, capacit 300 ml, import de Chine (de bonne qualit) = 3 $ - manuel, capacit 600 ml, modle SIKA MK5C = 49 $ - air comprim, 600 ml, modle SIKA DKR600 = 267 $ - poussoir (pour faire les saucisses), inox, 10 litres, manuel = 500 $ - gaine PE alimentaire 60, diamtre 50 mm = 24 $/km Fournisseurs (Pistolets Sika) : Sika, 101 rue de Tolbiac, F75654-Paris cedex13, Tel 0153797900 ou revendeurs (produits pour le batiment) Schoirs - Schoir lectrique, puissance 600 Watt, modle Stckli avec 3 plateaux = 67 $ (Suisse) ; le plateau supplmentaire = 1,7 $

Fournisseurs : A. & J. Stoeckli, CH-8754- Netstal GL ou revendeurs (en Suisse) Broyeurs - broyeur manuel (Corona) = 20 $ (Chili) Emballages - Sacs plastique mtalliss thermoscellables maintien vertical ou non, capacit 800 g de spiruline broye = 0,41 $ pice par 5000 units ou 0,34 $ pice par 10.000 units ; capacit 100 g = 0,078 $ pice par 10.000 units (non imprims) ou 0,113 $ imprims. - soude-sacs lectrique pour sacs plastique aluminiss = 333 $ Fournisseur : Bernhardt, BP 69, F62201-Boulogne/Mer, Tel 0321315091 Produits chimiques - Acide chlorhydrique 33% = 1,17 $/litre - Acide citrique en sac de 25 kg = 1,9 $/kg (Costa Rica) - Acide phosphorique 78% en jerrican (24 % de P) = 0,6 $/kg (Espagne) - Acide phosphorique 85 % en bidon de 25 kg (27 % P) = 1 $/kg (Costa Rica) - Bicarbonate de sodium zootechnique en sac de 25 kg = 0,35 $/kg - Bicarbonate de sodium naturel U.S.A. 99,8 % de puret, en sac de 25 kg = 0,4 $/kg (Costa Rica) - Bicarbonate de sodium alimentaire par 500 g = 2,7 $/kg - Butane liquide = 1,3 $/kg en bouteilles de 13 kg consignes; 0,69 $/kg (Chili); 0,713 $/kg (Cotonou) + consigne - Carbonate de sodium technique lger = 1 $/kg - Chlorure de sodium brut broy en sac de 50 kg = 0,22 $/kg; 0,083 $/kg (Arequipa), 0,117 (Espagne) - Chlorure de sodium alimentaire (sel fin) en sac de 50 kg = 0,27 $/kg - Chlorure de sodium alimentaire (sel fin) en sac de 10 kg = 0,38 $/kg - EDTA sel disodique, 2H2O, par 1 kg = 50 $/kg

- Ferfol (Fer chlat l'EDTA 13 % de fer), par 1 kg = 25 $/kg - Gaz carbonique liquide en bouteille de 30 kg = 0,863 $/kg (Iquique, Chili) bouteille comprise, ou 0,63 $/kg (Arequipa, Prou) + bouteille (2 $/mois + caution 233 $) - Gaz carbonique liquide en bouteille de 22 kg = 3 $/kg (Als, France) + bouteille (8,8 $/mois + caution 200 $) - Gaz carbonique liquide en bouteille de 25 kg (Chili) = 1,25 $/kg + bouteille (5,8 $/mois) [Dtendeur = 12 $]

- Gaz carbonique liquide en vrac, location du stockage compris, hors vaporisateur (cot 4500 $), pour 6 tonnes/an = 0,5 $/kg - Nitrate de potasse cristallis, engrais, en sac de 50 kg = 0,68 $/kg - Nitrate de soude du Chili, engrais 16 % d'azote, en sac de 50 kg = 0,53 $/kg - Oligolments en solution concentre (formule J. Falquet) = 0,033 $/kg de spiruline - Propane liquide vrac = 0,5 $/kg - Phosphate monoammonique cristallis, engrais, en sac de 25 kg = 1,05 $/kg - Phosphate dipotassique technique en sac de 25 kg = 3,58 $/kg - Squestrne 100 SG (Fer chlat l'EDDHA 6 % de fer), par 1 kg = 42,5 $/kg - Soude anhydre en boite de 1,3 kg = 3,33 $/kg, en sac de 25 kg = 1,63 $/kg - Sucre blanc en sac de 1 kg = 1 $/kg (1,17 Bangui) - Sucre roux cristallis en sac de 50 kg = 0,35 $/kg (Arequipa) - Sulfate dipotassique cristallis en sac de 25 kg = 0,48 $/kg ou en sac de 5 kg = 2,3 $/kg

- Sulfate de magnsium cristallis, engrais, en sac de 25 kg = 0,32 $/kg - Sulfate de fer pour analyses (FeSO4, 7H2O), flacon de 1 kg = 35 $/kg - Sulfate de zinc (ZnSO4, 7H2O) pour analyses, flacon de 1kg = 25 $/kg - Ure = ure en perles, agricole, en sac de 50 kg = 0,25 $/kg; 0,28 $/kg (Espagne), 0,27 $/kg (Arequipa) Matriel de laboratoire - Bassine en PE alimentaire blanc, 35 litres = 28 $ - Balance lectronique 5 kg = 50 $ - Balance lectronique 100 g ( 0,1 g) = 167 $ - Microscope monoculaire = 142 333 $ - Microscope portable (x 100) = 50 $ - Densimtre = 17 29 $ - Thermomtre alcool = 3 17 $ - Thermomtre Infra-Rouge (mesure sans contact) = 50 $ - Thermomtre-humidimtre lectronique = 25 98 $ - pHmtre professionnel = 400 580 $ (dont lectrode 60 100 $) - ph-mtre-thermomtre = 277 $ - ph-mtre "Piccolo" = 154 $ - pHmtre simplifi (type "stylo") = 58 $ - Etalons de pH 4 -7-10 (60 ampoules) = 100 $ - Etalons de pH 4 - 7 - 10 (15 glules ou "pillows") = 22 $ - Aquamerck ammonium 0,5 - 10 ppm (150 dosages) = 64 $ - Bandelettes Merckoquant nitrates (100 dosages) = 50 $ - Bandelettes Merckoquant sulfates (100 dosages) = 37 $ - Bandelettes Merckoquant calcium + magnsium (100 dosages) = 37 $

- Bandelettes Merckoquant calcium 10 - 100 ppm (60 dosages) = 69 $ - Analyseur de CO2 dans l'air, I.R. = 400 $ - Luxmtre digital 50 Klux = 50 $ Analyses, $/unit - % protines = 15 - % humidit = 7,8 - % cendres brutes = 6,7 - % GLA = 97 - Phosphore total = 18,3 - Nitrates = 24,7 - Fer = 26,2 - Autres mtaux = 20 (moyenne) - Bta-carotne = 100 - Microbiologie = 64 Ensembles - Bassin de culture sous serre tunnel avec roue aube (1000 m) = 25 $/m - Serre en film PE sur armature acier (1000 m) type tunnel = 7 $/m type multichapelle arable et ombre = 19 $/m Spiruline sche (Prix de vente) - Le prix de vente de la spiruline sche est extrmement variable selon les lieux, les quantits, la qualit, l'emballage, la conjoncture, etc. En 1999 le prix international par tonne est tomb autour de 10 $/kg sous la pression chinoise. Au dtail on trouve de la spiruline en poudre autour de 80 $/kg, tandis qu'en glules elle se vend en pharmacie autour de 300 $/kg. Frt - par avion, de Madagascar en France = 3,33 $/kg

A22) Planche pour comparer les spirulines a d'autres algues :

A23) Spiruline vue au microscope

Le poids sec d'un filament moyen de spiruline est d'environ 3g. Le sens d'enroulement des spires des spirulines spirales est le plus souvent le sens inverse des aiguilles d'une montre si on regarde par dessus la spirale en descendant,

mais pas toujours. Cela dpend des souches mais non de l'hmisphre Nord ou Sud. Et l'intrieur d'une mme souche (Lonar par exemple) on peut trouver des trichomes spirals dans les deux sens se ctoyant.

A24) Pour ceux qui ont de l'lectricit:

A24.1) Agitation par roue a aubes

Les bassins agits par roue aubes sont plus longs que larges, avec extrmits arrondies et une cloison centrale et de prfrence des dflecteurs aux changements de direction dans les angles. La roue aube est installe sur un des cts ou une extrmit, entre bord et cloison centrale. L'axe de rotation repose sur deux roulements billes fixs sur des supports solides, gnralement btonns. Au droit de la roue la largeur du canal peut tre rtrcie sans inconvnient; au contraire cela permet de renforcer les supports et de raccourcir la roue donc de la rendre plus solide. La roue comprend par exemple 4 ou 6 pales ou ailettes solidement maintenues sur des disques solidaires de l'axe et de diamtre voisin de 80 cm. La hauteur des pales est de l'ordre de 20 cm. Pour minimiser les dgts causs aux spirulines, il est bon d'arrondir le bord d'attaque des pales. La construction de la roue aubes doit se faire de prfrence en plastique (PVC rigide d'paisseur 4 mmm ou plus) ou en bois car presque tous les mtaux sont corrods la longue. Le contreplaqu de qualit rsistant l'eau bouillante convient et il est pratique. L'acier galvanis et certains inox (304) rsistent en gnral. L'axe est gnralement mtallique, mais il faut prvoir son remplacement ainsi que celui des roulements billes qui le supportent et qui risquent fort d'tre corrods. Un moto-rducteur lectrique entrane l'axe une vitesse de 20 tours par minute environ. Sa puissance utile doit tre de l'ordre de 1 Watt/m de bassin ou plus ; sous serre, prvoir une arrive d'air extrieur sur le ventilateur du moteur. Un variateur de vitesse est commode mais onreux. Une transmission par courroie est recommande. Pour les petits bassins, la roue aubes peut tre monte directement sur l'axe du moto rducteur. Elle peut ne comporter que deux pales, ce qui a pour effet de provoquer une houle artificielle se propageant jusqu' l'extrmit du bassin et contribuant l'agitation. Il est utile de protger le fond

du bassin, s'il est en film plastique, au droit des pales: par exemple par des plaques inox ou ciment (on peut couler du ciment sur place). La distance entre le bas des pales et le fond du bassin ou ces plaques doit tre faible, mais suffisante pour ne pas risquer de toucher le fond ni d'endommager les spirulines (5 cm parat correct). On admet que la vitesse de circulation de la culture doit tre de 20 cm/seconde pour obtenir une bonne agitation; thoriquement le rgime turbulent est atteint ds que cette vitesse dpasse 10/z (z = profondeur en cm) si la concentration en spiruline est infrieure 3 g/l. Pour rduire les irrgularits de dbits et l'accumulation des boues en certains endroits, on installe des dflecteurs ou des contre-pales crant des remous : Il y a un dbat concernant le meilleur sens de rotation du liquide dans le bassin : pour certains le meilleur serait le sens contraire aux aiguilles d'une montre. Pour d'autres le sens des aiguilles d'une montre serait tabou. En ce qui nous concerne, nous n'avons aucune recommandation spciale. A24.2) Filtration sous vide L'utilisation d'un vide modr (un aspirateur donnant un vide de 15 kPa - soit 1,5 m de colonne d'eau - suffit) permet d'acclrer la vitesse de filtration. On utilise pour cela une toile reposant sur un support rigide (grille), pos sur un rservoir tanche rsistant au vide. Ce rservoir est reli l'aspirateur. La culture filtrer est pompe dans le bassin travers une crpine servant de tamis ou envoye sur la toile de filtration travers un tamis. Une pompe vide-cave de type " vortex" est recommande pour ne pas casser trop de spirulines. Une pompe type vide-cave, commande automatique par flotteur et munie sur son refoulement d'un clapet de nonretour bien tanche, assure le maintien automatique du niveau de filtrat dans le rservoir sous vide. En cours de filtration on dcolmate au besoin la toile avec une raclette caoutchouc. On arrte l'arrive de liquide et on attend que la biomasse soit suffisamment pauvre en eau, puis on rcupre la biomasse la raclette. La vitesse de filtration dpend bien entendu de la qualit de la culture et de la frquence des dcolmatages, mais elle peut se situer autour de 8 kg de spiruline sche/heure/m de filtre. A24.3) Filtration sous pression La culture pompe travers un tamis peut tre envoye dans un sac en forme de manche ferm par une pince, flottant dans le bassin. Si le sac est vertical et hors de la culture, de petit diamtre (< 6 cm) et de grande longueur (> un mtre), la filtration peut se faire par gravit avec une bonne efficacit. A24.4) Filtration continue Divers dispositifs existent (tamis vibrants, tambours rotatifs), mais sont plus adapts aux conditions industrielles qu'artisanales.

A24.5) Essorage par le vide (pour remplacer le pressage) Il s'agit d'une variante du A24.2. Si la biomasse est laisse sur le filtre sous vide suffisamment longtemps (par exemple 10 minutes pour une paisseur de 5 mm), l'eau interstitielle s'limine comme dans le cas d'un pressage. Par rapport au pressage, ce systme permet le lavage ventuel de la biomasse (opration que nous estimons inutile, voire nuisible selon les cas, cf 8.2 RECOLTE - lavage). On peut aussi n'utiliser le filtre vide que pour l'essorage; dans ce cas le volume de liquide est suffisamment faible pour qu'on puisse se passer de la pompe vide-cave dans le rservoir. Un bon essorage peut exiger un vide plus fort que la simple filtration. A24.6) Essorage par essoreuse (pour remplacer le pressage) L'essorage de la biomasse sortant du filtre peut aussi se faire dans une essoreuse panier ( axe vertical) munie d'une toile de filtre et tournant vitesse suffisamment modre pour ne pas casser la spiruline. Ce systme permet aussi le lavage de la biomasse. Nous ne le considrons pas la porte d'un artisan. A25.7) Essorage par gaz comprime (pour remplacer le pressage) C'est une variante du A25.5 o le vide est remplac par une pression de gaz pouvant aller jusqu' 5 bars sans risquer de casser la spiruline si la biomasse est de qualit correcte. A25) Hivernage Dans les zones hivers froids, les rcoltes peuvent se poursuivre tant que la temprature maximum ne descend pas en dessous de 15C. Ensuite, lorsque la temprature des bassins est infrieure 10C, il arrive que la spiruline dcante au fond et jaunisse. Il faut viter d'aborder l'hiver pH < 10 et de trop agiter la pompe pendant l'hiver pour viter le risque de "blanchiment" du milieu et la mort des spirulines. Si l'hiver est assez doux (> - 8C) et si le milieu n'est pas carenc, la spiruline peut trs bien survivre sous serre et redmarrer aux beaux jours, mais il est prudent d'ombrer tant que la temprature du bassin reste infrieure 10 - 15C. En cours d'hiver il est bon d'agiter de temps autre au balai pour remettre en suspension et arer les boues du fond. En fin d'hiver, si tout se passe bien, le milieu de culture se trouve rnov (turbidit trs faible, peu ou pas de boues, pH = 10, rcoltabilit excellente). Cependant il y a le danger thorique que pendant l'hiver des contaminations puissent se produire (algues trangres et ventuellement toxiques): faire un test de toxicit avant de recommencer rcolter. Dans les zones forte saison des pluies il faut couvrir les bassins. Si ce n'est pas possible, on peut continuer les rcoltes en purgeant le milieu de culture, et en rajoutant les sels correspondants, mais cela cote cher en sels tandis que la rcolte

risque de ne pas pouvoir se scher. On peut donc prfrer arrter la production, puis vider et nettoyer fond les bassins et redmarrer la culture au retour du beau temps.

Il faut toujours conserver une ou plusieurs rserves de semence de bonne qualit, mais a fortiori en cas d'arrt annuel. La rserve doit tre conserve dans un endroit abrit des intempries, l'ombre (pas l'obscurit pendant le jour), temprature modre (20 30 C) et agite de temps en temps. Elle ne doit tre ni trop concentre ni trop dilue en spiruline (Secchi = 2 4 convient). Il faut "repiquer" la culture de rserve, c'est--dire dmarrer une autre rserve, ensemence partir de la premire tous les deux trois mois pour maintenir sa qualit. Nota: une culture, mme de rserve, ne doit jamais tre ferme de manire tanche: elle a besoin d'air, et un bon moyen de l'apporter est d'agiter par bullage d'air. En cas d'arrt prolong des rcoltes sur un bassin en production, il faut l'ombrer en permanence et l'agiter au moins de temps en temps.

A26) Formules d'oligo-lments

A26-1) Formule de Jacques Falquet, 1997 (Antenna Technologie, Genve) : Solution concentre pour faciliter le transport (5 ml contiennent les oligo-lments d'un kg de spiruline) : Acide citrique = 100 g / litre Borax = 75 g / litre MnNO3,4 H2O = 45,6 g / litre ZnSO4,7H2O = 35 g / litre CuNO3,3H2O = 9,2 g / litre KCr(SO4)2,12 H2O (alum de chrome) = 5,4 g / litre MoNa2O4,2H2O (Molybdate de sodium) = 3,5 g / litre Co(NO3)2,6H2O = 0,2 g / litre Ni(NO3)2,6H2O = 2,9 g / litre NH4VO3 (monovanadate d'ammonium) = 0,94 g / litre Na2Se2O3,H2O (slnite de sodium) = 0,2 g / litre Eau distille = qsp 1 litre

A noter qu'en vieillissant cette solution dgage une odeur nausabonde de gaz sulfur (compos du slnium volatil et toxique). A26-2) Formule de J.P. Jourdan (sans slnium, avec supplment de zinc) ZnSO4,7H2O = 20 g / litre Sel disodique d'EDTA,2H2O = 7 g / litre Acide orthoborique = 5 g / litre MnCl2,4H2O = 2 g / litre CuSO4,5H2O = 0,5 g / litre Alum de chrome = KCr(SO4)2,12 H2O = 0,3 g / litre MoO3 (oxyde molybdne) = 0,1 Eau dminralise ou de faible duret = qsp 1 litre L'oxyde de molybdne doit de prfrence tre dissout dans l'eau avant emploi, mais il peut tre remplac par le molybdate de sodium (MoNa2O4, 2 H2O) raison de 0,18 g/l. La couleur de la solution est bleue. Dose moyenne utiliser = 25 100 ml/kg rcolt, selon les autres apports d'oligolments; si on ne connat pas ces autres apports, essayer 50 ml/kg et chercher la meilleure dose par ttonnements. La dose de 100 ml/kg apporte 500 mg de zinc/kg, ce qui considr comme souhaitable du point de vue nutritionnel. A la dose de 50 ml/kg le cot de cette formule est ngligeable: environ 0,03 $/kg de spiruline. Remarque La composition de la spiruline peut tre modifie dans de larges proportions concernant le fer et les oligolments selon ce que les spcialistes prconisent. Certains disent par exemple qu'il y a trop de vitamine B12 dans la spiruline : l'apport de cobalt a donc t supprim dans la formule. Par contre la dose de zinc a t renforce.

A27) Plans de schoirs

A27.1) Schoir solaire modle "Bangui"
(version SS4-I.1996) par Michel-Andr THELER, CH-1958 Uvrier/Sion (Suisse), Tl. (41) 27 203 28 43

Plan simplifi (Monsieur Theler dispose des plans complets) :

Description sommaire de l'lment et principe de fonctionnement : Caisse (dimensions 200 x 90 x 25 cm) constitue de : Une tle ondule A en polyester translucide (dessus) Une tle ondule B en aluminium (fond) Deux cts C et D (contre-plaqu) Un portillon frontal de chargement E (moustiquaire) Une fentre F (moustiquaire) l'extrmit oppose Cette caisse repose sur 4 pieds fixes G ( l'tat de repos et lors du chargement) ou elle est incline afin d'optimiser l'exposition au soleil et l'effet thermosiphon (surlvation de l'arrire par un double pied escamotable H). Schage par circulation d'air chaud au travers de 8 cadres J en moustiquaire plastique (surface utile totale = 1,2 m) sur lesquels est dispose la biomasse extrude scher. Chargement l'aide de 2 chssis K (supportant chacun 4 cadres) introduits lorsque le portillon est ouvert et glissant l'intrieur du caisson en prenant appui sur deux rails latraux inclins. Productivit par bon ensoleillement : environ 300 g de spiruline sche/jour.

A27.2) Schoir solaire gaz (modle "Davougon", version 1996) par Pierre ANCEL, F-95120 Ermont, Tl. 01 30 72 03 57 Cet appareil est construit partir d'un ft en tle de 200 litres (diamtre environ 50 cm, hauteur environ 80 cm) propre auquel trois pieds support on t souds ou boulonns. A 10 cm au dessus du fond des ouvertures colmatables, protges par des morceaux de moustiquaire colls, sont amnages pour permettre l'entre d'air frais et la rgulation de temprature. A 20 cm au dessus du fond des cornires mtalliques sont soudes ou visses pour servir de support aux plateaux de schage. Un couvercle amovible en bois ou en mtal protge de la pluie et des insectes tout en permettant la sortie de l'air humide. Les plateaux sont des cadres en bois munis d'une moustiquaire nylon. Ils sont emplilables (nombre maximum = 5) Un rchaud gaz butane (ou un brleur rcupr sur une gazinire, mont sur support mtallique soud) permet de chauffer le fond du schoir. Le schage peut aussi se faire directement par les gaz de combustion, convenablement dilus pour rgler leur temprature (en jouant sur la hauteur des plateaux par rapport au brleur), mais deux conditions: - brleur de bonne qualit (ne charbonnant pas et donnant une flamme bleue) - gaz de bonne qualit (le gaz butane courant en France convient)

A27.3) Schoir solaire chauffage indirect conception Claude VILLARD, 8 rue Stphen Ligeard, F-83400- Hyres, Fax 04.94.57.03.34, spirulinaP@aol.com Le schoir est constitu d'un caisson en tle noire mate portant 5 plateaux amovible (cadre bois + moustiquaire nylon), muni sur un ct de portes permettant le chargement des plateaux. Le caisson est surlev (pieds ou dnivele du sol) de manire pouvoir tre aliment en air chaud par thermosiphon partir d'un capteur solaire air absorbeur en briques cuites, inclin et orient convenablement selon la latitude du lieu. L'entre d'air au capteur constitue le point bas du systme et elle est protge par une moustiquaire ; cette entre doit tre place en un endroit autant que possible l'abri des poussires et autres polluants, et bien videmment hors d'eau.. Le caisson est surmont d'une large chemine galement en tle noire mate, surmonte d'un chapeau de protection contre la pluie et portant une moustiquaire de protection contre les insectes et feuilles mortes. Cette chemine assure un tirage suffisant : pour cela sa hauteur doit tre proche de celle du caisson.

A28) Projet semi-artisanal de 5 kg/jour

Il nous parait intressant de rsumer ici un projet de 5 kg de spiruline/jour que nous avons eu l'occasion de prparer la demande dune entreprise intresse; il s'adresse des groupes disposant d'lectricit, d'eau courante et de CO2, et disposs investir suffisamment pour vendre leur production sur le march international. En climat chaud l'atelier peut fonctionner toute l'anne et produire 1,5 tonnes/an ; en climat tempr, la moiti. Il s'agit encore d'un procd encore peu mcanis, utilisant beaucoup de main d'uvre. A28.1) Bassins 4 bassins de 3 m x 50 m = 150 m, sous 2 serres de 8 m de large, raison de 2 bassins par serre, avec une alle au centre de la serre entre les deux bassins. Agitation par roue aubes 4 ou 6 pales bois actionne par motorducteur de 250 W (un par bassin). Puisard de vidange une extrmit, vidange par gravit ou par pompe vide-cave vortex. Serres arables et ombrables partiellement, munies de moustiquaires aux deux bouts. En variante la serre peut tre remplace par un habillage de film tendu sur chaque bassin, prenant appui sur un tube galvanis reposant sur le muret central. Les bords du film sont enterrs. Dans cette variante l'accs au bassin est limit.

A28.2) Btiment Toutes les manipulations de spiruline se font dans un btiment de 70 m (pouvant servir de logement au personnel) dont le sous-sol est amnag en salle de rcolte. Au rez-de-chausse se trouve le schage-broyage-conditionnement du produit sec, ainsi qu'un petit laboratoire et le magasin de matires premires. Le btiment est climatis, avec ventilation par air filtr. Ceci facilite le port des vtements de protection en vigueur dans les industries alimentaires. La moiti du toit est construit pour pouvoir servir de capteur solaire sans vitrage (tle peinte couleur tuiles) pour alimenter le schoir solaire ventuel. Un auvent abrite ventilateurs, carbonatation et cuve dpuration. A28.3) Rcolte Le dispositif de rcolte est constitu d'une cuve de filtration en ciment, profonde de 60 cm, large de 80 cm et longue de 8 m., aux bords horizontaux garnis d'un joint de caoutchouc, sur lesquels reposent 4 cadres de filtration mobiles. Ces cadres ont des bords de 10 cm de haut et un filet tendu sur le fond. Les toiles de filtration sont simplement poses sur ces cadres. La culture filtrer vient des bassins par gravit travers un tamis. Chaque bassin a sa propre tuyauterie d'amene, munie d'un compteur d'eau permettant de savoir exactement le volume soutir par bassin. On peut acclrer la filtration en branchant un aspirateur sur la cuve. Le filtrat est pomp par une pompe vide-cave commande par flotteur, situe dans un regard au point bas de la cuve. La tuyauterie de refoulement, comprenant un clapet anti-retour, traverse le ct de la cuve pour ne pas interfrer avec l'tanchit au vide. Le filtrat est envoy dans la cuve de carbonatation. La biomasse goutte est essore dans une presse situe proximit de la filtration. Le pressage se fait sur des plateaux rebords de 2 cm, au fond perc (formant caillebotis). Ces plateaux sont mobiles. La biomasse est enveloppe dans une toile de coton forte double l'intrieur d'une toile nylon fine, formant un "paquet" plat de 5 cm d'paisseur maximum pos sur un des plateaux, en attendant d'tre mise sous presse. Plusieurs plateaux peuvent tre empils pour pressage simultan. La presse peut tre vis ou poids avec bras de levier. La biomasse presse est charge dans une machine faire les saucisses (un "poussoir" en inox, manivelle ou motoris) et mise en boyau plastique alimentaire de 50 mm de diamtre. Des noeuds en ficelle dlimitent la longueur des saucisses qui correspond celle du pistolet extrudeur (environ 35 cm). Les chapelets de saucisses sont mises au frigo au fur et mesure de leur fabrication. Une partie de la production peut tre sous forme de saucisses plus courtes pour la vente frache. En variante, le poussoir, fix verticalement, sert dextrudeur de grande dimension, les plateaux de schage dfilant dessous. schoir, aspirateur, compresseur, cuve de

Le matriel et le sol sont lavs l'eau aprs usage, l'eau tant recueillie dans un puisard au point bas du sous-sol et envoye l'gout par un vide-cave commande par flotteur. A28.5) Nourriture de la spiruline A la fin de la rcolte on utilise la cuve de filtration pour transfrer les sels (pess au magasin situ juste au-dessus et transfrs la cuve par une chute en PVC) dans la cuve de carbonatation, en utilisant un jet d'eau et la pompe. Cette cuve en ciment, de 4 m de section et 3 m de profondeur, surleve de 1 m. au dessus du sol, est relie un tube translucide permettant de connatre le niveau de liquide. Elle est aussi munie de bulleurs permettant l'injection de CO2 au fond. L'injection de CO2 (7 kg/jour) se fait de manire qu'aucune bulle ne sorte en surface (une chelle permet de surveiller cette surface). La dure d'injection peut tre de plusieurs heures. Le fait que le CO2 soit dissout en l'absence de lumire favorise le rendement d'absorption, proche de 100 %, en raison de l'absence de dgagement d'oxygne. Le bullage permet aussi de terminer la dissolution des sels et d'homogniser la solution. On arrte la carbonatation quand le pH dsir est atteint (gnralement 9,5), et on procde ensuite la rpartition de la solution dans les bassins au prorata du milieu soutir pour la filtration. Le transfert se fait par gravit. Une deuxime cuve de 12 m3, identique, sert de cuve dpuration du filtrat par dcantation (cf CULTURE - Epuration). Elle peut tre exploite en discontinu ou par lots quotidiens. A28.6) Schage Pour l'extrusion on utilise un pistolet colle en poches type Sika ("saucisson" en langage Sika Canada) de 600 ml de capacit, actionn par air comprim. Le chargement du pistolet est instantan grce au conditionnement de la biomasse en saucisses identiques aux poches de colle. En variante, comme dit en A28.3, le poussoir peut servir dextrudeur de grande capacit. La mthode la plus simple, et sans doute la moins chre en investissements, consiste utiliser les schoirs lectriques Stoeckli; il en faut une douzaine pour scher les 5 kg/jour, avec une fourne de nuit. Le schage en tuve lectrique demande un peu moins de travail parce que les plateaux sont plus grands. L'tuve peut tre couple un capteur solaire (en toiture) ou un dshumidificateur pour conomiser l'lectricit. Dans ce dernier cas, particulirement adapt aux climats chauds et humides, le matriel ne doit pas tre isol thermiquement et l'air en circulation doit tre refroidi en dessous de 35C. Les spaghetti secs sont verss dans un rcipient intermdiaire de 100 litres travers un entonnoir de dimension adapte celle des plateaux. Ils sont crass au pilon puis broys et ensachs. Les emballages sont scells sous vide par une machine du type utilis pour emballer le fromage en Suisse.

A28.7) Personnel Ce type de production semi-artisanale convient particulirement un couple rsidant sur place; il n'y a alors normalement pas besoin de main d'oeuvre extrieure s'il est considr comme acceptable de rduire la production en cas de maladie ou de congs. Avec du personnel extrieur salari, et pour assurer la production nominale tous les jours, il faut au minimum 3 personnes et de prfrence 4. A28.8) Prix de revient Le programme de calcul (cf Annexe A31) ne s'applique pas ce type de projet semiartisanal. On peut toutefois l'utiliser comme une premire approche, condition d'ajouter l'investissement environ 8000 $, ce qui porterait le prix de revient dans des conditions "africaines" environ 15 $/kg. A28.9) Conditions humaines pour la russite du projet Quelles conditions humaines faut-il runir pour qu'un petit projet de spiruline russisse? 1) Il faut qu'une demande solvable de spiruline se soit exprime ds avant l'initiation du projet, et que le projet ait des perspectives de dveloppement ultrieur, suite des tests nutritionnels publis et reconnus, et ventuellement une campagne de publicit. 2) Il faut que le partenaire local dsire fortement le projet et se comporte en vrai "patron", disposant des pouvoirs et des moyens voulus ainsi que du temps matriel pour s'occuper du projet. Il serait bon qu'il visite un projet de spiruline voisin pour qu'il voit bien de quoi il s'agit. Il est trs souhaitable qu'il exprime par crit ses objectifs tant vis--vis de ses collaborateurs que de l'ONG soutenant le projet. 3) Il ne faut pas que ce "patron" soit mut ailleurs en cours de projet. 4) Il faut que le responsable technique former soit capable de comprendre l'intrt du projet et s'y implique fortement. Pour cela il doit tre salari et assur correctement (pas "au noir") et travailler plein temps sur le projet. Il ne doit pas tre paresseux. Il doit mettre la main la pte, fabriquer ses outils de rcolte, former luimme son quipe et veiller ce qu'il y ait un bon esprit d'quipe. Il doit tre convaincu de l'intrt long terme de son nouveau mtier d'algoculteur. Il doit aimer manger lui-mme de la spiruline et accepter de goter sa production pour en vrifier la qualit organoleptique. Il faut qu'il soit convaincu de la ncessit de travailler hyginiquement. Il doit tre au courant des prix. 5) Il est important que le responsable fasse lui-mme quelques dcouvertes, ou ait l'impression d'en faire. Il faut donc lui laisser rapidement une certaine autonomie

et des moyens (petit labo), tout en l'empchant de sortir des limites prvues pour le projet (rester raliste). 6) Il faut de bons moyens de communication avec l'ONG soutenant le projet (au moins fax), et la volont de s'en servir, et ceci dans les deux sens (quipe localeONG et ONG-quipe locale). 7) Il faut que le projet soit raisonnablement protg des vols et des insurrections. 8) Il faut interdire l'accs du projet toute personne non autorise, car l'exprience montre que les bassins sont souvent confondus avec des poubelles (exemples de Nanoro au Burkina et Dapaong au Togo). 9) Le personnel doit accepter de - venir trs tt le matin pour faire les rcoltes, - assurer une permanence midi si l'agitation n'est pas automatique. Il est souhaitable qu'un membre de l'quipe habite sur place. 10) Il faut que des visiteurs de marque viennent voir le projet, mais pas trop souvent.

A29) Check- list pour dmarrage de spiruline sur nouveau site

(N.B. Le maximum devra tre trouv sur place ; le reste devra tre apport) Film PE de serre paisseur 0,2 mm (pour bassin extensible) Rcipients genre "Tupperware" (pour test d'humidit et stockage de biomasse frache) Bassines (blanches de prfrence) dont une bords droits Seau plastique (blanc de prfrence et gradu) Balai plastique Jarre gradue plastique de 1 litre Etiquettes autocollantes Papier filtre type filtre caf Mellita N4

Entonnoir plastique Pelle plastique bord droit Secchi Sachets de sels pour 8 litres de milieu de culture initial Kit d'analyse d'eau Merck (nitrate, sulfate, ammonium, calcium, duret) Balances lectroniques 100 g ( 0,1 g) et 3 kg Petits rcipients plastique pour peses Seringues, compte-gouttes Fonds d'vier plastique (pour presse) Papier absorbant type Sopalin Thermomtre (0 - 100C), densimtre (1000 - 1050 g/l) PHmtre avec une lectrode de rechange Etalons de pH 7 et 10 en glules Hygromtre digital Piles de rechange Pissette Compresseur et pompes d'aquarium Pompe vide-cave Bidons plastique pour cultures labo, lampe de chevet 40 Watt Tube souple diamtre 4 mm pour air + t avec robinets Tube souple diamtre 10 mm pour pompe Tuyau d'arrosage avec embout jet rglable Programmateur et prises multiples

Mtre de poche Loupe (x25) ou microscope (x100) Cystes (oeufs) d'Artmias et miniaquarium pour tests de toxicit Tissus de filtration 30 en polyester Tissus 315 en polyester Grille plastique pour cadres de filtration Extrudeuse Schoir lectrique ou de quoi construire un schoir solaire (moustiquaire, film plastique noir, ventilateur) Sachets thermoscellables pour emballage spiruline Kit de rparation de bches plastique Agrafeuse et agrafes Outils de base (scie, tournevis, marteau, ciseaux) + clous, vis Lampe de poche Souche de spiruline 100 % spirale ou ondule Manuel de culture artisanale (livre et diskette) Bicarbonate Sel de cuisine Ure Nitrate soluble Phosphate soluble Sulfate de magnsium Sulfate de potassium

Sel de calcium soluble ou chaux Oligolments Ferfol ou Fetrilon (fer chlat) ou acide citrique ou jus de citron Acide chlorhydrique concentr Soude ou potasse caustique ou carbonate de soude (ou sinon cendre) Eau potable ou filtre

A30) Spiruline humanitaire dans les PVD

(Texte de P. Ancel de mai 2004) N.B. Le texte ci-dessous reflte l'opinion de son auteur qui a une longue exprience de la culture de spiruline en Afrique. L'auteur du prsent Manuel est largement d'accord avec ce texte mais voudrait souligner qu'il vous est toujours possible de "cultivez votre spiruline" vous-mme sans les contraintes socio-conomiques que souligne juste titre P. Ancel. Lorsqu'on cultive pour soi-mme ou pour sa propre famille ou mme ses voisins, il n'est pas obligatoire d'tre "rentable" comme dans une entreprise qui doit rmunrer du personnel et prsenter un bilan financier positif faute de disparatre. L'avantage de pouvoir consommer sa propre spiruline frache est tel que cela vaut bien de ne pas tre "rentable". Toutes proportions gardes cela est semblable la culture dans son propre jardin de varits goteuses de tomates, dont on ne saura jamais le prix de revient, mais dont on se souviendra longtemps du plaisir qu'on a eu les manger ! Spiruline humanitaire dans les PVD : penser au lendemain Introduction Lorsque lon est ONG, vouloir implanter dans les Pays en Voie de Dveloppement des installations de culture de la spiruline est un objectif louable : lutte locale contre la malnutrition, amlioration des dfenses immunitaires pour les enfants et les adultes des populations dshrites, la spiruline, en attendant davoir conquis les principales organisations de sant internationales et le monde scientifique souvent sceptiques, nen a pas moins sur le terrain de trs nombreux adeptes, parmi lesquels les organisations de sant locales, les congrgations religieuses, les centres de rhabilitation nutritionnelle, les mdecins et infirmiers ayant pu se rendre lvidence du plus apport par la spiruline. Nombreuses sont par consquent les ONG, petites ou moyennes, dcouvrir les mrites tonnants de larthrospira platensis, vulgairement la spiruline, puis vouloir en implanter des cultures locales. Sur le principe de la fourniture des cannes pche plutt que du poisson.

Cependant, lorsque lon a trouv un bon partenaire local, construit avec lui quelques bassins et dmarr une culture, lessentiel du travail reste fournir par lONG, ce quelle ignore le plus souvent De quoi sagit-il ? Une course dobstacles Pour atteindre le succs, lONG rencontrera 3 obstacles majeurs, quelle aura lieu de prendre en compte si possible avant le dmarrage du projet. Malheureusement, ses efforts sont gnralement concentrs en amont de ces obstacles : choix du partenaire, mise en place du projet, conventions, recherche de fonds, constructions, dmarrage des cultures absorbent lessentiel de son nergie Lorsque les difficults relles apparaissent sur le terrain, lONG nest bien souvent pas prpare. Obstacle 1 : matriser la culture Les techniques de culture de la spiruline sont aujourdhui bien connues des spcialistes du domaine ! Lorsque lONG dbute dans des projets spiruline, il est rare quelle ait sa disposition un de ces spcialistes. Force lui est de dbuter grce aux conseils, crits ou oraux de ces derniers, ou grce quelques connaissances acquises sur des missions antrieures. Citons ainsi lexistence du manuel de culture de spiruline artisanale de Jean Paul Jourdan, celui des Ides Bleues de Giles Planchon, ainsi que louvrage de Ripley Fox : Spiruline : technique, pratique et promesses . Enfin, il est possible depuis avril 2004 de venir se former grce un cycle de 400 heures au Centre de Formation Agricole de Hyres, qui devrait permettre au dbutant darriver une certaine maturit. Leffet trompeur provient du fait que le dmarrage dune culture de spiruline ne pose gnralement pas de problme : la souche et le milieu de culture sont neufs, les conditions de dveloppement sont optimales. Cette priode favorable, de quelques semaines quelques mois, correspond gnralement la priode de prsence des reprsentants de lONG sur place. Ceux-ci repartent alors avec le sentiment de la mission accomplie . Les premires difficults napparaissent en gnral quaprs le dpart de lONG et sont accrues par trois facteurs :

lincapacit de lacteur local, encore peu expriment, non seulement trouver la cause, mais aussi dcrire le problme de culture rencontr, les difficults et les dlais de communication : langue, distance, liaison tlphonique lvolution trs rapide de la spiruline, cyanobactrie, tout autant capable dune duplication toutes les 7 heures que dune mort subite. Nous avons ainsi pu constater la mort simultane en quelques heures, de souches Paracas au Burkina Faso, dveloppes sur trois sites diffrents distants de 10 30km sans aucune explication rationnelle jusqu ce jour

Force est de constater que la culture de la spiruline est un art relativement complexe pour le commun des mortels, encore accru par la distance. La difficult observe, si elle a pu finalement tre correctement exprime, peut avoir plusieurs facteurs croiss. Parmi les problmes les plus frquemment poss, citons lapparition des spirulines droites, spirulines fragmentes, le jaunissement plus ou moins rapide des

cultures, les difficults de filtration, de pressage, lapparition de got ou dodeur dsagrable, les ventuelles contaminations par dautres algues, etc. A cela, ajoutons que le matriel cd par lONG est parfois mal adapt ou rapidement mis hors service sur le terrain : pH mtres en panne ou mal utiliss, solutions talons et kits danalyse prims, etc., qui rendront plus difficile la mise en vidence des causes, dautant quelles peuvent tre nombreuses, lies des facteurs tels que temprature, ensoleillement, nourriture, agitation, pH, etc. Ainsi, contrairement aux ides reues, le maintien en exploitation dune unit de culture nest pas chose facile : il faut exprimenter pendant plusieurs annes pour pouvoir reprer rapidement, en arrivant sur un site, grce lintuition et lobservation, le problme de culture. Dans le cas contraire, il faudra ttonner, redmarrer plusieurs fois les cultures avant didentifier lorigine des cueils rencontrs. Obstacle 2 : former du personnel local 1 - Acqurir le savoir-faire Lorsque la matrise de la culture par lONG est acquise, il sagit alors de transmettre ce savoir une petite quipe dexploitation locale. Rappelons quil est quasiment indispensable de disposer sur place dun partenaire srieux et organis, de facilits telles que leau, llectricit et le tlphone. Pour les raisons prcdentes et pour lavoir exprimente nous-mme, la spiruline de brousse , au sein dune communaut villageoise, telle que souhaite par certaines ONG, si elle voit le jour ici et l, essuie souvent des checs. Force nous est de constater que la grande majorit des implantations russies en Afrique (dure de vie > 5ans) sont pour linstant le fait de congrgations religieuses locales stables et organises. Transfrer un savoir-faire ? Tout au plus pourrons-nous transfrer un savoir, et attendre, avec la mme patience dont nous avons fait preuve pour nous-mmes, que lexploitant local atteigne en quelques annes ou dpasse mme notre art de la culture. Le transfert de savoir est relativement rapide : de quelques heures quelques jours suivant les moyens pdagogiques et lentendement des tudiants. Bien choisir le futur responsable dexploitation est essentiel : les qualits requises nous semblent lexprience les suivantes : savoir lire, crire et communiquer rationnellement (niveau minimum : BEPC, de prfrence, le baccalaurat, ou bac +2) savoir compter et pratiquer aisment la rgle de 3 et le calcul mental savoir observer et ressentir les plantes : autrement dit, avoir la main verte . Cette qualit est souvent lapanage des moins diplms si lexploitation est importante, savoir commander et animer une quipe

enfin et peut-tre surtout, tre totalement partie prenante de lexploitation et de ses objectifs humanitaires

Soulignons que le responsable dexploitation ne pourra pas tre le responsable de lorganisation locale avec laquelle lONG a conclu un accord de partenariat, ce dernier, compte-tenu de sa position, tant le plus souvent appel dautres tches. Le responsable dexploitation devra quant lui consacrer la majorit de son temps la spiruline (voire la totalit pour les exploitations de plus de 3 personnes) : lvolution rapide de la spiruline nautorise pas labsentisme. Pour la formation de lexploitant, on sappuiera sur les ouvrages existants dj cits. Cependant, ils ne seront pas exploitables en ltat, car souvent trop riches. Il est ncessaire de rdiger un mode demploi de la ferme adapt aux conditions particulires du site. A titre dexemple, le site de Koudougou dispose dun manuel de 8 pages, suffisant pour dcrire lensemble des procdures de culture (ensemencement, nourriture, mesures et contrles, problmes rencontrs, etc.). Il ne reste plus alors qu attendre au cours des annes, les coups de fil avec les explications plus ou moins claires de lexploitant, nombreux durant le premiers mois, puis qui sespaceront lentement au fil des annes. On pourra estimer que le transfert de technologie est assur lorsquil ny aura pas plus dun appel au secours annuel 2 Apprendre grer son entreprise Dans le cadre de la formation, la matrise de la gestion dune unit de production de spiruline, qu'elle ait 50 ou 5000 m2, est une tape tout aussi longue acqurir pour lexploitant. Par exprience, il nous semble quen Afrique, cet aspect est encore plus dlicat aborder, tant sont absentes des proccupations locales les notions dorganisation, de discipline, danticipation, de procdures, de contrat, de comptabilit, pourtant piliers de toute entreprise. Combien de fois se trouve-t-on cours de bicarbonate de soude, sans avoir pens renouveler le stock ? Combien de fois le site est-il dlaiss pour des funrailles importantes dans le village ct ? Pourtant, si le mil peut bien attendre une semaine ou deux avant dtre sem, la spiruline requiert des soins quotidiens si lon ne veut pas retrouver des bassins jauntres aprs une journe dabsence. Il faudra l encore quelques annes de patience et de conseils pour que, peu peu, chacun au niveau de lexploitation se sente responsable, soit efficace, et que tout le monde soit prsent 7 heures le matin Finalement, la survie dune exploitation, petite ou grande, passe par la professionnalisation progressive de lquipe en place. Mme si lONG dmarre sur une base louable alter mondialiste, force lui sera de reconnatre quelle nchappera pas aux principes universels de lentreprise. Ces notions nempchent en aucune faon le respect des principes humanitaires et le travail dans la bonne humeur, au contraire. Quelques conseils utiles :

Etablir un organigramme de lexploitation, prciser les tches de chacun par des fiches de fonction . Ceci jettera les bases dun fonctionnement efficace et vitera bien des confusions. A titre dexemple, nous donnons ciaprs lorganigramme de la ferme Koudougou (Burkina Faso). Concentrer la responsabilit de lexploitation, tant technique que financire, sur une seule et mme personne : les dcisions doivent tre prises en tenant compte de la rapidit de dveloppement de la cyanobactrie : les commandes dintrants, de sachets, les rparations, et la remise des salaires, nattendent pas la dcision dun superviseur loign. Elles doivent tre prises chaque instant par le responsable dexploitation. Etablir ds que possible une comptabilit de la ferme. Quelle que soit la solution de financement de lexploitation, la connaissance des cots dexploitation est ncessaire. Il faut sopposer cette tendance naturelle dans les PVD visant travailler au jour le jour, et chercher de nouvelles recettes lorsque les caisses sont vides. De telles vrits, aussi banales, ne sont pas forcment claires dans tous les esprits, tant au niveau du partenaire local que de lONG. En principe, aucun projet ne devrait voir le jour sans ltablissement dun compte dexploitation mensuel prvisionnel, prpar en parallle avec le budget dinvestissement. Ce compte dexploitation sera par la suite ajust en dtaillant les postes clefs tels que salaires, intrants, rparations, consommables, eau, lectricit, sans oublier, victimes trop souvent de lamnsie africaine, les provisions pour remplacements ! Savoir impliquer le personnel dans le fonctionnement de la ferme. La notion de salaire est souvent assez abstraite pour un nouvel embauch, le plus souvent sans exprience dun premier emploi. Le salaire peut apparatre comme un d, quel que soit le travail effectu. Or il est essentiel que chaque employ comprenne que la ferme fonctionne uniquement grce la volont et au labeur de chacun, quil est la ferme : le salaire peru doit reflter les rsultats de la production. Des primes la productivit seront dexcellents moyens de prise de conscience et de motivation. Nanmoins, largent nest pas tout, et ce sera le rle du responsable dexploitation que dinsuffler au sein de son quipe un bon tat desprit. La communication au sein de son quipe est essentielle, avec des contacts directs et prcis. LAfrique, mais aussi dautres PVD o le non-dit est prdominant, ne lentendent pas toujours de cette oreille et les problmes humains, dans les premires annes, sajouteront aux problmes techniques. Cependant, quelles que soient les difficults dimplantation de lesprit dentreprise, nous pensons que le fait de travailler chaque jour pour une cause humanitaire constitue un moteur essentiel de russite et de progrs rapide au sein dune quipe.

Obstacle 3 : prenniser lexploitation Le troisime obstacle peut se rsumer ainsi :

1 2 3

Construire une ferme de culture a un cot Lexploiter cote, la longue, beaucoup plus cher. LONG et le partenaire local ont tendance oublier le point 2.

Comment financer une exploitation sur 1, 5, 10 ou 20 annes? Solution 1 : Micro-installations (qq dizaines de m2) - cots dexploitation pris en charge par le partenaire local ou par lONG Le plus souvent, lONG se concentre alors sur la construction et le dmarrage de la ferme. Les aspects exploitations, notamment financiers, sont confis au partenaire local : congrgation religieuse, associations. Ils sont parfois pris en charge sur les premires annes par lONG elle mme. Cest le fonctionnement le plus courant des petites units de spiruline qui ont t implantes en Afrique : Davougon (Bnin), Nanoro (Burkina Faso), Dapaong (Togo), Puits Bermeau (Niger), Agharous (Niger), Morandave 1re tranche (Madagascar), Gabon, etc. Inconvnient : un lent traquenard financier. Au dpart, lONG, pas plus que le partenaire local, na une relle connaissance des cots dexploitation. Pour une petite installation de quelques dizaines de m2, produisant quelques kilogrammes de spiruline par mois, les cots mensuels, prenant en compte salaires (ne pas oublier les gardiens !), intrants, ensachage, rparations et remplacements, eau, tlphone, lectricit, seront de lordre de 80 150 euros (ordre de grandeur pour lAfrique), soit entre 50 000 et 100 000 FCFA. Ces cots, mme modrs, sont une charge supplmentaire pour le financeur, dont il na pas souvent conscience lorigine. Ainsi, les cots dexploitation dunits de production dpassent en quelques annes le cot de ralisation, ceci dautant plus rapidement que lunit sera petite. Finalement, produire de la spiruline sur de petites installations revient toujours plus cher que dimporter de la spiruline industrielle (environ 15 euros le kilo). La solution qui consiste produire de la spiruline en milieu villageois ou par le biais dune association locale humanitaire pour rduire le cot est souvent un leurre : personne ne travaille gratuitement sur de longues priodes, et les salaires, minimes au dbut, rattraperont rapidement les niveaux rgionaux, mme en brousse. Par contre, lONG aura supporter en plus le manque de moyens logistiques et techniques locaux. En conclusion, la prise en charge des frais dexploitation par le partenaire local ou les ONG ne peut concerner que de petites cultures. La production restera limite quelques kilogrammes/mois, donc avec un impact humanitaire limit en regard des efforts fournis. Avantages : faire connatre la spiruline et pouvoir la consommer frache. Quoi quil en soit, il est souvent intressant de commencer par ces petites installations, pour se faire la main , et parce que les cots dinvestissements sont faibles : environ 10 000 euros, si lon prend en compte les frais de missions, les bassins, un

petit btiment, lachat de matriel et des intrants pour un ou deux ans, etc. Il faudra bien entendu clarifier le problme du financement des cots dexploitation avant de commencer. Ces installations ont lavantage de faire connatre la technique de culture de la spiruline, et de permettre la distribution de spiruline frache, plus efficace et plus facilement tolre. On cre ainsi des noyaux dintrt de la spiruline dans les PVD, propices au dmarrage, dans un deuxime temps, de plus grands projets, objectif dautofinancement. Solution 2 : Autofinancer les cots dexploitation Ce principe concerne les installations artisanales de plus grande taille, lheure actuelle de quelques centaines de mtres carrs. On obtient lautofinancement des cots dexploitations en commercialisant une partie de la production (%c). Lautre partie est destine la distribution sociale. Remarques importantes : la part sociale (%s) que peut fournir une exploitation nest pas un objectif que lon peut fixer a priori mais une consquence : du prix de revient de la production Pr du prix de vente Pv, par la relation :

Ps.%s + Pv.%c = Pr (100 + marge dexploitation)

%s = Pv.100 - Pr (100 + marge dexploitation) Pv - Ps Exemple : Pr (prix de revient) = 15 Euros/kg Marge brute = 20% Pv (prix de vente gros) = 23 Euros/kg Ps (prix de vente social) = 6 Euros/kg %s = 29%

Comment augmenter le pourcentage social %s?

Les degrs de libert sont finalement limits : Le prix de vente commercial Pv ne peut augmenter au del dun certain seuil : il doit tenir compte de la concurrence nationale et internationale, qui, si elle nexiste pas au dmarrage du projet dans le pays considr, ne manquera pas de sinstaller ds lors que son succs attirera lattention.

On ne peut rduire la marge dexploitation inconsidrment au risque de mettre en danger la sant financire de la ferme Le prix social dpend du pouvoir dachat des plus dmunis. Dans certains cas, il peut-tre nul! Pas question de laugmenter

>>> Reste la possibilit daction sur le prix de revient Pr Comment diminuer le prix de revient Pr? On cherchera bien sr rationaliser lexploitation, en amliorant notamment les techniques de rcolte, densachage, en trouvant des intrants moins chers, en diminuant la consommation nergtique (eau, lectricit, gaz), etc. Cependant, le moyen de loin le plus efficace consiste augmenter la surface de lexploitation, afin de bnficier de leffet dchelle. Ainsi, on pourra :

diminuer la part relative du personnel non productif (charges fixes) amliorer la productivit des rcoltantes grce des ateliers centraliss et lutilisation de pompes de rcolte diminuer les cots spcifiques dentretien (schoirs et bassins plus grands, matriel labo, informatique, frais de tlphone) diminuer le cot des intrants (achats en gros) diminuer le cot relatif de lensachage (commandes en gros), de la publicit limiter les cots nergtiques (eau : utilisation de forage - lectricit : systme solaire raccord au rseau)

A titre dexemple, le graphique suivant donne lordre de grandeur des prix de revient sur diffrentes exploitations africaines.

Inconvnients de lexploitation autofinance : cette solution nest envisageable que pour des installations de taille moyenne : le point mort de rentabilit en Afrique (mais certainement aussi dans dautres PVD) se situe environ 400 m2. Raliser plus petit conduit un prix de revient de la spiruline le plus souvent incompatible avec le march international. Le cot dinvestissement sur ce continent tant de lordre de 15 000 Euros les 100m2 (btiments compris), on voit que lon peut difficilement prtendre lautosuffisance de lexploitation si lon ne dispose pas dun minimum de 60 000 100 000 Euros, ce qui nest pas la porte de toutes les ONG ! Il faut alors demander un financement extrieur des bailleurs de fonds institutionnels, ce qui est long et demande une certaine exprience. Par ailleurs, les projets moyens ncessitent une solide connaissance de la culture de spiruline, une certaine rigueur dans lorganisation et la gestion, etc. On imagine que rater un projet de grande taille aura un impact considrablement plus large que si lon avait chou dans la culture de petits bassins Avantages : sattaquer la malnutrition grande chelle. Crer une vritable richesse locale

La ferme de culture autofinance, une fois son quilibre atteint, possde bien des avantages : Il est vident que raliser des installations qui produisent plusieurs tonnes par an de spiruline permet dattaquer le problme de malnutrition une chelle nationale, et de traiter des dizaines de milliers denfants malnutris. Il ne sagit plus alors dune curiosit locale, la spiruline peut tre connue et consomme sur tout un pays. Le principe de lentreprise responsabilise le partenaire local, ce que la perfusion par lenvoi de fonds rguliers (solution 1) ne peut pas faire. Une gestion mal contrle conduit en effet trs rapidement le projet lchec : il y a donc obligation de rsultat, ce qui cre peu peu au niveau du partenaire local lattention (et la tension) propice la russite. Lentreprise cre ainsi une vritable richesse locale, qui, outre le combat contre la malnutrition, fait travailler toute une quipe dexploitation, des ateliers locaux pour la maintenance, des agents commerciaux, etc..

Conclusion :
Que les conseils ci-dessus, qui font parfois apparatre une ralit douloureuse, ne dcouragent pas les ONG dbutantes. Il y a, avec la spiruline, une demande norme dans les pays en voie de dveloppement, partout o svit la malnutrition. Son succs est d ses qualits nutritives remarquables, qui en fait le complment ingal dune alimentation pauvre. Il faut avoir t soi-mme en situation de malnutrition dans ces pays pour se rendre compte de limportance que peut prendre un flacon de spiruline dans son bagage, que lon oubliera pourtant dans un placard une fois rentr chez soi. Cest la raison pour laquelle, quelles que soient les difficults, la spiruline devrait peu peu simplanter dans les annes venir dans la plupart des pays africains.

A31) Adoucissement de l'eau trop dure

Lorsque l'eau contient trop de Ca ou Mg par rapport aux besoins de la spiruline, on peut soit ajouter au bassin plus de phosphate (qui va prcipiter avec le Ca ou le Mg), soit passer l'eau sur un adoucisseur classique rsine changeuse d'ion (mais on rejettera de l'eau contenant des chlorures, donc pollution), soit traiter l'eau dans une cuve avec des ractifs qui vont prcipiter des carbonates insolubles (et non polluants pour l'environnement). Pour ce dernier cas, on a le choix des ractifs : 1) la soude : Ca (HCO3)2 + NaOH = CaCO3 + NaHCO3 2) au carbonate : Ca(HCO3)2 + Na2CO3 = CaCO3 + 2 NaHCO3

3) la chaux : Ca(HCO3)2 + Ca(OH)2 = 2 CaCO3 + 2 H2O A vous de choisir, sachant que si le Ca est sous forme chlorure, seul le carbonate sera actif. NB 1 : Le Mg suit le mme sort. NB 2 : il est fortement dconseill de stocker l'eau pure la lumire car il y a risque de dveloppement de microorganismes toxiques.

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