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    CPG Résumé 2017

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    La chromatographie en phase gazeuse est une méthode de séparation de composés volatiles ou susceptibles de l'être. Le document décrit le principe, l'appareillage et les applications de cette technique d'analyse qualitative et quantitative.

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    Biochimie

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    CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE : CPG

    I. INTRODUCTION  Détecteur à ionisation de flamme (FID) : Le plus


    Méthode de séparation de composés volatiles ou utilisé pour les composés organiques et de grande
    susceptibles de l’être. La séparation se fait soit par partage sensibilité.
    ou par adsorption.  Détecteur à capture d'électrons (ECD) : Spécifique
     Permet une analyse qualitative et quantitative des dérivés halogénés et très sensibles.
     Ne convient pas pour les produits:  Détecteur thermo-ionique :
     Thermolabiles  Détecteur à conductibilité thermique (TCD)
    Obsolète, n’est plus utilisé.
     Peu volatils et ionisés.  Spectromètre de masse : Universel, très sensible,
    II. PRINCIPE  Spectrophotomètre infrarouge
    Echantillon dissous dans un solvant vaporisé et injecté  Résonance magnétique nucléaire
    dans une colonne contenue dans un four. Entrainé par un 6) Enregistreur
    gaz inerte vecteur (phase mobile). Traverse la colonne Résultats sous forme de chromatogramme = série de pics
    (phase stationnaire) à différentes vitesse. Analyse qualitative : Tr de chaque produit
     Solide: chromatographie d’adsorption Analyse quantitative : surface d'un pic est,
     Liquide: chromatographie de partage proportionnelle à la quantité du produit représenté.
    Les molécules sont détectées à la sortie de la colonne grâce
    au détecteur Chromatogramme IV. MISE EN OEUVRE
    III. APPAREILLAGE  Préparation de l’échantillon:
     Substance volatisable : Injection directe.
     Substance non volatile: Transformation
     Préparation de l’appareil: Colonne:
    À la 1ere utilisation, La faire traverser au moins 12 h par
    le gaz vecteur.
     Régalage de la température et la pression
     Choix de l’étalon interne:
    Molécule voisine de celle à doser mais à TR différent.
     Aspect Qualitatif: repérage des pics
     Aspect Quantitatif: Le rapport des hauteurs de pics.
    V. APPLICATIONS
    Industrie pharmaceutique:
    1) Source de gaz :
     Contrôle des matières premières
     Grande pureté
     Contrôle en cours de fabrication
     Inerte, Faible viscosité
     Contrôle du produit terminé
     Ex : Azote +++, argon, hélium ou l’hydrogène  Etude de stabilité dans le temps.
    2) Système d’injection Toxicologie: Alcoolémie, Aflatoxines, Toxicomanie
    Introduction de l’échantillon, son évaporation Son Biochimie: Les stéroïdes, AA, HbA1c…….
    entrainement par le GV vers la colonne
    Dosage des médicaments: Biodisponibilité
     Microseringue, faible volume
    Métabolisme des médicaments, Suivi thérapeutique
     Tube thérmostaté: vaporisation
    Agroalimentaire: Pesticides, herbicides,
     Volatilisation instantanée de l’échantillon nitrosamines, benzène…
    3) Four : Cosmétologie pétrochimie: Essences, Solvants,
    Contient la colonne Température désirée. Hydrocarbures.
    Dispositif de programmation de température.
    4) Colonne
    En Acier inoxydable ou en verre contient la phase
    stationnaire. 2 types:
     Colonnes capillaires: 10 à 100 mètres, diamètre < 1 mm
     Colonnes compactes: 1 à 3 mètres, diamètre 2 à 6 mm
    5) Détecteur
    Plus ou moins spécifiques des composés à détecter.
    Il existe différents types de détecteurs:

    CPG : Résumé 2017 Dr. OUASSOU Abdelaziz


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