TP Enzymologie

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COMPTE RENDU

TP1 ENZYMOLOGIE
Encadré par Pr.Jamal
AYOUR

Titre de TP : La spécificité des enzymes digestives :Digestion de l’amidon


par l’amylase

Réalisé par :
Brahim AFARNI
Othmane BADAOUI
Redone Azzam
Groupe 1 du TP
INTRODUCTION :
Les êtres humains consomment des différents glucides tel que l’amidon pour leurs
besoins naturels. Au cours de la digestion humaine, les différentes macromolécules glucidiques
subissent diverses transformations pour bien s'adapter au système digestif. À l’aide des
enzymes bien spécifiques on peut arriver à achever ça. Pour notre cas de l’amidon l’amylase et
l’enzyme qui va catalyser l’hydrolyse de l’amidon en une molécule plus simple. Cet enzyme
est produit dans la salive et dans le pancréas.

Objectifs :
 Observez le mode d’action de l’enzyme amylase.
 Déductif de la spécificité de cet enzyme et expliquer l’origine de sa spécificité

Matériel qu’on va utiliser :


Tubes à essai - Les pipettes de 5 ml - bain-marie 37 - bec-bunsen 80C

Solutions : Amylase – Empois d’amidon –Li Fehling –Eau distillée –Glucose- HCl – Eau
iodée

Protocole suivi :
Dans 4 tubes on met :
tube 1 : 4ml d’empois d’amidon et 1ml de solution d’amylase.
tube 2 : 4ml d’eau distillée et 1ml de solution d’amylase.
tube 3 : 4ml de la solution du glycose et 1ml de solution d’amylase.
tube 4 : 4ml empois d’amidon et 2ml HCl et 1ml de solution d’amylase
note : on doit agiter pour chaque tube pour mélanger les contenus

Manipulation 1 : mise en évidence par l’eau iodée


- On doit déposer un bécher contenant de l’eau iodée.
- prélever environ deux gouttes extrait de tube 1 et tube 4.
- déplacer les les gouttes de l’iode dans un carré divisé en deux (pour les deux tubes ).
- mélanger les gouttes de l’eau iodée par celles de l’extrait du tube en respectant le
numéro du tube au carré T1 et T2.
- observation des changements des couleurs.
note : on refait la même manipulation pour t0 et t10 et t20.

Manipulation 2 : mise en évidence des sucres réducteur par liq de Fehling.


1- Extraire environ 1ml de chaque tube et le déposer dans d’autre tube test.
2- On ajoute une dose de liq de Fehling dans chaque tube test et on les met dans un bec-
bunsen 80C pendant 3 min.
3- On met les tubes d’origine dans un bain-marie 37C pour l’extraction des deux fois
supplémentaires.
4- On refait le même processus pour t0 et t10 et t20.
Exploitation des résultats :

1- On a réalisé ces expériences pour la mise en évidence de l’action de l’enzyme amylase


sur l’amidon en testant d’autres substances qui vont être des témoins expérimentaux.

Résultat de la première Manip :


A t0 : on remarque la décoloration rapide d’orange de l’iode au niveau des gouttes extraites
du tube 1.
A t10 : on remarque l’inverse (l’extrait de tube 4 qui décolore l’iode).
A t20 : on remarque que la couleur de l’iode ne change pas rapidement pour les deux.
D’après ça on peut conclure que l’amylase catalyse l’hydrolyse de l’amidon.
Résultat de la deuxième Manip :
A t0 : et après laisser les tubes test au bec-bunsen pour 3 minutes on remarque que les tubes
test 1,2 et 4 restent coloré en bleu (car liq de Fehling). Mais le tube 3 adoptent un couleur
rouge brique avec des précipitations.
Pour t10 et t20 on remarque presque les mêmes résultats.
Signification des résultats:

La coloration rouge-brique signifie la présence des sucres réducteurs (glucose dans notre
cas). Et la coloration bleue signifie l’absences des sucres réducteurs. car le tube 3 est le seul
tube contenant le glycose.

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