TUGAS FITOKIMIA

Skrining Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan

Korteks Batang Salam (Syzygium polyanthum)

DISUSUN OLEH:

NAMA : DJUNAIDDIN

NIM : F201701072

KELAS : K2

PROGRAM STUDI S-1 FARMASI

STIKES MANDALA WALUYA KENDARI

2019
 BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Salam merupakan salah satu tumbuhan yang tumbuh subur di Indonesia. Salam
tumbuh liar di hutan dan pegunungan, atau biasa ditanam di perkarangan dan sekitar
rumah. Pohon ini dapat ditemukan di daerah dataran rendah sampai ketinggian 1.400 m
dpl. Tinggi pohon salam mencapai 25 m, batang bulat, permukan licin, bertajuk rimbun
dan berakar tunggang. Daun dari tanaman ini tunggal, letak berhadapan ,dengan panjang
tangkai daun 0,5-1 cm (Dalimartha, 2000). Tumbuhan salam banyak digunakan sebagai
rempah pengharum makanan dan dikenal pula sebagai tumbuhan berkhasiat obat oleh
masyarakat Indonesia. Daun salam banyak digunakan oleh masyarakat untuk mengobati
asam urat, kolesterol tinggi, tekanan darah tinggi (hipertensi), kencing manis (diabetes
mellitus), sakit maag (gastritis), dan diare (Putra dkk, 2015). Hal ini dibuktikan dalam
beberapa penelitian yang menyatakan bahwa tumbuhan salam memiliki beberapa
aktivitas farmakologi seperti antihipertensi, antidiabetes, antioksidan, antiinflamasi,
antibakteri dan antikanker. Aktivitas farmakologi tersebut ditimbulkan oleh kandungan
senyawa metabolit sekunder dalam tumbuhan Salam (Rizki dan Hariandja, 2015).
Penelitian tentang tumbuhan salam telah banyak dilaporkan. Murhadi dkk (2007)
melaporkan bahwa ekstrak etanol dan ekstrak etil asetat daun salam memiliki aktivitas
antibakteri yang tinggi terhadap Staphylococus aureus, Bacillus subtillis, Pseudomonas
aeruginosa dan Escherichia coli (Murhadi dkk, 2007). Hal ini diperkuat oleh Kusuma dkk
(2011) yang melaporkan bahwa ekstrak etanol daun salam (Syzygium polyanthum)
memiliki aktivitas antibakteri yang baik terhadap Salmonella thypi dan Bacillus cereus.
Sedangkan uji fitokimianya dilaporkan mengandung senyawa metabolit sekunder
golongan flavonoid, alkaloid, tannin, steroid, dan triterpenoid (Kusuma dkk, 2015).
Sedangkan dalam penelitian yang lain dilaporkan bahwa ekstrak daun salam (Syzygium
polyanthum) memiliki daya hambat terhadap Methicillin Resistant Strains of
Staphylococus aureus (Fifendy, 2014). Lain halnya dengan Putra, dkk (2015) yang
melaporkan bahwa ekstrak etanol kulit batang salam menunjukkan efek antibakteri
terhadap bakteri Staphylococus aureus (Putra dkk, 2015).
Selain pada Salam, aktivitas antibakteri juga terdapat dalam genus Syzygium yang
lain. Ekstrak air dan aseton batang, daun dan biji tumbuhan Syzygium jambos telah
dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococus aureus, Bacillus
subtillis, Escherichia coli, Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, Pseudomonas
aeruginosa, Salmonella typhi, dan Vibrio cholera (Murugan dkk, 20011). Hal ini
menunjukkan bahwa bagian batang, daun dan biji sama-sama mengandung keompok
senyawa metabolit sekunder yang berpotensi sebagai antibakteri. penelitian ini juga
melaporkan bahwa ekstrak bagian batang tumbuhan Syzygium jambos memiliki aktivitas
antibakteri yang lebih tinggi daripada bagian daunnya. Hal ini diperkuat oleh
Panchavarnakili dkk (2012) yang melaporkan bahwa ekstrak metanol batang cengkeh
(Syzygium cumini) memiliki aktivitas antibakteri yang tinggi terhadap Bacillus subtillis
dan Escherichia coli. Berdasarkan penelitian Murugan dkk, (2011) dan Panchavarnakili
dkk (2012) tersebut maka dimungkinkan bagian batang salam (Syzygium polyanthum)
khususnya bagian korteks memiliki aktivitas antibakteri yang tinggi dibandingkan bagian
daunnya. Hal ini yang menjadi alasan dilakukannya penelitian disamping karena adanya
bakteri yang resisten terhadap antibiotik sintetik seperti Bacillus subtillis dan Escherichia
coli yang merupakan bakteri patogen penyebab keracunan dan diare (Iswara , 2015 dan
Kanzil dkk, 2015) dan juga belum ada laporan penelitian antibakteri pada korteks batang
Salam. Adapun Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi dalam beberapa penelitian
sebelumnya adalah pelarut polar (metanol, etanol dan air), sedangkan untuk pelarut
nonpolar seperti n-heksan belum banyak dilakukan. Karena senyawa- senyawa yang
berpotensi sebagai antimikroba (antibakteri, antijamur) lebih larut dalam pelarut nonpolar
seperti n-heksan, maka dalam penelitian ini akan dilakukan Skrining fitokimia dan uji
aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium polyanthum).
Aktivitas antibakteri yang dimiliki ekstrak n-heksan korteks batang salam juga
diharapkan lebih efektif daripada obat antibiotik yang sudah ada. Sehingga mampu
menghambat pertumbuhan bakteri yang resisten terhadap antibiotik.
B. Rumusan Masalah
1. Apa saja senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak n-heksan
korteks batang salam (syzygium polyanthum) ?
 2. Bagaimana aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan korteks batang pohon salam
(syzygium polyanthum) terhadap bakteri Escherichia coli dan Bacillus subtillis
secara in vitro?
C. Tujuan dan Manfaat Penelitian Tujuan Penelitian:
1. Untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder apa saja yang terdapat dalam
ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium polyanthum).
2. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan korteks batang pohon
salam (Syzygium polyanthum) terhadap bakteri Escherichia coli dan Bacillus
subtillis secara in vitro.
D. Manfaat Penelitian:
1. Memberikan informasi mengenai manfaat batang salam bagi kesehatan.
2. Mendukung upaya pengembangan antibakteri dari bahan alam dalam bidang
pangan maupun obat-obatan.
3. Mendukung penelitian dan pengembangan obat berbasis bahan alam.

BAB II
LANDASAN TEORI
A. Deskripsi Teori
 Salam (Syzygium polyanthum) Salam adalah tanaman yang tumbuh liar
di hutan dan pegunungan, ataubiasa ditanam di perkarangan dan sekitar rumah.
Pohon ini dapat ditemukan di daerah dataran rendah sampai ketinggian 1.400
mdpl. Tinggi pohon salam mencapai 25 m, batang bulat, permukan licin, bertajuk
rimbun dan berakar tunggang. Daun dari tanaman ini tunggal, letak berhadapan
,dengan panjang tangkai daun 0,5-1 cm. Helaian daun berbentuk lonjong sampai
elips atau bundar telur sungsang, ujung meruncing, pangkal runcing, tepi rata,
pertulangan menyirip, permukaan atas licin berwarna hijau tua, permukaan bawah
berwarna hijau muda, panjang 5-15 cm, lebar 3-8 cm, dan jika diremas berbau
harum. Bunga majemuk tersusun dalam malai yang keluar dari ujung ranting,
berwarna putih, dan berbau harum. Buahnya buah buni, bulat, diameter 8-9 mm,
buah muda berwarna hijau, setelah masak menjadi merah gelap, rasanya agak
sepat. Biji bulat, diameter sekitar 1 cm, berwarna coklat (Dalimartha, 2000).

1. Taksonomi

Salam memiliki taksonomi tumbuhan sebagai berikut:

Kingdom : Plantae (Tumbuhan)
Divisi : Angiospermae
Sub divisi : Pinophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Bangsa : Myrtales
Suku : Myrtaceae
Marga : Eugenia
Jenis : Syzygium polyanthum
Badan POM RI, 2008)
2. Penamaan
Tanaman salam adalah tanaman yang berasal dari indonesia dan memiliki
nama berbeda di setiap daerah. Di pulau Sumatera, salam disebut meselangan atau
ubar serai. Sedangkan di pulau Jawa disebut gawok, manting, dan salam. Nama
 ilmiah daun salam adalah Syzygium polyanthum [Wight.] Walp. dengan nama
lain yaitu Eugenia polyantha Wight. dan Eugenia lucidula Miq. (Dalimartha,
2000).
3. Kandungan dan manfaat
Salam merupakan salah satu tumbuhan obat yang sudah banyak diteliti
terutama pada bagian daunnya. Pada tahun 2011 Liliwirianis dkk meneliti
kandungan senyawa metabolit sekunder dalam daun dan batang pohon salam
(Syzygium polyanthum) dan hasilnya yaitu terdapat senyawa metabolit sekunder
golongan alkaloid, saponin, steroid, fenolat, dan flavonoid. Kusuma, dkk, (2011)
melaporkan ekstrak etanol buah pohon salam yang telah masak mengandung
saponin, karbohidrat, tanin, alkaloid, triterpenoid, dan flavonoid, sedangkan yang
terkandung dalam ekstrak etanol buah mentah dan daun salam adalah karbohidrat,
tanin, alkaloid, steroid, triterpenoid, dan flavonoid. Ekstrak kulit pohon salam
mengandung senyawa fenolat, flavonoid, dan flavonol (Lelono, 2012). Ekstrak
metanol daun salam dilaporkan oleh Ruchiyat (2013) mengandung flavonoid,
saponin, tanin, steroid, dan kuinon, sedangkan fraksi n-heksan dan diklorometan
ekstrak metanol.
Berdasarkan beberapa penelitian, senyawa yang terkandung dalam daun
salam yang dapat menjadi antibakteri adalah sebagai berikut.
1. Flavonoid merupakan senyawa polar yang umumnya mudah larut dalam pelarut
polar seperti etanol, menthanol, butanol, dan aseton. Flavonoid adalah golongan
terbesar dari senyawa fenol. Senyawa fenol memiliki kemampuan antibakteri
dengan cara mendenaturasi protein yang menyebabkan terjadinya kerusakan
permeabilitas dinding sel bakteri (Cushnie & Lamb, 2011).
2. Tannin dapat mengganggu permeabilitas membran sel bakteri dan memiliki
kemampuan mencegah koagulasi plasma pada Staphylococcus aureus.
3. Minyak atsiri juga berperan sebagai antibakteri dengan cara mengganggu enzim
yang membantu pembentukan energi sehingga memperlambat pertumbuhan sel.
Minyak atsiri dalam jumlah banyak dapat juga mendenaturasi protein(Nazzaroet
al., 2013).
4. Alkaloid memiliki kemampuan sebagai antibakteri. Mekanisme alkaloid sebagai
inhibitor pertumbuhan bakteri adalah dengan cara mengganggu komponen
penyusun peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak
terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut.
4. Kegunaan
Tumbuhan salam banyak digunakan sebagai rempah pengharum makanan
dan dikenal pula sebagai tumbuhan berkhasiat obat oleh masyarakat Indonesia.
Daun salam sering digunakan sebagai salam satu ramuan tradisional jamu untuk
mengobati penyakit diabetes. Masyarakat Medan banyak yang telah
menggunakan daun salam sebagai jamu bagi penderita diabetes (Widyawati, dkk,
2015: 1701). Ekstrak metanol daun salam telah dilaporkan sebagai antioksidan
(Har dan Ismail, 2012), anti bakteri (Gowri dan Vasantha, 2010) dan antidiabetes
(Widyawati, dkk, 2015). Ekstrak etanol daun salam juga dapat berperan sebagai
antibakteri (Kusuma, 2015; Setiawan), mampu menurunkan kadar asam urat
(Sinaga, dkk, 2014) dan berpotensi sebagai obat antidiabetes (Sutrisna, dkk, 2016)
dengan menurunkan kadar gula dalam darah (Studiawan dan Santosa, 2005).
Minyak atsiri salam dapat digunakan sebagai antijamur (Lelono, 2012).
5. Ekstraksi
Ekstraksi adalah penyarian zat-zat berkhasiat atau zat- zat aktif dari bagian
tanaman obat, hewan dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut. Zat-zat aktif
terdapat di dalam sel, namun sel tanaman dan hewan berbeda demikian pula
ketebalannya, sehingga diperlukan metode ekstraksi dengan pelarut tertentu
dalam mengekstraksinya.
Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia yang
terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan
massa komponen zat ke dalam pelarut, dimana perpindahan mulai terjadi pada
lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut (Harbone, 1987).
Terdapat dua cara ekstraksi menggunakan pelarut, yaitu cara dingin dan cara
panas. Cara dingin terdiri dari maserasi dan perkolasi.
6. Maserasi
Maserasi merupakan salah satu metode ekstraksi yang dilakukan melalui
perendaman serbuk bahan dalam larutan pengekstrak. Metode ini digunakan
untuk mengekstrak zat aktif yang mudah larut dalam cairan pengekstrak, tidak
mengembang dalam pengekstrak, serta tidak mengandung benzoin. Menurut
Hargono dkk. (1986), ada beberapa variasi metode maserasi, antara lain digesti,
maserasi melalui pengadukan kontinyu, remaserasi, maserasi melingkar, dan
maserasi melingkar bertingkat. Digesti merupakan maserasi menggunakan
pemanasan lemah (40-50°C). Maserasi pengadukan kontinyu merupakan
maserasi yang dilakukan pengadukan secara terus- menerus, misalnya
menggunakan shaker, sehingga dapat mengurangi waktu hingga menjadi 6-24
jam. Remaserasi merupakan maserasi yang dilakukan beberapa kali. Maserasi
melingkar merupakan maserasi yang cairan pengekstrak selalu bergerak dan
menyebar. Maserasi melingkar bertingkat merupakan maserasi yang bertujuan
untuk mendapatkan pengekstrakan yang sempurna. Lama maserasi memengaruhi
kualitas ekstrak yang akan diteliti. Lama maserasi pada umumnya adalah 4-10
hari. Maserasi akan lebih efektif jika dilakukan proses pengadukan secara berkala
karena keadaan diam selama maserasi menyebabkan turunnya perpindahan bahan
aktif. Melalui usaha ini diperoleh suatu keseimbangan konsentrasi bahan
ekstraktif yang lebih cepat masuk ke dalam cairan pengekstrak.Kelemahan
metode maserasi adalah pengerjaannya lama dan penyarian kurang sempurna.
Secara tekhnologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian
konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakukan pengulangan
penambahan pelarut setelah dilakukan penyarigan maserat pertama dan
seterusnya (Depkes RI, 2000).
 BAB III

METODE PENELITIAN

1. Alat yang digunakan dalam penelitian ini dibagi dalam beberapa tahap yaitu:
B. Pembuatan simplisia
Dalam pembuatan simplisia digunakan pisau untuk memotong batang
salam dan menyerut bagian korteksnya. Selanjutnya dipakai blender untuk
menyerbukkan batang salam menjadi serbuk simplisia.
 C. Maserasi
Simplisia korteks batang salam ditimbang dengan neraca analitik.
Kemudian digunakan toples kaca yang mampu menampung 500 gram simplisia
untuk direndam dengan pelarut n-heksan.
D. Evaporasi
Ekstrak (maserat) korteks batang salam dievaporasi menggunakan Vacum
Rotary Evaporator (Heidolp) untuk menguapkan pelarut dalam maserat.
E. Uji Fitokimia
Pipet tetes digunakan untuk mengambil dan memindahkan bahan
cair/larutan. Kemudian dimasukkan tabung reaksi untuk mereaksikan larutan atau
bahan yang digunakan.
F. Uji Antibakteri
Dalam uji antibakteri digunakan alat sebagai berikut:
 Jarum ose digunakan untuk menanam mikroba dengan cara
goresanlstrea.
 Mikropipet untuk memindahkan larutan yang akan digunakan
dengan ketelitian yang tinggi
 Pinset sebagai alat penjepit bahan-bahan yang digunakan
 Cawan petri untuk tempat media yang akan digunakan untuk
menumbuhkan mikroba
 Vortex mixer untuk menghomogenkan suspense larutan dalam
tabung reaksi
 Autoklaf digunakan untuk steilisasi alat/bahan/media
 Bunsen untuk mensterilkan alat dan sebagi sumber panas
 inkubator untuk inkubasi media yang telah ditanami
mikrobapenggaris dan alat analisa GC-MS untuk menganalisa
senyawa yang terkandung dalam ekstrak.
3. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah:

1. Korteks batang salam

Simplisia yang digunakan dalam penelitian ini adalah Korteks batang

tanaman salam (Syzygium polyanthum) dari Kelurahan Wonosari Kecamatan
Ngaliyan Kota Semarang, Provinsi Jawa Tengah.

2. Pelarut
Pelarut yang digunakan dalam maserasi adalah n- heksan dan serbuk
simplisia korteks batang salam.
1. Bahan Skrining Fitokimia
Bahan-bahan yang digunakan dalam skrining fitokimia adalah
pereaksi dragendorf, pereaksi mayer, pereaksi bouchardat, serbuk seng,
asam oksalat, akuades, gelatin, natrium klorida, natrium karbonat, asam
sulfat, asetat anhidrat, serbuk magnesium, asam klorida, etanol, besi(III)
 klorida, natrium hidroksida, bismuth nitrat, natrium bikarbonat, kloroform
dan merkuri(II) klorida.
2. Bahan Uji Antibakteri
Bahan-bahan yang digunakan dalam uji antibakteri adalah aseton, ekstrak
n-heksan korteks batang salam, media Nutrien Agar (NA), biakan bakteri
Bacillus subtillis ATCC 6051 dan Escherichia coli ATCC 35218, akuades
steril, kloramfenikol, dan kertas saring.

B. Prosedur Kerja
1. Proses persiapan dan pengujian sampel
Proses persiapan dan pengujian sampel dalam penelitian ini diawali
dengan proses persiapan simplisia untuk maserasi. Hasil maserasi kemudian
diuapkan pelarutnya dan dipekatkan hingga membentuk gel/pasta dengan Vacum
Rotary Evaporator. Ekstrak kental yang didapatkan dari evaporasi dilakukan
penapisan fitokimia, serta analisa GC-MS dan diuji aktivitas antibakterinya.
Adapun rincian Proses persiapan dan pengujian sampel dalam penelitian
ini adalah:
a) Persiapan Simplisia
Batang tanaman salam dengan diameter 5 cm diambil kulit luarnya dan
dipotong-potong. Korteks batang salam diserut dengan pisau dan dikeringkan
dengan diangin-anginkan dalam suhu ruangan. Korteks batang yang kering
diperkecil ukurannya. Dengan dipotong-potong lalu dikeringkan kembali
dengan diangin-anginkan dalam ruangan. Potongan korteks batang
diserbukkan dengan blender. Serbuk simplisia korteks batang salam yang
dihasilkan diangin-anginkan dalam ruangan hingga kering. simplisia dibuat
serbuk dengan tujuan untuk membuka sel-sel dalam koreks batang salam,
sehingga seyawa bisa lebih mudah terekstrak.
b) Maserasi
Delapan ratus gram serbuk simplisia korteks batang salam ditimbang
dengan neraca analitik dan dimasukkan ke dalam toples kaca. Kemudian
ditambahkan pelarut n-heksan hingga merendam semua serbuk simplisia (2,5
L). Perendaman dilakukan selama 3 x 24 jam. Kemudian disaring
menggunakan kertas saring hingga semua pelarut terambil. Selanjutnya
dimaserasi kembali hingga maserat yang dihasilkan jernih. Semua maserat
yang didapatkan ditampung dalam wadah dan disimpan ditempat sejuk dan
kering(Saraswaty, 2010).
c) Evaporasi
Maserat yang telah didapatkan dievaporasi dengan vacuum rotary evaporator
Heidolph pada suhu 40°C dengan kecepatan putaran 40 rpm. Evaporasi
menghasilkan ekstrak kental dalam bentuk gel/pasta yang nantinya digunakan
dalam uji selanjutnya.
d) Skrinning Fitokimia
 Alkaloid
 Ekstrak n-heksan korteks batang salam ditambahkan 3 ml HCl 2N
kemudian diaduk secara kuat. Disaring sehingga diperoleh filtrat (Tukiran,
2016). Uji alkaloid dilakukan dengan tiga pereaksi, yaitu pereaksi
bouchardat, mayer, dan dragendorf. Satu mililiter filtrat ditambahkan 2
tetes pereaksi bouchardat. Adanya alkaloid ditunjukkan dengan adanya
endapan coklat hitam. 1 ml filtrat ditambahkan 2 tetes pereaksi mayer. Jika
terbentuk endapan putih atau pucat yang larut dalam metanol maka positif
mengandung alkaloid. 1 ml filtrat ditambahkan 2 tetes peeaksi dragendorf.
Hasil positif ditandai dengan terbentuknya endapan jingga coklat
(Departemen Kesehatan RI, 1995 dalam Murni, 2012).
 Fenol
Satu milligram ekstrak dilarutkan dalam etanol dan ditambahkan
beberapa tetes FeCl3 1%. Hasil positif ditandai dengan warna hijau,
merah, ungu, biru, atau hitam (Harborne, 1987; Tukiran dkk, 2016).
 Flavonoid
Dua mililiter larutan ekstrak dalam etanol mendidih ditambahkan
beberapa tetes FeCl3 1%. Adanya flavonoid ditandai dengan terbentuknya
warna hijau atau hitam pekat (Harbourne, 1987 dalam Fitriandiny,
2012:32).
 Saponin
Sepuluh milligram dalam 1 ml etanol ditambahkan beberapa tetes
NaHCO3. Campuran dikocok secara menyeluruh selama 3 menit. Jika
terbentuk buih seperti sarang lebah maka menunjukkan adanya saponin
dalam sampel (Gowri dan Vasantha, 2010).
 Tanin
Sepuluh miligram ekstrak ditambahkan 3 ml etanol. Lalu
dipanaskan hingga mendidih selama 5 menit kemudian disaring. Untuk
mengetahui adanya tanin dilakukan dengan dua pereaksi, yaitu pereaksi
FeCl3 dan gelatin. Ditambahkan beberapa tetes FeCl3 1 % beberapa tetes
dalam filtrat. Adanya tanin ditunjukkan dengan adanya warna hijau
kehitaman (Rasyidi, dkk, 2015).
 Triterpenoid
Dua mililiter ekstrak dalam etanol ditambahkan 1 ml asetat
anhidrat dan 1 ml asam sulfat pekat. Hasil positif ditunjukkan dengan
warna ungu, jingga, atau kuning (Harborne, 1987).
 Steroid
Dua puluh miligram ekstrak dilarutkan dalam 1 ml kloroform lalu
disaring. Kemudian ditambahkan asam sulfat. Hasil positif ditunjukkan
dengan terbentuknya cincin berwarna coklat (Samudra, 2014).
 Terpenoid
Sepuluh miligram ekstrak ditambahkan dengan 2 ml kloroform
dan 1 ml H2SO4. Jika teramati warna coklat kemerahan maka
menunjukkan adanya terpenoid (Gowri dan Vasantha, 2010).
e. Uji Aktivitas Antibakteri (metode CLSI: Clinical and Laboratory
Standards institute)

 Pembuatan media
Medium yang digunakan alam pertumbuhan bakteri dengan
menggunakan Nutrient Agar (NA) dengan komposisi Serbuk NA 20
gram (mengandung ekstrak daging sapi , pepton, dan agar-agar) dan
aquades 1000 mL.
 Preparasi ekstrak uji dan penentuan pelarut Preparasi ekstrak uji
dilakukan dengan cara menentukan pelarut yang digunakan untuk
melarutkan ekstrak uji.
Pelarut yang digunakan yaitu dimetil sulfoksida (DMSO) 5%
(Chandrasekaran & Venkatesalu, 2014),. Jika tidak bisa larut maka
digunakan DMSO 10% (Prabhakaran dkk, 2011). Apabila belum bisa
larut maka digunakan aseton (Djoukeng, 2005). Sampel ekstraks n-
heksane di timbang sebanyak 1000 mg (1 g) dan di larutkan dalam 5
ml aseton (konsentrasi 200 mg/ml) sebagai larutan stok. Kemudian
diencerkan menjadi beberapa konsentrasi yaitu 0,125, 0,25, 0,50, 0,75,
100 dan120 mg/mL.

f. Uji Antibakteri Metode disk diffusion

Mula-mula diambil 1 ml kultur sel (umur 24-48 jam) dimasukkan ke

dalam petridish steril, kemudian di tuang media NA hangat (belum memadat).
Dibiarkan memadat. Selanjutnya disiapkan kertas cakram (papr disk) steril
dengan diameter 0,8 mm. Kertas cakram dimasukkan ke dalam tabung
eppendorf yang telah berisi sampel dengan berbagai variasi konsentrasi.
Sebagai kontrol digunakan kontrol akuades; kontrol pelarut (aseton) dan
kontrol positif chloramphenicol). Cakram diserapkan pada sampel dengan cara
merendamnya dalam sampel selama 2 menit, kemudian diambil menggunakan
penjepit steril dan di sentuhkan ke dinding tabung eppendorf guna meniriskan
larutan yang menempel pada cakram. Cakram secara aseptis diletakkan pada
permukaan media yang telah berisi kultur uji (Bacillus subtillis dan Escherichia
coli). Kemudian diinkubasi selama 24-48 jam pada suhu 37°C. Diamati adanya
pembentunkan zona bening disekitar cakram dan diukur dengan jangka sorong.

g. Uji Antibakteri Metode well diffusion

Pada metode ini digunakan bilayer. Layer yang dasar adalah agar yang di
tuang ke dalam petri dan dibiarkan memadat, selanjutnya diletakkan ring
sumuran dan dituang dengan media berisi kultur bakteri uji. Setelah memadat
ambil ring-nya dan masukkan sample dengan berbagai konsentrasi pada
sumuran (well). Kemampuan penghambatan ditunjukkan dengan adanya zona
hambat disekeliling sumuran.
 BAB IV
HASIL PENGAMATAN

A. Deskripsi Data

1. Ekstraksi

Ekstrak kental yang dihasilkan dari proses maserasi dengan pelarut n-heksan dan
evaporasi sebesar 1,21 gram dengan rendemen sebesar 0,15%.

2. Skrining fitokimia ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium

polyanthum)

Hasil uji fitokimia ekstrak n-heksan korteks batang

 salam (Syzygium polyanthum) disajikan dalam table 4.1

berikut:

Tabel 4.1 Hasil uji fitokimia ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium
polyanthum)

Jenis senyawa Hasil (+/-)

Flavonoid -
Alkaloid -

Fenol -
Saponin -

Steroid +
Terpenoid +

Triterpenoid +

Keterangan : (+) = mengandung senyawa metabolit sekunder

(-) = tidak mengandung senyawa metabolit sekunder

Berdasarkan table 4.1 diketahui ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium
polyanthum) mengandung senyawa metabolit sekunder golongan steroid, terpenoid dan
triterpenoid. Uji ini merupakan uji pendahuluan untuk mengetahui golongan senyawa
metabolit sekunder dalam tanaman.

3. Aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan korteks batang salam (Syzygium polyanthum)

Uji aktivitas antibakteri pada penelitian ini menggunakan dua metode yaitu disc diffusion
(Paper disc) dan well diffusion, dan menggunakan bakteri Bacillus subtillis sebagai
bakteri gram positif dan Escherichia coli sebagai bakteri gram negatif. Aktivitas
penghambatan pertumbuhan bakteri ditandai dengan adanya diameter zona bening yang
terbentuk disekitar ekstrak uji. Hasil pengukuran aktivitas antibakteri disajikan dalam
table 4.3 dan 4.4.
B. Analisa Data
1. Deskripsi Hasil Ekstraksi

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah batang salam. Bagian batang
yang digunakan adalah korteks salam yang dipisahkan dari kulit batang, xylem dan floem.
Serbuk simplisia kering yang didapatkan adalah sebanyak 800 gram. Simplisia ini
dimaserasi dengan 2,5 L. n-heksan yang telah didestilasi. Setelah difiltrasi maserat
kemudian diuapkan dengan vacuum rotary evaporator (Heidolph).

Proses ekstraksi simplisia korteks batang salam dilakukan dengan metode

maserasi dengan pelarut n- heksan tanpa pemanasan dengan tujuan agar senyawa-
senyawa yang sensitif terhadap suhu tidak menguap. Penggunaan n-heksan sebagai
pelarut dikarenakan tujuan dari ekstraksi ini adalah untuk mengekstrak senyawa golongan
steroid, terpenoid dan triterpenoid yang larut dalam pelarut nonpolar (seperti n-heksan)
yang berpotensi sebagai antibakteri. Pada saat maserasi berlangsung pelarut berdifusi ke
dalam sampel dan melarutkan senyawa-senyawa yang mempunyai kepolaran yang sama
dengan pelarut sesuai prinsip like

dissolved like. Penghalusan sampel menjadi serbuk (simplisia) bertujuan untuk

meningkatkan luas permukaan sehingga meningkatkan proses ekstraksi dan mempercepat
waktu maserasi (Ncube dkk, 2008). Ekstrak (maserat) yang didapatkan kemudian di
evaporasi dengan vacuum rotary evaporator (Heidolph) untuk menghilangkan pelarut
yang masih bercampur dengan ekstrak. Ekstrak Kental berbentuk pasta yang diperoleh
berwarna coklat sebanyak 1, 21 gram dengan rendemen 0,15 %. Kecilnya hasil rendemen
kemungkinan disebabkan oleh sampel yang digunakan adalah bagian korteks batang
salam yang keras sehingga proses ekstraksi dengan cara maserasi kurang efektif.

2. Hasil Skrining fitokimia

Hasil skrining fitokimia ekstrak n-heksan korteks

batang salam (tabel 4.1) menunjukkan hasil positif terhadap senyawa metabolit sekunder
golongan steroid, terpenoid dan triterpenoid. Sedangkan senyawa golongan flavonoid,
alkaloid, fenol, tanin dan saponin menunjukkan hasil negatif.

Uji flavonoid dilakukan dengan melarutkan ekstrak dalam etanol mendidih kemudian
ditambah FeCl3. Sampel tidak menunjukkan hasil positif mengandung flavonoid, karena
tidak terbentuk warna hijau atau hitam pekat

setelah penambahan FeCl3. hal ini dikarenakan senyawa golongan flavonoid ini lebih
larut dalam pelarut polar seperti metanol (Ncube dkk, 2008). Adapun reaksi kimia yang
terjadi sebagai berikut (uji positif):

Uji alkaloid menunjukkan hasil negatif dengan tidak terbentuknya endapan jingga setelah
direaksikan dengan pereaksi Dragendroff. Senyawa alkaloid bereaksi dengan pereaksi
Dragendorff (kalium tetraiodobismutat) menghasilkan endapan jingga hingga merah
kecokelatan. Pada reaksi ini terjadi penggantian ligan dimana nitrogen yang mempunyai
pasangan elektron bebas pada alkaloid membentuk ikatan kovalen koordinat dengan ion
K+ dari kalium tetraiodobismutat menghasilkan kompleks kalium- alkaloid yang
mengendap (Haryati dkk, 2015). Adapun reaksi kimia yang terjadi sebagai berikut (uji
positif):

Pada uji fenol, ekstrak dilarutkan dalam air dan direaksikan dengan FeCl3 1%
menunjukkan hasil negatif dengan tidak adanya perubahan warna menjadi hijau
kehitaman. Fenolik bereaksi dengan FeCl3 1% membentuk warna merah, ungu, biru atau
hitam yang pekat karena FeCl3 bereaksi dengan gugus –OH aromatis [Haryati dkk 2015].
Kompleks berwarna yang terbentuk diduga sebagai besi (III) heksafenolat. Ion Fe3+
mengalami hibridisasi orbital d2sp3 sehingga ion Fe3+ (4s03d5) memiliki 6 orbital
kosong yang diisi oleh pendonor pasangan elektron, yaitu atom oksigen pada senyawa
fenolik yang memiliki pasangan electron bebas [Marliana dan Saleh, 2011]. Adapun
reaksi kimia yang terjadi sebagai berikut (uji positif):

52
Uji steroid dan triterpenoid menggunakan metode Liebermann-bouchard, ekstrak
dilarutkan dalam kloroform kemudian ditambah pereaksi Liebermann- bouchard (asam
asetat anhidrat-H2SO4)menunjukkan hasil positif dengan adanya perubahan warna
menjadi merah kecoklatan untuk steroid dan coklat-ungu untuk triterpenoid. Reaksi
triterpenoid dengan pereaksi Liebermann (asam asetat anhidrat-H2SO4) menghasilkan
warna merah-ungu sedangkan steroid memberikan warna hijau-biru. Hal ini didasari oleh
kemampuan senyawa triterpenoid dan steroid membentuk warna oleh H2SO4 dalam
pelarut asam asetat anhidrid. Perbedaan warna yang dihasilkan oleh triterpenoid dan
streoid disebabkan perbedaan gugus pada atom C-4 [Marliana dan Saleh, 2011].

53

Uji saponin tidak menunjukkan hasil positif karena buih yang terbentuk setelah
pengocokan tidak bertahan lama, hanya bertahan beberapa detik. Saponin memiliki
glikosil sebagai gugus polar serta gugus steroid atau triterpenoid sebagai gugus nonpolar
sehingga bersifat aktif permukaan dan membentuk misel saat dikocok dengan air. Pada
struktur misel gugus polar menghadap ke luar sedangkan gugus nonpolar menghadap ke
dalam dan keadaan inilah yang tampak seperti busa (Sangi dkk, 2008). Adapun reaksi
kimia yang terjadi sebagai berikut: Adapun reaksi kimia yang terjadi sebagai berikut (uji
positif):
 Hasil uji fitokimia ini dikomparasikan dengan penelitian sebelumnya pada
tumbuhan dengan genus yang sama yaitu Syzygium yang diekstrak dengan pelarut n-
heksan. Hasilnya bahwa ekstrak n-heksan korteks batang Salam (Syzygium polyanthum)
dan ekstrak fraksi n-heksan daun tanaman pucuk merah (Syzygium myrtifolium) sama-
sama mengandung senyawa golongan triterpenoid sebagai mana yang telah dilaporkan
Haryati dkk (2015). Senyawa golongan terpenoid memiliki potensi antibakteri seperti
yang dilaporkan oleh Djoukeng dkk, (2005). Dengan demikian, golongan terpenoid
dalam ekstrak n-heksan korteks batang Salam juga dimungkinkan berpotensi sebagai
antibakteri.

3. Hasil Uji Hambat aktivitas antibakteri a. Preparasi sampel

Preparasi ekstrak sampel dilakukan dengan melarutkan sedikit ekstrak kedalam

DMSO 5% untuk mengetahui kelarutannya (Chandrasekaran dan Venkatesalu, 2004).
Akan tetapi ekstrak tidak dapat larut, hal ini mungkin dikarenakan konsentrasi DMSO
kurang tinggi. Kemudian ekstrak dilarutkan dalam DMSO 10% (Prabhakaran, 2011).
Namun ekstrak masih belum bisa larut. Hal ini mungkin dikarenakan perbedaan
kepolaran antara ekstrak dan DMSO. Selanjutnya ekstrak dilarutkan dalam aseton
(Djoukeng, 2005), dan ekstrak dapat larut, sehingga aseton digunakan untuk melarutkan
ekstrak sampel. Kemudian dibuat larutan stok dengan konsentrasi 200 mg/mL yang
selanjutnya diencerkan menjadi beberapa konsentrasi yaitu 0,125; 0,25; 0,5; 1; 5; 10; 15;
20; 25; 50; 75; 100; dan 120 mg/mL.

Adapun media yang digunakan untuk menumbuhan bakteri adalah nutrien agar
(NA), karena NA adalah media yang umum digunakan untuk menumbuhkan bakteri.
Sedangkan uji aktivitas antibakteri dilakukan pada bakteri Bacillus subtillis sebagai
bakteri gram positif dan Escherichia coli sebagai bakteri gram negatif, karena kedua
bakteri ini adalah bakteri yang umum mengontaminasi makanan

Sehingga menyebabkan keracunan dan infeksi (Setiawan dan Martioso).

Kemudian untuk pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan dua
metode yaitu disk diffusion dan well diffusion, karena metode ini adalah metode uji
antimikroba yang umum digunakan, sederhana dan tidak membutuhkan biaya yang mahal
(Balouri, 2016).
b. Deskripsi hasil uji hambat dengan Metode well diffusion Uji antibakteri dimulai
dengan metode well diffusion pada konsentrasi ekstrak sebesar 0,125; 0,25; 0,50;0,75;
dan 1 mg/mL pada bakteri Bacillus subtillis dan Escherichia coli. Hasil uji metode disk
diffusion (tabel 4.3) menunjukkan bahwa pada konsentrasi 0,125 – 1 mg/mL tidak
terbentuk zona bening di sekitar ekstrak (gambar 4.1). Hal ini diduga karena konsentrasi

ekstrak uji kurang besar.

(a)

(b)

Gambar 4.2 hasil uji aktivitas antibakteri metode well diffusion E. Coli (a) dan B. Subtillis
(b) dengan konsentrasi 0,125-1 mg/mL.

Gambar 4.2 menunjukkan bahwa zona bening disekitar ekstrak uji tidak terbentuk dan
bakteri dapat tumbuh secara merata disekitar ekstrak uji. Hal ini menunjukkan bahwa
ekstrak uji pada konsentrasi 0,125-1 mg/mL tidak menunjukkan aktivitas anti bakteri.
Adapun zona bening yang terbentuk pada gambar 4.2 adalah zona bening dari
kloramfenikol (kontrol positif)

Kemudian dilakukan peningkatan konsentrasi ekstrak uji menjadi 5; 10; 15; 20; 25; 75;
100 dan 125 mg/mL. Ternyata pada konsentrasi 5-100 mg/mL ekstrak uji juga tidak
menunjukkan penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri. Hal ini ditunjukkan

dengan tidak terbentuknya zona bening disekitar ekstrak uji (gambar 4.3)

(a)
(b)

Gambar 4.2 hasil uji aktivitas antibakteri metode disk diffusionpadaEscherichiacoli(a)

danBacillussubtillis (b) dan dengan konsentrasi 5;10;15;20;25;75; 100; dan 120 mg/mL

Gambar 4.3 menunjukkan bahwa ekstrak uji pada konsentrasi 5-120 mg/mL tidak
menunjukkan aktivitas anti bakteri, karena zona bening disekitar ekstrak uji tidak
terbentuk dan bakteri dapat tumbuh secara merata disekitar ekstrak uji (Jawetz dkk,
1986).

Adapun zona bening yang terbentuk pada gambar 4.3 adalah zona bening dari
kloramfenikol (kontrol positif).

Hasil ini menunjukkan informasi bahwa kandungan senyawa metabolit sekunder dalam
ekstrak n-heksan korteks batang salam (table 4.1) yaitu senyawa terpenoid dan
triterpenoid belum mampu menunjukkan aktivitas antibakteri karena kemungkinan
kadarnya sangat kecil. Kemudian uji aktivitas antibakteri dilanjutkan dengan metode
yang kedua yaitu disk diffusion untuk membandingkan mengkonfirmasi hasil uji aktivitas
antibakteri metode well diffusion.

c. Deskripsi hasil uji hambat dengan disk diffusion

Uji aktivitas antibakteri dengan metode well diffusion dimulai pada konsentrasi ekstrak
uji sebesar 0,125; 0,25; 0,50;0,75; dan 1 mg/mL pada bakteri Escherichia coli. Hasil pada
tabel 4.3 menunjukkan bahwa ekstrak uji pada konsentrasi 0,125;0,25;0,50; 0,75 dan1
mg/mL tidak mampu mengambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli, artinya tidak ada
zona bening yang terbentuk disekitar ekstrak uji (gambar 4.4). sehingga uji aktivitas
antibakteri

terhadap Bacillus subtillis tidak dilakukan.

Gambar 4.4 hasil uji aktivitas antibakteri metode disk diffusion pada E. coli dengan
konsentrasi 0,125-1 mg/mL.

Gambar 4.4 menunjukkan bahwa ekstrak uji pada konsentrasi 0,125-1 mg/mL tidak
menunjukkan aktivitas anti bakteri terhadap Escherichia coli. Hal ini ditunjukkan dengan
tidak adanya zona bening disekitar ekstrak uji yang terbentuk (jawetz dkk, 1986).
sehingga bakteri dapat tumbuh secara merata disekitar ekstrak uji.

Konsentrasi ekstrak uji ditingkatkan untuk uji selanjutnya. Ekstrak uji dengan konsentrasi
5; 10; 15; 20; 25; 75; 100; dan 120 mg/mL diujikan terhadap bakteri E. coli, sedangkan
bakteri B. Subtillis diuji dengan konsentrasi ekstrak uji sebesar 5; 10; 15; 20; 25; dan 100
mg/m. Ternyata pada rentang konsentrasi ekstrak uji sebesar 5-100 mg/mL juga tidak
terbentuk zona bening disekitar ekstrak uji (gambar 4.5) yang

menunjukkan bahwa tidak ada penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri E. coli dan
B. subtillis.

Gambar 4.5 hasil uji aktivitas antibakteri metode disk diffusion pada B. subtillis dan E.
coli dengan rentang konsentrasi 5-120 mg/mL
Gambar 4.5 menunjukkan bahwa ekstrak uji pada konsentrasi 5-120 mg/mL tidak
menunjukkan aktivitas

anti bakteri terhadap B. subtillis dan E. coli, karena zona bening disekitar ekstrak uji tidak
terbentuk dan bakteri dapat tumbuh secara merata disekitar ekstrak uji (Jawetz dkk,
1986).

Selanjutnya dilakukan perbandingan uji aktivitas antibakteri terhadap pelarut ekstrak uji
yaitu aseton dan pelarut media yaitu aquades sebagai kontrol negatif. Tabel 4.3
menunjukkan bahwa aseton tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri B. Subtillis
dan E.coli yang menunjukkan bahwa pelarut ekstrak uji sudah sesuai karena tidak
berpengaruh terhadap bakteri (Djoukeng dkk, 2005). Begitu juga dengan aquades yang
juga tidak menunjukkan aktivitas penghambatan bakteri yang berarti bahwa aquades
cocok untuk menjadi pelarut media NA karena bakteri dapat tumbuh dengan baik (gambar

Gambar 4.6 hasil uji akuades dan aseton (kontrol negatifitif) terhadap pertumbuhan
bakteri Bacillus subtillis dan Escherichia coli.
Adapun untuk uji positif aktivitas antibakteri digunakan obat kloramfenikol yang
merupakan obat sintetis antibakteri (Haryati dkk, 2015). Uji aktivitas antibakteri
kloramfenikol (kontrol positif) menunjukkan hasil positif dengan terbentuknya zona
hambat disekitar ekstrak uji sebesar 2,843 mm pada E.coli dan 2,534 mm pada B. Subtillis
dengan metode well difffusion dan zona hambat sebesar 2,5 mm pada B. Subtillis dengan
metode disk diffusion(gambar 4.7).

Gambar 4.7 hasil uji kloramfenikol (kontrol positif) terhadap pertumbuhan bakteri
Bacillus subtillis dan Escherichia coli.

Berdasarkan uraian diatas dapat diketahui bahwa ekstrak n-heksan korteks batang salam
mengandung senyawa metabolit sekunder golongan steroid, terpenoid dan triterpenoid.
Setelah dilakukan analisis GC-MS kelompok senyawa terpenoid dan triterpenoid yang
sebelumnya dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri,

tidak terdeteksi. Hasil ini diperkuat dengan uji aktivitas antibakteri menunjukkan hasil
yang negatif. Dengan demikian, ekstrak n-heksan korteks batang Salam mengandung
senyawa golongan terpenoid dan triterpenoid yang kadarnya sangat kecil sehingga
potensi aktivitas antibakteri yang dimiliki juga kecil.
 BAB V

PENUTUP

A. Kesimpulan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit
sekunder dalam ekstrak n-heksan korteks batang salam dan potensinya sebagai
antibakteri. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat ditarik kesimpulan bahwa:

Ekstrak n-heksan korteks batang salam mengandung senyawa metabolit sekunder

golongan steroid, terpenoid dan triterpenoid.

Uji aktivitas antibakteri ekstrak n-heksan korteks batang salam menunjukkan hasil
negatif dengan tidak adanya zona hambat pada pertumbuhan Bacillus subtillis dan
Escherichia coli, karena kandungan senyawa triterpenoid yang berpotensi sebagai
antibakteri sangat kecil.

B. Saran
Penelitian yang sudah dilakukan ini merupakan sebuah penelitian awal yang bisa
dikembangkan pada penelitian selanjutnya. Saran yang kami berikan untuk penelitian
berikutnya yaitu:

1. Proses ekstraksi apabila menggunakan maserasi sebaiknya disertai dengan

pengadukan secara kontinyu agar senyawa yang terelstrak lebih banyak.
2. Metode Ekstraksi yang dilakukan dapat menggunakan soxhletasi agar ekstrak
lebih banyak. Hal ini dikarenaka bentuk korteks lebih keras, tetapi perlu
dipertimbangkan waktu dan suhu soxhletasi untuk menghindari kerusakan
senyawa yang diekstrak.
3. Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi sebaiknya menggunakan pelarut yang
polar (etanol/metanol), kemudian dilanjutkan dengan proses fraksinasi dengan
pelarut yang lain.
 DAFTAR PUSTAKA

Abok, J. I. dan C. Manulu. 2017. TLC Analysis and GC-MS Profiling of Hexane Extract
ofSyzygium guineense Leaf. American Chemical Science Journal. 16 (3): 1-6.

Affandi, Moh Fauzan. 2012. Informasi Singkat Benih (Syzygium polyanthum).

Direktorat Bina Perbenihan Tanaman Hutan.

Balouiri, M., Moulay Sadiki dan Saad Koraichi Ibnsouda. 2016.

Methods for in vitro evaluating antimicrobial activity: A review. Journal of

Pharmaceutical Analysis 6. 71-79.

Bobbarala, Varaprasad. 2012. Antimicrobial Agents. Croatia: Janeza Trdine 9, 51000

Rijeka. Available at www.intechopen.com

BPOM RI. 2008. Acuan Sediaan Hebal Edisi Pertama Volume Keempat. 1-78..

Chandrasekaran, M. & V. Venkatesalu. 2014. Antibacterial and Antifungal Activity of

Syzygium jambolanum Seeds. Journal of Ethnophamacology .91. 105-108.

Cowan, Marjorie Murphy. 1999. Plant Product as Antimicrobial Agents. Clinical

Microbiology Review. 12(4).

Cushnie, T.P. Tim., dan Andrew J. Lamb. 2005. Antimicrobial activity of Flavonoids.
Int. Jour. Of Antimicrobial Agents. 343- 356

Dalimartha, Setiawan. 2000. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Bogor: Trobus Agriwidya.

Dirjen POM. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:
Departemen Kesehatan RI.

Djoukeng, J.D., dkk. 2005. Antibacterial triterpenes from Syzygium guinennse

(Myrtaceae). Journal of ethnoparmacology 101: 283-286.

Gowry, S. Shyamala dan K. Vasantha. 2010. Phytochemical Screening and Antibacterial

Activity of Syzygium cumini (L.) Myrtaceae Leaves Extracts. International Journal of
Pharmtech Research. 2 (2): 1569-1573.

Hadacek, F. dan Greger, H. 2000. Testing of Antifungal Natural Product: Methodologies,

Comparability of Results and Assay Choice. Phytochemical Analysis 11, 137-147.
Har, Lee Wei dan Intan Safinar Ismail. 2012. Antioxidant Activity,

Total Phenolic and Total Flavonoids of Syzygium polyanthum (Wight) Walp Leaves.
International Journal of Medicinal Arom. Plants. 2 (2): 219-228.

Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia: Penentu Cara Modern Menganalisis Tumbuhan.
Bandung: Penerbit ITB Bandung.

Hargono D. 1986. Sediaan Gelanik. Departemen Kesehatan Republik Indonesia: Jakarta

Haryati, Nur Aini, Chairul Saleh, Erwin. 2015. Uji Toksisitas dan Aktivitas Antibakteri
Ekstrak Daun Merah (Syzygium mytifolium Walp) Terhadap Bakteri Staphylococus
aureus dan Escherichia coli. J. Kimia Mulawarman. 13 (1): 35-39

Herbie, Tandi. 2015. Kitab Tanaman Berkhasiat Obat: 226 Tumbuhan Obat untuk
Penyembuhan Penyakit dan Kebugaran Tubuh. Yogyakarta: Octopus.

Iswara, Arya. 2015. Pola Sensitivitas Escherichia coli terhadap Antibiotik Metrodinazole.
The 2nd University research colloquium. 273-277

Jawetz, Ernest. 1986. Mikrobiologi Kedokteran edisi 20. EGC; Jakarta

Kanzil, Terence., Fatimawali., dan aaltje Manampiring. 2015. Uji Resistensi Bakteri
Bacillus sp yang diisolasi dari Plak Gigi terhadap Merkuri dan Eritromisin. Jurnal e-
Biomedik 3(1): 80-83

Kusuma, Irian Wijaya, Harlinda Kuspradini, Enos Tangke Arung, Farida Aryani, Yu-
Hong Min, Jin-Sook Kim, Yong-Ung Kim. 2011. Biological Activity and Phytochemical
of Three Indonesian Medicinal Plants, Murraya koenigii, Syzygium polyanthum, and
Zingiber purpurea

Lelono, Raden Athur Ario. 2012. Potential Antioxidative and Antifungal Activities from
Eugenia polyantha Wight. Widyariset. Widyariset. 15(2): 437-446.

Liliwirianis N, Nor Lailatul Wahidah Musa, Wan Zuraida Wan Mohd Zain, Jamaluddin
Kassim dan Syaikh Abdul Karim. 2011. Premilinary Studies on Phytochemical Screening
of Ulam and Fruit from Malaysia. E-Journal of Chemistry. 8 (S1): S285-S288.

Magaldi S., S. Mata-Essayag, C. Hartung de Capriles, et al. 2004.

Well diffusion for antifungal susceptibility testing, Int. J. Infect. Dis. 8. 39–45.

Malik, Abd dan Aktsar Roskiana Ahmad. 2013. Antidiarrheal Activity of Etanolic Extract
of Bay Leaves (Syzygium polyanthum (Wighht.)Walp.). Int. Res. J. Pharm. 4(4).
Marliana, S. D., Saleh C. 2011. Uji Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak kasar
Etanol, Fraksi n-Heksana, Etil

asetat, dan Metanol dari Buah Labu Air (Lagenari Siceraria (Morliana) Standl. J. Kimia
Mulawarman. 8(2): 39-63

Mukhriani. 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif. Jurnal
Kesehatan 7(2).

Murhadi, Suharyoso AS, dan Susilawati. 2007. Aktivitas antibakteri Ekstrak Daun Salam
(Syzygium polyanthum) dan Daun Pandan (Pandanus amaryllifolius). Jurnal Teknologi
dan Industri Pangan 18(1).

Murugan, S., P. Uma Devi, N. Kannika Parameswari dan K. R. Mani. 2011.

Antimicrobial activity of Syzygium jambos Against Selected Human Phatogens. Int.
Journl. of Pharm. and Pharmaceut. Science. 3(2): 44-47

Nazzaro, Filomena., Florinda fratianni., Laura de Martini., Raffaele Coppola., Vincenzo

De Feo. 2013. Effect of Essential oils on Pathogenic Bacteria. Pharmaceutical. 6. 1451-
1474

Ncube, NS, Afolayan AJ, Okoh AI. 2008. Assesment Technique of Antimicrobial
Properties of Natural Compound of Plant Origin: Current Methods and Future Trends.
African Journal of Biotechnology. 7 (12): 1797-1806

Sarker, D. Satyajit. Zahid Latid., Alexander I. Gray. 2008. Natural Product Isolation
second Edition. United States of America: ANSI. Available at www.humanapres.com

Sticher, Otto. 2008. Natural Product Isolation. Nat. Prod. Report. 25:517-554

Panchavarnakili, N., S. Tamil Selvi, D. Pavai, A. Pannerselvam, dan M. Prabakaran.

2012. Antimicrobial Studies and Phytochemical Screening of Stem Bark in Syzygium
cumini (L.) and Lannea coromentalica Houtt (Merr). Asian Jour. Of Pln. Sci. Resrch. 2
(2): 89-94

Prabhakaran, Shylaja, K.M. Gothandam & Karthikeyan Sivashanmugam. 2011.

Phytochemical and Antimicrobial Properties of Syzygium cumini an Ethanomedicinal
Plant of Javadhu Hills. Research in Pharmacy 1(1). 22-23

Pratiwi, S.T., 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga.

Rastina., Mirnawati Sudarwanto., dan Ietje Wientarsih. 2015.

Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kari (Murraya koenigi) Terhadap
Staphylococus sureus, Escherichia coli dan Pseudomonas sp. Jurnal Kedokteran Hewan.
9(2): 185-188.

Rizki, Muhammad Ikhwan dan Ester Magdalena Hariandja. 2015.

Review: Aktivitas Farmakologi, Senyawa Aktif dan

Mekanisme Kerja Daun Salam (Syzygium polyanthum). Prosiding Seminar Nasional &
Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi & Klinik 5”.

Ruchiyat. 2013. Analisis Fisikokimia dan Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Metanol
Daun Salam (Syygium polyanthum [Wight] Walp.) Asal Jawa Barat. Jurnal Ilmiah
Farmako Bahari 4(2): 68-84.

Safriani, Novi, Normalina Arpi, & Novia Mehra Erfiza. 2015.

Potency of Curry (Murayya koeniigi) and Salam Leaves (Eugenia polyanthha) Leaves as
Natural Antioxidant Sources. Pakistan Journal of Nutrition. 14 (3): 131-135.

Samudra, Arum. 2014. Karakterisasi Ekstrak Etanol Daun Salam (Syzygium polyanthum
Wight) dari Tiga Tempat Tumbuh di Indonesia. Skripsi. Jakarta: Fakultas Kesehatan dan
Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah.

Saraswaty, Vienna. 2010. Alpha Glucosidase Inhibitory Activity from Syzygium Sp.
Jurnal Teknologi Indonesia. 33 (1): 33-37.

Sardjono, S. 1999. Syzygium polyantum. Prosea 13: Spices. De Guzman, C.C. and
Siemonsma, J.S. (Eds.). Backhuys Publisher, Leiden, The Netherlands. P. 218-219.

Sinaga, Agnes Filadelfia, Widdhi Boddhi, dan Widya Astuti Lolo. 2014. Uji Efek Ekstrak
Etanol Daun Salam (Syzygium polyanthum (Wight.) Walp) terhadap Penurunan Kadar
Asam Urat Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Rattus novergicus L.) yang diinduksi
Potasium Oksonat. Pharmacon. 3 (2): 2302-2493.

Suarsana, I Nyoman, A.A. Ngurah Anom Kumbara dan I Ketut Satriawan. 2015.
Tanaman Obat Sembuhkan Penyakit untuk Sehat. Bali: Lembaga Pengapdian Kepada
Masyarakat Universitas Udayana.

Sumana, Agus & Agustin Wulan SD. 2009. Kemampuan Air Rebusan Daun Salam
(Eugenia polyantha) dalam Menurunkan Jumlah Koloni Bakteri Steptococcus sp.
Majalah Farmasi Indonesia. 20(3). 112-117.
Sungkar, S., Ismid, I.S., Sjarifuddin, P.K., & Susanto, I. 2008. Parasitologi Kedokteran,
Edisi Keempat. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.

Sutrisna, EM, Ika Trisharyanti, Rima Munawaroh, & Suprapto. 2016. Antioxidant and
Antidiabetic Activity of 70% Ethanolic Extract of Syzygium polyanthum (Wight) Leaf
from Indonesia. International Journal of Researching Ayurveda Pharm. 7 (2): 214-216.

Tiwari, Phrasant, Bimlesh Kumar, Mandeep Kaur, Gupreet Kaur, Harleen Kaur.
Phytochemical Screening and Extraction: A Review. J. Etnopharmacol. 50:53-59

Tjitrosoepomo, Gembong. 2002. Taksonomi Tumbuhan (spermatophyta). Yogyakarta:

Gadjah Mada University Press.

Tukiran, Andika Pramudya, Wardana, Ela Nurlaila, Ayu Mei Santi, dan Nurul Hidayati.
2016. Analisis Awal Fitokimia pada Ekstrak Metanol Kulit Batang Tumbuhan Syzygium
(Myrtaceae). Prosiding Seminar Nasional Kimia dan Workshop. Surabaya 17 Nopember
2016.

Vignesh, Rajamanickam, Puhazhendhi Puhazhelvan, Mani Sangeethkumar,

Jothiramshekar Saranya, Palanisami Eganathan & Puthiyapurayil Sujanapal. 2013. GC-
MS Analysis, Antimicrobial, Scavenging Ability and Cytotoxic Activity of Leaves of
Syzygium calophyllifolium Walp. Jurnal of Biologically Active Products from Nature.
3(2). 121-129.

Widyawati, Tri, Willy Winardi Purnawan, Item Justin Atangwho, Nor Adlin Yusoff,
Mariam Ahmad, dan Mohd. Zaini Asmawi. 2015. Anti-diabetic Activity of Syzygium
polyanthum (Wight.) Leaf Extract, The Most Commonly Use Herb Among Diabetic
Patients in Medan, North Sumatera, Indonesia.

International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research. 6 (4): 2320-5148.