SKRIPSI

KARAKTERISASI DAN UJI AKTIVITAS

ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL 96% DAUN
STROBERI (Fragaria x ananassa) DENGAN METODE
DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil)

I Made Astawa Ari Putra

171200245

PROGRAM SARJANA
PROGRAM STUDI FARMASI KLINIS
FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS BALI INTERNATIONAL
2021
KARAKTERISASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
ETANOL 96% DAUN STROBERI (Fragaria x ananassa) DENGAN
METODE DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil)

Skripsi untuk memperoleh Gelar Sarjana pada Program

Studi Farmasi Klinis Universitas Bali Internasional

I Made Astawa Ari Putra

171200245

PROGRAM SARJANA
PROGRAM STUDI FARMASI KLINIS
FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS BALI INTERNATIONAL
2021
 LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING

USULAN PENELITIAN INI TELAH DISETUJUI PADA

TANGGAL 30 Desember 2020

Pembimbing I Pembimbing II

apt. I Gusti Ngurah Agung W.P, S.Farm., M.Sc. Putu Ika Farmani, S.KM.,
M.Kes NIDN. 0823088801 NIDN. 0826088901

Mengetahui

Ketua Program Studi Farmasi Klinis

Universitas Bali International

apt.I.A. Manik Parthasutema, S.Farm.,M.Farm

NIDN. 0818118505
 PENETAPAN PANITIA PENGUJI
Skripsi Ini Telah Diuji dan Dinilai Oleh Panitia
Penguji pada
Program Studi Farmasi Klinis
Universitas Bali Internasional
Pada Tanggal

Berdasarkan SK Rektor Universitas Bali Internasional

No :
Panitia Penguji usulan penelitian skripsi ini adalah :
Ketua :
Anggota :
1. apt.I Gusti Ngurah Agung Windra W.P , S.Farm.,M.Sc
2. Putu Ika Farmani, S.KM., M.Kes
 UCAPAN TERIMAKASIH

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas

segala rahmat dan karunia yang telah dilimpahkan-Nya kepada penulis sehingga

skripsi yang berjudul “ karakterisasi dan uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol

daun stroberi (Fragaria x ananassa) dengan metode DPPH (2,2-diphenyl-1-

picrylhydrazil)” selesai tepat pada waktunya. Skripsi ini disusun untuk memenuhi

salah satu persyaratan akademik dalam meraih gelar Sarjana Farmasi.

Dalam proses penyusunan skripsi ini, penulis banyak mendapatkan

bimbingan serta saran dari berbagai pihak. Maka dari itu, dalam kesempatan ini

penulis menyampaikan rasa hormat dan terimakasih kepada:

1. Prof. Dr.dr. I Made Bakta Sp.PD (KHOM) selaku Rektor Universitas Bali

Internasional.

2. Ns. I Gusti Ngurah Made Yudhi Saputra, S.Kep., M.M. selaku Dekan Fakultas

Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Bali Internasional.

3. apt. Ida Ayu Manik Partha Sutema, S.Farm., M.Farm. selaku Koordinator

Program Studi Farmasi Klinis Universitas Bali Internasional.

4. apt. I Gusti Ngurah Agung Windra Wartana Putra.,S.Farm.,M.Sc. selaku dosen

pembimbing I yang telah memberikan bimbingan, saran dan dukungan kepada

penulis selama penyusunan skripsi ini.

5. Putu Ika Farmani S.KM., M.Kes. selaku pembimbing II yang telah

memberikan bimbingan, saran dan dukungan kepada penulis selama

penyusunan skripsi ini.

6. Segenap dosen dan staf Universitas Bali Internasional.

7. Ida Ayu Mira Jayanti A.Md.Ak selaku laboran yang turut membantu dalam

penyediaan alat dan bahan di laboratorium.

8. Ibu dan keluarga saya yang selalu memberikan dukungan dan doa kepada

penulis.

9. Rr. Ratih Purnami Sudrajad selaku sahabat dan orang yang telah dianggap

saudara oleh penulis, yang selalu memberikan semangat, dukungan, perhatian

dan tak pernah bosan mendengarkan keluh kesah penulis.

10. Teman-teman prodi Farmasi Klinis Universitas Bali Internasional angkatan 2

yang telah membantu dan memberikan semangat kepada penulis.

11. Semua pihak yang tidak dapat penulis disebutkan namanya satu persatu.

Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan skripsi

ini. Untuk itu, saran dan kritik yang bersifat membangun sangat diharapkan dari

para pembaca untuk menyempurnakan dan semoga skripsi ini dapat bermanfaat

bagi penulis dan pembaca.

Denpasar, 31 Mei 2021

Penulis
 ABSTRAK

KARAKTERISASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK

ETANOL 96% DAUN STROBERI (Fragaria x ananassa) DENGAN

METODE DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil)

Latar belakang : Stroberi merupakan tananaman yang berpotensi dengan

kandungan fitokimia yang tinggi seperti asam ellagik, katekin, kuarsetin,

kaempferol, dan antosianin. Antosianin dari stroberi adalah kandungan utama

senyawa polifenol dengan efek antioksidan yang tinggi. Tujuan : Untuk

mengetahui metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak etanol 96% daun

stroberi, mengetahui karakter daun stroberi, dan mengetahui aktivitas antioksidan

ekstrak etanol 96 % daun stroberi (Fragaria x ananassa). Metode : mengunakan

metode DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil). Hasil : hasil uji skrining fitokimia

menunjukan kandungan senyawa fitokimia daun stroberi positif mengandung

senyawa steroid, flavonoid, tannin dan fenol. Hasil uji aktivitas ekstrak etanol

96% daun stroberi menunjukan nilai IC50 = sebesar 27,7 ppm. Kesimpulan : hasil

dari penelitian ini menyimpulkan ekstrak mengandung senyawa fitokimia dan

memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dengan nilai IC50 = sebesar 27,7 ppm

kemampuan baik sebagai penangkap radikal bebas.

Kata kunci : Stroberi, Fragaria x ananassa , fitokimia, DPPH.

 ABSTRACT

CHARACTERIZATION AND ANTIOXIDANT ACTIVITY TEST OF

ETHANOL EXTRACT 96% STRAWBERRY LEAVES (Fragaria x

ananassa) USE DPPH METHOD (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil)

Background : Strawberries are a potential safe with high phytochemical content

such as ellagic acid, catechins, quarchine, kaempferol, and anthocyanins.

Anthocyanins from strawberries are the main content of polyphenol compounds

with high antioxidant effects. Purpose : To know the secondary metabolites

contained in ethanol extract 96% strawberry leaves, know the character of

strawberry leaves, and know the antioxidant activity of ethanol extract 96%

strawberry leaves (Fragaria x ananassa). Method : using DPPH method (2,2-

diphenyl-1-picrylhydrazil). Results : phytochemical screening test results showed

the phytochemical compounds of strawberry leaves positively contained steroid

compounds, flavonoids, tannins and phenols. The test result of ethanol extract

activity of 96% strawberry leaves showed ic50 = value of 27.7 ppm. Conclusion :

the results of this study concluded the extract contains phytochemical compounds

and has a strong antioxidant activity with a value of IC50 = of 27.7 ppm good

ability as a free radical catcher.

Keywords : Strawberry, Fragaria x ananassa, phytochemical, DPPH.

 DAFTAR ISI

SKRIPSI
i
PERSYARATAN GELAR...........................................................................ii
LEMBAR PENGESAHAN.........................................................................iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI..........................................................vi
UCAPAN TERIMAKASIH.......................................................................vii
ABSTRAK...................................................................................................vii
ABSTRACT................................................................................................vii
DAFTAR ISI...............................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR..................................................................................vii
DAFTAR TABEL......................................................................................viii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH..................................................ix
DAFTAR LAMPIRAN...............................................................................ix
BAB I PENDAHULUAN.............................................................................1
1.1 Latar Belakang.....................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah................................................................................4
1.3 Tujuan Penelitian.................................................................................4
1.4 Manfaat Penelitian...............................................................................5
BAB II KAJIAN PUSTAKA.......................................................................6
2.1 Stroberi.................................................................................................6
2.1.1 Klasifikasi Tumbuhan...................................................................6
2.1.2 Uraian Tumbuhan..........................................................................7
2.1.3 Manfaat Tumbuhan.......................................................................9
2.1.4 Kandungan Zat Gizi Stroberi.......................................................10
2.1.5 Senyawa Fitokimia......................................................................10
2.1.6 Skrining Fitokimia.......................................................................14
2.2 Simplisia............................................................................................21
2.3 Ekstraksi.............................................................................................21
2.3.1 Definisi Ekstraksi........................................................................21
2.3.2 Metode Ekstraksi.........................................................................22
 2.3.3 Parameter Ekstraksi.....................................................................25
2.4 Radikal Bebas....................................................................................26
2.5 Karakterisasi Simplisia......................................................................27
2.6 Antioksidan........................................................................................28
2.6.1 Jenis – Jenis Antioksidan.............................................................29
2.6.2 Mekanisme Antioksidan..............................................................31
2.7 Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH........................... 31
2.8 Spektrofotometer UV-VIS.................................................................33
BAB III KERANGKA BERFIKIR, KONSEP, DAN HIPOTESIS ......35
3.1 Kerangka Berfikir..............................................................................35
3.2 Kerangka Konsep...............................................................................37
3.3 Hipotesis............................................................................................38
BAB IV METODE PENELITIAN ..........................................................39
4.1 Rancangan Penelitian.........................................................................39
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian.............................................................39
4.2.1 Lokasi Penelitian..........................................................................39
4.2.2Waktu Penelitian...........................................................................39
4.3 Ruang Lingkup Penelitian.................................................................40
4.4 Variabel Penelitian.............................................................................40
4.4.1 Variabel Bebas.............................................................................40
4.4.2 Variabel Terikat ..........................................................................40
4.4.3 Definisi Oprasional .....................................................................40
4.5 Alat Dan Bahan Penelitian.................................................................41
4.5.1 Alat Penelitian..............................................................................41
4.5.2 Bahan Penelitian...........................................................................42
4.6 Prosedur Penelitian............................................................................42
4.6.1 Persiapan Sampel..........................................................................42
4.6.2Pembuatan Ekstrak Daun Stoberi..................................................42
4.6.3 Evaluasi Ekstrak...........................................................................43
4.7 Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan metode DPPH...................45
4.7.1 Pembuatan larutan sampel induk..................................................45
 4.7.2 Pembuatan larutan sampel uji.......................................................45
4.7.3 Pembuatan larutan baku kerja DPPH 40 ppm..............................46
4.7.4 Penentuan panjang gelombang maksimum larutan baku DPPH. .46
4.7.5 Pengukuran aktivitas peredaman radikal bebas DPPH................46
4.7.6 Penentuan IC50 dan Potensi Antioksidan......................................46
4.8 Analisis Data......................................................................................48
BAB V HASIL PENELITIAN .....................................................................
5.1 Hasil Determinasi Tanaman...................................................................
5.2 Hasil Evaluasi Ekstrak...........................................................................
5.2.1 Pemeriksaan Organoleptis................................................................
5.2.2 Pemeriksaan Kadar Abu...................................................................
5.2.3 Pemeriksaan Kadar Air.....................................................................
5.2.4 Pemeriksaan Persentase Rendemen..................................................
5.3 Hasil Skiring Fitokimia..........................................................................
5.4 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan.............................................................
BAB VI PEMBAHASAN ..............................................................................
6.1 Penyiapan Bahan....................................................................................
6.2 Ekstraksi Daun Stroberi.........................................................................
6.3 Standarisasi Simplisia Dan Ekstrak.......................................................
6.3.1 Uji Parameter Spesifik......................................................................
6.3.2 Uji Parameter Non Spesifik..............................................................
6.4 Hasil Skrining Fitokimia........................................................................
6.5 Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol....................................................
6.5.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksium DPPH...................
6.5.2 Pengukuran Potensi Antioksidan Pada Ekstrak Etanol 96%............
6.6 Keterbatasan Penelitian..........................................................................
BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ...........................................................
7.1 Simpulan................................................................................................
7.1 Saran......................................................................................................
DAFTAR RUJUKAN ....................................................................................
LAMPIRAN ...................................................................................................
 DAFTAR GAMBAR
2.1 Daun Stroberi ...............................................................................5
2.2 Struktur Antosianin...............................................................................11
2.3 Struktur Katekin....................................................................................12
2.4 Struktur Vitamin C................................................................................13
2.5 Struktur Flavonoid.................................................................................14
2.6 Struktur Kimia Monoterpen..................................................................16
2.7 Struktur Steroid.....................................................................................17
2.8 Struktur Tanin........................................................................................18
2.9 Struktur Triterpenoid.............................................................................19
2.10 Mekanisme Penghambatan Radikal DPPH.........................................39
3.2 Kerangka Konsep..................................................................................42
 DAFTAR TABEL

2.1. Kandungan Zat Gizi Daun Stroberi ...........................................................5

2.2 Radikal Bebas ...........................................................................................27
2.3 Pengukuran nilai IC50 dengan metode DPPH............................................53
 DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH

C : Celcius

Ca : Calsium

C2H5OH : Etanol

CI2 : Gas klor

Cm : Centi meter

Cp : Canadian Press

Cu : Cuprum

Cy : Cyanidin

Dirjen POM : Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan

DNA : Deoxyribo Nucleic Acid

DPPH : Difenil pikrilhidrazil

F. chiloensis : Fragaria chiloensis

F. virgiana : Fragaria virgiana

g : Gram

HCI : Hidrogen klorida

HNO2 : Asam Nitrit

HOCI : Hipoklorit

Kkal : Kilokalori

kPa : Kilopascal

LDL : Low Density Lipoprotein

µg : Mikrogram
Mg/Kg : Miligram per Kilogram

Nm : Nanometer

N2O4 : Dinitrogen tetraoksida

OH : Hidroksida

Pg : Pelargonidin

pH : Power of Hydrogen

Pka : Prekallikrein activator

RI : Republik Indonesia

ROOR : Peroksida

UV Vis : Ultraviolet Visible

 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1....................................................................................................51
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Radikal bebas adalah atom atau molekul yang tidak stabil dan sangat

reaktif karena mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital

terluarnya. Untuk mencapai kestabilan atom atau molekul, radikal bebas akan

bereaksi dengan molekul di sekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron.

Reaksi ini akan berlangsung terus–menerus dalam tubuh dan bila tidak dihentikan

akan menimbulkan berbagai penyakit seperti kanker, jantung, katarak, penuaan

dini, serta penyakit degeneratif lainnya. Oleh karena itu, tubuh memerlukan suatu

substansi penting yaitu antioksidan yang mampu menangkap radikal bebas

tersebut sehingga tidak dapat menginduksi suatu penyakit (Ferdiansyah et al.,

2016). Aktivitas penangkapan radikal bebas dievaluasi menggunakan sistem

pendeteksian radikal bebas 2,2–difenil –1pikrilhidrazil (DPPH). DPPH digunakan

secara luas untuk menguji kemampuan suatu senyawa sebagai penangkap radikal

bebas atau donor hidrogen, atau untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan dari

makanan. DPPH memberikan absorbsi maksimum pada panjang gelombang 516

nm dan menghasilkan warna ungu (Agustina et al., 2017)

Antioksidan adalah zat yang dapat menunda, memperlambat, dan

mencegah terjadinya proses oksidasi serta menetralisir radikal bebas. Antioksidan

menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki

radikal bebas yang dapat menimbulkan stress oksidatif (oxidative stress).

 Stress oksidatif adalah ketidakseimbangan antara radikal bebas

(peroksidan) dan antioksidan yang dipicu oleh dua kondisi umum, yaitu

kurangnya antioksidan dan kelebihan pereduksi radikal bebas (Umar, 2014).

Antioksidan berfungsi mengatasi atau menetralisir radikal bebas sehingga

diharapkan dengan pemakaian produk yang mengandung antioksidan dapat

menghambat dan mencegah terjadinya kerusakan tubuh dari timbulnya penyakit

degeneratif. Bila ketersediaan antioksidan dalam tubuh tidak memadai, maka daya

tahan tubuh akan menurun dan proses penuaan dini akan terjadi. Oleh sebab itu,

ketersediaan antioksidan dalam tubuh harus dipertahankan dan ditingkatkan untuk

dapat menangkal radikal bebas (Utama, 2017).

Pada saat ini, stroberi adalah tanaman yang banyak dibudidayakan di

Indonesia. Stroberi merupakan buah yang berpotensi dengan kandungan fitokimia

yang tinggi (Lin dan Wang, 2011), seperti asam ellagik, katekin, kuarsetin,

kaempferol, dan antosianin (pelargonidin dan sianidin) (Manach et al., 2012).

(Swarcova et al., 2014), tanaman stroberi berperan sebagai perlindungan terhadap

sel kanker, pencegahan penyakit jantung iskemik, antitumorgenik, anti–inflamsi,

anti alergi, antimutagenik, antimikroba, dapat menghaluskan kulit, membuat

warna kulit terlihat lebih cerah dan bersih, terutama antosianin. (Anggraini Deni

et al., 2017). Antosianin dari stroberi adalah kandungan utama senyawa polifenol

dengan efek antioksidan yang tinggi (Musilova et al., 2013). Menurut (Giampieri

et al., 2012), ekstrak stroberi sebanyak 0,5 mg/ml atau sebanyak 0,5 % (w/v)

memiliki efek fotoprotektif yang dapat melindungi kulit dari kerusakan yang
disebabkan oleh radiasi UV – A yang dapat menginduksi timbulnya radikal bebas

(Anggraini Deni et al., 2017)

Karakterisasi simplisia meliputi penetapan kadar air, kadar abu total,

kadar abu tidak larut asam, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol dan susut

pengeringan, dilakukan dengan tujuan untuk menjamin keseragaman mutu

simplisia agar memenuhi persyaratan standar simplisia dan ekstrak. Beberapa

faktor yang dapat mempengaruhi pemeriksaan karakteristik simplisia, diantaranya

adalah bahan baku simplisia, cara pembuatan dan penyimpanan simplisia. Selain

itu pemeriksaan ini juga menentukan jumlah cemaran dan pengotor yang

terkandung dalam simplisia (Ditjen POM, 2014).

Berdasarkan jurnal yang berjudul “Antioxidant Capacity And

Antioxidants Of Strawberry, Blackberry, And Raspberry Leaves”. Kapasitas

antioksidan infus daun stroberi (ditentukan dengan metode DPPH) lebih rendah

daripada anggur merah dan infus teh, tetapi sebanding dengan kapasitas

antioksidan dari anggur putih dan minuman buah (Buricova et al., 2011)

Berdasarkan hal tersebut, peneliti tertarik menggunakan daun stroberi

sebagai antioksidan terhadap radikal bebas dengan metode DPPH.

1.2 Rumusan Masalah

1. Metabolit sekunder apakah yang terdapat pada ekstrak etanol 96%

daun stroberi (Fragaria x ananassa) ?

2. Karakter apakah yang terdapat pada daun stroberi (Fragaria x

ananassa) ?

3. Apakah aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol 96% daun stroberi

(Fragaria x ananassa) ?

1.3 Tujuan penelitian

1. Untuk mengetahui metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak

etanol 96% daun stroberi (Fragaria x ananassa).

2. Untuk mengetahui karakter daun stroberi (Fragaria x

ananassa) ?

3. Untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak etanol 96 % daun

stroberi (Fragaria x ananassa).

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi terkait

kandungan metabolit sekunder yang terkandung pada daun stroberi dan

karakter,serta aktivitas antioksidan daun stroberi kepada masyarakat

maupun peneliti lain yang ingin mengembangkan penelitian ini.

1.4.2 Manfaat praktis

Hasil penelitian ini diharapkan dapat diimplementasikan dalam

pengobatan alternatif di Indonesia dan dapat memberikan data ilmiah yang

dapat mendukung penggunaan dan pengembangan daun stroberi sebagai

tanaman obat tradisional yang memiliki aktivitas antioksidan serta sebagai

alternatif pengganti obat modern yang ada dipasaran.

 BAB II

KAJIAN PUSTAKA

2.1 Stroberi ( Fragaria x ananassa )

Tinjauan mengenai tumbuhan ini meliputi klasifikasi, uraian

tumbuhan, manfaat serta kandungan kimia.

Gambar 2.1 Daun Stroberi

(sumber: balitjestro.litbang.pertanian.go.id/2015/07)

2.1.1 Klasifikasi Tumbuhan

Menurut (Inggrid, 2015), tanaman stroberi diklasifikasikan

sebagai berikut sebagai berikut :

 Kingdom : Plantae

 Divisi : Spermatophyta

 Sub Divisi : Angiospermae

 Kelas : Discotyledonae
  Sub Kelas : Rosidae

 Ordo : Rosales

 Famili : Rosaceae

 Genus : Fragaria

 Spesies : Fragaria x ananassa

2.1.2 Uraian Tumbuhan

Stroberi adalah tanaman dengan famili Rosaceae. Tanaman stroberi

umumnya tumbuh pada daerah dataran tinggi dengan suhu udara yang sejuk, di

Jawa Barat stroberi banyak dibudidayakan pada daerah Lembang dan Cianjur.

Tanaman stroberi merupakan tanaman herbal. Tanaman stroberi memiliki struktur

akar tanaman yang terdiri atas pangkal akar, batang akar, ujung akar, bulu akar

serta tudung akar. Tanaman stroberi berakar tunggang panjangnya dapat mencapai

100 cm, akan tetapi pada umumnya hanya menembus lapisan atas tanah sedalam

15 cm – 45 cm. Bunga stroberi tersusun sebagai bunga majemuk yang berukuran

panjang, terletak pada ujung tanaman. Batang tanaman stroberi beruas – ruas

pendek dan berbuku – buku, banyak mengandung air. Tanaman stroberi

merupakan salah satu tanaman buah – buahan yang mempunyai nilai ekonomi

tinggi. Daya pikatnya terletak pada warna buah yang merah mencolok dengan

bentuk yang mungil, menarik, serta rasa yang manis dan segar (Gunawan.,W,

2013).
 Tanaman stroberi mengandung banyak air dan serat, memiliki banyak

biji kecil pada bagian buahnya. Buah stroberi umumnya berbentuk kerucut hingga

bulat, buah yang muda berwarna hijau namun setelah tua berubah menjadi warna

merah atau kuning kemerah – merahan. Biji stroberi berukuran kecil dan terletak

diantara daging buah (Inggrid, 2015). Sifat dan ketahanan buah stroberi untuk

setiap varietas berbeda, sehingga perlakuan yang diberikan untuk setiap varietas

dapat berbeda. Kondisi ini mengakibatkan buah stroberi yang dipanen, baik waktu

maupun tingkat kesegaran dan kekerasan buah tidak sama. Kualitas stroberi

ditentukan oleh rasa, kemulusan kulit dan keutuhan akibat benturan atau hama

penyakit. (Inggrid, 2015).

Stroberi merupakan buah yang sangat berguna untuk kesehatan manusia

karena banyak mengandung banyak nutrisi dan senyawa bioaktif, diantaranya

adalah senyawa fenol vitamin C, flavonoid dan ellagic acid. Biji stroberi

mengandung 72% asam lemak tidak jenuh dan mikronutrien esensial sebesar 20 –

25 µg/100 g buah segar. Warna merah pada stroberi disebabkan adanya pigmen

alami yang kaya akan senyawa polifenol seperti antosianin, dari hasil penelitian

didapat kadar antosianin pada stroberi adalah 150 – 600 mg/kg buah segar

(Francesca Giampieri, et al., 2012). Antosianin dalam stroberi tidak hanya

memberikan warna merah yang menarik, tetapi juga berfungsi sebagai antioksidan

(Inggrid, 2015).

Stroberi yang dapat kita temukan di pasar swalayan adalah hibrida yang

dihasilkan dari persilangan F. Virgiana L. Var Duchesne asal Amerika Utara

dengan F. Chiloensis L. Var Duchesne asal Chili. Persilangan ini menghasilkan

hibrid yang merupakan stroberi modern (komersil) Fragaria x annanassa var

Duchesne (Recsanti, 2014). Rasa stroberi berasal dari kombinasi fruktosa, glukosa

dan sukrosa, asam organic (asam sitrat dan asam fenolik) serta tannin bercampur

dengan aroma senyawa yang terkandung di dalamnya (Recsanti, 2014).

2.1.3 Manfaat Tumbuhan

Stroberi merupakan sumber senyawa polifenol yang besar dengan

aktivitas antioksidan dapat memberikan perlindungan terhadap penyakit

kardiovascular (Recsanti, 2014). Senyawa fenolik stroberi terdiri atas senyawa

polimer (ellagitannin dan gallotannin), dan juga molekul – molekul monomer

seperti asam ellagic dan glikosid asam ellagic, antosianin, flavonols, cathecin dan

coumaroyl glycosides. Ellagitannin termasuk senyawa tannin yang dapat

dihidrolisis juga ditemukan dalam buah delima, raspberry merah dan hitam,

blackberry dan beberapa kacang – kacangan (Recsanti, 2014). Stroberi adalah

salah satu buah yang kaya akan pigmen warna. Warna merah pada stroberi

disebabkan oleh antosianin, pigmen warna yang juga memiliki aktivitas

antioksidan. Kandungan antioksidan, yang cukup tinggi dibandingkan buah –

buahan dan sayuran lain, menyebabkan stroberi dapat digunakan untuk

menanggulangi masalah penyakit akibat radikal bebas seperti kanker, stroke dan

proses penuaan. Di samping itu dapat mencegah terjadinya radang dan alergi.

Stroberi merupakan buah – buahan yang mengandung gula rendah sehingga cocok

untuk diet pengidap diabetes, melawan encok dan radang sendi. Karena

antioksidan yang tinggi, buah ini juga dapat digunakan untuk menghaluskan kulit

dan membuat cerah (Recsanti, 2014). Kandungan antioksidan lain yang terdapat
dalam buah stroberi adalah senyawa derivat fenol catechin, quercetin dan

kaemferol yang merupakan senyawa antioksidan aktif yang berperan dalam proses

inflamasi. Selain itu, stroberi juga mengandung asam ellagic yang bermanfaat

sebagai anti karsinogenik dan anti mutagenik (Johnston, 2015). Di dalam stroberi

juga terdapat sejumlah kandungan vitamin C yang cukup banyak dan mineral

lainnya yang juga bermanfaat bagi tubuh manusia (Recsanti, 2014).

2.1.4 Kandungan Zat Gizi Stroberi

Adapun kandungan zat gizi buah stroberi dapat dilihat dalam tabel
sebagai berikut:
Tabel 2.1 Kandungan Zat Gizi Buah Strawberry
Nutrisi Kandungan Satuan
Energi 37 Kkal
Protein 0,8 g
Lemak 0,5 g
Karbohidrat 8,0 g
Kalsium 28 mg
Fosfat 27 mg
Besi 0,8 mg
Vitamin A 60 SI
Vitamin B1 0,03 mg
Vitamin C 60 mg
Air 89,9 g
2.1.5 Senyawa Fitokimia

Senyawa yang terdapat dalam stroberi adalah golongan fenol, komponen

yang terbanyak adalah flavonoid (terutama antosianin, flavonol), tannin

(ellagitannin dan gallotannin), asam fenolat (asam hidroksibenzoat dan asam

hidroksisinamat) dan proanthocyanidin sebagai komponen minor(Francesca

Giampieri, et al., 2012; Kong JM, 2013).Golongan senyawa fenol banyak

ditemukan pada tanaman. Senyawa fenol yang mengandung lebih dari satu gugus
hidroksi pada cincin aromatik disebut polifenol. Senyawa ini dapat membentuk

eter, ester atau glikosida.(Inggrid, 2015).

a. Antosianin

Antosianin merupakan senyawa penting dalam stroberi, termasuk

golongan senyawa polifenol, kandungan antosianin pada stroberi sekitar 150 –

600 mg / kg buah segar. Antosianin merupakan pigmen pemberi warna merah

pada stroberi, antosianin pada stroberi merupakan derivat dari pelargonidin (Pg)

dan cyanidin (Cy) aglycone, jenis antosianin yang paling banyak terdapat dalam

buah adalah Pg 3 – glucoside (Pg 3-gluc), selain itu diketahui terdapat sekitar dua

puluh lima pigmen antosianin dalam berbagai varietas strawberry (Lopes da Silva,

2017). Berikut adalah struktur kimia dari antosianin :(Inggrid, 2015)

Warna pigmen antosianin sangat dipengaruhi oleh pΗ larutan, pada

kondisi asam bentuk pigmen antosianin adalah kation flavilium yang berwarna

merah ungu. Stabilitas antosianin dipengaruhi oleh pΗ, temperatur dan kehadiran

oksigen atau cahaya. Antosianin umumnya tidak stabil pada temperatur tinggi,

sehingga selama proses pengolahan atau penyimpanan dapat menyebabkan

perubahan warna atau penurunan aktivitas antioksidan (Inggrid, 2015).

Gambar 2.2. Struktur Antosianin

b. Ellagic Acid
 Ellagic acid merupakan senyawa fenolik alami, jenis tanaman yang

banyak mengandung ellagic acid di antaranya adalah stroberi dan apel. Pada

strawberry, senyawa tersebut terdapat pada bagian biji, daun, dan daging buah.

Kandungan dalam daun per berat kering pada umumnya adalah yang terbesar,

terutama pada varietas Tribute. Buah yang masih mentah mengandung ellagic

acid lebih tinggi daripada buah yang matang. Di samping itu, varietas stroberi

juga menentukan kandungan ellagic acid di dalam buah. Kandungan ellagic acid

dalam buah strawberry berkisar 0,43–4,64 mg per gram berat kering, salah satu

manfaatnya adalah untuk mencegah kanker (Inggrid, 2015).

Ellagic acid adalah persenyawaan fenolik alamiah yang ditemukan dalam

beberapa anggota Rosaceae, Fragaceae, Saxifragaceae, Cunominaceae, dan

Myrothamnaceae. Rumus molekul ellagic acid adalah C14H6O8 dengan rumus

bangun sebagai berikut : (Dr. Ir. Livy Winata Gunawan, 2013)

c. Kaempfenol, Quercetin dan Catechin

Stroberi juga mengandung komponen fenolik lain yang berfungsi sebagai

antioksidan, senyawa tersebut adalah kaempfenol, quercetin dan catechin (Inggrid,

2015).
 Gambar 2.3. Struktur Katekin

d. Vitamin C

Vitamin C atau L – asam askorbat merupakan antioksidan yang larut

dalam air. Secara alami bentuk vitamin C adalah isomer – L, isomer ini memiliki

aktivitas lebih besar dibandingkan dengan bentuk isomer – D (Recsanti, 2014).

Sebagai antioksidan , vitamin C bekerja dengan menjadi donor electron,

dengan cara memindahkan satu electron ke senyawa logam Cu. Selain itu, vitamin

C juga dapat menyumbangkan elektron ke dalam reaksi biokimia interseluler dan

ekstraseluler. Vitamin C dapat menghilangkan senyawa oksigen reaktif, mencegah

terjadinya LDL teroksidasi, mentransfer elektron ke dalam tokoferol teroksidasi

dan mengabsorbsi logam dalam saluran pencernaan (Recsanti, 2014).

Antioksidan vitamin C mampu bereaksi dengan radikal bebas, kemudian

mengubahnya menjadi radikal askorbil. Senyawa radikal ini akan segera berubah

menjadi askorbat dan dehidroaskorbat. Asam askorbat dapat bereaksi dengan

oksigen teraktivasi, seperti anion superoksida dan radikal hidroksil cs (Recsanti,

2014).

Gambar 2.4. Struktur Vitamin C

2.1.6 Skrinning Fitokimia

 a. Flavonoid

Flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak terdapat

pada tumbuh – tumbuhan. Kandungan senyawa flavonoid di dalam tumbuhan

sangat rendah, yaitu sekitar 0,25% dan secara umum terikat atau terkonjugasi

dengan senyawa gula membentuk glikosida (Robinson, 2011).Flavonoid

umumnya larut dalam air dan dapat diekstraksi dengan etanol 70%. Pada

penyarian lebih lanjut digunakan petroleum eter (PE), etanol 80%, dan pelarut

organik lain, flavonoid tetap berada dalam lapisan air (Prianingrum, 2016).

Efek flavonoid terhadap organisme sangat banyak macamnya sehingga

tumbuhan yang mengandung flavonoid dapat dipakai dalam pengobatan

(Robinson, 2011).Flavonoid menunjukkan aktivitasnya sebagai anti alergi, anti

inflamasi, anti mikrobial, dan anti kanker. Pada kenyataannya, flavonoid bekerja

sebagai anti oksidan kuat, melindungi dari serangan oksidatif dan radikal bebas.

Di antara senyawa flavonoid yang telah lama dikenal dan merupakan

suatu kelompok antioksidan yakni, kelompok polifenol memiliki kemampuan

sebagai scavenger superoksida, oksigen singlet, dan radikal peroksi lipid

(Sitompul, 2013). Flavonoid dapat bekerja sebagai inhibitor lipoksigenase.

Penghambatan lipoksigenase dapat menimbulkan pengaruh lebih luas karena

reaksi lipoksigenase merupakan langkah pertama pada jalur yang menuju ke

hormon eikosanoid seperti prostaglandin dan tromboksan (Prianingrum, 2016).

Karakteristik struktur flavonoid yang mampu memberikan efek

antioksidan antara lain karena adanya (1) gugus katekol (O –dihidroksi) pada
cincin B yang mempunyai sifat sebagai donor proton, (2) gugus piragalol

(trihidroksi ) pada cincin B, (3) gugus 4 – oxo pada cincin heterosiklik, (4) gugus

3 – OH pada cincin heterosiklik, serta (5) gugus 5 – OH dan 7 – OH yang

potensial pada keadaan tertentu (Prianingrum, 2016)

Gambar 2.5. Struktur Flavonoid

b. Monoterpen

Senyawa monoterpen yang terdiri dari 2 unit isopren memiliki 10 atom

karbon (C), meskipun ada beberapa yang kehilangan 1 – 2 atom C dalam proses

pembentukannya. Kedua bentuk senyawa ini, yaitu siklik dan asiklik, banyak

didapat secara alami. Banyak senyawa monoterpen telah berhasil diisolasi dari

tumbuhan dan sebagian besar merupakan komponen dalam minyak atsiri yang

memiliki nilai ekonomi yang cukup tinggi. Umumnya senyawa monoterpen tidak

berwarna, tidak larut dalam air, ikut dalam fraksi terdestilasi uap, dan memiliki

bau spesifik, serta beberapa di antaranya bersifat optik aktif. Untuk mendapatkan

secara murni, ada sedikit kesulitan karena terdapat dalam campuran yang

kompleks dan terjadinya isomerisasi ataupun penyusunan kembali

(rearrangement). Keberadaan senyawa monoterpen tersebar luas dalam

tumbuhan, tetapi tidak spesifik untuk satu jenis atau kelompok tumbuhan. Dengan

kata lain, tidak ada tumbuhan yang memiliki satu senyawa terpen, tetapi terkadang
kandungan utamanya berupa sekelompok senyawa terpen. Senyawa monoterpen

juga terdapat pada beberapa Briofita dan fungi. Beberapa senyawa monoterpen

asiklik dapat dilihat pada gambar, biasanya terdapat perbedaan pada posisi ikatan

rangkap dan gugus fungsi yang dikandungnya.

Proses siklisasi dapat terjadi dalam pembentukan monoterpen sehingga

membentuk suatu monoterpen siklik, seperti pada gambar di atas.Senyawa

monoterpen juga terdapat dalam bentuk bisiklik sebagai turunan dari senyawa

monoterpen siklik, seperti contoh pada gambar

Gambar 2.6. Struktur Kimia Monoterpen

c. Seskuiterpen
 Kelompok seskuiterpen (C- 15) termasuk kelompok yang ikut dalam

proses destilasi uap seperti monoterpen. Senyawa yang banyak dijumpai dalam

tumbuhan adalah farnesol yang merupakan senyawa seiskuiterpen alkohol asiklik.

Beberapa contoh senyawa dari seiskuiterpen adalah bisabolen yang

tersebar luas dalam tumbuhan, zingiberen (dalam Zingiber officinale), ar–

turmeron (dalam Curcuma longa), lanseol (dalam Santalum lanceolatum), dan

pereson (dalam Trixis pipitzahuac).

Senyawa seiskuiterpen dengan struktur yang tidak biasa, merupakan

suatu seiskuiterpen monosiklik, kemungkinan terbentuk dari penyusunan kembali

(rearragements) dan reaksi oksidasi dari isopren, contohnya zerumbon (dalam

Zingiber zerumber), humulen (dalam Humulus lupulus), elemol (dalam Canarium

luzonicum) dan nootkatin (dalam Cupressus macrocarpa).

Kelompok senyawa seiskuiterpen bisiklik dibedakan menjadi tipe

naftalen dan azulen berdasarkan struktur senyawa siklik yang terbentuk pada

proses dehidrogenasi, selain itu ada juga yang membentuk aromatik. Sebagai

contoh, seperti terlihat pada gambar di atas, yaitu α- kadinen (dalam Cedrus spp),

eudesmol (dalam Eucalyptus piperita), β- selinen (dalam Apium graveolens), dan

santonin (dalam Artemisia spp). Kelompok senyawa monoterpen dan

seiskuiterpen yang umumnya merupakan komponen minyak atsiri.

d. Steroid

Steroid merupakan lipid yang dikarakteristikkan mempunyai kerangka

karbon yang dihubungkan dengan empat cincin (Prianingrum, 2006)

 Gambar 2.7. Struktur Steroid

Sebagian besar senyawa steroid dan terpenoid adalah senyawa non polar

dan karena itu dapat dipisahkan dari komponen tumbuhan yang polar dengan

mengekstraksi menggunakan pelarut seperti benzena atau eter (Prianingrum,

2006).

Sterol merupakan senyawa steroid berbentuk alkohol dengan kerangka

karbon C27 - C29 dan mempunyai rantai cabang alifatik. Sterol yang terdapat

dalam tumbuhan digolongkan dalam fitosterol, misalnya, β – sitosterol (Harborne,

1984). Senggani juga memiliki komponen aktif steroid, misalnya β – sitosterol, α

–amyrin, dan sitosterol 3–O–β–D-glucopyranoside. Pada umumnya steroid dapat

bermanfaat untuk mengurangi inflamasi dan sebagai obat kontrasepsi oral

(Prianingrum, 2016).

e.Tanin

Tanin merupakan substrat kompleks yang biasanya terjadi sebagai

campuran polifenol yang sulit diseparasi karena tidak dapat dikristalkan. Tanin

terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh dalam angiospermae khususnya

jaringan kayu. Dalam industri, tanin merupakan senyawa yang berasal dari

tumbuhan yang mampu mengubah kulit hewan mentah menjadi kulit siap pakai.

Sedangkan dalam dunia kesehatan tanin bermanfaat sebagai astringen yang

mengakibatkan pengurangan bengkak (edema), radang, dan sekresi pada

gastrointestinal (Harborne, 2014).Tanin terhidrolisiskan dan glikosida dapat

diekstraksi dengan air panas atau campuran etanol – air (Prianingrum, 2016)

Gambar 2.8. Struktur Tanin

f. Saponin Dan Triterpenoid

Saponin adalah senyawa glikosida steroid, steroid alkaloid, atau triterpen

yang ditemukan dalam tumbuhan, khususnya pada kulit tumbuhan sebagai lapisan

pelindung. Saponin dipercaya bermanfaat untuk diet manusia dan pengontrol

kolesterol. Tetapi beberapa mempunyai sifat racun, misalnya, soapberry, jika

dimakan dan menyebabkan ruam pada kulit. Saponin jenis ini disebut sebagai

sapotoksin.Beberapa penelitian menunjukkan bahwa saponin mempunyai

spektrum yang lebar sebagai anti – jamur, anti – bakteri, menurunkan kadar

kolesterol darah, dan menghambat pembentikan sel kanker (Prianingrum, 2016).

Saponin adalah glikosida triterpena dan sterol dan telah terdeteksi dalam

lebih dari 90 suku tumbuhan. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan

bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya

membentuk busa dan menghemolisis sel darah. Pencarian saponin dalam

tumbuhan telah dipicu oleh kebutuhan akan sumber sapogenin yang mudah

diperoleh dan dapat diubah di laboratorium menjadi sterol hewan yang berkhasiat

penting (misalnya, kortison, estrogen, kontraseptik, dll) (Prianingrum, 2016)

Senyawa glikosida seperti saponin dan glikosida jantung tidak larut

dalam pelarut non polar. Senyawa ini paling cocok diekstraksi dari tumbuhan

memakai etanol atau metanol panas 70 – 95 % (Prianingrum, 2016)

Gambar 2.9. Struktur Triterpenoid

2.2 Simplisia

Dalam buku “ Materia Medika Indonesia “ ditetapkan definisi bahwa

simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum

mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa bahan

yang telah dikeringkan. (Kemenkes RI, 2020).

Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia hewani dan

simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa

tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan

adalah isi sel yang secara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan
cara tertentu dikeluarkan dari selnya atau senyawa nabati lainnya yang dengan

cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia

murni (Kemenkes RI, 2020).

2.3 Ekstraksi

2.3.1 Definisi Ekstraksi

Ekstraksi yaitu suatu proses pemisahan suatu substansi atau zat dari

campurannya dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Senyawa aktif yang

terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak

atsiri, alkaloid, flavonoid, dan lain – lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif

yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara

ekstraksi yang tepat (Kemenkes RI, 2020).

Efektifitas ekstraksi senyawa kimia dari tumbuhan bergantung pada

(Tiwari et al, 2011 ) :

1. Bahan – bahan tumbuhan yang diperoleh.

2. Keaslian dari tumbuhan yang digunakan.

3. Proses ekstraksi.

4. Ukuran partikel.

2.3.2 Metode Ekstraksi

 Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini anatara lain :

(Kemenkes RI, 2020)

Ekstraksi secara dingin

a. Maserasi

Prinsip maserasi adalah pengikatan/pelarutan zat aktif berdasarkan sifat

kelarutannya dalam suatu pelarut (like dissolved like),penyarian zat aktif yang

dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari yang

sesuai selama tiga hari pada temperatur kamar, terlindung dari cahaya, cairan

penyari akan masuk ke dalam sel melewati dinding sel. Isi sel akan larut karena

adanya perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di luar sel.

Larutan yang konsentrasinya tinggi akan terdesak keluar dan diganti oleh cairan

penyari dengan konsentrasi rendah ( proses difusi ). Peristiwa tersebut berulang

sampai terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam

sel. Selama proses maserasi dilakukan pengadukan dan penggantian cairan

penyari setiap hari. Endapan yang diperoleh dipisahkan dan filtratnya dipekatkan.

Maserasi merupakan cara penyarian sederhana yang dilakukan dengan cara

merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama beberapa hari pada

temperatur kamar dan terlindung dari cahaya.

Maserasi dapat dilakukan modifikasi misalnya:

1. Digesti

Digesti adalah cara maserasi dengan menggunakan pemanasan lemah, yaitu

pada suhu 40–50°C. Cara maserasi ini hanya dapat dilakukan untuk simplisia
yang zat aktifnya tahan terhadap pemanasan. Dengan pemanasan diperoleh

keuntungan antara lain:

a).Kekentalan pelarut berkurang, yang dapat mengakibatkan

berkurangnya lapisan-lapisan batas.

B).Daya melarutkan cairan penyari akan meningkat, sehingga pemanasan

tersebut mempunyai pengaruh yang sama dengan pengadukan.

c).Koefisien difusi berbanding lurus dengan suhu absolute dan

berbanding terbalik dengan kekentalan, sehingga kenaikan suhu akan

berpengaruhpada kecepatan difusi. Umumnya kelarutan zat aktif akan

meningkat bila suhu dinaikkan.

d).Jika cairan penyari mudah menguap pada suhu yang digunakan, maka

perlu dilengkapi dengan pendingin balik, sehingga cairan akan menguap

kembali ke dalam bejana.

2. Maserasi dengan Mesin Pengaduk

Penggunaan mesin pengaduk yang berputar terus-menerus, waktu proses

maserasi dapat dipersingkat menjadi 6 sampai 24 jam.

3. Remaserasi

Cairan penyari dibagi menjadi, Seluruh serbuk simplisia di maserasi dengan

cairan penyari pertama, sesudah diendapkan, tuangkan dan diperas, ampas

dimaserasi lagi dengan cairan penyari yang kedua.

4. Maserasi Melingkar
 Maserasi dapat diperbaiki dengan mengusahakan agar cairan penyari selalu

bergerak dan menyebar. Dengan cara ini penyari selalu mengalir kembali secara

berkesinambungan melalui sebuk simplisia dan melarutkan zat aktifnya.

5. Maserasi Melingkar Bertingkat

Pada maserasi melingkar, penyarian tidak dapat dilaksanakan secara

sempurna, karena pemindahan massa akan berhenti bila keseimbangan telah

terjadi masalah ini dapat diatasi dengan maserasi melingkar bertingkat (M.M.B),

yang akan didapatkan :

a) Serbuk simplisia mengalami proses penyarian beberapa kali, sesuai

dengan bejana penampung. Pada contoh di atas dilakukan 3 kali, jumlah

tersebut dapat diperbanyak sesuai dengan keperluan.

b) Serbuk simplisia sebelum dikeluarkan dari bejana penyari, dilakukan

penyarian dengan cairan penyari baru. Dengan ini diharapkan agar

memberikan hasil penyarian yang maksimal.

c) Hasil penyarian sebelum diuapkan digunakan dulu untuk menyari

serbuk simplisia yang baru, hingga memberikan sari dengan kepekatan

yang maksimal.

d) Penyarian yang dilakukan berulang-ulang akan mendapatkan hasil yang

lebih baik daripada yang dilakukan sekali dengan jumlah pelarut yang

sama.

b. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai

sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur

ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi

 antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan atau penampungan ekstrak)

sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1 – 5 kali dari bahan.

2.3.3 Parameter Ekstrak

Dalam memperoleh ekstrak yang baik harus diperhatikan parameter –

parameter sebagai berikut (Kemenkes RI, 2020):

1. Parameter Uji Non Spesifik Ekstrak

a. Bobot jenis

Parameter bobot jenis adalah massa persatuan volume yang diukur

pada suhu kamar tertentu (25OC) yang menggunakan alat khusus

piknometer. Tujuannya adalah memberikan batasan tentang besarnya

massa persatuan volume yang merupakan parameter khusus ekstrak cair

sampai ekstrak pekat (kental) yang masih dapat dituang. Memberikan

gambaran kandungan kimia terlarut.

b. Uji kadar air

Parameter kadar air adalah pengukuran kandungan air yang

berbeda didalam bahan, dilakukan dengan cara yang tepat diantara cara

titrasi, destilasi atau gravimetri, yang bertujuan untuk memberikan

batasan minimal atau rentan tentang besarnya kandungan air dalam

bahan.

c. Kadar abu

Parameter kadar abu adalah bahan dipanaskan pada temperatur

dimana senyawa organik dan turunannya terdekstruksi dan menguap.

 Sehingga unsur mineral dan anorganik, dengan tujuan memberikan

gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari

proses awal sampai terbentuknya ekstrak.

2.Parameter Spesifik

Organoleptik

Meliputi penggunaan panca indra untuk mendeskripsikan bentuk

(padat, serbuk, kering, kental, cair) warna (kuning, coklat, dan lain –

lain), bau (aromatik, tidak berbau, berbau), rasa (pahit, manis, kelat).

Dengan tujuan untuk pengenalan awal yang sederhana.

2.4 Radikal Bebas

Radikal bebas dapat didefinisikan sebagai spesies molekuler yang mampu

hidup bebas yang mengandung elektron tidak berpasangan dalam orbital

atom. Kehadiran elektron yang tidak berpasangan menghasilkan sifat umum

tertentu yang dimiliki oleh kebanyakan radikal. Banyak radikal tidak stabil dan

sangat reaktif. Radikal bebas dapat menyumbangkan elektron ke atau menerima

elektron dari molekul lain, oleh karena itu bersifat sebagai oksidan atau reduktor.

Radikal bebas yang mengandung oksigen paling penting dalam banyak penyakit

adalah radikal hidroksil, radikal anion superoksida, hidrogen peroksida,

hipoklorit, radikal oksida nitrat, dan radikal peroksinitrit. Radikal bebas adalah

spesies yang sangat reaktif, mampu di dalam nukleus, dan di dalam membran sel

yang merusak molekul yang relevan secara biologis seperti DNA, protein,

karbohidrat, dan lipid. Radikal bebas menyerang makromolekul penting yang

menyebabkan kerusakan sel dan gangguan homeostatis. Sasaran radikal bebas

mencakup semua jenis molekul di dalam tubuh, diantaranya lipid, asam nukleat,

dan protein adalah target utamanya (Lobo et al., 2010).

Radikal bebas berasal dari proses metabolisme esensial normal dalam tubuh

manusia atau dari sumber eksternal seperti paparan sinar-X, ozon, asap rokok,

polutan udara, dan bahan kimia industri. Pembentukan radikal bebas terjadi terus

menerus dalam sel sebagai konsekuensi dari reaksi enzimatik dan non

enzimatik. Reaksi enzimatik yang berfungsi sebagai sumber radikal bebas,

termasuk yang terlibat dalam rantai pernapasan, fagositosis, sintesis

prostaglandin, dan dalam sistem sitokrom P-450. (Lobo et al., 2010).

2.5 Karakterisasi Simplisia

Karakterisasi simplisia meliputi penetapan kadar air, kadar abu total, kadar

abu tidak larut asam, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol dan susut

pengeringan, dilakukan dengan tujuan untuk menjamin keseragaman mutu

simplisia agar memenuhi persyaratan standar simplisia dan ekstrak. Beberapa

faktor yang dapat mempengaruhi pemeriksaan karakteristik simplisia, diantaranya

adalah bahan baku simplisia, cara pembuatan dan penyimpanan simplisia. Selain

itu pemeriksaan ini juga menentukan jumlah cemaran dan pengotor yang

terkandung dalam simplisia (Ditjen POM, 2014).

a) Genetik (bibit)

b) Lingkungan (tempat tumbuh, iklim)

c) Rekayasa agronomi (fertilizer, perlakuan selama masa tumbuh)

d) Panen (waktu dan pasca panen)

 Besarnya variasi senyawa meliputi baik jenis ataupun kadarnya,

sehingga timbul jenis (spesies) lain yang disebut kultivar (Kemenkes RI,

2020). Proses pemanenan dan preparasi simplisia merupakan proses yang

dapat menentukan mutu simplisia dalam artian, yaitu komposisi senyawa

kandungan, kontaminasi dan stabilitas bahan (Kemenkes RI, 2020).

Karakterisasi suatu simplisia mempunyai pengertian bahwa

simplisia yang akan digunakan untuk obat sebagai bahan baku harus

memenuhi persyaratan yang tercantum dalam monografi terbitan resmi

Departemen Kesehatan (Materia Medika Indonesia). Sedangkan sebagai

produk yang langsung di konsumsi (serbuk jamu dsb) harus memenuhi

persyaratan produk sesuai dengan peraturan(Kemenkes RI, 2020).

2.6 Antioksidan

Antioksidan digunakan untuk menghambat autooksidasi. Fenol – fenol,

senyawa dengan satu gugus OH yang terikat pada karbon cincin aromatik,

merupakan antioksidan yang efektif, produk radikal bebas senyawa – senyawa ini

terstabilkan secara resonansi dan karena itu tidak reaktif dibandingkan dengan

kebanyakan radikal bebas lain. Vitamin E dan flavonoid adalah suatu antioksidan

alamiah yang dijumpai dalam minyak – minyak nabati (Umar, 2014).

Dalam pengertian kimia, antioksidan adalah senyawa – senyawa

pemberi elektron, tetapi dalam pengertian biologis lebih luas lagi, yaitu semua

senyawa yang dapat meredam dampak negatif oksidan, termasuk enzim – enzim

dan protein – protein pengikat logam (Umar, 2014).

 Adapun penentuan persen peredaman aktivitas antioksidan dapat

dihitung dengan rumus :(Umar, 2014)

% peredaman = x100%

2.6.1 Jenis – Jenis Antioksidan

Berdasarkan sumbernya, antioksidan digolongkan menjadi 3

kelompok, yaitu antioksidan primer, antioksidan sekunder, dan antioksidan

tersier (Umar, 2014).

a. Antioksidan primer

Antioksidan primer adalah antioksidan yang sifatnya sebagai

pemutus reaksi berantai (chain – breaking antioxidant) yang bisa bereaksi

dengan radikal – radikal lipid dan mengubahnya menjadi produk – produk

yang lebih stabil. (Kesuma Sayuti, et al., 2015).

Antioksidan primer disebut juga antioksidan enzimatis. Suatu

senyawa dikatakan sebagai antioksidan primer apabila dapat memberikan

atom hidrogen secara cepat kepada senyawa radikal, kemudian radikal

antioksidan yang terbentuk segera berubah menjadi senyawa yang lebih

stabil. Antioksidan primer meliputi enzim superoksida dismutase (SOD),

katalase dan glutation peroksidase. Sebagai antioksidan, enzim – enzim

tersebut menghambat pembentukan radikal bebas dengan cara memutuskan

reaksi berantai, kemudian mengubahnya menjadi lebih stabil. Misalnya

Transferin, Feritin, albumin (Umar, 2014).

b. Antioksidan sekunder

Antioksidan sekunder disebut juga antioksidan eksogenus atau non

– enzimatik. Antioksidan dalam kelompok ini juga disebut sistem

pertahanan preventif. Dalam sistem pertahanan ini terbentuknya senyawa

oksigen reaktif dihambat dengan cara pengkhelatan metal, atau dirusak

pembentukannya. Pengkhelatan metal terjadi dalam cairan ekstraseluler.

Antioksidan non – enzimatis dapat berupa komponen non – nutrisi dan

komponen nutrisi dari sayuran dan buah – buahan. Kerja sistem

antioksidan ini yaitu dengan cara memotong reaksi oksidasi berantai dari

radikal bebas atau dengan cara menangkapnya. Akibatnya, radikal bebas

tidak akan bereaksi dengan komponen seluler, misalnya Superoxide

Dismutase (SOD), Glutathion Peroxidase (GPx), vitamin C, vitamin E dan

β – Caroten (Umar, 2014).

c. Antioksidan tersier

Antioksidan tersier bekerja memperbaiki kerusakan biomolekul

yang disebabkan radikal bebas. Contoh antioksidan tersier adalah enzim –

enzim yang memperbaiki DNA dan metionin sulfida reduktase (Kesuma

Sayuti, et al., 2015).

Berdasarkan sumbernya antioksidan dibagi dalam dua kelompok,

yaitu antioksidan sintetik (antioksidan yang diperoleh dari hasil sintesa

reaksi kimia) dan antioksidan alami (antioksidan hasil ekstraksi bahan

alami).Beberapa contoh antioksidan sintetik yang diizinkan

penggunaannya secara luas diseluruh dunia untuk digunakan dalam

 makanan adalah Butylated Hidroxyanisol (BHA), Butylated

Hidroxytoluene (BHT), Tert – Butylated Hidroxyquinon (TBHQ) dan

tokoferol. Antioksidan tersebut merupakan antioksidan yang telah

diproduksi secara sintetis untuk tujuan komersial (Kesuma Sayuti, et al.,

2015).

2.6.2 Mekanisme Antioksidan

Antioksidan bertindak sebagai garis pertahanan kedua melawan pembentukan

radikal bebas di dalam tubuh. Antioksidan dapat bertindak sebagai molekul

perangkap berputar yang dapat menyumbangkan elektron ke radikal bebas yang

selanjutnya menjebak molekul yang berkeliaran di dalam sel untuk menyebabkan

kerusakan pada biomolekul. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa

antioksidan melawan radikal bebas menghambat kerusakan sel (Deepali, 2016).

2.7 Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH

DPPH (2,2 – difenil – 1 – pikrilhidrazil) merupakan radikal bebas yang

stabil pada suhu kamar dan sering diggunakan untuk menilai aktivitas antioksidan

berupa senyawa atau ekstrak bahan alam. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik

secara transfer elektron atau radikal hidrogen pada DPPH akan menetralkan

karakter radikal bebas dari DPPH (Rahmatika, 2017).

Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan

memberikan warna ungu. Pengurangan intesitas warna yang terjadi berhubungan

dengan jumlah elaktron DPPH yang menangkap atom hidrogen. Sehingga

pengurangan intensitas warna mengindikasikan peningkatan kemampuan

antioksidan untuk menangkap radikal bebas. Senyawa DPPH memberikan serapan

kuat pada panjang gelombang 517 nm dengan warna ungu (Rahmatika, 2017).

Gambar 2.10 Mekanisme Penghambatan Radikal DPPH

Parameter yang dipakai untuk menunjukkan aktivitas antioksidan adalah harga

konsentrasi efisien atau efficient concentration (EC50) atau inhibitory

concentration (IC50) yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan yang dapat

menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal atau konsentrasi suatu zat

antioksidan yang memberikan persen peredaman sebesar 50%. Zat yang

mempunyai antioksidan tinggi, akan mempunyai harga EC 50 atau IC50 yang

rendah. Suatu senyawa dikatakan memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat

jika nilai IC50 kurang dari 50 µL/mL, kuat jika nilai IC 50 antara 50 – 100 µL/mL,

sedang jika nilai IC50 antara 100 – 150 µL/mL, dan lemah jika nilai IC50 antara 151

– 200 µL/mL. Semakin kecil nilai IC50 semakin tinggi aktivitas antioksidan

(Rahmatika, 2017)

2.8 Spektrofotometer UV - Vis

Spektrofotometer terdiri atas spetrometer dan fotometer.

Spektrofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang

tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditranmisikan

atau yang diabsorpsi (Rahmatika, 2017).

Spektrofotometri UV – Vis merupakan salah satu teknik analisis

spektroskopi yang memakai sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet dekat (190

– 380) dan sinar tampak (380 – 780) dengan memakai instrumen

spektrofotometer. Spektrofotometri UV – Vis melibatkan energi elektronik yang

cukup besar pada molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometri UV – Vis

lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif ketimbang kualitatif (Rahmatika,

2017).

Prinsip kerja spektrofotometer berdasarkan hukum Lambert Beer,

menyatakan hubungan linearitas antara konsentrasi sampel dengan energi

absorbsi. Jika radiasi monokromatis melewati larutan mengandung zat yang

dapat menyerap, radiasi ini akan dipantulkan, diabsorbsi oleh zatnya, dan sisanya

ditransmisikan (Rahmatika, 2017).

Untuk mendapatkan hasil pengukuran yang optimum, setiap komponen dari

instrumen yang dipakai harus berfungsi dengan baik. Komponen – komponen

spektrofotometri UV – Vis meliputi sumber sinar, monokromator, dan sistem

optik (Rahmatika, 2017).

a. Sumber – Sumber Lampu

Lampu deuterium digunakan untuk daerah UV pada panjang gelombang

dari 190 – 350 nm, sementara lampu halogenkuarsa atau lampu tungsten

untuk daerah visible (pada panjang gelombang antara 350 – 900 nm).
b. Monokromator

Digunakan untuk mendispersikan sinar ke dalam komponen – komponen

panjang gelombangnya yang selanjutnya akan dipilih oleh celah (slit).

Monokromator berputar sedemikian rupa sehingga kisaran panjang

gelombang dilewatkan pada sampel sebagai scan instrumen melewati

spektrum.

c. Optik – Optik

Dapat didesain untuk memecah sumber sinar sehingga sumber sinar

melewati 2 kompartemen dan sebagaimana dalam spektrofotometer berkas

ganda (double beam), suatu larutan blanko dapat digunakan dalam satu

kompartemen untuk mengoreksi pembacaan atau spektrum sampel.

 BAB III

KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN DAN HIPOTESIS

3.1 Kerangka Berpikir

Pengobatan tradisional yang berasal dari tanaman merupakan manifestasi

dari partisipasi aktif masyarakat dalam menyelesaikan problematika kesehatan,

pemeliharan kesehatan, pencegahan dan pengobatan penyakit, penyakit kronis,

penyakit degeneratif, dan kanker. Obat tradisional telah diterima secara luas di

berbagai negara. Obat tradisional ditujukan agar diperoleh obat tradisional yang

bermutu tinggi, aman, memiliki khasiat nyata yang teruji secara ilmiah, dan

dimanfaatkan secara luas, baik untuk pengobatan sendiri oleh masyarakat maupun

digunakan dalam pelayanan kesehatan formal.

Stroberi merupakan sumber senyawa polifenol yang besar dengan

aktivitas antioksidan dapat memberikan perlindungan terhadap penyakit

kardiovascular. Senyawa yang terdapat dalam strawberry adalah golongan fenol,

komponen yang terbanyak adalah flavonoid (terutama antosianin, flavonol),

tannin (ellagitannin dan gallotannin), asam fenolat (asam hidroksibenzoat dan

asam hidroksisinamat)dan proanthocyanidin sebagai komponen minor. Flavonoid

merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak terdapat pada tumbuh –

tumbuhan. Kandungan senyawa flavonoid di dalam tumbuhan sangat rendah,

yaitu sekitar 0,25% dan secara umum terikat atau terkonjugasi dengan senyawa

gula membentuk glikosida Flavonoid umumnya larut dalam air dan dapat
diekstraksi dengan etanol 70%. Pada penyarian lebih lanjut digunakan petroleum

eter (PE), etanol 80%, dan pelarut organik lain, flavonoid tetap berada dalam

lapisan air.

Pembuatan ekstrak dari tanaman ini dilakukan dengan menggunakan

maserasi. Maserasi merupakan prosedur pemisahan dengan menggunakan pelarut

yang dilakukan pada suhu kamar dan disertai dengan pengocokan beberapa

kali.Ektraksi dilakukan menggunakan pelarut etanol 96% karena pelarut tersebut

merupakan pelarut universal yang dapat menyari senyawa polar, non polar, dan

semi polar.Sebelum melakukan uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun

Stroberi perlu dilakukan pengujian karakterisasi ekstrak. Karakterisasi merupakan

suatu proses pemenuhan persyaratan sebagai bahan baku untuk dapat digunakan

sesui dengan standar yang telah ditetapkan. Pada proses ini dilakukan pengukuran

parameter untuk mendapatkan mutu, keamanan dan kemanfaatan obat tradisional,

Setelah menjamin kualitas ekstrak kemudian dilanjutkan dengan pengujian

aktivitas antioksidan ekstrak 96% daun Stroberi (Fragaria x ananassa) untuk

mengetahui aktivitas antioksidan yang terdapat dalam daun Strawberry. Uji

aktivitas antioksidan dilakukan dengan mengunakan metode DPPH (2,2–difenil–

1–pikrilhidrazil) metode ini dipilih karena metode uji aktivitas antioksidan

terhadap radikal bebas ini ditemukan paling efektif dan lebih sensitif

dibandingkan dengan metode FRAP, dan FIC.

3.2 Kerangka konsep

Obat tradisional berasal dari tanaman obat

dengan berbagai kandungan metabolit
sekunder.

Daun Stroberi mengandung flavonoid, steroid,

triterpenoid, tanin, saponin dan memiliki
aktivitas antioksidan yang memiliki kemampuan
menangkap radikal bebas.

Pembuatan ekstrak etanol 96 % daun stroberi

E Evaluasi ekstrak etanol 96 % daun stroberi :

1. Pemeriksaan organoleptis
2. Uji kadar air
3. Uji bobot jenis
4. Uji kadar total golongan kandungan kimia.

Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH

Gambar 3.2. Kerangka Konsep

3.3 Hipotesis

Dari rumusan masalah dan tinjauan pustaka didapatkan hipotesis yaitu :

1. Terdapat metabolit sekunder yang teridentifikasi pada ekstrak daun stroberi

2. Ekstrak etanol daun strawberry memiliki karakter dan aktivitas

antioksidan.
 BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1 Rancangan Penelitian

Aktivitas antioksidan suatu ekstrak dapat diketahui dari nilai IC 50, semakin

tinggi nilai IC50 menunjukkan aktivitas antioksidan yang semakin kuat. Penelitian

ini adalah penelitian eksperimental.

4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

4.2.1 Lokasi Penelitian

Lokasi penelitian merupakan tempat atau lokasi suatu penelitian akan

dilakukan. Penelitian dilakukan di Laboratorium kimia Universitas Bali

Internasional.

4.2.2 Waktu Penelitian

Waktu penelitian adalah waktu suatu penelitian akan dilakukan. Penelitian

dilakukan pada bulan Februari 2021 sampai April 2021.

4.3 Ruang Lingkup Penelitian

Ruang lingkup penelitian ini termasuk farmasi bahan alam, khususnya

pada pembuatan ekstrak beserta ujinya.

4.4 Variabel Penelitian

4.4.1 Variabel Bebas

Variable bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi ekstrak etanol 96%

daun Stroberi.

4.4.2 Variabel Terikat

Variabel terikat dalam penelitian ini yaitu sifat karakter daun stroberi dan

aktivitas atioksidan.

1.Sifat karakter daun stroberi

1. Presentase organoleptis

2. Hasil Uji Kadar Air

3. Hasil Uji Bobot Jenis

4. Hasil uji total golongan kandungan kimia

2.Aktivitas atioksidan

1. IC50

4.4.3 Definisi Operasional

Definisi operasional merupakan penjelasan dari masing-masing variabel

yang digunakan dalam penelitian terhadap indikator yang membentuknya.Definisi

operasional penelitian ini adalah :

1. Metabolit sekunder adalah senyawa metabolit yang tidak esensial

bagi pertumbuhan organisme dan ditemukan dalam bentuk yang

unik atau berbeda-beda antara spesies yang satu dan lainnya.

Dalam tanaman strawberry metabolit yang terkandung yaitu

flavonoid, steroid, triterpenoid, tanin, saponin.

 2. Ekstrak etanol daun strawberry merupakan hasil dari metode

esktraksi secara maserasi serbuk simplisia daun strawberry dengan

menggunakan pelarut etanol 96%.

3. Karakterisasi simplisia meliputi, persentase rendeman, pemeriksaan

organoleptis, uji susut pengeringan, uji kadar air, uji bobot jenis, uji

kadar total golongan kandungan kimia dilakukan dengan tujuan

untuk menjamin keseragaman mutu simplisia agar memenuhi

persyaratan standar simplisia dan ekstrak.

4. Aktivitas antioksidan dari suatu ekstrak yang telah diuji akan

mendapat data berupa IC50.

4.5 Alat dan Bahan Penelitian

4.5.1 Alat Penelitian

Alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi timbangan analitik (Acic

AD- 2100H), beaker glass, cawan porselen, labu ukur, erlenmayer, gelas ukur,

tabung reaksi, pipet tetes, toples kaca, kertas saring, batang pengaduk, rotary

evaporator, spektrofotometer Uv-Vis, kuvet, pipet ukur, corong, blender

(miyako), mikro pipet, aluminium foil dan oven.

4.5.2 Bahan Penelitian

Ekstrak daun stroberi, etanol 96%, serbuk Mg, besi (III) klorida 1%, HCl

Pekat, HCl 0,1 N, pereaksi dragendroff, metanol dengan kualitas pro analisis,

aquadest, dan serbuk DPPH.

4.6 prosedur penelitian

4.6.1 Persiapan Sampel

Sampel yang akan digunakan pada penelitian ini adalah daun stroberi yang

akan diambil dari Puncak, Bedugul. Tabanan Bali Sampel daun stroberi

dikumpulkan sebanyak 8 kg. Sampel daun stroberi diambil pada sore hari. Lalu

diambil dan dipisahkan dari tangkai kemudian sampel dibersihkan dari sisa – sisa

kotoran (sortasi basah), dengan cara dicuci menggunakan air mengalir sampai

bersih. Setelah itu sampel dikeringkan pada oven dengan suhu 40°C . Pengeringan

bertujuan untuk menurunkan kadar air dalam bahan sehingga mikroorganisme

penyebab kerusakan bahan tidak tumbuh. tanaman dideterminasi di Lembaga Ilmu

Pengetahuan Indonesia (LIPI) Eka Karya Bedugul Bali.

4.6.2 Pembuatan Ekstrak Daun Stroberi

Simplisia daun stroberi yang telah menjadi serbuk, selanjutnya di ekstraksi

dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96% selama 5 hari.

Keuntungan cara maserasi ini adalah cara pengerjaan, peralatan yang digunakan

sederhana dan mudah dilakukan. Serbuk daun stroberi ditimbang masing-masing

sebanyak 300 gram. Selanjutnya dimaksukkan kedalam wadah kaca, kemudian

ditambahkan pelarut etanol 96% sebanyak 1500 mL dengan perbandingan 1:10

(w/v). Hasil maserasi disaring dengan kertas saring sampai diperoleh filtrat dan

residu. Perendaman dilakukan 1 kali remaserasi (750 mL). Filtrat yang didapatkan

kemudian dipekatkan menggunakan evaporator rotary pada suhu 40oC hingga

diperoleh ekstrak kental.

4.6.3 Evaluasi Ekstrak Daun Stroberi

Penapisan fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan metabolit

sekunder yang terdapat pada tanaman strawberry. Pengujian penapisan

fitokimia meliputi flavonoid, monoterpen, seiskuiterpen, steroid, triterpenoid,

kuinon, dan saponin (Farnsworth,2014).

a. Identifikasi Flavonoid

Mereaksikan 1 mL ekstrak herba sirih cina dengan serbuk Mg dan 1

mL HCl pekat. Adanya senyawa flavonoid ditandai adanya perubahan warna

merah flavonoid (Djamil dan Wijiastuti, 2015).

b. Identifikasi Alkaloid

Uji kualitatif senyawa alkaloid dilakukan dengan menggunakan

sebanyak 500 mg ekstrak ditambahkan dengan HCL pekat lalu ditambahkan

2 tetes pereaksi Dragendroff atau pereaksi Mayer. Jika terbentuk warna

orange dengan perekasi dragendroff atau terbentuk endapan putih dengan

penambahan pereaksi mayer berarti ekstrak mengandung alkaloid (Mandal

dan Ghasal,2012).

c. Identifikasi Fenol

Uji senyawa fenol dilakukan dengan menggunakan 1 mL ekstrak herba

sirih cina dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian dikocok dengan 2

mL metanol, lalu ditambahkan larutan FeCl3 1%. Adanya senyawa fenol

ditandai dengan terbentuknya warna ungu (Mandal dan Ghasal,2012).

d. Identifikasi Saponin
 Pengujian senyawa saponin dilakukan dengan menggunakan sebanyak

500mg ekstrak herba sirih cina dimasukkan ke dalam tabung reaksi,

ditambahkan 10 mL air panas, dinginkan dan kemudian kocok kuat selama

30 detik. Terbentuknya buih yang stabil selama ≤ dari 10 menit, setinggi 1

cm sampai 10 cm. Pada penambahan 1 tetes HCl pekat, buih tidak hilang

( Djamil dan Wijiastuti, 2015 ).

e. Identifikasi Tanin

Sebanyak 1 mL ekstrak herba sirih cina dimasukkan ke dalam tabung

reaksi. Kemudian ditambahkan 2 sampai 3 tetes larutan besi (III) klorida

1%, tanda positif tannin ditandai terbentuknya warna hijau biru atau hitam

(Djamil dan Wijiastuti, 2015).

Dalam memperoleh ekstraksi yang baik harus diperhatikan parameter

– parameter sebagai berikut (Kemenkes RI, 2020):

a. Organoleptis

Ekstrak dideskripsikan menggunakan panca indra untuk mengetahui

tekstur, bau dan rasa.

b. Uji kadar Air

Uji kadar air dilakukan dengan cara,timbang seksama kurang lebih 10

gram sampel, masukan kedalam wadah yang sudah ditara. Keringkan

pada suhu 105°C selama 5 jam, dan timbang. Lanjutkan pengeringan

dan timbang pada selang waktu 1 jam sampai perbedaan antara dua

penimbangan berturut-turut tidak lebih dari 0,25%.

c. Bobot Jenis
 Disiapkan alat dan bahan, selanjutnya ditimbang piknometer yang

kosong, ditimbang piknometer yang diisi sampel ektrak daun stroberi,

dan dihitung bobot jenis dari sampel ekstrak daun stroberi.

Perhitungan bobot jenis dapat dipeoleh dengan rumus :

Dt= ................................................................................................(1)

4.7 Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH

4.7.1 Pembuatan Larutan Sampel Induk

Ekstrak etanol 96% daun stroberi dibuat larutan sampel induk dengan

konsentrasi 1000 ppm, yaitu dengan cara menimbang 100 mg ekstrak kental

dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL, kemudian dilarutkan dengan metanol p.a

sampai volume 100 mL, kemudian dikocok sampai homogen (Kumara, 2020).

4.7.2 Pembuatan Larutan Sampel Uji

Dari 100 mL larutan sampel induk ekstrak etanol daun stroberi 1000 ppm,

dibuat larutan sampel uji dengan varian konsentrasi 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm,

yaitu dengan cara masing-masing dipipet 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 mL larutan

sampel induk, kemudian masukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan

metanol p.a pada tabung reaksi sampai tanda batas 10 mL sehingga didapat

konsentrasi yaitu 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm (Kumara, 2020).
4.7.3 Pembuatan Larutan Baku Kerja DPPH 40 ppm
Ditimbang 4 mg serbuk DPPH, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur

100 mL dan dilarutkan dengan metanol sampai tanda batas sehingga didapatkan

larutan baku kerja DPPH dengan konsentrasi 40 ppm (Kumara, 2020).

4.7.4 penentuan panjang gelombang maksimum larutan baku DPPH

Dipipet sebanyak 4 mL larutan baku induk DPPH 40 ppm, kemudian

dimasukkan ke dalam kuvet, diamati spektrum serapannya menggunakan

spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 400 – 800 nm dengan

menggunakan 4 mL etanol sebagai blanko (Kumara, 2020).

4.7.5 Pengukuran Aktivitas Peredaman Radikal Bebas DPPH dengan

Spektrofotometri UV-Vis
Larutan sampel uji pada masing-masing varian konsentrasi dipipet sebanyak 2

mL, kemudian dimasukan ke dalam tabung reaksi, ditambah larutan baku kerja

DPPH 40 ppm sebanyak 2 mL. Selanjutnya, dibuat larutan blanko dengan

memipet larutan baku kerja DPPH 40 ppm sebanyak 2 mL, dimasukkan ke dalam

tabung reaksi, kemudian ditambahkan 2 mL metanol p.a. Semua larutan sampel

uji dan blanko masing-masing dihomogenkan, didiamkan selama 30 menit pada

suhu kamar, di tempat yang terlindung dari cahaya, lalu diukur absorbansinya

dengan spektrofotometer UV-VIS. Pengukuran dilakukan sebanyak 3 kali

replikasi (Kumara, 2020).

4.7.6 Penentuan IC50 dan Potensi Antioksidan

Masing-masing tingkat konsentrasi yang akan diuji akan didapatkan

persentase peredaman. Kemudian hasil presentasi tersebut diplotkan dalam sebuah

grafik dan didapatkan sebuah kurva regresi linier, sehingga didapatkan suatu
persamaan y = bx + a dan akan diperoleh nilai IC50 dengan perhitungan secara

regresi linier, dimana x adalah konsentrasi (µg/mL) dan y adalah presentase

inhibisi (%). Nilai IC50 didapatkan dari nilai x setelah mengganti y = 50 (Kumara,

2020).

% Inhibisi = x 100%....................................(2)

Tabel 4.2 Pengukuran nilai IC50 dengan metode DPPH (Pratama dkk., 2015).

No Nilai IC50 Keterangan

1 (IC50 < 50 ppm) Sangat Kuat

2 (50 ppm < IC50 < 100 ppm) Kuat

3 (100 ppm <IC50 <150 Sedang

4 (150 ppm < IC50 <200 ppm) Lemah

5 (IC50 > 200 ppm) Sangat lemah

4.8 Analisis Data

Penelitian ini akan mendapatkan hasil data berupa metabolit sekunder,

karakter suatu ekstrak dan aktivitas antioksidan. Metabolit sekunder dan karakter

suatu ekstrak dianalisis secara dekskriptif. Sedangkan aktivitas antioksidan

dianalisis secara statistic menggunakan metode regresi linear sederhana.

Selanjutnya tahapan dalam melakukan analisis regresi linear sederhana sebagai

berikut :

a. Menentukan tujuan dalam melakukan analisis regresi linear

sederhana.

b. Mengidentifikasi variabel faktor penyebab dan variabel akibat.

c. Melakukan pengumpulan data.

d. Menghitung X², Y², XY dan total dari masing-masingnya

Nilai Y = Variabel Akibat (Dependent) dan niali X = Variabel

Faktor Penyebab (Independent)

e. Menghitung a dan b berdasarkan rumus

a =   (Σy) (Σx²) – (Σx) (Σxy)

             n(Σx²) – (Σx)²
 b =   n(Σxy) – (Σx) (Σy)
          n(Σx²) – (Σx)²

f. Membuat persamaan regresi linear sederhana

 BAB V

HASIL PENELITIAN

5.1 Hasil Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman stroberi dilakukan untuk memastikan apakah tanaman yang

digunakan memang benar merupakan tanaman yang diinginkan (Laksmiani et al,

2015). Determinasi dilakukan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia Eka Karya

Bedugul Bali.Hasil determinasi menunjukkan bahwa benar tanaman stroberi

tersebut sesuai dengan klasifikasi tanaman yang diinginkan. Hasil determinasi

dapat dilihat pada Tabel 5.1.

Tabel 5.1 Klasifikasi Tanaman

Kingdom Plantae (Tumbuhan)

Subkingdom Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Superdivisi Spermatophyta (Menghasilkan biji
Divisi Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas Magnolipsida (berkeping dua/dikotil)
Subkelas Rosidae
Ordo Rosales
Suku Rosaceae
Marga Fragaria
Jenis Fragaria x ananassa (Duschense ex Weston)
Duschense ex Rozier
5.2 Evaluasi Ekstrak Daun Stroberi (Fragaria x ananassa)

5.2.1. Pemeriksaan Organoleptis

Berdasarkan hasil evaluasi ekstrak etanol 96% daun stroberi (Fragaria x

ananassa) secara organoleptis menggunakan panca indera, diperoleh hasil sebagai
berikut :

Tabel 5.2.1 Hasil Pemeriksaan Organoleptis Ekstrak Etanol 96% Daun

Stroberi (Fragaria x ananassa)

Bentuk ekstrak Warna ekstrak Bau ekstrak Rasa

Kental Hijau tua Bau khas daun Pahit

(gelap) stroberi

5.2.2 Uji Kadar Abu

Kadar abu adalah sisa yang tertinggal bila suatu sampel bahan pangan dibakar

sempurna di dalam tungku pengabuan. Kadar abu menggambarkan banyaknya

mineral yang tidak terbakar menjadi zat yang mudah menguap (syarif, 2012).

Pada uji kadar abu yang telah dilakukan dan diperoleh hasil kadar abu ektrak

etanol 96 % daun stroberi pada 3 replikasi dapat dilihat pada tabel 5.2.2

Tabel 5.2.2 Tabel Hasil Uji Kadar Abu Ekstrak Daun stroberi
 No Kode Replikasi Kadar Abu (%)
1 A 2,9648

2 B 2,8505

3 C 2,9900

5.2.3 Uji Kadar Air

Penetepan kadar air bertujuan untuk mengetahui rentang besar kandungan air

dalam ekstrak daun strawberry. Semua hasil ekstrak telah memenuhi persyaratan

kadar air untuk ekstrak kental yaitu tidak boleh lebih dari 10% (Depker RI, 2008).

Tabel 5.2.3 Tabel Hasil Uji Kadar Air Ekstrak Daun stroberi

No Cawan Berat Berat Berat sampel Hasil

kosong sampel sampel + setelah
(gram) awal cawan pemanasan
(gram) A (gram) (gram) B
1 18,981 10 28,981 9,755 2,45%
2 19,706 10 29,706 9,638 3,62%
3 19,476 10 19,476 9,605 3,95%
Rata-rata 3,34%

5.2.4 Persentase Rendemen

Persentase rendemen dapat dilakukan dengan menimbang berat awal simplisia,

kemudian ekstrak simplisia ditimbang. Diperoleh hasil persentasi rendemen

sebagai berikut :

Table 5.2.4 Hasil persentase rendemen ekstrak daun stroberi

Bobot simplisia Bobot ekstrak kental Persentase rendemen

(g) (g) (%)

500 gram 70.23 gram 14.046%

5.3 Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Stroberi

Berdasarkan pengujian skrining fitokimia ekstrak etanol 96% daun stroberi yang

dilakukan untuk mengetahui adanya kandungan senyawa flavonoid, tannin,

steroid, fenolik yang mempunyai fungsi sebagai antioksidan, adapun hasilnya

sebagai berikut :

Tabel 5.3 Hasil Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Stroberi

Parameter Pereaksi Sampel Ekstrak Etanol Hasil

Daun Stroberi

Steroid Libermen + Warna hijau tua

Flavonoid NaOH 10% Warna merah
+
kecoklatan
Saponin Air Panas Tidak terbentuk

dikocok + HCL - busa

0,1 N
Fenolik FeCL 3 Jenuh + Warna hujau tua
Tannin FeCL3 Warna hitam
+
Dipanaskan
Alkaloid Pereaksi Mayer Tidak ada
-
endapan putih
Keterangan : + : Mengandung senyawa kimia

- : Tidak mengandung senyawa kimia

5.4 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH

Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak etanol 96% daun stroberi pada penelitian

ini menggunakan metode DPPH. Metode DPPH merupakan metode yang

sederhana mudah, cepat, dan peka serta hanya memerlukan sedikit sampel untuk

pengujian aktivitas antioksidan dari senyawa bahan alam (Molyneux, 2004). Pada

penentuan panjang gelombang maksimum larutan baku DPPH dengan konsentrasi

40 ppm didapatkan panjang gelombang maksimum sebesar 516 nm pada

Spektofotometri UV-Vis didapat absorbansi DPPH sebesar 0,564. Uji aktivitas

antioksidan pada metode DPPH berdasarkan hilangnya warna ungu akibat

tereduksinya DPPH oleh senyawa antioksidan. Panjang gelombang pada

penelitian ini sesuai dengan jangkauan panjang gelombang maksimum untuk

pengukuran dengan metode DPPH yaitu 515 nm sampai dengan 520 nm dan

dilakukan sebanyak 3 kali replikasi (Molyneux, 2004). Hasil pengujian dapat

dilihat pada Tabel 5.12 – 5.14.

Tabel 5.4 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Stroberi

Konsentrasi Absorbansi Rata-Rata ± SD

R1 R2 R3
5 ppm 0,359 0,364 0,376 0,366 ± 0,00873
10 ppm 0,317 0,325 0,316 0,319 ± 0,00493
15 ppm 0,273 0,283 0,279 0,278 ± 0,00503
20 ppm 0,217 0,221 0,224 0,221 ± 0,00351
 25 ppm 0,185 0,187 0,190 0,187 ± 0,00251

Hasil perhitungan persentase inhibisi ekstrak etanol 96% daun stroberi pada dapat

dilihat pada Lampiran. Berdasarkan hasil perhitungan persentase peredaman

DPPH, dapat disimpulkan bahwa persentase peredaman DPPH meningkat seiring

meningkatnya konsentrasi ekstrak etanol 96% daun stroberi. Hal ini menunjukkan

bahwa ekstrak etanol 96% daun stroberi memiliki aktivitas antiradikal bebas.

Maka dari itu dibuatkan kurva regresi linier untuk mendapatkan nilai IC50 yang

dapat dilihat pada Gambar 5.4

Gambar 5.4 Kurva Regresi Linier

 BAB VI

PEMBAHASAN
Sampel tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah daun stroberi

(Fragaria x ananassa) yang dikumpulkan dari desa Angseri, Kecamatan Baturiti,

Kabupaten Tabanan, Bali. Pengambilan daun stroberi dilakukan di satu tempat

bertujuan agar tidak adanya variasi tingkat kandungan senyawa dalam tumbuhan

yang disebabkan karena perbedaan kondisi lingkungan (Omokhua, 2015). Tujuan

dalam penelitian ini untuk mengetahui karakter dan aktivitas antioksidan ekstrak

etanol 96 % daun stroberi. Hal pertama yang dilakukan adalah proses determinasi

tanaman yang bertujuan memastikan kebenaran tanaman yang digunakan pada

penelitian dan menghindari kesalahan dalam pengambilan sampel tanaman.

Kemudian dilanjutkan dengan proses pembuatan simplisia, ekstraksi sampel, uji

paramater spesifik dan non spesifik, identifikasi golongan senyawa metabolit

sekunder dan pengujian aktivitas antioksidan daun stroberi.

6.1. Penyiapan Bahan

Sampel tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah bagian daun tanaman

stroberi yang diperoleh dari desa Angseri, Kecamatan Baturiti, Kabupaten

Tabanan, Bali. Pemilihan tumbuhan daun stroberi (Fragaria x ananassa) karena

memiliki sejumlah manfaat terhadap beberapa penyakit dan memiliki kandungan

sebagai antioksidan alami (Majumder et al., 2011). Daun stroberi dipilih bagian

daun yang masih segar. Kemudian selanjutnya dilakukan proses pencucian untuk

menghilangkan kotoran atau benda asing lainnya seperti tanah, kerikil, rumput

atau gulma, batang, daun, akar yang telah rusak dengan air mengalir. Setelah itu

dilakukan penirisan guna mencegah pembusukan serta mengurangi atau

menghilangkan kandungan air di permukaan tanaman (Ningsing, 2016). Setelah

dilakukan penirisan, kemudian dilakukan perajangan dengan menggunakan pisau

berbahan stainless steel. Penggunaan pisau berbahan stainless steel bertujuan agar

tidak merusak kandungan-kandungan kimia yang terkandung pada tanaman

(Pertanian, 2011). Selanjutnya dilakukan proses pengeringan, untuk mengurangi

kadar air, dengan berkurangnya kadar air pada tanaman maka tidak adanya

enzimatis yang dapat menyebabkan penjamuran (Pertanian, 2011). Proses

pengeringan dilakukan dengan menggunakan oven pada suhu 40oC. Apabila

simplisia dapat dihancurkan atau diremah maka proses pengeringan dinyatakan

telah selesai. Setelah proses pengeringan simplisiadaun stroberi dihaluskan

menggunakan blender dan diayak dengan ayakan 60 mesh.

6.2. Ekstraksi Daun Stroberi

Simplisia ekstrak daun stroberi dihaluskan menjadi partikel- partikel kecil dengan

bantuan blender. Hal ini bertujuan untuk memperluas bidang kontak antara bahan

dengan pelarut sampai pada batas senyawa yang diekstrak habis dalam

bahan(Ramadhan dan Phasa, 2010). Hal ini didukung oleh penelitian yang

dilakukan oleh Sembiring et al (2008) tentang pengaruh kehalusan bahan dan

lama ekstraksi terhadap mutu ekstrak temulawak yang menunjukkan bahwa

semakin halus bahan yang digunakan semakin tinggi rendemen yang diperoleh.

Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode maserasi.

Metode maserasi merupakan metode yang sederhana dan paling banyak

digunakan. Metode ini dilakukan dengan merendam serbuk simplisia dengan

pelarut yang sesuai kedalam wadah yang tertutup rapat pada suhu kamar. Proses
ekstraksi simplisia daun stroberi pada masing-masing sampel ditimbang sebanyak

500 gram, ditambahkan pelarut etanol 96% sebanyak 3.750 mL dengan rasio

bahan:pelarut 1:5 (b/v). Pemilihan rasio ekstraksi tersebut merupakan rasio

bahan:pelarut dengan perlakuan terbaik berdasarkan penelitian yang dilakukan

oleh (Setyowati dan Suryani, 2013), dimana pada penelitiannya menunjukkan

bahwa minuman instan yang tinggi aktivitas antioksidannya adalah minuman

instan temulawak dan kunyit pada rasio bubuk dengan etanol 1:5 (b/v)

mempunyai aktivitas antioksidan sebagai persentase Radical Scavenging Activity

(%RSA) 80,11% dan 78,00%. Serbuk simplisia dimasukan ke dalam toples kaca

dan ditambahkan etanol 96% sebanyak 2.500 mL dan didiamkan selama 3x24 jam

(setiap 24 jam dilakukan pengadukan), kemudian disaring hingga didapatkan

filtrat I. Kemudian ditambahkan pelarut etanol 96% kembali sebanyak 1.250 mL

dan diamkan selama 3x24 jam, kemudian disaring hingga didapatkan filtrat II.

Filtrat I dan II digabung pada satu wadah. Rendemen adalah perbandingan antara

berat bahan kering yang dihasilkan dari ekstrak dengan berat bahan segar,

menggunakan satuan persen (%). Rendemen diperoleh dari perbandingan antara

berat hasil ekstraksi yang dihasilkan dengan berat bahan simplisia awal

(Kemenkes RI, 2011). Berdasarkan tabel 5.2.4 diperoleh persentase rendemen

ekstrak daun stroberi sebesar 14.046%, yang dilakukan perhitungan dengan rumus

sebagai berikut : (Kemenkes RI, 2011)

% Rendemen =
6.3 Standarisasi Simplisia Dan Ekstrak
Standarisasi simplisia dan ekstrak dilakukan dengan tujuan agar mendapatkan

simplisia dan ekstrak yang stabilitasnya teruji dan aman sehingga sediaan yang

dihasilkan merupakan sediaan terjamin mutunya (Depkes RI, 2000).Pada

penelitian ini dilakukan standarisasi spesifik dan non spesifik pada daun stroberi.

Standarisasi spesifik yang dilakukan adalah organoleptik dan standarisasi non

spesifik yang dilakukan adalah kadar abu.

6.3.1 Uji Parameter Spesifik

Uji organoleptis merupakan pengujian yang bertujuan untuk mengetahui bau,

warna dan bentuk dari simplisia maupun ekstrak yang didasarkan pada proses

pengindraan (BSN, 2006). Pada penelitian ini, ektrak daun stroberi mempunyai

bentuk, warna dan bau yang serupa. Mempunyai bentuk ekstrak kental, warna

hijau tua, berbau khas seperti daun stroberi.

6.3.2 Uji Parameter Non Spesifik

Penentuan kadar abu adalah metode yang digunakan untuk mengetahui

kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai

terbentuknya ekstrak (Depkes RI, 2008). Persyaratan untuk kadar abu yang

terkandung dalam suatu ekstrak adalah tidak lebih dari 16,6%, karena besarnya

kadar abu yang terdapat dalam suatu ekstrak juga menunjukan banyaknya

pengotor yang terkandung didalamnya (Pasaribu, 2012). Pada tahap ini senyawa

dipanaskan hinga senyawa organic dan turunannya terdestruksi dang menguap

sehingga tersisa unsur mineral dan anorganiknya saja. Hasil yang diproleh dari

kadar abu ektrak etanol 96% daun stroberi yaitu 0,0743. Dari hasil yang diperoleh

bahwa uji kadar abu pada penelitian ini sudah memenuhi standar mutu yang

ditetapkan. Sehingga dapat disimpulkan ektrak etanol 96% daun stroberi baik dan

bagus karena tidak terdapat pengotor yang terkandung didalamnya (Pasaribu,

2012).

6.4 Hasil Skrining Fitokimia

Berdasarkan penelitian yang dilakukan diperoleh hasil skrining fitokimia dari

ekstrak daun stroberi memiliki hasil positif pada senyawa metabolit steroid, tanin,

flavonoid, dan memiliki hasil negative pada senyawa metabolit alkaloid dan

saponin. Pada uji flavonoid dilakukan dengan penambahan pereaksi Mg dan HCl

pada ekstrak yang akan diuji, setelah penambahan pereaksi tersebut terjadi

perubahan warna menjadi coklat, yang menandakan bahwa ekstrak daun stroberi

positif mengandung senyawa flavonoid. Uji steroid pada ekstrak daun stroberi

dilakukan dengan menggunakan pereaksi Lieberman-Buchard yang dilakukan

penambahan asam asetat anhidrat yang memiliki tujuan untuk membentuk turunan

asetil (Pardede dkk., 2013). Pada hasil skrining yang diperoleh bahwa ekstrak

daun stroberi positif mengandung steroid, karena terbentuknya warna hijau tua.

Uji tanin dilakukan dengan menambahkan pereaksi FeCl3, setelah itu terjadi

perubahan warna menjadi hitam. Dengan adanya perubahan warna menjadi hitam

berarti ekstrak tersebut mengandung senyawa tanin, perubahan warna tersebut

terjadi karena reaksi antara FeCl3 dengan salah satu gugus hidroksi pada senyawa

tanin dengan membentuk senyawa kompleks (Halimah, 2010).Uji senyawa

saponin dilakukan dengan melihat busa yang terbentuk pada ekstrak yang akan

diuji setelah dilakukan penambahan HCl pada sampel. Pada hasil skrining

fitokimia ekstrak daun stroberi dikatakan bahwa tidak mengandung senyawa

saponin, dikarenakan setelah penambahan HCl tidak terjadi terbentuk busa pada

ekstrak tersebut.Dengan terbentuknya busa menunjukkan bahwa adanya glikosida

yang mempunyai kemampuan membentuk buih dalam air yang terhidrolisis

menjadi glukosa dan senyawa lainnya (Pardede dkk., 2013). Uji alkaloid

dilakukan dengan menambahkan pereaksi mayer pada ekstrak yang akan diuji,

jika tidak terbentuk endapan putih maka hasilnya negative (Pardede dkk, 2013).

Hasil yang diperoleh pada uji alkaloid ekstrak daun stroberi menunjukkan bahwa

tidak adanya endapan putih, yang berarti ekstrak tersebut tidak mengandung

senyawa alkaloid. Uji alkaloid menggunakan pereaksi mayer diperkirakan

nitrogen alkaloid akan bereaksi dengan ion logam K+ dari kalium

tetraiodomerkurat(II) yang akan membentuk kompleks kalium-alkaloid yang

mengendap (Sriwahyuni, 2010)

6.5. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 96% Daun Stroberi

6.5.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH

Penentuan panjang gelombang maksimum dilakukan untuk mengetahui λ yang

memiliki absorbsivitas yang memberikan sensitivitas pengukuran tertinggi.

Pengukuran pada panjang gelombang maksimum agar kepekaanya lebih maksimal

dan meminimalkan tingkat kesalahan dalam pengukuran, karena pada panjang

gelombang tersebut perubahan nilai absorbansi tiap satuan konsentrasi merupakan

nilai yang paling besar. Pada daerah panjang gelombang maksimum, bentuk kurva
absorbansi datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer terpenuhi

(Gandjar dan Rohman, 2007).

Hasil penentuan panjang gelombang maksimum DPPH diperoleh pada panjang

gelombang 516 nm. Pada umumnya, absrobansi DPPH diukur dengan panjang

gelombang 515-520 nm (Bandoniene et al., 2002, Pavlov et al., 2002, Gazi et al.,

2004). Dalam bentuk teroksidasi, DPPH memiliki serapan yang terpusat sekitar

520 nm. Hasil penentuan panjang gelombang DPPH yang diukur sesuai literatur

dengan jangkauan panjang gelombang maksimum yaitu 515 nm sampai 520 nm

(Molyneux, 2004). Hasil penentuan panjang gelombang maksimum DPPH dapat

dilihat pada Lampiran

6.5.2 Pengukuran Potensi Antioksidan Pada Ekstrak Etanol 96% Daun

Stroberi

Pada pengujian ini, terdapat larutan blanko DPPH yang digunakan untuk

mengukur potensi antioksidan sebagai pembanding dalam menentukan

antioksidan sampel (Arindah, 2010). Larutan blanko DPPH memiliki fungsi untuk

mengetahui absorbansi radikal DPPH yang tidak direduksi oleh sampel (Sarkinah,

2017). Pengujian aktivitas antioksidan ini dilakukan pada panjang gelombang 516

nm dengan menggunakan 5 varian konsentrasi yang berbeda, yaitu 5 ppm, 10

ppm, 15 ppm, 20 ppm dan 25 ppm. Pemilihan varian konsentrasi ini bertujuan

untuk melihat apakah nilai kurva linieritas pada masing-masing peningkatan

konsentrasi dapat berbanding lurus dengan peningkatan daya hambat dari sampel

tersebut (Nashukha et al., 2014).

Kemampuan penangkapan radikal DPPH oleh suatu senyawa antioksidan

dinyatakan dengan nilai persen aktivitas antioksidan. Semakin tinggi nilai persen

aktivitas antioksidan yang dihasilkan menunjukkan bahwa sampel yang digunakan

terbukti berpotensi sebagai antioksidan (Sari et al., 2013).

Pengujian aktivitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan

Spektrofotometer UV-Vis karena memiliki keuntungan yaitu nilai blanko dapat

langsung diukur bersama dengan larutan sampel yang akan diuji dalam satu kali

proses. Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan metode serapan radikal

DPPH. Dipilihnya metode ini karena penggunaanya yang sederhana, cepat, mudah

serta memerlukan sedikit sampel untuk evaluasi aktivitas antioksidan dari

senyawa bahan alam yang digunakan (Molyneux, 2004). Pada metode ini,

larutan DPPH berfungsi

sebagai radikal bebas yang akan bereaksi dengan senyawa antioksidan (sampel)

sehingga DPPH akan berubah menjadi 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazin yang

bersifat non radikal. Hal ini ditandai dengan adanya perubahan warna ungu

menjadi warna kuning dan dapat diamati dengan menggunakan spektrofotometer

sehingga aktivitas peredaman radikal bebas oleh sampel dapat ditentukan

(Molyneux, 2004). Hal ini terjadi karena radikal bebas DPPH pada saat dicampur

dengan larutan sampel dapat menyumbangkan atom hidrogen sehingga

menimbulkan bentuk tereduksi dengan hilangnya warna ungu menjadi warna

kuning (Molyneux, 2004). Hasil uji aktivitas antioksidan dinyatakan dalam IC50

yang menggambarkan kemampuan konsentrasi sampel dalam menghambat radikal

bebas di dalam rumen sebesar 50% (Rinidar et al., 2013). Semakin kecil nilai IC50
maka aktivitas antioksidan semakin kuat. Suatu senyawa dikatakan sebagai

antioksidan sangat kuat jika nilai IC50 kurang dari 50 ppm, kategori kuat jika nilai

IC50 bernilai 50-100 ppm, sedang jika nilai 100-150 ppm dan lemah jika bernilai

151-200 ppm (Molyneux, 2004).Pengujian aktivitas antioksidan ekstrak etanol

96% daun stroberi menunjukan hasil yaitu setiap konsentrasi mengalami

perubahan persen peredaman, semakin besar konsentrasi, maka kemampuan

ekstrak etanol 96% daun stroberi untuk meredam radikal bebas juga semakin kuat.

Dari kurva hubungan antara konsentrasi larutan uji dengan persen peredaman

didapat persamaan regresi yaitu y y=2,2196x +1,8377 R² = 0,9907.

Kurva regresi juga menunjukan bahwa terdapat hubungan yang erat antara

konsentrasi dengan persen peredaman. Hal ini diperlihatkan dengan nilai R2

(Koefisien determinasi) diatas 0,90. Nilai R2 menyatakan bahwa terdapat

hubungan yang erat antara konsentrasi sampel dengan presentase peredaman. Dari

nilai R2 dapat diketahui bahwa terdapat keeratan hubungan yang signifikan antara

konsentrasi pelarut dengan persentase peredaman yang di amati dengan derajat

keeratan sebesar 0,9907. Hal ini menunjukan bahwa lebih dari 99%

penghambatan dipengaruhi oleh konsentrasi bahan, sedangkan kurang dari 1% di

pengaruhi oleh faktor lain seperti kurang ketelitian dalam penimbangan,

penambahan pelarut, pemipetan atau adanya pengotor pada larutan. (Mardawati et

al, 2008).

Syarat linearitas dapat ditentukan dari koefisien korelasi dan koefisien determinasi

yang mendekati = 1. Artinya kurva ini memiliki linearitas yang baik karena

memiliki koefisien determinasi yang mendekati 1 sehingga dapat digunakan

sebagai standar untuk penentuan kandungan antioksidan, semakin meningkatnya

konsentrasi ekstrak, semakin meningkat pula aktivitas antioksidannya (Mega

2014). Nilai R² menggambarkan linieritas konsentrasi terhadap persen peredaman.

Hal ini berkaitan dengan jumlah senyawa metabolit sekunder steroid, flavonoid,

fenolik dan tanin yang terlarut di dalam ekstrak dan memiliki aktivitas antioksidan

(Prawirodihardjo, 2014). Berdasarkan hasil pengujian aktivitas antioksidan

ekstrak etanol 96% daun stroberi menggunakan metode DPPH menunjukan

ekstrak etanol 96% daun stroberi tergolong kategori antioksidan yang kuat dengan

memberikan nilai IC50 sebesar 27,7 ppm (Munandar et al, 2015).

6.6. Keterbatasan Penelitian

Berdasarkan berlangsungnya penelitian ada beberapa keterbatasan yang dialami

oleh peneliti yang menjadi faktor yang perlu diperhatikan bagi peneliti

selanjutnya. Adapun keterbatasan dalam penelitian ini adalah :

Pada proses pembuatan simplisia, pengeringan menggunakan sinar matahari

langsung pada daun stroberi terkendala oleh faktor cuaca. Cuaca mendung dan

hujan, menyebabkan proses pengeringan daun stroberi menjadi terhambat.

 DAFTAR RUJUKAN
Agustina, dkk 2017. “Formulasi dan Evaluasi Sabun Mandi Cair dengan Ekstrak
Tomat (Solanum Lycopersicum L). sebagai Antioksidan Formulation and
Evaluation of Herbal Liquid Soap Containing Tomatoes (Solanum
lycopersicum L ) as Antioxidants,” jurnal ilmiah farmasi, 4, hal. 1–7.
Buricova, L., Andjelkovic, M. dan Cermakova, A. 2011. “Antioxidant Capacity
and Antioxidants of Strawberry , Blackberry , and Raspberry Leaves,”
jurnal ilmiah farmasi, 29(2), hal. 181–189.
Deni Anggraini, Armon Fernando, N. E. 2017.“Formulation Of Antioxidant
Lotion Strawberry (Fragaria Ananassa) Fruit extract,” jurnal ilmiah
farmasi, 14(02), hal. 1–9.
Deepali, J. 2016. Mechanism of Action of Antioxidant Against Free Radical
Mediated Damage To Biomolecules. Madhya Bharti Journal of Science,
60(1), pp.06-08
Ditjen POM.2014. Farmakope Indonesia. Edisi V. Jakarta: Departemen Kesehatan
Republik Indonesia
Inggrid, M. 2015. “Disusun Oleh :,” Aktivitas Antioksidan Dan Senyawa Bioaktif
Dalam Daun Strawberry. Parahyangan: Lembaga Penelitian dan
Pengabdian kepada Masyarakat Universitas Katolik Parahyangan, hal. 1–62.
Kemenkes RI. 2020. Farmakope Indonesia VI. Jakarta : Kementerian Kesehatan
Republic Indonesia.
Kesuma Sayuti dan Rina Yenrina, 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik. 1 ed.
Diedit oleh D. F. S. Y. Padang: Tuty Anggraini, STP, MP, Ph

Kumara, I.D.H.G.P. 2020. Skrining Fitokimia Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak

Etanol 96% Herba Brotowali Menggunakan Metode DPPH. (Skripsi).
Denpasar: Program Studi Farmasi Klini Universitas Bali Internasional

Lobo, V., Patil, A., Phatak, A. and Chandra, N., 2010. Free radicals, antioxidants
and functional foods: Impact on human health. Pharmacognosy
reviews, 4(8), p.118.
Mcmurry, J. And R.C . Fay . 2014. Mcmurry Fay Chemistry. Ed 4 Belmont, CA,
Pearson Education Internasional.

Pratama, D.M., Yuliawati, K.M. and Kodir, R.A., 2015. Identifikasi Senyawa
Antioksidan dalam Rumput Laut Sargassum duplicatum JG Agardh dari
Pantai Ujung Genteng. Prosiding Penelitian UNISBA. Bandung. ISSN,
pp.2460-6472

Prianingrum, E. D. 2016. “Efek Anti Inflamasi Ekstrak Etanol Daun Strawberry.

 jurnal ilmiah farmasi, hal. 1–143.
Rahmatika, A. 2017. “Formulasi Dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol
70% Daun Strawberry (Angelica keiskei Koidz) Dengan Setil Alkohol
Sebagai Stiffening Agent.” jakarta: Fakultas Kedokteran Dan Ilmu
Kesehatan Program Studi Farmasi, hal. 1–105.
Recsanti, D. 2014. “Pengaruh Pemberian Jus Strawberry Terhadap Kerusakan
Histologi Hepatosit Mencit Akibat Pemberian Asetaminopen.” Surakarta:
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, hal. 1–57.
Rival Ferdiansyah, Revika Rachmaniar, Haruman Kartamihardja, Elisabeth
Meliana, N. N. S. 2016. “Formulasi Krim Sari Buah Strawberry (Fragaria X
ananassa D) Sebagai Antioksidan,” jurnal ilmiah farmasi, 5, hal. 1–13.
Umar, I. 2014. “Formulasi Dan Uji Efektivitas Antioksidan Krim Ekstrak Etanol
Daun Botto’-Botto’ (Chromolaena odorata L.) dengan Metode Dpph.”
Makassar: Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Alauddin
Makassar, hal. 1–78.
Utama, R. F. 2017. “Formulasi Dan Uji Efek Anti – Aging Dari Krim
Mengandung Ekstrak Kulit Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia (Christm.
& Panzer) Swingle).” Medan: Program Studi Sarjana Farmasi Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan, hal. 1–115.
 LAMPIRAN

Lampiran 1. Jadwal Kegiatan Penelitian

Bulan
No. Jenis Kegiatan
1 2 3 4 5
1. Persiapan awal
(meliputi pengajuan ijin penggunaan laboratorium dan pemesanan bahan
dalam penelitian)
2. Penyiapan ekstrak
(meliputi pembuatan dan pengujian ekstrak)
3. Formulasi pembuatan ekstrak
(karakteristik ekstrak yang meliputi: Persentase rendeman,Pemeriksaan
organoleptis,Uji susut pengeringan,Uji kadar air,Uji bobot jenis, dan
Uji kadar total golongan kandungan kimia dan aktivitas antioksidan
yaitu IC50.
4. Analisa data, pembuatan laporan akhir penelitian dan luaran
penelitian
(meliputi analisa data hasil pengujian aktivitas, persiapan pembuatan
laporan akhir kegiatan penelitian, pembuatan skripsi)