O documento discute os princípios do transporte através da membrana celular, incluindo as diferenças de composição entre o interior e exterior da célula, a impermeabilidade das bicamadas lipídicas a solutos e íons, e a necessidade de proteínas transportadoras. Também descreve os tipos de proteínas de transporte, como carreadoras, bombas ativadas por ATP, e canais iônicos, assim como os mecanismos de transporte passivo e ativo.
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O documento discute os princípios do transporte através da membrana celular, incluindo as diferenças de composição entre o interior e exterior da célula, a impermeabilidade das bicamadas lipídicas a solutos e íons, e a necessidade de proteínas transportadoras. Também descreve os tipos de proteínas de transporte, como carreadoras, bombas ativadas por ATP, e canais iônicos, assim como os mecanismos de transporte passivo e ativo.
O documento discute os princípios do transporte através da membrana celular, incluindo as diferenças de composição entre o interior e exterior da célula, a impermeabilidade das bicamadas lipídicas a solutos e íons, e a necessidade de proteínas transportadoras. Também descreve os tipos de proteínas de transporte, como carreadoras, bombas ativadas por ATP, e canais iônicos, assim como os mecanismos de transporte passivo e ativo.
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Biologia Molecular e Celular II: Transporte atravs da membrana
Princpios do transporte H diferenas entre a composio dentro e fora da clula; A distribuio de ons dentro e fora da clula controlada por protenas transportadoras e de canal na membrana e, em parte, pelas caractersticas de permeabilidade da prpria bicamada.
As bicamadas so impermeveis a solutos e ons
A taxa de difuso de uma molcula qualquer varia dependendo de seu tamanho e de suas caractersticas de hidrofobicidade... Em geral: quanto menor e + hidrofbico, + rpido se difunde Quanto > o gradiente de [ ], taxa de difuso + rpida Transportadores proteicos so necessrios!!
As protenas de membrana podem ser:
Protenas carreadoras (transportadoras): Podem mediar o transporte passivo e ativo. Carregam molculas especficas encaixe no stio de ligao e transferncia atravs da membrana por alterao conformacional.
Bombas ativadas por ATP
ATPases que usam a energia da hidrlise de ATP para o transporte de ons e peq. molculas atravs da membrana
Protenas de canal Formam poros hidroflicos e fazem transporte passivo Se o canal est aberto, molculas de tamanho e carga apropriados podem passar.
Transporte passivo ou ativo?
A direo depende de [soluto] relativas, em grande parte. TRANSPORTE PASSIVO = molculas fluem de regies [ ] para [ ] TRANSPORTE ATIVO = molculas vo contra um gradiente de [ ]
Para molculas carregadas...
A maioria das membranas possui uma diferena no potencial eltrico em cada lado Potencial de membrana Essa diferena de potencial exerce uma fora em qualquer molcula eletricamente carregada... Em geral: o lado citoplasmtico est com potencial negativo em relao ao exterior, H uma tendncia a atrair ctions e impelir nions, mas o soluto tambm tende a mover-se de acordo com seu gradiente de [ ].
Assim: As foras do gradiente de [ ] + voltagem atravs da membrana geram Gradiente eletroqumico de soluto (fora motriz lquida) Determina a direo do transporte passivo atravs da membrana O transporte ativo move solutos contra seu gradiente eletroqumico
Protenas transportadoras (=carreadoras)
Transportam molculas orgnicas pequenas (acares, aminocidos, nucleotdeos, etc.); Altamente seletivas; Cada membrana tm seu conjunto prprio; Facilitam transportes ativo e passivo;
Carreador de glicose: mudana conformacional da protena carreadora pode mediar o transporte passivo de um soluto como glicose
Transportador de glicose da membrana plasmtica de clulas hepticas de mamferos
Numa conformao, expe stios de ligao p/ glicose no exterior da clula, noutra expe stios no interior... Embora passivo, o transporte seletivo! A direo dada pelo gradiente de [ ] uniportador: transporta um nico tipo de molcula
Lactose permease de E. coli: um simporte de lactose dirigido por H+
Science 1 August 2003: Vol. 301 no. 5633 pp. 610-615 DOI: 10.1126/science.1088196
Transportadores acoplados Protenas carreadoras nas quais o movimento favorvel do 1o soluto fornece energia para o transporte desfavorvel do 2o soluto. um transporte ativo secundrio. SIMPORTADOR = se as 2 molculas vo para a mesma direo ANTIPORTADOR = se deslocam-se em direes opostas
Bicamada lipdica
UNIPORTE
ANTIPORTE SIMPORTE transporte acoplado
Transporte transcelular de glicose
O transporte ativo O transporte passivo no suficiente... O transporte ativo se d em 3 formas principais: Transportadores acoplados: ligam o transporte desfavorvel de um soluto ao transporte favorvel de outro soluto; Bombas ativadas por ATP: acoplam o transporte desfavorvel hidrlise de ATP; Bombas movidas luz: unem o transporte desfavorvel a uma entrada de energia luminosa.
Bombas ativadas pelo ATP
Todas so protenas transmembrana com um ou + stios de ligao para o ATP na face citoslica da membrana; ATPases que normalmente no hidrolisam ATP em ADP + Pi a no ser que os ons ou outras molculas sejam transportados simultaneamente. So enquadradas em 4 classes: Bombas de Classe-P, Classe-V, Classe- F e Transportadores ABC
Classes de bombas ativadas pelo ATP
Bombas classe-P subunidades catalticas que ligam ATP + subunidades regulatrias Uma subunidade fosforilada e os ons movem-se atravs dela; Compem a membrana plasmtica de plantas, fungos e bactrias; Podem ser: bombas de Na/K, H+/K e Ca++
Comparao de concentraes de ons no interior e exterior de uma clula tpica de mamfero.
COMPONENTE Cations Na K + 2+ +
CONCENTRAO INTRACELLULAR (mM)
CONCENTRAO EXTRACELLULAR (mM)
5-15 140 0.5 10
-4 -5
145 5 1-2 1-2 4 10 -7.4 (10 M ou pH 7.4) 110
-5
Mg Ca H +
2+
7 10 -7.2 (10 M ou pH 7.2) 5-15
Anions* Cl -
ATPase muscular de Ca++ bombeia Ca++ do citosol para o R.Sarcoplasmtico
As bombas classe V transportam H+
Bombas de prtons classe V Presentes em membranas vegetais, leveduras e outros fungos; Em animais esto nas membranas lisossomais
Funcionam na acidificao de organelas; Partculas fluorescentes podem ser usadas para medir com preciso o pH lisossmico;
Gradientes de H+ So utilizados para impelir o transporte de membrana em plantas, fungos e bactrias, pois estes no possuem bombas de Na+/K+ Contam com um gradiente eletroqumico de H+ no lugar de Na+
Criado por bomba de H+ na membrana plasmtica A captura de muitos acares e aminocidos para o interior das clulas bacterianas conseguido por simportadores de H+
As bombas classes F transportam H+
Presentes na membrana plasmtica bacteriana, membrana mitocondrial interna e nas membranas dos tilacides; So ATPases de transporte trabalhando em sentido reverso: ATP sintases! O gradiente de H + sustenta a sntese de ATP
Bombas ativadas pelo ATP :Transportadores ABC (ATP binding cassete)
Transportam aminocidos, peptdeos, accares, ons inorgnicos, polissacardeos e at protenas. Flipam lipdeos; Em E. coli 5% dos genes codificam transportadores ABC para importao e exportao Em eucariotos a maioria exportador. Ex. MDR = transportador ABC que d resistncia a multidrogas
Protenas de canal CANAIS hidroflicos = forma + simples de permitir que uma molcula hidrossolvel atravesse a membrana; - algumas formam grandes poros, muito permissivos - p.e. porinas (na membrana ext. bacteriana, mitocondrias e cloroplastos); - Junes comunicantes (gap junctions) - Certas toxinas bacterianas. Porm, a maioria das protenas de canal seletiva e de poros estreitosquase todas so canais inicos (Na+, K+, Cl- e Ca+)
Canais inicos Poros estreitos e altamente seletivos; - No esto continuamente abertos... estados aberto/fechado alternam por mudana conformacional. - Taxa de transporte muito mais rpida que aquela das protenas carreadoras (at mil vezes >), - mas no fazem transporte ativo... - O transporte segue a favor do gradiente eletroqumico. - So seletivos (filtro de seletividade)!
Estrutura do canal de K
Somente o on de tamanho e carga apropriados pode passar Filtro de seletividade.
Mecanismo de seletividade e transporte inico
Modelo para o controle do canal de K+ bacteriano
Canais inicos H mais de 100 tipos de canais inicos; Diferem quanto 1) seletividade inica 2) condies que influenciam na abertura
O controle da abertura-fechamento pode ser por: voltagem, ligao de ligante ou presso mecnica
Canais inicos Mecanicamente controlado
Receptor de acetilcolina: um canal inico controlado por ligante (neurotransmissor)
O movimento da gua A presso osmtica causa o movimento da gua atravs das membranas; As bicamadas lipdicas puras so semi-permeveis gua, que atravessa por osmose parte das membranas celulares tem protenas de canal de gua (aquaporinas) que aumentam a permeabilidade da biomembrana gua Aquaporinas: so seletivas para gua
Estrutura da aquaporina
Modelo estrutural da protena homotetramrica : cada subunidade forma um canal de gua. Um dos monmeros mostrado com a superfcie molecular destacando o poro.
Vista lateral do poro em uma nica subunidade
Expresso de aquaporina por ocitos de r (acima) e controle (abaixo) em soluo hipotnica
Pesquisa funcional com protenas de membrana
Dificuldades Protenas devem estar na membrana! H muitas protenas de membrana diferentes numa dada membrana; Geralmente, esto em baixas concentraes relativas; O que fazer: 1) Extrair, purificar e reincorporar em lipossomas; ou 2) expressar o gene de interesse
Nanodiscos A developing technology termed nanodiscs exploits discoidal phospholipid bilayers encircled by a stabilizing amphipatic helical membrane scaffold protein to reconstitute membranes with integral proteins. After reconstitution, the membrane nanodisc is soluble, stable, and monodisperse
Figure 1 Model of nanodiscs with incorporated rhodopsin. Blue: membrane scaffold protein; gray: phospholipid bilayer; green: rhodopsin. The model was adapted from Nath et al. (2007a).
