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    Ficha de Trabalho 8 Biologia 12

    Enviado por

    Renato Costa
    Este documento descreve duas técnicas importantes da biologia molecular: a síntese de cDNA a partir de mRNA e a reação em cadeia da polimerase (PCR). A síntese de cDNA permite obter DNA codificador para a produção de proteínas como a insulina em vez de extrair a proteína diretamente. A PCR é um método para copiar segmentos específicos de DNA em número exponencial através de ciclos de desnaturação, ligação de primers e extensão.

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    Este documento descreve duas técnicas importantes da biologia molecular: a síntese de cDNA a partir de mRNA e a reação em cadeia da polimerase (PCR). A síntese de cDNA permite obter DNA codificador para a produção de proteínas como a insulina em vez de extrair a proteína diretamente. A PCR é um método para copiar segmentos específicos de DNA em número exponencial através de ciclos de desnaturação, ligação de primers e extensão.

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    ES/3 FICHA DE TRABALHO

    JOÃO DE BARROS
    CORROIOS
    Decreto-Lei Nº24/2006 de 6 de Fevereiro

    BIOLOGIA
    12º ano de escolaridade | Curso Científico-Humanístico
    Científico de Ciências e Tecnologias
    Ficha de trabalho (8) | 2 páginas
    Duração: até 135 min

    Prof. Renato Costa | Janeiro 2010 | Ano Lectivo de 2009/2010

    DNA COMPLEMENTAR (CDNA)


    A técnica dada a conhecer na fig.1 pode ser vista como etapa precedente da metodologia do DNA recombinante
    (rDNA). Aquela permite a síntese de cDNA a partir de mRNA.
    Admita que o material bioquímico desta figura está relacionado com a hormona proteica insulina. Em alternativa à
    administração deste composto de origem bovina e suína,
    suína, conseguido através de uma extracção, em diabéticos, é
    possível agir sobre o mRNA abundante que existe no pâncreas humano. O RNA em questão tem que
    obrigatoriamente participar na síntese proteica da insulina.
    Para reconstituir esta síntese até ao seu ponto de partida, é necessária a utilização da transcriptase reversa. Só
    assim se obtém o DNA de base codificador da proteína final.
    final

    Figura 1: obtenção de cDNA.

    1. Explique o interesse da captação da molécula de mRNA para que se obtivesse no final o segmento de DNA
    codificador da insulina.

    2. Por que razão se recorre a uma sequência de ácido nucleico – designada no processo de primer – logo na fase
    inicial do método, a partir do mRNA?

    3. Explique a utilização da enzima transcriptase reversa no processo de geração do DNA final.

    Ficha de Trabalho (8). Página 1 de 2


    4. Indique o trabalho bioquímico da substância alcalina sobre a molécula híbrida RNA-DNA.

    5. A partir do ponto anterior, descreva os passos que permitiram a geração da dupla cadeia de cDNA.

    6. Discuta em jeito de conclusão a finalidade e o enquadramento da obtenção do cDNA no âmbito da técnica do


    rDNA.

    POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)


    As reacções de polimerização em cadeia (PCR) têm conjunturalmente como resultado a produção de tantas cópias de genes
    quanto aquelas que se pretendem.
    Analise o documento digital:
    Cold Spring Harbor Laboratory (CSHL). PCR - Biology Animation Library. Dolan DNA Learning Center. [Online] [Citação: ]
    http://www.dnalc.org/resources/animations/pcr.html;
    E as fig. 2 e 3.

    2 3
    Figuras: (2) PCR e (3) cópias de DNA obtidas em ciclos de PCR.
    1. Em que consiste a desnaturação do DNA?

    2. Para que os primers sejam inseridos nas cadeias-molde, que variação ocorreu na temperatura do sistema onde o DNA se
    encontra?

    3. Denomine a etapa das PCR que envolve a síntese da nova cadeia de DNA a partir dos primers, dando origem assim a cópias
    de moléculas deste ácido nucleico.

    4. Sintetize os três passos fundamentais que definem um ciclo de PCR.

    5. Interprete o gráfico da fig.3.

    6. Discuta em jeito de conclusão a finalidade e o enquadramento deste método de PCR no âmbito da técnica do rDNA.

    7. Agora que tem conhecimento sobre o processo e subprocessos da técnica do rDNA, discuta a metodologia das terapias
    génicas somáticas em humanos, que se retratam pela integração no cariótipo do indivíduo de genes saudáveis para vencer a
    expressão de alelos mutantes correspondentes.
    FIM
    Ficha de Trabalho (8). Página 2 de 2

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