Non-protein coding RNAs: making their own path losing translation
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[Twisting of mRNA reversibly blocks its translation by the ribosome]
HAL (Le Centre pour la Communication Scientifique Directe), 2007
Rôle des longs ARN non codants dans le développement normal et pathologique
médecine/sciences, 2014
ARNs non-codants: potentiel d’utilisation thérapeutique
Bulletin de l'Académie Vétérinaire de France, 2016
Les ARNs non codants constituent une classe d'acides nucléiques de plus en plus étudiée. D'abord pensés comme étant une catégorie anecdotique de produits de la transcription, il apparait clairement, que sous la forme de petites molécules (micro ARNs-ou miARNs-, siARNs et piARNs) ou de molécules beaucoup plus longues (long-non coding RNA ou lncRNAs), ils jouent un rôle crucial dans la régulation épigénétique de l'expression des gènes, dans le contexte général de l'interférence à ARN. Des molécules synthétiques mimant leur action peuvent aisément être produites (siARNs ou mimes de miARNs) et vont être capables d'inhiber l'expression des gènes (voire de miARNs naturels). L'intérêt thérapeutique de leur utilisation est donc évident dans quasiment tous les domaines de la médecine. Cette utilisation nécessite tout de même de détruire plusieurs verrous techniques ou technologiques, ce qui est clairement en passe de se produire.
[Non-coding small RNAs and spermatogenesis]
Médecine sciences : M/S, 2012
The continuous production of spermatozoa is a tightly regulated biological process, both at the transcriptional and post-transcriptional levels. Recently, different classes of small non-coding RNAs have emerged as important regulators of spermatogenesis. Available molecular and genetic data, although still fragmented, underscore their crucial role in regulating the fine tuning of gene expression required for testicular function. Here, we review the latest advances accomplished in this domain, spanning from the biogenesis of these small non-coding RNAs to their roles in male reproductive function.
Structural and functional studies of actors of translation termination efficiency and messenger RNA stability in Eukaryotes
Gene expression is an essential function which level, fidelity and efficiency are tightly controlled. During my thesis I have focused on the actor of translation termination efficiency Tpa1, on its partner Ett1 and on the complex Dom34-Hbs1 involved in the RNA quality- control mechanisms NGD and NRD. We have solved the crystal structure of each of these proteins and realized a biochemical functional characterization.
Rôle de la protéine cellulaire RoXaN dans la traduction des ARNm du Rotavirus
Les rotavirus sont la cause majeure des gastroentérites chez les jeunes mammifères et sont à l'origine de pertes humaines et économiques très importantes. Contrairement à la plupart des ARN messagers cellulaires, les ARNm de rotavirus ne sont pas polyadenylés en 3' mais se terminent tous par la séquence UGACC. Notre laboratoire a montré pour les ARNm de rotavirus l'existence d'un mécanisme de traduction indépendant de la présence d'une queue poly(A) en 3. La protéine virale NSP3 présente une affinité remarquable de spécificité pour la séquence d'ARN UGACC et interagit avec le facteur d'initiation de la traduction eIF4G (eucaryotic initiation factor 4G). Nous avons montré, par transfection d'ARNm dans des cellules exprimant NSP3, que cette protéine permet la traduction d'ARNm portant la région 3' non codante des ARNm de rotavirus. Nous avons identifié une nouvelle protéine cellulaire interagissant avec la protéine virale NSP3. Cette protéine, que nous avons baptisée RoXaN (protéine X associée à la protéine NSP3 de Rotavirus), présente plusieurs des motifs protéiques impliqués dans des interactions entre protéines et entre protéines et acides nucléiques. Nous avons pu mettre en évidence que RoXaN interagit avec nsp3 au cours de l'infection par le rotavirus et que cette interaction se fait via un motif « LD » de RoXaN et qu'un complexe ternaire composé de NSP3, RoXaN et d'eIF4G était présent dans les cellules au cours de l'infection. Le rôle de la protéine RoXaN dans la cellule non-infectée et a fortiori lors de l'infection par le rotavirus, n'est pas connu. Le but de notre travail a été d'identifier le rôle de cette protéine lors de l'infection par le rotavirus et de son rôle dans les cellules non-infectées. Pour cela des partenaires protéiques de RoXaN ont été recherchés par la technique du tap-tag et par coimmunoprecipitation. Nous avons pu identifier la PABP, YB1 et une protéine de la petite sous unité ribosomale comme partenaire de RoXaN. L'interaction PABP-RoXaN et YB1-RoXaN ont été confirmées par co-immunoprecipitation. Nous avons montré que l'interaction PABP-RoXaN se fait par l'intermédiaire d'ARN fixés aux deux protéines. Nous avons montré aussi que RoXaN fixe des molécules d'ARN via ses doigts de zinc et qu'elle a une affinité plus marquée pour les ARN poly(U). La localisation intracellulaire de RoXaN dans les cellules infectées et non-infectées par le rotavirus à été établi à l'aide d'un anti-peptide dirigé contre la partie N terminale de RoXaN. Les résultats obtenus montrent que RoXaN est une phospho-protéine nucleo-cytoplasmique fixant les ARN dont la localisation est modifiée lors de l'infection. Des mutations ont été introduites dans la partie de NSP3 fixant RoXaN afin d'abolir cette interaction. Des lignées stables de cellules Ma104 exprimant NSP3 wt ou ces mutants ont été obtenues. La tansfection d'ARN « rotalike » dans ces cellules est en cours. Un RNA interférant inactivant le proteine RoXaN a été identifié, il sera utilisé pour évaluer l'effet de l'inactivation de RoXaN sur la production virale.
[Kinetic regulation of pre-messenger RNA alternative splicing]
Médecine sciences : M/S, 2014
Des ARNs circulaires possibles chaînons de l’évolution de la traduction médiée par les ARNts : les affinités codons-acides aminés augmentent en fonction de l’ancienneté des ARN circulaires
HAL (Le Centre pour la Communication Scientifique Directe), 2020
Des ARNs circulaires possibles chaînons de l'évolution de la traduction médiée par les ARNts : les affinités codons-acides aminés augmentent en fonction de l'ancienneté des ARN circulaires Résumé Les affinités nucléotidiques des interactions non covalentes avec les acides aminés produisent des associations entre les ARNm et les peptides apparentés, régulant potentiellement la traduction ribosomale. Les corrélations entre les affinités nucléotidiques et l'hydrophobicité des résidus sont explorées pour 25 ARNs circulaires théoriques d'une longueur minimale de 22 nucléotides, conçus in silico pour coder chaque acide aminé une fois et une seule après trois tours de traduction et former des structures « hairpin » (épingle à cheveux) maximales. Cette conception imite vraisemblablement les premiers ARNs de la vie. Les ARNs circulaires ressemblent à des ARNts consensuels, suggérant une fonction de proto-ARNt, mettant en jeu un anticodon prédit et un acide aminé apparenté. Les 25 ARNs circulaires et leur ordre d'évolution présumé, déduits de l'ordre d'intégration dans le code génétique de l'acide aminé apparenté à leur anticodon prédit, montrent des associations remarquables avec plusieurs propriétés anciennes du mécanisme de traduction de la cellule. Ici, nous les utilisons pour explorer l'évolution des corrélations entre hydrophobicité d'un résidu et affinité à son codon, en supposant qu'elles reflètent des propriétés de la traduction pré-ARNt et préribosomique. Cette hypothèse suppose que les corrélations diminuent avec les ordres d'inclusion dans le code génétique du codon apparenté à un ARN circulaire. Les associations entre les affinités des nucléotides et les hydrophobicités des résidus ressemblent à celles existant actuellement entre gènes et protéines. Les forces d'association diminuent avec les rangs d'inclusion dans le code génétique des acides aminés apparentés au proto-ARNt. La conception des ARNs circulaires minimaux ne tient pas compte des affinités entre ceux-ci et les peptides qu'ils codent. Cependant, les interactions entre les ARNs circulaires et leurs peptides apparentés ressemblent à celles observées pour les gènes naturels actuels. Cette propriété est plus forte pour les ARNs circulaires anciens et plus faible pour les récents, couvrant une période au cours de laquelle la traduction moderne à base d'ARNts et de ribosomes a probablement évolué. Les résultats indiquent que la traduction usant d'adaptateurs fondés sur les affinités codon-acide aminé et sur le code génétique primitif a préexisté à une traduction médiée par l'ARNt. Les ARNs circulaires minimaux théoriques apparaissent ainsi comme des modèles prébiotiques pour la transition entre les traductions à médiation pré-ARNt et ARNt.
Introduction au Droit
Droit objectif : l'ensemble des règles régissant la vie en société et les relations entre les personnes. Ici, la règle de droit est nécessairement abstraite, elle va concerner tout le monde mais elle ne s'adresse à personne en particulier.
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