Chemické pokusy/Izolace DNA
| Izolace DNA | |
| Chemikálie | Banán nebo jahody, ethanol, chlorid sodný (NaCl), voda, detergent, EDTA |
|---|---|
| Pomůcky | Mixér, kádinka (400 ml), filtrační papír, odsávací baňka, Büchnerova nálevka, vodní vývěva, odměrný válec, skleněná tyčinka, zkumavky, mikropipeta |
| Některá data mohou pocházet z datové položky. | |
Popis
[editovat | editovat zdroj]Deoxyribonukleová kyselina (DNA) je nukleová kyselina, která je nositelkou genetické informace organismů. Je tvořena polynukleotidovými řetězci.
EDTA je zkratka používaná pro kyselinu ethylendiamintetraoctovou a její soli. Patří do skupiny chelatačních činidel. Váže na sebe ionty kovů a s nimi vytváří komplexní sloučeniny. Využívá se například při snížení tvrdosti vody, v pracích a mycích prostředcích nebo také k detoxikaci těla.
-
Molekula DNA -
Struktura EDTA
Po rozmixování dojde k oddělení buněk. EDTA inhibuje enzymy obsahující kovy, které mohou poškodit DNA. Po přidání ethanolu se vytvoří vrstva směsi a vrstva ethanolu na jejichž rozhraní dojde k vysrážení DNA.
Postup
[editovat | editovat zdroj]- Ethanol dáme na pár minut vychladit do mrazáku.
- Menší banán nebo jahody rozmixujeme v mixéru společně s 200 ml vody a poté do směsi přidáme 2 g chloridu sodného.
- Získanou směs přefiltrujeme.
- Do filtrátu přilijeme 30 ml detergentu a EDTA - počkáme 5 minut.
- Následně do zkumavky přelejeme 3 ml směsi. Zkumavku držíme pod úhlem asi 45° a po stěně postupně přidáváme mikropipetou 3 ml vychlazeného ethanolu.
- Po přidání ethanolu můžeme pozorovat vysrážení vláken DNA, které můžeme zkusit namotat na dřevěnou špejli.
-
Přefiltrované směsi banánu a jahod -
Směs s vychlazeným ethanolem
