Actividad de La Ureasa

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA

Programas: Zootecnia; Agronoma; Ingeniera Agroforestal
LABORATORIOS DE BIOQUMICA METABLICA-LBM

Prof: Jairo Granados., MSc
PRCTICA 1
Determinacin de Actividad Uresica (AU) en suelos, pastos y Forrajes
INTEGRANTES DEL GRUPO

NATALIA ROCO BUITRAGO RAMOS
COD. 1049617604
Buitrago.natalia@gmail.com
GLORIA JOHANA OLMOS
COD.
lochaolmos@yahoo.es
Grupo de plataforma: 352001_23
DIRECTOR DE CURSO
GRANADOS MORENO JAIRO / jairo.granados@unad.edu.co
CEADTUNJA
PROGRAMA INGENIERA AGROFORESTAL
16/05/2015
RESUMEN
La ureasa es una exoenzima que cataliza la reaccin de hidrlisis de la urea, el
principal producto celular nitrogenado de la degradacin de las protenas y los
cidos nucleicos, el cual es ms fcil de eliminar que otras formas de nitrgeno


(como el amoniaco) porque es soluble en agua y menos txico (Science in

School, 2008). En dicha reaccin, la urea se rompe para formar dixido de
Tcnicas para el anlisis de actividad enzimtica en suelos 21 carbono y
amonio, como se describe en la siguiente reaccin (Quintero-Lizaola et al.,
2005):
H2NCONH2 + H2 O ------ 2NH3 + CO2
La ureasa se encuentra principalmente en semillas, microorganismos e
invertebrados. En las plantas, es un hexmero (consiste en seis cadenas
idnticas) y se encuentra en el citoplasma. Su pH ptimo es 7.4, y su
temperatura ptima 60 C (Kandeler y Gerber, 1988). Se midi la actividad
enzimtica de la ureasa en muestras de suelo y forraje. La metodologa
consisti bsicamente en extraer con NaCl mediante centrifugacin el
sobrenadante el cual se titul posteriormente con HCl e indicador de tashiro
que viro a color verde esmeralda. Los resultados arrojaron que la actividad
Uresica medida para muestras de suelo y forraje fue de 980 y 755 micromoles
de urea/ g. min respectivamente. Siendo mayor la actividad metablica de esta
enzima superior en suelos con respecto a la actividad en forrajes.
PALABRAS CLAVES: Actividad Uresica, forraje, suelo, urea, enzimas.
ABSTRACT
Urease Is A exoenzyme that catalyzes the hydrolysis reaction of the urea, the
main cell product nitrogen degradation of proteins and nucleic acids, which is
easier to remove than other forms of nitrogen (as ammonia) is why Less soluble
in water and toxic (Science in School, 2008). In this reaction, the urea breaks
para train dioxide techniques for the analysis of soil enzyme activity 21 Carbon
and ammonium, as described in the following reaction (Quintero-Lizaola et al.,
2005):
H2NCONH2 + H2 O ------ 2NH3 + CO2
Urease is found mainly in seeds, micro-organisms and invertebrates. In plants,
it is hexamer UN (consists of six identical chains) and is located in the
cytoplasm. Optimum pH is 7.4 and its optimum temperature 60 C (Kandeler
and Gerber, 1988). The enzymatic activity of urease in soil and forage samples
was measured. The methodology consisted basically removing NaCl by
centrifugation the supernatant which is itself subsequently with HCl title and
Tashiro indicator Viro an emerald green color. The results showed that the
activity of urease paragraph Measure soil and forage samples WAS 980 and
755 micromoles of urea / g. min respectively. Being mayor of the metabolic
activity of soil enzyme in excess esta regarding the activity in fodder.
KEYWORDS: urease activity, feed, soil, urea, enzymes.
2


INTRODUCCIN
La calidad y la salud de los suelos se miden a travs de distintos indicadores que evalan
su funcionamiento (Doran et al., 1999). Para medir la calidad, se considera qu tan
adecuadas son sus propiedades fsicas y qumicas para permitir el intercambio de gases,
la retencin de humedad y de nutrientes, la penetracin de races, entre otros. En este
contexto, uno de los indicadores que se ha utilizado es la magnitud de la actividad
enzimtica de la ureasa involucrada en los procesos antes mencionados. La mayora de
las enzimas actan dentro de las clulas, pero algunas son extracelulares. La actividad
enzimtica del suelo es importante porque refleja el estado en el que se encuentran sus
poblaciones microbianas (Doran, 2002; Gianfreda y Ruggiero, 2006). Dado a la elevada
tecnificacin empleada para uso con monocultivos se ha producido un rpido deterioro de
los suelos. En vista de esta problemtica, en los ltimos aos se han planteado
investigaciones dirigidas al establecimiento de sistemas de manejo conservacionista de
suelos, estos han vinculado la tasa de mineralizacin de los mismos con sus propiedades
bioqumicas, tales como: el contenido de N (Bending et al., 1998), la relacin C/N (Rivero
y Paolini, 1995), contenido de lignina (L) y celulosa (Fioretto et al., 2005), contenido de
polifenoles (PP) (Palm y Snchez, 1991), las relaciones L/N, PP/N y (L+PP)/N (Palm y
Snchez, 1991; Singh et al., 2007). Dentro de este marco, la actividad enzimtica es
considerada como una de las caractersticas ms dinmicas del suelo, ya que responde
rpidamente a los cambios en las prcticas de manejo dentro de un sistema. Se utiliza la
medicin de la actividad de distintas enzimas del suelo, como por ejemplo la ureasa, para
seguir la dinmica de la mineralizacin del N, ya que permite evaluar los cambios
producidos en las transformaciones de este elemento esencial en los suelos, como efecto
del uso de residuos orgnicos de distintos orgenes, debido a su participacin como
enzimas hidrolticas en la descomposicin de residuos. El objetivo de este trabajo fue
evaluar la actividad enzimtica de la ureasa en algunas muestras biolgicas.
1. FUNDAMENTACIN TERICA
1.1 MAPA CONCEPTUAL


1.2 diagrama de flujo relacionado con los videos


2. MATERIALES Y MTODOS
2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS
Cuadro 1. Lista de materiales y equipos utilizados en la prctica
Aplicacin
Material equipo
Capacidad y
(Operacin
Fotografa Real
(marca)
Precisin
unitaria)
Balanza analtica
Ohaus
Pesada
(Gravimetra)
210g;
0,0001g


Tubos de ensayo
con gradilla
Depsito de las
muestras
Pinzas para bureta
Sostenimiento
Erlenmeyer
Volumtrica
125 ml
Pipetas
Volumtrica
5 y 10 ml
Matraz aforado
Volumtrica
100 ml


Bao termostato
Mantenimiento
de temperatura
Beaker
Volumetra
400 ml
Bureta
Volumetra
25 ml
Soporte universal
Base
2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

Cuadro 2. Reactivos utilizados en la prctica


Reactivo (nombre)
Frmula Molecular
Peso
Molecular (g/
mol)
concentracin
Urea
H2N-CO-NH2
60
0,25M
Ureasa en bfer
fosfato de pH 7
0.1%
Cloruro de
mercurio
HgCl2
271.6
1%
cido clorhdrico
HCl
36.5
0.1 N
Indicador de
tashiro
C15H14N3O2Na +
C16H18N3SCl ---3H20 + C2H60
291.29
5 gotas
2.3 PROCEDIMIENTOS
2.3.1 Protocolos de muestras analizadas
MUESTRA
Forraje
(kikuyo)
(pennisetm
Clandestinu
m)
Suelo
LUGAR DE
MUESTREO
Los mismos orgenes
que para Suelo se
aplican para el forraje.
Muestras tomadas en
la finca el Molino, de
propiedad del seor
Carlos Lpez
CONDICIONES
Beln Boyac,
coordenadas
geogrficas de Beln,
Latitud: 5.98957,
Longitud: -72.9134,
localizado en la
cordillera oriental
provincia del tundama
al norte del
departamento de
Boyac en la ruta,
Tunja, Duitama, Santa
Rosa, Cerinza Beln
En Beln existen
tres climas bien
marcados
Clima frio hmedo,
entre los 2.500 a
3.000 m.s.n.m
Clima frio
subparamo seco,
terrenos que estn
entre los 3.000 y
3.600 m.s.n.m
Clima de paramo
seco entre los 3,600
y 3.800. m.s.n.m
Iguales condiciones
que para el suelo.
DESCRIPCIN
Textura suave
Olor hierba fresca
Color verde intenso
Sabor agradable al
paladar
Se tomaron 300 gramos
para la realizacin del
laboratorio de Bioqumica
Color pardo rojizo
Textura, franco arcilloso
Acidez ph 5.8
Olor no caracterstico
Sabor ligeramente a tierra


Con una
temperatura
promedio de 14C y
una altitud de 2.630
m.s.n.m.
2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados.
Tomar 1g de forraje , suelo y depositarlo en la
centrifuga
Adicionar a la centrifuga 10 mL de NaCl 1%
Agitar durante 3 minutos
Centrifugar a 3500 rpm durante 5 minutos
Tomar el sobrenadante (Fase liquida)
Descartar el precipitado (Fase solida)

Medir el sobrenadante en una probeta y adicionar
NaCl hasta 25
Agitar durante 30 segundos
Rotular


Alistar el montaje de titulacin: lavar, purgar ,cargar y enrasar

la bureta con HCl 0,1N
Colocar el Erlenmeyer que contiene la solucin blanca, agregar 5

gotas del indicador tashiro, debajo la bureta y adicionar lentamente
el HCl, hasta que aparezca y permanezca un color verde esmeralda.
Esto indica que los equivalentes-gramo del hidrxido de amonio
fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del cido
clorhdrico.
Registrar en su tabla de datos, los mL

de HCl gastados en la titulacin del
blanco.
Repetir el procedimiento anterior, con el

tubo St y anotar los mL empleados de
HCl
Continuar el proceso con los tubos 1, 2,

3 y 4 ; registrar los mL gastados de
HCl en la tabla de datos.
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
3.1 TABLAS DE DATOS
Muestra
10


Wm (g)
VHCL(ml)
suelo
1.0200gr
1.4
forraje
1.0800gr
1.3
estndar
1.2
blanco
0.2
3.2. Clculos
3.2.1 Actividad Uresica en el tubo estndar
AU=
( mL HCl StmL HCl B ) 0,11000 mol

Fd
2 t (min)
Fd=
50 mL
5 mL
3.2.2. Actividad Uresica del suelo
AU=
( mL HCl para tubo 1mL HCl B ) 0,1 1000 mol

Fd
2 t (30 min)
Fd=
50 mL 100 g
V f (mL) W Suelo
3.2.3 Actividad Uresica del forraje
( mL HCl para tubo20,2 ) 0,1 1000 mol

Fd
AU=
2 t(min)
Fd=
50 mL
100 g
V f (mL) W Forraje
11


3.3TABLA DE RESULTADOS
TUBO
Tabla 2. Actividad Uresica de las muestras biolgicas

TIPO DE MUESTRA
AU( mol urea/ g . min
Estndar
16.6
Suelo
980
Forraje
755
3.3.1 GRFICAS
Grafica 1. Actividad ureasa en muestras biologicas

1200
1000
800
micromoles de urea /g.min
600
400
200
0
estndar
suelo
forraje
3.4 DISCUSIN DE RESULTADOS

En la grfica podemos observar que la actividad de la enzima fue mayor en la muestra de
suelo que en la muestra de forraje. La mayora de las tcnicas empleadas en la
determinacin de la ureasa cuantifican la liberacin de amonio de un suelo incubado.
12


Varias de ellas difieren en el uso de soluciones tampn o de tolueno. Otros mtodos

utilizan la urea residual para estimar la propia hidrlisis de este compuesto (Douglas y
Bremner, 1970). Es claro que la mayor transformacin de urea en subproductos, en las
muestras analizadas est determinada por su interaccin con el medio ambiente y
factores que influyen sobre la actividad de ureasa como cantidad de materia orgnica,
humedad cerca de capacidad de campo, mayor temperatura, pH de suelo cercano a la
neutralidad, mayor aportacin de residuos al suelos.
4. CONCLUSIONES
La mayor Actividad Uresica del suelo, se puede atribuir a una alta presencia de
Materia Orgnica en el mismo y a la gran actividad de la Fijacin Biolgica del
Nitrgeno (FBN).
5. BIBLIOGRAFA
BENDING, G.; M. TURNER Y I. BURNS. 1998. Fate of nitrogen from crop residues as
affected by biochemical quality and the microbial biomass. Soil Biol. Biochem. 30:20552065
Doran, J.W., Jones, A.J., Arshad, M.A., Gilley, J.E. 1999. Determinants of soil quality and
health. En: Rattan, L. (editor). Soil quality and soil erosion. CRC Press, Florida, EUA.
Doran, J.W. 2002. Soil health and global sustainability, translating science into practice.
Agriculture Ecosystems and Environment. 88, 119-127
Douglas, L.A., Bremner., J.M. 1970. Extraction and colorimetric determination of urea in
soils. Soil Science Society of American Proceedings. 34, 859-862
13


Gianfreda, L., Ruggiero, P. 2006. Enzyme activities in soil. En: Nannipieri, P., Smalla., K.
(editores). Nucleic acids and proteins in soil. Captulo 12. Springer Publishing Company.
Alemania
Kandeler, E., Gerber, H. 1988. Short-term assay of soil urease activity using colorimetric
determination of amonium. Biology and Fertility of Soils. 6, 68-72.
Quintero-Lizaola R., Ferrera-Cerrato R., Etchevers-Barra J.D. 2005. Manual para la
medicin de actividades enzimticas en compost y vermicompost. Colegio de
Postgraduados. Campus Montecillo. Mxico
RIVERO, C. Y J. PAOLINI. 1995. Efecto de la incorporacin de residuos orgnicos sobre
algunas propiedades qumicas de dos suelos en Venezuela. Venesuelos 3:24-30.
Science in School, 2008. http://www.scienceinschool.org/print/1074. Consultado en
octubre de 2010.
14


PRCTICA 2
Carbono Orgnico y Capacidad Amortiguadora de suelos
RESUMEN
(Redactar en mximo 10 lneas, en un solo texto: Qu se hizo, cmo se desarroll,
qu resultados se encontraron, cmo se interpretaron estos resultados, qu se
concluy):
PALABRAS CLAVES: (Escribir 5):
ABSTRACT
(This text is based on that described in the above summary)
(Paragraph 5 lines)
Key Words: (Write 5)

INTRODUCCIN
(se debe escribir en 18 lneas)
Consultar el siguiente link para tener informacin de apoyo


http://www.exactas.unlpam.edu.ar/academica/catedras/edafologia/practicos/mo04.htm
1.1 MAPA CONCEPTUAL (Con base en los conceptos mostrados , elaboren un mapa
conceptual, en este espacio)
CONCEPTOS
CONCEPTOS
Suelo
Actividad Microbiana
Aminocidos
Carbono orgnico
Grupos Funcionales
Fases
Fertilidad
Mezcla heterognea
cidos Orgnicos
Enzimas
Componentes Bioqumicos
Humus
Materia inorgnica
Materia orgnica
Reacciones Bioqumicas Enzimticas

(RBE)
Sales Minerales
pH
Nitrgeno total
Equilibrio cido-base
Carbohidratos
1.2 MENTEFACTO CONCEPTUAL (Con base en los conceptos mostrados , elaboren

un mentefacto conceptual, en este espacio)
Fertilidad
pH
Microorganismo
s
Bases
intercambiables
Potenciometra
Tcnicas
analticas
Titulacin
REDOX
Gravimetra


Composicin
Bioqumica
Volumetra
Materia orgnica
Conductividad
elctrica
Espectrofotometra
CIC
Sales Minerales
Carbono orgnico
Caractersticas
Fisicoqumicas
Amonio
(NH4+)
FBN
Suelo
1.3 Con base en la revisin detallada de los videos relacionados con anlisis de
suelo y mostrado en los siguientes link:
http://www.youtube.com/watch?v=Gm4Be6qHCRM
http://www.youtube.com/watch?v=5eo-Fiuf1rY
http://www.youtube.com/watch?v=lXOAwkG_D2I
Deben elaborar un diagrama de flujo que integre los temas relacionados all.
1.4 En este espacio, deben elaborar un Diagrama UVE heurstico, relacionado con
el artculo cientfico anexo, denominado: Evaluacin de parmetros de calidad para la
determinacin de carbono orgnico en suelos., J,Garca Galvis y Ballesteros, M (2005),
Revista Colombiana de Qumica
2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS (completar el cuadro)
Cuadro 1.lista de materiales y equipos utilizados en la prctica
Aplicacin
Material equipo
Capacidad y
(Operacin
Fotografa Real
(marca)
Precisin
unitaria)
Balanza analtica Ohaus
Pesada
(Gravimetra)
210g;
0,0001g


2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS (Completar el cuadro)

Cuadro 2.Reactivos utilizados en la prctica
Peso Molecular
Reactivo(nombre)
Frmula Molecular
(g/ mol)
Concentracin
Sulfato ferroso
1N
Dicromato de potasio
1N
2.3 PROCEDIMIENTOS (Completar el cuadro)

Cuadro 3.Tcnicas analticas utilizadas en el anlisis fisicoqumico de suelos
VARIABLE(INDICADOR)
TCNICA ANALTICA
EVALUADA(O)
UTILIZADA
pH
Mtodo potenciomtrico
Carbono Orgnico(CO) %
Mtodo de titulacin (WalkeyBlack)
Carbono Orgnico(CO) %
Capacidad Amortiguadora
Nitrgeno total (NT) %


Materia Orgnica(MO) %
2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha formato que muestre
la informacin fundamental sobre el origen de cada una. Por ej: especie, nombre
cientfico, lugar de muestreo, datos agroclimatolgicos)
2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede inclur:
Video fotografas que sustentan los procesos desarrollados ( en Word : hacer
click en insertar, formas y diagrama de flujo)
3.1 TABLAS DE DATOS
*Inclur aqu las enviadas al profesor.*
3.2 ECUACIONES DE CLCULO
%Carbono Orgnico, Mtodo de titulacin volumtrica
( V FeSO 4 B
%CO =
N FeSO 4 0,003 Fd
Wm
Dnde:
%CO= porcentaje de carbono orgnico
VFeSO4= Volumen(mL) de sulfato ferroso
B = Volumen del sulfato ferroso gastado en el blanco= 0,4 mL
N = normalidad del sulfato ferroso
0.003= peso miliequivalente del carbono en gramos
Wm= peso de la muestra en gramo
Fd=Factor de dilucin : 10
Materia Orgnica (%MO)

%MO= %CO
Dnde:
%MO = Materia orgnica
%CO= porcentaje de carbono orgnico
1,724


1,724= constante de Van Bemmelen
Nitrgeno Total ( %NT)
%NT= %MO/20
Donde:
%NT= Nitrgeno total
%MO = Materia orgnica
Carbono Orgnico por mtodo colorimtrico-espectrofotomtrico
%CO=
][
Am +0,0017
2,88
0,0111
W m M S
]
Donde:
A m =Absorbancia de la muestra de suelo

W m =Peso de lamuestra de suelo
M S=Peso Molecular de lasacarosa
Sacarosa: C12H22O11
Capacidad amortiguadora ( ), Mtodo Potenciomtrico
Capacidad Amortiguadora ( )
Con respecto a NaOH, para muestras de
suelos:
mL NaOH 0,1 40
1000 mEq
( pH 2 pH 1 ) Wm


Capacidad Amortiguadora ( )
Con respecto a NaOH, para muestras de agua y
solucin buffer
mL NaOH 0,1 20
1000 mEq
( pH 2 pH 1 ) Vm
mL
Vm :Volumen de la muestra
3.3 TABLAS DE RESULTADOS (Completar)
Tabla 1.Resultados obtenidos en el anlisis fisicoqumico

Valor obtenido por:
VARIABLE
DESCRIPCIN
Espectrofotomet
EVALUADA
Titulacin
ria
Materia orgnica
MO
(%)
NT
Nitrgeno total (%)
CO
Carbono
orgnico(%)
pH
Potencial de
Hidrgenos
Capacidad
Amortiguadora
3.3.1 GRFICAS (*POR EJEMPLO*)


Grfica 1.Resultados anlisis Fisicoqumico de suelo
4.66
5 4.44
4.06
4
3
Valores porcentuales
2.36
2.3
2
1
0.2
Indicadores Fisicoqumicos
3.4 . DISCUSIN DE RESULTADOS

*EN ESTE ESPACIO SE DEBE REALIZAR UN ANLISIS INTERPRETATIVO Y
COMPARATIVO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS, TRATANDO DE CONFRONTAR
LOS VALORES CON LA FUNDAMENTACIN TERICA Y CON LA LITERATURA*
4. CONCLUSIONES
(Escribir mnimo Cinco)
ESTAS SE DERIVAN DE LA DISCUSIN DE RESULTADOS
5. BIBLIOGRAFA


(UTILIZADA Y CONSULTADA, MNIMO 6 REFERENCIAS EN NORMAS APA)
PRCTICA 4
Actividad Cataltica de Catalasa (ACAT) en muestras de origen Biolgico
RESUMEN
(Redactar en mximo 10 lneas, en un solo texto: Qu se hizo, cmo se desarroll,
qu resultados se encontraron, cmo se interpretaron estos resultados, qu se
concluy):
PALABRAS CLAVES: (Escribir 5):
ABSTRACT
(This text is based on that described in the above summary)
(Paragraph 5 lines)


Key Words: (Write 5)

INTRODUCCIN
(Se debe escribir en 18 lneas, Inclur breve revisin de literatura)
Consultar el siguiente link para tener informacin de apoyo)
http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S071827912006000200004&script=sci_arttext
1.1 MENTEFACTO CONCEPTUAL (elaboren un mentefacto conceptual, en este
espacio, con base en los siguientes conceptos)
CONCEPTO
CONCEPTO
Desdobla el Radical H2O2
Actividad cataltica
El sustrato es el perxido
pH y T ptimos
xido-reductasa
Catalasa (CAT)
El sustrato es la rea
Peroxidasa
Peroxisoma
Produce H2O y O2
Cintica enzimtica de MichaellisMenten
Parmetros cinticos(Km y Vmx)
Impide la acumulacin de
perxido
Participa en la foto-respiracin
Es amidohidrolasa
RBE REDOX
1.2 MAPA CONCEPTUAL (Con base en los siguientes conceptos claves elaboren un
mapa conceptual en este espacio, utilizando conectores adecuados)


CONCEPTO
CONCEPTO
Catalasa(CAT)
Enzima xido-reductasa
Familia peroxidasas
Clulas animales y vegetales
Peroxisoma
Peroxidacin lipdica
RBE REDOX
H2O2
H2O + O2
Cintica Michaeliana
Permanganometra
Coenzima
Apoenzima
Grupo Hemo(Fe+3)
Protena cuaternaria
Homotetramrica
Grasas
Mitocondria
Oxidacin
1.3 Con base en la revisin detallada de los videos relacionados con actividad
enzimtica y mostrados en los siguientes link:
http://www.youtube.com/watch?v=WOAcp15VLJ0
http://www.youtube.com/watch?v=0Jr7gxy3bKI
Deben elaborar un diagrama de flujo que integre los temas relacionados all.
1.4 En este espacio, deben elaborar un Diagrama UVE Heurstico relacionado con el
artculo cientfico anexo, denominado: Catalasa, Peroxidasa y Polifenoloxidasa en
pitaya amarilla (acanthocereus pitajaya): maduracin y senescencia
2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS(completar el cuadro)
Cuadro 1. Lista de materiales y equipos utilizados en la prctica

Aplicacin
Material equipo
Capacidad y
(Operacin
Fotografa Real
(marca)
Precisin
unitaria)


Balanza analtica Ohaus
Pesada
(Gravimetra)
210g;
0,0001g
2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS(Completar el cuadro)

Cuadro 7. Reactivos utilizados en la prctica
Peso Molecular
Reactivo(nombre)
Frmula Molecular
(g/ mol)
Perxido de
hidrgeno
H2O2
Concentracin
0,05M
2.3 PROCEDIMIENTOS
2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha formato que muestre
la informacin fundamental sobre el origen de cada una. Por ej: especie, nombre
cientfico, lugar de muestreo, datos agroclimatolgicos, animales, etapa productiva,
alimentacin etc.)


2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede inclur :

Video fotografas que sustentan los procesos desarrollados ( en Word : hacer
click en insertar, formas y diagrama de flujo)
3.1 TABLAS DE DATOS (Completar)
INCLU AQU LAS ENVIADAS AL PROFESOR
3.2 CLCULOS
Calcular la actividad cataltica de la catalasa (ACAT) de cada una de las muestras

trabajadas; ver la ecuacin en el documento: protocolo de prcticas; tener en
cuenta lo siguiente:
mL de KMnO4 gastados en el blanco= 4,7 mL
3.3 TABLAS DE RESULTADOS (Completar)

Tabla 5. Valores de actividad de catalasa en las muestras estudiadas
Tubos
1
2
Muestras Analizadas
ACAT (moles de
H2O2 / min)


3
4
3.3.1 GRFICAS
(Realizarlas en Excel y luego importarlas a Word en este documento)
3.4 . DISCUSIN DE GRFICAS Y RESULTADOS

*EN ESTE ESPACIO SE DEBE REALIZAR UN ANLISIS INTERPRETATIVO Y
COMPARATIVO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS, TRATANDO DE CONFRONTAR
LOS VALORES CON LA FUNDAMENTACIN TERICA Y CON LA LITERATURA*
4. CONCLUSIONES
(Escribir mnimo Cinco)
*ESTAS SE DERIVAN DE LA DISCUSIN DE RESULTADOS


5. BIBLIOGRAFA
(UTILIZADA Y CONSULTADA, MNIMO 6 REFERENCIAS EN NORMAS APA)

Actividad de La Ureasa

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Actividad de La Ureasa

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(como el amoniaco) porque es soluble en agua y menos txico (Science in

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1.2 diagrama de flujo relacionado con los videos

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Pinzas para bureta

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2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

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Agitar durante 3 minutos

Centrifugar a 3500 rpm durante 5 minutos

Tomar el sobrenadante (Fase liquida)

Descartar el precipitado (Fase solida)

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Alistar el montaje de titulacin: lavar, purgar ,cargar y enrasar

Colocar el Erlenmeyer que contiene la solucin blanca, agregar 5

Registrar en su tabla de datos, los mL

Repetir el procedimiento anterior, con el

Continuar el proceso con los tubos 1, 2,

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( mL HCl StmL HCl B ) 0,11000 mol

3.2.2. Actividad Uresica del suelo

( mL HCl para tubo 1mL HCl B ) 0,1 1000 mol

3.2.3 Actividad Uresica del forraje

( mL HCl para tubo20,2 ) 0,1 1000 mol

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Tabla 2. Actividad Uresica de las muestras biolgicas

Grafica 1. Actividad ureasa en muestras biologicas

micromoles de urea /g.min

3.4 DISCUSIN DE RESULTADOS

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Varias de ellas difieren en el uso de soluciones tampn o de tolueno. Otros mtodos

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Reacciones Bioqumicas Enzimticas

3.3.1 GRFICAS (POR EJEMPLO)