METABOLISMO DE LIPIDOS

MVZ HUMBERTO TRONCOSO ALTAMIRANO

Al menos en el hombre, entre el 95 y el 98 % del total de los cidos grasos presentes en el plasma sanguneo est contenido en los steres de cidos grasos como los triglicridos, los fosfolpidos y los steres del colesterol. Estos esteres de cidos grasos se encuentran principalmente en forma de lipoprotenas plasmticas. El resto, una pequea porcin de entre 2 y 5 %, se halla en forma no esterificada y est unido a un complejo albuminoide del plasma. Las lipoprotenas realizan tres funciones principales: a) transportar las grasas de la dieta desde la mucosa intestinal, donde son absorbidas, hacia los tejidos del organismo animal; esta funcin la desempean los quilomicrones y los residuos de quilomicrones. b) transportar los triglicridos desde el hgado hacia el resto de los tejidos del cuerpo, para almacenarse o ser oxidados para obtener energa. Las responsables de esta accin son las lipoprotenas de muy baja densidad (very low density lipoproteins), tambin conocidas como VLDL (por sus siglas en ingls). Una vez que las VLDL liberan los triglicridos en los tejidos, los restantes constituyentes son devueltos al hgado en la forma de lipoprotenas de densidad intermedia (intermediate density lipoproteins), o IDL y tambin como lipoprotenas de baja densidad (low density lipoproteins), o LDL. c) actuar como mediador en el transporte inverso del colesterol; esta tarea recae en las lipoprotenas de alta densidad (high density lipoproteins), o HDL, y en las LDL, que devuelven al hgado el exceso de colesterol formado en los tejidos extrahepaticos. El cuadro 1, muestra la localizacin en donde tienen origen cada una de las lipoprotenas. Los lpidos sanguneos se transportan como lipoprotenas, que varan desde densidades muy bajas (VLDL), tales como quilomicrones hasta las de muy alta densidad (HDL). La densidad aumenta a medida que la proporcin de protenas en el complejo aumenta y a medida que los lpidos disminuyen. Los cidos grasos libres (AGL), se transportan como un complejo con la albmina.
CUADRO 1. TEJIDO DE ORIGEN Y FUNCION DE LAS LIPOPROTENAS PLASMTICAS.

TIPO Quilomicrones Residuos de quilomicrones VLDL IDL LDL HDL

ORIGEN Intestino delgado Plasma Hgado Plasma Plasma Hgado, intestino

FUNCION FISIOLGICA Absorcin de la grasa de la dieta Liberacin de la grasa de la dieta en hgado. Transporte de los triglicridos desde el hgado hacia otros tejidos. Primer producto formado por el catabolismo de las VLDL. Transporte de los steres del colesterol. Eliminacin del exceso de colesterol de los tejidos y de las lipoprotenas; restructuracin de las lipoprotenas.

Fuente: Montgomery et al. Bioqumica. Casos y Texto. 1993.

El cuadro 2, muestra la composicin de las diferentes lipoprotenas plasmticas en el hombre.

SINTESIS DE ACIDOS GRASOS. El hgado, el tejido adiposo y la glndula mamaria son los tres sitios principales donde se lleva a cabo la biosntesis de los cidos grasos y los triglicridos. El hgado es el rgano central para la interconversin y su metabolismo. La sntesis de cidos grasos en el hgado, en el tejido adiposo y la glndula mamaria siguen vas parecidas; sin embargo, la actividad que cada una de ellas desarrolla vara de acuerdo con la especie animal. En las aves de corral (pollo para engorda y gallina de postura), el hgado es el rgano ms activo; en el cerdo, el tejido adiposo muestra mayor actividad y, en los rumiantes, tanto el hgado, como el tejido adiposo y la glndula mamaria (en lactacin) muestran la misma actividad. Por otro lado, para los no rumiantes, el sustrato principal para la sntesis de cidos grasos es la glucosa y, para los rumiantes (en general) el sustrato principal es el cido actico proveniente de la actividad bacteriana en el rumen. En ambos casos, el exceso de estos sustratos son los que promueven a la sntesis de los cidos grasos. La sntesis de cidos grasos se lleva a cabo en el citosol de las clulas activas y el producto activo para la sntesis es el acetil CoA proveniente de la glucosa va gluclisis. A esta ruta tambin se le conoce como sntesis de novo o sntesis completa. El acetil CoA se sintetiza en el interior de las mitocondrias pero no puede salir hacia el citosol, por lo que se condensa con el oxalacetato que se difunde hacia el citosol.
Citrato sintetasa

MITOCONDRIA.

Acetil CoA + Oxalacetato

Citrato

Citrato liasa CITOSOL. Citrato + CoASH + ATP Acetil CoA + Oxalacetato

En el citosol, el acetil CoA tiene dos funciones importantes: es el iniciador de la sntesis de novo y, es la base para la elaboracin de las unidades de malonil CoA. Malonil CoA es el donador de unidades carbonadas con las cuales crece el cido graso en sntesis. Ambos productos entran en la ruta de la sintetasa de los cidos grasos. La sntesis de un cido graso se inicia por el extremo del carbono metileno (CH3) y termina en el extremo del carbono carboxlico (COOH).
O CH3 - CH2 - CH2 - CH2 - CH2 - CH2 - CH2 CH2 - CH2 - C~S-PPant-complejo sintetasa Sntesis

Del acetil CoA

Del malonil CoA

En la sntesis de cidos grasos, el malonil CoA es sintetizado a partir de la carboxilacin del acetil CoA. Esta reaccin es mediada por un complejo enzimtico, la acetil CoA carboxilasa, que contiene biotina. En esta reaccin de carboxilacin, acta como intermediario el CO2 ligado covalentemente a la biotina unida a la enzima, formando un complejo llamado carboxibiotina. La reaccin de carboxilacin del acetil CoA a malonil CoA, es lo que regula la velocidad de la sntesis de los cidos grasos.
Acetil~SCoA + CO2 + ATP Malonil~SCoA + ADP + Pi

Acetil~CoA carboxilasa

La sntesis de cidos grasos tiene lugar en un complejo formado por siete enzimas independientes y una protena transportadora que sujeta a la cadena aclica en crecimiento; a este complejo se le denomina cido graso sintetasa. Es posible separar a este complejo enzimatico (de origen animal) en dos subunidades grandes aparentemente idnticas, las cuales estn firmemente acopladas y actan coordinadamente. Una subunidad contiene un grupo 4-fosfopantetena (que se conocer posteriormente como PPant-SH, para fines didcticos), que proporciona un grupo sulfhidrilo al que se fija la cadena del cido graso en crecimiento. El grupo 4-fosfopantetena es tambin el grupo funcional de la CoASH. La otra subunidad es el grupo cisteinil sulfhidrilo de la -ceto sintetasa, conocida tambin como enzima condensadora (que se conocer posteriormente como Cys-SH, para fines didcticos). Segn este modelo, la cadena acil grasa (el cido graso en crecimiento) va y viene entre el grupo PPant-SH y el grupo Cys-SH durante el proceso de sntesis. Inicialmente, el grupo acetil del acetil CoA es transferido al grupo sulfhidrilo de PPant-SH. Esta reaccin est catalizada por la acetil CoA-transacilasa:
Acetil~SCoA + PPant-SH Acetil~S-PPant + CoASH

A continuacin, el grupo acetil, unido originalmente al grupo PPant, es transferido a un grupo cisteinil sulfhidrilo de la -ceto sintetasa presente en la otra subunidad del complejo enzimtico.
Acetil~S-PPant + Cys-SH Acetil~S-Cys + PPant-SH

As, se libera el grupo sulfhidrilo de PPant para aceptar al siguiente grupo que llega, un grupo malonil de la malonil CoA. La transferencia del malonil est catalizada por la malonil CoA aciltransferasa.
Malonil~SCoA + PPant-SH Malonil~S-PPant + CoASH

Enseguida, el residuo acetil es transferido de su sitio provisional en el grupo cisteinil sulfhidrilo de la segunda subunidad para que se condense con el residuo malonil ligado a PPant de la primera subunidad. En esta reaccin, un grupo carboxilo se libera del malonato en forma de CO2, de manera que el producto resultante de esta condensacin contiene cuatro tomos de carbono, en vez de cinco.
Acetil~S-Cys + Malonil~S-PPant Acetoacetil~S-PPant + Cys-SH + CO2

La condensacin de los grupos acetil y malonil est catalizada por la -ceto sintetasa. El proceso que impulsa dicha reaccin es la descarboxilacin del malonato. El producto de estas reacciones, el acetoacetil~S-PPant, es reducido a butiril~S-PPant por las restantes enzimas del complejo de la cido graso sintetasa (la -cetoacil reductasa, la enoil deshidratasa y la crotonil reductasa). Tras esta serie de acontecimientos, se repite toda la secuencia, de tal manera que se van agregando pares de carbonos a la cadena arlica en crecimiento. En las reacciones anteriores, se form el cido butrico (un cido graso de cuatro carbonos C4-); la adicin secuencial de pares de carbonos da lugar inmediatamente al cido caproico (C6), despus al cido caprlico (C8), despus al cido cprico (C10), y as sucesivamente hasta llegar a formar al cido palmtico, un cido graso de 16 carbonos. La sntesis de un cido graso por esta ruta llega a 16 carbonos todos saturados:
CH3-CH2-(CH2)12-CH2-COOH

Por lo anterior, la saturacin de los carbonos de la cadena arlica se realiza tomando los hidrogeniones que aporta el NADPH que se genera por la va de la pentosa fosfato, que es una de los principales generadores de este hidrgeno. Los cidos grasos generados por esta va, no pueden vivir solos dentro del organismo, por lo que tienen que agruparse o condensarse. Para esto se lleva a cabo la sntesis de triacilglicridos. Para esta sntesis se necesita de glicerol el cual proviene de la ruta de la gluclisis (a partir del glicerol 3P) al cual se le van adicionando por esterificacin los cidos grasos, como se observa a continuacin:

Glicerol 3P Acil CoA 1 acil glicerol 3P Acil CoA Acido fosfatdico PO4 1,2 diacilglicerol Acil CoA Triacilglicerol

Beta oxidacin. Los cidos grasos almacenados como triglicridos en el tejido adiposo son la principal fuente de energa para la mayora de los animales estudiados. El catabolismo de los cidos grasos se produce en el interior de las mitocondrias, mediante un proceso que se conoce como -oxidacin, en el que se van eliminando sucesivamente pares de carbonos (dos carbonos a la vez) del cido graso. La eliminacin es en forma de acetil CoA. El catabolismo del cido graso se inicia por el extremo carboxlico del mismo, mediante la eliminacin de dos hidrgenos del carbono (beta- C3 en la cadena arlica), formndose as un grupo cetnico. Por lo tanto, es el tomo de carbono el que se oxida, de lo que se deriva el trmino de -oxidacin. Posteriormente, se produce una escisin (corte) entre los carbonos y y el fragmento de dos carbonos queda libre en forma de acetil CoA.
-oxidacin CH3 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 - COOH

Una sola secuencia de -oxidacin que produzca un mol de acetil CoA, proporciona a la clula cinco moles de ATP cuando se oxidan en el ciclo de Krebs y, cada mol de acetil CoA proporciona a la clula 12 moles de ATP cuando se oxidan por la misma ruta. El siguiente es un ejemplo de la -oxidacin de un cido graso de ocho carbonos (un cido octanoico C8:0, o cido caprlico), como tioester de la CoA:

CH3 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 COSCoA CH3 CH2 CH2 CH2 CH2 COSCoA CH3 CH2 CH2 - COSCoA

cido graso activado

CH3 COSCoA + 5 ATP CH3 COSCoA + 5 ATP

CH3- COSCoA

CH3 COSCoA + 5 ATP

El primer paso en la ruta, es la activacin del cido graso, es decir, la formacin de un tioster de acil CoA por combinacin con la CoASH. La enzima acil CoA sintetasa es la que regula la accin (tambin conocida como ligasa o tioquinasa).
Mg++ Acido graso + CoASH + ATP Tioquinasa Acido graso~S-CoA + AMP + PPi

En particular, hay al menos cuatro acil CoA sintetasas independientes para los cidos grasos que entran a -oxidacin: Una tioquinasa para cidos grasos de cadena corta que activa al acetato y al propionato; una tioquinasa que activa cidos grasos de cadena intermedia que contengan de 4 a 10 tomos de carbono; otra tioquinasa que activa a los cidos grasos de cadena larga que contengan 12 ms carbonos, y una tioquinasa especfica para el cido araquidnico (20:4-6). Las tioquinasas para los cidos grasos de cadena corta e intermedia se encuentran en el interior de las mitocondrias, mientras que las enzimas que activan a los cidos grasos de cadena larga y al cido araquidnico se hallan en el retculo endoplsmico. Para el caso de los cidos grasos de cadena larga que van a degradarse por oxidacin (como el cido palmtico, que es el ms comn), una vez activado, no puede atravesar la membrana mitocondrial interna para llegar al lugar de la oxidacin, por lo que para cruzarla el grupo acil de la CoASH se tiene que transesterificar a carnitina. Esta reaccin es catalizada por la enzima carnitina aciltransferasa. Esta enzima existe en dos formas: a) la carnitina aciltransferasa I (CAT I), que se encuentra en la superficie externa de la membrana mitocondrial interna; b) una segunda forma de la enzima, la carnitina aciltransferasa II (CAT II), se encuentra en la superficie matricial de la membrana mitocondrial interna.

MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA Acido graso~S-CoA + Carnitina

MATRIZ MITOCONDRIAL

CAT I
CoASH Acido grasoCarnitina

TRANSLOCASA

Acido graso-Carnitina + CoASH

CAT II

Acido graso~SCoA Carnitina A -oxidacin

Una vez dentro de la mitocondria el cido graso, se producen cuatro reacciones consecutivas: el primer paso es una deshidrogenacin que requiere la presencia del dinucletido de flavina adenina (FAD), y se forma un producto intermedio de acil CoA insaturado trans. FADH2 es transportado hacia la cadena respiratoria para su oxidacin. La enzima que realiza esta reaccin es la acil CoA deshidrogenasa.
H R C = C - C~SCoA + FADH2 R CH2 CH2 C~SCoA + FAD H O Acil CoA deshidrogenasa O 2 trans-enoilacil CoA

La segunda reaccin es una hidratacin del enlace insaturado, dando lugar a un L-hidroxiacil CoA, donde la enzima participante es la enoilhidratasa.
H R CH CH2 - C~SCoA R C = C - C~SCoA + H2O H O Enoilhidratasa OH O 2 trans-enoilacil CoA L--Hidroxiacil CoA

La tercera reaccin es otra deshidrogenacin que necesita de la presencia del dinucletido de niacina adenina (NAD), que posteriormente es oxidado en la 7

cadena respiratoria para su recuperacin. La enzima que cataliza esta reaccin es la L--Hidroxiacil deshidrogenasa:
R CH CH2 - C~SCoA + NAD R C CH2 -C~SCoA + NADH+H OH L--Hidroxiacil deshidrogenasa O O L--Hidroxiacil CoA -ceto acil CoA

La cuarta y ltima reaccin consiste en una escisin (corte) tioltica y da lugar a un mol de acetil CoA y a un acil CoA que es un par de carbonos ms corto que el cido graso original que entr a -oxidacin.
R C CH2 C~SCoA + CoASH O O -cetoacil CoA R C~SCoA + CH2 C~SCoA O O Acil CoA Acetil CoA

Tiolasa

El acil CoA generado vuelve a entrar a -oxidacin y el proceso se repite hasta que toda la cadena es degradada a acetil CoA. El FADH2 generado en el primer paso se oxida en la cadena respiratoria, produciendo 2 ATP, lo mismo que el NADH + H formado en el tercer paso se oxida igualmente en cadena respiratoria generando 3 ATP. Cada mol de acetil CoA generado por esta ruta se dirige hacia el ciclo de Krebs proporciona a la clula 12 ATP. En resumen, si un mol de cido palmtico entrara a la ruta de la -oxidacin generara:
Activacin del cido graso: Mg++ PalmitoilCoA + AMP + PPi 2 ATP 14 ATP 21 ATP 96 ATP 129 ATP

Palmitato + CoASH + ATP FADH2 = 7 X 2 = NADH+H = 7 X 3 = Acetil CoA generados = 8 X 12 =

TOTAL

Para activar al palmitato se utilizan dos enlaces de fosfato de alta energa, uno en la reaccin de la acil CoA ligasa y otro cuando se hidroliza el pirofosfato formado en esa reaccin. En el ciclo de la -oxidacin el palmitoil CoA es convertido en ocho unidades de acetil CoA; para ello, se necesitan siete -oxidaciones y cada secuencia de -oxidacin requiere de un FAD y NAD que generan cinco ATP.

LITERATURA CONSULTADA. Church DC y Pond WG. Fundamentos de nutricin y alimentacin de animales. Limusa-Noriega. Mxico. 1990. Maynard LA, Loosli JK, Hintz HF y Warner RG. Nutricin animal. 4a Ed. McGrawHill. Mxico. 1981. Montgomery R, Conway T y Spector A. Bioquimica. Casos y texto. 5 Ed. MosbyYear book. Espaa. 1993. Huang WY, Kummerow FA. Cholesterol and fatty acid synthesis in swine. Lipids. 11(1):34-41. 1976. Hansen HO, Knudsen J. Effect of exogenous long-chain fatty acids on individual fatty acid synthesis by dispersed ruminant mammary gland cells. J. Dairy Sci. 70(7):1350-1354. 1987. Rahim A. Type of fatty acids, lipoprotein secretion from liver and fatty liver syndrome in laying hens. International J. Poultry Sci. 4(11):917-919. (2005). Pearce J. Fatty acid synthesis in liver and adipose tissue. Proc. Nut. Soc. 42(2):263-271. (1983).